一種人參種子萌發培養基的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于人參組織培養技術領域,特別涉及一種人參種子萌發培養基。
【背景技術】
[0002] 人參是被子植物門雙子葉植物綱離瓣花亞綱五加科,多年生草本植物,生長于密 林,多分布于黑龍江、吉林、遼寧和河北北部深山中,含有10多種人參皂甙,以及人參快醇、 多種氨基酸和維生素,是名貴的中草藥材。
[0003] 然而人參種子成熟后會積累大量抑制萌發的物質,阻止人參種子萌發,使人參種 子進入深度休眠,造成人參無菌播種萌發率極低,難以滿足市場和科研的需求。
【發明內容】
[0004] 基于現有技術存在上述問題,本發明提供一種人參種子萌發培養基,其并添加 KT (激動素 )、NAA(萘乙酸)、GA3(赤霉素 )、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖,麥芽汁中含有多種天然激 素和酶,可以打破種子休眠,本發明提供的人參種子萌發培養基具有萌發率高,萌發時間短 的優點。
[0005] -種人參種子萌發培養基,其特征在于,其以MS培養基為基礎培養基,并添加 KT (激動素 )、NAA(萘乙酸)、GA3(赤霉素 )、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖,麥芽汁中含有多種天然激 素和酶,可以打破種子休眠,GA3對萌發具有促進作用。
[0006] 〇(激動素)的濃度為0.5-21^/1、祖4(萘乙酸)的濃度為0.1-0.4 11^/1、643(赤霉 素)的濃度為0.05-0.2 11^/1、麥芽汁的濃度為100-20(^/1,瓊脂粉的濃度為8-128/1、白砂 糖的濃度為25-35g/L。
[0007] 〇(激動素)的濃度為0.8-1.211^/1、祖4(萘乙酸)的濃度為0.2-0.3 1^/1、643(赤 霉素)的濃度為〇.〇8-〇.12 11^/1、麥芽汁的濃度為13〇-18(^/1,瓊脂粉的濃度為9-1(^/1、白 砂糖的濃度為28-32g/L。
[0008] 所述的快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為5.8-6.8。
[0009] 所述的快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為6.3。
[0010] -種人參種子萌發培養基的配制方法,其包括以下步驟: 步驟SlO溶解配制培養基:用蒸餾水溶解MS基礎培養基各成分,并添加 KT(激動素 )、NAA (萘乙酸)、GA3(赤霉素 )、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖; 步驟S20高溫滅菌:將步驟SlO配制好的培養基放于高壓滅菌鍋中,于120~121°C高溫滅 菌20~21分鐘,冷卻凝固。
[0011 ] 步驟SlO還包括步驟SI 1調節pH值:使用HCL和KOH滴定調節培養基pH值至6.3。
【具體實施方式】
[0012] 下面結合具體實施例對本發明作進一步描述。
[0013] 實施例一:配制人參種子萌發培養基。
[0014] 根據表1所示的MS培養基配方以及表2所示的人參種子萌發培養基配方,制備本發 明所述的人參種子萌發培養基。
[0015] 用天平分另Ij稱取MS培養基中的各成分以及KT、NAA、GA3、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖, 置于三角瓶中,加入適量純化水,攪拌溶解,定容至1000 mU并調節pH值至6.3。將三角瓶封 口,置于高壓滅菌鍋中,于121°C滅菌21min,然后于超凈工作臺中,將人參種子萌發培養基 分裝至組織培養瓶中,自然冷卻,待其凝固后將組織培養瓶封口,備用。
[0016] 表1 MS培養基的成分及其用量。
[0017] 表2人參種子萌發培養基的成分及其用量。
[0018] 實施例二:本發明所述的人參種子萌發培養基的測試。
[0019] 按實施例一所述的方法配制人參種子萌發培養基,備用。
[0020] 取顆粒飽滿的成熟人參種子,使用l〇°C的冷水對人參種子進行浸泡20小時,取出 種子,并于超凈工作臺中將種子用質量濃度為75%的酒精浸泡30秒,用無菌水沖洗4次,再用 質量濃度為0.12%的氯化汞溶液消毒6分鐘,再用無菌水沖洗4次。
[0021] 將消毒完畢的人參種子接種到上述配制好的人參種子萌發培養基中,并放入人工 氣候箱中培養,培養條件為光暗周期為14h光照/12h黑暗、光照強度為2000-23001UX的條件 下培養,培養到第17天時開始有第一顆種子萌發,長成人參無菌苗,培養22天后,超過90%的 人參種子萌發,誘導成無菌苗,種子萌發率高達90%,比常規誘導方法的萌發率高,常規誘導 方法平均萌發時間在25天以后,使用本發明提供的人參種子萌發培養基可以縮短誘導時 間。
【主權項】
1. 一種人參種子萌發培養基,其特征在于,其以MS培養基為基礎培養基,并添加 KT (激 動素)、ΝΑΑ(萘乙酸)、GA3 (赤霉素)、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖。2. 根據權利要求1所述的一種人參種子萌發培養基,其特征在于,KT(激動素)的濃度為 0 · 5-2mg/L、NAA(萘乙酸)的濃度為0 · 1-0 · 4 mg/L、GA3(赤霉素)的濃度為0.05-0 · 2 mg/L、麥 芽汁的濃度為100_200g/L,瓊脂粉的濃度為8-12g/L、白砂糖的濃度為25-35g/L。3. 根據權利要求1所述的一種人參種子萌發培養基,其特征在于,KT(激動素)的濃度為 0.8-1.211^/1、嫩厶(萘乙酸)的濃度為0.2-0.3 11^/1、6厶3(赤霉素)的濃度為0.08-0.12 11^/ L、麥芽汁的濃度為130-180g/L,瓊脂粉的濃度為9-10g/L、白砂糖的濃度為28-32g/L。4. 根據權利要求1至3其中之一所述的一種人參種子萌發培養基,其特征在于,所述的 快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為5.8-6.8。5. 根據權利要求1至3其中之一所述的一種人參種子萌發培養基,其特征在于,所述的 快速誘導人參愈傷組織培養基的pH值為6.3。6. -種人參種子萌發培養基的配制方法,其特征在于,其包括以下步驟: 步驟S10溶解配制培養基:用蒸餾水溶解MS基礎培養基各成分,并添加 KT(激動素)、NAA (萘乙酸)、GA3(赤霉素)、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖; 步驟S20高溫滅菌:將步驟S10配制好的培養基放于高壓滅菌鍋中,于120~121°C高溫滅 菌20~21分鐘,冷卻凝固。7. 根據權利要求7所述的一種人參種子萌發培養基的配制方法,其特征在于,所述的步 驟S10還包括步驟SI 1調節pH值:使用HCL和KOH滴定調節培養基pH值至6.3。
【專利摘要】本發明提供一種人參種子萌發培養基,屬于人參組織培養技術領域,其并添加KT(激動素)、NAA(萘乙酸)、GA3(赤霉素)、麥芽汁、瓊脂粉和白砂糖,麥芽汁中含有多種天然激素和酶,可以打破種子休眠,本發明提供的人參種子萌發培養基具有萌發率高,萌發時間短的優點。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105638470
【申請號】
【發明人】何志鏗
【申請人】佛山市金藍領教育科技有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月9日