一種膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及藥物檢測領域，具體涉及一種膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法。
【背景技術】
[0002]薄荷廣泛分布于我國各地，如云南、江蘇、浙江、江西等都有出產。中國是薄荷油、薄荷腦的主要輸出國之一。薄荷素油(Oleum Menthae Dementholatum)是薄荷中的主要化學成分，是一種傳統的中藥，具有清涼止癢、抗炎鎮痛、祛痰、利膽、溶石排石等藥效[劉紅杰等，薄荷油研究進展，山東中醫藥大學學報2006，30 (6) =502-505]，臨床上主要用來治療慢性膽囊炎[韓捷等，膽舒膠囊治療慢性膽囊炎25例臨床觀察，中成藥，2007，29⑴:說明書4附8_9]、膽結石[黃欣等，膽舒膠囊治療膽石癥的療效觀察，中國全科醫學，2005,8(1):55-56]、慢性結石性膽囊炎、腸易激綜合癥[聞峻等，薄荷油治療腸易激綜合癥的藥理和臨床研究，國外醫藥.植物藥分冊，2006，21 (2):50-62]、產后腹脹[張文，薄荷油濕布熱敷治療產后腹脹，J.huaihua Med.,2001,19(3):264-265]、老年術后腸功能恢復[江桂林，薄荷油濕熱敷對老年術后腸功能恢復的臨床觀察，實用臨床醫藥雜志(護理版)，2006，2 (4):42-43]、膽源性消化不良[黃寧新，膽舒治療膽源性消化不良臨床意義的探討，中國基層醫藥，2005，12 (8):1099]等病癥。
[0003]膽舒膠囊主要活性成分為薄荷素油，是根據舒肝利膽、理氣止痛的中醫理論研制而成的一種膠囊劑，具有舒肝理氣，利膽功能，臨床常用于慢性結石性膽囊炎，慢性膽囊炎及膽結石肝膽郁結，濕熱胃滯證的治療。經現代研究表明，其利膽、消食作用機制主要為:正常人的膽汁由膽汁酸、膽固醇、卵磷脂等有機成份及鈉鉀鈣等無機離子組成，其中膽汁酸與甘氨酸或牛磺酸結合形成的鈉鹽或鉀鹽稱為膽鹽。膽固醇與既有親水性又有親脂性的膽鹽和卵磷脂按一定比例[1:(11±2.5)]組合，膽鹽和卵磷脂的親水基團排列在表面，而親脂基團包在內部，形成微膠粒，從而將膽固醇“溶解”在膽汁中。若膽汁中膽固醇含量相對或絕對增多，膽固醇便因過飽和而析出結晶，不利于膽汁的排放，而膽舒膠囊能夠改善膽汁流出通道，顯著松弛膽道平滑肌及Oddi氏括約肌的作用，減輕膽管因膽囊切除術后淤膽代償性擴張，使膽汁流出量增加，從而改善膽囊切除后的右上腹脹悶不適癥狀。同時，其改善餐后不適綜合征(ros)的臨床方面也有較好應用，其機制可能與膽舒膠囊及其活性成份能夠有效降低胃腸張力，改善胃腸容受性，降低胃腸對擴張刺激的敏感性，及抵御輕度焦慮癥的作用有關。此外，相關研究表明，膽舒膠囊還具有一定的解痙和抗炎鎮痛作用。
[0004]膽舒膠囊包含醇類、酮類、酯類、萜烯類等多種活性成分，其檢測方法主要為氣相檢測，然而，現有的檢測方法中存在檢測時間長、檢測到的活性成分峰個數少、分離效果不好等技術問題，因此，尋求一種能夠快速、有效的膽舒膠囊檢測方法對于其質量控制而言顯得尤為重要。

【發明內容】

[0005]為解決現有技術中存在的檢測時間長、檢出成分少、分離效果差等技術問題，本發明提供一種快速、有效的膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法，其包括以下步驟:
[0006]1)樣品制備方法:取膽舒膠囊內容物適量，置具塞試管中，加入有機溶劑，充分振搖或超聲后濾過，取續濾液即得；
[0007]2)氣相色譜條件:采用極性毛細管柱，氫火焰離子化檢測器，初始溫度為73°C?75°C,結束溫度為160°C?200°C，采用程序升溫，進樣口溫度為250°C，檢測器溫度為250。。。
[0008]3)測定:吸取步驟1)中制備得到的樣品溶液注入氣相色譜儀進行檢測，得到指紋圖譜。
[0009]上述膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法中，所述的程序升溫過程優選為:初始溫度保持4min，以2V.min 1的速率升溫至100°C，再以6°C.min 1的速率升溫至結束溫度；進一步優選為:初始溫度75°C，保持4min，以2°C.min 1的速率升溫至100°C，再以6V.min 1的速率升溫190°C。
