伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法
【專利摘要】本發明公開了一種伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，以原兒茶酸和原兒茶醛為對照，以氯仿、乙酸乙酯、甲酸混合溶液為展開劑，該方法分離效果好，重現度高，且操作簡單，能對滇桂艾納香進行快速的定性分析，為有效控制伊血安顆粒的質量提供了可靠保證。
【專利說明】
伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法
技術領域
[0001]本發明涉及藥物檢測領域，特別是一種伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法。【背景技術】
[0002]伊血安顆粒是一種治療婦科血癥的中成藥，主要成份為滇桂艾納香、益母草、延胡索、甘草等，具有活血止血、行氣止痛等功效。臨床上用于產后惡露不絕，人工流產后子宮出血不凈，中醫辯證屬血瘀證者。
[0003]伊血安顆粒的君藥為滇桂艾納香，來源于菊科植物滇桂艾納香[Blumea riparia (BL)DC.]的干燥全草，主要產于廣西西南部和云南東南部，常見生于林邊、山坡灌叢或密林中。現有的伊血安顆粒質量標準中，雖然有建立滇桂艾納香的分析方法，但存在分離度和重現性較差的問題，難以有效、準確、快速地進行滇桂艾納香的定性分析。
【發明內容】

[0004]本發明提供了一種伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，可快速、準確的對伊血安顆粒中的滇桂艾納香進行定性分析。
[0005]為實現上述目的，本發明的技術方案為:
[0006]—種伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，包括以下步驟:
[0007](1)供試品溶液的準備:取伊血安顆粒，加水，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取2?3次，獲得乙醚提取液，合并乙醚提取液，加水洗滌2次后，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇使之溶解，作為供試品溶液；
[0008](2)原兒茶酸對照品溶液:原兒茶酸對照品加甲醇制成原兒茶酸對照品溶液；
[0009](3)原兒茶醛對照品溶液:原兒茶醛對照品加甲醇制成原兒茶醛對照品溶液；
[0010](4)取上述供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液點于同一硅膠薄層板上，以體積比為5?7:2?4:5的氯仿、乙酸乙酯、甲酸混合溶液為展開劑展開，取出， 晾干，在紫外燈下檢視。[〇〇11]優選的，所述展開劑中，氯仿、乙酸乙酯、甲酸的體積比為6:3:5。
[0012]優選的，所述步驟(1)的具體操作方法為:取伊血安顆粒4?6g，加水30mL，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸0.1?〇.3mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取2?3次，每次10?20mL，合并乙醚提取液，加水洗滌2次，每次10?20mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇 0.5?2mL使之溶解，作為供試品溶液。更優選的，所述步驟(1)的具體操作方法為:取伊血安顆粒5g，加水30mL，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸0.25mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取3次， 每次15mL，合并乙醚提取液，加水洗滌2次，每次15mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇lmL使之溶解作為供試品溶液。[0〇13]優選的，所述步驟(4)中，紫外燈的波長為254nm。[〇〇14]優選的，所述步驟(2)中，原兒茶酸對照品溶液是由原兒茶酸對照品加甲醇制成0 ? 25?0 ? 30mg ? mL—1溶液。
[0015]優選的，所述步驟(3)中，原兒茶醛對照品溶液是由原兒茶醛對照品加甲醇制成 0 ? 30?0 ? 35mg ? mL—1溶液。
[0016]優選的，所述步驟(4)中，供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液各取10?20yL點于同一娃膠薄層板上。
[0017]本發明中，所述稀鹽酸是質量分數為9.5%?10.5%的鹽酸。
[0018]以上所述的技術方案，建立了以原兒茶酸和原兒茶醛為對照，以氯仿、乙酸乙酯、 甲酸混合溶液為展開劑的薄層色譜鑒別方法，該方法分離效果好，重現度高，且操作簡單， 能對滇桂艾納香進行快速的定性分析，為有效控制伊血安顆粒的質量提供了可靠保證。【附圖說明】
[0019]圖1是實施例1獲得的薄層色譜圖。
[0020]圖2是實施例4獲得的薄層色譜圖。【具體實施方式】
[0021]以下結合具體實施例對本發明作進一步說明，但本發明的保護范圍不限于以下實施例:
[0022]實施例1[〇〇23] 供試品溶液的準備:分別取批號為120303、120602、120603、120701、120702的伊血安顆粒進行薄層色譜鑒別，每個批號的伊血安顆粒各取5g，分別加水30mL，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸〇.25mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取3次，每次15mL，合并乙醚提取液，加水洗滌2次，每次15mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇lmL使之溶解。[〇〇24] 原兒茶酸對照品溶液:原兒茶酸對照品加甲醇制成0.30mg ? mL-1溶液。[〇〇25] 原兒茶醛對照品溶液:原兒茶醛對照品加甲醇制成0.30mg ? mL-1溶液。
[0026]陰性對照溶液:取缺滇桂艾納香的陰性伊血安顆粒樣品按供試品溶液制備方法同法制成陰性對照溶液。[〇〇27]照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液各15此，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以體積比為6:3:5的氯仿、乙酸乙酯、甲酸混合溶液為展開劑，置于展開劑預飽和的展開缸內，展開，取出，瞭干，在紫外光燈(254nm)下檢視，檢視結果如圖1 所示，1為本實施例的陰性對照溶液，2為本實施例的原兒茶酸對照品溶液，3為本實施例的原兒茶醛對照品溶液，4?8分別為本實施例的供試品伊血安顆粒120303、120602、120603、 120701、120702的溶液，由圖1中可見供試品溶液色譜在與原兒茶酸對照品、原兒茶醛對照品色譜在相應位置上，顯示有相同顏色的斑點，且分離效果好，重現度高。[〇〇28] 實施例2[〇〇29] 供試品溶液的準備:分別取批號為120303、120602、120603、120701、120702的伊血安顆粒進行薄層色譜鑒別，每個批號的伊血安顆粒各取6g，加水30mL，使伊血安顆粒溶解， 加稀鹽酸〇.3mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取2次，每次20mL，合并乙醚提取液，加水洗滌2 次，每次20mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇2mL使之溶解。
[0030] 原兒茶酸對照品溶液:原兒茶酸對照品加甲醇制成0.27mg ? mL-1溶液。[〇〇31] 原兒茶醛對照品溶液:原兒茶醛對照品加甲醇制成0.32mg ? mL-1溶液。
[0032]陰性對照溶液:取缺滇桂艾納香的陰性伊血安顆粒樣品按供試品溶液制備方法同法制成陰性對照溶液。[〇〇33]照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液各15此，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以體積比為5:2:5的氯仿、乙酸乙酯、甲酸混合溶液為展開劑，置于展開劑預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，在紫外光燈(254nm)下檢視。由獲得的薄層色譜圖可見供試品溶液色譜在與原兒茶酸對照品、原兒茶醛對照品色譜在相應位置上，顯示有相同顏色的斑點，且分離效果較好，重現度高。[〇〇34] 實施例3[〇〇35] 供試品溶液的準備:分別取批號為120303、120602、120603、120701、120702的伊血安顆粒進行薄層色譜鑒別，每個批號的伊血安顆粒各取5g，分別加水30mL，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸〇.25mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取3次，每次15mL，合并乙醚提取液，加水洗滌2次，每次15mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇lmL使之溶解。[〇〇36] 原兒茶酸對照品溶液:原兒茶酸對照品加甲醇制成0.30mg ? mL-1溶液。[〇〇37] 原兒茶醛對照品溶液:原兒茶醛對照品加甲醇制成0.30mg ? mL-1溶液。
[0038]陰性對照溶液:取缺滇桂艾納香的伊血安顆粒陰性樣品按供試品溶液制備方法同法制成陰性對照溶液。[〇〇39]照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液各15此，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以體積比為7:4:5的氯仿、乙酸乙酯、甲酸混合溶液為展開劑，置于展開劑預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，在紫外光燈(254nm)下檢視。由獲得的薄層色譜圖可見供試品溶液色譜在與原兒茶酸對照品、原兒茶醛對照品色譜在相應位置上，顯示有相同顏色的斑點，且分離效果較好，重現度高。
[0040] 實施例4[0041 ]伊血安顆粒現行質量標準的檢測方法:[〇〇42] 供試品溶液的準備:分別取批號為120303、120602、120603的伊血安顆粒進行薄層色譜鑒別，每個批號的伊血安顆粒各取l〇g，加水30mL使溶解，加稀鹽酸5滴(0.25mL)，攪勻， 濾過，用乙醚萃取3次，每次15mL，合并乙醚提取液，用水洗滌2次，每次15mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇〇.5mL使溶解，作為供試品溶液。[〇〇43]對照藥材溶液的準備:另取滇桂艾納香對照藥材3g，加水200mL，煎煮lh，濾過，濾液濃縮至約30mL，加稀鹽酸5滴(0.25mL)，同法制成對照藥材溶液。
