專利名稱：炔烴Ⅰ的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的化合物、新化合物的制備方法、新化合物在治療中的應用以及包括所述新化合物的藥物組合物。
背景技術：
代謝型谷氨酸受體(mGluR)為與在中樞神經系統(CNS)中的許多突觸的調節和活性有關的G蛋白偶聯受體。已經鑒定了八個代謝型谷氨酸受體亞型，并根據序列相似性將其再分成三組。組I包括mGluR1和mGluR5。這些受體活化磷脂酶C和增加神經元興奮性。包括mGluR2和mGluR3的組II以及包括mGluR4、mGluR6、mGluR7、和mGluR8的組III能夠抑制腺苷酸環化酶活性和減少突觸傳遞。幾種受體還以不同的同種型存在，它們通過可變剪接發生(Chen，C-Y等人，Journal of Physiology(2002)，538.3，773-786頁；Pin，J-P等人，European Journal of Pharmacology(1999)，375，277-294頁；Bruner-Osborne，H等人，Journal of Medicinal Chemistry(200)，43，2609-2645頁；Schoepp，D.D，Jane D.E.Monn J.A.，Neuropharmacology(1999)，38，1431-1476頁)。
下食道括約肌(LES)易于間歇性地松弛。結果是，因為在此時機械屏障暫時喪失，因此來自胃的流體可以進入食道，發生以下稱為“回流”的現象。
胃食道回流疾病(GERD)為最常見的上胃腸道疾病。當前的藥物療法針對減少胃酸分泌，或針對中和食道中的酸。回流的主要機制已被認為是由于下食道括約肌的張力減退。然而，例如Holloway&Dent(1990)Gastroenterol.Clin.N.Amer.，19，517-535頁已經表明大多數回流發作事件在一過性下食道括約肌松弛(TLESR)過程中發生，即不是由吞咽引發的松弛。還表明，在患有GERD的患者中，胃酸分泌通常是正常的。
本發明要解決的問題是找到可用于治療GERD的新化合物。
WO 01/16121 A1公開了化合物A-L-B，其中A為5-、6-或7-元雜環， L為亞烯基、亞炔基或偶氮；和B為烴基；環烴基；雜環(任選包含一個或多個雙鍵)；或芳基。這些化合物已經被描述為可用于特別是腦缺血、慢性神經變性、精神障礙(psychiatric disorder)、癲癇和肺系統及心血管系統的疾病。
WO 99/02497 A2公開了下式的化合物 其中X可為通過鄰接的不飽和碳原子結合的亞烯基或亞炔基，或為偶氮基；R5可為芳族或雜芳族基團。這些化合物已經被描述為可用于特別是癲癇、腦缺血和阿爾茨海默氏病。
WO 03/022846 A1特別公開了化合物4-(4-吡啶-2-基-丁-3-炔基)-芐腈。該化合物是生產可用于治療癌癥的化合物的方法中的中間體。

發明內容
本發明涉及由通式I表示的新化合物 其中
R1選自氫、C1-C4烷基、C3-C6環烷基、芳基和雜芳基，其中芳基或雜芳基可被C1-C4烷基取代；R2選自氫和C1-C4烷基；R3選自氫、C1-C4烷基、F、CF3、CHF2和CH2F；R4選自氫、F、CF3、CHF2、CH2F和CH3；R3選自氫和F；R6選自氫和F；Q選自C1-C4烷基，其任選被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代；Y1選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；芐氧基；間位或對位的硝基；和C1-C4烷基酯；Y2選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；Y3選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；或Y1和Y2可形成芳族或非芳族環，其任選被鹵素、腈、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基(其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代)、芐氧基或C1-C4烷基酯取代；以及其可藥用鹽、水合物、同種型(isoform)和/或旋光異構體，除4-(4-吡啶-2-基丁-3-炔基)-芐腈之外。
用于化學式I的定義中的一般術語具有以下含義鹵素為氯代、氟代、溴代或碘代。
C1-C4烷基為直鏈或支鏈的烷基，其各自獨立地包含1、2、3或4個碳原子，例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、或異丙基。在一個實施方案中，烷基可包含一個或多個選自O、N和S的雜原子。這種基團的例子為甲基乙基醚、甲基乙基胺、和二甲基硫。
環烷基為環狀烷基，其各自獨立地包含3、4、5或6個碳原子，如環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
C1-C4烷氧基為包含1、2、3或4個碳原子的烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基或異丙氧基。
本文中使用的術語芳基是指具有6-14個碳原子的芳香環，包括單環和多環化合物，例如苯基、芐基或萘基。
本文中使用的術語雜芳基是指具有5-14個碳原子的芳香環，包括單環和多環化合物，如咪唑并吡啶，其中一個或若干個環原子為氧、氮或硫，例如呋喃基或噻吩基。
式I化合物的可藥用鹽及其異構體、水合物和同種型也處在本發明的范圍內。
式I化合物的可藥用鹽也處在本發明的范圍內。這種鹽為例如與無機酸如鹽酸形成的鹽；堿金屬鹽如鈉鹽或鉀鹽；或堿土金屬鹽如鈣鹽或鎂鹽。
