專利名稱：一種具有抗炎作用的藥物組合物及其生產方法
技術領域：
本發明涉及一種具有抗炎作用的藥物，特別是添加有中藥貫葉連翹提取物的具有治療急性炎癥和以肉芽組織增生為主的慢性炎癥的藥物組合物及其生產方法。
背景技術：
急、慢性炎癥的產生一般認為是化學性及物理性疼痛因子所致的疼痛，臨床的病癥是內臟器官，疼痛、急、慢性軟組織損傷，腱鞘炎，風濕、類風濕關節炎、關節疼痛等，我國傳統中醫學認為本病的發生，多因正氣本虛，外邪入侵，邪毒阻滯，濕演化熱，血敗肉腐，帶脈約束失常。但嚴重時可能會出現局部粘膜充血水腫、炎性滲出，血液循環障礙，乃至組織粘膜脫落壞死。目前西醫采用的鎮痛和消炎藥物有多種，如阿司匹林、去痛片、消炎痛、布洛芬、酮洛芬、案普生、保泰松、尼美舒利、莫非唑拉等，中藥有牛黃消炎片、麻黃細辛湯、止痛消炎膏、烏藥提取物、竹黃提取物、蓮膽消炎膠囊等，這些鎮痛和消炎藥物的作用要求在達到清熱解毒，抗菌消炎的同時，還可以改善局部血液循環，促進創面的修復與愈合，使熱清毒化。濕祛瘟散，腐法新生，帶脈宣通暢達，則諳癥自除的目的。
經檢索中國科技文獻，我們還了解到具有治療急性炎癥和以肉芽組織增生為主的急慢性炎癥的中西藥藥物研究論文如下1、金邊瑞香的抗炎癥作用，《贛南醫學院學報》。2002，22(1)，目的研究金邊瑞香的抗炎癥作用。方法①足腫脹法；②佐劑性關節炎法；③瓊脂肉芽腫法；④耳廓腫脹法；⑤遲發性過敏反應法；⑥毛細血管通透性法。結果對角叉菜膠誘發的大鼠足爪腫，佐劑性關節炎，瓊脂肉芽腫，小鼠遲發性過敏反應具有明顯的抑制作用；對二甲苯誘發的小鼠耳廓腫脹及醋酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性的影響等急性炎癥也具有一定的抑制作用。結論金邊瑞香提取液具有抗炎癥作用。
2、赤土苻苓苷的抗炎作用研究《新疆中醫藥》。2002，20(3)，通過增加血管通透性為主的急性炎癥模型和以肉芽腫為特征的慢性炎癥模型，觀察赤土苻苓(Smi)的抗炎作用，并以阿斯匹林為陽性對照。結果Smi對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹，醋酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性，小鼠角叉菜膠性足腫脹均有明顯的抑制作用，其中Smi在80mg/kg作用最為明顯(P＜0.001)。對小鼠棉球肉芽腫增生也有明顯的抗增生作用(P＜0.001)。結果表明Smi對急性和慢性炎癥模型均有抗炎作用，此外，Smi明顯降低小鼠角叉菜膠性炎癥組織內PGE2含理。
3、福建穿山龍抗炎鎮痛作用的實驗研究，《海峽藥學》。2000，12(3)。運用二甲苯、角叉菜膠致炎、小鼠扭體反應等實驗觀察。福建穿山龍i g能明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳殼炎癥、大鼠角叉菜膠性足關節腫脹，降低小鼠腹腔毛細血管通透性及明顯抑制大鼠棉球肉芽腫；并能延長小鼠疼痛反應時間，減少小鼠扭體反應次數。實驗結果表明，福建穿山龍具有明顯的抗炎、鎮痛作用。
4、紅毛五加總甙的抗炎作用，《中藥藥理與臨床》。2000，16(1)，研究紅毛五加總甙(TGA)的抗炎作用。方法采用多種致炎劑引起大、小鼠炎癥模型。結果TGA對二甲苯、蛋清、角叉菜膠、甲醛致腫、瓊脂肉芽腫增生、乙酸致毛細血管通透性增加及多形核白細胞游走均有明顯抑制作用，同時使炎癥組織PGE、組胺含量減少。結論TGA具有抗急、慢性炎癥作用。
5、乙醇提取新鮮當歸油的抗炎鎮痛作用《中國藥房》。2002，13(9)。研究當歸油的鎮痛、抗炎作用。方法應用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增高、蛋清致大鼠足跖腫脹及大鼠棉球肉芽腫增生4種動物模型進行抗炎藥效學實驗；采用醋酸致小鼠扭體反應，進行鎮痛實驗。結果當歸油能顯著抑制上述各種動物模型的炎癥反應及醋酸引起的小鼠扭體反應。結論當歸油對急、慢性炎癥均有明顯抑制作用。且有一定的鎮痛效果。
6、復方銀黃微型灌腸劑抗炎作用的研究《廣西醫科大學學報》。1999，16(6)。研究復方銀黃微型灌腸劑的抗炎作用。方法觀察復方銀黃微型灌腸劑對巴豆油所致的小鼠耳部炎癥、冰醋酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性增高和大鼠棉球肉芽腫的影響。結果復方銀黃微型灌腸劑對巴豆油所致的小鼠耳部炎癥有明顯的抗炎作用。能明顯抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性增加，對大鼠棉球肉芽腫也有顯著的抑制作用。結論復銀黃微型灌腸劑具有較強的抗炎作用。
