專利名稱：用于促進腸道菌群發育的方法和脂質組合物的制作方法
技術領域：
本發明 涉及腸道菌群領域，特別涉及用于增強腸道菌群發育，由此尤其增強受試者免疫系統的方法和產品。
背景技術：
如本領域所描述的，腸道菌群由生活在動物消化道中的微生物組成，并且構成最大的人菌群儲庫。胃腸道與大量細菌之間的共生實質上有助于正常消化功能。因而，腸道菌群充當對抗機會致病微生物和病原微生物的有效屏障，并且這種“定殖抵抗力”是它們的
最重要功能之一。正常菌群呈現出介于通常居住在胃腸道中，在營養學、生理學和宿主免疫系統調節中起著重要作用的微生物之間的極其復雜的平衡[Bourlioux, P.等，Am J Clin Nutr78(4) :675-83,2003]。腸道菌群的數量和物種分布根據胃腸道區域而有很大差異，其中結腸是腸道菌群群體最密集的區域。大多數細菌是無芽胞厭氧菌，其中數目上占優勢的細菌為擬桿菌屬(Bacteroides spp.)和雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)、真桿菌屬(Eubacteriumspp.)、梭菌屬(Clostridium spp.)、乳桿菌屬(Lactobacillus spp.)、梭桿菌屬(Fusobacterium spp.)以及各種革蘭氏陽性球菌。以較少的數目存在的細菌包括腸球菌屬(Enterococcus spp.)、腸桿菌科(Enterobacteriaceae)、產甲燒菌(methanogens)和異化型硫酸鹽還原菌。腸道微生物菌群的重要性已廣為所知。菌群代謝參與維生素的產生、免疫系統的調節、調節腸道發育、消化和吸收的增強、有害物種的抑制及致癌物和毒素的去除、產生激素以指導宿主儲存脂肪以及防止過敏的形成。腸道菌群對宿主的腸道和全身免疫系統有著連續和動態的影響。該細菌是促進腸道粘膜免疫系統在物理組分和功能方面的早期發育的關鍵要素，并且在以后的生活中繼續在腸道粘膜免疫系統的運作中起著作用。該細菌刺激與腸道粘膜相關的淋巴樣組織產生針對病原體的抗體。免疫系統識別并抵抗有害細菌，但不作用于單獨的有用/有益物種，這是一種在嬰兒期形成的耐受性。關于免疫性，最新調查結果顯示腸道菌群在Toll樣受體(TLR)的腸表達中起著作用，Toll樣受體是在先天免疫系統中起著關鍵作用的一類蛋白質。TLR使免疫系統的部分修復由例如輻射引起的損傷。TLR還給腸提供了判別病原細菌和共生細菌的能力。人的腸道在出生時是無菌的，微生物在分娩期間開始定殖。遷入的第一種細菌能夠影響免疫反應，使免疫反應更有利于它們自身的生存并因此對競爭物種不太有利；因而定殖在腸道的第一種細菌在決定人的終身腸道菌群構成中是重要的。微生物菌群發育然后取決于早期給予的喂養方式類型。母乳喂養嬰兒具有占優勢的雙歧桿菌(Bifidobacteria)。在母乳喂養嬰兒中，菌群不僅更加富含雙歧桿菌，而且包括少得多的易于致病的物種[Bourlioux等，出處同上]。相比之下，配方食品喂養的嬰兒具有較復雜的類似于成人的菌群，因為擬桿菌屬、梭菌綱(Clostridia)、雙歧桿菌、乳酸桿菌(Lactobacilli)、革蘭氏陽性球菌、大腸菌群(coliforms)和其他物種都占據完全相等的比例[Yoshioka, H.等，Pediatrics 72(3)317-21,1983]。然而,在斷奶時,發生從占優勢的兼性需氧物種諸如鏈球菌(Streptococci)和大腸埃希氏菌(Escherichia coli)向幾乎專性厭氧物種的轉變。可以觀察到與年齡有關的影響。菌群的組成根據嬰兒接受的膳食隨著時間演變，直至它在嬰兒約2歲時類似于成人的菌群，此時它被認為變得相當穩定[Cummings, J.等，Eur J Nutr 43 Suppl 2 II118-II1 73,2004]。新生兒的胃腸道是無菌的，但在出生后立即被來自環境，主要來自母親的生物體定殖。在陰道分娩期間，與陰道和腸菌群的接觸是嬰兒的定殖開始的重要來源[OrrhageK & Nord CE. , Acta Paediatr. 88 =Suppl (430) :47-57,1999] 在剖宮分娩期間，新生兒的嘴與陰道和腸微生物區系沒有直接接觸，因而環境細菌對于嬰兒的腸定殖起著重要作用。一些作者已認為最初的人微生物區系的組成可能具有持久影響，該影響長達數個月[Griinhmcl MM 等，J Pediatr Gastroenterol Nutr. 28 :19-25,1999]或甚至數年[Salminen S等，Gut，53 :1388_9，2004]。在生命初期的腸微生物區系的組成因而似乎是在 未來幾年獲得和維持良好健康的非常重要的因素。因而，持續而且越來越多地需要開發可以模擬人乳保護作用，從而提供與母乳喂養嬰兒的腸道微生物菌群組成盡可能相似的腸道微生物菌群組成的嬰兒制劑。最常見的情況是，提供益生菌(如膳食產品)以便影響腸道菌群的組成。此外，可以使用益生元。益生菌是根據世界衛生組織(WHO)被定義為當以足夠的量施用時可給宿主的健康帶來益處的活生物體[Morais7M. B.和 Jacob, C. M. , J Pediatr (Rio J)82(5Suppl)S189-97，2006]，而益生元是通過選擇性地刺激已定居在結腸中、具有改善健康潛能的一種或有限數目的細菌物種的生長來有益地影響宿主的不可消化型食物成分[Parracho，H.等，Proc Nutr Soc 66(3) :405_11，2007]。因此，完整地到達結腸的任何膳食組分都是潛在的益生元[Currimings等，出處同上]。益生元樣作用在人腸中的健康細菌活性增加時發生。益生元刺激腸道中的健康細菌如雙歧桿菌和乳酸桿菌的生長，并且增加對入侵的病原體的抵抗力。對益生元的開發的最大興趣是針對不可消化型寡糖如果寡糖(FOS)、反式-半乳糖化寡糖(TOS)、異麥芽寡糖(MO)、木寡糖(XOS)、大豆寡糖(S0S)、半乳糖寡糖(GOS)和乳鹿糖[Cummings等，出處同上]。菌群富集區域中的相對新的開發在于合生素領域。術語合生素包括將有用的益生菌摻入到合適的具有適宜益生元的膳食媒介物中[Cummings等，出處同上]。數篇專利申請描述了嬰兒制劑，其中許多是基于組合了蛋白質源、碳水化合物源、脂質源以及維生素或礦物質與微生物(益生菌)和/或益生元源的組合物。WO 2010/003790描述了營養組合物，其包含游離氨基酸、碳水化合物源和脂質源并且可以不含肽或不含蛋白質。該脂質源包含富集有在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸殘基的三酰甘油酯。該組合物用于過敏嬰兒或腸吸收受損嬰兒的治療，用于治療、防止或減輕此類癥狀，同時改善腸道中的鈣吸收和/或改善腸道中的脂肪吸收和/或軟化糞便硬度。WO 2001/41581 (EP I 237 419)描述了包含至少一種蛋白質組分、至少一種益生元組分、至少一種脂質組分的組合的嬰兒配方食品，所述至少一種脂質組分包含甘油三酯，其中棕櫚酸殘基占據存在于甘油三酯中的所有脂肪酸殘基的10%以上(w/w)，并且棕櫚酸殘基的至少30%鍵合在三酰甘油骨架的sn-2位。WO 2006/019300描述了具有蛋白質、脂肪、碳水化合物、核苷酸組分和帶負電荷的非蛋白質組分的嬰兒營養組合物，其模擬人乳的保護作用，特別是對抗過敏和感染的保護作用。WO 2008/005862和W02008/005032描述了包含脂肪、蛋白質、碳水化合物、維生素
和礦物質以及以喂食狀態為基準的神經節苷脂、磷脂、乳鐵蛋白和唾液酸的嬰兒配方食品。這種制劑旨在用于降低嬰兒腹瀉的風險，以及產生與母乳喂養嬰兒的腸道微生物菌群分布類似的腸道微生物菌群分布。WO 2004/112507描述了供嬰兒和幼兒用的配方食品，其包含蛋白質源、碳水化合物源、包括至少一種長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)的脂質源，和益生菌。該配方食品用于強化天然免疫系統缺陷和促進健康的心智發展。WO 2004/112509描述了包含特定脂肪或不可消化型寡糖和至少一種微生物的營 穩態。
