植物葉用多酚增加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材及其制造方法
【專利摘要】本發明提供一種可提高葉類蔬菜或茶葉等植物葉子的保存性的植物葉用多酚增加劑、植物葉用多酚及氨基酸增加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材和植物葉保存用片材的制造方法。植物葉用多酚增加劑包含原花色素和海藻糖。植物葉用多酚增加劑優選以1:15～1:60的重量比包含原花色素和海藻糖。植物葉保存用片材包含植物葉用多酚增加劑。
【專利說明】植物葉用多酚増加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材及其制造方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物葉用多酚增加劑、植物葉用多酚及氨基酸增加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材以及植物葉保存用片材的制造方法。
【背景技術】
[0002]作為可用作食品的植物葉，有水芹或甘藍、萵苣、菠菜、蘿卜的葉、茶葉、桑葉等。其中，作為將水芹或甘藍、萵苣、菠菜等葉類蔬菜以生鮮狀態進行長期保存的方法，有放入由具有多孔的薄膜構成的袋中進行保存的方法(例如，參照專利文獻I)。另外，緑茶、烏龍茶、紅茶等茶葉一般進行干燥保存。以前一直主要用于養蠶的桑葉，近年來也作為桑葉茶進行生產(例如，參照專利文獻2)，蒸干鮮桑葉后進行干燥保存(例如，參照專利文獻3)。
[0003]現有技術文獻
[0004]專利文獻
[0005]專利文獻1:日本專利特開6 — 199385號公報
[0006]專利文獻2:日本專利特開2006 — 101732號公報
[0007]專利文獻3:日本專利特開平9 一 206019號公報

【發明內容】

[0008]本發明要解決的技術問題
[0009]以生鮮狀態保存葉類蔬菜的情況下，考慮到物資流通等時，保存期越長越好，因此期望有比專利文獻I公開的袋保存期更長的方法。另外，當為茶葉的情況下，現有的將其干燥保存的方法，是作為茶加工后提高保存性的方法，而提高加工前的茶葉的保存性的方法目前未知。
[0010]本發明是著眼于上述技術問題而完成的，其目的在于提供ー種能夠提高葉類蔬菜或茶葉等植物葉的保存性的植物葉用多酚增加劑、植物葉用多酚及氨基酸增加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材及植物葉保存用片材的制造方法。
[0011]解決技術問題的技術手段
[0012]為了實現上述目的，本發明的植物葉用多酚增加劑，其特征在于，含有原花色素和
海藻糖。
[0013]本發明的植物葉用多酚增加劑，通過海藻糖吸收從植物葉釋放出的こ烯，通過原花色素抑制因過量產生的こ烯氧化物導致的氧化作用，從而能夠抑制植物葉的腐敗。另外，可通過抑制腐敗而增加乳酸菌，其結果能夠促進乳酸發酵而増加植物葉中所含的多酚。這樣，本發明的植物葉用多酚增加劑能夠提高葉類蔬菜或茶葉等植物葉的保存性。
[0014]本發明的植物葉用多酚及氨基酸增加劑，其特征在于含有原花色素和海藻糖。本發明的植物葉用多酚及氨基酸增加劑，能夠促進乳酸發酵而増加植物葉中所含的多酚，同時能夠増加植物葉中所含的支鏈氨基酸、必需氨基酸等，從而能夠實現植物葉的長期儲藏、增強高功能性以及營養成分。
[0015]本發明的植物葉用多酚增加劑以及本發明的植物葉用多酚及氨基酸增加劑，優選以1:15~1:60的重量比含有所述原花色素和所述海藻糖。該情況下，多酚的增加促進效果尤其高，植物葉的保存性尤其高。