7、蛇床子素抗炎作用的實驗研究《贛南醫學院學報》。1999，19(3)。采用多種實驗性炎癥模型，觀察了Ost的抗炎作用。Ost對二甲苯所致小鼠耳殼腫脹，醋酸引起的小鼠腹腔毛細血管通透性增高，角叉菜膠誘發的大鼠及切除雙側腎上腺的大鼠足抓腫脹均有明顯的抑制作用，但不影響大鼠足爪類癥組織內PGE含量。Ost對瓊脂引起的小鼠肉芽腫增生亦有明顯的抑制作用。結果表明Ost對急性和慢性炎癥模型均有抗炎作用。其抗炎機制并非通過垂體—腎上腺皮質系統，亦與PGE的合成無關。
8、荊芥揮發油抗炎作用研究，《中藥藥理與臨床》。1998，14(6)。采用動物急性炎癥模型(大鼠角叉菜膠或蛋清性足腫脹、小鼠角叉菜膠性及足腫脹和二甲苯致耳廓腫脹、小鼠腹腔或皮膚毛細血管通透性亢進)及慢性炎癥模型(小鼠棉球肉芽腫)，觀察了荊芥揮發油的抗炎作用，結果表明荊芥揮發油對動物急性或慢性炎癥模型均有不同程度的抑制作用，具有良好的抗炎作用。
9、女金丹抗炎和對血液流變學影響的實驗研究《廣州中醫藥大學學報》。1996，13(1)，本研究結果表明，女金丹能降低炎癥動物毛細血管通透性，對大鼠蛋清性，甲醛性足腫脹，對大鼠棉球性肉芽腫，均有明顯的抑制作用，“血瘀證”大鼠能明顯改善其血液流變性。提示女金丹具有抗炎和改善血液流灣性的作用。
10、合成川芎嗪的抗炎作用《沈陽藥科大學學報》。2000，17(4)。川芎嗪50-200mg/kg灌胃給藥，可顯著抑制小鼠叉菜膠性足腫脹、巴豆油性耳腫脹、二甲苯致小鼠皮膚毛細血管通透性增高、小鼠棉球肉芽腫增生、大鼠巴豆油性肉芽囊腫的組織增生、抑制小鼠羧甲基纖維素囊中白細胞的游走反應，對小鼠燙傷性炎癥也有顯著抑制作用。
11、雙氯芬酸刺氨酸鹽的抗炎作用《中國醫藥工業雜志》。1995，26(12)，雙氯芬酸賴氨酸鹽灌胃給藥能明顯抑制角叉菜膠等所致急性炎癥，棉球肉芽腫民性炎癥及免疫性炎癥佐劑關節炎。其作用機理與抑制前列腺素等各種致炎介質的合成、釋放，穩定溶酶體膜，抑制單核巨噬細胞系統吞噬功能有關。
技術內容本發明為了更好地開發出一些治療急性炎癥和以肉芽組織增生為主的急慢性炎癥的藥物，對一些中藥提取物進行了研究，篩選了一些具有治療效果好，安全、無明顯副作用等特點的藥物。
本發明的技術方案如下具有抗炎作用的藥物組合物包括貫葉連翹提取物和賴氨酸鹽酸鹽，其成分和重量含量如下貫葉連翹提取物 50-80％賴氨酸鹽酸鹽 20-50％以上所述的貫葉連翹提取物含金絲桃素2-5％，其提取方法可以采用50℃左右的熱水浸泡2h后，加入0.5％NaOH，用75％甲醇在0.05Mpa下78℃提取3-5次，每次1.5h，溶媒量為5倍，在80℃條件下濃縮干燥；也可以采用80％乙醇為溶劑，撮出貫葉連翹中的蒽衍生物，再用吸附樹脂，結合硅膠層析法把金絲桃素分離出來，得到含量為4.26％的金絲桃素產品；有的文獻介紹用95％乙醇作為溶劑來提取金絲桃甙，濃縮時加入少量(NH4)2SO4，在真空度為34～8kPa的條件下濃縮，采用噴霧干燥的方法得到，也可以用文獻介紹的其它方法提取得到。
所述的藥物組合物中賴氨酸鹽酸鹽含量為95％以上。
所述的藥物組合物做成的制劑包括片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、合劑、糖漿劑。
本發明的藥物組合物的生產方法如下1、片劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽，與賦形劑制成顆粒干燥，加入崩解劑、潤滑劑，壓片，或直接包裝，或包糖衣，或包薄膜衣即得到產品。
以上片劑所述的賦形劑為淀粉及其衍生物、糊精、磷酸氫鈣等；所述的崩解劑為羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素等；所述的潤滑劑為硬脂酸鎂等；所述的包糖衣材料為蔗糖、滑石粉、明膠、色素、川蠟等；所述的薄膜包衣材料為胃溶型水、醇包衣材料等。其中賦形劑、崩解劑、潤滑劑、包衣材料用量的重量含量分別為5～75％、0.5～20％、0.5～2.0％、2～45％。
2、膠囊劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽加入賦形劑，和崩解劑并使之干燥，然后裝入膠囊中，得到產品。
以上制備膠囊所述的賦形劑為淀粉及其衍生物、磷酸氫鈣、硬脂酸鎂、微分硅膠等。重量20～80％。
3、丸劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽加入賦形劑，制丸。①制成濃縮丸；②加入賦形劑重量10～100％、蜜糖，制成水蜜丸、大蜜丸、濃縮丸。
4、顆粒劑的生產方法在上述生產得到的濃縮液中加入賦形劑，并制成顆粒，使之干燥，得到產品。
加入賦形劑的成分和含量蔗糖50～95％、乳糖50～90％、糊精50～70％。
5、合劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽與矯味劑、防腐劑溶液混合均勻，即得到產品。