W02006/108824描述了包含蛋白質源、脂質源、碳水化合物源和益生菌的嬰兒配方食品。該配方食品用于調節新生嬰兒的免疫系統，以促進在嬰兒生命的最初幾周內與在母乳喂養嬰孩中發現的有益腸微生物區系相當的有益腸微生物區系的發育，以及促進在生命的最初幾周內新生嬰兒免疫系統的成熟。發明概述本發明根據其第一方面提供了促進受試者的腸道菌群，特別是有益腸道菌群發育的方法，該方法包括向受試者施用包含植物來源的脂肪源的可食用脂質組合物，其中該脂肪源包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在進一步方面，本發明提供了包含植物來源的脂肪源的可食用脂質組合物在促進受試者腸道菌群發育中的用途，或者在制備用于促進受試者腸道菌群，特別是有益腸道菌群發育的制劑中的用途，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在又一個進一步方面，本發明提供了用于促進受試者腸道菌群，特別是有益腸道菌群發育的可食用的植物來源的脂肪源，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在另一方面，本發明提供了減少受試者，特別是嬰兒的啼哭期的出現頻率和持續時間的方法，該方法包括向受試者施用包含植物來源的脂肪源的脂質組合物，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55 %的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在進一步方面，本發明提供了包含植物來源的脂肪源的可食用脂質組合物在減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間中的用途，或者在制備用于減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間的制劑中的用途，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在又一個進一步方面，本發明提供了用于減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間的可食用的植物來源的脂肪源，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在另一方面，本發明提供了食品，其中該食品包含如上面和下面結合促進受試者腸道菌群，特別是有益腸道菌群發育的方面描述的根據本發明的植物來源的脂質組合物(脂肪源)。在另一方面，本發明提供了食品，其中該食品包含如上面和下面描述的用于減少受試者，特別是嬰兒的啼哭期的出現頻率和持續時間的根據本發明的植物來源的脂質組合物(脂肪源)。 在又一個進一步方面，本發明提供了一種商業包裝，其包含a)在腸內施用至受試者后促進受試者的腸道菌群，特別是有益腸道菌群發育的可食用的植物來源的脂肪源；b)任選的可食用的生理學上可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或非活性添加劑中的至少一種；c)任選的至少一種用于輸送a)和b)中定義的一種/多種成分的可食用的生理學上可接受的載體或稀釋劑；d)用于混合a)、b)和/或c)中定義的成分的裝置和容器；和e)使用說明書。在又一個進一步方面，本發明提供了一種商業包裝，其包含a)在腸內施用于受試者后減少受試者，特別是嬰兒的啼哭期的出現頻率和持續時間的可食用的植物來源的脂肪源；b)任選的可食用的生理學上可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或非活性添加劑中的至少一種；c)任選的至少一種用于輸送a)和b)中定義的一種/多種成分的可食用的生理學上可接受的載體或稀釋劑；d)用于混合a)、b)和/或c)中定義的成分的裝置和容器；和e)使用說明書。在一些實施方案中，本文定義的脂質組合物提供了至少以下有益影響中的一種或多種影響-它對受試者腸道中的至少一種病原細菌的定殖產生影響，該影響選自由抑制、防止和減少該至少一種病原細菌的定殖組成的組；-它對受試者腸道中的雙歧桿菌和/或乳酸桿菌細菌中的至少一種的定殖產生影響，該影響選自由增強、增加和促進雙歧桿菌和/或乳酸桿菌細菌中的至少一種的定殖組成的組；-它對免疫系統產生有益影響；
-它對受試者腸道中的腸道菌群發育產生影響，該影響可以包括下列中的一種或多種影響(i)促進主要包含雙歧桿菌和乳酸桿菌的腸道菌群的發育；(ii)增加雙歧桿菌和乳酸桿菌的豐度；和(iii)減少至少一種病原細菌的定殖；-它對受試者腸道中的pH水平產生影響，其中該影響包括降低腸道中的pH水平(如例如從來自受試者的糞便樣品中測得的)；和-它對受試者例如嬰兒的啼哭期產生影響，其中該影響可以包括減少啼哭期(啼哭時期)數量和/或減少嬰兒啼哭的頻率、持續時間和/或強度。對免疫系統的影響可以為，但不限于包含下列中的一種或多種的影響(i)治療受試者免疫系統的至少一種病癥，更特別地，其中該免疫系統的至少一種病癥可能由受試者的腸道菌群失衡引起；(ii)增強受試者的免疫系統；(iii)防止免疫病癥的形成(和/或減少免疫病癥的發生率)；和(iv)提高受試者對疫苗接種的反應。就啼哭而言，在具體實施方案中，該減少啼哭的影響與受試者糞便特征無關。 在一些實施方案中，該免疫系統的至少一種病癥選自炎癥、過敏、特應性、喂養不耐受和感染，并且該脂質組合物對于治療該病癥有效。應注意，在本發明的各種方面和實施方案中，受試者可以是健康受試者。在此類實施方案中，根據本發明的組合物的影響可以是預防性的。附圖
簡述為了理解本發明和了解它可以如何實踐，現在參考附圖僅以非限制性實例方式描述實施方案，在圖中圖I示出根據本發明的方法對所測試受試者的腸道菌群中的有益細菌計數的影響。發明詳述雖然本發明在下面詳細描述中是根據使用用于促進受試者的有益腸道菌群發育和/或用于減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間的根據本發明的脂質組合物的方法進行描述的，但是應理解，用于促進受試者的有益腸道菌群發育和/或用于減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間的本發明脂質組合物的用途，以及如本文上面和下面公開的本發明其余方面也包括在本公開中。本發明的發明人已經證明，用根據本發明的脂質組合物，例如包含如本文所述的合適的結構化脂質的嬰兒配方食品，例如作為非限制性實例的InFat 喂養的嬰兒表現出與母乳喂養嬰兒的腸菌群分布類似的腸菌群分布(如本文下面在實施例3和4中詳述的)。進一步地，本發明人驚訝地發現，用像本發明采用的脂族組合物一樣含有豐富的sn-2位棕櫚酸的食物喂養的嬰兒經歷腸道中的病原細菌數目減少(如本文下面在表10和12中示出的)，同時腸道中的有益細菌數目增加(如本文下面在圖I和在表9和表11中示出的)。此夕卜，本發明人驚訝地發現，用根據本發明的脂質組合物喂養的嬰兒在啼哭的強度和持續時間以及在啼哭周期/啼哭期的出現頻率上表現出統計學上顯著較少的啼哭(如例如本文下面在實施例5和在表13中示出的)。因而，首先，本發明提供了用于促進受試者中的這種對受試者有益的腸道菌群的方法和用于該方法的脂質組合物，所述對受試者有益的腸道菌群為，例如以豐富的有助于消化功能和/或對消化功能產生積極影響的細菌為特征的腸道菌群。