[0016]本發明的植物葉用多酚增加劑和植物葉用多酚及氨基酸增加劑，如果為了保存植物葉，怎樣使用均可。例如，通過涂敷在用于包裝葉的片材或用于儲存葉的容器上等來使用。本發明的植物葉用多酚增加劑和植物葉用多酚及氨基酸增加劑中，海藻糖為三種異構體中的a, a體、a, 0體以及(6, ^體中的任ー種均可。另外，原花色素的原料可以是葡萄籽、黑大豆或其他原料，但特別優選來自于葡萄籽的原花色素。
[0017]本發明的植物葉保存用片材，其特征在于，含有本發明的植物葉用多酚增加劑或本發明的植物葉用多酚及氨基酸增加劑。
[0018]本發明的植物葉保存用片材，由于含有本發明的植物葉用多酚增加劑、或本發明的植物葉用多酚及氨基酸增加劑，因此通過用在葉類蔬菜或茶葉等植物葉的包裝等中，能夠提高該植物葉的保存性。另外，能夠增加植物葉中所含的多酚或氨基酸。為了進ー步提高保存性，可以在包裝植物葉后，抽空內部空氣。本發明的植物葉保存用片材可以由袋狀、箱狀、折疊形狀、柱狀或其他任意形狀構成。
[0019]本發明的植物葉保存用片材，可以通過以150~200°C熔解含有本發明的植物葉用多酚增加劑或本發明的植物葉用多酚及氨基酸增加劑的樹脂顆粒后，加工成厚度為20~50 y m的片材狀而制造。樹脂顆粒優選將本發明的植物葉用多酚增加劑或植物葉用多酚及氨基酸增加劑，與選自聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、聚縮醛、聚對苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酷、乙烯-醋酸共聚物及ABS樹脂中的一種或多種樹脂混合而成。
[0020]另外，本發明的植物葉保存用片材，可以通過將本發明的植物葉用多酚增加劑、或本發明的植物葉用多酚及`氨基酸增加劑包含于具有透氣性的片材中而形成。這種情況下，植物葉用多酚增加劑或植物葉用多酚及氨基酸增加劑，可以通過在它們的水溶液中浸潰具有透氣性的片材的方法、或將它們的溶液對具有透氣性的片材進行噴霧的方法等，使其含于片材中。另外，具有透氣性的片材，例如由棉紙、瓦楞紙或其他紙、無紡布、纖維產品、食物纖維等構成，即可以是天然原料，也可以是人工原料。本發明的植物葉保存用片材可以包含食鹽或其他礦物質、抗菌劑、防鎊劑、除臭劑等添加劑。
[0021]本發明的植物葉保存用片材，可以使具有透氣性的片材含有原花色素和海藻糖而成，原花色素可以以250~300mg/m2的比例包含于片材中，海藻糖以5g/m2的比例包含于片材中。另外，本發明的植物葉保存用片材，可以通過下述方法制得，即在1000ml蒸留水中溶解3g含有原花色素的來自于植物的水溶性提取多酚和5g海藻糖，配制水溶液，在該水溶液中浸潰網狀無紡布(網眼50g/m2)，使每塊無紡布中原花色素的含量為300mg/m2、海藻糖為5g/m2，然后在熱風干燥機內以120°C干燥2小吋。
[0022]另外，茶葉的收獲期短，收獲后的加工作業也要趁著茶葉未腐敗的短時期內進行。因此，在特定的期間內集中作業，難以確保持續一年的穩定勞動力。另外，為了確保持續ー年間的穩定勞動力，需要持續一年間進行茶的加工和生產，需要保存加工前的茶葉使其不腐敗。根據本發明的植物葉用多酚增加劑、植物葉用多酚及氨基酸増加劑以及植物葉保存用片材，可提高茶葉的保存性，因此可利用所保存的茶葉，持續一年間穩定進行茶葉的加工和生產。另外，由此可以實現持續一年間的穩定的勞動力。
[0023]發明效果