加入的矯味劑及其含量蔗糖(或蜜糖)10～60％、防腐劑山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。
6、糖漿劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽與蔗糖、防腐劑溶液混合均勻，即得到產品。
加入的蔗糖量為60～70％、防腐劑山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。
本發明藥物組合物的抗炎作用機理以及其的突出實質性特點和顯著的進步為貫葉連翹為藤黃科金絲桃屬(Hyprzeum L)植物貫葉連翹(Hypericum perforatumLinn，EHPL)的全草，它主要被用于抗抑郁、收斂止血、治吐血、外傷出血、腫毒及止痛等癥。近年來國外的研究發現，提取物中金絲桃素是貫葉連翹中的主要有效成分，可以治療甲型肝炎、乙型肝炎、風濕骨痛等。有的文獻介紹，金絲桃素還是一種有前途的內源性光敏劑，可應用于腫瘤的光化學診斷與治療，具有顯著的抗DNA、RNA病毒的作用。
賴氨酸鹽酸鹽為L-賴氨酸，別名L-己氨酸、L-松氨酸、L-2，6-二氨基己酸的鹽酸鹽，外觀為白色或近白色、可自由流動的結晶性粉末，無肉眼可見雜質，賴氨酸鹽酸鹽通常較穩定，高溫下易結塊，相對濕度60％以下穩定，60％以上則生成二水合物，堿性條件及直接在還原糖存在下加熱則分解，易溶于水，水溶液呈中性至微酸性，與磷酸、鹽酸、氫氧化鈉、離子交換樹脂等一起加熱，能起到外消旋作用。
本發明人還經過檢索，了解貫葉連翹國內外的研究和治療疾病的進展情況，并檢索到有關貫葉連翹的公開文獻有以下一些1、“國產貫葉連翹化學成分的研究”，殷志琦葉文才，(中國藥科大學)《中國藥科大學學報》。2002，33(4)文摘對我國貴州產貫葉連翹的化學成分進行了較系統的化學研究。利用各種色譜技術進行分離純化，經理化常數和波譜分析等進行結構鑒定。分離得到8個化合物槲皮素(quercetin，I)，皮苷(quercitrin，II)，山萘酚(kaempferol，III)，1，7-二羥基山酮(1，7-dihydroxyxanthone，IV)，kielcorin(5-hydroxymethyl-6-guaiacyl-2，33’，2’，4’-methoxy-xanthone-1，4-dioxane，V)，大黃素(emodin，VI)，2，5-二甲基-7-羥基色原酮(2，5-dimethyl-7-hydroxychromone，VII)，香草酸(vanillic acid，VIII)。結論化合物IV，VII和VII為首次從貫葉連翹中分離得到。2、“貫葉連翹提取物抗抑郁作用研究”作者，徐靜、蔡爽等(沈陽藥科大學、中國醫科大學附屬第一臨床醫院)，《中藥藥理與臨床》。2002，18(5)，文摘目的研究貫葉連翹提取物對小鼠的抑郁作用。方法選取了強迫小鼠游泳實驗，小鼠尾懸吊應激實驗，拮抗利血平所致的抑制癥狀等實驗指標。結果貫葉連翹提取物150mg/kg，300mg/kg顯著縮短迫游泳小鼠及尾懸吊小鼠的不動時間；顯著拮抗利血平所致的體溫下降作用和小鼠眼瞼下垂作用。結論貫葉連翹提取物具有一定的抗抑郁作用。3、“貫葉連翹中的新抗真菌黃酮苷”，作者，盧艷花張臻等(南京師范大學、南京大學)《植物學報》。2002，44(6)。文摘從貫葉連翹(Hypericum perforatum L.)地上部分的80％乙醇提取物中分離得到1個新的黃酮苷和6個已知黃酮類化合物。采用紅外光譜，紫外光譜，質譜和核磁共振光譜等波譜技術測得新黃酮苷的結構為6″-O-乙酰基槲皮素-3-O-β-D—阿洛糖苷(1，6″-O-acetyl quercetin3-O-β-D-alloside)，6個已知化合物分別被鑒定為槲皮苷(quercitrin)，金絲桃苷(hyperoside)，扁蓄苷(avicularin)，蘆丁(rutin)，槲皮素(quercetin)和山萘酚(kaemfero10。體外抗真菌活性實驗表明，新黃酮苷(1)，槲皮苷和槲皮素對植物病原菌Helminthosporium sativum Pamel King et Bakke具有一定的抑制作用，三者的最小抑制濃度(MIC)分別為25，50和50μg/mL。另外，1和槲皮苷對禾赤色鐮孢霉(Fusarium graminearum Schw.)的生長也有抑制作用(MIC值均為100μg/mL)。4、“貫葉連翹活性成分研究新進展”，李宏、姜懷春等(武漢大學、重慶商學院)《中草藥》。2001，32(7)。文摘介紹了貫葉連翹的活性成分，抗抑郁、抗腫瘤、抗病毒等藥理作用和副作用的研究新進展。5、“貫葉連翹的研究進展與可持續發展對策”，李會寧王存蓮(漢中師范學院)《漢中師范學院學報自科版》。