本發明在其一方面提供了促進受試者的有益腸道菌群發育的方法，該方法包括向受試者施用包含脂肪源，更具體地，植物油脂肪源的脂質組合物，其中該脂肪源是甘油三酯，更具體地為植物來源的甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占約15%至約55%(在全文中都為％ w/w，除非另外指明)的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少約30%。本發明在其另一方面提供了減少受試者例如嬰兒的啼哭期的出現頻率和持續時間的方法，該方法包括向受試者施用包含植物來源的脂肪源的脂質組合物，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少約30%。本發明在其又一方面提供了用于促進受試者腸道菌群發育的可食用脂肪源，更具體地，植物來源的脂肪源，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，更具體地為包含甘油三酯的 植物來源的脂肪源，所述甘油三酯更具體地為具有在總脂肪酸中占約15%至約55%的棕櫚酸部分的植物來源的甘油三酯或植物來源的結構化甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少約30%。應注意，如本文使用的術語“棕櫚酸比率”意指在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平在甘油三酯組合物(油)中的總棕櫚酸中所占的％。這個“棕櫚酸比率”在本文還指“比率”，并且具體地為如下面所定義和列舉的。在又一個進一步方面，本發明提供了包含植物來源的脂肪源的可食用脂質組合物在促進受試者的有益腸道菌群發育中的用途，或者在制備用于促進受試者的有益腸道菌群發育的制劑中的用途，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占約15%至約55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少約30%。在本發明的上下文中，術語“促進腸道菌群發育”用來表示對受試者腸道(腸)菌群的構建和/或產生的增強、誘導、刺激和類似影響中的任一種影響。在本發明上下文中的腸道菌群是指在腸道的至少一部分內的細菌腸道群體。在一些實施方案中，腸道菌群中的雙歧桿菌和/或乳酸桿菌豐度增加。在一些進一步實施方案中，細菌腸道群體主要富集有雙歧桿菌和/或乳酸桿菌，意味著雙歧桿菌和/或乳酸桿菌更豐富。因而，在一些實施方案中，根據本發明的脂質組合物增加受治療受試者腸道菌群中的雙歧桿菌和/或乳酸桿菌豐度。術語“促進腸道菌群發育”在本文還指“促進有益腸道菌群發育”。在本發明的所有實施方案和方面中，有益腸道菌群可以與母乳喂養的受試者的腸道菌群基本上等效和/或相當。在一些實施方案中，脂質組合物對促進主要包含雙歧桿菌和乳酸桿菌的腸道菌群發育有效。在一些實施方案中，脂質組合物對維持正常腸道菌群分布有效。在又一些進一步實施方案中，脂質組合物對誘導腸道菌群的開始形成有效，從而例如當在出生后例如從第一天開始施用，或者在出生后晚些時候開始施用時可提供優勢。進一步地，在本發明的上下文中，應理解通過促進腸道菌群發育，還可能會發生對抗病原細菌定殖的有利影響。因而，術語“促進腸道菌群的發育”還表示減少、抑制和/或消除腸道中病原細菌的定殖。此種可受有利腸道菌群(同如下面討論的標準參考相比較)的存在影響的病原細菌包括而不限于大腸菌群生物體、腸桿菌、梭菌綱、葡萄球菌屬(staphylococcus)、韋榮氏球菌屬(veillonella)、變形菌屬(proteus)、銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)、梭菌屬(Clostridium)和不同類型的鏈球菌。進一步地，術語“促進腸道菌群發育”應理解為包括對腸道pH水平的影響，即降低腸道中的pH水平。應意識到，在健康的母乳喂養嬰兒中腸道中的pH通常在約5. 5與6. 5之間。腸道的PH可以基于從受治療受試者獲得的糞便樣品確定。再進一步地，術語“促進腸道菌群發育”應理解為包括對受試者免疫系統的有益影響，由此實現下列的至少一種或多種(i)治療受試者免疫系統的至少一種病癥，該免疫系統的至少一種病癥是由受試者的腸道菌群失衡所引起；(ii)強化受試者免疫系統。腸道菌群失衡可以通過與健康母乳喂養嬰兒的菌群相比的菌群水平低下和腸道群體失衡等展現出來。該病癥可以是慢性或急性病癥，并且它可以是涉及免疫系統功能的降低或減弱(免疫缺陷)，或者另一方面，免疫系統功能的提升(免疫系統過度活躍)的病癥。此類病癥可以選自由炎癥、特應性(例如，過敏、哮喘、濕疹、鼻炎和特應性皮炎)、喂養不耐受和感染組成的組，但不限于此。當提及強化免疫系統時，應理解為包括對變弱的免疫系統和健康的免 疫系統的誘導、刺激、增強等。在本發明的上下文中，術語“治療”或“進行治療”等在本文用于指對受試者產生期望的藥理和生理影響，包括就“防止”或部分地防止不期望的病狀或癥狀形成而言的預防性藥理和生理影響，和/或就部分“治愈”或完全治愈已經存在的不期望病狀而言的治療性藥理和生理影響。術語“治療”在本申請的上下文內用作對健康和/或罹患病癥、疾病或受損的生理/醫學狀態的受試者的治療。在一些實施方案中，脂質組合物對促進有益腸道菌群發育以獲得與健康母乳喂養嬰兒的預先確定或已知的正常腸道菌群分布基本上等效和/或相當的腸道菌群分布有效。正常腸道菌群分布基于從一組健康母乳喂養嬰兒預先確定的水平來確定。與預先確定的正常分布水平基本上等效和/或相當的水平包括偏離正常水平約5%，有時偏離預先確定的水平約10%和甚至多達約15%。在一些實施方案中，根據本發明的方法被用于建立與母乳喂養嬰兒的腸道菌群分布基本上等效/相當的腸道菌群分布。如上所述，在本發明所有的各種方面和實施方案中，脂肪源來源于植物源。在本發明各種方面和實施方案中，脂質組合物可以對受試者腸道中的至少一種病原細菌的定殖產生影響，其中該影響選自由抑制、防止和減少至少一種病原細菌的定殖組成的組。在本發明各種方面和實施方案中，脂質組合物可以對受試者的免疫系統產生有益影響。在一些實施方案中，受試者罹患由腸道菌群失衡引起或者與腸道菌群失衡相關的免疫系統的至少一種病癥。在本發明各種方面和實施方案中，該免疫系統中的至少一種病癥選自炎癥、特應性、過敏、喂養不耐受和感染，并且該脂質組合物對治療或防止該病癥或者減輕該病癥的嚴重性有效。在一些實施方案中，特應性選自由過敏、哮喘、濕疹、鼻炎和特應性皮炎組成的組。在本發明各種方面和實施方案中，該脂質組合物可以促進具有豐富的雙歧桿菌和/或乳酸桿菌的腸道菌群的發育。在一些實施方案中，經促進的腸道菌群主要包含雙歧桿菌和/或乳酸桿菌。在本發明各種方面和實施方案中，該脂質組合物可以增強受試者腸道中的至少一種有益細菌的定殖(增加豐度)。更具體地，該細菌可以選自由雙歧桿菌和乳酸桿菌組成的組。在本發明各種方面和實施方案中，該脂質組合物可以抑制受試者腸道中至少一種病原細菌的定殖。在一些實施方案中，該病原細菌選自由大腸菌群生物體、腸桿菌、梭菌綱、韋榮氏球菌屬、變形菌屬、銅綠假單胞菌、梭菌屬、葡萄球菌屬和鏈球菌組成的組。在一些實施方案中，該病原細菌是梭菌屬和/或葡萄球菌屬。根據本發明具體實施方案的受試者是兒童。進一步地，術語“兒童”表示嬰兒(從出生日，新生兒，至約12個月，即約I歲)以及學步幼童(從約I歲至約3歲)。嬰兒可以是早產兒和足月兒，以及通過正常分娩、剖宮手術(剖宮產)和任何其他分娩方式出生的嬰 兒。術語“新生兒”包括未成熟嬰兒、過度成熟嬰兒和足月新生兒。在一些實施方案中，本發明方法包括在從嬰兒出生后的第一天至數周的時間段內向嬰兒提供脂質組合物。在一些實施方案中，兒童是被診斷(通過標準技術)為患有或易患下列的至少一種的兒童-腸道菌群群體的水平失衡例如水平低下，或腸道菌群群體的分布失衡，特別是與母乳喂養嬰兒的腸道菌群分布相比更是如此；-與腸道菌群群體的水平失衡或分布失衡相關的免疫系統中的病癥；-和與腸道菌群水平失衡(例如菌群水平低下)或腸道菌群群體分布失衡相關的免疫系統病癥有關或者由它引起的病癥。該病癥可以為而不限于炎癥、特應性(例如，過敏、哮喘、濕疹、鼻炎和特應性皮炎)、喂養不耐受和感染。有罹患前述病癥風險的受試者群體包括但不限于過早出生的兒童、通過剖宮產出生的嬰兒、素食者、自然主義者(naturalistic)、服用可影響其腸道菌群的藥物例如抗生素的受試者、具有有限營養或營養不足的受試者、經受可影響其腸道菌群的癌癥治療例如化療和/或輻射的受試者。因而，在本發明各種方面和實施方案中，受試者可以是兒童。該兒童可以是嬰兒或學步幼童。在一些實施方案中，該嬰兒是通過剖宮產分娩的嬰兒。在一些實施方案中，該嬰兒是新生兒，其可以是早產嬰兒和足月嬰兒。在一些實施方案中，與母乳喂養嬰兒相比，受試者有罹患失衡的腸道菌群群體分布的傾向和風險。在一些實施方案中，與母乳喂養嬰兒相比，受試者有罹患與腸道菌群群體分布失衡相關的病癥的風險。在一些實施方案中，受試者有罹患腸道菌群群體分布失衡的風險。在一些實施方案中，受試者是經配方食品喂養的，并因而與母乳喂養嬰兒相比有罹患腸道菌群群體分布失衡的風險。在本發明各種方面和實施方案中，脂質組合物可以在促進有益腸道菌群發育以獲得與健康母乳喂養嬰兒的預先確定或已知的正常腸道菌群分布基本上等效的腸道菌群分布方面是有效的。在本發明的所有方面和實施方案中，脂質組合物在建立與母乳喂養嬰兒的有益腸道菌群分布基本上等效或相當的有益腸道菌群分布方面是有效的。