本發明的新化合物可用于治療應用。在本發明的一個方面，所述化合物可用于抑制一過性下食道括約肌松弛(TLESR)并由此用于治療或預防胃食道回流疾病(GERD)。在另一個實施方案中，本發明的化合物可用于預防回流、治療或預防返流、治療或預防哮喘、治療或預防喉炎、治療或預防肺病、和用于處置生長發育不良(failure tothrive)。
本發明的另一個方面為式I的化合物在制備用于治療或預防功能性胃腸疾病如機能性消化不良(FD)的藥物中的應用。本發明的另一個方面為式I的化合物在制備用于治療或預防過敏性腸綜合征(IBS)如便秘型IBS、腹瀉型IBS、或交替腸蠕動型IBS的藥物中的應用。
本發明的另一個方面為式I的化合物在制備用于抑制一過性下食道括約肌松弛、用于治療或預防GERD、用于預防回流、用于治療或預防返流、用于治療或預防哮喘、用于治療或預防喉炎、用于治療或預防肺病、和用于處置生長發育不良的藥物中的應用。
本發明的另一個方面為治療上述任一種病癥的方法，包括將藥學有效量的上述式I的化合物對患有所述病癥的主體給藥。
在本發明的一個方面，式I的化合物可用于治療和/或預防急性和慢性神經障礙和精神障礙、焦慮、以及慢性和急性疼痛障礙。在另一個方面，所述化合物可用于預防和/或治療與以下有關的疼痛偏頭痛、炎性疼痛、神經性疼痛如糖尿病性神經病、關節炎和類風濕性疾病、下背痛、術后疼痛和與多種病癥包括癌癥、心絞痛、腎或膽絞痛、月經、偏頭痛和痛風有關的疼痛。
術語“異構體”在本文中定義為式I化合物中官能團位置和/或取向不同的式I化合物。“取向”是指立體異構體、非對映異構體、區域異構體和對映異構體。
本文中使用的術語“同種型”定義為式I化合物的晶格不同的式I化合物，如結晶性化合物和無定形化合物。
詞語“TLESR”，一過性下食道括約肌松弛，在本文中根據Mittal，R.K，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，L.A.，Dent，J.，1995；Transient lower esophageal sphincter relaxation.Gastroenterology，109，601-610頁中定義。
詞語“回流”在本文中定義為因為機械屏障在此時暫時喪失，來自胃的流體能夠進入食道。
詞語“GERD”，胃-食道回流疾病，在本文中根據van Heerwarden，M.A.，Smout A.J.P.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Baillière′sClin.Gastroenterol.14，759-774頁定義。
制備方法上述式I的化合物可通過芳基溴A和炔B在堿如三乙胺的存在下在室溫下到60℃的溫度下通過Sonogashira偶聯(TetrahedronLetters，1975，50，4467；S.Thorand，N.Krause J.Org.Chem.，1998，63，8551-8553；M.Erdélyi，A.Gogoll，J.Org.Chem.，2001，66，4165-4169)合成(圖解1) 圖解1在其中末端炔B沒有市售的情況中，末端炔B通過中間體G制得，中間體G可通過兩個路線之一得到(圖解2)。一個路線為通過在DMF中在室溫到60℃的溫度下將芳基碘C與烯丙醇D偶聯。另一個路線通過首先使用氫化鋁鋰在THF中將羧酸E還原為醇F，從0℃開始并在回流溫度結束，然后使用Dess-Martin高碘化物(periodinane)在DCM中在室溫下在催化量的三氟乙酸的存在下將醇F氧化為醛G。
路線1 路線2 圖解2在得到醛G之后，如圖解3中所述制得炔B首先通過在DCM中在室溫下，醛G與四溴甲烷和三苯基膦反應將醛G轉化為二溴烯。在-78℃的溫度下在THF中用雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰進行消除反應，隨后在-78℃到室溫下在THF/己烷中與正丁基鋰進行鹵素-鋰交換，在用水淬滅之后得到末端炔B。然后使用物質B用于如圖解1中所述的Sonogashira偶聯。
圖解3
如圖解1-3所示的這一反應順序的優點在于，其可以無需純化任何中間體而進行；僅在Sonogashira偶聯之后需要純化。
或者，可使用經由吡啶J的方法(圖解4)在室溫到60℃的溫度下在堿如三乙胺的存在下芳基溴A與乙炔基(三甲基)硅烷I進行Sonogashira偶聯得到吡啶J。然后在四丁基銨三苯基二氟硅酸鹽的存在下在60℃加熱使吡啶J與溴化物K反應適當的時間，以得到通式I的化合物。
圖解4在上述圖解1、2、3和4中，Q、R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y1、Y2和Y3如上述式I化合物中的定義。
實驗詳述DCM用3分子篩干燥。THF在即將使用前從Na/二苯酮蒸餾。所有的反應在氮保護氣氛下進行。所有的玻璃儀器在即將使用前在150℃溫度下干燥至少兩小時。使用得自International Sorbent Technology(IST)的相分離器。色譜純化在硅膠60(0.040-0.063mm)上進行，或者在C8柱上進行反相色譜法。所有的NMR光譜在δ-氯仿中測量。
2-溴-6-甲基吡啶可購自Aldrich，(PPh3)2PdCl2購自Avacado，Pd(OAc)2購自Aldrich，CuI購自Fluka，4-苯基丁-1-炔購自TCI。如果沒有另外表明，使用的化學品為市售的并且不經進一步純化即可使用。
藥學制劑對于臨床應用，根據本發明，將式I的化合物適當地配制為用于口服給藥的藥學制劑。此外，制劑領域的技術人員還可考慮直腸、腸胃外或任何其它給藥途徑。因此，將式I的化合物與至少一種藥學和藥理學可接受的載體或助劑一起配制。載體可為固體、半固體或液體稀釋劑的形式。