2000，18(1)文摘貫葉連翹除作為傳統的中藥材入藥外，它的活性成分在治療抑郁癥，肝炎和艾滋病以及抗癌等方面具有重要的利用前景而被廣泛關注。本文綜述了貫葉連翹的生藥顯微鑒定特征，有效成分的研究，藥理和臨床試驗等方面的研究進展。同時探討了可持續發展的對策。6、“貫葉連翹的生藥學研究”，雷國蓮王繼濤(陜西中醫學院)《陜西中醫學院學報》。1999，22(6)。文摘為尋找和研究新而有效，無毒，安全可靠，非麻醉性的特殊性鎮痛藥，作者對秦嶺地區資料十分豐富，且富含金絲桃甙的植物貫葉連翹首次作了為系統的生藥學研究，為該藥的開發與利用提供可靠的鑒定和研究資料。7、“金絲桃素的研究進展”，梁巧麗高宏成(北京大學)，《中草藥》。1999，30(9)。文摘綜述金絲桃素在抗抑郁，抗病毒，對癌癥的光化學治療，免疫等方面的最新研究成果，為開發新藥提供參考。
賴氨酸極其衍生物單獨治療疾病在中國科技期刊和在中國專利中有以下一些公開的文獻題名賴氨酸茶堿治療支氣管哮喘及喘息性支氣管炎的臨床觀察刊名臨床內科雜志。1995，12(4)文摘作者采用雙盲法對照研究口服賴氨酸茶堿和氨茶堿治療支氣管哮喘及喘息性支氣管炎的療效及副作用，結果表明賴氨酸茶堿平喘、止咳及改善小氣道痙攣作用與氨茶堿相似，且副作用比氨茶減小，是一種較好的支氣管擴張藥；題名芐達賴氨酸滴眼液對實驗性白內障的治療作用觀察刊名眼科新進展。1997，17(3)；題名L-賴氨酸對大鼠腦損傷的作用刊名青島大學醫學院學報。2001，37(4)。文摘①目的研究L-賴氨酸對大鼠閉合性腦損傷的作用。②方法采用落體法致大鼠閉合性腦損傷，傷后立刻一次性腹腔注射L-賴氨酸，觀察L-賴氨酸對腦損傷大鼠腦水腫、病死率的影響；采用光鏡下特定區域壞死神經元計數方法，觀察L-賴氨酸對皮質及海馬CA-1神經元損害的作用。③結果L-賴氨酸組(621.5mg/kg及310.8mg/kg)與對照組(NS組)比較，能顯著減少相關腦區變性、壞死神經元的數量(H＝10.35，13.84，t＝2.16～9.25，P＜0.05，0.01)，顯著減輕腦水腫(F＝3.52，q＝4.04～11.37，P＜0.01)，同時621.5mg/kg L-賴氨酸能顯著降低腦損傷后大鼠的病死率(P＝0.009)。④結論L-賴氨酸對腦損傷有一定的保護作用。4、中國專利<申請號>01111316<公告號>1365665<發明名稱>用于與細胞外基質退化相關疾病的含有抗壞血酸鹽和賴氨酸的藥物組合物<文摘>公開了一種預防和治療與細胞外基質降解有關的疾病或病態如包括但不限于退化性疾病，特別是動脈粥樣硬化、癌癥、感染或其他炎性疾病的組合物，包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸鹽及其衍生物和合成的類似物和維生素、前維生素和微量元素。5、中國專利<申請號>96116212<發明名稱>一種治療腦血管病的藥物<文摘>本發明公開了一種抗腦血管病新藥——蘇腦片，主要由丹皮酚、川芎嗪、賴氨酸、珍珠粉、維生素E等組成，它能改善腦梗塞后腦血流量，治療各種原因引起的缺血性腦血管病以及顱腦外傷后出現的意識障礙等各種綜合癥。6、中國專利<申請號>95109783<授權公告日>2000年05月03日<發明名稱>一種治療顱腦外傷及其綜合癥的藥物組合物，本發明是一種治療顱腦外傷及其綜合癥的藥物組合物，其主要成分是鹽酸賴氨酸、維生素B6、維生素B1和葡萄糖酸鈣。6、中國專利<申請號>93103380<發明名稱>L-賴氨酸鹽酸在制備止血藥物中的應用<文摘>本發明公開了一種止血新藥(健身素顆粒劑)，這種止血新藥 的主要成分是L-賴氨酸鹽，用這種止血藥物能治療人體某些器官出血，如子宮異常出血、手術后異常出血，咯血，尿血等，從而開拓了L-賴氨酸的新用途。7、中國專利<申請號>93102915<發明名稱>L-賴氨酸鹽酸鹽用于制備治療顱腦外傷藥物的應用<文摘>本發明提供了L-賴氨酸及其鹽類的新用途，即用L-賴氨酸治療顱腦損傷的藥物，它對治療顱腦受機械性損傷、腦血管病、大腦發育不全、更年期綜合癥的有效率達到9 0％以上，進一步拓寬了L-賴氨酸的新用途。
其中中國專利<申請號>95109783、93103380、93102915是本發明人(原單位廣西南寧邕江制藥廠)的發明創造。
從上述文獻了解到，貫葉連翹在治療某些疾病方面得到了證明，尤其是抗抑郁作用的研究較多，但未公開其使用方法、也未見有貫葉連翹提取物與其它藥物配成組合物的公開文獻報道；賴氨酸在治療顱腦損傷、治療人體某些器官出血、改善腦梗塞后腦血流量等方面也有了較多研究，并已經形成藥物產品在市場上銷售，但也未發現賴氨酸在抗炎方面的藥用報道，也未見將貫葉連翹和賴氨酸組合成藥物的公開文獻報道。
