類風濕關節炎檢測試劑盒的制作方法
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及類風濕關節炎檢測領域，特別是涉及一種類風濕關節炎檢測試劑合
ΙΤΓΤ.0
【背景技術】
[0002]類風濕關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種以侵蝕性關節炎為主要表現的全身性自身免疫疾病。本病以女性多發，男女患病比例約為1:3。RA可發生于任何年齡，以30?50歲為發病高峰。我國大陸地區的RA患病率約為0.2%?0.4%。病例表現為關節滑膜的慢性炎癥、血管翳的形成、關節軟骨和骨的破壞，最終可導致關節畸形和功能喪失，嚴重影響了患者的生活質量和造成巨大的經濟負擔。
[0003]RA的診斷主要依靠臨床表現、實驗室檢查及影像學檢查。典型病例按1987年美國風濕病學會(ACR)的分類標準診斷并不困難，但對于不典型及早期RA易出現誤診或漏診。2009年ACR和歐洲抗風濕病聯盟(EULAR)提出了新的RA分類標準和評分系統，該標準對關節受累情況、血清學指標、滑膜炎持續時間和急性時相反應物4個部分進行評分，總得分6分以上也可診斷為RA。該標準中血清學指標包括了類風濕因子(RF)和抗瓜氨酸化蛋白抗體(ant1-citrullinated protein antibodies, ACPA);急性時相反應物包括了 C 反應蛋白(CRP)和血沉(ESR) ο
[0004]CRP是人類急性反應蛋白，沒有特異性，目前已經作為醫院常規檢測項目，可以在很多疾病診斷上作為輔助判斷依據。另外，越來越多的證據表明CRP不僅是炎癥標志物，本身直接參與炎癥過程。最近(2006)有研究發現CRP是糖尿病人獲冠心病的獨立危險因素，正常參考值彡10mg/L，類風濕早期和急性風濕時，血清中可達50mg/L，其陽性率為80%?90%。CRP的臨床意義與血沉相同，但不受紅細胞、HB、脂質和年齡等因素的影響，是反應炎癥感染和療效的良好指標。CRP在類風濕活動期明顯增多，與血沉增快相平行，但比血沉增快出現的早、消失也快。CRP含量愈多，表明病變活動度愈高。炎癥恢復過程中，若CRP陽性，預示仍有突然出現臨床癥狀的可能性；停用激素后已轉陰的CRP又陽性時，表明病變活動在繼續。炎癥緩解期和用抗風濕藥后，CRP轉陰或消失比血沉快，且在貧血和心力衰竭時不象血沉那樣易受影響。
[0005]RF主要為IgM類自身抗體，但也有IgG類、IgA類和IgE類。各類RF臨床意義有所不同。RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體。未經治療的類風濕性關節炎患者其陽性率為80%，且滴定度常在1:160以上。臨床上動態觀察滴定度多少，可作為病變活動及藥物治療后療效的評價。其他風濕性疾病如SLE陽性率為20% — 25%;硬皮病與皮肌炎陽性率為10% — 24%，滴定度較低。類風濕性關節炎患者和約50%的健康人體內都存在有產生RF的B細胞克隆，在變性IgG(與抗原結合的IgG)或EB病毒直接作用下，可大量合成RF。健康人產生RF的細胞克隆較少，且單核細胞分泌的可溶性因子可抑制RF的產生，故一般不易測出。在RA患者，高效價的RF存在并伴有嚴重的關節功能受限時，常提示預后不良。在非類風濕患者中，RF的陽性率隨年齡的增加而增加，但這些人以后發生RA者極少。
[0006]近年來，ACPA雖然在RA常規診斷中尚未完全取代RF的地位，但其已成為診斷RA的首選指標。總體而言，ACPA與RF敏感性相近，但特異性更高。這些抗體識別轉錄后被瓜氨酸化的多種蛋白，包括聚絲蛋白(filaggrin)、波形蛋白(vimentin)、α和β纖維蛋白(a-and β-fibrin)、α -稀醇化酶(a-enolase)及 I 型和 II 型膠原多肽(Type I andtype II collagen)。ACPA的檢測是通過ELISA法檢測血清對環瓜氨酸多肽(CCP)的反應。最初的臨床檢驗以檢測抗瓜氨酸化聚絲蛋白的環狀多肽的反應為基礎，因為環瓜氨酸多肽與天然構象表位更為接近，從而提高實驗結果的準確性。目前這一實驗已被結果更準確的第二代試驗--抗CCP2Elisa--所取代，它使用從瓜氨酸化多肽庫中篩選的瓜氨酸化多肽，這些瓜氨酸化的多肽均為人工合成。近期研究顯示瓜氨酸化殘基可在肺和滑膜表達，ACPA的產生可能為肽基精氨酸脫亞胺酶(Peptidylarginine deiminase，PAD)介導的蛋白在肺及滑膜脫亞氨基作用而致。這些蛋白可被特異性抗原遞呈細胞或通過B細胞形成的免疫復合物所攝取，并遞呈給T細胞，促進激活ACPA反應性B細胞。
[0007]上述指標大多需要采集全血后，在實驗室分離血清或血漿，再進行分別檢測，耗時較長，不能現場得出檢測結果。
【實用新型內容】
[0008]有鑒于此，有必要針對上述的問題，提供一種類風濕關節炎檢測試劑盒結構。
[0009]為了實現上述目的，本實用新型采用如下技術方案:
[0010]一種類風濕關節炎檢測試劑盒，包含盒子和其內的免疫膠體金檢測裝置，所述免疫膠體金檢測裝置包含樣品墊、金標結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊和支撐板，樣品墊、金標結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次設置在支撐板上，相鄰兩者之間首尾銜接，其中金標結合墊吸附有金標抗體，硝酸纖維素膜上設有3條檢測線和I條質控線，3條檢測線分別包被RF、CCP和CRP的抗原或抗體，質控線包被抗金標抗體；所述盒子包含盒體和盒蓋，所述盒蓋上設有加樣孔和觀察窗，所述加樣孔與樣品墊位置對應，所述觀察窗與質控線和3條檢測線位置對應。
[0011]優選地，所述類風濕關節炎檢測試劑盒還包含微量采血裝置；微量采血裝置與加樣孔可拆卸連接。
[0012]優選地，所述微量采血裝置包含微量采血管、針頭和導管，針頭設置在微量采血管的頂面，導管設置在微量采血管的底面；微量采血裝置設有導管的一端與免疫膠體金檢測裝置的加樣孔可拆卸連接。
[0013]優選地，所述導管還包含管蓋和支撐桿，所述管蓋鉸接在導管上端，所述支撐桿固定于管蓋下面并伸至導管下端之外。
[0014]優選地，微量采血管的底面設有外凸的環形凸槽，所述加樣孔設有與其對應的內凹的環形凹槽，環形凸槽和環形凹槽可拆卸連接。
[0015]優選地，所述微量采血管中內置促凝劑。
[0016]與現有技術相比，本實用新型具有如下有益效果:
[0017]1、可以同時進行RF、CCP和CRP三種指標檢測，使用方便快速，節省樣品，便于基層使用和現場使用，所有反應能在15分鐘內完成；成本低，不需要特殊的儀器設備；
[0018]2、將微量采血裝置與免疫膠體金檢測裝置組合起來，可在采血后立即進