本(ben)發明(ming)涉及(ji)納米溫度計(ji)領(ling)域。更具體地，涉及(ji)一種以(yi)銀納米線為基底的熒(ying)光納米溫度計(ji)及(ji)其制備方法。

背景技術：

溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)作為一(yi)個重要的(de)參數(shu)，對(dui)(dui)很多(duo)化學反應和(he)生(sheng)物過程具(ju)有(you)調控(kong)作用。準確(que)測(ce)量(liang)微(wei)(wei)(wei)小(xiao)體(ti)(ti)系的(de)溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)，對(dui)(dui)調控(kong)微(wei)(wei)(wei)化學反應和(he)從(cong)細(xi)胞(bao)水(shui)平認知(zhi)生(sheng)命(ming)過程具(ju)有(you)重要意義。常用的(de)溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)計(如(ru)熱耦(ou)溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)計)由(you)于(yu)空(kong)間分辨率(lv)低等問(wen)題，使其不(bu)能滿足(zu)微(wei)(wei)(wei)小(xiao)體(ti)(ti)系(如(ru)細(xi)胞(bao)內特定區域)內溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)的(de)測(ce)定。隨著納(na)米材(cai)料制(zhi)備方(fang)法的(de)完(wan)善和(he)納(na)米技術的(de)不(bu)斷發展，納(na)米溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)計已被廣泛研究(jiu)(Qi,Li.Surface-Modified Silicon Nanoparticles with Ultrabright Photoluminescence and Single-Exponential Decay for Nanoscale Fluorescence Lifetime Imaging of Temperature.Journal of the American Chemical Society,2013,135:10372-14927)。這些納(na)米溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)計大都是以(yi)納(na)米顆粒為基底對(dui)(dui)溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)進(jin)行(xing)測(ce)量(liang)，納(na)米顆粒在進(jin)入微(wei)(wei)(wei)小(xiao)體(ti)(ti)系如(ru)細(xi)胞(bao)時通過被動擴散，或(huo)者需要靶向性修飾進(jin)入細(xi)胞(bao)特定部位(wei)。一(yi)維納(na)米材(cai)料由(you)于(yu)可(ke)以(yi)借助(zhu)微(wei)(wei)(wei)操作插入特定微(wei)(wei)(wei)小(xiao)體(ti)(ti)系(如(ru)細(xi)胞(bao)特定部位(wei))(Junho,Lee.Quantitative Probing of Cu2+Ions Naturally Present in Single Living Cells.Advanced Materials,2016,(28):4071-4076)實現(xian)對(dui)(dui)微(wei)(wei)(wei)小(xiao)體(ti)(ti)系的(de)主動檢測(ce)，使其在微(wei)(wei)(wei)小(xiao)體(ti)(ti)系溫(wen)(wen)(wen)度(du)(du)計研究(jiu)中有(you)明顯優勢。

因此，發(fa)展基于(yu)一維納米材(cai)料的溫度計對微小體(ti)系溫度的準確(que)檢測具(ju)有重要意義。

技術實現要素：

本發明的一(yi)個目的在(zai)于提(ti)供一(yi)種以銀納(na)米線為(wei)基底的熒光納(na)米溫度計，可(ke)用于微小(xiao)體系溫度的檢測。

本發明的另一(yi)個(ge)目的在(zai)于提供(gong)一(yi)種上述熒(ying)光納米溫度(du)計的制備方(fang)法(fa)。

為達到上述(shu)目的，本(ben)發明采用下述(shu)技術方案(an)：

一(yi)種以銀納(na)米(mi)(mi)線為(wei)基底的(de)熒光納(na)米(mi)(mi)溫(wen)度計，所述熒光納(na)米(mi)(mi)溫(wen)度計以銀納(na)米(mi)(mi)線為(wei)基底，銀納(na)米(mi)(mi)線表面組裝帶有熒光分子的(de)特定DNA片段(duan)和輔助(zhu)鏈(lian)T的(de)一(yi)維納(na)米(mi)(mi)溫(wen)度計。

進一步，所述特定DNA片段的序列為3’端修飾有-(CH₂)₃-SH的ATCTAATCATTATTGTTTTTTTTTTTTTTTACTATTATGTTTAGATTTTTTTTTTT(如SEQ ID No.1所示)(即ATCTAATCATTATTGTTTTTTTTTTTTTTTACTATTATGTTTAGATTTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)。