在本發明的各種方面和實施方案中，可以在從嬰兒出生后的第一天至數周、數個月等的時間段內向嬰兒提供脂質組合物。根據本發明的甘油三酯可以包含飽和的和/或單不飽和的和/或多不飽和的脂肪
酸殘基。在本發明的各種方面和實施方案中，在甘油骨架的sn-2位的脂肪酸殘基可以是飽和脂肪酸殘基，其包括C8-C24脂肪酸殘基，并且在一些具體實施方案中，包括C14-C18脂肪酸殘基。該飽和脂肪酸可以是酪酸(丁酸，C4:0)、羊油酸(己酸，C6:0)、羊脂酸(辛酸，C8:0)、羊蠟酸(癸酸，C10:0)、月桂酸(十二烷酸，C12:0)、肉豆蘧酸(十四烷酸，C14:0)、棕櫚酸(十六烷酸，C16:0)、硬脂酸(十八烷酸，C18:0)、花生酸(二十烷酸，C20:0)和山崳酸二十二烷酸，C22:0)中的任一種。
在一些具體實施方案中，該飽和脂肪酸殘基主要是棕櫚酸殘基。在本發明各種方面和實施方案中，在根據本發明的植物來源的脂肪源中，總棕櫚酸殘基的至少約30%，有時至少約33%，有時至少約38%，甚至有時至少約40%存在于甘油骨架的sn-2位。在本發明各種方面和實施方案中，在根據本發明的植物來源的脂肪源中，在甘油骨架的Sn-I和sn-3位的總脂肪酸部分的至少約50%，有時至少約70%是不飽和的。該不飽和脂肪酸可以是油酸(C18:l)、亞油酸(C18:2)、α -亞麻酸(C18:3)和鱈油酸(gadoleic acid) (C20:1)中的任一種。在本發明各種方面和實施方案中，在根據本發明的植物來源的脂肪源中，在sn-1和sn-3位的不飽和脂肪酸部分的至少約35%，有時至少約40%是油酸部分。在本發明各種方面和實施方案中，在根據本發明的植物來源的脂肪源中，在sn-1和sn-3位的不飽和脂肪酸部分的至少約4%，有時至少約6%是亞油酸部分。在本發明各種方面和實施方案中，植物來源的脂肪源的特征是具有下列參數(i)總棕櫚酸殘基的至少30%，有時至少33%，有時至少38%，甚至有時至少40%在甘油骨架的sn-2位；(ii)在甘油骨架的sn-1和sn_3位的脂肪酸部分的至少50%，有時至少70%是不飽和的；(iii)在sn-1和sn_3位的不飽和脂肪酸部分的至少35%，有時至少40%是油酸部分；和(iv)在sn-1和sn-3位的不飽和脂肪酸部分的至少4%,有時至少6%是亞油酸部分。在本發明各種方面和實施方案中，植物來源的脂肪源包含具有在總脂肪酸中占約15%至約40%的棕櫚酸部分的甘油三酯。在一些實施方案中，植物來源的脂肪源包含具有在總脂肪酸中占約15%至約33%的棕櫚酸部分的甘油三酯。因而，脂肪源的棕櫚酸含量可以是總脂肪酸的15%、16%、17%、18%、19%、20%、
2122%,23%,24%,25%,26%,27%,28%,29%,30%,31 32%,33%,34%,35%,36%,3/%,38%,39%,40%,41 %,42%,43%,44%,45%,46%,47%,48%,49%,50%,51%,52%,53%,54%^； 55%。在本發明各種方面和實施方案中，在根據本發明的植物來源的脂肪源中，在甘油骨架的sn-2位的總脂肪酸殘基的至少約13% w/w，有時至少約15%，有時至少約18%，甚至有時至少約22%是棕櫚酸殘基。
根據本發明所有方面的脂質組合物或植物來源的脂肪源的非限制性實例包含在總脂肪酸殘基含量中占O % -10 %的CS: O脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占0%-10%的C10:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占O % -22 %的C12:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占0%-15%的C14:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占15% _55%的(16:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占I % -7 %的C18:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占20% -75%的C18:l脂肪酸殘基；
在總脂肪酸殘基含量中占2 % -40 %的C18:2脂肪酸殘基；和在總脂肪酸殘基含量中占O % -8 %的C18:3脂肪酸殘基，和其中占總脂肪酸殘基含量的至少30%，有時至少33%，甚至有時至少40%的C16:0脂肪酸殘基在甘油骨架的sn-2位。根據更具體的實施方案，根據本發明所有方面的脂質組合物或植物來源的脂肪源包含在總脂肪酸殘基含量中占O % -2 %的CS: O脂肪酸殘基； 在總脂肪酸殘基含量中占O % -2 %的ClO: O脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占5 % -15 %的C12:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占2%-10%的C14:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占17% _25%的(16:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占2 % -5 %的C18:0脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占28% -48%的C18:l脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占5% -20%的C18:2脂肪酸殘基；在總脂肪酸殘基含量中占I % -3 %的C18:3脂肪酸殘基；和其中占總脂肪酸殘基含量的至少30%，有時至少33%，甚至有時至少40%的C16:0脂肪酸殘基在甘油骨架的sn-2位。更具體地，根據本發明的植物來源的脂肪源包含總脂肪酸的O % _10%，優選O % -2 %的C8:0脂肪酸；總脂肪酸的O % -10 %，優選O % -2 %的ClO: O脂肪酸；總脂肪酸的0-22 %，優選5-15 %的C12:0脂肪酸；總脂肪酸的0-15 %，優選2-10 %的C14:0脂肪酸；總脂肪酸的15-55%的C16:0脂肪酸，其中超過30%在甘油骨架的sn_2位上酯化；總脂肪酸的1_7%，優選2-5%的(18:0脂肪酸；總脂肪酸的20-75%，優選28-48%的C18:1脂肪酸；總脂肪酸的2-40%，優選5-20%的C18:2脂肪酸；總脂肪酸的0_8%，優選1_3%的C18:3脂肪酸；其他脂肪酸各自以總脂肪酸的不到8%，優選不到5%的水平存在。因而，根據本發明的植物來源的脂肪源可以包含總脂肪酸的4%、5%、6%、7%、8%、9%或10%的08:0 脂肪酸；總脂肪酸的 O %、1%、2 %、3 %、4 %、5%、6%、7%、8%、9%或10%的(12:0 脂肪酸；總脂肪酸的 O %、I %、2 %、3 %、4 %、5 %、6%,7%,8%,9%,10%,11 %>12%,13%,14%,15%,16%,17%,18%,19%,20%,21 %或 22%的 C12:0 脂肪酸；總脂肪酸的 0%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11 %、12%、13%、14%或 15% 的 C14:0 脂肪酸；總脂肪酸的 15%,16%,17%,18%,19%,20%,21 %,22%,23%,24%,25%,26%,27%,28%,29%,30%,31 %,32%,33%,34%,35%,36%,37%,38%,39%,40%,41 %,42%,43%,44%,45%,46%,47%,48%,49%,50%、51%、52%、53%、54%或55%的(16:0脂肪酸;總脂肪酸的 1%、1. 2% A. 4%U. 6%,