在根據本發明制備口服藥學制劑時，將要配制的式I的化合物與固體粉狀組分如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物、明膠或其它適合的組分、以及與崩解劑和潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、富馬酸十八烷基酯和聚乙二醇蠟混合。然后將混合物加工為顆粒或壓縮為片劑。
可以用包含本發明的一種或多種活性化合物、植物油、脂肪、或其它適合用于軟明膠膠囊的介質的混合物的膠囊制備軟明膠膠囊。硬明膠膠囊可包含與固體粉狀組分如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物或明膠組合的活性化合物。
可制備以下形式的用于直腸給藥的劑量單位(i)包含與中性脂肪基質混合的活性物質的栓劑形式；(ii)包含與植物油、石蠟油、或其它適合用于明膠直腸膠囊的介質混合的明膠直腸膠囊形式；(iii)預制的微量灌腸劑形式；或(iv)用于在即將給藥前與適當的溶劑進行重新配制的干微量灌腸制劑形式。
可以制備糖漿劑或懸浮劑形式的口服給藥用液體制劑，例如包含活性化合物并且制劑的其余部分包括糖或糖醇；以及乙醇、水、甘油、丙二醇和聚乙二醇的混合物的溶液或懸浮液。如果需要，這種液體制劑可包含著色劑、調味劑、糖精和羧甲基纖維素或其它增稠劑。口服給藥用液體制劑也可制備為用于在使用前與適當的溶劑進行重新配制的干粉形式。
腸胃外給藥用溶液可制備為本發明的化合物在可藥用溶劑中的溶液。這些溶液也可包含穩定組分和/或緩沖組分并以安瓿或小瓶形式分配為單元劑量。腸胃外給藥用溶液也可制備為用于在使用之前與適當的溶劑進行重新配制的干制劑。
在本發明的一個方面，式I的化合物可每天給藥一次或兩次，根據患者病癥的嚴重程度而定。
式I的化合物的典型日劑量為基于要治療主體的每千克體重為0.1-10mg，但是其根據多種因素而定，例如給藥途徑、患者的年齡和體重、以及患者病癥的嚴重程度。
實施例方法A實施例13-(3-氯苯基)丙醛(化合物1)的制備 在氮氣下將四丁氯化銨(6.95g，0.25mol，1.0eq.)和碳酸氫鈉(5.25g，0.625mmol，2.5eq.)適當地溶解在DMF(15mL)中。將混合物冷卻到0℃，隨后加入3-氯碘代苯(5.96g，3.10mL，0.25mol)，然后加入烯丙醇(2.18g，2.56mL，0.375mol，1.50eq.)，和最后加入Pd(OAc)2(0.168g，7.5mmol，0.03eq.)，后者分為小份加入。將混合物在0℃攪拌0.5小時，最后在室溫下攪拌16小時。TLC表明有一些3-氯碘代苯剩余。然后將反應混合物在50℃加熱5小時。TLC表示3-氯碘代苯仍然有剩余，因此繼續在50℃加熱另外的15小時。其后，在40℃加熱8小時真空蒸發DMF。
然后，加入水(30mL)并用戊烷(4×30mL)提取黑色的反應混合物。將合并的戊烷相用硫酸鈉干燥并蒸發。得到2.487g(收率59％)的產物。
TLC Rf(庚烷/AcOEt 4∶1)＝0.17。
1H NMR(500MHz)9.81(s，1H)，7.24-7.17(m，3H)，7.09-7.06(br d，1H)，2.93(t，J＝7.5Hz，2H)，2.78(t，J＝7.5Hz，2H)。
13C NMR(75 MHz)200.5，142.2，134.0，129.6，128.2，126.3，126.2，44.8，27.6。
方法B實施例23-(3-氯苯基)丙醇(化合物2)的制備 在氮氣下將3-(3-氯苯基)丙酸(0.923g，5.0mmol)溶解于THF(12mL)中并冷卻到0℃。分批加入氫化鋁鋰(0.380g，10.0mmol，2.0eq.)。使混合物回溫到室溫并在該溫度下攪拌0.5小時，然后回流0.5小時。
隨后，將混合物冷卻并傾入0℃的酒石酸的乙醇飽和溶液(30mL)中。加入十水硫酸鈉和硅藻土的1∶1混合物(總體積40mL)。混合物在室溫下攪拌10分鐘然后用Et2O(150mL)通過硅藻土真空過濾。蒸發有機相。得到無色油狀物和一些白色晶體的混合物。加入EtOAc(10mL)。其溶解了油狀物但是沒有溶解晶體，將晶體濾掉，母液濃縮。這樣，分離出0.832g(收率98％)的無色油狀物。
1H NMR(300MHz)7.22-7.14(m，3H)，7.09-7.03(m，1H)，4.29(s，1H，br)，3.63(t，J＝6.6Hz，2H)，2.66(t，J＝7.4Hz，2H)，1.86(q，J＝7Hz，2H)。
13C NMR(75MHz)143.5，133.6，129.2，128.1，126.2，125.6，61.2，33.5，31.4。
實施例33-(3-甲氧基苯基)丙醇(化合物3)的制備使用3-(3-甲氧基苯基)丙酸作為起始原料根據上述方法B制備。
1H NMR(500MHz)7.19(t，J＝7.8Hz，1H)，6.78(d，J＝7.4Hz，1H)，1H，6.76(m，2H)，3.77(s，3H)，3.64(t，J＝6.5Hz，2H)，2.66(t，J＝7.8Hz，2H)，2.11(br s，1H)，1.87(br q，J＝7.6Hz，2H)。
實施例43-(3-甲基苯基)丙醇(化合物4)的制備使用3-(3-甲基苯基)丙酸作為起始原料根據上述方法B制備。
1H NMR(500MHz)7.24(t，J＝7.5Hz，1H)，7.10-7.04(m，3H)，3.70(t，J＝6.6Hz，2H)，3.25(br s，1H)，2.72(t，J＝7.6Hz，2H)，2.39(s，3H)，1.93(br q，J＝7.6Hz，2H)。
