專利名稱：高亞精胺綴合物、制備及其應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物化合物、制備及其應用技術領域，涉及一種高亞精胺綴合物、制備方法及其應用。
背景技術：
多胺是動植物體內具有生理活性的一類含氮有機小分子物質。近年來，隨著分子生物學及細胞生物學的發展，多胺的諸多生物功能不斷被認識，多胺在生物體內主要是通過離子鍵和氫鍵與蛋白質(主要指各種酶)、核酸(主要是指DNA、RNA)以及帶負電荷的磷脂等生物大分子相結合，并通過影響它們的生物合成途徑和改變它們的構象，進而在動植物的生長發育中發揮重要的生理功能。多年來的相關研究發現，天然多胺、多胺同系物以及多胺綴合物在降血壓、抗HIV、抗腹瀉、治療寄生蟲、基因轉移、作為金屬螯合劑和抗生素等方面都顯示出應用的前景。特別重要的是，多胺在治療中樞神經系統疾病方面尤其抗癌方面所表現出來的積極意義(參見Pieter smid，Hein K.A.C.，et al.J.Med.Chem.，2005，486855-6899)。目前治療癌癥的重要方法之一是化學療法，但化療過程中所用到的抗腫瘤藥物，在臨床應用過程中還存在著嚴重的毒副作用，其主要缺陷之一就是藥物分子對病變細胞缺乏選擇性。為了實現抗癌藥物作用的靶向性，即藥物發生作用時對腫瘤細胞的高選擇性或高識別性，長期以來，科學家開發出不同的給藥系統，均使藥物作用的選擇性有所提高。同時，隨著腫瘤病理學研究的深入，抗腫瘤細胞作用的新靶點相繼被發現，以脂質體、單克隆抗體載體為標志的第四代靶向給藥系統，逐漸成為藥學領域的研究熱點。我們在研究中也發現，高亞精胺也具有良好的靶向給藥能力(參見ChaojieWang，Jean-Guy Delcros，et al.J.Med.Chem.，2003，462663-2671)。因此合成新型高亞精胺綴合物將拓寬多胺的研究、應用領域，使高亞精胺類化合物更好地造福人類。

發明內容
本發明目的是提供一種新的高亞精胺綴合物；本發明另一目的是提供一種操作簡便、條件溫和、反應收率高的高亞精胺綴合物的制備方法；本發明進一步的目的是高亞精胺綴合物在制備抗腫瘤藥物上的應用。
為實現本發明目的，采用如下技術方案一種高亞精胺綴合物，為以下通式化合物 R`為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基。
R`優選為H、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基或者氨基。
高亞精胺綴合物最優選為以下通式化合物 其中， 或者
其中， 制備高亞精胺綴合物的方法將高亞精胺化合物溶于溶劑，-10～60℃加入芳甲醛或芳酮反應，反應結束后，在-10～20℃下加入還原劑反應，-10～60℃下反應4～18小時，反應后蒸除溶劑，剩余物溶于鹵代烴中，洗滌并干燥有機層，蒸除鹵代烴，分離提純后溶于醇中，在-10～30℃下加入鹽酸的醇溶液或水溶液反應，-10～50℃下反應4～18小時，過濾，洗滌濾餅，干燥得高亞精胺綴合物；所述的芳甲醛是芳環上含有取代基為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基的α-萘甲醛、β-萘甲醛、聯苯甲醛、蒽甲醛；芳酮是芳環上含有取代基為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基的四氫萘酮；所述的溶劑為脂肪醇和鹵代烴的混合液。
制備高亞精胺綴合物的優選方法將高亞精胺化合物溶于溶劑，10～30℃加入芳甲醛或芳酮反應，反應至TLC檢測芳甲醛或芳酮的原料點減弱時停止反應，在-5～10℃下加入還原劑反應，10～30℃下反應8～13小時，反應后蒸除溶劑，剩余物溶于鹵代烴中，洗滌并干燥有機層，蒸除鹵代烴，分離提純后溶于醇中，在-5～10℃下加入鹽酸的醇溶液或水溶液反應，10～30℃反應8～13小時，過濾，洗滌濾餅，干燥得高亞精胺綴合物；所述的芳甲醛是芳環上含有取代基為H、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、C1-4的烷基、C1-4的烷氧基或者氨基的α-萘甲醛、β-萘甲醛、聯苯甲醛、蒽甲醛；芳酮是芳環上含有取代基為H、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、C1-4的烷基、C1-4的烷氧基或者氨基的四氫萘酮；所述的溶劑為飽和脂肪醇和鹵代烴的混合液，其中飽和脂肪醇為C1-4的飽和脂肪醇，鹵代烴為氯代烷、溴代烷。
高亞精胺化合物∶芳甲醛或芳酮的摩爾比為1∶0.1～3。
所用溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇與1，2-二氯乙烷、三氯乙烷、二氯甲烷、氯仿中各任取一種的任意比例混合物；所用還原劑為Pd/C、雷尼鎳或NaBH4。
