一種精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種藥物的分析方法，特別是涉及一種精氨洛芬中游離布洛芬的高效 液相色譜測定方法。
【背景技術】
[0002] 布洛芬（Ibuprfen)是英國Boots公司1967年創制、1969年上市的一種療效確切、 毒副作用小、安全性高的烷基苯丙酸類消炎、解熱、鎮痛藥。但幾乎不溶于水，普通口服片在 胃腸中溶出慢，體內消除快。而治療風濕及類風濕性關節炎等慢性疾病時，需長期頻繁大劑 量用藥，易導致胃腸出血，且對腎臟有一定的損害，導致某些病人不能繼續治療。為適應臨 床要求，國外相繼設計的多種劑型問世，以精氨洛芬為原料制成的糖漿劑，緩釋小顆粒等新 劑型，在國外已上市，國內臨床已開始應用。精氨洛芬是由布洛芬和精氨酸形成的復鹽，精 氨酸為人體所需的氨基酸類基本營養成分，將布洛芬與精氨酸成鹽，形成的復鹽在水中的 溶解度大幅提高，擴展了布洛芬的制劑類型和臨床應用。精氨洛芬質量標準中的一個重要 檢測項目是測定產品中游離布洛芬的含量，目前藥典中沒有給出檢驗方法，產品的質量控 制各企業采用各自的企業內控標準，一般是紫外-可見分光光度法，但存在專屬性不強，不 夠準確的缺點。
【發明內容】
[0003] 針對現有技術的不足，本發明的目的旨在提供一種精氨洛芬中游離布洛芬的高效 液相色譜測定方法，具有穩定、準確、可靠、重復性好、方便推廣使用的特點。
[0004] 為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：
[0005] 一種精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，其特征在于，按以下步驟 進行：
[0006] 1)高效液相色譜條件：采用高效液相色譜儀，色譜柱為：C18柱，規格為 4. 6mmX250mm，5um;柱溫30°C，紫外檢測器，檢測波長為220nm;流動相：甲醇與水混合組 成，甲醇與水的體積比為75:25,用2%呀04調pH至2. 5 ;流速：1.Oml/min;
[0007] 2)供試品溶液的制備：稱取精氨洛芬樣品，用脂溶性有機溶劑進行提取，定容后， 作為供試品溶液；
[0008] 3)對照品洛液的制備：取布洛分標準對照品適量，用甲醇制成0. 2mg/ml的對照品 溶液；
[0009] 4)測定：取供試品溶液及對照品溶液各20ul進樣，注入高效液相色譜儀，記錄色 譜圖，采用外標法進行定量分析，計算游離布洛芬含量。
[0010] 作為優選，在步驟2中，供試品溶液的制備：稱取lg精氨洛芬樣品，加脂溶性有機 溶劑20ml，磁力攪拌提取lOmin，濾出脂溶性有機溶劑，濾渣再用20ml脂溶性有機溶劑重 復提取2次，合并脂溶性有機溶劑提取液，將濾液于50°C水浴減壓蒸干，回收脂溶性有機溶 劑，濃縮后得到的剩余物用甲醇溶解，并定容至l〇〇ml，作為供試品溶液。
[0011] 作為優選，在步驟2)中，所述脂溶性有機溶劑為氯仿、二氯甲烷、三氯甲烷、二氯 乙烷、乙酸乙酯中的任意一種。
[0012] 作為進一步優選，在步驟2)中，所述脂溶性有機溶劑為三氯甲烷。
[0013] 本發明的有益效果在于：
[0014] 本發明采用脂溶性有機溶劑將樣品中的游離布洛芬轉移到有機溶劑中進行液相 色譜測定，減少了處理樣品時可能引入水份造成的樣品分解，且提取物中的有關雜質相對 減少，保證了結果的可靠性，同時，本發明針對精氨洛芬的特點，優化了高效液相色譜條件， 使得本發明能準確和可靠的檢測精氨洛芬中游離布洛芬的含量，是一種實用和可靠的檢測 方法，優于使用紫外-可見分光光度計的檢測方法。
【附圖說明】
[0015] 圖1為本發明的回歸方程圖。
[0016] 圖2為本發明200ug/ml布洛芬對照品溶液的高效液相色譜圖。
[0017] 圖3為本發明5ug/ml布洛芬對照品溶液的高效液相色譜圖。
[0018] 圖4為本發明供試品溶液的高效液相色譜圖。
【具體實施方式】
[0019] 本發明提供的檢測方法中所用試劑均由市場購得。所述脂溶性有機溶劑為氯仿、 二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙烷、乙酸乙酯中的任意一種。
[0020] 實施例：