本發明人在對貫葉連翹和賴氨酸組合成藥物進行研究的過程中對其藥理學、藥效學和臨床試驗，發現該藥物組合物對二甲苯所致小鼠耳腫脹、棉球腋下埋藏誘發肉芽組織增生均有不同程度的抑制作用，但對急性炎癥有非常顯著性意義，抑菌作用試驗結果提示該藥對一些病菌如金黃色葡萄球菌有抑制作用；對急性炎癥、慢性增生性炎癥作用呈正相關。認為的作用機理可能與其抗炎、抑菌、抗菌作用及抗感染作用有關。
本發明的突出的實質性特點和顯著的進步為1、安全性從公開文獻中我們已經了解到，貫葉連翹提取物的毒理工作已在小鼠，大鼠和犬等動物身上進行了長達26星期的試驗。最大試驗劑量為5000mg/kg，最初不耐受劑量為每日900mg/kg。LD50大于最大劑量。所有試驗末顯示有基因毒和誘變作用。在13個男性正常人每日服用900，1800和3600mg貫葉連翅提取物試驗中，每日900mg是大多數臨床試驗采用的安全有效劑量。在我們進行的臨床試驗中，也證明了人服用貫葉連翹提取物的安全性。
2、鎮痛和消炎作用的有效性本發明的貫葉連翹提取物與賴氨酸鹽酸鹽組合后有明顯的鎮痛作用，并且部分減輕甲醛引起的水腫癥狀。而單獨使用貫葉連翹提取物或單獨使用賴氨酸鹽酸鹽達不到復合后的效果。
3、對人體的其它輔助治療效果與賴氨酸鹽酸鹽復配后，顯示出該藥物組合物不僅具有鎮痛和消炎作用，而且還有抗抑郁、抗腫瘤的效果，還可以補充人體所缺乏的部分維生素。
4、本發明對急性炎癥和以肉芽組織增生為主的慢性炎癥，均有顯著抑制作用，還能顯著抑制小鼠腹腔毛細血管通透性。
具體實施例方式
實施例1取貫葉連翹提取物500g，賴氨酸鹽酸鹽500g(其中貫葉連翹提取物中金絲桃素含量2-5％，賴氨酸鹽酸鹽含量為95％以上)，與5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氫鈣混合，制成顆粒，干燥，加入0.5～20％羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、潤滑劑0.5～2.0％硬脂酸鎂，壓片，或直接包裝，或包糖衣，或包薄膜衣即得到產品。
實施例2取貫葉連翹提取物750g，賴氨酸鹽酸鹽250g，與5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氫鈣混合，制成顆粒，干燥，加入0.5～20％羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、潤滑劑0.5～2.0％硬脂酸鎂，壓片，或直接包裝，或包糖衣，或包薄膜衣即得到產品。
實施例3取貫葉連翹提取物800g，賴氨酸鹽酸鹽200g，與5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氫鈣制成顆粒，干燥，加入助流劑微分硅膠，裝膠囊，即得到產品。
實施例4取貫葉連翹提取物800g，賴氨酸鹽酸鹽200g，與5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氫鈣制成顆粒，干燥，加入助流劑微分硅膠，裝膠囊，即得到產品。
實施例5取貫葉連翹提取物700g，賴氨酸鹽酸鹽300g，與賦形劑蔗糖100g、乳糖100g、糊精300g制成濃縮丸、水蜜丸、大蜜丸、即得到產品。
實施例6取貫葉連翹提取物650g，賴氨酸鹽酸鹽350g，30g，與賦形劑蔗糖200g、乳糖100g、糊精200g制成濃縮丸、水蜜丸、大蜜丸、即得到產品。
實施例7取貫葉連翹提取物800g，維生素B1 40g，維生素B2 60g，維生素B6 100g，加入蔗糖500g、糊精500g，制成顆粒，干燥，得到產品。
實施例8取貫葉連翹提取物750g，賴氨酸鹽酸鹽250g，與蔗糖10～55％、防腐劑山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％混合，制成合劑。
實施例9取貫葉連翹提取物650g，賴氨酸鹽酸鹽6350g，與蔗糖量為60～70％、防腐劑山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％合并，制成糖漿劑。
本發明有關臨床試驗、藥理、藥效學情況一、貫葉連翹提取物和維生素B復方的鎮痛試驗單位，北京大學醫學部神經病理研究室(國家藥物臨床試驗單位)試驗時間2002年9月-2003年1月摘要目的，了解貫葉連翹搖提取物和鹽酸賴氨酸復方的抗炎作用。方法，采用小鼠耳殼二甲苯性炎癥法、小鼠濾紙片誘發肉芽腫法和醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增高法。結果，賴金絲可以顯著抑制小鼠耳腫脹，抑制肉芽組織增生，降低腹腔毛細血管通透性。結論，賴金絲可以抑制急性炎癥，其作用機制可能與抑制毛細血管通透性有關；可以抑制肉芽腫組織增生。