叔丁氧羰基(BOC)保護的高亞精胺化合物(中間體)的制備將N-叔丁氧羰基-1，4-丁二胺或4-(4-叔丁氧羰基)哌嗪基丁胺溶于溶劑中，加催化劑后攪拌10～20min，加入N-(4-溴丁基)鄰苯二甲酰亞胺，反應過夜。減壓蒸除溶劑，殘余物用鹵代烴溶劑提取，堿性水溶液洗滌，收集有機層并干燥，減壓蒸除溶劑，得淡黃色油狀物，將該油狀物溶于醇溶液中，加入BOC2O及催化劑，攪拌反應過夜。減壓蒸除溶劑，殘余物用鹵代烴溶劑提取，水洗滌，收集有機層并干燥，減壓蒸除溶劑，分離提純得淡黃色油狀化合物。
其中，所用溶劑為乙腈、乙醇、甲醇、異丙醇、1，2-二氯乙烷、三氯乙烷、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環、三乙胺、吡啶中的一種；反應所用催化劑為甲醇鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氟化鉀、三乙胺、二乙胺、吡啶、碳酸鉀中的一種。
該中間產物結構式如下所示 R＝NHBOC， 高亞精胺綴合物是高亞精胺與多胺連接形成的綴合物，是一種新的化合物，具有良好的靶向給藥能力，由于所合成綴合物含有活潑的氨基，經相關化學反應可以合成席夫堿、酰胺以及苯環上含有其他取代基的化合物，故可以作為有機合成的中間體以及合成多胺類醫藥品的中間體使用；利用高亞精胺的高運載能力，將具有細胞毒性的芳香基團運入細胞內部，進而殺死快速增生的癌細胞，故可以作為抗腫瘤藥物使用；利用氨基的親電性，可以與金屬陽離子作用生成金屬配體，故可以作為配體應用于金屬配合物的合成反應中。本發明制備方法原料價格低廉，反應條件溫和，產率高。


圖1是實施例2的化合物的13C NMR圖；圖2是實施例2的化合物的1H NMR圖；圖3是實施例3的化合物的13C NMR圖；圖4是實施例3的化合物的1H NMR圖；圖5是實施例4的化合物的13C NMR圖；圖6是實施例4的化合物的1H NMR圖；圖7是實施例5的化合物的13C NMR圖；圖8是實施例5的化合物的1H NMR圖；圖9是實施例6的化合物的13C NMR圖；圖10是實施例6的化合物的1H NMR圖；圖11是實施例7的化合物的13C NMR圖；圖12是實施例7的化合物的1H NMR圖；圖13是實施例8的化合物的13C NMR圖；圖14是實施例8的化合物的1H NMR圖；圖15是實施例9的化合物的13C NMR圖；圖16是實施例9的化合物的1H NMR圖；圖17是實施例10的化合物的13C NMR圖；圖18是實施例10的化合物的1H NMR圖；圖19是實施例11的化合物的13C NMR圖；圖20是實施例11的化合物的1H NMR圖；所用實驗儀器名稱與型號Bruker AV-400型核磁共振儀(D2O做溶劑，TMS或D2O為內標)；
Vario EL III型元素分析儀(德國)。
Esquire 3000型LC-MS質譜儀。
具體實施例方式
為對本發明進行更好地說明，舉實施例如下實施例1 制備一端和中間胺基被BOC保護的高亞精胺中間體將8.99g N-叔丁氧羰基-1，4-丁二胺溶于180mL乙腈中，加無水碳酸鉀9g，室溫攪拌15min，升溫到45℃，分四批加入N-(4-溴丁基)鄰苯二甲酰亞胺共11.5g，控溫45℃，反應過夜。減壓蒸除乙腈，殘余物用30mL氯仿提取，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用40mL，收集有機層，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除氯仿，得淡黃色油狀物(含雜質)。將該油狀物溶于甲醇溶液100mL中，加入BOC酸酐10.42g，室溫攪拌過夜至有大量白色不溶性固體生成。減壓蒸除溶劑，殘余物用40mL氯仿提取，3×40mL水洗滌，收集有機層，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將8.47g(17.3mmoL)該化合物溶于50mL乙醇中，加水合肼10.2g，室溫攪拌過夜至有大量白色不溶性固體出現，減壓蒸除溶劑，殘渣溶于35mL氯仿中，3×30mL w(Na2CO3)＝10％的水溶液洗滌，收集有機層，有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀高亞精胺中間體。總產率46.7％，實驗數據如下1H NMR(CDCl3，400MHz)H4.37(brs，1H)，2.89～2.93(t，J＝19.0Hz，6H)，2.48～2.51(t，J＝13.5Hz，2H)，1.37(s，4H)，1.26～1.31(m，22H).ESI-MS m/z360.3(M+1)+.
