一種d-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法
【專利摘要】本發明涉及一種D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱；以磷酸二氫鉀溶液－甲醇為流動相；以紫外檢測器檢測。本發明測定茶飲料等樣品中的D-異抗壞血酸鈉所得色譜峰與其它組分色譜峰能達到基線分離，呈對稱的高斯峰，峰型良好，能滿足定性和定量要求；本發明所涉及的色譜條件對所采用的色譜柱損傷較小，正常使用下色譜柱壽命較長，檢測成本較低；本發明檢測方法準確，操作簡便，重現性好，靈敏度高，在工作中實用性強。
【專利說明】一種D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法。
【背景技術】
[0002]D-異抗壞血酸鈉，學名:D_2，3，5，6-四羥基_2_乙烯酸-Y -內酯鈉鹽，又名異抗壞血酸鈉，赤藻糖酸鈉。分子式為:C6H7NaO6.H2O。該產品為白色粉末或顆粒,無臭,稍有咸味，易溶于水。
[0003]D-異抗壞血酸鈉作為當前飲料行業中普遍添加的一種抗氧化劑，對內容物起到護色作用。由于其易被氧化，在飲料的儲存過程中易被內容物中的溶解氧、容器內頂隙中的氧氣或通過包裝滲透進來的氧氣氧化而衰減，當其含量衰減至一定程度時，將無法發揮其護色作用，內容物將會變色，從而影響產品的感官。因此，飲料中D-異抗壞血酸鈉的初始添加量必須能保證產品在貨架期期間不發生變色，而此初始添加量的確定則需基于對D-異抗壞血酸鈉在該產品內在特定的儲存條件下的衰減規律的掌握。由此可見，飲料中D-異抗壞血酸鈉含量測定方法的建立尤為重要。
[0004]目前測定D-異抗壞血酸鈉的方法在業內的報道還比較少，李紅曾報道用碘量法測定D-異抗壞血酸鈉有效含量的方法，布都會等將碘量法測定D-異抗壞血酸鈉的方法加以改良，而應用了現代分析儀器測定的相關文獻則更為罕見，僅康黎東報道過用以C18色譜柱作分離柱，以0.05M磷酸二氫鉀作為流動相測定啤酒中的D-異抗壞血酸鈉的有效含量。而目前D-異抗壞血酸鈉的測定仍未有成熟的國家標準,僅吉林省衛生廳于2012年12月發布了食品中D-異維生素C鈉測定方法的地方標準，采用親水作用力柱作分離柱，乙腈-0.1%磷酸水溶液作流動相測定。

【發明內容】

[0005]采用康黎東報道的方法測定茶飲料中的D-異抗壞血酸鈉的含量，發現D-異抗壞血酸鈉色譜峰異常，未能形成對稱的高斯峰，說明此法不適用于茶飲料中D-異抗壞血酸鈉的測定。而吉林省地方標準所涉及的方法對所采用的親水作用力柱在測定過程中損耗較大，色譜柱壽命較短，檢測成本較高。
[0006]本發明解決其技術問題所采用的技術方案包括以下步驟:
[0007](I)色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱；以磷酸二氫鉀溶液一甲醇為流動相；以紫外檢測器檢測；
[0008](2)待測樣品溶液的制備:取待測樣品5-10g，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取濾液作為待測樣品溶液；
[0009](3)對照品溶液的制備:另取對照品D-異抗壞血酸鈉3mg，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為對照品溶液；
[0010](4)含量測定方法:分別吸取待測樣品溶液和對照品溶液各5 μ L?10 μ L注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標法分別以峰面積計算樣品中D-異抗壞血酸鈉的含量。[0011 ] 本發明的D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法，步驟(I)色譜條件的流動相由濃度為
0.5%-0.8%，pH值為3-5的磷酸二氫鉀溶液和甲醇組成，兩組分的體積比為(85: 15)-(95:5)，紫外檢測器檢測的波長范圍為240nm?250nm。
[0012]本發明的D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法，當D-異抗壞血酸鈉的溶液濃度在lmg/kg-200mg/kg之間時具有良好的線性關系，其線性相關系數達0.9990以上，回收率為106%-109%ο
[0013]本發明可用于各種液體飲料中D-異抗壞血酸鈉的含量檢測。
[0014]本發明與已有技術相比的積極效果在于:
[0015]1.本發明測定茶飲料等樣品中的D-異抗壞血酸鈉所得色譜峰與其它組分色譜峰能達到基線分離，呈對稱的高斯峰，峰型良好，能滿足定性和定量要求；
[0016]2.本發明所涉及的色譜條件對所采用的色譜柱損傷較小，正常使用下色譜柱壽命較長，檢測成本較低；
[0017]3.本發明檢測方法準確，操作簡便，重現性好，靈敏度高，在工作中實用性強。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1是本發明方法測定的D-異抗壞血酸鈉30mg/L對照品色譜圖；
【具體實施方式】
[0019]下面結合附圖和實施例對本發明進一步說明。
[0020]實施例一:
[0021]1.色譜條件與系統適用性試驗:
[0022]安捷倫1260Infinity型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);安捷倫二極管陣列檢測器；色譜柱:PR0SHELL120EC-C18 (3.0X50mm2.7Micron);流動相:濃度 0.8%, pH 為 4.0的磷酸二氫鉀溶液一甲醇，兩組分體積比為(80: 20)；
