專利名稱：：石斛葛根杜仲功能食品的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種對化學性肝損傷有輔助保護功能和增強免疫力的保健食品，特別是以石斛為君藥的保健功能食品。
背景技術：
：肝臟是重要的物質代謝器官，在碳水化合物、脂類、蛋白質、維生素、激素、膽汁等物質的吸收、貯存、生物轉化、分泌、排泄等方面都起著重要的作用。肝臟具有強大的再生和代償能力，能克服輕度或局限性損傷而造成的肝功能障礙。但許多病因可導致肝臟實質細胞的變形和壞死，造成肝硬化和肝壞死。當肝臟嚴重損傷、代謝能力顯著減弱時，就會出現嚴重的肝功能障礙，進一步加重肝功能衰竭，并引起中樞神經系統的功能障礙而導致肝昏迷。引起肝損傷的因素很多，如酒精的過量攝入、藥物代謝產毒及環境毒物的侵蝕等。據美國疾病預防控制中心2004年的一份報告稱，美國每年有7.5萬人因過量飲酒而死亡。另據俄羅斯國家統計委員會2004年的報告，每年有超過3.7萬人死于酒精中毒。近年來，我國居民中酒精肝、脂肪肝的患病人群日益擴大，且患病人群年齡呈現出低齡化趨勢。現在，酒精肝、脂肪肝等化學性肝損傷已經成為一種常見病，正嚴重蠶食國人身體健康。肝臟問題，迫切需要關注。開發具有保護肝損傷的功能性食品，巿場潛力巨大。我國的養生保健橫亙古今，自古就有重養生和藥食同源的養生文化。中醫藥是中華民族長期醫學實踐的結晶，它具有與現代化醫療保健觀相似相通的醫療保健觀念。具有整體觀、辨證論治、復方中藥等特點的中醫藥的優勢集中表現在能夠全方位地調整人體的免疫力，為人們高質量的生活方式提供一種有力的支持手段。西醫講"治"，中醫講"調"、"補"、"養"，臨床對增強免疫力的治療手段是注射免疫球蛋白，但這僅僅限于危重病人的情況，對于可以正常生活的普通人群，增強免疫力基本沒有什么臨床的藥物可以達到很好的療效。對于目前缺乏藥物治療的癥狀，利用我國藥食同源的中藥材開發保健食品，是一個很好的選擇。經現代醫學研究表明，人體免疫力低下是造成肝細胞不健康的直接原因，在進行護肝的同時增強人體免疫力，能有效地增強肝臟功能。本發明充分考慮到這一點，利用藥食兩用的名貴中藥材制備出該功能食品，使人體免疫力增加的同時，也達到保肝護肝的效果。石斛始載于《神農本草經》，列為上品，歷代本草均有記載。《神農本草經》記載"…味甘、平，無毒。治傷中，除痹，下氣，補五臟虛勞，贏痩，強陰。久服厚腸胃，輕身，延年，長肌肉，逐皮膚邪熱，痱氣，定志除驚......"。《本草綱目拾遺》(清.趙學敏)"清胃除虛熱，生津，已勞損，以之代茶，開胃健脾，定驚療風，能鎮涎痰，解署，甘芳降氣"。本產品所釆用石斛為蘭科植物金釵石斛Dendrobiumnobilelindl.的干燥莖；為《中國藥典》(2005年版)一部石斛項下首選品種。金釵石斛《中華人民共和國藥典》(2005年版)一部載性味與歸經苦，微寒。歸胃、腎經。功能與主治益胃生津，滋陰清熱。用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。金釵石斛的主產地在云南，生于海拔590~3000米原始深山樹林或巖壁上。石斛呈扁圓柱形，長2040cm,直莖0.40.6cm,節間長2.5-3cm。表面金黃色或黃中帶綠色，有深縱溝。金釵石斛主要功效成分為石斛多糖和石斛生物堿類。石斛生物堿類主要成分有石斛堿(^fe"t/raZ)/"e)、石斛次堿("06//0"/"6義石斛醚堿(&"Aoja'^)、6-羥基石斛醚堿、4-羥基石斛醚堿及次甲基石斛素(w^7zV^^;/e恥)等。其中石斛多糖是石斛強壯作用的主要成分，能增強機體免疫功能，并具有抗腫瘤活性。金釵石斛在云南當地民間一直以來是采用切片干燥或加工成楓斗后作為名貴中藥材銷售，但當地老百姓則僅把其干品或鮮品作為茶飲用。不論其作為中藥和茶飲用都是通過煎、煮方法，石斛的有效成分不能完全釋放出來，并被人體充分吸收利用，通過高溫煎、煮，石斛的粗多糖變為寡糖、單糖，功效下降，并且未正確與相應的藥物配伍也不能充分發揮其功效。葛根為豆科植物野葛puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根，始載于《神農本草經》，歷代本草均有記載。葛根中除含有對預防心腦血管等方面有顯著療效的黃酮類活性成分外，還含有人體必需的氨基酸(賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸等)和微量元素(硒、鋅、錳、鍺等)。