方法C實施例53-(3-甲氧基苯基)丙醛(化合物5)的制備 在0℃溫度下將Dess-Martin高碘化物[1，1，1-三(乙酰氧基)-1，1-二氫-1，2-benziodoxol-3-(1H)-酮](1.01g，2.38mmol，1.1eq.)溶解于DCM(5mL)中。在0℃溫度下加入1滴三氟乙酸，然后加入在DCM(3mL)中的3-(3-甲氧基苯基)丙醇(0.360g，2.17mmol)。在室溫下攪拌20小時之后，將反應混合物用Et2O(25mL)轉移到1M NaOH(10mL)中。在攪拌10分鐘之后，分離有機相，然后分別用1M NaOH(10mL)和水(10mL)提取并用硫酸鈉干燥。得到0.276g粗產物(77％)，其不經進一步純化用于下一步。
1H NMR(300MHz)9.63(s，1H)，7.10-7.02(m，1H)，6.70-6.58(m，3H)，3.64(s，3H)，2.78(t，J＝7.4Hz，2H)，2.60(t，J＝7.4Hz，2H)。
13C NMR(300MHz)200.9，159.3，141.6，129.2，120.2，113.8，111.1，54.8，44.8，27.9。
實施例63-(3-甲基苯基)丙醛(化合物6)的制備使用3-(3-甲基苯基)丙醇作為起始原料根據上述方法C制備。
1H NMR(300MHz)9.83(br t，J＝1.4Hz，1H)，7.20(br t，J＝7.3Hz，1H)，7.07-6.98(m，3H)，2.94(t，J＝7.4Hz，2H)，2.78(t，J＝7.4Hz，2H)，2.34(s，3H)。
方法D實施例71-氯-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯(化合物7)的制備(根據E.J.Corey，P.L.Fuchs Tetrahedron Letters 1972，No.36，3769-3772頁的方法) 將四溴甲烷(4.89g，14.76mmol，2.0eq.)溶解于DCM(45mL)中，然后冷卻到0℃。加入三苯基膦(3.87g，14.76mmol，2.0eq.)。將橙色溶液攪拌3分鐘，然后以小份加入Zn(0.97g，14.76mmol，2.0eq.)。在另外攪拌10分鐘之后，加入在DCM(5mL)中的3-(3-氯苯基)丙醛(1.24g，7.38mmol)。再過10分鐘之后，使反應混合物回溫到室溫并在該溫度下攪拌14小時。然后，向反應混合物加入戊烷(200mL)得到沉淀。將混合物過濾并將不溶性部分溶解于DCM(40mL)中，并再次用戊烷(200mL)沉淀。在過濾之后，再次重復這一過程。將合并的有機相蒸發。得到2.562g粗產物，為包含白色晶體的油狀物。NMR表示為所需物質和O＝PPh3的混合物。油狀物可以溶解在5mL乙酸乙酯中，而晶體不能溶解。濾掉晶體并將母液濃縮。得到2.106g(收率87％)物質，根據NMR分析，這種物質不含O＝PPh3。
1H NMR(300MHz)7.25-7.15(m，3H)，7.07-7.02(d t，J1＝6.6Hz，J2＝1.7Hz，1H)，2.69(t，J＝7.4Hz，2H)，2.38(q，J＝7.4Hz，2H)。
13C NMR(75MHz)142.2，136.8，134.0，129.6，128.3，126.3，126.3，89.9，34.3，33.4。
實施例81-甲氧基-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯(化合物8)的制備用3-(3-甲氧基苯基)丙醛作為起始原料根據上述方法D制備。
1H NMR(300MHz)7.10(t，J＝7.6Hz，2H)，6.65(m，2H)，6.30(t，J＝7.2Hz，1H)，3.68(s，3H)，2.59(t，J＝7.6Hz，2H)，2.30(q，J＝7.5Hz，2H)。
13C NMR(75MHz)159.4，141.8，137.3，129.2，120.4，113.9，111.3，89.3，55.0，34.4，33.7。
實施例91-甲基-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯(化合物9)的制備用3-(3-甲基苯基)丙醛作為起始原料根據上述方法D制備。
1H NMR(500MHz)7.22(t，J＝7.75Hz，1H)，7.08-7.0(m，3H)，6.33(t，J＝7.2Hz，1H)，2.60(t，J＝7.6Hz，2H)，2.32(q，J＝7.6Hz，2H)，2.37(s，3H)。
13C NMR(125MHz)140.3，137.6，132.6，129.0，128.5，126.9，125.2，89.3，34.5，33.6，21.3。
方法E實施例101-丁-3-炔-1-基-3-氯苯(化合物10)的制備
將1-氯-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯(1.106g，3.41mmol)溶解于THF(5mL)然后冷卻到-78℃。滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(5.11mL，1.0M的THF溶液，1.5eq.)并將溶液攪拌0.5小時。然后滴加正丁基鋰(5.05mL，1.6M的己烷溶液，2.5eq.)。將反應混合物在-78℃攪拌1小時，然后在室溫下攪拌1小時，隨后用水(20mL)淬滅。分離有機相并將水相用Et2O提取(2×20mL)。將合并的有機相用硫酸鈉干燥并蒸發。得到0.541g(收率96％)粗產物。
1H NMR(300MHz)7.24-7.15(m，3H)，7.11-7.05(m，1H)，2.79(t，J＝7.4Hz，2H)，2.45(d t，J1＝7.4Hz，J2＝2.6Hz，2H)，1.97(t，J＝2.6Hz，1H)。
13C NMR(125MHz)142.2，134.0，129.5，128.5，126.6，126.4，83.0，69.2，34.2，20.2。
實施例111-丁-3-炔-1-基-3-甲氧基苯(化合物11)的制備用1-甲氧基-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯作為起始原料根據上述方法E制備。