實施例2 制備通式1所示Ar為β-萘基、R1為NH2.3HCl時的高亞精胺綴合物按照實施例1的方法制備Ar為β-萘基、R1為H時的高亞精胺化合物(中間體)，取0.09g上述高亞精胺中間體溶于25％甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，攪拌下加入0.14g β-萘甲醛；-10℃下攪拌反應至TLC檢測β-萘甲醛的原料點減弱時停止反應，減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液12mL中，反應混合液在-10℃下攪拌15min，分三次加入NaBH4共0.1g，-10℃下反應4h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用30mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于10mL無水乙醇中，冷卻至-10℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液6mL，-10℃下攪拌4h，至有固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物，收率23.6％。
如圖1、圖2是實施例2的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.89～7.96(m，4H)，7.54～7.57(m，2H)，7.49(d，J＝1.9Hz，1H)，4.33(s，2H)，3.05～3.09(t，J＝15.2Hz，2H)，2.92～3.00(m，6H)，1.65～1.70(m，8H).13C NMR(D2O)C133.18，132.84，129.64，129.09，128.22，128.04，127.78，127.39，127.10，126.57，51.15，46.87，46.81，46.24，38.78，23.91，22.82，22.76，22.72.ESI-MS m/z300.2(M+H-3HCl)+；Anal.calcd.forC19H32N3Cl3·0.2H2OC 55.33，H 7.92，N 10.19，foundC 55.33，H 7.82，N 10.13.
實施例3 制備通式1所示Ar為6-甲氧基萘基、R1為NH2.3HCl時的高亞精胺綴合物按照實施例1的方法制備Ar為6-甲氧基萘基、R1為H時的高亞精胺中間體，將0.3g上述高亞精胺中間體溶于25％甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，攪拌下加入6-甲氧基萘甲醛0.02g；60℃攪拌18h，至TLC檢測6-甲氧基萘甲醛的原料點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液12mL中，反應混合液在20℃下攪拌15min，分三次加入NaBH4共0.09g，60℃下反應18h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用40mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于7.3mL無水乙醇中，30℃下加入4N的鹽酸的水溶液9.5mL，50℃下攪拌18h至有大量固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物，收率69.3％。
如圖3、圖4是實施例3的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.89～7.96(m，3H)，7.53～7.56(t，J＝9.8Hz，1H)，7.38(d，J＝2.2Hz，1H)，7.28(d，J＝2.4Hz，1H)，7.25～7.26(d，J＝2.4Hz，1H)，4.39(s，2H)，3.96(s，3H)，3.06～3.19(m，8H)，1.78～1.94(m，8H).13C NMR(D2O)C157.78，134.52，129.76，129.51，128.40，127.91，127.24，125.89，119.14，106.21，55.42，51.10，46.88，46.82，46.13，38.79，23.91，22.81，22.75，22.73.ESI-MS m/z330.3(M+H-3HCl)+；Anal.calcd.for C20H34N3Cl3O·0.1H2OC 54.51，H 7.82，N9.54，foundC 54.48，H 7.75，N 9.46.
