專利名稱：新的肽衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及凝血酶的新的竟爭性抑制劑，它們的合成，含有這些化合物作為活性成分的藥用組合物，以及應用這些化合物作為抗凝血劑以預防和治療血栓栓塞疾病，如靜脈血栓形成，肺栓塞，動脈血栓，特別如心肌梗塞和腦血栓，通常的過凝固狀態和局部凝固狀態，例如，成血管細胞和冠狀旁通手術后的狀態。
本發明還涉及這些化合物用作合成絲氨酸蛋白酶抑制劑起始物的新用途。本發明進一步涉及絲氨酸蛋白酶中的新的結構片斷。
血液凝固是包括在止血(即防止從損壞血管中失血)和血栓形成(即通過血塊使血管病理性的閉塞)中的關鍵過程。血液凝固是一系列復雜酶反應的結果，其中之一的最后步驟是前凝血酶酶原轉化成活性的凝血酶。
凝血酶在血液凝固中扮演重要角色。它激活血小板，它把血纖維蛋白原轉化成血纖維蛋白單體，該單體自發聚合成絲，且它激活ⅩⅢ因子，該因子依次聯接不溶的血纖維單體和聚合體，凝血酶進一步激活在正反饋反應中的Ⅴ因子和Ⅷ因子。因此期望凝血酶抑制劑通過抑制血小板，血纖維蛋白單體的形成和血纖維蛋白的固定成為有效的抗凝血劑。通過抑制正反饋機制，期望可選擇地早期抑制導致血液凝固和血栓形成的鏈過程。
Blomback等人在J.Clin，Lab.Invest 24，增刊107，59，(1969)中首先報導了基于環繞血纖維蛋白原Aα鏈分裂點的氨基酸序列的凝血酶抑制劑。他提出Phe-Val-Avg序列(P9-P2-P1，本文中參見P3-P2-P1序列)是最好的抑制劑。
在US 4，346，078(Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R T，優先權日1980，10，7)和S.Bajusz等人的Peptides 1983，Walterde Gruyter δ Co，Berlin，pp 643-647中，描述了凝血酶抑制劑H-DPhe-Pro-Agm，一種在P1-位在氨基烷基胍的二肽基衍生物。
S.Bajusz等人還在J.Med.Chem.1990，33，1729-1735中和在Ep-A2-0，185，390(Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R T)(優先權日84，12，21)中報道了用精氨酸醛取代鯡精胺提供了一種具有非常高效力的凝血酶抑制劑。
據推斷這些凝血酶抑制劑活性增加的原因，可能是由于醛與Ser-OH在酶活性位點形成半縮醛的相互作用。可以想到的，在二肽衍生物H-DPhe-Pro-Agm中，由于它不具有在P1-位帶有羰基的氨基酸衍生物，所以不具有相同類型的相互作用。
在凝血酶抑制劑領域的其它工作中，基于用親電性酮代替在P1-位醛的絲氨酸蛋白酶的抑制劑包括在下述E.N.Shaw等人(研究公司)US-4，318，904(優先權日80.4.25)描述了氯-甲基酮類的肽，例如H-Dphe-Pro-Arg-CH2CL。
M.Szelke和D.M.Jones在EP-A1-0，118，280(優先權日83.3.4)中描述了衍生于血纖維蛋白源A2鏈的P3-P2′戊肽序例的化合物，其中裂開的P1-P1′肽鍵被-CO-CH2-部分取代，形成相應肽的酮電子等排物。
M.Kolb等人(Merrell-Dow)Ep-A2-0，195，212(優先權日85.2.4)描述了α酮肽基酯和酰胺。
B.Imperiali和R.H.Abeles，Biochemistry 1986.25.3760描述了肽基氟烷基酮。
D.Schirlin等人(Merrell-Dow)EP-A1-0，362，002(優先權日88.9.1)描述了氟烷基酰胺酮。
P.Bey等人，(Merrell-Dow)EP-A2-0，364，344(優先權日88.9.1)描述了α，β，δ-三酮類化合物。
Ueda等人，Biochem.j.1990，265，539還描述了肽基氟烷基酮。
A.D Kettner等人(Du Pont)EP-A2-0，293，881(優先權日87.6.5.和88.4.6.)曾經報道了基于精氨酸的C-末端硼酸衍生物和它的異硫脲鎓鹽類似物的凝血酶抑制劑。
本發明的目的在于提供對目標酶具有競爭性抑制活性，即，引起可逆的抑制作用的新的和有效力的凝血酶抑制劑。進一步的目的是獲得有口服生物效果和在其它絲氨酸蛋白酶存在下選擇性抑制凝血酶的抑制劑。本發明更進一步的目的是在治療劑量下的穩定性，特效性，和低毒性。
化合物本發明化合物涉及描述修飾的亞-位點P9，P2和P1的人體血纖蛋原Aα鏈的肽序列P9H-Ala-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-P2P1↓P1′P2′P3′-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg-Gly-Pro-Arg-Val-
根據本發明已經發現通式Ⅰ的化合物本身或生理適合鹽的形式，包括立體異構體，是有效的凝血酶抑制劑。
其中A表示亞甲基，或A表示亞乙基且所得5-元環可以帶或可以不帶有一或二個氟原子，在4位的羥基或橋氧基，或可以是或可以不是不飽和的，或A表示-CH2-O-，-CH2-S-，-CH2-SO-，其中雜原子官能團在4位，或A表示n-亞丙基且所得的6-元環可以或不可以在5位帶有一個氟原子，羥基或橋氧基，或在4或5位之一帶有兩個氟原子或在4位和5位是不飽和的，或在4位帶有1到4碳原子的烷基基團，或A代表-CH2-O-CH2-，-CH2-S-CH2-，-CH2-SO-CH2-;
R1代表H，具有1到4個碳原子的烷基，具有2-3個碳原子的羥烷基或R11OOC-烷基-，其中烷基具有1到4個碳原子且R11是H或具有1到4個碳原子的烷基或具有2-3碳原子的亞烷基，其分子內鍵連于R1中羰基的α位，或R1表示R12OOC-1，4-苯基-CH2-，其中R12是H或具有1到4碳原子的烷基，或R1表示R13-NH-CO-烷基-，其中烷基具有1到4碳原子且可以用1到4碳原子的烷基在羰基α位取代且其中R13是H或具有1到4碳原子的烷基或-CH2COOR12其中R12如上述定義，或R1表示R12OOC-CH2-OOC-烷基，其中烷基具有1到4個碳原子且可以用1到4個碳原子的烷基在羰基的α位取代，且其中R12如上述定義，或R1表示CH3SO2-，或R1表示R12OCOCO-其中R12如上述定義，或R1表示-CH2PO(OR14)2，-CH2SO3H或-CH2-(5(1H)-四唑基)其中R14是，單獨的每次出現，H，甲基或乙基;
R2表示H或具有1到4碳原子的烷基或R21OOC-烷基，其中烷基具有1到4碳原子且可以在羰基的α位被取代，且α取代基是R22-(CH2)P-，其中P＝0-2且R22是甲基，苯基，OH，COOR21，且R21是H或具有1到4碳原子的烷基;
m是0，1或2，R3表示環己基且R4表示H，或
m是1且R3表示環己基或苯基和且R4與R1一起形成亞乙基橋，或m是1中R3和R4各自表示環己基或苯基基團，R5表示H或具有1到4碳原子的烷基n是2到6的整數;且B表示-N(R6)-C(NH)-NH2，其中R6是H或甲基基團，或B表示-S-C(NH)-NH2，或-C(NH)-NH2，除非另外具有指明，烷基表示直鏈或支鏈烷基，具有1到4碳原子的烷基基團是甲基，乙基，n-丙基，i-丙基，n-丁基，i-丁基，s-丁基和t-丁基。不飽和意指碳碳雙鍵，縮寫例示于本詳說明書的后面。
根據本發明優選的方面涉及式Ⅰ的化合物，其中R1表示R11OOC-烷基-，其中烷基具有1到4碳原子且R11是氫。在這些化合物中，其中A是亞乙基且R5是H或具有1到4碳原子的烷基，特別是那些R5是H的化合物是優選的。
在式Ⅰ化合物中，其中R3是環己基，m是1或2，特別的m是1且R4是H結構的化合物是另一個優選的亞類。
其它的優選的化合物組是其中A是n-亞丙基且所得6-元環可以在或可以不在4位帶有1到4個碳原子的烷基，和R5是H或具有1到4碳原子的烷基，特別是那些其中R5是H的化合物。
根據本發明另一優選的方面是n是3的化合物。
在α-氨基酸P2-位具有S-構型的式Ⅰ化合物是優選的化合物，在α-氨基酸P3位還具有R-構型的那些化合物是特別優選的化合物。
本發明的優選化合物是實施例序號 化合物1 H-(R)Cha-Pro-Agm2 Me-(R)Cha-Pro-Agm3 HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm4 HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm5iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm6 HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm7 HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm8 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a9 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b10 HOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a11 HOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b12 HOOC-(RorS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b13 HOOC-(R，S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm14 HOOC-(RorS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a15 HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm16 EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm17 (R，S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm18 HOOC-(RorS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b19 H-(R)Cha-Pro-Nag20nBu-(R)Cha-Pro-Nag21 HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag22 HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag23 EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag24nPrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag25tBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag26 HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag27 H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag28 HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag29 (HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag30 HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag
31 HOOC-CH2-(nBu)(R)Cha-Pro-Nag32 HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag33 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a34 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b35 EtOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag36 HOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a37 HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag38 HOOC-(R，S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Nag39 HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag40 HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag41 HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag42 EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag43 HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag44 EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag45 HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag46 MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag47 (R，S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag48 HOOC-(R，S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag49 MeOOC-(R，S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag50 HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag51 (HO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag52 EtO(HO)P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag53 (EtO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag54 HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Mag55 H-(R，S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm56 H-(R，S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-Agm57 HOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm58 HOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag59 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm60 HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R，S)Pic-Agm61 HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm62 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a63 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b64 HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
65 H-(R)Cha-Pic-Nag66 Me-(R)Cha-(R，S)Pic-Nag67 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag68 MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag69iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag70 HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/b71 HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-(R，S)Pic-Nag72 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/c73 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/d74 HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Nag75 HOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Mor-Agm76 HOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Mor-Nag77 H-(R)Cha-Aze-Nag78 HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag79 H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag80 HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag81 HOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Pic(4，5-dehydro)-Nag/b82 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag83 HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag84 HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag85 H-(R)Hoc-Pro-Nag86 HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag87 HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag88 HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag89 HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag90 HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(R，S)Me)-Nag91 H-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag92 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag93 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(6-(S)Me)-Nag
在這些化合物中，實例例序號為4，6，9，22，30，34，59，63，67，73，80和82的的化合物特別優選，且下述的化合物最優選30 HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag34 HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b67 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag在上述化合物表中，字母/a，/b，/c和/d意味著在表示“R或S”的碳原子上實質上是純的立體異構體。每個化合物立體異構體的鑒別可以參見本文的實驗部分。“R，S”表示立體異構體的混合物。
在本發明進一步的方面涉及將下式化合物
作為合成絲氨酸蛋白酶抑制劑，且特別是合成凝血酶抑制劑的起始物的新的用途。上式化合物可以如上述應用或兩者擇一的在胍基上具有在δ氮上的單保護基或在δ-氮上或γ，δ-氮上的雙保護基，優選的保護基如苯甲氧羰基。去甲胍基丁胺衍生物的保護通過現有技術中保護胍基化合物的已知方法進行。本文中該化合物命名為“去甲胍基丁胺”或“Nag”。除此之外，該化合物曾經在GB 1，599，324(Henkel，優先權日1977.2.5.)中，公開用作頭發漂白加速劑。可是下式的結構片斷
不曾在先公開用作藥用活性化合物的結構單元。
作為上述結構單元的“去甲胍基丁胺”片斷表現為絲氨酸蛋白酶抑制劑，且特別是有價值的凝血酶抑制劑。
醫療和制藥上的用途本發明進一步的方面涉及治療人體成動物有機體需要抑制凝血酶的癥狀。本發明化合物特別期望用于動物，包括人治療或預防在血液和組織中的血栓和過凝固狀態。其進一步地期望用于沒有凝固狀態信號時，不需要的過量凝血酶狀況。在治療和/和或預防疾病狀態時，本化合物具有用途，這些癥狀包括靜脈血栓形成和肺栓塞，動脈血栓，如心肌梗塞，不穩定絞痛，中風引起的血栓形成和外周動脈血栓。進一步的，本化合物期望用于預防動脈粥樣硬化癥如冠心病，腦動脈疾病和外周動脈疾病，進一步的，本化合物期望在血栓形成疾病中與血栓溶解物一起應用，特別是在心肌梗塞中。進一步的，本化合物期望用于預防血栓形成。經皮的轉移魯米那血管病(PTCA)和冠狀旁通手術后的再閉塞，進一步的，本化合物期望用于預防顯微外科后的再血栓形成，進一步的，本化合物期望用于人造器定和賁門瓣連接的抗血凝劑的處理。進一步的，本化合物期望用于在血透析和散布肌內凝血的抗血凝劑處理。
進一步期望的用途是沖洗用于患者體內的導管和醫療設備，并用作抗凝血劑在體外保存血液，血漿和其它血液制品。
藥用的制劑式Ⅰ的化合物通常通過口服，直腸，皮，鼻或腸胃外的途徑，以含有活性成份的自由堿或適于藥用無毒酸加成鹽藥用制劑的形式，在適于藥用的劑量形式下給藥，這些酸加成鹽例如，鹽酸鹽，溴酸鹽，乳酸鹽，乙酸鹽，檸檬酸鹽，P-甲苯磺酸鹽，三氟乙酸鹽和類似物。
通過現有技術的已知方法可以制備固體，半固體或液體配方的劑量形式。通常在配方中由0.1到99%重量的活性成分組成，更具體的活性成分占0.1到50%重量的配方將用于腸胃外給藥，且活性成分為0.2到75%重量的配方適于口服給藥。
在對人的治療處理中，本發明化合物每天適當的經口服給藥劑量大約為0.001-100mg/kg體重，且腸胃外給藥劑量為0.01-50mg/kg體重。
制備本發明進一步的目的是化合物的制備方式。式Ⅰ化合物的制備是通過N-末端保護的氨基酸或二肽或預先形成的N-末端烷基化保護的二肽與下式化合物連接H2N-(CH2)n-X其中n如式Ⅰ定義且X是未保護或保護的胍基或保護的氨基，或可變換成氨基的基團，其中氨基隨后可轉移成胍基。
通過下述的方法之一進行連接方法Ⅰ通過常規的肽連接方法，用保護或不保護氨基胍或在烷基鏈的末端帶有保護或掩蔽氨基的直鏈烷基胺制備N-末端保護的二肽的連接物，采用的常規的肽連接方法示于下式
其中R3，R4，R5，n，m和A如式Ⅰ定義，R6是H或烷基，W1是氨基保護基如叔丁氧羰基和苯甲氧羰基且X是-NH-C(NH)NH2，-NH-C(NH)NH-W2，-N(W2)-C(NH)NH-W2，-NH-C(NW2)NH-W2或-NHW2，其中W2是氨基保護基如叔丁氧羰基或苯甲氧羰基，或X是掩蔽氨基如疊氮化物，以提供保護的肽。根據原來采用的X-基團，可以且下述任何的方法制備最終化合物除去保護基(當X＝-NH-C(NH)NH2，-N(W2)-C(NH)NH-W2，-NH-C(NW2)NH-W2或-NH-C(NH)NH-W2)或選擇性地使W1-基去保護(例如當X＝-NH-C(NH)NH-W2，-N(W2)-C(NH)NH-W2，-NH-C(NW2)NH-W2，在這種情況下W2必須和W1正交)然后通過N-末端氮的烷基化作用和去保護或選擇性地去保護/去掩蔽烷基氨基末端官能團(X＝NH-W2，在這種情況下W2必須和W1正交或X＝掩蔽的氨基基團，如疊氮化物)接著采用常規的方法通過胍化反應，得到游離的胺和去保護的W1-基團。
方法Ⅱ通過常規肽連接方法，用保護或不保護氨基胍或在烷基鏈的末端帶有保護或掩蔽氨基的直鏈烷基胺制備N-末端保護的氨基酸的連接物，采用的常規的肽連接方法示于下式
其中W1，A，R5和X如上述定義，接著使W1-基團去保護并與N-末端的氨基酸以被保護的形式連接，得到描述于方法Ⅰ或Ⅲ中的被保護的多肽，依賴于用于連接程的N-末端氨基酸的氮上的選擇的取代模式，然后根據方法Ⅰ或方法Ⅲ繼續合成得到最終的肽。
方法Ⅲ
通過常規的連接方法連接預先形成的N-末端烷基化和被保護二肽，與保護或不保護的氨基胍或在鏈末端帶有保護或掩蔽氨基的直鏈烷基胺，采用的常規的肽連接的方法示于下式
其中R2，R3，R4，R5，n，m，A和X如上述定義，除了R2不是H和W3是酰基保護基如三氟酰基。
根據原來采用的X-基團可以用下述的任何方法制備最終化合物保護基的去除(當X＝-NH-C(NH)NH2，NH-C(NH)NH-W2，-N(W2)-C(NH)NH-W2NH-C(NW2)NH-W2或NH-W2)，或末端烷基氨基官能團選擇性的去保護/去掩蔽(X＝NH-W2，在這種情況下W2必須和W3正交或X＝掩蔽的氨基如疊氮化物)接著通過胍化反應將W3基團去保護。
圖Ⅰ是實施例3-18，20-21，24-28，30-34，36-40，43-49，51-53，57-64和67-93的圖解。
圖Ⅱ是實施例55，56，65和66的圖解。