關鍵詞貫葉連翹提取物；賴氨酸；賴金絲(貫葉連翹提取物和賴氨酸的組合物)；抗炎貫葉連翹(Hypericum Perforatum L，HPL)又名圣約翰草(St.John’swort)，為多年生連翹屬植物，有效成份有金絲桃素(hypericin)貫葉金絲桃素(hyperforin)偽金絲桃素(pseudohrpericin)其提取物在歐洲(尤其是德國)廣泛用于輕中度抑郁癥的治療，近年來對其抗病毒、抗菌和抗炎鎮痛作用的研究逐漸增多。賴氨酸是一種必需氨基酸，具有抗單純皰疹病毒和帶狀皰疹病毒作用。另外，賴氨酸參與能量代謝，補充一定量賴氨酸可以改善機休的營養狀態。本實驗把鹽酸賴氨酸和貫葉連翹提取物按正交設計原理以不同比例配伍，進行抗單純皰疹病毒、帶狀皰疹病毒和鎮痛試驗研究，結果顯示劑量相同時貫葉連翹提取物和賴氨酸的組合物(賴金絲)的抗病毒及鎮痛效果最理想，本研究是對賴金絲的抗炎作用進行研究。
1材料1.1試驗藥物與試劑貫葉連翹提取物(EHPL，廣西南寧邕江藥業有限公司提供，批號1605796，金絲桃素含量30‰，棕色瓶避光保存)鹽酸賴氨酸(lysine hydroch loride，廣西南寧邕江藥業有限公司生產)，吲哚美辛(indomethacin，石家莊制藥集團歐意藥業有限公司生產)，羧甲基纖維素鈉(CMC，中國醫藥上海化學試劑站生產)，阿司匹林(aspirin，山東新華制藥股份有限公司生產)，醋酸(acetic acid，北京化工廠生產)。
貫葉連翹提取物和鹽酸賴氨酸按1∶1；1∶2；2∶1等幾種形式混合后，用0.25％CMC制成所需濃度的混懸液，吲哚美辛及阿司匹林均研磨成細粉后用0.25％CMC制成混懸液。對照組用等容積0.25％CMC。
1.2試驗動物ICR小鼠，雌雄各半，18～22g，自由食水，由北京大學醫學部試驗動物中心提供，合格證號SCXKII-0004。
1.3試驗儀器打孔器，AB104-N型電子天平(上海Mettler-Toledo儀器公司)，手術器械，HH.BII420型烘干箱(天津市中環科技開發公司)，注射器，TU-1800型721分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)。
2試驗方法試驗分組和給藥 小鼠50只隨機分為5組，每組10只，分別為賴金絲500mg/kg、250mg/kg、125mg/kg吲哚美辛10mg/kg或阿司匹林300mg/kg，對照組給予等容量的0.25％CMC(ig，吲哚美辛組ip給藥)，每天一次，連續給藥7天。
二甲苯性炎癥 連續給藥7天，末次給藥后一小時，將30ul二甲苯涂于小鼠右耳，兩側涂勻，左耳作為對照。兩小時后處死動物，將左右兩耳剪下，用直徑6mm打孔器在兩耳相同部位打孔，將取下的耳片在天平上稱重，以左右兩耳片重量之差為腫脹程度指標(4)。
濾紙片誘發肉芽腫 小鼠用戊巴比妥鈉50mg/kg麻醉后，下腹部消毒，沿正中線剪開皮膚，分離皮下組織，于左右腹股溝皮下各埋入重量約2.7～2.8mg的滅菌濾紙片(直徑為6mm)，縫合皮膚，術后12h開始給藥，連續7天，末次給藥后12h處死動物，剝出周圍已包裹肉芽組織的濾紙片，在60℃烘箱干燥24h后稱量，減去原有紙片的重量，即為肉芽組織凈重。以mg(肉芽腫重)/10g(體重)，作為肉芽腫增殖指數。比較組間差異并計算抑制率。
對腹腔毛細血管通透性的影響連續給藥7天，每天一次，于末次給藥后1h，尾靜脈注射1％Evan’s藍0.1ml/10g，隨即ip 0.6％醋酸，0.1ml/10g，20min后處死動物，用6ml NS分3次沖洗腹腔，收集沖洗液置于預先加入0.1ml 0.1N NaOH的試管中，用NS補充至10ml，混勻靜置2h，取上清液于725分光光度計590nm測OD值，以OD值表示Evan’s藍含時。
統計方法 所有結果均以x±s表示，用Excel軟件進行雙尾t檢驗，組間對照，p＜0.05為顯著性差異。
3.試驗結果3.1賴金絲對小鼠耳殼二甲苯致炎的影響與CMC組相比，賴金絲高(500mg/km)、中(250mg/kg)、低(125mg/kg)劑量對小鼠二甲苯性耳炎癥均有顯著抑制作用，中劑量(250mg/kg)組與對照組相比抑制率(50.69％)最高，但不及ip吲哚美辛組(75.35％)的抗炎效果。結果見表1。
表1 賴金絲對小鼠耳殼二甲苯性炎癥的影響(x±s，n＝10)組別 劑量 腫脹度(mg)抑制率(％)(mg/kg，ig)CMC 等容量 10.18±3.27吲哚美辛10(ip) 2..51±3.32*** 75.35***1256.49±1.81** 36.25**賴金絲 2505.02±2.50*** 50.69***5005.32±3.25** 47.74**與對照組相比**p＜0.01；***p＜0.001。
3.2賴金絲對小鼠紙片透發肉芽腫的影響與CMC組相比，賴金絲高(500mg/kg)、中(250mg/kg)、低(125mg/kg)劑量，對小鼠紙片誘發的肉芽腫均有顯著抑制作用，各組之間無統計學差異，抑制效果較阿司匹林組為佳。結果見表2。