[0010]上述膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法中，所述的氣相色譜條件中進樣量優選為1.0 μ 1，分流比優選為40:1。
[0011]上述膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法中，所述樣品制備方法中有機溶劑優選乙醇、無水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、環己烷、三氯甲烷、乙醚，進一步優選無水乙醇。
[0012]上述膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法中，所述色譜條件中極性毛細管柱優選聚乙二醇毛細管柱、改性聚乙二醇毛細管柱，進一步優選聚乙二醇毛細管柱。
[0013]上述膽舒膠囊的指紋圖譜檢測方法中，所述樣品制備方法優選為，取膽舒膠囊內容物0.72g，置具塞試管中，加入無水乙醇10ml，充分振搖或超聲后濾過，取續濾液即得；
[0014]本發明所提供的膽舒膠囊指紋圖譜檢測與現有技術相比，存在以下優勢:
[0015]1、本發明提供膽舒膠囊指紋圖譜檢測方法檢出成分多、各組分分離度好，能夠為膽舒膠囊質量控制提供有效的標準。
[0016]2、本發明提供的膽舒膠囊指紋圖譜檢測方法在20min內出峰完畢，整體檢測時間短，大大減少了檢測時間和節約檢測成本，更利于工業生產應用。
[0017]本申請發明人考察了不同溶劑提取膽舒膠囊內容物對于檢測結果的影響，發現采用30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇、無水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、環己烷、三氯甲烷、乙醚提取時均能夠有效檢出各組分，且分離度較好，其中采用無水乙醇提取時，效果最佳。
【附圖說明】
[0018]圖1為實施例1中氣相色譜圖
[0019]圖2為實施例2中氣相色譜圖
[0020]圖3為實施例3中氣相色譜圖
[0021]圖4為實施例4中氣相色譜圖
[0022]圖5為實施例5中氣相色譜圖
【具體實施方式】
[0023]下面通過實施例對本發明進一步說明，但不能限制本發明的保護范圍。
[0024]本發明中涉及的實驗儀器和藥品、試劑如下:
[0025]實驗儀器:安捷倫7890A氣相色譜儀；氣相色譜柱:OPTIMA-WAXplus (柱長為30m，內徑為0.32mm，膜厚度為0.25 μ m，德國Macherey Nagel公司)；檢測器:氫火焰離子化檢測器。
[0026]實驗藥品及試劑:膽舒膠囊(四川濟生堂藥業有限公司，121008、121009、121010)，檸檬烯對照品(來源:中檢院、批次:)，桉油精對照品(來源:中檢院、批次:)，薄荷酮對照品(來源:中檢院、批次:)，胡薄荷酮(來源:中檢院、批次:)，薄荷腦(來源:中檢院、批次:)，無水乙醇(AR，成都金山化學試劑有限公司，20130506)。
[0027]實施例一膽舒膠囊氣相色譜檢測
[0028]樣品制備方法:取膽舒膠囊內容物0.72g，置具塞試管中，加入無水乙醇10ml，充分振搖或超聲后靜置20min，濾過，取續濾液即得；
[0029]對比色譜條件:初始溫度60°C，保持4min，以2°C.min 1的速率升溫至100°C，再以100°C-min 1的速率升溫230°C，進樣口溫度為250°C，FID檢測器，檢測器溫度為250°C，進樣量為Ι.Ομ 1，分流比為10:1，載氣:Ν2，流速20ml*min、
[0030]按照上述方法制備樣品溶液，進行氣相色譜檢測，檢測結果如圖1所示，其檢測得到的色譜峰為13個，保留時間分別為0.60min、0.76min、1.10min、3.44min、4.40min、
5.08min、5.59min、7.63min、8.05min、9.35min、10.lOmin、11.27min、13.61min,其中梓樣烯和桉油精兩個成分峰堆積在一起(1.lOmin)，未能得到分離，其他色譜峰分離多數也不能滿