圖Ⅲ是實施例1和2的圖解。
圖Ⅳ是實施例19的圖解。
圖Ⅴ是實施例54的圖解。
圖Ⅵ是實施例22，23，29，35，41，42和50的圖解。
一般的實驗方法在BRUKER AC-P 300和BRUKER AM 500分光計上對1H NMR和13C NMR進行測定，前者操作1H題率為500.14MHz和13C頻率為125.76MHZ且后者1H和13C的頻率分別為300.13MHz和75.46MHz。
10-50mg樣品溶解于0.6ml下述任一的溶劑中;CDCl3(同位素純度＞99.8%Dr.Glaser AG Basel)，CD3OD(同位素純度＞99.95%Dr.Glaser AG Basel)，或D2O(同位素純度＞99.98%Dr.Glaser AG Basl;)。
在CDCl3和CD3OD中1H和13C的化學位移值與作為外標的四甲基甲硅烷相關。在D2O中1H的化學位移與3-(三甲基甲硅烷基)-d4-丙酸鈉鹽相關且在D2O中13C的化學位移參見相關的1，4-二噁烷(67.3ppm)，對照物均作為外標，在一些情況下會引起外標的標準與內標相比很小的區別位移，但是，在1H化學位移的區別小于0.02ppm中且在13c且小于0.1ppm。
含有脯氨酸殘基的肽序列的1H NMR光譜中，經常存在兩個記錄響應，這是由于存在作用于環繞酰胺鏈旋轉的構象，此時脯氨酸為肽鏈的N末端。上述構象命名為順和反。在本化合物(R)CHa-Pro-和-(R)Cha-Pic序列中，由于一個構象是占優勢的構象(＞90%)，時常出現順-反平衡，在這些情況中只報道主要旋轉異構體的化學位移。
在商品化的Merck Silicagel 60F254涂層的玻璃板或鋁板上進行薄層色譜，用聯合的UV-光觀察。接著噴布通過混合372ml EtOH(95%)，13.8ml濃H2SO4，4.2ml的濃乙酸和10.2ml的P-甲氧基苯甲醛或磷鉬酸試劑(5-10W.T%的EtOH溶液)制備的溶液，并加熱。
在N2壓下，在Merck Silicagel 60(40-63mm 230-400目)上進行閃色譜。
在Waters M-590儀器上進行反相高效液譜(在實施例表示為RPLC)，該設備上裝有具有不同維的三反相Kromail 100，C8柱(EKa-Nobel)用于分析，(4.6mm×250mm)，半制備(1″×250mm)和制備(2″x500mm)色譜在266nm鑒定。
在Leybold-Heraens，model Lyovac GT 2，設備上進行冷凍。
保護方法Boc-(R)Cha-OH在H-(R)Cha-OH，21.55g(125.8mmol)的130ml 1M NaOH和65ml THF溶液中加入30g(137.5mmol)的(BoC)2O，并在室溫下攪拌混合物4.5h。蒸發掉THF并追加150ml水。用EtOAc洗滌堿溶液相兩次，然后用2M KHSO4酸化，并用3×150ml EtOAc提取。合并的有機相用水，鹽水洗滌并干燥(Na2SO4)。蒸發溶劑得到30.9g(90.5%)白色固體的標題化合物。
Z-(R)Cha-OH
采用描述于Bodanszky M.和Bodanszky A“The Practice of Peptide synthesis”，Springer-Verlag 1984，p.12，中的相同方法，用H-(R)Cha-OH作為起始物。
Boc-(Me)Phe-OH采用如Me-(R)Phe-OH的相同方法，在Me-(R)Phe-OH制備。
Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-OH在充分攪拌的2.0g(8，8mmol，1eq.)H-(R，S)Pro(3-反)Ph)-OH X HCl(如描述于J.Org.Chem.，55，P.270-75，1990和J.Org.Chem.，39，1710-1716，1974中的方法制備)的17.6ml 1N NaOH，12ml H2O和12ml THF的溶液中，在+5℃加入2.33g(Boc)2O(10.7mmol，1.2eq.)。使反應到達室溫并連續攪拌另外的18小時。除去有機溶劑并在殘留物中加入50ml H2O。用2×50ml的EtOAc洗滌堿性水相并用2M KHSO4酸化(PH大約1)。酸化的水相用4×75ml EtOAc提取且合并的有機相用1×40ml水，1×40ml鹽水洗滌并干燥。蒸發溶劑得到2.0g(78%)的白色固體的純產物。
1H-NMR(CDCl3，500MHz，兩旋轉異構體的混合物)δ1.4和1.5(2s，9H)，2.0-2.1(m，1H)，2.3-2.4(m，1H)，3.45-3.88(m，3H)，4.3和4.45(2d，1H)，7.2-7.4(m，5H)。
Boc-(R，S)Pro(3-Ph)-OH制備如上述，起始于順/反H-(R，S)Pro(3-Ph)-OH的混合物。
Boc-(R)Dph-OH根據描述于K.Hsich等人J.Med.Chem.，32，p.898(1989)的方法，從H-(R)Dph-OH制備。
Boc-(R)Hop-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-OH的相同方法，從H-(R)Hop-OH制備。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.00(m，1H)，2.22(m，1H)，2.75(bt，2H)，4.36(bs，1H)，5.05(bs，1H)，7.15-7.33(m，5H)。
去保護方法(a)被保護的肽溶于EtOH(95%)中并在過量的TFA或HOAc(＞2eq.)存在下，在大氣壓力下用5%Pd/c充分氫化大約1-4h。過濾掉催化劑，蒸發溶劑，冷凍干燥后(H2O)分離出如白色粉末狀的最終的肽(TFA或HOAc鹽)。
(b)除了將EtOH/H20(ca∶5/1)用作溶劑外，與(a)中的相同。
(c)除了將MeOH用作溶劑，與(a)中的方法相同。
(d)除了將2M HCl用作酸得到HCl鹽，與(a)中的方法相同。
(e)酯水解，列示于下述實施例EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc(0.4mmol)溶于1.5mlMeOH中并在室溫下加入1.2ml(1.2mmol)的1M NaOH。3h后蒸發除去甲醇并加入過量HOAc到殘留物中，冷凍干燥混合物并用RPLC純化(CH3CN/0.1M NH4OAc(70/30))。從水中冷凍干燥后，獲得粉末純產物，產率為73%。
t-丁基酯裂解，列示于下述實施例將t-丁基酯溶于過量的TFA中。在室溫下攪拌2h后，蒸發TFA。在水-乙醇中用活性碳活化處理以提純，接著從水中冷凍干燥得到所需的化合物。
起始物的制備H-Pic-OEtxHClL-哌可酸4.0g(0.031mmol)在100ml abs乙醇中漿化，通入HCl(g)，短暫地冒泡，直到獲得澄清溶液。溶液在冰浴中冷卻，用超過15min的時間滴加入17ml的亞硫酰氯。除去冰浴，使混合物回流2.5小時，除去溶劑，獲得等量的產物的鹽酸鹽。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.33(t，3H)，1.8-2.1(m，5H)，2.3-2.5(m，1H)，3.1-3.3(m，1H)，3.5-3.7(m，1H)，4.14(dd，1H)，4.44(q，2H)。
H-Pic-OMexHCl用上述的H-PIC-OEt x HCl的相同方式制備，用MeOH代替了EtOH。
H-Aze-OEtxHCl如上述H-Pic-OEt x HCl的相同方法，從H-Aze-OH制備。
H-Pic(4-(S)Me-OEtxHCl如上述H-Pic-OEt x HCl的相同方法，從H-Pic(4-(R)Me)-OH(從Synthelec，Lund，Sweden購買到)制備。
H-(R)Pic(4-(R)Me)-OEtxHCl如上述H-PIC-OEt x HCl的相同方法，從H-Pic(4-(S)Me)-OH(從Synthelec，Lund，Sweden購買到)制備。
H-(R)Dph-OH
通過A.Evans等人，在JACS，112，4011(1990)中提供的一般方法制備。
H-(R，S)Pic(4.5-dehy dro)-OEt將H-(R，S)Pic(4.5-dehydro)-OH，3.05g(18.1mmol)(根據Burgstahler等人，J.Org.Chem，25，4.p.489-92(1960)的方法制備)，溶于75ml EtOH/HCl(飽和)中，將混合物回流5小時，蒸發溶劑并把殘留物溶于水中，用氫氧化鈉(水溶液)堿化并用乙酸乙酯提取三次。干燥(Na2SO4)，小心蒸發得到2.05g(71%)的標題產物。
1H-NMR CDCl3)δ1.28(t，3H)，1.88(bs，NH)2.2-2.4(m，2H)，3.45(bs，2H)，3.57(dd，1H)，4.21(q，2H)，5.68-5.82(m，2H)。
Boc-(R)Cgl-OH在5Mpa和甲醇中將Boc-(R)Pg-OH用5% Rh/Al2O3充分氫化。過濾并蒸發溶劑，得到不需要進一步提純的標題產物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.9-1.7(m，20H)，4.0-4.2(m，1H)5.2(d，1H)。
Boc-(R)Dch-OHBoc-(R)Dph-OH，0.75g(2.2mmol)溶于25ml的MeOH中并加入催化量的5% Rh/Al2O3。將混合物在5Mpa，50℃氫化40h，過濾并蒸發得到0.72g(93%)的標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ0.92-2.0(m，32H)，它的1.45(bs，9H)，4.55(bd)和4.9(bd);兩個旋光體結合的全部1H，5.7-6.1(寬，NH)。
H-(R)Pro(5-(S)Me)-OMe根據B.Gopalan等人，在J.Org.Chem.，51，2405，(1986)中提供的方法制備。
H-Mor-OH根據K.NaKa jima等人，Bull.Chem.Soc.Jpn.，51(5)，1577-78，1978和ibid 60，2963-2965，1987中的方法制備。
H-Mor-OEtxHCl如H-Pic-OEt x HCl的相同方式，從H-Mor-OH制備。
Boc-(R)Cha-OSuBoc-(R)Cha-OH(1 eq.)，HOSu(1.1eq)和DCC或CME-CDI(1.1 eq)溶于乙腈(大約2.5ml/mmol酸)中，并在室溫下攪拌過夜。過濾掉在反應中形成的沉淀，蒸發掉溶劑并在真空干燥產物。(當CME-CDI用于反應中，殘留物在蒸發掉CH3CN后，溶于EtOAc中，用水洗滌有機相并干燥。蒸發溶劑得到標題化合物)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，2旋光異構體約1∶1比例)δ0.85-1.1(m，2H)，1.1-1.48(m，4H)，1.5-1.98(m，16H;它的1.55(bs，9H)，2.82(bs，4H)，4.72(bs，1H較多的旋光異構體)，4.85(bs，1H，較少的)。
Boc-(Me)(R)Cha-OSu(ⅰ)Boc-(Me)(R)Cha-OH11.9g(42.6mmol)Boc-(Me)(R)Phe-OH 150ml在MeOH中的溶液，在0.28Mpa用5% Rh/Al2O3充分氫化24h。過濾掉催化劑并蒸發溶劑，得到白色固體的產物(95%產率)，其不需要進一步提純用于下面的步驟。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，兩個旋光異構體的混合物約1/1)。δ0.8-1.1(m，2H)，1.1-1.9(m，20H它的1.47和1.45(s，9H))，2.82和2.79(s，全部3H)，4.88和4.67(m，全部1H)。
(ⅱ)Boc-(Me)(R)Cha-OSu如所述的制備Boc-(R)Cha-OSu的相同方式，從Boc-(Me)(R)Cha-OH制備。
Boc-(R)Cha-Pro-OSu(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-OHH-(S)Pro-OH(680mmol)溶于0.87M氫氧化鈉(750ml)中，用20分鐘滴加溶于DMF(375ml)中的Boc-(R)Cha-OSu(170mmol)。在室溫下攪拌反應混合物20h。酸化混合物(2M KHSO4)并用乙酸乙酯提取三次。合并有機層用水洗滌三次用鹽水洗滌一次。用硫酸鈉充分干燥后并蒸發溶劑，把漿狀油溶于二乙基醚中，蒸發溶劑最后真空干燥產物得到白色粉末狀的Boc-(R)Cha-Pro-OH，其產率幾乎等量。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，較少旋光異構體10%)δ0.8-1.05(m，2H)，1.05-1-55(m，15H;它的1.5(bs，9H))，1.55-1.8(m，5m)，1.8-2.15(m，3H)，2.47(m，1H);3.48(m，1H)，3.89(m，1H)，4.55(m，2H)，5.6(m，1H);較少旋光異構體單峰2.27(m，1H)，3.58(m，1H)，4.33(m，1H)，5.0(m，1H)(ⅱ)Boc-(R)Cha-Por-OSu采用所述的制備Boc-(R)Cha-OSu-的相同方式，從Boc-(R)Cha-Por-OH制備。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，2旋光異構體，5∶1比例)δ0.78-1.05(m，2H)，1.05-1.83(m，20H;它的1.43(bs，9H))，1.83-2.26(m，3H)，2.32(m，1H)，2.72-2.9(m，4H)，3.2(m，1H，較少的旋光體)，3.52(m，1H，較多的)，3.68(m，1H，較少的旋光異構體)，3.89(m，1H，較多的)，4.31(bq，1H，較少的旋光異構體)，4.56(bq，1H，較多的)，4.71(bt，1H，較多的旋光異構體)，4.93(bt，1H，較少的)，5.22(bd，1H，較多的旋光異構體)，5.44(bd，1H，較少的)。
Z-(R)Cha-Pro-OSu采用如Boc-(R)Cha-Por-OSu的相同方法，從Z-(R)Cha-OH制備。
Boc-(R)Cha-Pic-OSu(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pic-OEt將Boc-(R)Cha-OH，6.3g(0.023mol)溶于150ml的CH2Cl2中。在冰浴中使溶液冷卻加入6.3g(0.047mol)的N-羥苯甲三唑和11.2g(0.0265mol)的CME-CDI。15分鐘后除去冰浴，在室溫下攪拌反應混合物4h。蒸發除去溶劑殘留物溶于150ml的DMF中并在冰浴中冷卻。加入H-Pic-OEtxHCl，4.1g(0.021mol)通過加入N-甲基嗎啉將PH調節至大約9。15min后除去冰浴，攪拌反應混合物3天。蒸發溶劑并把殘留物溶于乙酸乙酯中，用稀KHSO4(aq)，NaHCO3(aq)和水洗滌，干燥有機層(Na2SO4)并蒸發得到7.7g(89%)的Boc-(R)Cha-Pic-OEt，它不必進一步提純即可應用。1H-NMR(500MHz，CDCl3，2旋光異構體，3∶1比例)δ0.7-1.0(m，2H)，1.1-1.9(m，29H;它的1.28(t，3H))，1.45(bs，9H)，2.01(bd，1H，較多的旋光異構體)，2.31(bd，1H)，2.88(bt，1H，較少的)，3.30(bt，1H，較多的)，3.80(bd，1H，較多的)，4.15-4.3(m，2H)，4.5-4.7(m，2H較少的)，4.77(bq，1H，較多的)，4.90(bq，1H，較少的)，5.28(bd，1H，較多的)，5.33(bd，1H，較多的)。
(ⅱ)Boc-(R)Cha-Pic-OHBoc-(R)Cha-Pic-OEt，5.6g(0.014mol)，與100ml THF，100ml水和7g的LiOH混合。在室溫下攪拌混合物過夜。蒸發TFH水溶液用KHSO4(aq)酸化異用乙酸乙酯提取三次。合并有機相用水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發得到4.9g(94%)的Boc-(R)Cha-Pic-OH，它不需要進一步提純即可應用，化合物可從二異丙基醚/己烷中重結晶。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，2旋光異構體，3.5∶1比例)δ0.8-1.1(m，2H)，1.1-2.1(m，27H;它的1.43(s，9H，較多的旋光異構構)，1.46(S，9H較少的))，2.33(bd，1H)，2.80(bt，1H，較少的)，3.33(bd，1H，較少的)，3.85(bd，1H，較多的)，4.57(bq，1H，較少的)，4.68(m，1H，較少的)，4.77(bd，1H，較多的)，5.03(bs，1H，較少的)，5.33(bd，1H，較多的)，5.56(m，1H，較多的)。
(ⅲ)Boc-(R)Cha-Pic-OSu將Boc-(R)Cha-Pic-OH(1g，2.6mmol)在室溫下溶解于DMF(15ml)中，然后冷卻到-18℃，在添加反應物的過程中保持該溫度。加入羥基琥珀酸亞胺(0.60g 5.2mmol)并攪拌反應混合物幾分鐘直到結晶溶解。預先冷卻的溶于DMF(10ml)中的二環己基(0.56g，2.7mmol)滴加入反應混合物。幾分鐘后，把在-18℃的反應混合物倒入20℃的水浴中2h，并伴隨攪拌。蒸發溶劑，加入乙酸乙酯(40ml)并過濾掉沉淀的脲。有機相用一次水，二次0.3M KHSO4，二次稀NaHCO3，一次水，一次鹽水洗滌并干燥(Na2SO4)。蒸發溶劑，真空干燥產物，得到1.16g(93%)的產物。根據1H-NMR，產物含有二種立體異構體(異構體在Pic，S/R)，比例為95/5。
1H-NMR(300MHz CDCl3，較多的非對映體)δ0.7-2.0(m，27H;它的1.46(bs，9H)，2.29(bd，1H)，2.85(bs，4H)，3.40(m，1H)，4.5-4.8(m，1H)，5.1-5.4(m，1H)，5.70(bd.1H，較多的)。
Boc-(R)Cha-Mor-OSu采用如Boc-(R)Cha-Pic-OSu的相同方法從H-Mor-OEt x HCl制備，除了在形成OSu-酯中把CH3CN用作溶劑，代替DMF。
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu采用如Boc-(R)Cha-Pro-OSu的相同方法，從Boc-(Me)-(R)Cha-OH制備。
Boc-(Me)(R)Cha-Pic-OSu采用如Boc-(R)Cha-Pic-OSu的相同方法，從Boc-(Me)(R)Cha-OH制備。
Boc-(R，S)Pro(3-Ph)-Pro-OSu采用如Boc-(R)Cha-Pro-OSu的相同方法，從Boc-(R，S)Pro(3-Ph)-OH制備。
Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OSu(ⅰ)Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OBn在室溫下在1.0g的Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-OH(3.43mmol，1eq.)，1.04g的H-Pro-OBn x HCl(4.29mmol，1.25eq.)，0.04g的HOBt(0.24mmol，0.07eq.)的15ml DMF漿液中加入1.83g的CME-CDI(4.29mmol，1.25eq，)和0.525ml的NMM(4.73mmol，1.38eq.)攪拌附加的4天后蒸發掉溶劑，殘留物用200ml EtOAc吸收，有機相用2×40ml的水，2×25ml的1M KHSO4，2×25ml的(M NaOH，2X25ml的H2O洗滌并干燥(MgSO4)。蒸發溶劑并通過閃色譜(CH2Cl2/MeOH，97/3)得到純產物(44%產率)如計算1∶1對映體的混合物。
(ⅱ)Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OH從在前步驟中得到的苯甲基酯，通過在大氣壓力下，用5%Pd/c在乙醇中充分氫化4小時而移去，過濾并蒸發得到純產物，如計算為1∶1等量對映體的混合物。
1H-NMR(CDCl3，500MHz，二個非對映體每個由二個旋光異構體組成)δ1.3-2.4(m+4s來自Boc基，全部(4H)，2.5-2.9(m，全部1H)，3.2-3.9(M，全部5H)，4.3-4.65(m，全部2H)，7.2-7.5(m，5H)。
(ⅲ)Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OSu根據所述的制備Boc-(R)Cha-OSu的方法，從Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OH制備。
Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ch)-Pro-OSu(ⅰ)Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ch)-Pro-OH在0.34Mpa下，Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OH用5%Rh/Al2O3在甲醇和少量的HOAr中充分氫化7天。過濾掉催化劑，蒸發溶劑并用閃色譜(CH2Cl2/MeOH，94/6)得到白色固體(非對映體的混合物)。
(ⅱ)Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ch)-Pro-OSu根據所述的制備Boc-(R)Cha-OSu的方法，從Boc-(R，S)Pro(3-(反)CH)-Pro-OH制備。
Boc-(R)Hoc-Pro-OH(ⅰ)Boc-(R)Hoc-OH將Boc-(R)Hop-OH，3.2g(11.46mmol)溶于甲醇(75ml)中。加入銠/活性鋁氧化物(Rh/Al2O3)，0.5g，混合物在0.41Mpa的氫氣壓力下攪拌18h。催化劑通過硅藻土過濾掉并蒸發溶劑得到幾乎等量的產物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.90(m，2H)，1.08-1.33(m，6H)，1.43(s，9H)，1.60-1.74(m，6H)，1.88(bs，1H)，4.27(bs，1H)。
(ⅱ)Boc-(R)Hoc-OSu采用所述的制備Boc-(R)Cha-OSu的方法，從Boc-(R)Hoc-OSu制備。
(ⅲ)Boc-(R)Hoc-Pro-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pro-OH的方法，從Boc-(R)Hoc-OSu制備。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.80-0.94(m，2H)，1.05-1.36(m，7H)，1.36-1.48(bs，9H)，1.48-1.78(m，7H)，1.98-2.14(m，2H)，2.34(m，1H)，3.48(m，1H)，3.85(m，1H)，4.43(m，1H)，4.52(bd，1H)，5.26(bd，1H)，較少的旋轉異構體的信號出現在δ1.92，2.25，3.58，4.20和4.93。
Boc-(R)Hoc-Pic-OH
(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Pic-OMe采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法，從Boc-(R)Hoc-OH和H-Pic-OMe X HCl制備。
(ⅱ)Boc-(R)Hoc-Pic-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的方法，從Boc-(R)Hoc-Pic-OMe制備。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.82-0.97(m，2H)，1.10-1.36(m，7H)，1.36-1.50(bs，9H)，1.50-1.82(m，11H)，2.35(bd，1H)，3.28(bt.1H)，3.85(bd，1H)4，63(m，1H)，5.33(bs，1H)，5.44(bd，1H)，較少的旋轉異構體的信號出現在δ1.88，2.80，4.25，4.55和4.97。
Boc-(R)Cha-Aze-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的相同方法，從H-Aze-OEt X HCl制備。
Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的相同方法，除了用CH2Cl3作溶劑，從H-Pic(4-(S)Me)-OEt X HCl制備。
Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(S)Me)-OSu(ⅰ)Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-OEt采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OEt的相同方法，從H-(R)Pic(4-(R)Me)-OEt X HCl制備。
(ⅱ)Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-OH采用去保護的(e)在上述的產物(ⅰ)上制備。
(ⅲ)Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)OSu
采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OSu的相同方法，從Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(S)Me)-OH制備。
Boc-(R)Cha-(R，S)Pic(4.5-去氫)-OH根據所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的相同方法，從H-(R，S)Pic(4.5-去氫)-OEt制備。
