一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及藥物分析領域中的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高 效液相檢測方法。
【背景技術】
[0002] 左卡尼汀（Levocarnitine)，又名左旋肉堿，其化學名為（R)-3-羧基-2-羥基-N， N，N-三甲基-1-丙胺氫氧化物，內鹽，是一種國際公認安全無害的營養劑。其鹽類常用的有 左卡尼汀鹽酸鹽、左卡尼汀酒石酸鹽等。左卡尼汀是哺乳動物能量代謝中必需的體內天然 物質，其主要功能是促進脂類代謝。它既能將長鏈脂肪酸帶進線粒體基質，并促進其氧化分 解，為細胞提供能量，又能將線粒體內產生的短鏈脂酰基輸出。本品的補充可緩解因其體內 缺乏引起的脂肪代謝紊亂、骨骼肌和心肌等組織的功能障礙。卡尼汀有一個手性中心，有兩 種光學異構體，即左旋體和右旋體，具有生物活性為左旋體，即左卡尼汀，右旋體為右卡尼 汀。為保證本品的質量及其安全性，需建立檢測方法對右卡尼汀的含量進行控制。目前，關 于左卡尼汀及其鹽類中右卡尼汀的含量的高效液相檢測方法，為將本品衍生后，用C18柱 進行色譜分離，檢測器為熒光檢測器，方法比較復雜且耗時長。因此，研制開發一種簡單、省 時、適于實時監測左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢測方法一直是亟待 解決的新課題。

【發明內容】

[0003] 本發明的目的在于提供一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相 檢測方法，該方法采用環糊精及其衍生物鍵合硅膠手性固定相作為色譜柱的填充劑分離左 卡尼汀、右卡尼汀及左卡尼汀雜質A，用紫外檢測器進行檢測。通過該方法檢測左卡尼汀及 其鹽類產品中右卡尼汀含量，右卡尼汀與左卡尼汀之間、左卡尼汀與左卡尼汀雜質A之間 均能達良好分離，方法重復性、靈敏度、耐用性等均能符合要求，且操作簡單、省時快速，適 用于左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀的含量控制。
[0004] 本發明的目的是這樣實現的：一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效 液相檢測方法，該檢測方法包括如下步驟： (1) 色譜條件： 色譜柱：環糊精及其衍生物為填充劑的手性色譜柱； 檢測器：紫外檢測器； 流動相：由三乙胺-醋酸水溶液和乙腈配制的混合溶液； (2) 系統適用性溶液的制備： 精密稱取左卡尼汀對照品、右卡尼汀對照品、左卡尼汀雜質A對照品各適量，加水溶解 并稀釋； (3) 供試品溶液及對照溶液的制備： 精密稱取樣品適量，加水溶解并稀釋，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，用 水稀釋，作為對照溶液； (4)測定方法： 取系統適用性溶液注入液相色譜儀，記錄圖譜，色譜峰按右卡尼汀、左卡尼汀、左卡尼 汀雜質A次序依次流出，上述三種成分色譜峰之間分離度均應大于1. 5 ;精密量取供試品溶 液與對照溶液，注入液相色譜儀，記錄圖譜，分別計算供試品液中右卡尼汀的峰面積和對照 溶液中左卡尼汀的峰面積， 右卡尼汀1
【主權項】
1. 一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢測方法，其特征在于：該 檢測方法包括如下步驟： (1) 色譜條件： 色譜柱：環糊精及其衍生物為填充劑的手性色譜柱； 檢測器：紫外檢測器； 流動相：由三乙胺-醋酸水溶液和乙腈配制的混合溶液； (2) 系統適用性溶液的制備： 精密稱取左卡尼汀對照品、右卡尼汀對照品、左卡尼汀雜質A對照品各適量，加水溶解 并稀釋； (3) 供試品溶液及對照溶液的制備： 精密稱取樣品適量，加水溶解并稀釋，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，用 水稀釋，作為對照溶液； (4) 測定方法： 取系統適用性溶液注入液相色譜儀，記錄圖譜，色譜峰按右卡尼汀、左卡尼汀、左卡尼 汀雜質A次序依次流出，上述三種成分色譜峰之間分離度均應大于1. 5 ;精密量取供試品溶 液與對照溶液，注入液相色譜儀，記錄圖譜，分別計算供試品液中右卡尼汀的峰面積和對照 溶液中左卡尼汀的峰面積， 右卡尼打