I.8 %,2 %,2. 2 %,2. 4 %,2. 6 %,2. 8 %,3 %,3. 2 %,3. 4 %,3. 6 %,3. 8 %,4 %,4. 2
4.4 %,4. 6 %,4. 8 %,5 %,5. 2 %,5. 4 %,5. 6 %,5. 8 %,6 %,6. 2 %,6. 4%,6. 6 %,6. 8%,或 7% 的 C18:0 脂肪酸；總脂肪酸的 20%,21%,22%,23%,24%,25%,26%,27%,28%,29%,30%,31 %,32%,33%,34%,35%,36%,37%,38%,39%,40%,41 %,42%,43%,44%,45%,46%,47%,48%,49%,50%,51 %,52%,53%,54%,55%,56%,57%,58%,59%,60%,61 %,62%,63%,64%,65%,66%,67%,68%,69%,70%,71 %,72%,73%,74%或 75% 的 C18:1 脂肪酸；總脂肪酸的2%、3%、4%、5%、 6%、7%、8%、9%、10%、11%、12% ,13% ,14% ,15% ,16% ,17% ,18% ,19%,20%,22%,23%,25%,26%,27%,28%,29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40% 的 C18:2 脂肪酸；總脂肪酸的 0%、0· 5%、1 %、1· 2%、1· 4%、1· 6%、1· 8%、2%、2· 2%、2· 4%、2· 6%、2· 8%、3 %,3. 2 %,3. 4 %,3. 6 %,3. 8 %,4 %,4. 2 %,4. 4 %,4. 6 %,4. 8 %,5 %,5. 2 %,5. 4
5.6%,5. 8%,6%,6. 2%、6· 4%、6· 6%、6· 8%、7%、7· 2%、7· 5%、7· 8%或 8% 的 C18:3 脂肪酸。具體的植物來源的脂肪源描述于W005/036987，其以引用方式整體并入本文。這些脂肪源包括脂肪濃縮物(脂肪基質)、脂肪共混物、包含該濃縮物/共混物的嬰兒配方食品以及其他食物和食品。特別感興趣的是基于可食用合成油(其可以酶法生產)的植物來源的脂肪源，該植物來源的脂肪源在或當與可食用植物油(其可以在共混之前進行隨機化(randomized))共混時模擬人母乳脂肪的甘油三酯組成。此類脂肪源具有高水平的在甘油三酯的sn-2位的棕櫚酸，和高水平的在sn-Ι位和sn-3位的不飽和脂肪酸。這種類型的油是申請人享有的標有 InFat 的各種產品(Enzymotec Ltd. ,Migdal HaEmeq, Israel)。申請人使用 InFat 對用于用植物油稀釋/與植物油共混來制備嬰兒配方食品、膳食補充劑和食品的脂肪基質(脂肪濃縮物)，以及還對所得共混物進行廣泛的選擇。InFat 組成的實例在下表I中給出。因而，本發明使用的植物來源的脂肪源可以是濃縮物，特別是酶法制備的脂肪基質組合物,其包含植物來源的甘油三酯混合物,其中總棕櫚酸殘基含量為總脂肪酸殘基的最多38%，有時最多50% ;并且其中在甘油骨架的sn-2位的脂肪酸殘基的至少50%，有時至少52. 9%，甚至有時至少60%是棕櫚酸殘基。InFat 是用于生產在嬰兒營養品和嬰兒配方食品中使用的脂肪制劑的高級脂肪基質成分。它是用特定甘油三酯組合物和結構進行設計和制造的專用脂肪基質，現已發現它在促進特別是易于出現與腸道菌群有關的問題的嬰兒群體，以及其他此類群體的腸道菌群發育方面很有效。因而，在本發明各種方面和實施方案中，植物來源的脂肪源可以是人造的(man-made)、合成制造的、人工制造的(artificially made)和/或酶法制造的。進一步地，在本發明各種方面和實施方案中，植物來源的脂肪源和/或該脂肪源的至少一種甘油三酯可以選自由天然存在的甘油三酯、合成的甘油三酯、半合成的甘油三酯和人工生產的甘油三酯組成的組。在一些進一步實施方案中，該甘油三酯可以由植物源獲得。根據本發明的植物來源的脂肪源也可以是替代的人乳脂肪組合物或人乳脂肪模擬組合物，其包含至少25%的脂肪基質濃縮物與最多75%的至少一種植物油的共混物。在一些具體實施方案中，該脂肪源可以分別包含25%、30%、36%、50%、52%、60%、63%、73%和 83%的脂肪基質濃縮物，以及 75%、70%、64%、50%、48%、40%、37%、27%和 17%的至少一種植物油。下列實施例給出12種共混物，I至12，其中使用不同量的脂肪基質濃縮物(InFat )，其用量為共混物含量的25%直至83%。在共混物制備時使用的植物油可以是下列的至少一種豆油、棕櫚樹油、卡諾拉油(canola)、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油、紅花油和菜籽油，以及其他植物油和脂肪及其混合物。因而，在本發明各種方面和實施方案中，植物來源的脂肪源包含與植物油混合物 共混的脂肪基質，其中該混合物包含選自但不限于由下列的油組成的組的油豆油、棕櫚樹油、卡諾拉油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油、紅花油和菜籽油。植物油(共混油)可以在與脂肪基質(脂肪濃縮物)共混之前通過化學方法或酶法進行隨機化。更重要地，本發明植物來源的脂肪源可以用于制備嬰兒配方食品。本發明使用的嬰兒配方食品除了包含脂肪源之外，還包含至少一種蛋白質組分和任選的碳水化合物源、維生素、礦物質、核苷酸和氨基酸中的至少一種。因而，在本發明各種方面和實施方案中，嬰兒配方食品包含植物來源的脂肪源，連同蛋白質源、碳水化合物源、礦物質、維生素以及任選的載體、稀釋劑、添加劑或賦形劑中的至少一種。術語“脂質”和“脂肪”在本文中作為同義詞使用。根據本發明的方法最佳地通過向受試者施用利用如本發明中描述的植物來源的脂肪源制備并包含該植物來源的脂肪源的嬰兒配方食品或食品來實踐，所述植物來源的脂肪源為濃縮物基質形式或共混物形式。脂肪濃縮物/基質的非限制性實例為脂肪基質I至11，并且共混物的非限制性實例為脂肪共混物I至12。施用通常經由口服或腸內途徑施用，該途徑可包括應用采用胃喂養管、探針(sonda)等的胃管喂養法，特別是適合于嬰兒喂養的方法。本發明在其另一方面提供了用于促進受試者的有益腸道菌群發育的可食用的植物來源的脂肪源，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占約15%至約55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少約30%。在一些實施方案中，植物來源的脂肪源對受試者腸道中的至少一種病原細菌的定殖產生影響，其中該影響選自由抑制、防止和減少該至少一種病原細菌的定殖組成的組。在一些實施方案中，植物來源的脂肪源可以對受試者的免疫系統產生影響。在一些實施方案中，該脂肪源對受試者的免疫系統產生影響，其中該受試者罹患由腸道菌群失衡引起的免疫系統的至少一種病癥。在一些實施方案中，該免疫系統中的至少一種病癥可以選自炎癥、特應性、過敏、喂養不耐受和感染，并且該脂質組合物對治療該病癥有效。
在一些實施方案中，該特應性可以選自由過敏、哮喘、濕疹、鼻炎和特應性皮炎組成的組。在一些實施方案中，植物來源的脂肪源促進主要包含雙歧桿菌和乳酸桿菌的腸道菌群發育。在一些進一步實施方案中，植物來源的脂肪源可以增強受試者腸道中的至少一種有益細菌的定殖(增加豐度)。該細菌可以選自由雙歧桿菌和乳酸桿菌組成的組。在一些實施方案中，植物來源的脂肪源抑制受試者腸道中至少一種病原細菌的定殖。在一些實施方案中，該病原細菌選自由大腸菌群生物體、腸桿菌、梭菌綱、韋榮氏球菌屬、變形菌屬、銅綠假單胞菌、梭菌屬、葡萄球菌屬和鏈球菌組成的組。在一些實施方案