Boc-(R)Cgl-Pic-OH(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pic-OMe特戊酰氯(1.000ml，8.1mmol)加入到Boc-(R)Cgl-OH(2.086g，8.1mmol)和三乙基胺(1.13ml，8.1mmol)的甲苯(25ml)和DMF(5ml)的溶液中。在冰浴的溫度下隨后加入H-Pic X HCl(1.46g，8.1mmol)和三乙基胺(1.13ml，8.1mmol)在DMF(20ml)中的混合物。使反應混合物緩慢升至室溫且24h后用水稀釋并用甲苯提取，用0.3M KHSO4，10% Na2CO3和鹽水洗滌后，真空除去溶劑，得到2.52g(81%)元色油，它不需要進一步提純即可使用。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，2旋轉異構體，5∶1比例)δ0.8-1.8(m，25H)，2.25(d，1H)，2.75(t，1H，較少的旋轉異構體)，3.3(t，1H)，3.7(s，3H)，3.85(d，1H)，4.3(t，1H，較少的旋轉異構體)，4.5-4.6(m，1H)，5.25(d，1H)，5.30(d，1H)。
(ⅱ)Boc-(R)Cgl-Pic-OH根據水解Boc-(R)Cgl-Pic-OEt的方法，用上述(ⅰ)的產物制備。產物用二-異丙基醚和己烷結晶。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，2旋轉異構體，5∶1比例)δ0.8-1.8(m，25H)，2.3(d，1H)，2.8(t，1H，較少的旋轉異構體)，3.3(t，1H)，3.9(d，3H)，4.4(t，1H，較少的)，4.5-4.6(m，1H)，5.1(s，1H，較少的旋轉異構體)，5.3(d，1H)，5.40(d，1H)。
Boc-(R)Dph-Pic-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的相同方法，從Boc-(R)Dph-OH制備。
Boc-(R)Dch-Pic-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的相同方法，從Boc-(R)Dch-OH制備。
Boc-(R)Cha-Pro-(5-(S)Me)-OH采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-OH的相同方法，從H-Pro(5-(S)Me)-OMe制備。
Boc-Nag(Z)(ⅰ)N-苯甲基氧羰基-O-甲基異脲在18℃對攪拌的濃NaOH水液(2.8L，50% W/W，19.1M，53mol)和水中，加入二份半硫酸O-甲基異脲酯(1.57kg，99% 9.0mol)。將反應混合物冷卻至3-5℃，在冷卻和劇烈攪拌下用超過20分鐘的時間加入氯甲酸苯甲基酯(3.88kg，92% 20.9mol)。加入Z-Cl期間反應溫度升至3到8℃，添加的漏斗用5升水沖洗，沖洗液加入到反應容器。在0-3℃攪拌反應混合物18h，過濾且結晶用冷水(3℃)洗滌，25℃真空干燥(10-20mbar)48h，得到白色結晶粉末狀的3.78kg(89%)的標題化合物。
(ⅱ)Boc-Nag(Z)對Boc-NH-(CH2)3-NH2X HCl(根據Mattingly P.G.，Synthesis，367(1990)制備)(3.9kg，18.5mol)的異丙醇(24kg)的攪拌溶液，在60-70℃，用超過30分鐘的時間按份加入KHCO3(4.2kg，42mol)，緩慢放出產生的CO2(g)。混合物攪拌另外的30分鐘，然后用超過30分鐘的時間按份加入N-苯甲氧羰基-O-甲基異脲(3.74kg，18.0mol)。在65-70℃攪拌反應混合物16h，冷卻至20℃并過濾。沉淀用異-丙醇(10+5L)洗滌。在減壓下濃縮合并的濾液。保持加熱的表面不超過65-70℃。當大約蒸餾掉45升時，加入EtOAc(90L)。將反應混合物冷卻至20-25℃，用水(10和5L和鹽水(5L)洗滌，用Na2SO4(2kg)干燥。攪拌反應混合物后過濾，濾塊用EtOAc(11和7L)洗滌，減壓濃縮合并的濾液，保持加熱的表面不超過40-50℃。當大約90升EtOA(蒸餾掉時，加入甲苯(25L)并繼續蒸發，收集另外大約18升的未餾物后，在強烈攪拌下加入甲苯(20L)，并將所得混合物冷卻至-1至0℃，溫和攪拌過夜(17h)。過濾結晶的漿液，產物用冷卻的甲苯洗滌(10和5L)，真空干燥(10-20mbar，40℃)24h，得到4.83kg(13.8mol，76%)的Boc-Nag(Z)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.41(s，9H)，1.6-1.7(m，2H)，3.0-3.3(m，4H)，4.8-5.0(bs，1H)，5.10(s，2H)，7.2-7.4(m，5H)。
Boc-Agm(Z)(ⅰ)Boc-Agm在室溫下用5分鐘的時間對14.95g(65.5mmol，1eq.)的硫酸胍丁基胺(Aldrich)，13.7ml的EtN3(98.25mmol，1.5eq)，165ml的水和165ml的THF的漿液加入21.5g(98.25mmol)，1.5eq.)的(Boc)2O。將混合物劇烈攪拌過夜，蒸發至干，并用2X 100ml的Et2O洗滌殘留物，得到白色粉末狀的Boc-Agm，它不需要進一步提純用于以下的步驟。
(ⅱ)Boc-Agm(2)對冷卻的(+5℃)，從以上步驟獲得的粗Boc-Agm(大約65.5mmol)的180ml 4N NaOH和165ml的THF的漿液，用10分鐘加入24ml(169mmol，2.5eq)氯甲酸苯甲基酯。在室溫攪拌4h后，加入甲醇(150ml)，在室溫下繼續攪拌附加的20h。蒸發有機層，將200ml水加入殘留物。堿性的水相用1 x 300ml和2 x 200ml的EtOAc提取，合并有機相用H2O(2 X 100ml)，鹽水(1 x 100ml)洗滌并干燥(MgSO4)。蒸發溶劑用閃色譜(CH2Cl2/MeOH，采用97/3，95/5和9/1的分部梯度)得到14.63g(58%)白色粉末狀的純Boc-Agm(Z)。
1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ1.35-1.40(m，2H)，1.45(s，9H)，1.5-1.6(m，2H)，3.0-3.2(m，4H)，4.65(bs，1H)，5.1(s，2H)，7.25-7.40(m，5H)。
13H-NMR(CDCl3，75.5MHz)δ25.44，27.36，28.21，65.83，79.15，127.47，127.66，128.14，137.29，156.47，161.48，163.30。
Boc-NH-(CH2)3-N3根據Mattingly P.G，在Synethesis 1990，367中所述的方法制備。
Z-NH-(CH2)2-NH2對6g亞乙基二胺(0.1mol)和22ml三乙基胺在20ml氯仿中的冷卻溶液，加入溶于5ml氯仿中的2.5g Z-OSu。使混合物升至室溫并在攪拌下放置過夜。過濾，蒸發溶劑并用閃色譜(CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和的)，95/5)得到0.9g(46%)的標題化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.27(s，2H)，2.85(t，2H)，3.24(q，2H)，5.14(s，2H)，7.22-7.40(m，5H)。
Agm x HCl通過在離子交換柱上把硫酸氫離子轉化成氯化物，從Agm x H2SO4(Aldrich)制備。
H-Nag(Z)x 2HCl通過把HCl(e)通入Boc-Nag(Z)的EtOAc溶液，然后蒸發掉溶劑制備。
BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br對P-TsOH x H-Gly-OBn(5mmol)和三乙基胺(5mmol)的10ml CH2Cl2的溶液加入溶于10ml CH2Cl2和二環己基碳化二亞胺(5ml)中的2-溴乙酸(5mmol)混合物在室溫下攪拌過夜并過濾，有機相用二次0.2M KHSO4，0.2M NaOH，鹽水洗滌并干燥，蒸發并用閃色譜(CH2Cl2/MeOH，95/5)得到一定量的所需化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝3.89(s，2H)，4.05-4.11(d，2H)，5.19(s，2H)，7.06(bs，1H)，7.3-7.4(m，5H)。
BnOOC-CH2-OCO-CH2-Br2.8g(0.020mmol)溴乙酸，4.2g(0.020mmol)的溴乙酸苯甲基酯和2.0g(0.020mmol)的三乙胺在25ml EtOAc中的混合物回流3h。混合物用較多的EtOAc稀釋并冷卻。用稀HCl洗滌溶液，然后用NaHCO3(aq)且最后用水洗滌。干燥(Na2SO4)并蒸發，然后用閃色譜(庚烷/乙酸乙酯，75/25)得到標題化合物26%產率。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ3.95(s，2H)，4.75(s，2H)，5.23(s，2H)，7.35-7.45(m，5H)。
Bno-(CH2)3-OTf丙烷二醇單苯甲基醚(0.83g，5mmol)溶于干燥吡啶(0.6g，7mmol)和二氯甲烷(20ml)中，冷卻至-15℃。將預冷卻到-15℃的Triflic anhydride，用45分鐘加入到攪拌的反應混合物中加入后使溫度升至15℃。蒸發掉溶劑，產物-溶于己烷/乙酸乙酯4∶1(10ml)中，并用硅過濾。最后蒸發掉溶劑并使產物真空干燥得到0.95g(64%)的1-苯甲氧-3-氟甲烷磺酰丙烷。它可以直接使用(見實施例21)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ2.12(m，2H)，3.6(t，2H)，4.51(s，2H)，4.72(t，2H)，7.22-7.42(m，5H)。
BnO-(CH2)2-CHO通過Swern氧化作用(敘述在D.Swern等人，J.Org.Chem.，1978，2480-82)制備BnO-(CH2)3-OH。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ2.63(dt，2H)，3.80(t，2H)，4.51(s，2H)，7.30(m，5H)，9.76(bt，1H)。
Br-(S)CH(CH2OBn)-COOBn(ⅰ)Br-(S)CH(CH2OBn)-COOHO-苯甲基絲氨酸(3.9g，19mmol)的水溶液(10ml)加入到溴化鈉(Wg，107mmol)水溶液(20ml)和硫酸(2g，20mmol)中。使反應混合物冷卻到-10℃，并在劇烈攪拌下加入NaNO2(1.73g，25mmol)。在粘稠的混合物中再加入其它份的水，幾分鐘后，加入H2SO4(1g，10mmol)。在室溫下攪拌混合物過夜，然后用EtOAc(100ml)提取兩次。合并有機相用二次水和一次鹽水洗滌并干燥(Nz2SO4)。蒸發溶劑得到3.7g(75%)的如黃色油狀的標題化合物，它的純度已足夠直接用于以下步驟。
(ⅱ)Br-(S)CH(CH2OBn)-COOBn對上述(ⅰ)粗產物(2.6g，10mmol)的干燥苯(25ml)溶液，加入乙二酰氯(2.6g，20.5mmol)和分子篩(4A°，1g)。在室溫和氬氣條件下攪拌混合物18h。過瀘除去分子篩并蒸發溶劑。淺黃色殘留物溶于CH3CN(10ml)中并加入苯甲醇(1g，9.2mmol)。在室溫攪拌混合物5h。蒸發溶劑，殘留物溶于Et2O中。并用1M NaOH，水，鹽水洗滌一次并干燥蒸發溶劑，然后用閃色譜(CH2Cl2/MeOH，95/5)得到1.8g(67)的所需化合物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ3.82(dd，1H)，3.99(dd，1H)，4.38(dd，1H)，4.56(s，2H)，5.23(s，2H)，7.23-7.46(m，5H)。
操作實施例實施例1H-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pfro-Agm x HOAcBoc-(R)Cha-Pro-OSu(1.7mmol)和二氫氯化胍基丁胺(2.0mmol，1.18eq)溶于DMF/H2O 95∶5(35ml)中。加入三乙胺調節PH大約為10，并在室溫下攪拌溶液2天。蒸發溶液(5mm Hg/60℃)直到干，粗產物用RPLC(CH3CN/NH4oAc(0.1M)，38∶62)純化。冷凍干燥后獲得白色粉末狀的所需化合物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3/DMSO-d65∶2，兩個旋轉異構體，9∶1δ(較多的旋轉異構體)0.75-0.90(m，2H)，1.1-2.05(m，19H)，1.35(s，9H)2.98-3.14(m，4H)，3.37(q，1H)，3.76(m，1H)，4.20(m，1H)，4.33(dd，1H)，6.30(d，1H)，7.05-7.80(寬 m，5H)，8.67(寬 d，1H)。
改變較多的旋轉異構體信號寬度，可以明確地觀察到δ3.44(m，1H)，3.62(m，1H)，4.10(m，1H)，4.64(m，1H)，5.56(d，1H)，9.08(m，1H)。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc在室溫下攪拌Boc-(R)Cha-Pro-Agm(0.2mmol)的TFA(2ml)溶液4.5h。蒸發溶劑，所剩下的油直接RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，25∶75)。反復冷凍干燥后獲得如白色粉末的二乙酸鹽。
1H-NMR(500.13MHz，D2O)δ0.80-0.95(m，2H)，1.00-1.21(m，3H)，1.32(m，1H)，1.40-1.78(m，12H)，1.83-2.00(m，2H)，1.90(s，乙酸酯)，2.20(m，1H)，3.06-3.14(m，4H)，3.50(m，1H)，3.67(m，1H)，4.20-4.30(m，2H)。
13C NMR(75.6MHz，D2O)胍δ157.4;羰基碳δ169.9，174.5。
實施例2Me-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc(ⅰ)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Agm對479.6mg(1mmol，1eq.)的Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Osu和500ml的NMM的16ml DMF/H2O(15/1)的溶液中，在室溫下，加入166.5mg(1.2mmol，1.2eq.)的Agm XHCl再攪拌反應混合物另外70hr.，蒸發溶劑，得到油狀的粗產物。它不需要進一步提純可用于以下步驟。
(ⅱ)Me-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc在室溫，從上一步驟得到的粗油溶于10ml TFA/CH2Cl2(1∶4)。攪拌2小時25分鐘后，蒸發溶劑并用RPLC純化粗產物(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，35/65)，冷凍干燥后得到白色粉末狀的所需產物。1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.93-1.05(m，2H)，1.10-1.29(m，3H)，1.33-1.43(m，1H)，1.50-1.80(m，12H)，1.88-2.10(m，2H)，1.92(s，乙酸酯)，2.27-2.36(m，1H)，2.68(s，3H)，3.15-3.23(m，3H)，3.24-3.31(m，1H)，3.57-3.66(m，1H)，3.76-3.83(m，1H)，4.28(t，1H)，4.39(dd，1H)。
13C NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.24;羰基碳δ174.03，168.24。
實施例3HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z)Boc-Agm(Z)(1eq)溶于TFA/CH2Cl2(1∶4，ca∶6ml/mmol)中，并在室溫下攪拌大約2h。蒸發溶劑，產物與Boc-(R)Cha-Pro-OSu(1eq)一起溶于DMF(大約1ml/mmol)，用NMM調節PH到大約9，混合物在室溫下攪拌20h。真空蒸發溶劑，粗產物溶于CH2Cl2中用水洗滌三次并用鹽水洗一次。干燥后(硫酸鈉)蒸發溶劑，產物用閃色譜提純(CH2Cl2/MeOH)得到白色粉末狀的Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z)。
(ⅱ)H-(R)-Cha-Pro-Agm(Z)
Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z)溶于TFA/CH2Cl(1∶4，大約6ml/mmol)，并在室溫下攪拌2h。蒸發溶劑，產物溶于0.2M NaOH(20ml/mmol)并用二氯甲烷提取兩次。合并有機層并用鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)蒸發溶劑，得到白色粉末狀的H-(R)-Cha-Pro-Agm(Z)。
(ⅲ)BnO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm(Z)將H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(1mmol)溶于甲醇(10ml)中。加入氯化三乙基銨(1mmol)，氰硼氫化鈉(0.7mmol)然后加入BnO-(CH2)2-CHO(1.05mmol)，反應混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，粗產物溶于乙酸乙酯中，用水洗兩次，鹽水洗一次，用硫酸鈉充分干燥。蒸發溶劑，粗產物用閃色譜提純(EtOAc/MeOH)。
(ⅳ)HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm X 2 HCl通過在上述產物(ⅲ)上，采用去保護的方法(d)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.72(m，較少的旋轉異構體)，0.84(m，較少的旋轉異構體)，0.87-1.03(m，2H)，1.03-1-26(m，3H)，1.28-1.40(bs，1H)，1.44-1.80(m，11H)，1.80-1.95(bs，3H)，1.95-2.10(bs，2H)，2.28(m，1H)，3.04(m，1H)，3.08-3.27(m，5H)，3.58(bs，1H)，3.67(bs，2H)，3.78(m，1H)，4.12(bd，較少的旋轉異構體)，4.30(m，1H)，4.37(m，1H)。
13C NMR(125MHz，D2O)胍δ157.26;羰基碳δ174.06，168.36。
實施例4HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAcN-末端烷基化的一般方法。
在此敘述的方法是比較一般方法，且可以參見下述的實施例以及每個具體實施例中采用的烷基化試劑。
將被烷基化的肽(1eq)和烷基化試劑(1.1-1.2eq)溶于乙腈(大約10ml/mmol)中。加入碳酸鉀(2.0-2.2eq)。在50-60℃攪拌反應混合物，直到起始產物消耗掉(TLC，通常1-5h)。過濾，蒸發溶劑并用閃色譜(CH2Cl2/MeOH，CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和)或EtOAc/MeOH，大約9/1)提純，蒸發掉溶劑得到烷基化的產物。
(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(Z)根據上述的方法，從H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)和Br-CH2COOBn制備。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc在上述的產物(ⅰ)上，采用去保護的方法(b)制備。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.9-1.1(m，2H)，1.1-2.3(m，19H)，1.95(s，乙酸酯)，3.1-3.2(m，4H)，3.2-3.65(m，3H)，3.85(m，1H)，4.0(bt，1H)，4.35(dd，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.55;羰基碳δ168.71，171.37和174.3。
實施例5ipr-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Agm-Agm(Z)(參見實施例3)和Br-CH2COOiPr烷基化，然后采用去保護的方法(b)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.05(m，2H)，1.1-1.35(m，9H;它的1.23(d，3H)，1.25(d，3H)，1.35-2.02(m，14H)1.92(s，乙酸酯)，2.08(m，1H)，2.2(m，1H)，3.07-3.45(m，6H)，3.55(m，1H)，3.7-3.8(m，2H)，4.3(dd，1H)，5.05(m，1H)。
13C NMR(125MHz，D2O)胍δ157.39;羰基碳δ171.10，172.76和174.44。
實施例6HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA(ⅰ)Me-(R)Cha-Pro-Agm(Z)從Boc-(ME)(R)Cha-Pro-OSu制備，采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA如實施例4中，采用(Me)-(R)Cha-Pro-Agm(Z)和Br-CH2COOBn烷基化，然后采用去保護方法(b)得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.9-1.35(m，6H)，1.5-2.2(m，14H)，2.25-2.45(m，1H)，3.12(s，3H)，3.15-3.35(m，4H)，3.6-3.75(m，1H)，3.8-3.95(m，1H)，4.22(出現bs，2H)，4.45(m，1H)，4.6(bt，1H)。
13C NMR(75.47MHz，D2O)胍δ157.52;羰基碳δ173.86，168.79和167.38。
實施例7HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)和Br-CH(Me)COOBn烷基化，然后采用去保護方法(a)，得到兩種對映體混合物的標題化合物。
實施例8HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a x HOAC采用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，1/4)，通過分離實施例7形成的非對映體而得到。從柱的兩個峰中最早出現的一個是本非對映體。
1H-NMR(500MHz，D2O;2旋轉并構體大約5∶1比例)δ0.74(m，較少的旋轉異構體)，1.01(m，2H)，1.10-1.33(m，3H)，1.48-1.88(m，15H;它的1.51(d，3H))，1.92-2.12(m，3H)1.96(s，乙酸酯)，2.30(m，1H)，3.20(m，3H)，3.38(m，1H)，3.47(q，較少的旋轉異構體)，3.53-3.68(m，2H)，3.73(m，1H)，4.20(d，較少的旋轉異構體)，4.33(m，1H)，4.38(m，1H)，4.51(d，較少的旋轉異構體)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.38;羰基碳δ174.11，173.45和168.64。
實施例9HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAC在實施例8的分離中，從柱中最先出現的峰之后的非對映體，是上述的標題化合物1H-NMR(500MHz，D2O，2旋光體大約9∶1比例)δ0.88(m，較少的旋轉異構體)，1.05(m，2H)，1.12-1.33(m，3H)，1.42(bs，1H)，1.50-1.88(m，15H;它的1.55(d，3H))，1.93-2.13(m，3H)1.95(s，乙酸酯)，2.30(m，1H)，2.40(m，較少的旋轉異構體)，3.22(t，2H)，3.28(t，2H)，3.64(m，1H)，3.70(q，1H)，3.98(t，較少的旋轉異構體)，4.35(t，1H)，4.41(dd，H)。
實施例10HOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)和Br-CHn(Pr)COOEt烷基化，并用去保護方法(e)，然后用去保護方法(b)得到HOOC-(R，S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm。用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，1/4)分離非對映體并在蒸發掉溶劑后冷凍干燥(H2O)得到標題化合物。從柱中的兩個峰中最早出現的是本非對映體。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.8-1.1(m，5H;它的0.92(t，3H)，1.1-2.1(m，22H)1.95(s，乙酸酯)，2.2(m，1H)，3.1-3.35(m，5H)，3.48(m，1H)，3.88(m，1H)，4.0(m，1H)，4.4(dd，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.50;羰基碳δ168.55和174.16。