[0021] -種精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，按以下步驟進行：
[0022] 1)高效液相色譜條件：高效液相色譜儀，島津LC-20AT，液相色譜條件：C18柱 (4. 6mmX250mm，5um)，柱溫30°C，紫外檢測器，檢測波長220nm;流動相：甲醇：水（含2% 把卩04，？11 = 2.5)= 75:25，流速：1.〇1111/111111
[0023] 2)供試品溶液的制備：稱取lg精氨洛芬樣品，加二氯甲燒20ml，磁力攬拌提取 lOmin，濾出三氯甲烷，濾渣再用20ml三氯甲烷重復提取2次，合并三氯甲烷提取液，將濾液 于50°C水浴減壓蒸干，回收三氯甲烷，濃縮后得到的剩余物用甲醇溶解，并定容至100ml， 作為供試品溶液。
[0024] 3)對照品溶液的制備：取布洛芬標準對照品適量，用甲醇制成0.2mg/ml的對照品 溶液；
[0025] 4)測定：取供試品溶液及對照品溶液各20ul進樣，記錄色譜圖，采用外標法進行 定量分析，計算游離布洛芬含量。
[0026] 方法驗證：
[0027] 1、線性范圍：取布洛芬配成濃度在5?200ug/ml范圍內的7個濃度的溶液（見表 1)，分別進樣測定，測定峰面積，以峰面積對數值為縱坐標，進樣量對數值為橫坐標，計算其 回歸方程，結果表明布洛芬在5?200ug/ml范圍內線性關系良好（見圖1)，回歸方程為：Y =51753X+39655,r= 0.9999。
[0028] 表 1
[0029]
【主權項】
1. 一種精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，其特征在于，按w下步驟進 行： 1) 高效液相色譜條件：采用高效液相色譜儀，色譜柱為；C18柱，規格為 4. 6mmX250mm，5um ;柱溫30。紫外檢測器，檢測波長為220nm ;流動相：甲醇與水混合組 成，甲醇與水的體積比為75:25,用2%畔〇4調抑至2. 5 ;流速；1. Oml/min ; 2) 供試品溶液的制備；稱取精氨洛芬樣品，用脂溶性有機溶劑進行提取，定容后，作為 供試品溶液； 3) 對照品溶液的制備；取布洛芬標準對照品適量，用甲醇制成0. 2mg/ml的對照品溶 液； 4) 測定；取供試品溶液及對照品溶液各20ul進樣，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖， 采用外標法進行定量分析，計算游離布洛芬含量。
2. 根據權利要求1所述的精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，其特征在 于；在步驟2)中，供試品溶液的制備：稱取Ig精氨洛芬樣品，加脂溶性有機溶劑20ml，磁力 攬拌提取lOmin，濾出脂溶性有機溶劑，濾渣再用20ml脂溶性有機溶劑重復提取2次，合并 脂溶性有機溶劑提取液，將濾液于50°C水浴減壓蒸干，回收脂溶性有機溶劑，濃縮后得到的 剩余物用甲醇溶解，并定容至100ml，作為供試品溶液。
3. 根據權利要求2所述的精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，其特征在 于；在步驟2)中，所述脂溶性有機溶劑為氯仿、二氯甲燒、S氯甲燒、二氯己燒、己酸己醋中 的任意一種。
4. 根據權利要求2所述的精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，其特征在 于；在步驟2)中，所述脂溶性有機溶劑為=氯甲燒。
【專利摘要】本發明公開了一種精氨洛芬中游離布洛芬的高效液相色譜測定方法，主要步驟為用脂溶性有機溶劑提取樣品中的游離布洛芬，定容后用高效液相色譜測定，外標法計算樣品中游離布洛芬的含量。本發明具有穩定、準確、可靠，重復性好，方便推廣使用的優點。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104535683
【申請號】CN201410831391
【發明人】蒲含林, 朱義波, 相東方
【申請人】廣州普星藥業有限公司
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月25日