一種桑葉消毒藥物組合物和制備方法及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及桑蠶病蟲害防治技術領域，更具體地，涉及一種桑葉消毒藥物組合物 及其應用。
【背景技術】
[0002] 種桑養蠶在我國歷史悠久，產繭量和產絲量目前占世界的80%左右。養蠶生產中 因蠶病危害的損失在10%以上，在一些養蠶新區甚至達到20%以上。而蠶病的發生，大都 是由于蠶吃了污染了病原微生物的桑葉所致。研究發現家蠶微粒子孢子存活期長，能在灰 塵、土壤、水流中存活7~8年（張培芬等，2010)，且野外昆蟲易對桑葉造成污染（張碧君， 2014)，因此在蠶病防控上如何有效地減少和預防桑葉的污染尤為重要。桑葉洗消是蠶種 行業普遍采用的最有效和最直接的防病技術。采用桑葉清洗消毒的方法，可切斷桑葉病原 傳播（周菊珍，2013)。目前桑蠶生產實踐中，桑葉洗消主要是使用有效氯濃度為0.3%~ 0. 5%的消毒液浸泡1~3齡的小蠶桑葉lOmin，漂洗干凈，自然晾干后喂食（張培芬， 2010);在4齡眠時第1天使用"防微靈"進行葉面噴霧，后每隔3d噴藥一次，直至結繭（錢 永華等，2001)。此外，根據桑園預警情況，可用0. 3%~0. 35%有效氯漂白粉液直接進行桑 園桑葉的葉面消毒（蘇建，2014)。但目前生產中使用的葉面消毒劑主要為漂白粉、漂粉精 和強氯精等，在對桑葉進行噴霧或清洗消毒過程中，該類葉面消毒劑腐蝕性強，易破壞桑葉 葉質、降低桑葉口感，且影響蠶農健康，污染環境（楊瓊，2009)。
[0003] 因此，蠶業生產上需要一種消毒效果可靠、安全、殺菌譜廣、對環境污染小、對消毒 物品損壞小的消毒劑。隨著目前對消毒劑研究水平的不斷提高，通過與其他學科的結合，研 制出新型高效的復方消毒劑成為了一種研究趨勢。消毒作為蠶業生產過程中不可或缺的重 要環節，實現消毒劑的專業化和功能化，使其高效、廣譜、穩定、低成本亦是未來研究的重要 方向。

【發明內容】

[0004] 本發明要解決的技術問題是針對桑蠶病蟲害防治方面消毒劑的技術不足，提供一 種桑葉消毒的藥物組合物。
[0005] 本發明的要解決的另一技術問題提供所述藥物組合物的制備方法。
[0006] 本發明還一要解決的技術問題是提供所述藥物組合物的應用。
[0007] 本發明的目的通過下述技術方案予以實現：
[0008] 提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包括濃度為1500~50mg/L的二溴海因和 濃度為5g/L的磷酸三鈉。
[0009] 優選地，所述藥物組合物包括濃度為1500mg/L的二溴海因和濃度為5g/L的磷酸 三鈉。
[0010] 本發明同時提供所述藥物組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0011] SOL準備好含磷酸三鈉的濃度為5g/L的溶液1000 mL ;
[0012] S02.按比例稱取二溴海因，將二溴海因在SI所述溶液中完全溶解。
[0013] 本發明同時提供所述藥物組合物的應用，應用操作包括以下步驟：
[0014] SlL取新鮮采摘的桑葉，將采摘的新鮮桑葉在所述藥物組合物中以浸泡或者浸洗 的方式進行葉面消毒；
[0015] S12.將消毒后的桑葉取出放置自然晾干或陰干后，飼喂家蠶。
[0016] 優選地，所述飼喂家蠶的給桑葉的時間為：從四齡起蠶開始飼喂，連續飼喂8~12 日，直至家蠶上蔟，每日給桑2~3次。
[0017] 與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：
[0018] 本發明利用二溴海因和磷酸三鈉組合在一起成為桑葉消毒的藥物組合物，不僅發 揮二溴海因具有低腐、刺激小、高效的特點，而且通過其余磷酸三鈉合理比例的配伍，獲得 了溶解度理想的消毒溶液，調節二溴海因溶液的pH，擴大了二溴海因的殺菌范圍。從而，可 以實現利用較低濃度的二溴海因就可以起到桑葉消毒的作用，降低用藥成本。