中，該病原細菌是梭菌屬和/或葡萄球菌屬。根據本發明的脂質/脂肪源組合物可以配制為或配制成可食用產品。為此，可以將該脂質/脂肪源組合物與至少一種益生菌和益生元物質組合在一起。該可食用產品可以是營養組合物、藥物組合物、營養藥物性組合物和/或功能食物。該可食用產品可以液體形式(例如，作為飲料或飲品)以及固體或半固體形式(例如，作為粥或固體可食用產品)提供。根據本發明的脂肪源可以包含在食品和嬰兒配方食品中的任一者中。該食品可以選自包括面包特別是餅干和糕點的焙烤食品、人乳脂肪替代品、包括奶和乳飲料的乳制品、冰淇淋、谷類制品、調味汁、湯、包括人造黃油的涂抹食品、餡料、油和脂肪、豆制品、肉制品、油炸食品、糖果廣品、棒狀食品(bars)、塊狀糖(candy bars)、糖果和巧克力、點心、飲料和奶昔、速溶產品、速溶飲料產品、冷凍食物、包括預制的熟制蔬菜泥和/或水果泥在內的供嬰兒、學步幼童及幼兒用的預制食品、調味品產品，以及食用油和脂肪。因而，本發明在其另一方面提供了包含用于促進受試者的有益腸道菌群發育的根據本發明的植物來源的脂肪源的食品，其中所述食品選自包括面包特別是餅干和糕點的焙烤食品、人乳脂肪替代品、嬰兒配方食品、包括奶和乳飲料的乳制品、冰淇淋、谷類制品、調味汁、湯、包括人造黃油的涂抹食品、焰料、油和脂肪、 制品、肉制品、油炸食品、糖果廣品、棒狀食品、塊狀糖、糖果和巧克力、點心、飲料和奶昔、速溶產品、速溶飲料產品、冷凍食物、包括預制的熟制蔬菜泥和/或水果泥在內的供嬰兒、學步幼童及幼兒用以及供成人用的預制食品、調味品產品，以及食用油和脂肪。在進一步方面，本發明涉及用于制備可食用脂肪源或食品的商業包裝，根據本發明，所述可食用脂肪源或食品被推薦用于促進受試者的有益腸道菌群發育和/或用于減少受試者的啼哭周期的出現頻率和持續時間。除了活性和非活性成分之外，該商業包裝還含有使用說明書。這些說明書包括儲存條件、對用于施用的脂肪源或食品的制備、所需的稀釋、劑量、施用頻率等的說明。根據本發明的商業包裝也可以含有即用形式的植物來源的脂肪源和使用說明書。劑量通常根據受試者的年齡、體重、性別和身體狀況，依據主治醫師和其他醫務人員已知的良好醫療實踐來確定。因而，本發明提供了一種商業包裝，其包含a)在腸內施用至受試者后促進受試者的有益腸道菌群發育的植物來源的脂肪源；
b)任選的可食用的生理學上可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或非活性添加劑中的至少一種；c)任選的至少一種用于輸送a)和b)中定義的一種/多種成分的可食用的生理學上可接受的載體或稀釋劑；d)用于混合a)、b)和/或c)中定義的成分的裝置和容器；和e)使用說明書。在又一個進一步方面，本發明提供了一種商業包裝，其包含a)在腸內施用至受試者后減少受試者，特別是嬰兒的啼哭期的出現頻率和持續時 間的植物來源的脂肪源；b)任選的可食用的生理學上可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或非活性添加劑中的至少一種；c)任選的至少一種用于輸送a)和b)中定義的一種/多種成分的可食用的生理學上可接受的載體或稀釋劑；d)用于混合a)、b)和/或c)中定義的成分的裝置和容器；和e)使用說明書。在根據本發明的商業包裝的具體實施方案中，該植物來源的脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占約15%至約55%的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。在一些實施方案中，該脂質組合物可以人工地富集有至少一種甘油三酯。如本文使用的術語“人工富集”用于表示該脂質組合物雖然通常源自天然脂質源，但經受至少一種修飾，通常為酶處理步驟，但不局限于此，所述修飾促進該脂質富集有至少一種如定義的甘
油三酯。天然脂質源可以是任何可食用脂質源，優選植物油，其包括而不限于豆油、棕櫚樹油、卡諾拉油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油、紅花油和菜籽油。該脂質組合物優選作為如本文所討論的可食用產品經口提供給受試者。根據本發明的方法可以是短期方法和長期方法。換言之，受試者，特別是嬰兒、學步兒童或兒童受試者可以每天接受單次劑量的脂質組合物或包含脂質組合物的可食用產品，以及許多次劑量的脂質組合物，持續數天、數周、數個月和1、2、3或更多年。應意識到，當根據本發明的方法進行很長一段時間時，可以根據受試者的年齡以及其他考慮因素如營養需要來改變該脂肪源和/或產品的組成。可以從出生后的第一天在任意時間開始施用。也可以作為補充喂養施用給母乳喂養受試者，或者在斷奶期間或斷奶后，或者當喂母乳的人(通常母親)不在或者無法用母乳喂養時施用給母乳喂養受試者。因而，促進受試者的有益腸道菌群發育的方法提供用以維持有利的腸道菌群分布，例如但不局限于母乳喂養嬰兒、嬰孩或學步兒童的腸道菌群分布。在一些實施方案中，根據本發明的甘油三酯選自由天然存在的甘油三酯、合成的甘油三酯、半合成的甘油三酯和人工生產的甘油三酯組成的組，所有這些甘油三酯都來源于植物源。如本文使用的術語“一個”、“一種”和“該”包括單數指代和復數指代，除非上下文另外明確指明。例如，術語“一種甘油三酯”包括可一起形成脂質基質或脂質共混物的一種或多種甘油三酯。術語“基本上由......組成”用于定義包括所列舉要素但排除
其他要素的脂質組合物，即，該術語脂質組合物用于限定基本上僅由脂質組成的組合物。
“由......組成”因而意指排除其他要素的超過痕量的要素。由這些過渡術語中的每一個
定義的實施方案在本發明的范圍內。在本說明書和所附權利要求書全文中，除非上下文另外要求，否則詞語“包含”以及變化形式如“包含的”應理解為暗示包括陳述的整體或步驟或者整體或步驟的組，但不排除任何其他整體或步驟或者整體或步驟的組。進一步地，例如當提及構成本文各種脂質組合物的要素的量或范圍時所有數值都是近似值，其以(+)或(_)多達規定值(stated value)的20%，有時多達規定值的10%的值變化。應理解，即使不一定明確陳述，但所有數值指定前面都有術語“約”。應注意，當各種實施方案通過使用給定范圍進行描述時，該范圍照這樣給出僅是為了方便和簡潔，而不應解讀為是對本發明范圍的剛性限制。因此，范圍的描述應視為已具體公開所有可能的子范圍以及該范圍內的各個數值。應意識到，為清楚起見而描述在單獨實施方案的上下文中的本發明某些特征也可以以組合形式提供在單一實施方案中。相反，為了簡潔起見而描述在單一實施方案的上下文中的本發明各種特征也可以單獨地提供，或以任何合適的子組合形式提供，或在合適時提供在本發明描述的任何其他實施方案中。在各種實施方案的上下文中描述的某些特征并不能視為這些實施方案的必要特征，除非該實施方案在沒有這些要素的情況下是無效的。應注意，在本發明一方面的上下文中詳細描述的本發明某些實施方案的特征可以適用于本發明其他方面。現將在根據本發明進行的實驗的以下描述中舉例說明本發明。應理解，這些實施例旨在為說明性的而非限制性的。明顯地，根據上述教導，這些實施例的許多修改和變化是可能的。因此，應理解在所附權利要求書的范圍內，本發明可以以除本文下面具體描述的方式之外的無數可能方式實踐。非限制性實施例的描述在本發明的描述中以及在下面提供的非限制性實施例中提到脂肪基質和脂肪共混物。應理解，術語“脂肪基質”或“脂肪濃縮物”或“脂肪基質濃縮物”用于表示酶法制備的脂質組合物，其包含具有高含量sn-2棕櫚酸的植物來源的甘油三酯混合物；而術語“月旨肪共混物”用于表示包含脂肪基質以及植物來源的甘油三酯混合物的脂質組合物。脂肪共混物有時用術語“InFat”指代。如下面所示的，脂肪共混物是主要包含與其他植物油混合的甘油三酯的脂肪基質，該甘油三酯具有油酸-棕櫚酸-油酸(OPO)脂肪酸，該脂肪酸具有高含量的總棕櫚酸和高含量的sn-2棕櫚酸。一般而言，這種脂肪共混物用作嬰兒配方食品中的脂肪部分，并且可以用在其他嬰孩食物如餅干、棒狀食品等中。實施例I-制備脂肪基質和脂肪共混物表I詳細列出數種富集有高含量的在sn-2位的棕櫚酸的脂肪基質的含量。該脂肪基質包含高百分比的在三酰基甘油(TAG)的sn-2位的棕櫚酸，C16:0，和高百分比的在sn-Ι位和sn-3位的不飽和脂肪酸。該脂肪基質按照其公布內容以引用的方式整體并入本文的W005/036987中描述的方法制備。一般而言，使富含棕櫚酸(優選高于78%)的甘油三酯混合物與富含油酸(優選高于75% )并且具有低含量的棕櫚酸和硬脂酸(優選低于6% )的游離脂肪酸混合物反應。簡言之，甘油三酯混合物可以由雙分餾棕櫚硬脂生產，而游離脂肪酸(FFA)混合物由分餾后的棕櫚仁油或者由高油酸向日葵油獲得。在無附加溶劑的情況下將這兩種混合物在攪拌(任選的大規模的)反應器中進行共混。向該混合物中加入合適的脂肪酶，并且將甘油三酯、FFA和催化劑的混合物在50°C _60°C下攪拌約3_9小時，從而得到最終的所需的甘油三酯混合物。除去任何過多的FFA。可以利用漂白和除臭階段對該甘油三酯產品進一步處理以便改善顏色、氣味和味道。任選地，用天然抗氧化劑強化該產品從而增加該產品的存放時間。可以使該催化劑進一步再循環以在進一步的批次中加以重新利用。表I-脂肪基質組成 脂肪基質序號 11 [2 [3 P [s Ii [7 [i R [To~Wi""""