[0024]根據本發明，可以提供可提高葉類蔬菜、茶葉等植物葉的保存性的植物葉用多酚增加劑、植物葉用多酚及氨基酸增加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材以及植物葉保存用片材的制造方法。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1是表示測定由本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹茶葉而保存的樣本(1/2濃度本發明片材、標準濃度本發明片材)以及由其他方法保存的樣本(原始樣本、無紡布對照、山梨醇片材)的總氨基酸量的結果的圖表(各樣本進行3次測定(N = 3)，圖表中的數值表示其平均值)。
[0026]圖2是表示測定由本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本以及在不包裹桑葉的狀態下直接進行保存的對照樣本的含水量的結果的圖表(各樣本進行2次測定(N = 2)，圖表中的數值表示其平均值)。
[0027]圖3是表示測定由本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本以及在不包裹桑葉的狀態下直接進行保存的對照樣本的多酚含量的結果的圖表(各樣本進行3次測定(N = 3)，圖表中的數值表示其平均值，*表示“存在顯著差異(P< 0.05)，，)。
[0028]圖4是表示測定由本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本以及在不包裹桑葉的狀態下直接進行保存的對照樣本的DPPH自由基清除活性(DPPH清除活性)的結果的圖表(各樣本進行3次測定(N = 3)，圖表中的數值表示其平均值，*表示“存在顯著差異(P < 0.05)”)。
[0029]圖5是表示由本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本以及桑茶的氨基酸分析用樣本的制作方法的流程圖。
[0030]圖6是表示圖5所示的氨基酸分析用樣本的制作方法中Sep_PakC18處理順序的流程圖。
[0031]圖7是表示生桑葉的氨基酸分析用樣本的制作方法的流程圖。
[0032]圖8是表示用本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本、桑茶以及鮮桑葉的GABA代謝類的氨基酸含量的圖表。
[0033]圖9是表示用本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本、桑茶以及鮮桑葉的支鏈氨基酸的含量的圖表。
[0034]圖10是表示用本發明的實施方式的植物葉保存用片材包裹桑葉進行保存的片材覆蓋樣本、桑茶以及鮮桑葉的必需氨基酸的含量的圖表。
[0035]圖11是表示測定由發明的實施方式的植物葉保存用片材所構成的袋中放入桑葉進行保存的樣本(處理PE、處理PP)以及用市售的袋子保存的樣本(無處理PE、無處理PP)的總氨基酸量的結果的圖表。
【具體實施方式】
[0036]以下，根據實施例對本發明的實施方式的植物葉用多酚增加劑、植物葉用多酚及氨基酸增加劑、樹脂顆粒、植物葉保存用片材以及植物葉保存用片材的制造方法進行說明。
[0037]實施例1
[0038]對本發明的實施方式的植物葉保存用片材對茶葉的保存性以及氨基酸產生的變化進行實驗。在此所使用的植物葉保存用片材是使具有透氣性的片材中包含含有原花色素和海藻糖的植物葉用多酚增加劑(植物葉用多酚及氨基酸增加劑)而成的。植物葉保存用片材由以下的方法制造。首先，將3g來自干葡萄籽的水溶性提取多酚(原花色素含量95重量％、商品名“Leucoselect”、意迪那(ィンデナ)公司生產)和5g海藻糖溶解在IOOOml蒸留水中，配制水溶液，在該水溶液中浸潰網狀無紡布(大小40cmX40cm、網眼50g/m2)后，在熱風干燥機內以120°C干燥2小吋。