1H NMR(500MHz)7.23(t，J＝7.7Hz，1H)，6.83(d，J＝7.7Hz，1H)，6.79(m，2H)，3.82(s，3H)，2.85(t，J＝7.6Hz，2H)，2.50(t d，J1＝7.6Hz，J2＝2.6Hz，2H)，2.00(t，J＝2.6Hz，1H)。
13C NMR(125MHz)159.5，141.9，129.3，120.7，114.1，111.5，83.7，68.8，55.0，34.8，29.6。
實施例121-丁-3-炔-1-基-3-甲基苯(化合物12)的制備用1-甲基-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯作為起始原料根據上述方法E制備。
13C NMR(75MHz)140.2，137.8，129.0，128.1，126.9，125.2，83.8，68.7，34.8，21.4，20.6。
方法F實施例132-[4-(3-氯苯基)丁-1-炔-1-基]-6-甲基吡啶(化合物13)的制備 向2-溴-6-甲基吡啶(0.054g，0.31mmol)中加入粗品1-丁-3-炔-1-基-3-氯苯(0.057g，0.35mmol，1.10eq.)，隨后加入(PPh3)2PdCl2(0.007g，0.01mmol，0.03eq.)和三乙胺(0.50mL)。將混合物在氮氣下在0℃攪拌0.5小時。然后加入CuI(0.002g，0.01mmol，0.03eq.)并在約0.5小時內將混合物回溫到室溫，然后在60℃加熱12小時。將物質通過1g的SiO2短柱過濾，用乙酸乙酯(15mL)淋洗。在硅膠上進行急驟色譜法，用戊烷/Et2O為3∶1然后為2∶1進行洗脫，得到0.027g(收率34％，相對于2-溴-6-甲基吡啶)。
TLCRf(戊烷/Et2O＝2∶1)＝0.29。
1H NMR(300MHz)7.41(t，J＝7.8Hz，1H)，7.21-7.03(m，5H)，6.97(d，J＝7.8Hz，1H)，2.84(t，J＝7.8Hz，2H)，2.63(t，J＝7.8Hz，2H)，2.46(s，3H)。
13C NMR(75MHz)158.3，142.2，142.1，136.2，133.8，129.4，128.4，126.4，126.3，123.8，122.2，89.2，81.1，34.1，24.4，21.3。
實施例142-[4-(3-甲氧基苯基)丁-1-炔-1-基]-6-甲基吡啶(化合物14)的制備用2-溴-6-甲基吡啶和1-丁-3-炔-1-基-3-甲氧基苯作為起始原料，根據上述方法F制備。
1H NMR(500MHz)7.50(t，J＝7.6Hz，1H)，2.23(t，J＝7.8Hz，1H)，7.18(d，J＝7.7Hz，1H)，7.06(d，J＝7.8Hz，1H)，6.78(dd，J1＝8.1Hz，J2＝2.3Hz，1H)，6.87-6.81(m，2H)，3.80(s，3H)，2.94(t，J＝7.7Hz，2H)，2.72(t，J＝7.7Hz，2H)，2.55(s，3H)。
13C NMR(75MHz)159.4，158.4，142.7，141.9，136.1，129.2，123.7，122.0，120.6，114.0，111.6，89.6，81.0，55.1，34.8，24.5，21.6。
實施例152-甲基-6-[4-(3-甲基苯基)丁-1-炔-1-基]吡啶(化合物15)的制備用2-溴-6-甲基吡啶和1-丁-3-炔-1-基-3-甲基苯作為起始原料按上述方法F制備。
1H NMR(300MHz)7.51(t，J＝7.7Hz，1H)，7.21(t，J＝7.4Hz，1H)，7.19(t，J＝7.4Hz，1H)，7.10-7.01(m，4H)，2.93(t，J＝7.7Hz，2H)，2.72(t，J＝7.7Hz，2H)，2.55(s，3H)，2.35(s，3H)。
13C NMR(75MHz)158.5，142.8，140.3，137.8，136.1，129.1128.2，126.9，125.3，123.7，122.0，89.6，80.9，34.8，24.6，21.7，21.4。
實施例162-甲基-6-(4-苯基丁-1-炔-1-基)吡啶(化合物16)的制備用2-溴-6-甲基吡啶和4-苯基-丁-1-炔作為起始原料，根據上述方法F制備。
1H NMR(300MHz)7.46(t，J＝7.6Hz，1H)，7.33-7.19(m，5H)，7.14(d，J＝7.7Hz，1H)，7.02(d，J＝7.7Hz，1H)，2.95(t，J＝7.6Hz，2H)，2.71(t，J＝7.6Hz，2H)，2.52(s，3H)。
13C NMR(75MHz)158.2，142.6，140.1，135.9，128.1(高強度)，126.0，123.5，121.8，89.3，80.8，34.6，24.4，21.5。
實施例172-甲基-6-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]吡啶(化合物17) 將6-溴-2-甲基吡啶(0.516g，3.0mmol)與乙炔基(三甲基)硅烷(0.324g，3.3mmol，1.10eq.)混合并在0℃加入(PPh3)2PdCl2(0.063g，0.09mmol，0.03eq.)和三乙胺(1.21g，1.67mL，12.0mmol，4.0eq.)。將混合物在0℃攪拌0.5小時，然后加入CuI(0.017g，0.09mmol，0.03eq.)并在15分鐘內將混合物加熱到室溫。在室溫下攪拌15分鐘之后，將其加熱到60℃，加熱維持2小時，最后將混合物置于室溫下16小時。LC/MS表明沒有溴化物剩余。加入磷酸鹽緩沖液(5mL，0.2M，pH 7)。使用相分離器進行DCM提取(3×5mL)。將有機相合并并用硫酸鈉干燥。蒸發之后得到0.623g產物。在硅膠上進行急驟色譜法，在用庚烷中的5％EtOAc、隨后10％EtOAc洗脫之后，分離出0.320g物質。(收率56％)。