葛根對心腦血管、輔助降血脂、降血壓、輔助降血糖、對化學性肝損傷有保護作用、解酒、抗心率失常、延緩衰老、改善學習記憶等都有很好的作用。尤其適用于化學性肝損傷的人員。為《中國藥典》(2005年版一部)收載品種。葛根《中華人民共和國藥典》(2005年版)一部載性味與歸經甘、辛，涼。味甘、歸脾、胃經。功能與主治解肌退熱，生津，透疹，升陽止泄。用于外感發熱頭痛、項背強痛，口渴，消渴，麻參不透，熱痢，泄瀉；高血壓頸項強痛。杜仲葉為杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliv.的干燥樹葉。杜仲是我國名貴的滋補中藥材，在《神農本草經》、《本草綱目》中就被列為藥之上品。近年來，國內外許多學者對杜仲葉的化學成分和藥理作用進行了大量研究，發現杜仲葉與杜仲有相類似的化學成分，均具有護肝、增強免疫力、調節血脂、降低血糖、調節血壓、抗菌、抗病毒、抑制腫瘤細胞生長等藥理作用，以及延緩衰老、美白養顏、滋陰補腎、強壯筋骨等功效。辛曉明等研究表明，杜仲總多糖能明顯抑制環磷酰胺致肝損傷小鼠血清谷丙轉胺酶(ALT)、谷草轉胺酶(AST)的升高和肝組織的過氧化物丙二醛(MDA)的過量產生，還顯著升高受損肝組織超氧化物歧化酶(S0D)活性，這有利于清除自由基，減少膜脂質的過氧化，其對環磷酰胺造成的肝損傷有良好的治療作用，為腫瘤的中西醫結合治療提供了實驗依據,兩者相互作用的機制有待進一步研究。彭密軍等利用高效液相色譜-質譜法測定杜仲樣品中環烯醚萜含量，證明杜仲的葉、皮中含有類似的化學成分，主要為環烯醚萜類、苯丙素類、黃酮類等。不同環烯醚薛化合物藥效活性不同。桃葉珊瑚甙具有保肝利膽作用，可保護CCl4誘導的肝損傷；京尼平甙酸則具有防衰老、促進膠原蛋白合成和改善成年老鼠的角質層代謝功能；而京尼平甙具有體內抗血栓等作用。杜仲葉《中華人民共和國藥典》(2005年版)一部載性味與歸經微辛、溫。歸肝、腎經。功能與主治補肝腎，強筋骨。用于肝腎不足，頭暈目眩，腰膝酸痛，筋骨痿軟。
發明內容本發明所要解決的技術問題是提供一種石斛葛根杜仲功能食品，具有明顯的護肝、增強免疫力、增強抗病能力的保健功效，無任何毒副作用。解決本發明的技術問題所釆用的方案是由粒度>60目的石斛粉、葛根提取物、杜仲提取物混合均勻而成，且三者的混合重量分數之比為石斛6~10份，葛根提取物13份，杜仲提取物12份。在本配方中，杜仲提取物為杜仲葉的提取物，石斛釆用金釵石斛，可達到療效更好，成本更低的效果。本發明的配伍依據以石斛為君藥，佐以葛根和杜仲葉配伍。石斛味甘，滋養肝陰；杜仲葉歸肝、腎經，補肝益腎；葛根性涼味甘，清熱生津解表。全方配合，甘潤平和，滋陰益陽，陰中求陽，則陽得陰助生化無窮，陽中求陰，則陰得陽升而泉源不竭；又平肝瀉熱、升發清陽，共調人體機能狀態，從而扶正祛邪，增強抗病能力，調動人體整體的防衛作用，共達保肝護肝的目的。對免疫力低下者和易疲勞者有很好的保健功效。本發明的有益效果是釆用石斛、葛根、杜仲葉生產的功能食品，使用方便，能充分發揮石斛的功效，并且與葛根和杜仲葉相互協同，具有更高的活性成分，其專門針對化學性肝損傷者、免疫力低下者癥狀的保健作用更加顯著，無毒副作用。且本發明食品標志性成分/功效成分明確，質量穩定，符合大生產的要求。在對化學性肝損傷的保護方面降低酒精性損傷的肝組織中過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)含量的作用；降低酒精性損傷的肝組織中甘油三脂(TG)含量的作用；提高肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH)含量的作用；減輕酒精性肝損傷大鼠的肝組織脂肪變性的作用。在增強免疫力方面促進脾淋巴細胞增殖、轉化作用；促進抗體生成細胞增殖；提高血清融血素水平；促進單核-巨噬細胞碳廓清功能和腹腔巨噬細胞的吞噬能力；提高自然殺傷(NK)細胞活性。具體實施例方式實施例l:本發明藥物由下列組分組成(重量配比)主要成分石斛6份，葛根提取物l份，杜仲提取物l份。制作方法步驟步驟l:石斛干燥后粉碎、過60目篩，取粉末；步驟2:石斛粉、葛根提取物、杜仲提取物混合后過60目篩，以02g的量充填膠囊。實施例2:本發明藥物由下列組分組成(重量配比)主要成分石斛6份、葛根提取物2份、杜仲提取物2份；制作方法步驟同實施例1。實施例3:本發明藥物由下列組分組成(重量配比)主要成分石斛7份、葛根提取物2份、杜仲提取物l份；制作方法步驟同實施例1。實施例4:本發明藥物由下列組分組成(重量配比)主要成分石斛7份、葛根提取物l份、杜仲提取物2份。