[0039]準備兩種植物葉保存用片材，一種為每単位無紡布原花色素含量為250mg/m2、海藻糖為5g/m2的片材(以下、記作“標準濃度本發明片材”)，另ー種為每單位無紡布原花色素為125mg/m2、海藻糖為2.5g/m2 (以下、記作“ 1/2濃度本發明片材”)。另外，作為試驗中所使用的茶葉，使用2009年4月下旬收獲的日本靜岡縣產茶葉。
[0040][茶葉的保存實驗]
[0041]以植物葉保存用片材包裹茶葉，放入帶拉鏈的袋中，4°C下冷藏保存15天。另外，作為對比試驗，將茶葉在不包裹的狀態下直接放入帶拉鏈的袋中(以下、記作“原始樣本”)，將茶葉以無紡布包裹放入帶拉鏈的袋中(以下、記作“無紡布對照”)，以加入山梨醇代替標準濃度本發明片材中的海藻糖所得的無紡布片材包裹茶葉放入帶拉鏈的袋中(以下、記作“山梨醇片材”)，以相同條件進行保存。
[0042]結果，可以確認在原始樣本及無紡布對照中，部分褐變的茶葉腐敗而形成溶解狀態，發出如腐爛抹布的氣味。相反，可以確認在使用1/2濃度本發明片材以及標準濃度本發明片材中，雖然混有褐變的茶葉，但褐變的茶葉也處于具有彈性的狀態，茶葉氣味中微微混有其他氣味。由該氣味可知，使用植物葉保存用片材進行保存的茶葉正在進行乳酸發酵。另外，可以確認在山梨醇片材中，雖然混有褐變的茶葉，但褐變的茶葉也處于具有彈性的狀態，僅嗅到茶葉的氣味。由該結果可知，乳酸發酵需要海藻糖，原花色素作為提高保存性的物質發揮作用。
[0043][總氨基酸量的測定]
[0044]關于進行保存試驗的各樣本，以茚三酮反應法進行氨基酸測定。茚三酮試劑使用L 一 8900用茚三酮顯色溶液試劑盒(和光純藥エ業株式會社生產)。測定樣本的配制，是在96孔的多孔板上分別加入50 u I樣本、50 u I顯色溶液A、50 ill顯色溶液B并攪拌后，以80°C的烘箱加熱5分鐘。使用多孔板檢測儀(產品名“MTP — 450”、電暈電器株式會社生產)，以550nm進行測定。使用對氨基酸混合標準液AN — II型和B型進行混合所得的混合物(40種氨基酸各含有2nmol)制作標準曲線。
[0045]各樣本以通過茚三酮反應測定的值和由水分計測定的含水量為基礎，算出每Ig干重茶葉的總氨基酸量。測定結果示于圖1。如圖1所示，可確認標準濃度本發明片材的總氨基酸含量最多，相對于原始值增加34%。加入等量的山梨醇代替海藻糖的情況下(山梨醇片材)，未發現總氨基酸增加。
[0046]實施例2
[0047]對本發明的實施方式的植物葉保存用片材對桑葉的保存性、以及作為驗證儲藏熟化的附加價值，對多酚的增加以及氨基酸的變化進行實驗。在此所使用的植物葉保存用片材，由與實施例1的植物葉保存用片材相同的制造方法制造而成，并使每単位無紡布中原花色素的含量為300mg/m2、海藻糖為5g/m2。另外，作為試驗樣本，使用日本巖手縣北上市生產的2009年10月產的桑葉。
[0048][桑葉的保存性]
[0049]以植物葉保存用片材包裹桑葉，在氣溫為4°C的場所中保存40天(以下、記作“片材覆蓋樣本”)。另外，作為對比實驗，在不包裹桑葉的狀態下直接將樣本(以下、記作“對照樣本”)在氣溫4°C的場所中保存40天。
[0050]結果，與保存前的初始狀態相比，可以觀察到對照樣本、片材覆蓋樣本都變色為茶色。另外，在對照樣本中，附著霉菌樣物質，混雜有無柔軟性的腐敗桑葉，而在片材覆蓋樣本中，可以觀察到幾乎沒有附著霉菌樣物質，桑葉自身也具有柔軟性。
[0051]這樣，可以確認通過植物葉保存用片材包裹桑葉，可以抑制桑葉的腐敗，提高加工前的桑葉的保存性。可知，植物葉保存用片材通過海藻糖吸收從桑葉釋放出的こ烯，由原花色素抑制因過量產生的こ烯氧化物導致的氧化作用，從而可抑制桑葉的腐敗。利用由植物葉保存用片材包裹保存的桑葉，可一年間持續穩定的進行桑葉茶的加工或生產，從而能夠實現確保一年間持續穩定的勞動カ。