進一步，所述熒光分子為(wei)5’TEXAs-red。

進一步，所述的輔助鏈T的序列為3’端修飾有-(CH₂)₃-SH的TTTTTTTTTT(如SEQ ID No.2所示)(即TTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)。

進一步(bu)，所述銀納(na)米(mi)線的(de)直(zhi)徑為100-200nm，長度為50-100μm。

一種以銀(yin)納米(mi)線(xian)為基底的熒光納米(mi)溫(wen)度計的制(zhi)備方法(fa)，包(bao)括以下步驟：

(1)利用多(duo)元醇法制(zhi)備(bei)銀納米(mi)線

a、配制0.1M AgNO₃的溶液，0.15M PVP溶液，0.3mM FeCl₃溶液(ye)，以上溶劑(ji)均為(wei)乙二醇；

b、將1ml 0.3mM FeCl₃溶液加入到9ml 0.15M PVP溶液中，混合均勻后滴加入劇烈攪拌的10ml 0.1M AgNO₃的溶液中；待反應渾濁后停止攪拌(ban)(約4h)轉(zhuan)入高(gao)壓釜中保持160℃3小時；將產物取出，分(fen)別(bie)用丙(bing)酮、乙醇和水洗滌(di)，得銀納米線；

(2)將帶有熒光(guang)分(fen)子(zi)的(de)(de)特(te)(te)(te)定(ding)DNA片段(duan)(20μL，100μM)和(he)(he)輔(fu)(fu)助鏈T(10μL，100μM)與(yu)(yu)還(huan)(huan)原(yuan)(yuan)劑(30μL，100μM)混合孵育1-1.5小時(shi)，進行還(huan)(huan)原(yuan)(yuan)反應，以(yi)打開DNA序(xu)列中的(de)(de)二硫鍵；將還(huan)(huan)原(yuan)(yuan)好的(de)(de)特(te)(te)(te)定(ding)DNA片段(duan)和(he)(he)輔(fu)(fu)助鏈T與(yu)(yu)2-3mg/ml的(de)(de)銀(yin)納米線混合，使得(de)(de)還(huan)(huan)原(yuan)(yuan)好的(de)(de)特(te)(te)(te)定(ding)DNA片段(duan)和(he)(he)輔(fu)(fu)助鏈T的(de)(de)濃度分(fen)別為2μM和(he)(he)1μM，震(zhen)蕩孵育10-12小時(shi)后加(jia)入(ru)1-2M NaCl溶液，使體系(xi)達到(dao)0.1M NaCl，并繼續(xu)孵育10-12小時(shi)；得(de)(de)到(dao)的(de)(de)產物(wu)用緩沖(chong)液洗滌(di)三次(ci)，即(ji)得(de)(de)。

進一步，將以銀納(na)米線為基底(di)的熒光(guang)納(na)米溫度計分(fen)散在測(ce)試緩(huan)沖液(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)中，在熒光(guang)光(guang)譜儀上進行測(ce)試，激發波長為585nm，發射波長為612nm。

進一步，所述還原(yuan)劑為pH＝5.2的三(san)(2-甲酰乙基)膦(lin)鹽(yan)酸鹽(yan)的醋酸緩沖液。

進一步，所述(shu)緩沖液為0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4。

本發明以銀(yin)納(na)米線為(wei)基(ji)底的(de)熒(ying)光納(na)米溫(wen)度(du)計利(li)用(yong)一定溫(wen)度(du)下，DNA序列解鏈(lian)改(gai)變發光分(fen)子(zi)與銀(yin)納(na)米線之(zhi)間(jian)的(de)距離(li)，調控(kong)銀(yin)納(na)米線與熒(ying)光分(fen)子(zi)之(zhi)間(jian)的(de)能量(liang)轉移，利(li)用(yong)熒(ying)光強度(du)的(de)變化實現銀(yin)納(na)米線對溫(wen)度(du)的(de)檢測。