[0044]對照品溶液的準備:原兒茶酸對照品適量，加甲醇制成每lmL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。
[0045]陰性對照樣品溶液的準備:取缺滇桂艾納香的陰性伊血安顆粒樣品按供試品溶液制備方法同法制成陰性對照溶液。[〇〇46] 照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各10y L，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯一丙酮一甲酸(體積比6:2.5:2.5:0.4)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光燈(254nm)下檢視。 供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。[〇〇47]檢視結果如圖2所示，9?11分別為本實施例的供試品伊血安顆粒120303、120602、 120603的溶液，12為本實施例的對照藥材溶液，13為本實施例的原兒茶酸對照品溶液，14為本實施例的陰性對照樣品溶液，由圖2中可見供試品溶液色譜在與原兒茶酸對照品在相應位置上，顯示有相同顏色的斑點。
[0048]由實施例1和實施例4的薄層色譜圖可以看出，現行質量標準檢測方法的展開劑對原兒茶醛與伊血安顆粒的其他成分分離效果不好，且僅以原兒茶酸為對照品，其準確性不夠高，專屬性不夠強，有些斑點也不夠清晰。本發明的薄層色譜鑒別方法在分離度、重現性、 專屬性方面均優于現行質量標準的檢測方法。
【主權項】
1.一種伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于包括以下步驟:(1)供試品溶液的準備:取伊血安顆粒，加水，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸，攪拌均勻， 濾過，加乙醚萃取2?3次，獲得乙醚提取液，合并乙醚提取液，加水洗滌2次后，棄去水液，分 取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇使之溶解，作為供試品溶液；(2)原兒茶酸對照品溶液:原兒茶酸對照品加甲醇制成原兒茶酸對照品溶液；(3)原兒茶醛對照品溶液:原兒茶醛對照品加甲醇制成原兒茶醛對照品溶液；(4)取上述供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液點于同一硅膠薄層 板上，以體積比為5?7:2?4:5的氯仿、乙酸乙酯、甲酸混合溶液為展開劑展開，取出，晾干，在 紫外燈下檢視。2.根據權利要求1所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述展開劑中，氯仿、乙酸乙酯、甲酸的體積比為6:3:5。3.根據權利要求1所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述步驟(1)的具體操作方法為:取伊血安顆粒4?6g，加水30mL，使伊血安顆粒溶解，加 稀鹽酸0.1?0.3mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取2?3次，每次10?20mL，合并乙醚提取液，加水 洗滌2次，每次10?20mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇0.5?2mL使之溶解，作 為供試品溶液。4.根據權利要求1或3所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述步驟(1)的具體操作方法為:取伊血安顆粒5g，加水30mL，使伊血安顆粒溶解，加稀鹽酸0.25mL，攪拌均勻，濾過，加乙醚萃取3次，每次15mL，合并乙醚提取液，加水洗滌2次，每 次15mL，棄去水液，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加甲醇lmL使之溶解，作為供試品溶液。5.根據權利要求1所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述步驟(4)中，紫外燈的波長為254nm。6.根據權利要求1所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述步驟(2)中，原兒茶酸對照品溶液是由原兒茶酸對照品加甲醇制成0.25?0.30 mg ? mL—1 溶液。7.根據權利要求1所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述步驟(3)中，原兒茶醛對照品溶液是由原兒茶醛對照品加甲醇制成0.30?0.35mg ? mL—1溶液。8.根據權利要求1所述的伊血安顆粒中滇桂艾納香的薄層鑒別方法，其特征在于:所述步驟(4)中，供試品溶液、原兒茶酸對照品溶液、原兒茶醛對照品溶液各取10?20yL 點于同一硅膠薄層板上。
【文檔編號】G01N30/90GK106018662SQ201610315795
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月12日
【發明人】毛金玲, 慕麗群, 李修善, 農常東
【申請人】廣西萬壽堂藥業有限公司