^制作方法步驟同實施例1。上述實施例用于對化學性肝損傷有輔助保護功能和增強免疫力的功能食品，經過一般制劑工藝，可以制成多種劑型，如膠囊劑、片劑、散劑、沖劑、膏劑或顆粒劑。本發明功能試驗的結果采用上述實施例l配方制成的膠囊，按照衛生部《保健食品檢驗與評價技術規范(2003版)》的規定進行功能試驗和試驗結果評價。一、對化學性肝損傷有輔助保護功能試驗結果1、樣品對大鼠體重的影響表1試驗前后各組大鼠體重變化(；士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注表中各組間比較差異均無顯著性(PX).05)。由表l可見，試驗前各組大鼠體重一致，試驗過程各周各組大鼠的體重及試驗結束時的增重量相互比較，差異均沒有顯著性(PX).05),表明該樣品對大鼠的體重增長沒有明顯影響作用。2、樣品對酒精性肝損傷大鼠的肝組織過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)含量的影響表2各組大鼠肝組織句漿丙二醛(MDA)含量(X士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注表中P值為各組與模型對照組比較的統計結果從表2可見，肝損模型對照組大鼠肝組織的MDA含量明顯高于陰性對照組，且兩者的差異具有非常顯著性(PO.01),說明肝損模型成立。樣品各劑量組大鼠肝組織的MDA含量均低于肝損模型對照組，且中，低劑量組與模型對照組的差異均有顯著性(PO.05),表明該樣品具有降低酒精性損傷的肝組織中過氧化脂質含量的作用。3、樣品對酒精性肝損傷大鼠的肝組織甘油三酯(TG)含量的影響表3各組大鼠肝組織勾漿TG含量(i±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注表中P值為各組與模型對照組比較的統計結果從表3可見，肝損模型對照組的肝組織TG含量明顯高于陰性對照組，兩者差異具有非常顯著性(PO.Ol)，說明肝損模型成立。樣品各劑量組的肝組織TG含量均低于肝損模型對照組，且與模型對照組的差異均具有非常顯著性(P〈0.05),表明該樣品具有降低酒精性損傷的肝組織中甘油三脂(TG)含量的作用。4、樣品對酒精性肝損傷大鼠的肝組織還原型谷胱甘肽(GSH)含量的影響表4各組大鼠肝組織勻漿GSH含量(X±S)劑量組(mg/kgBW)動物數(只)肝組織GSH含量(nmol/g肝組織)P值8001211.4±1.50.0154001211.5±1.20細2001211.0±1.20.034模型對照129.4±2.1陰性對照1211.8±1.80.007注表中P值為各組與模型對照組比較的統計結果從表4可見，肝損模型對照組的肝組織中GSH含量顯著低于陰性對照組,兩者差異有非常顯著性(PO.Ol),表明肝損模型成立。樣品各劑量組大鼠肝組織的GSH含量與模型對照組比較，差異均有顯著性(P<0.05)，表明該樣品對酒精性肝損傷大鼠的肝組織中GSH含量有明顯影響作用。5、樣品對酒精性肝損傷大鼠的肝組織脂肪變性的影響表5各組大鼠肝組織脂肪變性檢查結果(Y±S)劑量組(mg/kgBW)動物數(只)組織脂肪變性評分P值■12206.1±65.50扁40012137.6±96.80扁20012129.4±53.1o扁模型對照1276.8±63.6陰性對照12268.1±7.170.000注表中P值為各組與模型對照組比較的統計結果從表5可見，肝損模型對照組大鼠的肝組織脂肪變性評分值高于陰性對照組，兩者差異具有非常顯著性(PO.Ol)，表明肝損模型成立。樣品各劑量組大鼠肝組織脂肪變性評分值均低于肝損模型對照組，且與模型對照組的差異具有顯著性(PO.01),表明該樣品具有減輕酒精性肝損傷大鼠的肝組織脂肪變性的作用。小結經口給予大鼠200mg/kgBW、400mg/kgBW、800mg/kgBW(相當于人體推薦用量5、10、20倍)劑量的石斛葛根杜仲膠囊，給大鼠連續灌胃30天，能顯著降低酒精性肝損模型的大鼠肝組織中的丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)含量及提高肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH)含量，減輕肝組織脂肪變性程度，對大鼠的體重無明顯影響。由此可見，該樣品具有對酒精性肝損傷有輔助保護功能作用。從上述模型可以證明，該樣品對肝損傷有輔助保護功能。