本發明的有益效果如下：

1、本(ben)發明銀(yin)納(na)米線具有(you)制備(bei)簡單、容易表面功能化、對(dui)熒光(guang)分子具有(you)很好(hao)(hao)的猝滅效應的特點(dian)，使(shi)其在作為一維納(na)米材(cai)料溫度計的基底中有(you)很好(hao)(hao)的前景(jing)。

2、本發(fa)明以銀納(na)(na)米線為基底，通過對溫度(du)有響應的特(te)定(ding)DNA片(pian)段(duan)將(jiang)熒光分子組裝在銀納(na)(na)米線表面，構建了基于銀納(na)(na)米線的熒光溫度(du)計，該溫度(du)計可用于微小體系溫度(du)的檢測，進一步發(fa)展(zhan)有望用于細(xi)胞特(te)定(ding)部位溫度(du)的檢測。

附圖說明

下面(mian)結合(he)附圖對(dui)本發(fa)明的具(ju)體實施方式作進一步詳細(xi)的說(shuo)明。

圖(tu)1示出基(ji)于銀納(na)米線的熒(ying)光納(na)米溫度(du)計(ji)的結構以及工作原理示意圖(tu)；

圖2示出銀納米線(xian)的掃描電(dian)鏡圖；

圖3示出基(ji)于銀(yin)納(na)米線的熒光(guang)納(na)米溫度(du)計熒光(guang)強度(du)隨溫度(du)的變化，溫度(du)變化范圍(wei)為20℃-50℃；

圖4示出(chu)基于(yu)銀納米線的(de)熒光納米溫(wen)度(du)計熒光強度(du)隨(sui)溫(wen)度(du)的(de)變化，溫(wen)度(du)變化范圍(wei)為(wei)30℃-35℃，間隔為(wei)0.5℃；

圖(tu)5示出基于銀納米線(xian)的(de)熒光納米溫度(du)計熒光強度(du)隨(sui)溫度(du)循環的(de)變化，溫度(du)變化為20℃到(dao)50℃；

圖6示出熒(ying)光(guang)分子-DNA片(pian)段在沒(mei)有銀納米線存在時同樣條件下熒(ying)光(guang)強(qiang)度(du)隨溫(wen)度(du)的變化(hua)，溫(wen)度(du)變化(hua)范圍為20℃-50℃。

具體實施方式

為了(le)更(geng)清(qing)楚(chu)地說明(ming)(ming)(ming)本發(fa)明(ming)(ming)(ming)，下面結合優選實施例和附(fu)圖對(dui)本發(fa)明(ming)(ming)(ming)做進一(yi)步的(de)(de)說明(ming)(ming)(ming)。附(fu)圖中相似(si)的(de)(de)部(bu)件以相同的(de)(de)附(fu)圖標記(ji)進行(xing)表示。本領域(yu)技術人員應當理(li)解，下面所具體(ti)描述的(de)(de)內(nei)容是說明(ming)(ming)(ming)性(xing)的(de)(de)而非限(xian)(xian)制性(xing)的(de)(de)，不(bu)應以此限(xian)(xian)制本發(fa)明(ming)(ming)(ming)的(de)(de)保(bao)護范(fan)圍(wei)。

實施例1以銀(yin)納米線為基底的(de)熒光納米溫度(du)計的(de)制(zhi)備(bei)方法

(1)利用多元醇法制備銀納米(mi)線

a、配制10ml 0.1M AgNO₃的溶液，9ml 0.15M PVP溶液，1ml 0.3mM FeCl₃溶液，以上(shang)溶劑均為乙(yi)二醇；

b、將1ml 0.3mM FeCl₃溶液加入到9ml 0.15M PVP溶液中，混合均勻后滴加入劇烈攪拌的10ml 0.1M AgNO₃的溶液中；待反(fan)應渾(hun)濁后(hou)停止攪拌(ban)(約4h)轉(zhuan)入高(gao)壓釜中保持160℃3小時；將產品取出，分(fen)別用(yong)丙酮、乙醇和(he)水洗滌，洗滌干凈之后(hou)保存在酒精中。制備得到(dao)的銀(yin)納米線(xian)的掃描(miao)電子顯微(wei)鏡照片如(ru)圖2所示。