實施例11HOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc在實施例10分離中，從柱中出現第一個峰之后出現的非對映體是上述標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.05(m，5H;它的0.95(t，3H)，1.1-2.08(m，22H)1.9(s，乙酸酯)，2.14(m，1H)，3.1-3.4(m，5H)，3.45(m，1H)，3.62(m，1H)，3.80(m，1H)，4.34(dd，1H)。
13C NMR(75MHz，D2O)胍δ157.53;羰基碳δ169.01和174.27。
實施例12HOOC-(RorS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc(ⅰ)tBuOOC-(RorS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm(Z)將H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)(0.55mmol)，溴乙酸特丁基-(R，S)苯基酯(0.66mmol)，K2CO3(1.4mmol)在CH3CN(10ml)中的混合物在室溫下攪拌28h并在60℃攪拌附加的5h。把非對映體的混合物(根據NMR大約3∶1)過濾并蒸發。所得的油直接用二次閃色譜(CH2Cl2/MeOH，92/8)提純，得到二個非對映體的完全分離物(分別的，Rf＝0.36(較少的異構體)和0.27(較多的異構體))。
1H NMR of較多的異構體(500.13MHz，CDCl3)δ0.79(quart，1H)，0.90(quart，1H)，1.06-1.70(m，H)，1.37(s，9H)，1.85-2.03(m，3H)，2.20(m，1H)，3.10-3.24(m，3H)，3.25-3.38(m，2H)，3.42(m，1h)，3.53(m，1H)，4.30(s，1H)，4.49(dd，1H)，5.08(s，2H)，7.19-7.40(m，10H);在6.7-8.6位置觀察到寬NH信號。
(ⅱ)HOOC-(RorS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc較多的異構體(50mmol)和苯硫基甲烷(0.5mmol)溶于TFA中，在室溫下保持8小時。蒸發5h后(0.1mm Hg)，殘留的油在RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)2∶3)后純化后，經過蒸發溶劑和冷凍干燥得到標題化合物。
1H NMR(500.13MHz，MeOD)δ0.85-1.01(m，2H)，1.13-1.38(m，4H)，1.53-2.05(m，14H)1.92(s，乙酸酯)，2.18(m，1H)，3.08-3.26(m，3H)，3.32-3.45(m，2H)，3.64(m，1H)，3.93(t，1H)，4.37(dd，1H)4.43(s，1H)，7.28-7.50(m，5H)。
13C-NMR(125.6MHz，MeOD)胍δ158.7;羰基碳δ173.8，174.7，177.0。
實施例13HOOC-(R，S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc如實施例4中采用H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)和Br-CH(CH2-CH2-Ph)COOEt烷基化，并用去保護方法(a)接著用去保護方法(e)得到HOOC-(R，S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm實施例14HOOC-(RorS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a x 2 TFA通過RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，2/3)和蒸發溶劑后冷凍干燥(H2O/TFA)，分離實施例13中獲得的非對映體，得到標題化合物。從柱的兩個峰中最早出現的非對映體是上述標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.93-1.11(m，2H)，1.24(m，1H)，1.29-1.40(m，2H)，1.52-1.85(m，11H)，1.89-2.11(m，4H)，2.14-2.32(m，3H)，2.83(t，2H)，3.14(t，2H)，3.24(t，2H)，3.50(q，1H)，3.70(m，1H)，4.00(t，1H)，4.36-4.42(m，2H)，7.17-7.31(m，5H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ 158.66;羰基碳δ168.08，171.53，174.16。
實施例15HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm/b xHOAc(ⅰ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(Z)將丙烯酰基苯甲基酯(1.1eq)和H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)(1eq)溶于乙醇(20m/mmol)中，在室溫下攪拌20h。蒸發溶劑，粗產物用閃色譜純化(CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和)，95/5)。最后蒸發溶劑并真空干燥產物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.7-0.95(m，2H)，1.0-1.5(m，10H)，1.5-1.75(m，5H)，1.75-1.92(m，2H)，2.0(m，1H)，2.17(bs，1H)，2.45(m，2H)，2.63(m，1H)，2.79(m，1H)，2.94-3.25(m，4H)，3.33(m，2H)，3.52(bt，1H)，4.45(bd，1H)，4.95-5.12(m，4H)，7.13-7.4(m，10H)。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc在上述產物(ⅰ)上采用去保護的方法(a)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.88(m，2H)，1.00-1.23(m，3H)，1.33(bs，1H)1.42-1.72(m，11H)，1.78-2.00(m，3H)1.94(s，乙酸酯)，2.18(m，1H)，2.52(m，2H)，3.03-3.20(m，6H)，3.50(m，1H)，3.72(m，1H)，4.23(mm，1H)4.30(m，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.25;羰基碳δ178.07，173.96，168.24。
實施例16EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc(ⅰ)EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm(Z)對冷卻(-10℃)的H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)(0.46g，0.89mmol)和NMM(199mg，1.97mmol)的10ml THF溶液，加入溶于3ml THF中的Cl-COCOOEt(134mg，0.98mmol)。將混合物保持在-10℃一小時，然后在室溫下攪拌另外的1小時。蒸發溶劑，殘留物溶于乙酸乙酯。有機相用水洗滌二次并干燥(Na2SO4)。蒸發溶劑，從EtOAc中結晶，得到0.275g(5%)的白色結晶狀的標題化合物。
(ⅱ)EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc在上述產物(ⅰ)上采用去保護方法(b)制備。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.9-2.25(m，24H;它的1.17(t，3H))，1.90(s，乙酸酯)，3.1-3.25(m，4H)，3.5-3.65(m，3H;它的3.59(q，2H))，3.88(m，1H)，4.35(m，1H)，4.69(dd，1H)。
13C-NMR(75.5MHz，MeOD)胍δ157.56;和羰基碳δ159.21，160.74，172.81，174.56。
實施例17
(R，S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA采用實例4中的方法，用H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)和α-溴丁內酯，接著用去保護的方法(a)得到兩種非對映體混合物的標題化合物。
1H-NMR(500MHz，D2O，非對映體的混合物大約1/1)δ0.93-1.06(m，2H)，1.09-1.30(m，3H)，1.37-1.49(m，1H)，1.50-1.87(m，11H)，1.89-2.10(m，3H)，2.24-2.36(m，1H)，2.44-2.56(m，1H)，2.72-2.85(m，1H)，3.10-3.30(m，4H)，3.56-3.65(m，1H)，3.75-3.84(m，1H)，4.2-5.0(m，5H部分被H-O-D信號掩蔽)。
13C-NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.34;(重疊峰);和羰基碳δ174.34，173.90，173.62，167.88，167.58(兩個重疊峰)。
實施例18HOOC-(RorS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x 2 TFA采用實施例14中的相同方法，通過處理實施例13中的非對映體，獲得標題化合物。從柱中出現第一個峰后，出現本非對映體。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.95-1.06(m，2H)，1.14-1.40(m，4H)，1.48-1.84(m，11H)1.87-2.30(m，6H)，2.72-2.90(m，2H)，3.12-3.32(m，4H)，3.52(m，1H)，3.72(m，1H)，4.04(dd，1H)，4.27(t，1H)，4.37(dd，1H)，7.17-7.32(m，5H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.68;羰基碳δ168.14，171.46，174.03。
實施例19H-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc(ⅰ)Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boc)對Z-(R)Cha-Pro-OSu(1mmol)的1ml DMF溶液，在0℃下加入溶于1ml DMF中的H2N-(CH2)3-NH(Boc)(參見起始產物的分離物)，并用NMM將PH調節至大約9。在室溫下攪拌反應3天，然后將反應物倒入水中。水相用EtOAc提取四次，合并的有機相用二次0.3M KHSO4，0.2M NaOH，鹽水洗滌并干燥。蒸發并用閃色譜(EtOAc/石油醚，4/1)得到產率59%的標題化合物。
(ⅱ)Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2將Z-(R)Cha-Pro-NH(CH2)3-NH(Boc)(0.6mmol)溶解于CH2Cl2(8ml)。將TFA(2ml)加入到反應混合物中，攪拌1h。蒸發溶劑殘留物溶于CH2Cl2中，用0.2M NaOH洗滌兩次并干燥(Na2SO4)。蒸發溶劑得到胺，產率為93%。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.79-1.03(m，2H)，1.05-1.75(m，15H)，1.84-2.08(m，4H)，2.36(m，1H)，2.66(m，2H)，3.25(m，2H)，3.43(q，1H)，3.85(m，1H)，4.45(m，1H)，4.56(d，1H)，5.09(m，2H)，5.35(d，1H)，7.30-7.45(m，5H)。
(ⅲ)Z-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc將Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2(0.55mmol，1eq)溶于DMF(2ml)中，用三乙胺把PH調節至8-9。加入溶于DMF(1ml)中的硝酸3.5-二甲基-1-吡唑基甲咪鹽(0.55mmol)(1eq)并在室溫下攪拌反應混合物三天。蒸發溶劑，冷凍干燥(H2O)粗產物并用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，4/6)提純，蒸發掉溶劑并冷凍后得到產率為93%的標題化合物。
(ⅳ)H-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc在上述的產物(ⅲ)上用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.82-1.03(m，2H)，1.03-1.28(m，3H)，1.35(m，1H)，1.53-1.82(m，9H)，1.82-2.05(m，3H)，1.89(s，乙酸酯)，2.24(m，1H)，3.15(t，2H)，3.23(q，2H)，3.55(m，1H)，3.72(m，1H)，4.27-4.34(m，2H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.37;羰基碳δ169.81，174.52。
實施例20nBu-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc(ⅰ)H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，從Boc-(R)Cha-OSu制備。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-1.03(m，2H)，1.10-1.50(m，6H)，1.60-1.83(m，8H)，1.87-2.20(m，3H)，3.15(m，1H)，3.25(m，2H)，3.42(m，2H)，3.63(dd，1H)，3.70(m，1H)，4.36(bs，1H)，5.07(s，2H)，7.22-7.43(m，5H)。
(ⅱ)nBu-(R)-Cha-Pro-Nag-(Z)將H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(0.5g，1mmol)溶于10ml甲醇中，加入氯化三乙基銨(0.1g，1mmol)，氰基硼氫化鈉(44mg，0.7mmol)然后加入丁醛，使反應混合物在室溫下攪拌20h。蒸發溶劑，粗產物溶于乙酸乙酯中，用水洗滌二次，鹽水洗滌一次并用硫酸鈉充分干燥。蒸發溶劑粗產物用閃色譜純化(EtOAc/EtOH/Et3N，88/10/2)，最后蒸發溶劑，真空干燥產物得到0.22g(40%)的nBu-(R)Cha-Pro-Nag(Z)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.82-1.0(m，5H;它的0.88(t，3H))，1.08-1.49(m，10H)，1.58-1.8(m，7H)，1.88-2.22(m，3H)，2.4(m，1H)，2.5(m，1H)，3.05(bs，1H)，3.3(m，1H)，3.4-3.53(m，3H)，3.73(m，1H)，4.42(bs，1H)，5.1(s，2H)，7.25-7.43(m，5H)。
(ⅲ)nBu-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc在上述產物(ⅱ)上，用去保護的方法(a)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.94(t，2H)，1.10-1.31(m，3H)，1.38(m，3H)，1.55-1.88(m，11H)，1.88-2.15(m，3H)，1.95(s，乙酸酯)，2.34(m，1H)，2.95(m，1H)，3.08(m，1H)，3.24(t，2H)，3.30(m，2H)，3.66(m，1H)，3.82(m，1H)，4.32(t，1H)4.41(dd，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.40;羰基碳δ180.39，174.82，168.55。
實施例21HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA(ⅰ)BnO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag(Z)將1-苯甲氧基3-氟甲烷磺酰丙烷(參見制備的起始物)(0.5g，1mmol)和H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)溶于四氫呋喃(10ml)中。把碳酸鉀(0.28g，2mmol)加入到反應混合物中，在室溫下攪拌二小時。蒸發溶劑粗產物用乙酸乙酯/水萃取。有機相用一次碳酸氫鈉水溶液，一次水，和一次鹽水洗滌。用硫酸鈉充分干燥后，蒸發溶劑，粗產物用閃色譜提純(CH2CH2/MeOH(NH3-飽和)，95∶5)，最后蒸發溶劑并真空干燥產物得到0.29g(45%)的標題化合物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.77-1.03(m，2H)，1.03-2.18(m，19H)，2.52(m，1H)，2.64(m，1H)，3.03(bs，1H)，3.1-3.6(m，7H)3.66(m，1H)，4.41(bs，1H)，4.46(s，2H)，5.08(s，2H)，7.2-7.4(m，5H)，7.55(m，1H)。
(ⅱ)HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.00(bs，2H)，1.10-1.32(m，3H)，1.40(bs，1H)，1.55-2.15(m，14H)，2.30(m，1H)，3.05-3.35(m，6H)，3.57-3.75(m，3H)，3.81(bs，1H)，4.35(bs，1H)，4.42(bs，1H)。
實施例22HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3采用如H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備，以Boc-(R)Cha-Pro-OSu和Boc-NH-(CH2)3-N3(代替Boc-Agm(Z))作為起始物。
(ⅱ)EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2x HOAc如實施例4中的方法，采用H-(R)-Cha-Pro-NH-CH2)3-N3和EtOOC-CH2-Br烷基化，然后用去保護方法(a)還原疊氮化物，得到標題化合物。
(ⅲ)EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc如實施例19(ⅲ)中制備Z-(R)Cha-Pro-Nag的相同方法，采用上述(ⅱ)的胺完成胍化反應。用RPLC(CH3CN/NH4OAC(0.1M)，3/7)純化，蒸發溶劑并冷凍干燥(H2O)后，獲得純化的標題化合物。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅲ)上，采用去保護的方法(e)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.99(m，2H)，1.09-1.30(m，3H)，1.44(m，1H)，1.59-2.09(m，12H)，1.92(s，乙酸酯)，2.29(m，1H)，3.20(t，2H)，3.28(m，2H)，3.52-3.63(m，3H)，3.76(m，1H)，4.38(dd，1H)4.42(t，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.43;羰基碳δ168.72，171.36，174.35。
實施例23EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc根據實施例22(ⅲ)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.07(m，2H)，1.17-1.59(m，7H;它的1.38(t，3H))，1.60-2.24(m，12H)，2.04(s，乙酸酯)，2.39(m，1H)，3.31(t，2H)，3.39(m，2H)，3.63-3.90(m，4H)，4.12(t，1H)，4.36(q，2H)4.46(dd，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.73;羰基碳δ173.73，175.09，175.70。
實施例24iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-CH2COOiP烷基化)，然后用去保護的方法(b)，得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.05(m，2H)，1.1-2.15(m，22H;它的1.23(d，3H)，1.25(d，3H))，1.92(s，乙酸酯)，2.2(m，1H)，3.10-3.35(m，5H)，3.4(m，1H)，3.55(m，1H)，3.65-3.8(m，2H)，4.28(dd，1H)5.03(m，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.39;羰基碳δ170.40，172.00和174.50。
實施例25tBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-CH2COOtBu烷基化，然后用去保護的方法(b)，得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.9-1.15(m，2H)，1.15-2.15(m，25H;它的1.55(bs，9H)，2.3(m，1H)，3.15-3.45(m，4H)，3.55(m，1H)，3.7-3.95(m，3H)，4.3-4.4(m，2H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.55;羰基碳δ166.55，168.13和174.33。
實施例26HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)BnOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)將H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)，0.20g(0.40mmol)，與0.115g(0.40mmol)的溴乙酸苯甲氧基羰基甲基酯，55mg的K2CO3(0.40mmol和5ml的CH3CN混合。在室溫下攪拌混合物6小時。蒸發溶劑且粗產物用色譜(CH2Cl2/MeOH，9/1)純化，蒸發掉溶劑后，得到0.20g(71%)的所需化合物。
(ⅱ)HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.1(m，2H)，1.1-1.6(m，8H)，1.6-2.15(m，10H)，1.99(s，乙酸酯)，2.23(m，1H)，3.1-3.4(m，4H)，3.45-3.65(m，4H)，3.7-3.9(m，3H)，4.34(m，1H)，4.48(dd，2H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.8;羰基碳δ176.1，175.2，174.9，173.1。
實施例27H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Cl-CH2CONH2烷基化，反應中存在催化量的KI。然后用去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.02(m，2H)，1.12-1.34(m，3H)，1.46(m，1H)，1.61-2.13(m，9H)，1.99(s，乙酸酯)，2.34(m，1H)，3.25(t，2H)，3.33(t，2H)，3.60-3.82(m，4H)，4.22(t，1H)，4.41(dd，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.5;羰基碳δ168.94，169.40，174.43。
實施例28HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-OH2CONHCH2COOBn(參見制備的起始產物)烷基化，然后用去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ1.01(m，2H)，1.15-1.38(m，3H)，1.47(m，1H)，1.64-2.13(m，12H)，2.27(m，1H)，3.17-3.26(m，3H)，3.37(m，1H)，3.51(m，1H)，3.83(m，1H)，3.88(s，2H)，3.93-4.06(m，2H)，4.35-4.45(m，2H)。
