專利名稱：一種從酵母制備飼料添加劑的方法
技術領域：
本發明涉及一種從酵母原料中制取含有核苷酸單體和蛋白水解物的混合物的飼料添加劑與含β-萄聚糖的飼料添加劑的方法。
背景技術：
現已公開的由酵母菌體制取核苷酸的技術有多種，如CN1370837公開了一種從啤酒廢酵母中提取核苷酸的方法；CN1049521公開了一種利用酒廠廢酵母生產5’核酸的方法；CN13970779公開了從味精廢液中提核苷酸的方法。以上這些公開的技術均屬于發酵生產酵母或從啤酒酵母等中提取核苷酸精制產品，工藝復雜，成本高。尚未見有用簡單且低成本從酵母菌體直接生產含有4個核苷酸單體(AMP、GMP、UMP、CMP)、蛋白水解物以及含β-萄聚糖的飼料添加劑的報導。

發明內容
本發明的目的是提出一種使用雙酶法直接從各種酵母乳液制取含有蛋白水解物(肽、氨基酸)及核苷酸和β-萄聚糖的飼料添加劑的方法。
本發明以各種酵母乳液，包括鮮酵母乳液或由干酵母粉調配的乳液為原料，原料乳液中含酵母細胞(干重)8～12％。從酵母乳液制備飼料添加劑的工藝過程如下(1)將原料酵母乳液迅速升溫至90～95℃殺酶，然后降至室溫；(2)加氫氧化納溶液，使乳液氫氧化鈉濃度為0.25N，攪拌30～60分鐘后加鹽酸調pH至7.0～7.5，保溫50～60℃；(3)取樣測定乳液中的酵母細胞及核糖核酸含量；(4)根據所測定的酵母細胞含量向乳液加蛋白酶，所加入的蛋白酶為乳液中所含酵母細胞重量的0.1～0.3％，于溫度50～60℃水解3～6小時，然后迅速升溫至90～95℃殺酶，停止反應；(5)將上述水解液用鹽酸調pH至5.5～5.8，保溫63～65℃，再根據所測定的核糖核酸含量向水解液加入五磷酸二酯酶，每克核糖核酸加入2500～5000u(活力單位)五磷酸二酯酶，進行酶解，攪拌2～3小時，然后迅速升溫至90～95℃殺酶；(6)將上述酶解液經離心分離出清液及渣漿，再將清液及渣漿分別干燥，其中清液干燥得含蛋白水解物和核苷酸混合物飼料添加劑，渣漿干燥得含β-萄聚糖的飼料添加劑。
在本發明的步驟(4)中，所加入的蛋白酶可為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶或諾和諾德(中國)生物技術有限公司生產的Alcalase 2.4L蛋白酶，以Alcalase 2.4L蛋白酶最佳。
本發明的酵母乳液原料可采用(1)啤酒廠沉淀酵母泥，調pH至8～9，再經洗滌得到濕酵母，將其調配成含酵母細胞(干重)8～12％的酵母乳液。
(2)白地霉壓榨塊調至含菌絲體(干重)8～12％的酵母乳液。
(3)將面包酵母乳液調配成含酵母細胞(干重)8～12％的酵母乳液。
(3)將熱帶假絲酵母乳液調配成含酵母細胞(干重)8～12％的酵母乳液。
本發明的酵母乳液原料，如采用干酵母粉調配的乳液則無需滅酶，如采用鮮酵母乳液均需經迅速升溫到90～95℃滅酶。
本發明通過雙酶法，能直接從酵母制取得到含有4種核苷酸(AMP、GMP、CMP、UMP)單體及蛋白水解物的飼料添加劑和含有β-萄聚糖(酵母細胞壁干燥物)的飼料添加劑兩種產品。在這兩種產品中，前者所含的蛋白水解物、肽類化合物和氨基酸含量高達45～60％，4種核苷酸(Amp、Gmp、Cmp、Ump)單體的含量也達到8～24％。該飼料添加劑產品，因含高核苷酸，可以作為幼畜、幼禽、奶牛、魚、蝦及其他水產養殖物的飼料添加劑，有提高免疫能力、加速幼畜、幼禽生長，加快病畜恢復健康的功效；同時，該產品中所含的高蛋白水解物、肽類化合物、氨基酸等又是助鮮劑，與核苷酸在一起時，可以改善飼料的口感，并增加蛋白質的供應量。而所得到的含有β-萄聚糖的飼料添加劑產品也是魚、蝦等水產養殖物的良好飼料添加劑，具有促進甲殼生長的功效。
本發明由于其工藝簡單，生產成本很低，產品營養效果好，因而具有重大的推廣應用價值。
具體實施例方式
實施例一1、取含10％干重的發酵面包酵母乳液1000ml，迅速升溫至95℃，滅酶，降至室溫；2、加入氫氧化鈉，使乳液含氫氧化鈉濃度為0.25N，于20℃以上，攪拌30～60分鐘；3、測定酵母細胞及核糖核酸含量；4、用鹽酸調pH至7.5，保溫55℃；根據測定的酵母細胞含量按所含酵母細胞重量的0.2％加入Alcalase 2.4L蛋白酶，慢速攪拌，酶解4小時后，迅速升溫至95℃，滅酶；5、再以鹽酸調pH至5.6，保溫65℃；根據測定的核糖核酸含量按每克核糖核酸加入3000u五磷酸二酯酶，慢速攪拌，酶解3小時后，迅速升溫至95℃，滅酶；