X0.5% 其中：=供試品溶液中右卡尼汀的峰面積； A左卡尼汀=對照溶液中左卡尼汀的峰面積。
2. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測方法，其特征在于：所述色譜柱的填充劑選自環糊精鍵合硅膠、環糊精衍生物鍵 合硅膠，所述環糊精衍生物鍵合硅膠選自乙酰化的環糊精鍵合硅膠、二甲基化的 3 -環糊精鍵合硅膠、3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯衍生化的的0 -環糊精鍵合硅膠、2,6-二 硝基-4-三氟甲基苯甲醚衍生化的的環糊精鍵合硅膠、（S)-羥丙基醚衍生化的的 3 -環糊精鍵合硅膠、（R，S)-羥丙基醚衍生化的的0 -環糊精鍵合硅膠、高效（R，S)-羥丙 基醚衍生化的的環糊精鍵合硅膠。
3. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測方法，其特征在于：所述填充劑的粒徑為3. 5-10ym。
4. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測方法，其特征在于：所述三乙胺-醋酸水溶液中三乙胺的體積濃度為〇. 05-0.6%，pH為 4. 0-6. 5 ;所述三乙胺-醋酸水溶液的配制方法為量取三乙胺試劑，加水稀釋制成體積濃度 為0. 05-0.6%的溶液，用醋酸水溶液調節pH為4. 0-6. 5。
5. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測方法，其特征在于：所述流動相中三乙胺-醋酸水溶液與乙腈的體積比為15-35: 85-65。
6. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測方法，其特征在于：所述流動相的流速為〇.8-1.2ml/分鐘，所述系統適用性溶液、供試品 溶液、對照溶液的進樣量為10-100y1，所述紫外檢測器的檢測波長為205nm，所述色譜柱 的柱溫為10-30°C。
7. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢 測方法，其特征在于：所述鹽類選自鹽酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽，所述左卡尼汀及其鹽類 產品選自左卡尼汀及其鹽類原料藥、左卡尼汀及其鹽類藥物組合物，所述藥物組合物選自 口服劑型、注射劑型，所述口服劑型選自片劑、膠囊劑、口服溶液劑，所述注射劑型選自注射 液、注射用無菌粉末。
8. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相 檢測方法，其特征在于：所述系統適用性溶液詳細制備方法為精密稱取左卡尼汀對照品約 200mg，右卡尼汀對照品約2mg，置同一10ml容量瓶中；另取左卡尼汀雜質A對照品約2mg， 精密稱定，置200ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，作為左卡尼汀雜質A對照品溶液；精 密量取左卡尼汀雜質A對照品溶液1.0ml置上述10ml容量瓶中，加水超聲溶解并稀釋至刻 度。
9. 根據權利要求1所述的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量 的高效液相檢測方法，其特征在于：所述左卡尼汀雜質A的英文化學名稱為 (E)-or(Z)-4-(trimethylammonio)but-2-enoate〇
【專利摘要】一種應用于藥物檢測領域中的一種左卡尼汀及其鹽類產品中右卡尼汀含量的高效液相檢測方法，該方法采用手性固定相高效液相色譜法,手性固定相選用環糊精及其衍生物鍵合硅膠填料，使得左卡尼汀、右卡尼汀、左卡尼汀雜質A三種成分的分離效果好、方法重復性及耐用性好；流動相選用三乙胺-醋酸水溶液與乙腈體系,該流動相對手性色譜柱基本無損傷，色譜峰保留時間重復性好，峰型對稱。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104698101
【申請號】CN201510111998
【發明人】王虹, 王潔, 黃文姝, 劉心, 董愛軍, 岳靜, 劉佳
【申請人】東北制藥集團股份有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2015年3月16日