實施例4 制備通式1所示Ar為4-聯苯基、R1為NH2.3HCl時的芳香基綴合物將一端和中間胺基被BOC保護的高亞精胺中間體0.26g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，攪拌下加入4-聯苯甲醛0.16g；30℃攪拌9h，至TLC檢測4-聯苯甲醛的原料點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液16mL中，反應混合液在10℃下攪拌15min，分三次加入NaBH4共0.1g，30℃下反應9h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用40mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于7.2mL無水乙醇中，冷卻至10℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液9.3mL，30℃下攪拌9h至有大量固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得灰褐色固體化合物，收率78.6％。
如圖5、圖6是實施例4的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.72～7.79(q，4H)，7.47～7.58(m，5H)，4.30(s，2H)，3.01～3.16(m，8H)，1.74～1.79(m，8H).13C NMR(D2O)C141.81，139.64，130.45(2C)，129.76，129.21(2C)，128.16，127.63(2C)，127.00(2C)，50.68，46.88，46.81，46.20，38.76，23.90，22.80，22.73(2C).ESI-MS m/z326.3(M+H-3HCl)+；Anal.calcd.for C21H34N3Cl3·0.1H2OC 57.76，H 7.89，N 9.62，foundC 57.68，H7.83.N 9.43.
實施例5 制備通式1所示Ar為四氫萘基、R為NH2.3HCl時的芳香基綴合物將一端和中間胺基被BOC保護的高亞精胺中間體0.67g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液30mL中，攪拌下加入四氫萘酮0.28g；10℃下攪拌13h，至TLC檢測四氫萘酮的原料點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液40mL中，反應混合液在-5℃下攪拌15min，分五次加入NaBH4共0.33g，10℃下反應13h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于50mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用40mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于3.15mL無水乙醇中，冷卻至-5℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液4.11mL，10℃下攪拌13h，減壓蒸去溶劑，剩余固體溶于二次蒸餾水10mL中，用15mL重蒸氯仿洗滌，分液除去有機層，減壓蒸去水層，干燥得紅褐色固體化合物，收率45.7％。
如圖7、圖8是實施例5的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.36～7.40(t，J＝12.5Hz，2H)，7.27～7.30(t，J＝14.0Hz，2H)，4.49～4.52(t，J＝8.8Hz，1H)，3.16～3.18(d，J＝8.0Hz，2H)，3.00～3.09(m，6H)，2.82～2.89(m，2H)，2.11～2.19(m，2H)，1.88～1.90(t，J＝9.7Hz，2H)，1.74～1.78(m，8H).13C NMR(D2O)C138.65，130.03，129.53(2C)，129.39，126.25，56.11，46.88，46.83，44.42，38.76，27.59，24.75，24.03，23.89，22.90，22.72，17.20.ESI-MS m/z290.2(M+H-3HCl)+；Anal.calcd.forC18H34N3Cl3·0.7H2OC 52.54，H 8.33，N 10.21，foundC 52.28，H 8.31，N 10.45.
實施例6 制備通式1所示Ar為9-蒽基，R為 時的芳香基綴合物將一端被哌嗪取代的高亞精胺衍生物0.1g(0.7mmoL)溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，-10℃下攪拌加入9-蒽甲醛0.15g，升至室溫攪拌4h，至TLC檢測9-蒽甲醛的點減弱時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液20mL中，反應混合液在-10℃下攪拌15min，分兩次加入NaBH4共0.1g，升至室溫反應4h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于15mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用20mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得紅棕色粘稠油狀化合物。將得到的化合物溶于12mL無水乙醇中，冷卻至-10℃下，加入4N的鹽酸的乙醇溶液8mL，升至室溫攪拌4h，至有大量固體生成；過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物。產率33.1％。
如圖9、圖10是實施例6的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H8.44(s，1H)，8.05～8.07(d，J＝8.9Hz，2H)，7.97～7.99(d，J＝8.5Hz，2H)，7.58～7.62(q，2H)，7.84～7.52(t，J＝15.0Hz，2H)，3.56(s，8H)，(m，4H)，2.95～3.02(m，4H)，1.64～1.78(m，8H).13C NMR(D2O)C130.98，130.62，130.40，129.61，127.91，125.69，122.64，120.77，56.43，48.60，47.13，46.90，46.83，42.93，40.91，22.93，22.82，22.72，20.76.ESI-MS m/z419.5(M+H-4HCl)+.Anal.calcd.for C27H42N4Cl4·1.9H2OC 54.17，H 7.71，N 9.36，found C 54.12，H7.70，N 9.33.