/腐肪酸*____________
「 … __— ~ 29.4 29J~32.6 32.2 30J 29~29~30~33~30~
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C18:0 4 4,4 4.4~4 4.1 3,82:6 2:6 3 ~33
CTh1...........................................53J......— 519........515.53J—. Τ~ 5556—. 56~Γ 5256~Γ
C1K;2 K 17.8 丨 8.2丨 8 17.9 18.3丨 9 丨 9 18.5 ItO丨8.5*除了限定為％的比率之外，所有數字都表示％ (w/w) 0 “C16:0”表示在總脂肪酸中的總棕櫚酸含量。“sn-2位的C16:0”表示sn-2位的棕櫚酸在總sn_2位脂肪酸中所占的％。“比率”表示sn-2位的棕櫚酸C16:0在總C16:0中所占的％ [ (sn-2位的C16:0在總sn-2位脂肪酸中所占的％ )/3)/(%總C16:0)] XlOO然后使用該脂肪基質形成也包含其他油的脂肪共混物。該脂肪基質可占適合于在用于本發明的配方食品中使用的脂肪共混物的約30%直至約83%。包含與其他脂肪組合的表I所列脂肪基質的共混物提供在表2中。具體地，表2詳細列出包含脂肪基質1、7、8、9、10或11中的一種的共混物的含量。該脂肪共混物通過使所選的脂肪基質與其他油共混來制備。因此，該共混物的脂肪酸組成由脂肪基質的脂肪酸組成和與該脂肪基質混合的其他油的脂肪酸組成產生。表2-脂肪共混物組成
權利要求
1.一種促進受試者的有益腸道菌群發育的方法，其包括向所述受試者施用包含植物來源的脂肪源的脂質組合物，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酷，并且其中在所述甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。
2.根據權利要求I所述的方法，其中所述脂質組合物對所述受試者腸道中的至少ー種病原細菌的定殖產生影響，其中所述影響選自由抑制、防止和減少所述至少ー種病原細菌的定殖組成的組。
3.根據權利要求I或2所述的方法，其中所述脂質組合物對所述受試者的免疫系統產生影響。
4.根據權利要求3所述的方法，其中所述受試者罹患由腸道菌群失衡引起的免疫系統的至少ー種病癥。
5.根據權利要求4所述的方法，其中所述免疫系統中的至少ー種病癥選自炎癥、特應性、過敏、喂養不耐受和感染，并且所述脂質組合物對治療所述病癥有效。
6.根據權利要求I至5中任一項所述的方法，其中所述脂質組合物促進用雙歧桿菌和乳酸桿菌增強的腸道菌群的發育。
7.根據權利要求I至5中任一項所述的方法，其中所述脂質組合物增強受試者腸道中的至少ー種細菌的定殖，其中所述細菌選自由雙歧桿菌和乳酸桿菌組成的組。
8.根據權利要求I至7中任一項所述的方法，其中所述脂質組合物抑制所述受試者腸道中至少ー種病原細菌的定殖。
9.根據權利要求I至8中任一項所述的方法，其中所述受試者是兒童。
10.根據權利要求9所述的方法，其中所述兒童是嬰兒或學步兒童。
11.根據權利要求10所述的方法，其中所述嬰兒是通過剖宮產分娩的。
12.根據權利要求10或11中任一項所述的方法，其中所述嬰兒是選自早產嬰兒和足月嬰兒的新生兒。
13.根據權利要求I至12中任一項所述的方法，其中所述受試者有罹患腸道菌群群體分布失衡的風險。
14.根據權利要求I至13中任一項所述的方法，其中在所述脂肪源中，在所述甘油骨架的sn-Ι和sn-3位的總脂肪酸部分的至少50%或70%是不飽和的。
15.根據權利要求14所述的方法，其中在所述脂肪源中，在所述sn-Ι和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%或至少40%是油酸部分。
16.根據權利要求14所述的方法，其中在所述脂肪源中，在所述sn-Ι和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%或6%是亞油酸部分。
17.根據權利要求I至13中任一項所述的方法，其中在所述植物來源的脂肪源中(i)所述總棕櫚酸殘基的至少30%、33%、38%或40%在所述甘油骨架的sn-2位；(ii)在所述甘油骨架的sn-Ι和sn-3位的脂肪酸部分的至少50 %或70 %是不飽和的；(iii)在所述sn-Ι和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%或40%是油酸部分；和(iv)在所述sn-Ι和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%或6%是亞油酸部分。
18.根據權利要求I至13中任一項所述的方法，其中在所述植物來源的脂肪源中，在所述甘油骨架的sn-2位的總脂肪酸殘基的至少13% w/w是棕櫚酸殘基。
19.根據權利要求I至18中任一項所述的方法，其中所述植物來源的脂肪源包含與植物油混合物共混的脂肪基質，其中所述混合物包含選自由下列組成的組的油豆油、棕櫚樹油、卡諾拉油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油、紅花油和菜籽油。
20.根據權利要求19所述的方法，其中所述植物油可以在與所述脂肪基質共混之前進行隨機化。
21.根據權利要求I至20中任一項所述的方法，其中所述植物來源的脂肪源包含在食品和嬰兒配方食品中的任一者中，其中所述食品選自包括面包特別是餅干和糕點的焙烤食品、人乳脂肪替代品、包括奶和乳飲料的乳制品、冰淇淋、谷類制品、調味汁、湯、包括人造黃油的涂抹食品、餡料、油和脂肪、豆制品、肉制品、油炸食品、糖果產品、棒狀食品、塊狀糖、糖果和巧克力、點心、飲料和奶昔、速溶產品、速溶飲料產品、冷凍食物、包括預制的熟制蔬菜泥和/或水果泥在內的供嬰兒、學步幼童及幼兒用的預制食品、調味品產品，以及食用油和脂肪。
22.根據權利要求21所述的方法，其中所述嬰兒配方食品包含所述植物來源的脂肪源，連同蛋白質源、碳水化合物源、礦物質、維生素以及任選的載體、稀釋劑、添加劑或賦形劑中的至少ー種。
23.一種用于促進受試者的有益腸道菌群發育的可食用的植物來源的脂肪源，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在所述總脂肪酸中占15-55 %的棕櫚酸部分的甘油三酷，并且其中在所述甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。
24.根據權利要求23所述的脂肪源，其中所述脂肪源對所述受試者腸道中的至少ー種病原細菌的定殖產生影響，其中所述影響選自由抑制、防止和減少所述至少ー種病原細菌的定殖組成的組。
25.根據權利要求23或24所述的脂肪源，其中所述脂肪源對所述受試者的免疫系統產生影響。