(2)將帶有熒光分子(5’TEXAs-red)的特定DNA片段(即ATCTAATCATTATTGTTTTTTTTTTTTTTTACTATTATGTTTAGATTTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)(20μL，100μM)和輔助鏈T(即TTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)(10μL，100μM)與(yu)三(2-甲酰乙(yi)基(ji))膦鹽酸(suan)鹽的(de)(de)醋(cu)酸(suan)緩(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(PH＝5.2)(30μL，100μM)混(hun)合(he)孵育(yu)1小(xiao)時，進行還原(yuan)反應，以(yi)打開DNA序(xu)列中的(de)(de)二硫鍵；將(jiang)還原(yuan)好的(de)(de)特定DNA片段(duan)和輔助鏈T與(yu)3mg/ml的(de)(de)銀(yin)(yin)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)線混(hun)合(he)，使(shi)得(de)(de)特定DNA片段(duan)和輔助鏈T的(de)(de)濃度分(fen)(fen)(fen)別為(wei)2μM和1μM，震(zhen)蕩孵育(yu)12小(xiao)時后，加入適量的(de)(de)1M NaCl溶(rong)液(ye)，使(shi)體系達到(dao)0.1M NaCl，并繼續(xu)孵育(yu)12小(xiao)時；所得(de)(de)產物用緩(huan)沖(chong)(chong)液(ye)(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)洗滌(di)三次，即(ji)得(de)(de)以(yi)銀(yin)(yin)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)線為(wei)基(ji)底(di)的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)溫度計(ji)(ji)。以(yi)銀(yin)(yin)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)線為(wei)基(ji)底(di)的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)溫度計(ji)(ji)的(de)(de)原(yuan)理為(wei)：利(li)用一定溫度下，DNA序(xu)列解鏈改變發光(guang)(guang)(guang)分(fen)(fen)(fen)子與(yu)銀(yin)(yin)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)線之間的(de)(de)距離(li)，調控銀(yin)(yin)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)線與(yu)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)分(fen)(fen)(fen)子之間的(de)(de)能量轉移，利(li)用熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)強度的(de)(de)變化實現銀(yin)(yin)納(na)(na)(na)米(mi)(mi)(mi)(mi)(mi)線對溫度的(de)(de)檢測(ce)(如圖1所示)。

(3)將步驟(2)所得(de)的(de)以銀納(na)(na)米(mi)(mi)線為(wei)(wei)基底的(de)熒(ying)光納(na)(na)米(mi)(mi)溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)計(ji)分散在(zai)測試(shi)(shi)緩沖液(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)中，在(zai)熒(ying)光光譜儀上進行測試(shi)(shi)，激(ji)發波長(chang)為(wei)(wei)585nm，發射波長(chang)為(wei)(wei)612nm。測試(shi)(shi)范圍為(wei)(wei)20-50℃，溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)間(jian)隔為(wei)(wei)5℃，結果如圖3所示(shi)，從(cong)圖中可(ke)(ke)以看出：從(cong)20度(du)(du)(du)升溫(wen)(wen)到50度(du)(du)(du)，再從(cong)50度(du)(du)(du)降溫(wen)(wen)到20度(du)(du)(du)，升溫(wen)(wen)和降溫(wen)(wen)得(de)到的(de)相對熒(ying)光強度(du)(du)(du)變化趨勢一致，說明以銀納(na)(na)米(mi)(mi)線為(wei)(wei)基底的(de)熒(ying)光納(na)(na)米(mi)(mi)溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)計(ji)有很好的(de)可(ke)(ke)逆性(xing)。

實(shi)施例2以銀納米線為基底的(de)熒(ying)光納米溫度計的(de)制備方法(fa)

(1)利用多(duo)元醇法制備(bei)銀(yin)納米(mi)線。

a、配制10ml 0.1M AgNO₃的溶液，9ml 0.15M PVP溶液，1ml 0.3mM FeCl₃溶液，以上溶劑均為乙二醇；

b、將1ml 0.3mM FeCl₃溶液加入到9ml 0.15M PVP溶液中，混合均勻后滴加入劇烈攪拌的10ml 0.1M AgNO₃的溶(rong)液中(zhong)；待反應渾濁后停(ting)止(zhi)攪拌(約4h)轉(zhuan)入(ru)高(gao)壓釜中(zhong)保持160℃3小時(shi)；將(jiang)產品取出，分別用(yong)丙酮、乙醇和水洗滌(di)，洗滌(di)干凈之后保存(cun)在酒精(jing)中(zhong)；