13C-NMR(75MHz，MeOD)胍δ158.71;羰基碳δ166.94，168.35，172.44，174.17。
實施例29(HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc(ⅰ)(EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3(參見實施例22)和Br-CH2COOEt(10eq.用于完成二烷基化作用)烷基化，然后用去保護方法(a)得到標題化合物。
(ⅱ)(EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
采用如實施例19(ⅲ)中制備Z-(R)Cha-Pro-Nag的相同方法，對上述胺完成胍化合應。用RPLC進行化合物的純化(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，4∶6)。
(ⅲ)(HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc根據去保護方法方法(e)，用二倍量的MaOH使酯基水解，用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，2∶8)純化后，蒸發掉溶劑并冷凍干燥(H2O)獲得純化的最終化合物。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.92-1.49(m，6H)，1.60-2.54(m，10H)，2.05(S，乙酸酯)，3.25-3.50(m，4H)，3.65-4.03(m，6H;它的3.95(s，4H))，4.49(m，1H)，4.71(m，1H;部分地被H-O-D峰掩蔽)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.64;羰基碳δ168.62，171.39，174.30。
實施例30HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA(ⅰ)Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z)如實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，從Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu和Boc-Nag(Z)制備。
(ⅱ)HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z)和Br-CH2COOBn烷基化，然后用去保護方法(b)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.8-1.06(m，2H)，1.08-1.27(m，4H)，1.55-2.10(m，12H)，2.30(m，1H)，3.04(s，3H)，3.14-3.33(m，4H)，3.63(m，1H)，3.81(m，1H)，4.13(出現bs，2H)，4.38(br.dd，1H)，4.56(bt，1H)。
13C-NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.40;羰基碳δ174.05，168.83，167.44。
實施例31HOOC-CH2-(nBu)(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用nBu-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-CH2COOBn烷基化，然后用去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.78-0.88(m，3H)，0.88-1.02(m，2H)，1.02-1.23(m，4H)，1.23-1.38(m，2H)，1.45-1.84(m，11H)，1.84-2.10(m，3H)，2.24(m，1H)，3.05-3.18(m，3H)，3.18-3.38(m，3H)，3.57(m，1H)，3.77(m，1H)，4.05-4.25(m，2H)，4.32(m，1H)，4.50(m，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ159.17;羰基碳δ175.66，171.13，169.31。
實施例32HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-CH(Me)COOBn烷基化，然后用去保護方法(a)，得到兩種非對映體混合物的標題化合物。
實施例33
HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a x HOAc采用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1m)，1/4)，分離實施例32中形成的非對映體，蒸發溶劑后獲得，從柱中出現的兩個峰中的第一個是本非對映體。
1H-NMR(300MHz，D2O2旋轉異構體大約9∶1比例)δ0.78(m，較少的旋轉異構體)，1.07(m，2H)，1.17-1.42(m，3H)，1.48-1.64(m，4H;它的1.56(d，3H)，1.64-1.95(m，9H)，1.95-2.20(m，3H)，2.00(s，乙酸酯)，2.37(m，1H)，3.28(t，2H)，3.38(t，2H)，3.53(m，較少的旋轉異構體)，3.63(m，2H)，3.77(m，1H)，4.24(d，較少的旋轉異構體)，4.35-4.50(m，2H)，4.60(d，較少的旋轉異構體)。
實施例34HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b x HOAc采用描述于實施例33中的相同方法，通過實施例32形成的化合物獲得標題化合物。從柱中出現的第二個峰是本對映體。
1H-NMR(300MHz，D2O2旋轉異構體大約9∶1比例)δ0.95(m，較少的旋轉異構體)，1.12(m，2H)，1.22-1.40(m，3H)，1.40-1.67(m，4H;它的1.60(d，3H))，1.67-2.00(m，9H)，2.00-2.25(m，3H)，2.03(s，乙酸酯)，2.40(m，1H)，3.25-3.48(m，4H)，3.66-3.84(m，2H)，3.93(m，1H)，4.38(m，1H)，4.50(m，1H)，4.93(m，較少的旋轉異構體)。
13C-NMR(75.5MHz，D2O)δ157.42;羰基碳δ168.05，171.99，174.04。
實施例35EtOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA采用實施例22中的相同方法，在烷基化中用EtOOC-CH(Me)-Br代替Br-CH2-COOEt而制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD，2非對映體大約2.5∶1比例和4旋轉異構體)δ0.88-2.43(m，25H)，3.1-4.55(m，11H)。
13C-NMR(75MHz，MeOD)胍δ158.65;羰基碳δ174.33，170.66，168.20。
實施例36HOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a x HOAc如實施例4中，用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-CH(nPr)COOEt烷基化，采用去保護方法(e)，然后用去保護方法(b)得到HOOC-(R，S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm。通過用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1m)，1/4)分離非對映體(從柱中出現的兩個峰中的第一個是本非對映體)，蒸發溶劑后，冷凍干燥(H2O)獲得標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.05(m，5H;它的0.95(t，3H))，1.1-2.05(m，20H)，1.95(s，乙酸酯)，2.18(m，1H)，3.15-3.3(m，4H)，3.35(m，1H)，3.46(m，1H)，3.85(m，1H)，4.04(m，1H)，4.38(dd，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.73;羰基碳δ171.63，174.43和176.78。
實施例37HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-(S)ch(ch2-OBn)-COOBn烷基化，然后用去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.75-1.56(m，7H)，1.56-2.30(m，11H)，2.40(m，1H)，3.15-3.55(m，4H)，3.55-4.60(m，7H)。
實施例38HOOC-(R，S)CH(ph)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-(Z)(參見實施例20)和Br-CH(ph)COOtBn烷基化，并用去保護方法(a)然后用去保護(f)。得到兩種非對映體混合物的標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.8-1.1(m，2H)，1.1-2.18(m，16H)，2.26(m，1H)，3.04-3.35(m，5H)，3.45(m，1H)，3.7(m，1H)，4.35(m，1H)，4.85(s，1H，一個異構體)，5.05(s，1H)，另一個異構體)，7.4-7.6(m，5H)，7.75(bt，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ158.68;羰基碳δ174.39，174.15和170.5，170.06和168.32，167.78。
實施例39HOOC-(S)CH(CH2CH2ph)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc如實施例21中烷基化，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Tfo-(R)CH(CH2CH2ph)-COOEt烷基化，并用去保護方法(e)，接著用去保方法(a)，得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.77-1.05(m，2H)，1.05-1.35(m，5H)，1.35-2.16(m，14H)，1.88(s，乙酸酯，2.71(t，2H)，3.07-3.53(m，7H)，3.73(m，1H)，4.32(m，1H)，7.03-7.25(m，5H)。
13C-NMR(75MHz，MeOD)胍δ158.71;羰基碳δ174.15，177.31 182.61。
實施例40HOOC-(R)CH(CH2CH2ph)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和Br-CH(CH2CH2Ph)-COOEt烷基化，然后通過去保護方法(a)和(e)，得到HOOC-(R，S)CH(CH2-CH2-Ph)-(R)Cha-Pro-Nag。用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，2/3)分離兩種非對映體，蒸發掉溶劑后，冷凍干燥(H2O)獲得標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.97(m，2H)，1.10-1.41(m，3H)，1.43-2.30(m，16H)，1.96(s，乙酸酯)，2.70(m，2H)，3.06-3.26(m，3H)，3.28-3.66(m，3H)，3.84(m，1H)，4.14(bt，1H)，4.39(dd，1H)，7.11-7.28(m，5H)。
13C-NMR(75MHz，MeOD)胍δ158.66實施例41HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
(ⅰ)EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2如實施例15中所述，用H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3代替H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)烷基化，然后用去保護方法(a)獲得標題化合物。
(ⅱ)Et-OOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc采用實施19中所述的制備Z-(R)Cha-Pro-Nag的方法，胍化上述的胺得到標題化合物(ⅱ)。
(ⅲ)HOOC-CH2CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅱ)上，采用去保護方法(e)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.12(m，2H)，1.22-1.48(m，3H)，1.54(bs，1H)，1.70-2.37(m，12H)，2.14(s，乙酸酯)，2.53(m，1H)，2.70(bs，2H)，3.15(t，1H)，3.25-3.55(m，5H)，3.75(m，1H)，3.93(m，1H)，4.43(t，1H)，4.52(m，1H)。
實施例42EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc根據實施例41(ⅱ)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.97(m，2H)，1.11-1.39(m，7H;它的1.30(t，3H))，1.50(t，2H)，1.62-1.76(m，5H)，1.76-2.14(m，5H)，1.93(s，乙酸酯)，2.29(m，1H)，2.62(t，2H)，2.77-2.94(m，2H)，3.23(t，2H)，3.32(t，2H)，3.60-3.87(m，3H)，4.20(q，2H)，4.36(dd，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.39;羰基碳δ182.05，175.13，175.02。
實施例43HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc(ⅰ)Et-OOC-CH＝CH-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)將H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)(1eq)和3-溴巴豆酸乙基酯(1.1eq)溶于乙腈(15ml/mmol)中。將碳酸鉀加入到反應混合物中，在室溫下攪拌2h。過濾后和蒸發溶劑，用閃色譜(CH2Cl2/MeOH)純化粗產物。最后蒸發溶劑并真空干燥產物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.73-1.0(m，2H)，1.0-1.4(m，8H;它的1.33(t，3H))，1.43-2.15(m，12H)，2.96(bs，1H)，3.12(dd，1H)，3.16-3.48(m，6H)，3.56(m，1H)，4.15(q，2H)，4.35(bs，1H)，5.03(s，1H)，6.0(d，1H)，6.85(dt，1H)，7.05(bs，1H)，7.17-7.37(m，5H)，7.5(bs，1H)。
(ⅱ)EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(a)制備。
(ⅲ)HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc在上述產物(ⅱ)上，用去保護方法(e)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.02(bs，2H)，1.08-1.32(m，3H)，1.42(bs，1H)，1.55-2.15(m，14H)，1.92(s，乙酸酯)，2.33(bs，3H)，3.00(bs，1H)，3.07(bs，1H)，3.18-3.40(m，4H)，3.62(bs，1H)，3.82(bs，1H)，4.33(bs，1H)，4.40(bs，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.42;羰基碳δ181.87，174.34，168.64。
實施例44EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA根據實施例43(ⅱ)制備。
1H-NMR(300MHz，MeOD/D2O)δ0.63-1.30(m，9H;它的1.02(t，3H))，1.30-1.97(m，14H)，2.06(bs，1H)，2.28(m，2H)，2.72-3.20(m，6H)，3.36(m，1H)，3.60(m，1H)，3.94(m，2H)，4.06(m，1H)，4.17(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，MeOD/D2O)胍δ158.10;羰基碳δ175.40，174.23，168.54。
實施例45HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)將H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)，0.50g(0.97mmol)溶于0.54ml三乙基胺和8ml的CH2Cl2中。加入溶于2ml的CH2Cl2中的乙基草酰氯0.146g(1.07mmol)，此時溫度升到22-28℃并在室溫下攪拌反應2小時。有機相用水洗滌兩次，干燥(Na2SO4并用閃色譜(EtOAc/EtOH(99%)，9/1)得到92mg(15%)的標題化合物。
(ⅱ)HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc采用去保護方法(b)，然后用(e)得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.88-1.14(m，2H)，1.15-1.5(m，4H)，1.5-2.3(m，13H)，1.9(s，乙酸酯)，3.1-3.43(m，4H)，3.6(m，1H)，4.05(m，1H)，4.43(dd，1H)，4.5(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.57;羰基碳δ165.94，173.95，174.85和181.22。
實施例46MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)通過在柱上EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例45)的酯基轉移作用獲得甲基酯，在內色譜中EtOAc/MeOH(9∶1)用作溶劑。產率55%(ⅱ)MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(b)制備。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.9-1.1(m，2H)1.1-2.3(m，17H)，1.9(s，乙酸酯)，3.12-3.4(m，4H)，3.52-3.67(m，2H)，3.9(s，3H)，4.35(m，1H)，4.65(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.52;羰基碳δ159.11，161.20，173.17和174.90。
實施例47(R，S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)和α-溴丁內酯烷基化，然后用去保護方法(a)，得到兩種非對映體混合物的標題化合物。
1H-NMR(300MHz，D2O，非對映體混合物)δ1.0-1.43(m，5H)，1.45-1.60(br.s，1H)，1.64-2.28(m，12H)，2.31-2.50(m，1H)，2.80-2.98(m，1H)，3.23-3.46(m，4H)，3.66-3.79(m，1H)，3.82-3.96(m，1H)，4.33-5.08(m，5H，部分被H-O-D信號掩蔽)。
實施例48HOOC-(R，S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)BnOOC-(R，S)CH(CH2COOBn)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)將H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)，0.21g(0.42mmol)，和0.12g(0.42mmol)的馬來酸二苯甲基酯溶于10ml的CH3CN中。使混合物回流過夜，蒸發并用閃色譜(CH2Cl3/MeOH，94/6)提純，蒸發溶劑得到所需化合物，產率22%。
(ⅱ)HOOC-(R，S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.9-2.4(m，19H)2.00(s，乙酸酯)，2.7-3.0(m，2H)，3.1-3.6(m，5H)，3.75-3.9(s，2H)，4.2-4.5(m，2H)。
實施例49MeOOC-(R，S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)MeOOC-(R，S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)將H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例20)，0.21g(0.42mmol)，和0.24g(1.7mmol)的馬來酸二甲基酯溶于15ml的MeOH中。混合物回流過夜，蒸發并用閃色譜(CH2Cl3/MeOH，9/1)提純，蒸發溶劑得到所需化合物，產率45%。
(ⅱ)MeOOC-(R，S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(c)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.1(m，2H)1.15-2.3(m，17H)，1.91(s，乙酸酯)，2.6-2.8(m，2H)，3.1-3.5(m，5H)，3.5-3.8(m，10H;它的4單3.66，3.68，3.71，3.73)，4.29(m，1H)。
實施例50HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA(ⅰ)tBuooc-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH3將H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3(參見實施例22)，0.39g(1.1mmol)和0.33g(1.2mmol)P-溴甲基苯甲酸叔戊基丁基酯溶于10mlCH3CN中，加入0.19g(2.4mmol)的K2CO3。混合物回流過夜并蒸發。粗產物用閃色譜(CH2Cl2/MeOH，92∶8)提純，得到0.50g(84%)的標題化合物。
(ⅱ)tBuooc-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH3在0℃對0.60g(1.8mmol)的雙-苯硫基錫烷，0.20g(1.8mmol)的苯硫酚和0.18g(1.8mmol)的三乙基胺的50ml的CH2Cl2溶液中，加入0.50g(0.92mmol)的tBuooc-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH3。在0℃攪拌混合物30分鐘，在室溫下4h。然后用CH2Cl2棉釋，并用碳酸氫鈉水溶液洗滌，隨后用2%H2O2洗滌3次。用稀HCl提取有機層。合并的酸化水相用EtOAc洗滌，隨后用NaOH(aq)堿化。用乙酸乙酯提取水層兩次，合并的有機層干燥(Na2SO4)并蒸發。用內色譜(CH2CL2/MeOH(NH3-飽和)，8∶2)提純得到0.12g(26%)的標題化合物。
(ⅲ)Hooc-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA采用實施例19中所述的制備Z-(R)Cha-Pro-Nag的相同方法，胍化上述的胺，然后采用去保護的方法(f)，得到標題化合。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.9-1.5(m，7H)，1.4-1.9(m，9H)，1.95-2.1(m，2H)，2.16(m，1H)，2.32(m，1H)，3.2-3.3(m，3H)，3.41(戊，1H)，3.53(m，1H)，3.77(m，1H)，4.2-4.3(m，3H)，4.42(dd，1H)，7.15(d，2H)，8.10(d，2H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ160.8;羰基碳δ174.3，168.9，168.2。
