專利名稱：表示標度為0-10的患者氧化應力分值的測定方法
表示標度為0-10的患者氧化應力分值的測定方法本發明涉及一種表示標度為0-10的患者氧化應力分值的測定方法。眾所周知，氧是細胞的碳氫燃料，在大量公開文獻中有此報道。然而，氧的某些形式，特別是自由基，如果它們催化自然的氧化反應，胡亂地改變生物分子，則會嚴重毒害機體和細胞。此處涉及的是被專家公認的稱為氧化應力的現象。這種現象出現在大范圍的病理 學中，特別是肝炎、癌癥、sida、Alzheimer病、Parkinson病...，此外還對應于主運動神經 的老化。然而，當今醫務界對于介入氧化應力的手段已有準備，例如改進生命保健、，增加 營養(根據國家健康營養綱要的建議)，或施用天然或合成的抗氧化劑。因此希望能夠在各種特定情況下估計氧化應力，以便預料病理發展的危險性，在 檢測出反常時，提前采取所有可能的措施進行醫治。但是，人類醫學對氧化應力的估計并不針對目前解決的問題，甚至不同實驗室建 議要根據主要為血液的平衡度(bilan)來探索該氧化應力，平衡度的基礎是某些生物標記 物的含量測定。然而，其方法與當前科學估計方法相比要更經驗化，更何況所用的生物標記物從 一個實驗室到另一個實驗室的變化很大。因此，這些平衡度自然就不能承擔現行醫學方面的氧化應力，多年來它們的特別 復雜的解釋就是對氧化應力很熟悉的某些專家的特權。本發明的目的在于填補這種缺陷，為醫務人員提出一種科學工具，這種工具能夠 根據血液平衡度和生物含量測定完成對患者氧化應力的估計，這種估計通過表示標度為 0-10 (從紊亂最小的平衡度到紊亂最大的平衡度)的氧化應力分值來實現。因此，這種分值表示正常平衡度或多少有些反常的平衡度。當存在反常平衡度時，醫生就應當進行說明，估計該反常的來源，向患者提出必要 的措施，以便進行醫治。在幾個月以后，由于重新檢測表示氧化應力的分值，就可以控制這些措施的相關 性(建議生命保健，改進飲食節奏，特別是增加水果和蔬菜的比例，或者輔以抗氧化劑)。因此，在該情況下，本發明的目的在于表示標度為0-10的患者氧化應力分值的測 定方法，其特征在于相繼進行下面的步驟_在初始校正步驟中-選擇一系列與氧化應力有關的生物標記物，在一組可能有或沒有不同的已知的 病理和臨床紊亂的人員中進行定量分析，特別是對血樣進行定量分析，由此來評估這些生 物標記物，以便獲得一個數據庫，和-以醫學領域已知的和文獻中描述的關系為依據，對該數據庫進行統計分析，以 便-為每一個生物標記物確定其嚴重性標度，該嚴重性標度與相對于參考值發現的 偏差有關，
-將這些生物標記物重新組合成分別表示不同信息的一組生物標記物組，這些信 息可以與氧化應力的不同發展階段有關，和-一方面將一個權重歸于每一組生物標記物，另一方面將該權重歸于各組內的各 個生物標記物，然后-對屬于多個生物標記物組的患者的多個生物標記物進行評估，_將嚴重性標度的分值歸于由此得到的各個值，和-用下面的公式計算專用于該患者的氧化應力分值 其中Maxma_eur表示生物標記物在嚴重性標度的最大分值。經過長約四年時間專心研究多個學科如醫學和數學的勞動，方構思出根據本發明 最初的方法。這樣，對健康患者或具有不同類型病理和臨床紊亂的患者作了約600次《前期》氧 化應力血液嚴重性標度，每次對10-20個生物標記物進行測定。在第二階段，當第一次平衡度顯示出反常以后，就對處理過的患者進行大約120 個控制平衡度。該工作能夠得到很完整的數據庫，例如在附表1中描繪了該數據庫。不同生物標記物的縮寫的意思、它們的單位以及標準均清楚地示于附表2中。用與下面說明的人群特征相關的信息完善該數據庫性別、年齡、居住條件、職業 活動...，以及患者的醫療檔案的繼往病歷健康狀況、個人醫療既往史、嫡親兄弟的既往 史、進行性疾病、治療、氧化應力的大小...。醫學組對該數據庫進行檢查，以便鑒定和消除可能出現的畸變值，再用模型化技 術對其進行統計分析，從而根據一些參數例如患者年齡來平衡不同生物標記物的數值，并 且通過驗證醫學文獻中提及的公知關系，使數據有效。