實施例7 制備通式5所示Ar為α-萘基，R為 時的芳香基綴合物將一端被哌嗪取代的高亞精胺衍生物0.34g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，60℃下攪拌加入α-萘甲醛0.01g，室溫攪拌18h，至TLC檢測α-萘甲醛的點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液18mL中，反應混合液在10℃下攪拌15min，分兩次加入NaBH4共0.12g，升至室溫反應18h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于15mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用20mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于8.2mL無水乙醇中，30℃下加入4N的鹽酸的水溶液6.7mL，升至室溫攪拌18h，至有大量固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物。產率73.3％。
如圖11、圖12是實施例7的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H8.01～8.08(m，3H)，7.54～7.69(m，4H)，4.72(s，2H)，3.58(s，8H)，3.16～3.27(m，4H)，3.01～3.07(q，4H)，1.72～1.81(m，8H).13CNMR(D2O)C133.72，130.98，130.65，129.55，127.61，126.83，126.65，125.75，122.57，56.44，48.61，48.00，46.94，46.83，40.93，22.93，22.81，22.73，20.78.ESI-MS m/z369.4(M+H-4HCl)+.Anal.calcd.for C23H40N4Cl4·0.8H2OC 52.24，H7.93，N 10.60，found C 52.31，H 7.87，N 10.49.
實施例8 制備通式6所示Ar為4-聯苯基，R為 時的芳香基綴合物將一端被哌嗪取代的高亞精胺衍生物0.3g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，攪拌下加入4-聯苯甲醛0.15g，10℃下攪拌9h，至TLC檢測4-聯苯甲醛的點減弱時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液20mL中，反應混合液在-5℃下攪拌15min，分兩次加入NaBH4共0.1g，10℃下反應9h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于15mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用20mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于3.93mL無水乙醇中，冷卻至-5℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液5.1mL，10℃下攪拌反應9h，至有固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物。產率84.1％。
如圖13、圖14是實施例8的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.74～7.80(q，4H)，7.55～7.60(q，4H)，7.49～7.51(d，J＝6.5Hz，1H)，4.31(s，2H)，3.69(s，8H)，3.36～3.40(t，J＝14.9Hz，2H)，3.12～3.16(t，J＝15.8Hz，6H)，1.82～1.91(m，8H).13C NMR(D2O)C141.73，139.64，130.50(2C)，129.78，129.24(2C)，128.17，127.63(2C)，127.02(2C)，56.35，50.69，48.49，46.88(2C)，46.74，46.25，40.73(2C)，22.84，22.77，22.62，20.62.ESI-MS m/z395.4(M+H-4HCl)+.Anal.calcd.for C25H42N4Cl4·1.5H2OC 52.91，H7.99，N 9.87，found C 53.12，H 8.26，N 9.67.
實施例9 制備通式7所示Ar為6-甲氧基萘基，R為 時的芳香基綴合物
將一端被哌嗪取代的高亞精胺衍生物0.36g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液20mL中，攪拌下加入6-甲氧基萘甲醛0.17g，30℃下攪拌13h，至TLC檢測6-甲氧基萘甲醛的點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液22mL中，反應混合液在10℃下攪拌15min，分兩次加入NaBH4共0.11g，30℃下反應13h，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用20mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于6.5mL無水乙醇中，冷卻至10℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液8.4mL，30℃下攪拌反應13h，至有大量固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物。產率84.0％。
如圖15、圖16是實施例9的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.90～8.29(m，3H)，7.54～7.56(q，1H)，7.40～7.41(d，J＝2.3Hz，1H)，7.27～7.30(q，1H)，4.40(s，2H)，3.97(s，3H)，3.69(s，8H)，3.35～3.39(t，J＝16.0Hz，2H)，3.09～3.19(m，6H)，1.77～1.93(m，8H).13C NMR(D2O)C157.77，134.49，129.74，129.49，128.37，127.89，127.22，125.87，119.13，106.17，56.29，55.39，51.08，48.44(2C)，46.82，46.69，46.11，40.70(2C)，22.80，22.72，22.58，20.59.ESI-MS m/z399.4(M+H-4HCl)+.Anal.calcd.for C24H42N4Cl4O·1.3H2OC50.76，H 7.92，N 9.87，found C 50.77，H 7.89，N 9.66.