[0052][多酚的測定]
[0053]分別對片材覆蓋樣本以及控制樣本，添加占桑葉濕重4倍量的こ醇，并研磨攪拌，將其進行離心分離得到上清液，將該上清液作為桑葉多酚提取液。使用該桑葉多酚提取液，通過作為比色檢測法的Folin Ciocalteu’ s法進行多酚含量的測定。
[0054]關于測定順序，首先，作為試驗容器使用96孔多孔板，向片材覆蓋樣本以及對照樣本各添加10微升桑葉多酚提取液、10微升2倍稀釋的Folin Ciocalteu’ S、160微升試劑蒸留水，進而為了防止數據誤差，最后添加20微升飽和碳酸鈉水溶液，將其攪拌后，在室溫下反應30分鐘。作為測定儀器使用多孔板檢測儀(產品名“DTX — 800”、貝克曼庫爾特公司生產)，在620nm測定波長下，以相當于沒食子酸量計，計算出多酚含量。
[0055]首先，對于片材覆蓋樣本以及對照樣本各自的桑葉，進行含水量比較。其結果示于圖2。如圖2所示，片材覆蓋樣本與對照樣本相比，比初始狀態含有更多的水分，但通過Turkey 一 Kramer多重比較分析法，在顯著水平5%下分析各含水量的統計學顯著差異，結果未發現有顯著差異。
[0056]接著，以ー 80°C時為初始值，將片材覆蓋樣本以及對照樣本各自的桑葉的每Ig干重桑葉中的多酚含量示于圖3。如圖3所示，可確認片材覆蓋樣本以及對照樣本的多酚都比初始值有所増加。另外，也可確認與對照樣本相比，片材覆蓋樣本中多酚的增加量多，増加到初始值的1.8倍、控制樣本的1.4倍。通過Turkey — Kramer的多重比較分析法,在顯著水平5%下分析各多酚含有量的統計學顯著差異，結果可以確認初始值與片材覆蓋樣本之間存在顯著差異。
[0057]這樣，可以確認到通過植物葉保存用片材包裹桑葉，可以促進桑葉中所含的多酚的増加。作為其原因，可認為是通過以植物葉保存用片材抑制腐敗菌，從而使乳酸菌増加，結果，可認為進行了乳酸發酵，多酚增加。
[0058][DPPH自由基清除活性的測定][0059]為了考察多酚的抗氧化能力，通過DPPH法進行DPPH自由基清除活性的測定。DPPH自由基清除活性以80%こ醇溶液作為100%進行計算。如下進行測定，作為測定容器使用96孔多孔板，作為測定儀器使用多孔板檢測儀(產品名“DTX — 800”、貝克曼庫爾特公司生產)，測定波長采用520nm。
[0060]如下進行測定，首先向各孔中添加50微升片材覆蓋樣本以及對照樣本的各桑葉多酚提取液(需要稀釋的情況下以80%こ醇進行稀釋)、80微升IOOmM Tris 一 HCl(PH7.5)、40微升試劑蒸餾水，最后添加40微升DPPHこ醇溶液(5mM DPPH、100%こ醇)，進行攪拌，反應20分鐘。空白樣本中使用以80%こ醇代替提取樣本的所得物。
[0061]將片材覆蓋樣本以及對照樣本的DPPH自由基清除活性的測定結果示于圖4。如圖4所示，可以確認對于每Ig桑葉的DPPH自由基清除活性，片材覆蓋樣本以及對照樣本都比初始值有所増加。另外，也可確認與對照樣本相比，片材覆蓋樣本的DPPH自由基清除活性的增加量多，增加到初始值的1.7倍、對照樣本的1.2倍。通過Turkey — Kramer的多重比較分析法，在顯著水平5%下分析各DPPH自由基清除活性的統計學顯著差異，可以確認初始值與片材覆蓋樣本之間存在顯著差異。
[0062]這樣，可以確認以DPPH自由基清除活性為指標的抗氧化能力，就桑葉而言，片材覆蓋樣本最高。因此，植物葉保存用片材，通過包裹桑葉，可以進ー步提高桑葉中所含的多酚的抗氧化能力。