[0023]2.檢測波長的選擇
[0024]精密稱取D-異抗壞血酸鈉對照品3mg，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為對照品溶液。用安捷倫自動進樣器精密吸取5 μ L注入液相色譜儀，由安捷倫二極管陣列檢測器得該成分的色譜圖(附圖1)和紫外光譜圖。由色譜圖和紫外光譜圖結果可知，該成分含量測定檢測波長選為240nm。
[0025]3.對照品溶液的制備
[0026]精密稱取D-異抗壞血酸鈉對照品3mg，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為對照品溶液。
[0027]4.綠茶D-異抗壞血酸鈉含量測定溶液制備
[0028]取待測綠茶樣品10g，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取濾液作為供試品溶液。
[0029]5.測定
[0030]分別精密吸取綠茶待測樣品溶液和對照品溶液各5 μ L注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標法分別以峰面積計算樣品中D-異抗壞血酸鈉的含量，結果為21.191mg/L0[0031]實施例二:
[0032]1.色譜條件與系統適用性試驗:
[0033]安捷倫1260Infinity型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);安捷倫二極管陣列檢測器；色譜柱:PR0SHELL120EC-C18 (3.0X50mm2.7Micron);流動相:濃度 0.6%, pH 為 4.0的磷酸二氫鉀溶液一甲醇，兩組分體積比為(95: 5)；
[0034]2.檢測波長的選擇
[0035]精密稱取D-異抗壞血酸鈉對照品3mg，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為對照品溶液。用安捷倫自動進樣器精密吸取5 μ L注入液相色譜儀，由安捷倫二極管陣列檢測器得該成分的色譜圖(附圖1)和紫外光譜圖。由色譜圖和紫外光譜圖結果可知，該成分含量測定檢測波長選為250nm。
[0036]3.對照品溶液的制備
[0037]精密稱取D-異抗壞血酸鈉對照品3mg，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為對照品溶液。
[0038]4.綠茶D-異抗壞血酸鈉含量測定溶液制備
[0039]取待測綠茶樣品10g，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取濾液作為供試品溶液。
[0040]5.測定
[0041]分別精密吸取綠茶待測樣品溶液和對照品溶液各5 μ L注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標法分別以峰面積計算樣品中D-異抗壞血酸鈉的含量，結果為20.797mg/L0
[0042]通過上述實施例，清楚的說明了本發明的技術方案，但以上實施例只為了說明本專利之用，而非對其的限制，任何基于本專利發明精神的替換或改變均應屬于本專利的保護范疇。
【權利要求】
1.一種D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法，其特征在于所述的檢測方法包括以下步驟: a、色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱；以磷酸二氫鉀溶液一甲醇為流動相；以紫外檢測器檢測； b、待測樣品溶液的制備:取待測樣品5?10g，置于IOOmL容量瓶中，加純凈水充分溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為待測樣品溶液； C、對照品溶液:采用濃度為30mg/L的D-異抗壞血酸鈉溶液作為對照品溶液； d、含量測定方法:分別吸取待測樣品溶液和對照品溶液各5 μ L?10 μ L注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標法分別以峰面積計算樣品中D-異抗壞血酸鈉的含量。
2.根據權利要求1所述的D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法，其特征在于:所述步驟a色譜條件的流動相由磷酸二氫鉀溶液和純甲醇組成，兩者體積份額為磷酸二氫鉀溶液80?98體積份:甲醇2?20體積份；其中所述磷酸二氫鉀溶液的質量濃度為0.5%?0.8%，pH值為3?5。
3.根據權利要求1所述的D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法，其特征在于，紫外檢測器檢測的波長范圍為240nm?250nm。
4.根據權利要求1或2所述的D-異抗壞血酸鈉的含量檢測方法，其特征在于，其中每個待測樣品含D-異抗壞血酸鈉需> lmg/kg。
【文檔編號】G01N30/02GK103698417SQ201310478788
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年10月14日 優先權日:2013年10月14日
【發明者】張志剛, 鄭羽茜 申請人:華潤怡寶食品飲料（深圳）有限公司