實施例10 制備通式7所示Ar為β-萘基，R為 時的芳香基綴合物將一端和中間胺基被BOC保護的高亞精胺中間體0.3g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液15mL中，攪拌下加入β-萘甲醛0.11g；室溫攪拌過夜，至TLC檢測β-萘甲醛的原料點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液18mL中，反應混合液在冰水浴中攪拌15min，分三次加入NaBH4共0.1g，升至室溫反應過夜，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于15mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用20mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于4.56mL無水乙醇中，冷卻至0℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液7.4mL，升至室溫攪拌過夜，至有大量固體生成，過濾，用重蒸無水乙醇洗滌三次，干燥得白色固體化合物。收率85.4％。
如圖17、圖18是實施例10的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.92～7.97(m，4H)，7.49～7.58(m，3H)，4.35(s，2H)，3.56(s，8H)，3.24(s，2H)，2.99～3.11(q，6H)，1.68～1.79(m，8H).13C NMR(D2O)C133.21，132.86，129.68，129.12，128.19，128.07，127.81，127.42，127.12，126.60，56.35，51.17，48.51(2C)，46.87，46.75，46.28，40.81(2C)，22.84，22.76，22.65，20.68.ESI-MS m/z369.4(M+H-4HCl)+.Anal.calcd.for C23H40N4Cl4·0.3H2OC 53.14，H7.87，N 10.78，found C 53.15，H 7.89，N 10.59.
實施例11 制備通式1所示Ar為對氟苯基、R為NH2.3HCl時的芳香基綴合物將一端和中間胺基被BOC保護的高亞精胺中間體0.67g溶于25％的甲醇的二氯甲烷溶液30mL中，攪拌下加入四氫萘酮0.28g；室溫攪拌過夜，至TLC檢測四氫萘酮的原料點消失時停止反應。減壓蒸除溶劑，將剩余物溶于50％的甲醇的二氯甲烷溶液40mL中，反應混合液在冰水浴中攪拌15min，分五次加入NaBH4共0.33g，升至室溫反應過夜，減壓蒸除溶劑，剩余物溶于50mL氯仿中，10％的Na2CO3水溶液洗滌三次，每次用40mL，收集有機層，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除氯仿，硅膠柱分離提純得淡黃色油狀化合物。將得到的化合物溶于3.15mL無水乙醇中，冷卻至0℃，加入4N的鹽酸的乙醇溶液4.11mL，升至室溫攪拌過夜，減壓蒸去溶劑，剩余固體溶于二次蒸餾水10mL中，用15mL重蒸氯仿洗滌，分液除去有機層，減壓蒸去水層，干燥得白色固體化合物，收率81.9％。
如圖19、圖20是實施例11的化合物的13C NMR圖、1H NMR圖，實驗數據如下1H NMR(D2O，400MHz)H7.59～7.61(t，J＝5.5Hz，2H)，7.32～7.34(d，J＝8.8Hz，2H)，4.33(s，2H)，3.14～3.99(t，J＝21.6Hz，8H)，1.86～1.87(d，J＝2.3Hz，8H).13CNMR(D2O)C162.01～164.46(1C)，132.04～132.13(1C)，126.70～126.73(1C)，116.04□116.26(1C)，50.40，46.97，46.90，46.29，38.89，23.98，22.87(2C)，22.79.ESI-MS m/z268.1(M+H-3HCl)+.Anal.calcd.for C15H29N3Cl3F·0.2H2OC 47.37，H 7.79，N 11.05，found C 47.51，H 7.96，N 10.8.