(2)將帶有熒光分子(5’TEXAs-red)的特定DNA片段(即ATCTAATCATTATTGTTTTTTTTTTTTTTTACTATTATGTTTAGATTTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)(20μL，100μM)和輔助鏈T(即TTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)(10μL，100μM)與三(2-甲酰乙基)膦鹽(yan)酸鹽(yan)的(de)醋酸緩(huan)沖液(PH＝5.2)(30μL，100μM)混(hun)(hun)合孵育(yu)(yu)1.5小時，進行(xing)還原(yuan)反應，以(yi)(yi)打開DNA序列中(zhong)的(de)二硫(liu)鍵(jian)；將還原(yuan)好(hao)的(de)特(te)定(ding)DNA片段和輔助鏈T與2mg/ml的(de)銀(yin)納米線(xian)(xian)混(hun)(hun)合，使得(de)特(te)定(ding)DNA片段和輔助鏈T的(de)濃度(du)分別為(wei)2μM和1μM，震(zhen)蕩孵育(yu)(yu)10小時后(hou)，加入(ru)適量(liang)的(de)2M NaCl溶液，使體系達到0.1M NaCl，并(bing)繼續孵育(yu)(yu)11小時；所得(de)產物用緩(huan)沖液(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)洗滌(di)三次(ci)，即得(de)到以(yi)(yi)銀(yin)納米線(xian)(xian)為(wei)基底的(de)熒光(guang)納米溫度(du)計。

(3)將步(bu)驟(2)所得的(de)以銀(yin)(yin)納米(mi)線(xian)為(wei)(wei)基底的(de)熒(ying)光(guang)(guang)納米(mi)溫(wen)(wen)度(du)計分散在測(ce)試(shi)(shi)緩沖液(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)中(zhong)(zhong)，在熒(ying)光(guang)(guang)光(guang)(guang)譜儀上進行測(ce)試(shi)(shi)，激發(fa)波(bo)(bo)長(chang)為(wei)(wei)585nm，發(fa)射波(bo)(bo)長(chang)為(wei)(wei)612nm。測(ce)試(shi)(shi)范圍為(wei)(wei)30-35℃，溫(wen)(wen)度(du)間隔為(wei)(wei)0.5℃，結(jie)果如圖4所示，從圖中(zhong)(zhong)可以看出：以銀(yin)(yin)納米(mi)線(xian)為(wei)(wei)基底的(de)熒(ying)光(guang)(guang)納米(mi)溫(wen)(wen)度(du)計在該溫(wen)(wen)度(du)范圍內相對熒(ying)光(guang)(guang)強(qiang)度(du)與(yu)溫(wen)(wen)度(du)呈很好的(de)線(xian)性響應(ying)。

實施例3以銀納米(mi)線為基(ji)底的熒光納米(mi)溫度計(ji)的制(zhi)備方法

(1)利用(yong)多元醇法(fa)制備銀納米線(xian)。

a、配制10ml 0.1M AgNO₃的溶液，9ml 0.15M PVP溶液，1ml 0.3mM FeCl₃溶液(ye)，以上溶劑均為(wei)乙二醇；

b、將1ml 0.3mM FeCl₃溶液加入到9ml 0.15M PVP溶液中，混合均勻后滴加入劇烈攪拌的10ml 0.1M AgNO₃的溶液中(zhong)；待反應渾(hun)濁后(hou)停止(zhi)攪拌(約4h)轉入高壓釜中(zhong)保(bao)持(chi)160℃3小時；將產品取出(chu)，分(fen)別用丙酮、乙醇和水洗滌，洗滌干凈之后(hou)保(bao)存在酒精中(zhong)；