[0019] 本發明所述藥物組合物應用方法簡單，應用效果良好，只需要采用藥物浸洗或漂 洗的方式對桑葉進行葉面清洗消毒處理，就可以顯著降低或預防桑葉病原微生物對家蠶的 感染，對家蠶病蟲害防治具有較好的效果，而且避免了對養蠶設備的損壞，不會對養蠶環境 產生污染，對家蠶的正常生長和人類身體健康不會造成影響及危害。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合具體實施例對本發明作出進一步地詳細闡述，所述實施例只用于解釋本 發明，并非用于限定本發明的范圍。下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明，均為常 規方法；所使用的材料、試劑等，如無特殊說明，為可從商業途徑得到的試劑和材料。
[0021] 一、生物材料
[0022] 1、病原：家蠶微孢子蟲（Nosema bombycis Naegeli)孢子、球孢白僵菌（Beauveria bassiana (Bals.) Vuill.)、蘇云金芽抱桿菌猝倒亞種（Bacillus thuringiensis subsp. sotto Ishiwata)芽抱、黑胸敗血病菌（Bacillus bombyseptieus)芽抱、家香質型多角 體病毒（Bombyx mori Cytoplasmic Polyhedrosis Virus，BmCPV)、家香核型多角體病毒 (Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus，BmNPV)均系華南農業大學香學實驗室歷年 保存菌種。
[0023] 2、實驗材料蠶由廣東省蠶業技術推廣中心提供，蠶品種為：932 ·芙蓉X7532 ·湘 暉。
[0024] 本領域技術人員也可以采用其他來源的病原和蠶品種及來源，并不因此限定本發 明范圍。
[0025] 二、供試藥品
[0026] 二溴海因、磷酸三鈉：均為市售成品化學試劑。二溴海因（C5H6Br 2N2O2，含量97% ; Lot. #11410148,上海晶純生化科技股份有限公司），磷酸三鈉（天津市大茂化學試劑廠）， 自行配置成目的濃度消毒液。中和劑：使用PBS配置的1 %硫代硫酸鈉與1 %吐溫-80的混 合液。
[0027] 實施例1本發明藥物組合物對家蠶細菌病病原菌、白僵菌分生孢子的殺滅試驗
[0028] 采用懸液定量法殺滅細菌病病原菌，具體步驟如下：
[0029] 1.配制含不同濃度的二溴海因的藥物組合物，為免贅述，本實施例以含二溴海因 濃度分別為1500mg/L、1000mg/L、500mg/L、200mg/L、50mg/L的藥物組合物為例說明。具體 為：
[0030] 二溴海因濃度為1500mg/L的藥物組合物的制備方法：
[0031] SOL準備好含磷酸三鈉的濃度為5g/L的溶液1000 mL ;
[0032] S02.稱取二溴海因 I. 5g，將二溴海因在Sl所述溶液中完全溶解。
[0033] 二溴海因濃度為1000mg/L的藥物組合物制備方法參照上述，具體是稱取二溴海 因 1.0 g完全溶解于磷酸三鈉濃度為5g/L的水溶液1000 mL中。
[0034] 二溴海因濃度為500mg/L的藥物組合物：稱取二溴海因0. 5g，完全溶解于含磷酸 三鈉濃度為5g/L的水溶液1000 mL中。
[0035] 二溴海因濃度為200mg/L的藥物組合物：稱取二溴海因0. 2g完全溶解于含磷酸三 鈉濃度為5g/L的水溶液1000 mL中。
[0036] 二溴海因濃度為50mg/L的藥物組合物：稱取二溴海因0. 05g完全溶解于含磷酸三 鈉濃度為5g/L的水溶液1000 mL中。
[0037] 使用4°C冰箱保存的菌株配制實驗所用菌懸液，蘇云金桿菌芽孢懸液、黑胸敗血病 菌芽孢懸液濃度為I X IO8~5 X 10 scfu/mL，白僵菌懸液濃度為I X 107cfu/mL