TLCRf(庚烷/EtOAc＝2∶1)＝0.56。
1H NMR(300MHz)7.37(t，J＝7.8Hz，1H)，7.13(d，J＝7.8Hz，1H)，6.93(d，J＝7.8Hz，1H)，2.40(s，3H)，0.14(s，9H)。
13C NMR(75MHz)158.2，141.8，135.7，124.0，122.3，103.5，93.6，24.2，-0.51。
實施例182-甲基-6-(5-苯基戊-1-炔-1-基)吡啶(化合物18)(根據A.S.Pilcher，P.DeShong，J.Org.Chem.，1996，61，6901-6905頁的方法) 2-甲基-6-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]吡啶(0.038g，0.2mmol，2.0eq.)與(3-溴丙基)苯(0.020g，0.1mmol)和四丁基銨三苯基二氟硅酸鹽(0.081g，0.3mmol，1.5eq.)混合并在密封小瓶中在60℃加熱24小時。隨后的LC/MS表示產物的分子量。繼續在60℃再加熱24小時，但是在LC/MS中沒有任何改變。通過在Si上的急驟色譜法進行純化，用戊烷/乙醚級分作為洗脫液，首先為6∶1，然后為4∶1，得到0.008g產物(收率17％)。
TLCRf(戊烷/Et2O＝4∶1)＝0.34。
1H NMR(500MHz)7.50(t，J＝7.8Hz，1H)，7.32-7.25(m，2H)，7.24-7.18(m，4H)，7.06(d，J＝7.8Hz，1H)，2.78(t，J＝7.8Hz，2H)，2.54(s，3H)，2.45(t，J＝7.4Hz，2H)，1.96(q，J＝7.4Hz，2H)。
實施例19(1-甲基-丁-3-炔基)-苯的制備使用(4，4-二溴-1-甲基-丁-3-烯基)-苯作為起始原料，根據上述方法E制備(1-甲基-丁-3-炔基)-苯。
1H NMR(400MHz)7.33(m，2H)，7.25(m，3H)，3.01(m，1H)，2.45(m，2H)，1.99(t，1H)，1.41(d，3H)。
實施例20
(4，4-二溴-1-甲基-丁-3-烯基)-苯的制備使用3-苯基-丁醛作為起始原料根據上述方法D制備(4，4-二溴-1-甲基-丁-3-烯基)-苯。
實施例212-甲基-6-(4-苯基戊-1-炔-1-基)吡啶(化合物19)該化合物使用(1-甲基丁-3-炔基)-苯和2-溴-6-甲基吡啶作為起始原料，根據上述方法F制備。
1H NMR7.49(t，1H)，7.26(m，5H)，7.14(d，1H)，7.04(d，1H)，3.11(m，1H)，2.73(dd，1H)，2.64(dd，1H)，2.53(s，1H)，1.44(d，3H)。
13C NMR158.9，145.9，143.3，136.4，128.6，127.1，126.6，124.1，122.3，89.3，81.9，39.2，28.9，24.7，21.1。
生物學評價在表達mGluR5d的細胞系中的mGluR5拮抗作用功能評價可使用用于藥理學活性的標準試驗分析本發明化合物的性質。谷氨酸受體試驗的例子為本領域中公知的，在例如Aramori等人，Neuron8757(1992)；Tanabe等人，Neuron 8169(1992)；Miller等人，J.Neuroscience 156103(1995)；Balazs，等人，J.Neurochemistry69151(1997)中描述。在這些出版物中描述的方法被并入本文作為參考。方便地，本發明的化合物可通過測量在表達mGluR5的細胞中細胞內鈣[Ca2+]i流動的試驗(FLIPR)、或測量肌醇磷酸代謝回轉的另一個試驗(IP3)方式進行研究。
FLIPR試驗將WO 97/05252中所述的表達人mGluR5d的細胞以每孔100,000細胞的密度接種在涂有膠原蛋白的具有透明底和黑色側面的96孔板上并在接種24小時之后進行實驗。所有的試驗在包含127mM NaCl、5mM KCl、2mM MgCl2、0.7mM NaH2PO4、2mM CaCl2、0.422mg/mlNaHCO3、2.4mg/ml HEPES、1.8mg/ml葡萄糖和1mg/ml BSA FractionIV(pH 7.4)的緩沖液中進行。將96-孔板中的細胞培養物加載到上述緩沖液中60分鐘，所述緩沖液包含在0.01％pluronic酸(專有的，非離子型表面活性劑多元醇-CAS9003-11-6)中的4μM熒光鈣指示劑fluo-3的乙酰氧基甲基酯形式(Molecular Probes，Eugene，Oregon)。在加載時段后，除去fluo-3緩沖液并替換為新鮮的試驗緩沖液。使用0.800W的激光設定和0.4秒的CCD攝像機快門速度以及激發波長和發射波長分別為488nm和562nm進行FLIPR實驗。每個實驗從存在于細胞板各個孔中的160μl緩沖液開始。加入得自拮抗劑板的40μl，隨后加入得自激動劑板的50μl。在拮抗劑和激動劑之間的加入間隔為90秒。在兩個加入中的每個之后立即以1秒間隔抽樣熒光信號50次，隨后以5秒間隔抽樣3個樣本。測量應答作為對激動劑應答的峰高之間的差異，減去抽樣時間內的背景熒光。使用線性最小二乘擬合程序進行IC50測定。
IP3試驗用于mGluR5d的另外的功能試驗在WO 97/05252中描述，其基于磷脂酰肌醇代謝回轉。受體活化刺激磷脂酶C活性并引起肌醇1，4，5，三磷酸酯(IP3)形成的增加。
將穩定地表達人mGluR5d的GHEK以40×104細胞/孔接種在24孔的涂有聚-L-賴氨酸的板上，介質包含1μCi/孔[3H]肌醇。