二、增強免疫力的功能試驗結果1、樣品對小鼠體重的影響_表1石斛葛根杜仲膠囊增強免疫力功能試驗小鼠體重(^士s)免疫I組(ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化實驗、NK細胞活性測定)劑量組(mg/kgBW)動物數(只)初始體重(g)中期體重(g)末期體重(g)增重(g)■1220.7±1.029.2±1.635.3±2.114.6±2.14001220.5±1.028.9±1.835.1±1.914.5±2.22001220.8±0.929.2±1.635.4±2.415.1±2.1陰性對照1220.7±1.029.3±1.635.9±2.415.3±2.3注各劑量組實驗初始、申期和末期的小鼠體重及增重與對照組比較，差異均無顯著性(P>0.05)。表2石斛葛根杜仲膠囊增強免疫力功能試驗小鼠體重^士s)免疫II組(碳廓清實驗)劑量組(mg/kgBW)動物數(只)初始體重(g)中期體重(g)末期體重(g)增重(g)8001220.1±0.629.2±1.634.8±1.414.7±1.84001220.2±0.828.9±1.935.3±1.614.8±1.22001220.1±0.829.2±2.234.4±2.214.6±2.2陰性對照1220.2±0.629.3±2.035.4±2.014.1±1.7免疫ni組(臟/體比值測定，血清溶血素測定和抗體生成細胞數測定)劑量組動物數初始體重中期體重末期體重增重(mg/kgBW)(只)(g)(g)(g)(g)8001220.1±0.627.2±1.634.3±1.414.5±2.14001220.2±0.827.9±1.435.1±1.614.4±1.52001220.1±0.828.2±1.634.4±2.215.1±2.1陰性對照1220.2±0.628.3±2.635.9±2.014.6±1.7兔疫iv組(遲發型變態反應實驗)'<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注各劑量組實驗初始、中期和末期的小鼠體重及增重與對照組比較，差異均無顯著性(P>0.05)。由表1、表2可見，實驗初、實驗中期、實驗末期樣品各劑量組的小鼠體重及實驗期間小鼠體重增長與陰性對照組間比較，差異均無顯著性(PX).05),表明該樣品對小鼠的體重增長無明顯影響。2、樣品對小鼠免疫器官臟器/體重比值的影響表3石斛葛根杜仲膠囊增強免疫力功能試驗小鼠的免疫器官臟器/體重比銜"s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由表3可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，小鼠的胸腺/體重及脾臟/體重比值與陰性對照組比較，均無顯著性差異(PX).05)，表明該樣品對小鼠的免疫器官重量無明顯影響。3、樣品對小鼠的細胞免疫的影響3.1樣品對ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化能力的影響—表4石斛葛根杜仲膠囊的小鼠淋巴細胞—轉化實驗結果^士s)官臟器/體重比值(；士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>從表4可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，高劑量組小鼠的淋巴細胞轉化能力明顯高于陰性對照組，差異具有顯著性(PO.01),表明該樣品具有促進小鼠的淋巴細胞增殖、轉化能力的作用。3.2樣品對小鼠遲發型變態反應(DTH)的影響_表5石斛葛根杜仲膠囊的小鼠遲發型變態反應(DTH)實驗結果(；士s)劑量組<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>—從表5可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，高、中低劑量組小鼠的左右耳片重量差值高于陰性對照組，但無顯著性差異(P>0.05),表明該樣品沒有促進遲發型變態反應的作用。