3.3賴金絲對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響與CMC組相比，賴金絲高(500mg/kg)、中(250mg/kg)劑量，能顯著降低小鼠腹腔毛細血管通透性，減少Evan’s藍滲出量，但抑制率低于阿司匹林。結果見表3。
表2 賴金絲對小鼠紙片誘發肉芽腫的影響(x±s，n＝10)組別 劑量 肉芽腫增殖指數抑制率(％)(mg/kg，ig) (mg/10g)CMC 等容量15.65±4.38阿司匹林 300 11.56±3.04* 26.14*125 11.09±4.34* 28.64*賴金絲250 11.14±4.25* 28.81*500 11.17±2.89* 29.22*與對照組相比*p＜0.05。
表3 賴金絲對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(x±s，n＝10)組別 劑量 OD 抑制率(％)(mg/kg，ig)CMC 等容量 0.134±0.041阿司匹林 300 0.073±0.018** 45.49**125 0.101±0.030 24.18賴金絲250 0.094±0.036* 29.97*500 0.096±0.033* 28.20*與對照組相比*p＜0.05；**p＜0.01。
4.討論貫葉連翹提取物(EHPL)的抗抑郁作用已為人們所公認，與經典抗抑郁藥相比副作用較少，作用溫和，因此許多國家把其作為非處方藥，甚至作為保健藥使用。但近年來其抗病毒、鎮痛和抗炎作用也日益引起人們關注。
實驗證明EHPL的冷凍干燥制品能抑制炎癥和白細胞浸潤。EHPL可以顯著抑制角叉菜膠引起的大鼠足腫脹(12)。EHPL的抗炎作用，可能與其中的貫葉金絲桃素抑制5-脂氧化酶和COX-1(環氧化酶1)的活性，進而抑制了炎癥介質PGE2的生成。
本實驗室的前期工作已證實貫葉連翹提取物(含金絲桃素30‰)和鹽酸賴氨酸配伍，具有理想的鎮痛和抗皰疹病毒作用。鑒于患者單純皰疹和帶狀皰疹發作的主要癥狀是疼痛和急性炎癥，所以本研究設計了幾種炎癥實驗，觀察賴金絲的抗炎效果。結果表明，賴金絲對以血漿蛋白滲出為主的急性炎癥和以肉芽組織增生為主的慢性炎癥，均有顯著抑制作用，還能顯著抑制小鼠腹腔毛細血管通透性。
初步印象，賴金絲具有一定鎮痛抗炎作用，并具有抑制單純皰疹病毒和帶狀皰疹病毒效果，兩種成份均無明顯副作用，有可能會成為一種治療皰疹病毒感染的理想藥物。
二、藥理研究北京大學醫學部藥理學系和神經病理研究室于2002年9月-2003年1月還對本發明的藥物組合物進行了藥理研究，藥理研究共做了以下幾個項目1、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對小鼠神經行為的影響，種屬為ICR，雌雄各半，共60只，觀察灌胃給藥是否對小鼠中樞神經系統有抑制作用，實驗結果表明高劑量(2000mg/kg)和中劑量(1000mg/kg)對小鼠一般神經精神行為無影響。
2、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對小鼠自主活動的影響，種屬為ICR，雌雄各半，共60只，觀察灌胃給藥是否對小鼠中樞神經系統有抑制作用，實驗結果表明高劑量(2000mg/kg)和中劑量(1000mg/kg)對小鼠有明顯鎮靜作用。
3、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對小鼠腸蠕動的影響，種屬為ICR，雌雄各半，共60只，用CMC比較，觀察灌胃給藥是否對小鼠腸道功能有影響，實驗結果表明高劑量(2000mg/kg)和中劑量(1000mg/kg)對小鼠胃腸沒有明顯影響。
4、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物對大鼠LD50，種屬為SD大鼠，雌雄各半，共50只，分成3組，對照組用0.25％的CMC，觀察灌胃給藥后的死亡率，實驗結果表明最大劑量(14000mg/kg)雌性組死亡90％，雄性20％，和中劑量(7072mg/kg)死亡率為0。
5、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對小鼠抗電驚厥的影響，種屬為ICR，雌雄各半，共60只，用CMC比較，用110V交流電3秒致電驚厥，觀察灌胃給藥是否對小鼠抗最大電驚厥有無明顯影響，實驗結果表明高劑量(2000mg/kg)和中劑量(1000mg/kg)對小鼠抗最大電驚厥無。
6、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對家貓心率和心電圖的影響，種屬為家貓，雌雄不拘，共34只，對照組用0.25％的CMC，觀察灌胃給藥對家貓心率和心電圖的變化，實驗結果表明高劑量(600mg/kg)和中劑量(300mg/kg)對家貓心率和心電圖沒有明顯變化。