將細胞培養過夜(16小時)，然后洗滌三次并在37℃的溫度下在補充有1單位/ml谷丙轉氨酶和2mM丙酮酸鹽的HEPES緩沖鹽水(146mM NaCl，4.2mM KCl，0.5mM MgCl2，0.1％葡萄糖，20mM HEPES，pH 7.4))中培養1小時。將細胞在HEPES緩沖鹽水中洗滌一次并在包含10mM LiCl的HEPES緩沖鹽水中預培養10分鐘。將化合物一式兩份在37℃培養15分鐘，然后加入谷氨酸鹽(80μM)或DHPG(30μM)并再培養另外的30分鐘。通過在冰上向反應加入0.5ml高氯酸(5％)終止反應并在4℃培養至少30分鐘。在15ml聚丙烯試管中收集樣品并使用離子交換樹脂(Dowex AG1-X8甲酸鹽形式，200-400目，BIORAD)柱分離肌醇磷酸。肌醇磷酸的分離首先通過用8ml的30mM甲酸銨洗脫甘油基磷脂酰肌醇。然后用8ml的700mM甲酸銨/100mM甲酸洗脫總的肌醇磷酸并收集在閃爍管中。然后將該洗脫液與8ml的閃爍體混合并通過閃爍計數測定[3H]肌醇結合。將得自雙份樣品的dpm計數繪圖并使用線性最小二乘擬合程序生成IC50測定結果。
縮寫BSA 牛血清清蛋白CCD 電荷耦合器件CRC 濃度應答曲線DHPG 3，5-二羥基苯基甘氨酸DPM 每分鐘衰變數EDTA 乙二胺四乙酸FLIPR 熒光成像板讀出器GHEK 含GLAST的人胚胎腎GLAST 谷氨酸/天冬氨酸轉運蛋白HEPES 4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸(緩沖劑)IP3肌醇三磷酸通常，化合物在上述試驗中有活性，IC50值小于10000nM。在本發明的一個方面，IC50值小于1μM。在本發明的另一個方面，IC50值小于100nM。
篩選具有抗TLESR活性的化合物使用兩種性別的成年Labrador獵犬，訓練其站在Pavlov吊具中。形成粘膜-到-皮膚食道造口并在進行任何試驗前允許狗完全地恢復。
運動性測量簡單地說，在禁食并自由供應水約17小時之后，通過食道造口引入多腔袖套式/側孔組件(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)以測量胃、下食道括約肌(LES)和食道壓力。使用低順應性壓力灌注泵(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)用水灌注組件。灌注由空氣的管以口腔方向穿過以測量吞咽，用銻電極監控LES上3cm處的pH。在個人電腦上將所有的信號以10Hz放大并記錄。當已經獲得未禁食的胃/LES III相運動活動的基線測量結果時，將安慰劑(0.9％NaCl)或試驗化合物在前腿靜脈中進行靜脈內給藥(i.v.，0.5ml/kg)。i.v.給藥后十分鐘，通過組件的中央腔，以100ml/分鐘向胃灌注營養餐(10％蛋白胨，5％D-葡萄糖，5％Intralipid，pH 3.0)到最終量為30ml/kg。在灌注營養餐后，以500ml/min的速率灌注空氣直到得到10±1mmHg的胃內壓力。然后通過使用灌流泵進一步灌注空氣或從胃排出空氣使整個實驗過程中的壓力維持在這一水平。從開始灌注營養餐到空氣注氣結束的時間為45分鐘。該方法已經被確認是引發TLESR的可靠方法。
TLESR定義為食道下端括約肌壓力(參考胃內壓力)以＞1mmHg/s的速率降低。松弛在其發作之前≤2s不應出現咽信號，在這種情況下，松弛被歸類為由吞咽誘導所致。LES和胃之間的壓力差應小于2mmHg，并且完全松弛的持續時間超過1秒。
生物學評價實施例1

根據上述實施例13的方法制備2-[4-(3-氯苯基)丁-1-炔-1-基]-6-甲基吡啶(化合物13)。根據上述的恒壓模型在兩種性別的成年Labrador獵犬上試驗2-[4-(3-氯苯基)丁-1-炔-1-基]-6-甲基吡啶。
表1.1-恒壓模型

N＝試驗用狗的數目
權利要求
1.由式I表示的化合物 其中R1選自氫、C1-C4烷基、C3-C6環烷基、芳基和雜芳基，其中芳基或雜芳基可被C1-C4烷基取代；R2選自氫和C1-C4烷基；R3選自氫、C1-C4烷基、F、CF3、CHF2和CH2F；R4選自氫、F、CF3、CHF2、CH2F和CH3；R5選自氫和F；R6選自氫和F；Q選自C1-C4烷基，其任選被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代；Y1選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；芐氧基；間位或對位的硝基；和C1-C4烷基酯；Y2選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；Y3選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；或Y1和Y2可形成芳族或非芳族環，其任選被鹵素、腈、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、芐氧基或C1-C4烷基酯取代，其中C1-C4烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；以及其可藥用鹽、水合物、同種型和/或旋光異構體，除4-(4-吡啶-2-基丁-3-炔基)-芐腈之外。
2.由式I表示的化合物 其中R1選自氫、C1-C4烷基、C3-C6環烷基、芳基和雜芳基，其中芳基或雜芳基可被C1-C4烷基取代；R2選自氫和C1-C4烷基；R3選自氫、C1-C4烷基、F、CF3、CHF2和CH2F；R4選自氫、F、CF3、CHF2、CH2F和CH3；R3選自氫和F；R6選自氫和F；Q選自C1-C4烷基，其任選被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代；Y1選自氫、鹵素、腈、C1-C4烷氧基和C1-C4烷基；Y2選自氫、鹵素、腈、C1-C4烷氧基和C1-C4烷基；Y3選自氫、鹵素、腈、C1-C4烷氧基和C1-C4烷基；以及其可藥用鹽、水合物、同種型和/或旋光異構體，除4-(4-吡啶-2-基丁-3-炔基)-芐腈之外。