本發明化合物在制備抗腫瘤藥物上的應用采用本發明方法合成的一系列新型結構的高亞精胺綴合物，它們均是未見文獻報道的新化合物。測試了他們對L1210腫瘤細胞的體外生長抑制率，以及他們與鳥氨酸脫羧酶(ODC)抑制劑二氟甲基鳥氨酸(DFMO)的協同效應。
測試條件及實驗方法參見Chaojie Wang，Jean-Guy Delcros，et al.J.Med.Chem.，2003，462663-2671。
同時以國外文獻已經報道過的體外抗腫瘤活性化合物為標準品，對比了它們體外抗腫瘤效果，測試結果見下表表1 高亞精胺綴合物的體外生理活性

L-1210白血病癌細胞表2 含哌嗪環高亞精胺綴合物的體外生理活性


L-1210白血病癌細胞表3 高亞精胺綴合物的體外生理活性

B16黑色素瘤細胞以上三表顯示所合成的高亞精胺類芳香綴合物具有較好的體外抗腫瘤活性，可用于制備抗腫瘤藥物；而且當加入ODC抑制劑DFMO時，化合物的抗腫瘤活性有明顯增加，是ODC抑制了內源多胺的生成，使細胞不得不通過多胺運輸通道運載更多的外源多胺，這樣就使更多的具有細胞毒性的化合物分子進入模型細胞，從而提高了藥物分子的抗腫瘤活性，這說明所得化合物與DFMO具有較好的協同效應，故兩者聯合使用時，其抗腫瘤活性將顯著增強。
權利要求
1.一種高亞精胺綴合物，其特征在于，為以下通式化合物 R`為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基。
2.如權利要求1所述的高亞精胺綴合物，其特征在于，R`為H、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基或者氨基。
3.如權利要求2所述的高亞精胺綴合物，其特征在于，為以下通式化合物 其中，
4.如權利要求2所述的高亞精胺綴合物，其特征在于，為以下通式化合物 其中，
5.制備高亞精胺綴合物的方法，其特征在于，將高亞精胺化合物溶于溶劑，-10～60℃加入芳甲醛或芳酮反應，反應結束后，在-10～20℃下加入還原劑反應，-10～60℃下反應4～18小時，反應后蒸除溶劑，剩余物溶于鹵代烴中，洗滌并干燥有機層，蒸除鹵代烴，分離提純后溶于醇中，在-10～30℃下加入鹽酸的醇溶液或水溶液反應，-10～50℃下反應4～18小時，過濾，洗滌濾餅，干燥得高亞精胺綴合物；所述的芳甲醛是芳環上含有取代基為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基的α-萘甲醛、β-萘甲醛、聯苯甲醛、蒽甲醛；芳酮是芳環上含有取代基為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基的四氫萘酮；所述的溶劑為脂肪醇和鹵代烴的混合液。
6.如權利要求5所述的制備高亞精胺綴合物的方法，其特征在于，將高亞精胺化合物溶于溶劑，10～30℃加入芳甲醛或芳酮反應，反應至TLC檢測芳甲醛或芳酮的原料點減弱時停止反應，在-5～10℃下加入還原劑反應，10～30℃下反應8～13小時，反應后蒸除溶劑，剩余物溶于鹵代烴中，洗滌并干燥有機層，蒸除鹵代烴，分離提純后溶于醇中，在-5～10℃下加入鹽酸的醇溶液或水溶液反應，10～30℃反應8～13小時，過濾，洗滌濾餅，干燥得高亞精胺綴合物；所述的芳甲醛是芳環上含有取代基為H、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基或者氨基的α-萘甲醛、β-萘甲醛、聯苯甲醛、蒽甲醛；芳酮是芳環上含有取代基為H、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基或者氨基的四氫萘酮；所述的溶劑為飽和脂肪醇和鹵代烴的混合液，其中飽和脂肪醇為C1-4的飽和脂肪醇，鹵代烴為氯代烷、溴代烷。
7.如權利要求5或6所述的制備高亞精胺綴合物的方法，其特征在于，高亞精胺化合物∶芳甲醛或芳酮的摩爾比為1∶0.1～3。
8.如權利要求7所述的制備高亞精胺綴合物的方法，其特征在于，所用溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇與1，2-二氯乙烷、三氯乙烷、二氯甲烷、氯仿中各任取一種的任意比例混合物；所用還原劑為Pd/C、雷尼鎳或NaBH4。
9.高亞精胺綴合物在制備抗腫瘤藥物上的應用。
全文摘要
本發明公開了一種高亞精胺綴合物，為以下通式化合物R′為H、鹵原子、烷基、烷氧基或者氨基；本發明高亞精胺綴合物是一種新化合物，可用作抗腫瘤藥物，具有良好的靶向給藥能力；本發明原料價格低廉，反應條件溫和，產率高。
文檔編號A61P35/00GK101037423SQ20071005423
公開日2007年9月19日 申請日期2007年4月16日 優先權日2007年4月16日
發明者趙瑾, 程鵬飛, 王超杰, 王建紅 申請人:河南大學