因此，我們發現一方面在不同的生物標記物之間出現關系，另一方面在這些生物 標記物的某些反常與這些患者的醫學個案的某些元素之間出現關系。顯然所有經定量分析的生物標記物不可能識別這樣或那樣的疾病，但能很好地指 出患者的整體健康狀態出現了反常。這樣，利用值得注意的兩組的極端表型使這兩組具有個性化，并在它們缺乏時或 在氧化應力處在高位時對它們進行研究。所獲得的信息的研究導致-根據所有平衡度獲得的結果，使嚴重性標度與各個生物標記物相關，-將試驗的各生物標記物重新合并成表示不同信息的多組生物標記物，某些信息 越表示患者的健康狀態，其他的則越與高度發展這樣或那樣的病理的危險性有關，-評估各不同生物標記物組的表格以及各組中的不同生物標記物的表格。最后構思出能夠利用數學算法的標度，該數學算法考慮到上面提到的所有元素，而這些元素為每個患者計算出表示其氧化應力大小的0-10的分值。該標度可以在所有數據庫中找出非常健康的患者和健康狀態不好的患者。應注意的是，從純統計學的觀點來看，這些工作要依靠下面的技術和方法描述統計學統計法的圖表和數字一致性檢驗_確定平均水平和離散的評估量，檢測反常數值的圖表和數字的檢驗，通過研究成配對誤差和相關檢驗(參數的和非參數的)來分析誤差，相關性的分析和簡單線性回歸的建模，主要成分的分析，PLS(Partial Least Squares & Discriminant Analysis)回歸的建模，同時根據 稱作《splites》的阻滯原理交叉確認。實際上利用相互作用的方法可以實現標度評估，這是因為Microsoft Excel在其 2003年版本顯示出的實用性，它是macro-commande形式，由于根據所擁有的加權進行了平 衡調節，所以允許不完全的平衡度。所用的統計處理軟件是版本為5. 11的Jmp軟件(A BUSINESS UNIT OFSAS- Copyright 1989-2004 SAS Institute Inc)。為使設計的標度有效，我們將30個患者的隨機卡片盒托付給了三個獨立的觀察 者A、B和C，這三個觀察者為氧化應力領域的專家。我們要求他們根據他們本能想象的氧化應力的嚴重性注意在0-10范圍內的這些 患者中的每一個的平衡度。附表3重新制作了每個專家的診斷，他們的一般意見，也就是這些專家達成一致 的平均分，在利用本發明方法以后得到的得分Sa^,以及該意見和該分值之間的誤差。這些結果可以使三個專家作出的評估總體相同，這些評估可以與本發明方法得到 的評估重合。根據本發明的另一特征，將各生物標記物重新組合成至少三組重大交叉的生物標 記物，這些組分別對應于外生抗氧化劑，也就是外部帶來的抗氧化劑，內生抗氧化劑，也就 是與細胞愈合相關的抗氧化劑，以及氧化受損的標記物。前兩組生物標記物表示患者的健康狀態，而第三組表示他們有發展某些病理的風險。根據本發明，有利的是將等于1的權重歸于與外生抗氧化劑相對應的第一生物標 記物組，將等于5的權重歸于與內生抗氧化劑相對應的第二生物標記物組，將等于10的權 重歸于與受損生物標記物相對應的第三生物標記物組。第一組生物標記物最好包括至少7個生物標記物，它們選自維生素C、維生素E、銅、鋅、硒、以及維生素C/維生素E的比例和銅/鋅。當然，第一組也可以包括其他生物標記物，其中可以列舉的有α生育酚(或維生 素Ε)、γ生育酚、膽固醇、維生素E/膽固醇的比例或β胡蘿卜素。第二組生物標記物最好包括至少四個生物標記物，它們選自總谷胱甘肽GSH、氧化 谷胱甘肽GSSG、硫醇蛋白質和GSH/GSSG的比例。第二組也可以包括其他生物標記物，例如過氧化谷胱甘肽或尿酸。最后，第三組生物標記物包括至少一個生物標記物，該生物標記物在低密度氧化脂質(LDL Oxyd.)和8-羥基-2-鳥苷/肌酸酐或氧化AND/肌酸酐的比例之間選擇。第三組還可以包括其他生物標記物，例如脂質過氧化物、抗LDL Oxyd.或抗氧化 AND的抗體。應注意的是，在本發明范圍內，通過將同一權重、特別是上述主要生物標記物的每 一個均為1的權重歸于各組中，就可以得到總體很好的結果。