4、樣品對小鼠的體液免疫的影響4.1樣品對小鼠的抗體生成細胞數的影響從表6可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，高劑量組小鼠的抗體生成細胞數高于陰性對照組，兩組差異具有顯著性(P<0.05)，表明該樣品具有促進小鼠抗體生成細胞增殖的作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>4.2樣品對小鼠血清溶血素的影響—表7石斛葛根杜仲膠囊的小鼠溶血素測定結果(；士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從表7可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，高、中、低劑量組小鼠的抗體積數高于陰性對照組，且與陰性對照組的差異均具有顯著性(分別PO.01和P〈0.05),表明該樣品具有提高小鼠的血清溶血素水平的作用。5、樣品對小鼠的單核-巨唾細胞吞唾功能的影響5.1樣品對小鼠的單核-巨噬細胞碳廓清的影響一表8石斛葛根杜仲膠囊的小鼠碳廓清實驗結果(^土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從表8可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根氺」d中膠囊30天，高、量組小鼠的吞噬指數高于陰性對照組，與陰性對照組的差異具有顯著性(PO.01),表明該樣品具有促進小鼠的單核-巨噬細胞碳廓清功能的作用。5.2樣品對小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響—表9石斛葛根杜仲膠囊的小鼠腹腔巨嗛細胞吞唾雞紅細胞實驗結果(^士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從表9可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，樣品各劑量組小鼠的腹腔巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬率及吞噬指數均高于陰性對照組，其中的高、中劑量組的吞噬率及吞噬指數與對照組的差異具有顯著性(PO.Ol或PO.05),表明該樣品具有促進小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用。6、樣品對小鼠的NK細胞活性的影響—表10石斛葛根杜仲膠囊的小鼠NK細胞活性測定結果(；士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>從表10可見，經口給予小鼠不同劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，樣品各劑量組小鼠的NK細胞活性均高于陰性對照組，且各劑量組與陰性對照組的差異具有非常顯著性(PO.Ol)，表明該樣品具有提高小鼠的NK細胞活性的作用。小結經口給予小鼠200mg/kgBW、400mg/kgBW、800mg/kgBW(相當于人體推薦用量5、10、20倍)劑量的石斛葛根杜仲膠囊30天，能促進小鼠的脾淋巴細胞增殖、轉化作用，促進小鼠的抗體生成細胞增殖，提高小鼠的血清溶血素水平，促進小鼠的單核-巨噬細胞碳廓清功能和腹腔巨噬細胞的吞噬能力，提高小鼠的NK細胞活性，對小鼠的體重增長、胸腺/體重比值、脾臟/體重比值無明顯影響，提示該樣品具有增強免疫力的功能。權利要求1、一種石斛葛根杜仲功能食品，其特征在于由粒度≥60目的石斛粉與葛根提取物和杜仲提取物混合均勻而成。2、根據權利要求l所述的石斛葛根杜仲功能食品，其特征在于石斛粉、葛根提取物、杜仲提取物的混合重量分數之比為石斛610份，葛根提取物13份，杜仲提取物12份。3、根據權利l或2所述的石斛葛根杜仲功能食品，其特征在于杜仲提取物為杜仲葉的提取物，石斛釆用金釵石斛。全文摘要石斛葛根杜仲功能食品。本發明涉及一種對化學性肝損傷有輔助保護功能和增強免疫力的保健食品，特別是以石斛為君藥的保健功能食品。本發明由粒度不低于60目的石斛粉、葛根提取物、杜仲提取物混合均勻而成，且三者的混合重量分數之比為石斛6～10份，葛根提取物1～3份，杜仲提取物1～2份。本功能食品合理地將藥食同源的保肝藥、滋陰藥與補陽功能的品種有機結合，制成了效果很顯著的保健食品，具有保肝明目、潤肺養胃、調劑人體陰陽平衡之功效，可有效對化學性肝損傷和免疫力低下所引起的一系列癥狀有明顯改善作用。文檔編號A23L1/29GK101444303SQ20081023370公開日2009年6月3日申請日期2008年12月10日優先權日2008年12月10日發明者陶國聞申請人:陶國聞