實施例51(HO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc將(EtO)2PO＝CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例53)。60mg(92mmol)溶于3ml的CH3CN。加入0.15ml三甲基甲硅烷基溴化物，并將混合物放置在室溫下21小時。蒸發后，NMR分析發現還存在一些酯。粗產物再溶于3ml的CH3CN中并加入0.15ml的三甲基甲硅烷基溴化物。5小時后，蒸發混合物，用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，30∶70)，過濾，蒸發和冷凍后，得到最后的化合物，產率8%。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.8-1.1(m，2H)，1.15-1.4(m，4H)，1.5-1.9(m，10H)，1.9-2.1(m，4H)，1.96(s，乙酸酯)，2.20(m，1H)，2.95(m，1H)，3.0-3.2(m，3H)，3.4-3.5(m，2H)，4.09(m，1H)，4.39(bd，1H)，4.59(m，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.6羰基碳δ174.2，170.6。
實施例52EtO(HO)P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc(ⅰ)(EtO)(HO)PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)。
將(EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例53)，50mg(77mmol)溶于2ml EtOH和2ml 2M NaOH中。混合物攪拌過夜并蒸發。粗產物用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，30∶70)純化，過濾和蒸發溶劑后得到標題化合物。
(ⅱ)(EtO)2(HO)PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(c)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.9-1.1(m，2H)，1.15-1.35(m，6H;它的1.28(t，3H))，1.35-1.5(m，2H)，1.5-1.6(m，1H)，1.65-1.8(m，6H)，1.9-2.1(m，3H)，1.95(s，乙酸酯)，2.19(m，1H)，2.80-3.0(m，2H)，3.1-3.25(m，2H)，3.27(m，1H)，3.36(m，1H)，3.48(m，1H)，3.9-4.05(m，4H)，4.36(bd，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.6羰基碳δ175.0，174.7實施例53(EtO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)(EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)。
將H-(R)Cha-PRO-Nag(Z)(參見實施例20)，0.2g(0.40mmol)，溶于5ml THF中，加入0.11g(0.80mmol)的羰酸鉀和0.12g(0.40mmol)三氟甲磺酰基磷酸二乙基酯。混合物在室溫下攪拌2h，用水結束反應，用EtOAc提取水層三次。合并的有機層干燥(Na2SO4)并蒸發得到0.14g(53%)的標題化合物。
(ⅱ)(EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc在上述產物(ⅰ)上，用去保護方法(c)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-1.05(m，2H)，1.15-1.3(m，5H)，1.34(t，6H)，1.5-1.85(m，8H)，1.9-2.05(m，3H)，1.91(s，乙酸酯)，2.10(m，1H)，2.22(m，1H)，2.90(dd，1H)，3.05(dd，1H)，3.1-3.3(m，3H)，3.42(m，1H)，3.53(m，1H)，3.71(dd，1H)，3.82(m，1H)，4.1-4.2(m，4H)4.28(dd，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.7羰基碳δ176.1，175.1。
實施例54HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Mag x HOAc(ⅰ)H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH(Z)從Boc-(R)Cha-Pro-OSu和H2N-(CH2)2-NH(Z)制備。采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH2x HOAc如實施例4中烷基化，然后通過去保護方法(a)，得到標題化合物。
(ⅲ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc采用實施例19中所述的制備Z-(R)Cha-Pro-Nag的相同方法，胍化上述的胺，接著用去保護方法(e)，用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，1/4)純化合并冷凍干燥(H2O)得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.90-1.18(m，2H)，1.19-1.43(m，3H)，1.52(m，6H)，1.63-2.20(m，10H)，2.06(s，乙酸酯)，2.31-2.47(m，1H)，3.44(m，2H)，3.50(m，2H)，3.60-3.75(m，3H)，3.85(m，1H)，4.46-4.54(m，2H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.82;羰基碳δ168.80，171.41，174.81。
實施例55H-(R，S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm x 2 TFA從Boc-(R，S)Pro(3-Ph)-Pro-OSu(參見制備的起始物)制備，采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，接著用去保護方法(b)。
1H-NMR(500MHz，D2O，具有未知相關立體化學的兩種非對映體混合物)δ1.0-1.8(m，7H)，2.0-2.5(m，3H)，2.8-4.3(m，10H)，4.56(d，1H，較多的)，4.90(d，1H，較多的)，7.2-7.5(m，5H)。
13C-NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.36較少的和較多的);羰基碳δ174.1(較多的)，174.0(較少的)，167.8(較多的)，167.0(較少的)。
實施例56H-(R，S)Pro-(3-(反)Ch)-Pro-Agm x 2 TFA
從Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ch)-Pro-OSu(參見制備的起始物)制備。采實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，接著用去保護方法(b)。
1H-NMR(500MHz，D2O，兩種非對映體混合物，比例，1.8/1)δ0.95-1.32(m，5H)，1.35-1.46(m，1H)，1.50-1.92(m，10H)，1.93-2.15(m，4H)，2.23-2.43(m，2H)，3.15-3.30(m，4H)，3.35-3.50(m，2H)，3.57-3.68(m，1H)，3.74-3.82(m，1H)，4.34-4.41(m，1H)，4.51(d，1H，較少的)，4.48(d，1H，較多的)。
13C-NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.36較少的和較多的);羰基碳δ174.34(較多的)，174.07(較少的)，168.94(較少的和較多的)。
實施例57HOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-Agm x 2 TFA(ⅰ)H-(R，S)Pro(3-(反)Ch)-Pro-Agm(Z)從Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OSu(參見制備的起始物)制備。采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-Agm x 2 TFA如實施例4中，用Br-CH2COOBn烷基化，接著用去保護的方法(b)，得到二種非對映體混合物的標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD，兩種非對映體混合物，比例大約1.1/1)δ1.40-1.80(m，6H)，1.85-2.05(m，1H)，2.10-2.30(m，1H)，2.50-2.65(m，2H)，3.10-3.40(m，6H)，3.50-3.70(m，2H)，3.9-4.40(m，4H)，4.63(d，1H，較多的)，4.67(d，1H，較少的)7.30-7.60(m，5H)。
13C-NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.52所有異構體);羰基碳δ173.87，173.73，169.12，168.94，167.21，167.00。
實施例58HOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-Nag x 2 TFA(ⅰ)H-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-Nag(Z)從Boc-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-OSu(參見制備的起始物)和Boc-Nag(Z)制備，采實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(反)Ph)-Pro-Nag x 2 TFA如實施例4中，用Br-CH2COOBn烷基化，接著用去保護的方法(b)，得到如兩種非對映體混合物的標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD，兩種非對映體混合物，比例大約1.5/1)δ1.40-1.85(m，4H)，1.90-2.00(m，1H)，2.10-2.30(m，1H)，2.45-2.70(m，2H)，3.08-3.46(m，6H)，3.57-3.70(m，2H)，3.90-4.0(m，1H)，4.32-4.40(m，1H)，4.04和4.29(AB-四，2H，較多的)，4.16和4.37(AB-四，2H，較少的)，4.60(d，1H，較多的)，4.64(d，1H，較少的)，7.33-7.6(m，5H)。
13C-NMR(125.76MHz，D2O)胍δ157.48所有異構體);羰基碳δ173.90，173.71，169.01，168.94，167.07(所有異構體)。
實施例59HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA(ⅰ)H-(R)ChA-Pic-Agm(Z)從BOC-(R)Cha-Pic-OSu(參見制備的起始物)制備，采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA如實施例4中，采用Br-CH2COOBn烷基化，接著用去保護的方法(a)，得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ1.02(m，2H)，1.13-2.00(m，20H)，2.24(bd，1H)，3.12-3.45(m，5H)，3.71(bd，1H)，3.87(s，2H)，4.65(bt，1H)，5.06(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.47;羰基碳δ169.42，170.03，172.71。
實施例60HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R，S)Pic-Agm x HOAc(ⅰ)Me-(R)Cha-(R，S)Pic-Agm(Z)從BOC-(Me)(R)Cha-Pic-OSu制備，采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R，S)Pic-Agm x HOAc如實施例4中，用Br-CH2COOBn烷基化，接著用去保護的方法(b)，得到標題化合物。
注釋在合成中，某處出現Pic的差向異構表異構化。
1H-NMR是復合譜，由兩個大約1∶1比例的非對映體和它的旋轉異構體組成。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.75-2.15(幾個m，20H)1.95(bs，乙酸酯)，2.2-2.7(6H，兩個不清楚的信號，觀察到的比例大約1∶1;它的2.35和2.55(s，3H))，3.0-3.5(m，6H)，3.9-4.17(m，2H;它的4.14(dd))，4.4-4.5(m，1H)，4.97-5.15(二個bdd，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.50;羰基碳δ169.65，170.01，170.54，172.67，172.89。
實施例61HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm x TFA如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pic-Agm(Z)(參見實施例59)和Br-CH(Me)COOBn烷基化，然后用去保護的(a)，得到兩種非對映體混合物的標題化合物。
實施例62HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a x 2 TFA采用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，1/3)分離實施例61形成的非對映體，接著蒸發溶劑并從H2O/TFA中冷凍干燥而得到。柱中出現的二個峰的第一個是非對映體。
1H-NMR(300MHz，D2O，2旋轉異構體大約5∶1比例)δ0.70(m，較少的旋轉異構體)，0.75-1.0(m，2H)，1.0-1.28(m，3H)，1.28-1.83(m，20H;它的1.57(d，3H))，2.14(bd，1H)，2.92(t，較少的旋轉異構體)，3.03-3.32(m，5H)，3.59(bd，1H)，3.85(q，較少的旋轉異構體)，3.98(q，1H)，4.30-4.50(m，較少的旋轉異構體)，4.54(m，1H)，4.95(s，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.39;δ172.26(2碳)，169.92。
實施例63HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b x 2 TFA在實施例61形成的化合物上，采用實施例62所述的相同的方法，獲得標題化合物。從柱中出現的第二個峰是本非對映體。
1H-NMR(500MHz，D2O，2旋轉異構體大約5∶1比例)δ0.72(m，較少的旋轉異構體)，0.82(m，較少的旋轉異構體)，0.97(m，2H)，1.0-1.23(m，3H)，1.23-1.40(m，2H)，1.40-1.83(m，18H;它的1.63(d，3H))，2.11(d，1H)，2.17(d，較少的旋轉異構體)，2.92(t，較少的旋轉異構體)，3.05-3.25(m，4H)，3.29(t，1H)，3.74(d，1H)，4.02(q，1H)，4.34(d，較少的旋轉異構體)，4.41(dd，較少的旋轉異構體)，4.52(t，1H)，4.95(s，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ154.68;羰基碳δ169.81，169.60，167.36。
實施例64HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA采用實施例15中所述的制備HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Ag的相同方法，從H-(R)Cha-Pic-Agm(Z)制備，用1.2eq的丙烯酸苯甲基酯代替1.1eq。
1H-NMR(500MHz，D2O，2旋轉異構體大約4∶1比例)δ0.70-0.90(m，較少的旋轉異構體)，0.90-1.0(m，2H)，1.05-1.25(m，3H)，1.30-1.45(m，2H)，1.45-1.85(m，15H)，2.1(bd，1H)，2.2(bd，較少的旋轉異構體)，2.75(t，2H)，2.95(t，較少的旋轉異構體)，3.1-3.4(m，7H)，3.75(bd，1H)，4.55(t，1H)，4.95(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.48;羰基碳δ170.10，172.58，174.75。
實施例65H-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(ⅰa)采用實施例3中所述的制備Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，以Boc-(R)Cha-Pic-OSu作為起始物制備。
(ⅰb)從Boc-(R)Cha-Pic-OH起始制備。
將二苯基磷酰基疊氮化物(0.432ml，2mmol)加入到-5℃的，Boc-(R)Cha-Pic-OH(765mg，2mmol)的攪拌溶液中。10分鐘后，加入H-Nag(Z)x 2 HCl(600mg 2.1mmol，參見分離的起始物)的5ml DMF溶液和三乙基胺(615mg，4.4mmol)。保持反應混合物在冰浴中3h，然后在室溫下12小時，此后，將其倒入水中。提取水相并真空蒸發溶劑1.18g(96%)得到如非對映體混合物(Pic上差向異構體)1.18g(96%)的產物，其比例為97∶3(RS/RF)。
(ⅰc)從Boc-(R)Cha-Pic-OH起始在-15℃下，將EDC氫氯化物(4.2g，21.9mmol)加入到Boc-(R)Cha-Pic-OH(8g，20.9mmol)，DMAP(10.6g，88mmol)和H-Nag-(Z) x HCl(6.3g，19.5mmol，參見制備的起始物)的乙腈溶液中，在16小時中，使反應混合物升至室溫，真空除去溶液，殘留物溶于乙酸乙酯中，用水，0.3M KHSO4，0.3M NaHCO3，水和鹽水洗滌，接著通過干燥(Na2SO4)和蒸發溶劑得到如非對映體混合物(Pic上的差而異構體)的11.9g(92.5%)的產物，其比例為98/2(RS/RR)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.85-2.0(m，29H;它的1.40bs，9H))，2.46(bd，1H)，3.1-3.4(m，5H)，3.92(bd，1H)，4.53(bq，1H)，5.10(s，2H)，5.22(bs，1H)，5.29(bd，1H)，6.7-7.2(b，3H)，7.25-7.45(m，5H)。
13C-NMR(125MHz，CDCl3)胍δ156.9;羰基碳δ173.6，170.3，163.7，161.7。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)如實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，以Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)作為起始物制備。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-2.0(m，22H)，2.24(bd，1h)，3.1-3.4(m，5H)，3.72(bd，1H)，3.84(bq，1H)，5.05(bd，1H)，5.08(s，2H)，7.3-7.5(m，5H)。
(ⅲ)H-(R)Cha-Nag x 2 TFA在產物(ⅱ)上，采用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.9-1.1(m，2H)，1.2-2.0(m，18H)，2.32(bd，1H)，3.20(t，2H)，3.30(t，2H)，3.36(m，1H)，3.69(bd，1H)，4.49(dd，1H)，5.05(bd，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.7;羰基碳δ172.7，171.4實施例66Me-(R)Cha-(R，S)Pic-Nag x 2 TFA(ⅰ)Me-(R)Cha-(R，S)Pic-Nag(Z)采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法，從BOC-(Me)(R)Cha-Pic-OSu和Boc-Nag(Z)起始制備。在合成中Pic出現差向異構表異構化，獲得兩個非對映體的混合物。
(ⅱ)Me-(R)Cha-(R，S)Pic-Nag x 2 TFA采用去保護方法(b)制備。
1H-NMR譜是復合的由兩種比例大約為4∶1的非對映體組成和它的旋轉異構體。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.8-1.08(m，2H)，1.15-2.4(幾個m，19H)，2.6-2.75和2.9-2.95(幾個s，3H)，3.1-3.6(幾個m，5H)，3.75-4.1(幾個m，1H)4.4-4.7(幾個m，1H)，5.05-5.15(二dd，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ154.84;羰基碳δ167.60和169.99。
實施例67HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)如實施例4中采用H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例65)和Br-CH2COOBn烷基化得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.7(m，19H)，1.79(bd，1H)，2.3-2.5(m，2H;它的2.38(bd，1H))，3.00(bt，1H)，3.1-3.4(m，5H;它的3.38(d，1H))3.58(d，1H)，3.67-3.7(m，2H)，5.06(dd，2H)，5.07(s，2H)，5.16(bs，1H)，6.7-7.1(b，1H)，7.15(bs，1H)，7.2-7.4(m，10H)。
13C-NMR(125MHz，CDCl3)胍和羰基碳δ176.0，173.6，170.8，163.8，161.7。
(ⅱa)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HCl采用去保護方法(a)接著用RPLC純化，用CH3CN/0.1MNH4OAc，1/3作為洗脫劑，在40-50℃蒸發并冷凍干燥，得到標題化合物的乙酸酯。用20-倍的過量鹽酸處理，蒸發并重新冷凍干燥得到所需化合物的二氫氯化物。
1H-NMR(500MHz，D2O，兩種旋轉異構體的混合物)δ0.7-2.0(m，20H)，2.17(bd，1H)，2.95(t，較少的旋轉異構體)，3.17(t，2H)，3.25-3.35(m，3H)，3.72(bd，1H)，3.86(dd，較少的旋轉異構體)，3.90(s，2H)，4.72(t，1H)，4.99(bs，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.4;羰基碳δ169.9，170.2，173.0。
(ⅱb)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HBr將BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)溶于iPr-OH/H2O(95/5)中，在大氣壓下，HBr(2.2eq)存在下用5% Pb/c充分氫化。過濾掉催化劑，蒸發溶劑，得到黃色油。(可選擇的，氫化和過濾后可加入酸)，從iPr-OH(或EtOH)/EtOAc(1/1)結晶，得到如白色結晶粉末的標題化合物。
1H-NMR(500MHz，D2O，兩種旋轉異構體的混合物)δ1.15-2.0(m，20H)，2.30(bd，1H)，3.30(m，2H)，3.40-3.50(m，3H)，3.85-3.90(m，1H)，3.95(出現s，2H)，4.75 4.85(m，1H，被H-O-D線部分掩蔽)，5.10(bs，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.6;羰基碳δ169.7，170.2，173.0。
實施例68MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA在上通過iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例69)的酯化轉移作用，得到MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的甲基酯，在內色譜期間，用CH2Cl2/MeOH作為洗脫劑。通過去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.95-1.15(m，2H)，1.2-1.6(m，6H)，1.65-2.0(m，13H)，2.25(bd，1H)，3.21(t，2H)，3.30(t，2H)，3.37(m，1H)，3.71(m，1H)，3.83(s，3H)，3.97(dd，2H)，4.67(bt，1H)，5.05(bs，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ158.0;羰基碳δ173.0，171.1，168.3。