7、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對家貓呼吸的影響，種屬為家貓，雌雄不拘，共34只，對照組用0.25％的CMC，觀察灌胃給藥對家貓呼吸頻率和呼吸幅度的變化，實驗結果表明高劑量(600mg/kg)和中劑量(300mg/kg)對家貓心率和心電圖沒有明顯變化。
8、貫葉連翹提取物、鹽酸賴氨酸組合物使用對家貓血壓的影響，種屬為家貓，雌雄不拘，共34只，對照組用0.25％的CMC，觀察灌胃給藥對家貓呼吸頻率和呼吸幅度的變化，實驗結果表明，觀察240分鐘，高劑量(600mg/kg)和中劑量(300mg/kg)對家貓血壓沒有明顯變化。
權利要求
1.一種具有抗炎作用的藥物組合物藥物組合物，其特征在于它包括貫葉連翹提取物和賴氨酸鹽酸鹽，其成分和重量含量如下貫葉連翹提取物50-80％賴氨酸鹽酸鹽 20-50％
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于貫葉連翹提取物的金絲桃含量為2-5％；賴氨酸鹽酸鹽含量為95％以上。
3.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物可以做成片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、合劑、糖漿劑。
4.一種具有抗炎作用的藥物組合物的生產方法，其特征在于該藥物組合物做成片劑的生產方法是將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽，與賦形劑制成顆粒干燥，加入崩解劑、潤滑劑，壓片，或直接包裝，或包糖衣，或包薄膜衣即得到產品；所述的賦形劑為淀粉及其衍生物、糊精、磷酸氫鈣等；所述的崩解劑為羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素等；所述的潤滑劑為硬脂酸鎂等；所述的包糖衣材料為蔗糖、滑石粉、明膠、色素、川蠟等；所述的薄膜包衣材料為胃溶型水、醇包衣材料等。其中賦形劑、崩解劑、潤滑劑、包衣材料用量的重量含量分別為5～75％、0.5～20％、0.5～2.0％、2～45％。
5.一種具有抗炎作用的藥物組合物的生產方法，其特征在于該藥物組合物做成膠囊劑的生產方法是將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽加入賦形劑，和崩解劑并使之干燥，然后裝入膠囊中，得到產品；所述的制備膠囊所述的賦形劑為淀粉及其衍生物、磷酸氫鈣、硬脂酸鎂、微分硅膠等。重量20～80％。
6.一種具有抗炎作用的藥物組合物的生產方法，其特征在于該藥物組合物做成丸劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽加入賦形劑，制丸。①制成濃縮丸；②加入賦形劑重量10～100％、蜜糖，制成水蜜丸、大蜜丸、濃縮丸。
7.一種具有抗炎作用的藥物組合物的生產方法，其特征在于該藥物組合物做成顆粒劑的生產方法在上述生產得到的濃縮液中加入賦形劑，并制成顆粒，使之干燥，得到產品；所述的顆粒劑的賦形劑的成分和含量蔗糖50～95％、乳糖50～90％、糊精50～70％。
8.一種具有抗炎作用的藥物組合物的生產方法，其特征在于該藥物組合物做成合劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽與矯味劑、防腐劑溶液混合均勻，即得到產品。所述的合劑的矯味劑及其含量蔗糖(或蜜糖)10～60％、防腐劑山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。
9.一種具有抗炎作用的藥物組合物的生產方法，其特征在于該藥物組合物做成糖漿劑的生產方法將貫葉連翹提取物、賴氨酸鹽酸鹽與蔗糖、防腐劑溶液混合均勻，即得到產品；所述的蔗糖加入量為60～70％、防腐劑山梨酸鉀0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。
全文摘要
本發明涉及一種具有治療急性炎癥和以肉芽組織增生為主的慢性炎癥的藥物組合物及其生產方法，該藥物組合物包括50－80％的貫葉連翹提取物和20－50％和賴氨酸鹽酸鹽，它對急性炎癥和以肉芽組織增生為主的慢性炎癥，均有顯著抑制作用，還能顯著抑制小鼠腹腔毛細血管通透性，并具有抑制單純皰疹病毒和帶狀皰疹病毒效果，無明顯副作用，是一種抗炎和治療皰疹病毒感染的理想藥物。
文檔編號A61P29/00GK1452979SQ0312800
公開日2003年11月5日 申請日期2003年5月17日 優先權日2003年5月17日
發明者庫寶善, 羅潤昌, 麻叔林, 湯萍英, 孫宜 申請人:廣西化工生物技術研究所