[0063][氨基酸分析]
[0064]對片材覆蓋樣本進行氨基酸分析。為了比較，也對市售的桑茶(商品名“更木桑茶”)進行氨基酸分析。另外，為了確認初始狀態，也對冷凍保存的生桑葉進行氨基酸分析。
[0065]如以下所示制作分析用的樣本。首先，如圖5所示，分別各自收取0.4g粗粉碎的片材覆蓋樣本及桑茶，分別添加40ml的熱水并攪拌后，靜置30分鐘。將其進行離心分離，以所得到的水溶性組分(上清液)為熱水提取物(HWS)。各分別收取30ml各HWS，添加120mlこ醇并攪拌后，靜置30分鐘。將其離心分離，以所得到的上清液為醇溶性組分(AS)。通過減壓濃縮分別使130ml各AS組分干燥固化，并溶解于13ml的蒸留水中形成醇溶性水解物(AffS)0
[0066]接著，如圖6所示，將2ml各AWS組分供給至S印一Pak C18柱(360mg)，以2mlこ醇:0.1%TFA=7:3的溶液溶出吸附物。如圖5所示，將該吸附組分進行濃縮干燥固化，以
0.02N的HCl進行溶解，通過0.22 ii m過濾器(MILLIP0RE公司生產)進行過濾，將所得物作為氨基酸分析樣本。
[0067]如圖7所示，收取約8g鮮桑茶，添加4倍量的こ醇和100ml80%こ醇(便于攪拌)，通過攪拌器(產品名“FORCE MILL”:株式會社島津GLC公司生產)進行磨碎和攪拌處理。將其離心分離，以所得到的醇溶性溶液作為醇提取物(AS)。采集2ml該AS組分，添加30ml的蒸餾水，得到5%左右的醇濃度，使用Sep — Pak C18進行圖6所示的操作。與圖5同樣地將該吸附組分濃縮干燥固化，以0.02N的HCl進行溶解，通過0.22iim過濾器(MILLIP0RE公司生產)進行過濾，將其所得作為氨基酸分析樣本。
[0068]使用制得的各氨基酸分析樣本，通過茚三酮反應法進行氨基酸測定。在氨基酸含量的測定中，使用L 一 8900氨基酸分析用茚三酮試劑盒及氨基酸分析儀(產品名“L 一8900”、株式會社日立高新技術公司)。反應條件為以試管混合0.1ml分析樣本、Iml茚三酮試劑、Iml茚三酮緩沖劑，在沸水浴中反應3分鐘。將其在570nm下進行測定，測定其含有濃度。
[0069]關于片材覆蓋樣本、桑茶以及鮮桑葉，分別各自制作兩份氨基酸分析樣本。對制得的樣本進行各種氨基酸含量的測定，求得每Ig固態物的含量，對于片材覆蓋樣本(“本發明處理”)、桑茶以及鮮桑葉分別求得兩份樣本的測定結果的平均值。其結果示于表1、圖8、圖9及圖10中。
[0070]表1
[0071]
【權利要求】
1.一種收獲后的植物葉用多酚增加劑，其特征在于，含有原花色素和海藻糖。
2.一種收獲后的植物葉用多酚及氨基酸增加劑，其特征在于，含有原花色素和海藻糖。
3.如權利要求1所述的植物葉用多酚增加劑或如權利要求2所述的植物葉用多酚及氨基酸增加劑，其特征在干，以1:15?1:60的重量比含有所述原花色素和所述海藻糖。
4.ー種植物葉保存用片材，其特征在于，其含有權利要求1所述的植物葉用多酚增加劑或權利要求2所述的植物葉用多酚及氨基酸増加劑。
5.一種用于制造權利要求4所述的植物葉保存用片材的樹脂顆粒，其特征在于，其含有權利要求1所述的植物葉用多酚增加劑或權利要求2所述的植物葉用多酚及氨基酸増加齊U。
6.ー種植物葉保存用片材的制造方法，其特征在于，在150?200°C下將權利要求4所述的樹脂顆粒熔解后，加工成厚度為20?50 ii m的片材狀。
【文檔編號】A23B7/14GK103491789SQ201280009564
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2012年4月2日 優先權日:2011年3月31日
【發明者】菅野稔 申請人:菅野稔