實施例69iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA如實施例4中所述采用H(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例65)和Br-CH2-COOiPr烷基化，接著用去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.95-1.1(m，2H)，1.15-1.16(m，12H;它的1.25(d，3H)，1.28(d，3H))，1.65-1.95(m，12H)，2.28(bd，1H)，3.21(t，2H)，3.30(t，2H)，3.36(m，1H)，3.93(dd，2H)，4.67(t，1H)，5.04(bs，1H)，5.11(戊，1H)。
13C-NMR(125MHz，MeOD)胍δ157.9;羰基碳δ173.1，171.0，168.3。
實施例70HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/b x 2 TFA如實施例4中所述，采用Me(R)Cha-(R，S)Pic-Nag(Z)(參見室施例66)和Br-CH2-COOBn烷基化，通過去保護方法(b)得到HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R，S)Pic-Nag。用RPLC(CH3CN/NH4OAC，1∶3)分離兩種非對映體，接著從H2O/TFA中冷凍干燥。從柱中出現的兩個峰的最后一個是本非對映體。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.9-1.1(m，2H)，1.15-1.35(m，4H)，1.4-1.55(m，2H)，1.6-1.85(m，12H)，2.3(m，1H)，2.85(s，3H)，3.15-3.45(m，5H)，3.65(bs，2H)，4.0(m，1H)，4.65(m，1H)，5.08(dd，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.65;羰基碳δ169.86和172.48。
實施例71HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-(R，S)Pic-Nag x 2 TFA如實施例4中所述，采用H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例65)和Br-CH(Me)-COOBn烷基化，接著用去保護方法(a)得到標題化合物。
實施例72HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/c x 2 TFA采用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，1/4)分離實施例71中形成的非對映體，接著蒸發并從H2O/TFA中冷凍干燥而獲得，從柱中出現的四個峰的第三個是本非對映體。
1H-NMR(300MHz，D2O，2旋轉異構體大約5∶1比例)δ0.88(m，較少的旋轉異構體)，0.98-1.63(m，7H)，1.63-2.02(m，16H;它的1.68(d，3H))，2.28(m，1H)，3.10(t，較少的旋轉異構體)，3.25-3.50(m，5H;它的3.33(t，2H)和3.43(t，2H))，3.82(bd，1H)，4.02(q，1H)，4.55(d，較少的旋轉異構體)，4.65(d，較少的旋轉異構體)，4.72(m，1H)，5.10(m，1H)。
實施例73HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/d x 2 TFA采用RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，1∶4)分離實施例71形成的非對映體，接著通過蒸發和用H2O/TFA中冷凍干燥獲得，柱中的四個非對映體中，最后出現是本非對映體。
1H-NMR(500MHz，D2O，2旋轉異構體大約5∶1比例)δ0.80(m，較少的旋轉異構體)，0.90(m，較少的旋轉異構體)，1.03(m，2H)，1.10-1.33(m，3H)，1.42(m，2H)，1.51-1.92(m，16H;它的1.57(d，3H))，2.18(d，1H)，2.24(d，較少的旋轉異構體)，2.98(t，較少的旋轉異構體)，3.21(t，2H)，3.28-3.40(m，5H;它的3.44(t，2H))，3.82(d，1H)，4.02(q，1H)，4.42(d，較少的旋轉異構體)，4.50(t，較少的旋轉異構體)，4.62(t，1H)，4.67(s，較少的旋轉異構體)，5.03(s，1H)。
實施例74HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA從H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例65)制備，采用實施例15中所述的制備HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm的相同方法，用1.2eq的丙烯酸苯甲基酯代替1.1eq。
1H-NMR(500MHz，D2O，2旋轉異構體大約4∶1比例)δ0.7-0.9(m，較少的旋轉對映體)，0.9-1.0(m，2H)，1.05-1.3(m，3H)，1.3-1.45(m，2H)，1.05-1.8(m，13H)，2.10(d，較少的旋轉異構體)，2.75(t，2h)，2.95(t，較少的旋轉對映體)，3.15(t，2H)，3.2-3.35(m，5H)，3.75(d，1H)，4.55(t，1H)，4.95(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.57;羰基碳δ170.16，172.82，174.75。
實施例75HOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Mor-Agm x 2 TFA
(ⅰ)H-(R)Cha-Mor-Agm(Z)從Boc-(R)Cha-Mor-OSu(參見制備的起始物)制備，采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Mor-Agm x 2 TFA如實施例4中，采用Br-CH2COOBn烷基化，接著用去保護的方法(b)得到標題化合物。在合成中，Mor的某些地方出現差而異構表異構化，且觀察終產物是大約9∶1的兩種非對映體的混合物1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.92-1.95(m，17H)，3.12-3.39(m，4H)，3.44-4.05(m，7H)，4.37(d，1H)，4.63(m，1H)，4.79(bd，1H)。
13C-NMR(75.47MHz，MeOD)胍δ158.63;羰基碳δ170.87，170.82，169.08其它的δ69.06，67.01(C-O-C)。
實施例76HOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Mor-Nag x 2 TFA(ⅰ)H-(R)Cha-Mor-Nag(Z)從Boc-(R)Cha-Mor-OSu(參見制備的起始物)制備和Boc-Nag(Z)制備，采用實施例3中所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)的相同方法。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Mor-Nag x 2 TFA如實施例4中所述，采用Br-CH2COOBn烷基化，接著用去保護的方法(b)得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.92-1.13(m，2H)，1.15-1.42(m，3H)，1.50(br.s，1H)，1.62-1.95(m，9H)，3.14-3.40(m，4H)，3.46-4.13(m，7H)4.41(d，1H)，4.63(m，1H)，4.80(br.d，1H)。
13C-NMR(75.47MHz，MeOD)胍δ158.68;羰基碳δ171.19，170.90，169.46。其它的δ68.81，67.00(C-O-C)。
實施例77H-(R)Cha-Aze-Nag x 2 HOAc(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-Nag(Z)根據實施例65(ⅰc)中所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的相同方法，從Boc-(R)Cha-Aze-OH制備。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Nag(Z)如所述制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅲ)H-(R)Cha-Aze-Nag x 2 HOAc在上述產物(ⅱ)上，采用去保護方(a)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.85-1.10(m，2h)，1.10-2.04(m，13H)，1.95(s，乙酸酯)，2.20-2.37(m，1H)，2.60-2.82(m，1H)，3.15-3.40(m，4H)，3.96-4.15(m，2H)，4.18-4.30(m，1H)，4.30-4.42(m，1H)，較少的旋轉異構體的信號出現在δ0.70，3.90和5.10。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.39和羰基碳δ170.22和172.38。
實施例78
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag x HOAc(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag(Z)根據描述于實施例4中的方法，從H-(R)Cha-Aze-Nag(Z)(參見實施例77)制備。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag x HOAc在上述產物(ⅰ)上，采用去保護(a)制備。
1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.90-1.10(m，2h)，1.15-2.00(m，13H)，1.95(s，乙酸酯)，2.20-2.30(m，1H)，2.58-2.70(m，1H)，3.17-3.30(m，4H)，3.35-3.50(m，2H)，3.55-3.68(m，1H)，4.10-4.20(m，1H)，4.30-4.38(m，1H)，4.65-4.77(m，1H)，較少的旋轉異構體的信號出現在δ3.75，3.98，4.03和5.08。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.40和羰基碳δ169.16，171.92和172.13。
實施例79H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)采用所述的聯結Boc(R)Cha-OH和H-Pic-OEt x HCl(參見制備的起始物)的相同方法，用來完成(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-OH和H-Nag(Z)x 2 HCl之間的聯接。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)采用所述的合成H-(R)-Cgl-Pic-Nag(Z)(參見實施例84(ⅱ))的相同方法。
(ⅲ)H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HCl
在上述產物(ⅱ)上，采用去保護方法(d)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.0-2.3(m，21H)，它的1.47(d，3H)，2.4-2.55(m，1H)，3.3-3.6(m，4H)，4.30(bt，1H)，4.38(dd，1H)，4.47(bt，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.6;羰基碳δ174.6，169.6。
實施例80HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HOAc如實施例4中，采用H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)(參見實施例79)和Br-CH2-COOBn烷基化，接著用去保護方法(a)得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.9-1.9(m，19H);它的1.34(bd，3H)，1.93(s，乙酸酯)，2.0-2.2(m，3H)，2.34(m，1H)，3.1-3.5(m，7H)，3.97(m，1H)，4.20(m，1H)，4.31(bt，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.4。
實施例81HOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Pic(4，5-去氫)-Nag/b x HOAc(ⅰ)Boc-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-Nag(Z)從Boc-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-OH制備，采用所述的制備BOC-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的相同方法(參見實施例65(ic))。
(ⅱ)H-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-Nag(Z)采用所述的H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-Nag(Z)根據實施例4所述的方法，從H-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-Nag(Z)制備。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Pic(4，5-去氫)-Nag/b x 2 HOAc將356mg(0.539mmol)的BnOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-Nag(Z)，10.8mL三氟乙酸和3.4ml的混合物，在室溫下攪拌3.5小時。加入水且混合物用CH2Cl2洗滌二次，蒸發溶劑得到HOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Pic(4，5-去氫)-Nag。通過RPLC(CH3CN/NH4OAc(0.1M)，3/7)分離非對映體，并在蒸發溶劑后，冷凍干燥(H2O)獲得標題化合物，從柱中出現的兩個峰的第二個是本非對映體。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.85-1.95(m，15H)，2.50-2.80(m，2H)，3.25(t，2H)，3.35(t，2H)，3.55(bs，2H)，3.85-4.6(m，3H)，4.92(較少)，5.30(d，1H)，5.85-6.1(m，2H)，13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.59;和羰基碳δ171.46，172.58，173.03。
實施例82HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag x 2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)從Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-OH制備，根據實施例65的方法(ic)，采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的相同方法制備。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
如所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)根據描述于實施例4中的方法，從H-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag制備。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag x 2 HCl在上述產物(ⅲ)上，采用去保護方法(d)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.95-2.05(m，22H;它的1.05(d，3H))，2.30-2.38(bd，1H)，3.28-3.36(m，2H)，3.36-3.50(m，3H)，3.85-3.95(m，1H)，3.98(s，2H)，4.70-4.90(m，1H;部分掩蔽在HOD信號的后面)，5.22-5.27(d，1H)，較少的旋轉異構體的信號出現在δ0.93，3.13和4.57。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.58;羰基碳δ170.12，170.32和172.82。
實施例83HOOC-CH2-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)從Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-OSu和Boc-Nag(Z)制備，采用如Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅱ)H-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)如所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
根據描述于實施例4中的方法，從H-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)制備。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HCl在上述產物(ⅲ)上，采用去保護方法(d)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.00-2.05(m，22H)，2.18-2.26(bd，1H)，3.28-3.36(m，2H)，3.36-3.55(m，3H)，3.85-4.05(m，3H)，4.70-4.90(m，1H;部分掩蔽在HOD信號的后面)，5.25-5.30(d，1H)，較少的旋轉異構體的信號出現在δ2.40，2.90，4.10，4.42，4.55和5.23。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ157.56;和羰基碳δ169.69，169.84和173.20。
實施例84HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag x 2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)從Boc-(R)Cgl-Pic-OH制備，根據實施例65的方法(ic)，如所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的相同方法制備。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.9-1.8(m，27H)，2.4(d，1H)，3.1-3.3(m，5H)，3.9(d，1H)，4.2(t，1H)，5.1(s，2H)，5.2(bd，2H)，6.7-7.4(m，9H)。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)將氯化氫氣體通入Boc-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)(1.38g，2.22mmol)的乙酸乙酯溶液中。10分鐘后蒸發溶劑，殘留物溶于乙酸乙酯和10% Na2CO3中。分離有機相，用鹽水洗滌并干燥(MgSO4)。蒸發溶劑得到1.02g(92%)的標題化合物。
1H-NMR(300MHz，MeOD)δ1.0-1.9(m，18H)，2.2-2.3(m，1H)，3.2-3.3(m，5H)，3.6(d，1H)，3.8-3.9(bd，1H)，4.2(t，1H)，4.7-4.8(bs，5H)，5.1(s，2H)，5.2(s，1H)，7.2-7.3(m，5H)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)在-25℃，將苯甲基乙二醇三酯(291mg，0.98mmol)的CH2Cl2(2ml)溶液，加入到H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)(0.52g，1.04mmol)和K2CO3(494mg，3.58mmol)的乙腈(5ml)和CH2Cl2(1ml)的攪拌混合物中，兩個小時之間使溫度升至室溫，且5天后，用水稀釋反應混合物，并用EtOAc和甲苯提取。干燥有機相(MgSO4)，濃縮溶液，得到319mg(47%)無色晶體。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.0-1.1(m，1H)，1.1-1.3(m，4H)，1.35-1.6(m，5H)，1.6-1.85(m，8H)，1.8-2.2(bs，1H)，2.23-2.5(m，2H)，2.9(t，1H)，3.1-3.5(m，6H)，3.6-3.7(m，2H)，5.0-5.1(m，4H)，5.2(s，1H)，6.5-7.4(m，13H)。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag x 2 HCl將BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)(319mg，0.49mmol)溶于加熱的異丙醇(50ml)和水(5ml)，并用10% Pd/c(228mg)充分氫化24h。過濾和蒸發溶劑后，接著溶于稀鹽酸中并冷凍干燥，分離如白色粉末狀的肽(223mg，91%)。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.1-2.1(m，18H)，2.3(d，1H)，3.3(t，2H)，3.4(t，3H)，3.85-4.05(m，3H)，4.6(d，1H)，5.15(s，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.43;羰基碳δ169.2，172.94。
實施例85H-(R)Hoc-Pro-Nag x 2 TFA(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)從Boc-(R)Hoc-Pro-OH制備，根據實施例65(ic)中所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的相同方法。
(ⅱ)H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)如所述的制備H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅲ)H-(R)Hoc-Pro-Nag x TFA在產物(ⅱ)上，采用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.90-1.05(m，2H)，1.16-1.48(m，6H)，1.48-1.84(m，6H)，1.84-2.24(m，6H)，2.40(m，1H)，3.25-3.45(m，4H)，3.74(m，1H)，3.85(m，1H)，4.42(m，1H)，4.51(m，1H)。
實施例86HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag x HOAc(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)根據實施例4中敘述的方法，從H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)(參見實施例85)制備。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag x HOAc
在上述產物(a)上，采用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.76-0.97(m，2H)，1.00-1.37(m，6H)，1.50-2.12(m，12H)，1.89(s，乙酸酯)，2.27(m，1H)，3.10-3.33(m，4H)，3.41(bs，2H)，3.61(m，1H)，3.77(m，1H)，4.12(m，1H)，4.37(m，1H)。
13C-NMR(75MHz，D2O)胍δ157.4;羰基碳δ170.08，173.9，174.5。