(2)將帶有熒光分子(5’TEXAs-red)的特定DNA片段(即ATCTAATCATTATTGTTTTTTTTTTTTTTTACTATTATGTTTAGATTTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)(20μL，100μM)和輔助鏈T(即TTTTTTTTTT-(CH₂)₃-SH)(10μL，100μM)與三(2-甲酰乙基)膦鹽(yan)酸鹽(yan)的(de)(de)醋酸緩(huan)沖液(PH＝5.2)(30μL，100μM)混合孵(fu)育(yu)1.2小時，進行(xing)還原反應，以(yi)打開(kai)DNA序列中的(de)(de)二硫鍵；將還原好的(de)(de)特(te)定DNA片段和(he)輔助鏈T與2.5mg/ml的(de)(de)銀納米線混合，使得(de)特(te)定DNA片段和(he)輔助鏈T的(de)(de)濃(nong)度分別為2μM和(he)1μM，震蕩(dang)孵(fu)育(yu)11小時后，加入適量的(de)(de)2M NaCl溶液，使體系達到(dao)0.1M NaCl，并(bing)繼續(xu)孵(fu)育(yu)10小時；所得(de)產物用(yong)緩(huan)沖液(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)洗滌三次(ci)，即(ji)得(de)到(dao)以(yi)銀納米線為基底的(de)(de)熒光納米溫度計。

(3)將步驟(2)所得的以(yi)銀納(na)(na)米線(xian)(xian)為基(ji)底的熒(ying)光(guang)(guang)納(na)(na)米溫(wen)度計(ji)分散在測(ce)(ce)試(shi)緩沖(chong)液(ye)(0.1M NaCl,10mM PB,pH＝7.4)中，在熒(ying)光(guang)(guang)光(guang)(guang)譜儀上進行測(ce)(ce)試(shi)，激發(fa)(fa)波(bo)長為585nm，發(fa)(fa)射波(bo)長為612nm。測(ce)(ce)試(shi)范(fan)圍為20-50℃，循(xun)環多(duo)次，結(jie)(jie)果如(ru)圖5所示(shi)。同時，測(ce)(ce)試(shi)了沒有銀納(na)(na)米線(xian)(xian)時DNA序列(lie)(lie)的熒(ying)光(guang)(guang)隨溫(wen)度的變(bian)化，結(jie)(jie)果如(ru)圖6所示(shi)。結(jie)(jie)果表明：以(yi)銀納(na)(na)米線(xian)(xian)為基(ji)底的熒(ying)光(guang)(guang)納(na)(na)米溫(wen)度計(ji)有很好的重(zhong)復性，其熒(ying)光(guang)(guang)隨溫(wen)度變(bian)化主要來自(zi)于銀納(na)(na)米線(xian)(xian)與DNA序列(lie)(lie)的作用，溫(wen)度升高抑制了銀納(na)(na)米線(xian)(xian)與TEXAs-red之間的能(neng)量轉移，使熒(ying)光(guang)(guang)增強。

顯(xian)然，本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)(de)上述(shu)實施例僅僅是(shi)為(wei)清楚地說明(ming)本(ben)發(fa)明(ming)所(suo)作的(de)(de)(de)舉(ju)例，而(er)并非是(shi)對(dui)本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)(de)實施方式(shi)的(de)(de)(de)限定，對(dui)于所(suo)屬(shu)領域(yu)的(de)(de)(de)普(pu)通(tong)技術人員來說，在上述(shu)說明(ming)的(de)(de)(de)基礎上還可以做(zuo)出其(qi)它不(bu)同形式(shi)的(de)(de)(de)變化(hua)(hua)或變動，這里無(wu)法(fa)對(dui)所(suo)有(you)的(de)(de)(de)實施方式(shi)予以窮(qiong)舉(ju)，凡是(shi)屬(shu)于本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)(de)技術方案(an)所(suo)引伸出的(de)(de)(de)顯(xian)而(er)易見的(de)(de)(de)變化(hua)(hua)或變動仍處(chu)于本(ben)發(fa)明(ming)的(de)(de)(de)保護(hu)范圍之列。

SEQUENCE LISTING

<110> 中國科學院理化技術(shu)研究(jiu)所(suo)

<120> 一種以銀(yin)納(na)米(mi)線(xian)為(wei)基底的熒光納(na)米(mi)溫(wen)度計及其制備方法

<130> JLC16I0735E

<160> 2

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 56

<212> DNA

<213> 人(ren)工合(he)成的特定DNA片段(duan)

<400> 1

atctaatcat tattgttttt tttttttttt actattatgt ttagattttt tttttt 56

<210> 2

<211> 10

<212> DNA

<213> 人工合成的輔助鏈T

<400> 2

tttttttttt 10