此外應注意的是，生物標記物的有關嚴重性標度的評分可以在0-2和0-10之間變 化。因此，本發明方法可以將0-10之間的分值提供給醫生，指出患者的氧化應力狀態 (中度或重度氧化應力)。因此，可以根據該標度應當是正常或是應當不認為正常來確定患者的健康好壞。在反常氧化應力的情況下(中度或重度)，該方法可以對得到的分值進行定性說 明，探討在該分值下哪一個是不同生物標記物組的相對權重。這種說明對醫生來講，按數值順序來講可以確定由患者的分值表現出的反常氧化 應力主要與下面的情況有關-外生抗氧化劑的相對缺乏維生素C和/或維生素E和/或銅和/或鋅和/或 硒…，-內生抗氧化劑的相對缺乏谷胱甘肽、硫醇蛋白質...，-或客觀上已經存在氧化損傷LDLOxyd、氧化AND...，根據該意見，醫生可以決定用輔助配量補足該平衡度，檢查水果和蔬菜的飲食比 例和/或囑咐患者對已證實的缺乏進行治療，主要是因為抗氧化化合物的用量。當然，醫囑也包括在適應性加量以后過幾個月要對平衡度進行控制。
權利要求
一種表示標度為0-10的患者氧化應力分值的測定方法，其特征在于相繼進行下面的步驟-在初始校正步驟中-選擇一系列與氧化應力有關的生物標記物，并在一組可能有或沒有不同的已知的病理和臨床紊亂的人員中進行定量分析，特別是對血樣進行定量分析，由此來評估這些生物標記物，以便獲得一個數據庫，和-以醫學領域已知的和文獻中描述的關系為依據，對該數據庫進行統計分析，以便-為每一個生物標記物確定其嚴重性標度，該嚴重性標度與相對于參考值發現的偏差有關，-將這些生物標記物重新組合成至少三個分別表示不同信息的生物標記物組，這些信息可以與氧化應力的不同發展階段有關，并分別對應于外生抗氧化劑、內生抗氧化劑和氧化損壞標記物，和-一方面將一個權重歸于每一組生物標記物，且另一方面將該權重歸于各組內的每個生物標記物，然后-對屬于多個生物標記物組的患者的多個生物標記物進行評估，-將嚴重性標度的分值歸于由此得到的各個值，和-用下面的公式計算專用于該患者的氧化應力分值，其中Maxmarqueur表示生物標記物在嚴重性標度中的最大分值。FPA000011.tif
2.根據權利要求1的方法，其特征在于將等于1的權重歸于與外生抗氧化劑相對應的 第一生物標記物組，將等于5的權重歸于與內生抗氧化劑相對應的第二生物標記物組，并 將等于10的權重歸于與損壞生物標記物相對應的第三生物標記物組。
3.根據權利要求1或2的方法，其特征在于第一生物標記物組包括至少7個生物標記 物，它們選自維生素C、維生素E、銅、鋅、硒、以及成比例的維生素C/維生素E和銅/鋅。
4.根據權利要求1-3之一的方法，其特征在于第二生物標記物組包括至少四個生物標 記物，它們選自總谷胱甘肽GSH、氧化谷胱甘肽GSSG、硫醇蛋白質和成比例的GSH/GSSG。
5.根據權利要求1-4之一的方法，其特征在于第三生物標記物組包括至少一個生物標 記物，該生物標記物選自低密度氧化脂質LDL Oxyd.和成比例的8-羥基-2-鳥苷/肌酸酐。
6.根據權利要求1-5之一的方法，其特征在于生物標記物的嚴重標度的評分可以根據 生物標記物在1-2和1-10之間變化。
全文摘要
一種表示患者氧化應力的得分的測定方法，其特征在于相繼進行下面的步驟在初始校正步驟中選擇一系列生物標記物，并在一組人員中進行定量分析，特別是對血樣進行定量分析，從而獲得一個數據庫，和對該數據庫進行統計分析，以便為每一個生物標記物確定其嚴重性標度，將這些生物標記物重新組合成一組生物標記物組，和一方面將一個權重歸于每一組生物標記物，另一方面將該權重歸于各組內的每個生物標記物，然后對患者的多個生物標記物進行評估，將嚴重性標度的分值歸于由此得到的各個值，和用下面的公式計算專用于該患者的氧化應力分值。
文檔編號G06F19/00GK101842791SQ200780053563
公開日2010年9月22日 申請日期2007年5月4日 優先權日2007年5月4日
發明者A·孔圖施, D·博納豐-羅塞洛特, G·德賴福斯, J·查普曼, M·布拉克, O·布拉克 申請人:瑞聯服務有限公司