實施例87HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag x HOAc(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)從Boc-(R)Hoc-Pic-OH制備，根據實施例65的方法(ic)，采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)的相同方法制備。
(ⅱ)H-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)采用所述的制備H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)(參見實施例3)的相同方法制備。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)根據如實施例4所述的方法制備。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag x HOAc在上述產物(ⅲ)上，用去保護方法(a)制備。
1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.75-0.95(m，2H)，1.00-1.30(m，6H)，1.30-1.50(m，2H)，1.50-1.82(m，12H)，1.82-1.95(bs，乙酸酯)，2.23(bd，1H)，3.08-3.32(m，6H)，3.52(bs，2H)，3.77(bd，1H)，4.50(bs，1H)，5.00(bs，1H)。
實施例88HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x 2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Dph-Pic-Nag(Z)從Boc-(R)Dph-Pic-OH制備，采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例65(ic))的相同方法。
(ⅱ)H-(R)Dph-Pic-Nag(Z)采用所述的制備H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)(參見實施例84(ⅱ))的相同方法制備。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag(Z)根據實施例4中所述的方法，從H-(R)Dph-Pic-Nag(Z)制備。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x 2 HCl在上述產物(ⅲ)上，用去保護方法(d)制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.46(m，1H)，1.2-1.35(m，2H)，1.45(m，1H)，1.53(m，1H)，1.89(戊，2H)，2.03(bd，1H)，3.24(bt，1H)，3.29(t，2H)，3.38(t，2H)，3.72(d，1H)，3.78(d，1H)，3.79(m，1H)，4.68(d，1H)，4.89(m，1H)，5.73(d，1H)，7.4-7.6(m，6H)，7.65(t，2H)，7.81(d，2H)。
實施例89HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x HOAc(ⅰ)Boc-(R)Dch-Pic-Nag(Z)從Boc-(R)Dch-Pic-OH制備，采用所述的制備Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)(參見實施例65(ic)中)的相同方法。
(ⅱ)H-(R)Dch-Pic-Nag(Z)采用所述的制備H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)(在實施例84(ⅱ)中)的相同方法制備。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag(Z)根據實施例4中所述的方法，從H-(R)Dch-Pic-Nag x HOAc制備。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag x HOAc通過去保護作在上述(ⅲ)產物中制備。
1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.2-2.0(m，30H)，2.09(s，乙酸酯)，2.30(bd，1H)，3.32(t，2H)，3.4-3.5(m，3H)，3.65(d，1H)，3.70(d，1H)，3.86(bd，1H)，4.86(m，1H)，5.09(m，1H)。
13C-NMR(125MHz，D2O)胍δ159.4;羰基碳δ172.5，173.3，174.9。
實施例P1非腸道給藥的溶液以下述成分制備溶液HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HBr 5g注射用氯化鈉 9g乙酸 3g注射水至1000ml將活性成分，氯化鈉和乙酸溶于水中。用2M NaOH將PH調節至PH3-7。通過消毒的0.2μm濾器過濾溶液，并無菌地倒入消毒的安瓿瓶。
實施例P2
口服給藥的片劑以下述成分制備1000片凝血酶抑制劑 100g乳糖 200g聚乙烯吡咯烷酮 30g微晶纖維素 30g硬脂酸鎂 6g將活性成分和乳糖與聚乙烯吡咯烷酮的水溶液混合。干燥混合物并磨成顆粒。然后混合微晶纖維素，再混合硬酯酸鎂。然后將混合物用壓片機，壓出1000片，每片含有100mg的活性成分。
生物學測定凝血酶的凝固時間和IC50TT將人體凝血酶(T 6769，Sigma Chem Co)PH 7.4的100μl的緩沖溶液，和100μl抑制劑溶液，溫育一分鐘。匯合入正常的人體血漿檸檬酸鹽，100μl加入后，用自動設備(KC 10，Amelung)測定凝固時間。
按秒計算的凝固時間，相對抑制濃度繪圖應用內推法測定LC50TT。
LC50TT是兩倍于人體血漿凝血酶凝固時間的抑制劑濃度。pIC50TT是以mol/l為單位的IC50TT的-log 10。本發明中優選的化合物具有的pIC50TT在6.6-8.2之間。
測定活化部分凝血激活的時間(APTT)。
匯合正常人體血漿檸檬鹽和由Stago制造的PTT Automated 5試劑。將抑制劑加入到血漿中(10μl抑制劑溶液對90μl血漿。并測定混合物的APTT，根據試劑生產者的建議，采用凝血分析儀KC10(Amelung)測定。按秒計的凝固時間，相對血漿的抑制劑濃度作圖。應用內推法確定IC50APTT。
IC50APTT定義為兩倍于活化部分凝血激活酶時間的血漿中的抑制劑濃度，pIC50APTT是以mol/l計的IC50APTT的-log 10。實驗中顯示的pIC50APTT在5.1-6.4之間的那些本發明化合物是優選的。
縮寫詞Agm＝胍基丁胺Agm(Z)＝四-N-苯甲氧羰基胍基丁胺AA1＝氨基酸1AA2＝氧基酸2Aze＝(S)-氮雜環丁烷-2-羧酸BLa＝α-取代的丁內酯Boc＝叔丁氧羰基Brine＝飽和的水/NaCl溶液Bu＝丁基Bn＝苯甲基Cgl＝(S)環己基甘氨酸Ch＝環己基Cha＝(S)-β-環己基丙氨酸CME-CDI＝N-甲-P-甲苯磺酰1-環己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺DCC＝二環己基碳化二亞胺Dch＝二環己基丙氨酸
DMAP＝N，N-二甲基氨基吡啶DMF＝二甲基甲酰胺DMSO＝二甲基亞砜Dph＝(S)-二苯基丙氨酸EDC＝氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺Et＝乙基EtOAc＝乙酸乙酶HOAc＝乙酸HOBt＝N-羥基苯并三唑Hoc＝(S)＝碳環己基丙氨酸Hop＝(S)-高苯基丙氨酸HOSu＝N-羥琥珀酰亞胺Mag＝MiniagmatineMe＝甲基Mor＝(S)-嗎啉基-2-羧酸Mpa＝mega pascalNag＝去甲胍基丁胺Nag(Z)＝δ-N-苯甲基氧羰基-去甲胍基丁胺NMM＝N-甲基嗎啉Pgl＝(S)-苯基甘氨酸Ph＝苯基Phe＝(S)-苯基丙氨酸Pic＝(S)-甲基哌啶酸
Pr＝丙基Pro＝(S)-脯氨酸RPLC＝反相高效液相色譜Tf＝三氟甲基磺酰基TFA＝三氟乙酸THF＝四氫呋喃p-TsOH＝對-甲苯磺酸Val＝(S)-纈氨酸Z＝苯甲氧羰基詞頭n，s，i和t具有它們通常的意義正，異，仲和叔。
權利要求
1.通式Ⅰ的化合物
其中A表示亞甲基，或A表示亞乙基且所得的5-元環可以帶或可以不帶有一或二個氟原子，在4位的羥基或氧基，或可以是或可以不是不飽和的，或A表示雜原子官能團在4位的-CH2-O-，-CH2-S-，-CH2-SO-，或A表示n-亞丙基，且所得6-元環在5位可以帶或可以不帶有一個氟原子，羥基或氧基，在4或5位之一帶有兩個氟原子，或在4位和5位是不飽和的，或在4-位帶有1到4碳原子烷基，或A表示-CH2-O-CH2-，-CH2-S-CH2-，-CH2-SO-CH2-；R1表示H，具有1到4碳原子的烷基，具有2-3碳原子的羥基烷基或R11OOC-烷基-，其中烷基具有1到4碳原子且R11是H或具有1-4碳原子的烷基或分子內連接在R1羰基的2位的具有2-3碳原子的亞烷基，或R1表示R12OOC-1，4-苯基CH2-，其中R12是H或具有1到4碳原子的烷基，或R1表示R13-NH-CO-烷基，其中烷基具有1到4碳原子且可以用1到4碳原子的烷基在羰基的α位取代，且其中R13是H或具有1到4碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12定義如上述，或R1表示R12OOC-CH2-OOC-烷基，其中烷基具有1到4碳原子，且可以用具有1到4碳原的烷基在α位取代的羰基，且其中R12定義如上述，或R1表示CH3SO2-，或R1表示R12OCOCO-其中R12如上述定義，或R1表示-CH2PO(OR14)2，-CH2SO3H或CH2-(5-(IH)-四唑)，其中R14是，分別在每次出次H，甲基或乙基；R2表示H或具有1到4碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基具有1到4碳原子且可以在羰基的α位取代，且α取代基是R22-(CH2)p-基，其中P=0-2且R22是甲基，苯基，OH，COOR21，且R21是H或具有1到4碳原子的烷基；m是0，1或2，R3表環己基且R4表示H，或m是1且R3表示環已基或苯基，且R4與R1一起形成亞乙基橋，或m是1且R3和R4分別表示環己基或苯基；R5表示H或具有1到4碳原子的烷基；n是2到6的整數；且B表示-N(R6)-C(NH)-NH2，其中R6是H或甲基，或B表示-S-(CNH)-NH2，或-C(NH)-NH2，或者是上述化合物或是其生理上可接受鹽形式以及其包括的立異構體，
2.根據權利要求1的化合物，其中R1表示R11-OOC-烷基-，其中烷基基團具有1到4碳原子，且R11是H。
3.根據權利要求2的化合物，其中A是亞乙基且R5是H或具有1到4碳原子的烷基。
4.根據權利要求2的化合物，其中A是n-亞丙基且所得的6-元環在4位可以帶或可不帶有1到4碳原子的烷基，且R5是H或具有1到4碳原子的烷基。
5.根據前述一個或多個權利要求的化合物，其中R3是環己基，m是1，2和R4是H。
6.根據前述一個或多個權利要求的化合物，其中n是3。
7.根據前述一個或多個權利要求的化合物，具有在P2位α-氨基酸上具有S-構象。
8.根據權利要求7的化合物，其中在P3位的α-氨基酸具有R-構象。
9.選自下述的化合物H-(R)Cha-Pro-AgmMe-(R)Cha-Pro-AgmHO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-AgmiPrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-AgmHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-AgmHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/aHOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/aHOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/bHOOC-(RorS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/bHOOC-(R，S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-AgmHOOC-(RorS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/aHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-AgmEtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm(R，S)Bla-(R)Cha-Pro-AgmHOOC-(RorS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/bH-(R)Cha-Pro-NagnBu-(R)Cha-Pro-NagHO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-NagEtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagiPrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagtBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagHOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagH2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-NagHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-NagHOOC-CH2-(nBu)(R)Cha-Pro-NagHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/aEtOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(RorS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/aHOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(R，S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NagEtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-NagEtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-NagHOOC-CO-(R)Cha-Pro-NagMeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(R，S)Bla-(R)Cha-Pro-NagHOOC-(R，S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-NagMeOOC-(R，S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-NagHOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(HO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-NagEtO(HO)P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(EtO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-NagHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-MagH-(R，S)Pro(3-Ph)-Pro-AgmH-(R，S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-AgmHOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-AgmHOOC-CH2-(R，S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-NagHOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R，S)Pic-AgmHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-AgmHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/aHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-AgmH-(R)Cha-Pic-NagMe-(R)Cha-(R，S)Pic-NagMeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-NagiPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-NagHOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/bHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-(R，S)Pic-NagHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/cHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-NagHOOC-CH2-(R)Cha-(R，S)Mor-AgmHOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Mor-NagH-(R)Cha-Aze-NagHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-NagH-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-NagHOOC-CH2-(R)Cha-(RorS)Pic(4，5-dehydro)-Nag/bHOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-NagHOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-NagH-(R)Hoc-Pro-NagHOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-NagHOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-NagHOOC-CH2-(R)Dph-Pic-NagHOOC-CH2-(R)Dch-Pic-NagHOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(R，S)Me)-NagHOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-NagH-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-NagHOOC-CH2-(R)Cha-Pic(6-(S)Me)-Nag或是上述化合物或是其生理上可接受的鹽和其包括的立體異構體。
10.選自下述的化合物HOOC-CH 2 -(R)Cha-Pro-AgmHOOC-CH 2 -(Me)(R)Cha-Pro-AgmHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/bHOOC-CH 2 -(R)Cha-Pro-NagHOOC-CH 2 -(R)Cha-Pic-AgmHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/bHOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-(RorS)Pic-Nag/dHOOC-CH 2 -(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-NagHOOC-CH 2 -(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag或是其生理上適合的鹽和其包括的立體異構體。
11.化合物HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag本身或者是其生理上適合的鹽和其包括的立體異構體。
12.化合物HOOC-(RorS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b本身或者是生理上適合的鹽和其包括的立體異構體。
13.化合物HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag本身或是其生理上適合的鹽和其包括的立體異構體。
14.制備權利要求1-13任一化合物的方法，該方法包括將N-末端保護的氨基酸或二肽，或預先形成的N-末端烷基化的被保護的二肽與下式化合物相連接H2N-(CH2)n-X其中n是2到6的整數且X是未保護或被保護的胍基或保護的氨基，或可以轉化成氨基的基團，其中的氨基隨后可以轉化成胍基，且如果需要，形成生理上適合的鹽，且在有情況下其中所得反應物是立體異構體的混合物，如果需要分離單個的立體異構體，可任意地通過常規色譜或重結晶技術分離。
15.根據權利要求14的方法制備權利要求1-13任一權利要求中化合物的方法，其方法包括a)(方法Ⅰ)兩者任一的保護或不保護氨基胍或在烷基的末端帶有保護和掩蔽氨基的直鏈烷基胺和N-末端保護的二肽相連接，采用如下式所示的常規的肽連接方法
其中R3，R4，R5，n，m和A如式Ⅰ中定2，R6是H或烷基，W1是氨基保護基，如叔丁氧羰基和苯甲氧羰基且X是-NH-C(NH)NH2′-NH-C(NH)NH-W2-N(W2)-C(NH)NH-W2′-NH-C(NW2)-NHW2或-NH-W2′其中W2是氨基保護基，如叔丁氧羰基或苯甲氧羰基，或X是蔽掩的氨基如疊氮化合物，得到保護的肽，或b)(方法Ⅱ)連接N-末端保護的氨基酸，和兩者擇一的保護或未保護氨基胍或在烷基末端帶有保護或掩蔽氨基的直鏈烷基胺，采用如下式的常規的肽連接方法
其中W1，A，R5和X如上述定義，接著將W1-基去保護并連接保護形式的N-末端氨基酸，或c)(方法Ⅲ)采用常規的肽連接方法連接預先形成的N-末端烷基化和保護的二肽，和兩者擇一的保護或未保護氨基胍或在烷基鏈末端帶有保護或掩蔽氨基的直鏈烷基胺，采用如下式所述的常規的肽連接方法
其中R2，R3，R4，R5，n，m，A和X如上述定義，除了R2不是H且W3是如三氟酰基的酰基保護基，上述最終的化合物，以下述任一的方法制備，依賴于采用的原來的X-基除去保護基(當X＝-NH-C(NH)NH2，NH-C(NH)NH-W2，-N(W2)-C(NH)NH-W2，-NH-C(NW2)NH-W2)或選擇性地去保護W1-基(例如當X＝-NH-C(NH)NH-W2，-N(W2)-C(NH)NH-W2，-NH-C(NW2)NH-W2，在這種情況下W2必須正交于W1)接著將N-末端氮烷基化并將末端烷基氨基功能團去保護或選擇性地去保護/去掩蔽(X＝NH-W2，W2在這種情況下必須分別和W1和W3正交，或X＝掩蔽的氨基基團，如疊氮化物)接著采用常規的方法，游離胺進行胍化反應，并分別使W1-或W3-基團去保護，且如果需要可形成生理上適合的鹽，且在一些情況下所得反應物是立體異構體的混合物，如果需要分離的單個異構體可住意地采用常規的色譜或重結晶技術分離。
16.下式化合物的的應用
或是以上述化合物或是以其鹽形式，或是上述化合物或是具有兩者擇-的在δ-氮上單保護或在δ-氮或在γ，δ-氮雙保護的胍基基團的化合物，可以作為合成絲氨酸蛋白酶的抑制劑的起始物，且特別是作為合成凝血酶抑制劑的起始物。
17.根據權利要求16的用途，其中的絲氨酸蛋白酶抑制劑是肽化合物。
18.下式結構的片斷
作為藥用活性的化合物結構單元。
19.根據權利要求18的結構片斷，其中藥用活性化合物是肽化合物。
20.根據權利要求1-13任一權利要求中的化合物用于醫療。
21.根據權利要求20的化合物用于抗凝血劑或抗血栓形成劑。
22.藥用制劑，其包括有效量的如權利要求1-13概括的化合物與一或多種藥用載體相結合。
23.根據權利要求22的藥用制劑，用作抗凝血劑或抗血栓形成劑。
24.根據權利要求1-13的化合物用作制造抑制人體或動物有機體凝血酶抑制劑的藥用制劑的有效成份的用途。
25.獲得需要抑制凝血酶的人體或動物有機體的凝血酶抑制的方法，包括對所述的有機體給予有效量的任何權利要求1-13中的化合物。
26.預防和治療人體或動物有機體血液和組織中血栓形成和過凝固狀態的方法，包括對需要上述治療或預防的宿主，給予有效量的任何權利要求1-13的化合物。
27.權利要求1-26和實際上描述的化合物，合成方法，藥用制備物，用途和方法。
全文摘要
本發明涉及根據下式(I)的新的凝血酶抑制劑，它們的合成，含有作為活性成分的這些化合物的藥用組合物，以及應用本化合物作為抗凝血劑預防和治療血栓栓塞疾病的用途其中R
文檔編號C12N15/00GK1076199SQ9211530
公開日1993年9月15日 申請日期1992年12月4日 優先權日1991年12月4日
發明者E·A·C·泰格-尼爾森, R·E·拜隆德 申請人:阿斯特拉公司