3.權利要求1或2的式I的化合物，其中R1為氫或C1-C3烷基；R2為氫；R3選自氫和甲基；R4為氫；R5為氫；R6為氫；Q為C1-C2烷基，其任選被C1-C2烷基取代；Y1選自氫、氯、C1-C2烷氧基和C1-C2烷基；和Y2選自氫、氯、C1-C2烷氧基和C1-C2烷基；和Y3為氫。
4.權利要求1的化合物，其選自2-[4-(3-氯苯基)丁-1-炔-1-基]-6-甲基吡啶、2-[4-(3-甲氧基苯基)丁-1-炔-1-基]-6-甲基吡啶、2-甲基-6-[4-(3-甲基苯基)丁-1-炔-1-基]吡啶、2-甲基-6-(4-苯基丁-1-炔-1-基)吡啶和2-甲基-6-(4-苯基戊-1-炔-1-基)吡啶。
5.用于治療應用的權利要求1-4中任一項的化合物。
6.權利要求5的化合物，其中治療應用為治療或預防胃食道回流疾病。
7.權利要求1或2的式I的化合物或其可藥用鹽或旋光異構體在制備用于抑制一過性下食道括約肌松弛的藥物中的應用。
8.權利要求1或2的式I的化合物或其可藥用鹽或旋光異構體在制備用于治療或預防胃食道回流疾病的藥物中的應用。
9.4-(4-吡啶-2-基丁-3-炔基)-芐腈或其可藥用鹽或旋光異構體在制備用于抑制一過性下食道括約肌松弛的藥物中的應用。
10.4-(4-吡啶-2-基丁-3-炔基)-芐腈或其可藥用鹽或旋光異構體在制備用于治療或預防胃食道回流疾病的藥物中的應用。
11.藥物組合物，其包括權利要求1或2的式I的化合物作為活性組分，以及包括藥理學和藥學可接受的載體。
12.制備式I的化合物的方法，其中芳基溴化物A 與炔烴B， 在堿如三乙胺的存在下在室溫到60℃溫度下進行偶聯反應并且其中R1選自氫、C1-C4烷基、C3-C6環烷基、芳基和雜芳基，其中芳基或雜芳基可被C1-C4烷基取代；R2選自氫和C1-C4烷基；R3選自氫、C1-C4烷基、F、CF3、CHF2和CH2F；R4選自氫、F、CF3、CHF2、CH2F和CH3；R5選自氫和F；R6選自氫和F；Q選自C1-C4烷基，其任選被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代；Y1選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；芐氧基；間位或對位的硝基；和C1-C4烷基酯；Y2選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；Y3選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；或Y1和Y2可形成芳族或非芳族環，其任選被鹵素、腈、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、芐氧基或C1-C4烷基酯取代，其中C1-C4烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代。
13.由式B表示的化合物 其中R1選自氫、C1-C4烷基、C3-C6環烷基、芳基和雜芳基，其中芳基或雜芳基可被C1-C4烷基取代；R2選自氫和C1-C4烷基；R3選自氫、C1-C4烷基、F、CF3、CHF2和CH2F；R4選自氫、F、CF3、CHF2、CH2F和CH3；Q選自C1-C4烷基，其任選被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代；Y1選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；芐氧基；間位或對位的硝基；和C1-C4烷基酯；Y2選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；Y3選自氫；鹵素；腈；C1-C4烷氧基；C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代；和C1-C4烷基酯；或Y1和Y2可形成芳族或非芳族環，其任選被鹵素、腈、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、芐氧基或C1-C4烷基酯取代，其中C1-C4烷基的一個或多個氫原子可被氟原子取代。
14.選自以下的化合物1-氯-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯；1-甲氧基-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯；1-甲基-3-(4，4-二溴丁-3-烯-1-基)苯；1-丁-3-炔-1-基-3-氯苯；和(4，4-二溴-l-甲基-丁-3-烯基)-苯。
15.抑制一過性下食道括約肌松弛的方法，包括將有效量的權利要求1或2的式I的化合物對需要這種抑制的主體給藥。
16.治療或預防胃食道回流疾病的方法，包括將有效量的權利要求1或2的式I的化合物對需要這種治療或預防的主體給藥。
全文摘要
本發明涉及式(I)的新化合物，新化合物的制備方法、新化合物在治療中的應用以及包括新化合物的藥物組合物。新化合物可用于治療應用，特別是用于治療胃食道回流疾病(GERD)。
文檔編號A61P1/04GK1870999SQ200480030870
公開日2006年11月29日 申請日期2004年10月20日 優先權日2003年10月31日
發明者P·巴克, U·鮑爾, K·尼爾松, A·瓦爾貝里 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司, Nps 藥物有限公司