26.根據權利要求25所述的脂肪源，其中所述受試者罹患由腸道菌群失衡引起的免疫系統的至少ー種病癥。
27.根據權利要求26所述的脂肪源，其中所述免疫系統中的至少ー種病癥選自炎癥、特應性、過敏、喂養不耐受和感染，并且所述脂質組合物對治療所述病癥有效。
28.根據權利要求23至27中任一項所述的脂肪源，其中所述脂肪源促進主要包含雙歧桿菌和乳酸桿菌的腸道菌群的發育。
29.根據權利要求23至28中任一項所述的脂肪源，其中所述脂肪源增強所述受試者腸道中的至少ー種細菌的定殖，其中所述細菌選自由雙歧桿菌和乳酸桿菌組成的組。
30.根據權利要求23至29中任一項所述的脂肪源，其中所述脂肪源抑制所述受試者腸道中至少ー種病原細菌的定殖。
31.根據權利要求30所述的脂肪源，其中所述病原細菌選自由大腸菌群生物體、腸桿菌、梭菌綱、韋榮氏球菌屬、變形菌屬、銅綠假單胞菌、葡萄球菌屬和鏈球菌組成的組。
32.根據權利要求23至31中任一項所述的脂肪源，其中所述受試者是兒童。
33.根據權利要求32所述的脂肪源，其中所述兒童是嬰兒或學步兒童。
34.根據權利要求33所述的脂肪源，其中所述嬰兒是通過剖宮產分娩的。
35.根據權利要求33或34中任一項所述的脂肪源，其中所述嬰兒是選自早產嬰兒和足月嬰兒的新生兒。
36.根據權利要求23至35中任一項所述的脂肪源，其中所述所述受試者有罹患腸道菌群群體分布失衡的風險。
37.根據權利要求23至36中任一項所述的脂肪源，其中在所述脂肪源中，在所述甘油骨架的sn-Ι和sn-3位的總脂肪酸部分的至少50%或70%是不飽和的。
38.根據權利要求37所述的脂肪源，其中在所述脂肪源中，在所述sn-Ι和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%或至少40%是油酸部分。
39.根據權利要求37所述的脂肪源，其中在所述脂肪源中，在所述sn-Ι和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%或6%是亞油酸部分。
40.根據權利要求23至36中任一項所述的脂肪源，其中在所述脂肪源中(i)所述總棕櫚酸殘基的至少30%、33%、38%或40%在所述甘油骨架的sn-2位；(ii)在所述甘油骨架的sn-Ι和sn-3位的脂肪酸部分的至少50%或70%是不飽和的；(iii)在所述sn_l和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%或40%是油酸部分；和(iv)在所述sn_l和sn-3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%或6%是亞油酸部分。
41.根據權利要求23至36中任一項所述的脂肪源，其中在所述脂肪源中，在所述甘油骨架的sn-2位的總脂肪酸殘基的至少13% w/w是棕櫚酸殘基。
42.根據權利要求23至41中任一項所述的脂肪源，其中所述脂肪源包含與植物油混合物共混的脂肪基質，其中所述混合物包含選自由下列組成的組的油豆油、棕櫚樹油、卡諾拉油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油、紅花油和菜籽油。
43.根據權利要求42所述的脂肪源，其中所述植物油可以在與所述脂肪基質共混之前進行隨機化。
44.根據權利要求23至43中任一項所述的脂肪源，所述脂肪源包含在食品和嬰兒配方食品中的任一者中，其中所述食品選自包括面包特別是餅干和糕點的焙烤食品、人乳脂肪替代品、包括奶和乳飲料的乳制品、冰淇淋、谷類制品、調味汁、湯、包括人造黃油的涂抹食品、焰料、油和脂肪、 制品、肉制品、油炸食品、糖果廣品、棒狀食品、塊狀糖、糖果和巧克力、點心、飲料和奶昔、速溶產品、速溶飲料產品、冷凍食物、包括預制的熟制蔬菜泥和/或水果泥在內的供嬰兒、學步幼童及幼兒用的預制食品、調味品產品，以及食用油和脂肪。
45.根據權利要求44所述的脂肪源，其中所述嬰兒配方食品包含所述脂肪源，連同蛋白質源、碳水化合物源、礦物質、維生素以及任選的載體、稀釋劑、添加劑或賦形劑中的至少ー種。
46.ー種包含用于促進受試者的有益腸道菌群發育的根據權利要求23至45中任ー項所述的植物來源的脂肪源的食品，其中所述食品選自包括面包特別是餅干和糕點的焙烤食品、人乳脂肪替代品、包括奶和乳飲料的乳制品、冰淇淋、谷類制品、調味汁、湯、包括人造黃油的涂抹食品、餡料、油和脂肪、豆制品、肉制品、油炸食品、糖果產品、棒狀食品、塊狀糖、糖果和巧克力、點心、飲料和奶昔、速溶產品、速溶飲料產品、冷凍食物、包括預制的熟制蔬菜泥和/或水果泥在內的供嬰兒、學步幼童及幼兒用以及供成人用的預制食品、調味品產品，以及食用油和脂肪。
47.一種減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間的方法，其包括向所述受試者施用包含植物來源的脂肪源的脂質組合物，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在所述總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酷，并且其中在所述甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。
48.根據權利要求47所述的方法，其中所述脂肪源如在權利要求14至21中的任ー項中所定義的。
49.根據權利要求47或48所述的方法，其中所述受試者如在權利要求9至13中的任ー項中所定義的。
50.根據權利要求47至49中任一項所述的方法，其中所述脂肪源包含在如權利要求44或45中的任ー項中所定義的食品或嬰兒配方食品中。
51.—種商業包裝,其包含 a)在腸內施用至受試者后促進所述受試者的有益腸道菌群發育的植物來源的脂肪源； b)任選的可食用的生理學上可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或非活性添加劑中的至少ー種； c)任選的至少ー種用于輸送a)和b)中定義的ー種/多種成分的可食用的生理學上可接受的載體或稀釋劑； d)用于混合a)、b)和/或c)中定義的成分的裝置和容器；和 e)使用說明書。
52.根據權利要求51所述的商業包裝，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在所述總脂肪酸中占15-55%的棕櫚酸部分的甘油三酷，并且其中在所述甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30%。
53.根據權利要求51所述的商業包裝，其中在所述脂肪源中(i)所述總棕櫚酸殘基的至少30%、33%、38%或40%在所述甘油骨架的sn_2位；(ii)在所述甘油骨架的sn_l和sn-3位的脂肪酸部分的至少50%或70%是不飽和的；(iii)在所述sn_l和sn_3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%或40%是油酸部分；和(iv)在所述sn-Ι和sn_3位的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%或6%是亞油酸部分。
54.根據權利要求51所述的商業包裝，其中所述脂肪源是根據權利要求23至45所述的脂肪源中的任ー種。
全文摘要
公開了誘導和促進受試者的有益腸道菌群發育和/或減少受試者的啼哭期的出現頻率和持續時間的方法，該方法包括向受試者施用包含植物來源的脂肪源的脂質組合物，其中該脂肪源是甘油三酯脂肪源，其包含具有在總脂肪酸中占15-55％的棕櫚酸部分的甘油三酯，并且其中在甘油骨架的sn-2位的棕櫚酸部分的水平是總棕櫚酸的至少30％。該方法特別供兒童使用。公開了具體脂肪源，以及食品和包含它們的商業包裝。
文檔編號A23L1/29GK102843921SQ201180019432
公開日2012年12月26日 申請日期2011年4月26日 優先權日2010年4月26日
發明者法比亞納·巴-約瑟夫, 約納坦·馬諾爾, 察弗拉·柯亨, 阿米特·戈倫, 耶爾·里夫什茨 申請人:酶學技術有限公司