6、將酶解液用管式離心機離心，將上清液與渣漿分離后分別真空減壓干燥得含核苷酸與蛋白質水解物混合物的飼料添加劑1和含β-萄聚糖的飼料添加劑產品2二種產品。
實施例二1、將啤酒廠沉淀酵母泥，調pH至8～9，再經洗滌得到濕酵母，將其調配成含酵母細胞(干重)12％的酵母乳液1000ml；迅速升溫至95℃，滅酶，降至室溫；2、加入氫氧化鈉，使乳液含氫氧化鈉濃度為0.25N，于20℃以上，攪拌30～60分鐘；3、測定酵母細胞及核糖核酸含量；4、用鹽酸調pH至7.0，保溫55℃；根據測定的酵母細胞含量按所含酵母細胞重量的0.1％加入木瓜蛋白酶，慢速攪拌，酶解5小時后，迅速升溫至95℃，滅酶；5、再以鹽酸調pH至5.8，保溫65℃；根據測定的核糖核酸含量按每克核糖核酸加入5000u五磷酸二酯酶，慢速攪拌，酶解3小時后，迅速升溫至95℃，滅酶；6、將酶解液用管式離心機離心，將上清液與渣漿分離后分別真空減壓干燥得含核苷酸與蛋白質水解物混合物的飼料添加劑1和含β-萄聚糖的飼料添加劑產品2二種產品。
實施例三1、將白地酶壓榨塊調制成含酵母10％(干重)的細胞懸液1000ml，迅速升溫至95℃，滅酶，降至室溫；2、加入氫氧化鈉，使乳液含氫氧化鈉濃度為0.25N，于20℃以上，攪拌30～60分鐘；3、測定酵母細胞及核糖核酸含量；4、用鹽酸調pH至7.0，保溫55℃；根據測定的酵母細胞含量按所含酵母細胞重量的0.3％加入菠蘿蛋白酶，慢速攪拌，酶解6小時后，迅速升溫至95℃，滅酶；5、再以鹽酸調pH至5.5，保溫65℃；根據測定的核糖核酸含量按每克核糖核酸加入2500u五磷酸二酯酶，慢速攪拌，酶解3小時后，迅速升溫至95℃，滅酶；6、將酶解液用管式離心機離心，將上清液與渣漿分離后分別真空減壓干燥得含核苷酸與蛋白質水解物混合物的飼料添加劑1和含β-萄聚糖的飼料添加劑產品2二種產品。
權利要求
1.一種從酵母制備飼料添加劑的方法，以含酵母細胞干重8～12％的酵母乳液為原料，其制備工藝過程如下(1)將原料酵母乳液迅速升溫至90～95℃殺酶，然后降至室溫；(2)加氫氧化納溶液，使乳液氫氧化鈉濃度為0.25N，攪拌30～60分鐘后加鹽酸調pH至7.0～7.5，保溫55～60℃；(3)取樣測定乳液中的酵母細胞及核糖核酸含量；(4)根據所測定的酵母細胞含量向乳液加蛋白酶，所加入的蛋白酶為乳液中所含酵母細胞重量的0.1～0.3％，于溫度55～60℃水解3～6小時，然后迅速升溫至90～95℃殺酶；(5)將上述水解液用鹽酸調pH至5.5～5.8，保溫63～65℃，再根據所測定的核糖核酸含量向水解液加入五磷酸二酯酶，每克核糖核酸加入2500～5000u五磷酸二酯酶，進行酶解，攪拌2～3小時，然后迅速升溫至90～95℃殺酶；(6)將上述酶解液經離心分離出清液及渣漿，再將清液及渣漿分別干燥，其中清液干燥得含蛋白水解物和核苷酸混合物飼料添加劑，渣漿干燥得含β-萄聚糖的飼料添加劑。
2.根據權利要求1所述的從酵母制備飼料添加劑的方法，其特征在于步驟(4)所加的蛋白酶為Alcalase 2.4L蛋白酶。
3.根據權利要求1所述的從酵母制備飼料添加劑的方法，其特征在于所說的酵母乳液原料為啤酒廢酵母經洗滌得到的濕酵母調配而成的酵母乳液、面包酵母乳液調配成的酵母乳液、白地霉壓榨塊調配成的酵母乳液和熱帶假絲酵母乳液調配成的酵母乳液中的任一種。
全文摘要
一種從酵母制備飼料添加劑的方法，本發明以各種酵母乳液，包括鮮酵母乳液或由干酵母粉調配的乳液為原料，通過加氫氧化納溶液進行稀堿法處理后，先后通過加入蛋白酶和五磷酸二酯酶進行兩次酶解反應，最后將酶解液離心分離出上清液和渣漿，再將清液和渣漿分別濃縮干燥，可得到含有4種核苷酸(AMP、GMP、CMP、UMP)單體(含量達到8～24％)及蛋白水解物(含量高達50～60％)的飼料添加劑產品1和含有β－萄聚糖的飼料添加劑產品2的兩種產品。
文檔編號A23J3/00GK1864516SQ200510034639
公開日2006年11月22日 申請日期2005年5月20日 優先權日2005年5月20日
發明者賀鷹摶, 梁超 申請人:萬代生物技術(深圳)有限公司