專利名稱：一種海水總氮含量的測定方法
技術領域：
本發明屬于海洋水質標準測定領域，特別涉及一種海水養殖中水體總氮含量的測定方法。
背景技術：
海水養殖是利用淺海、灘涂、港灣、圍塘等海域進行飼養和繁殖海產經濟動植物的生產方式，是人類定向利用海洋生物資源、發展海洋水產業的重要途徑之一。海水養殖中，海水總氮是反應水質的重要指標之一，總氮是指水體中NH4-N、N03-N、NO2-N和有機氮之和的總稱。海水養殖中，因為大量的外源性餌料和排泄物使水體中的N、P以及有機物大量增力口，導致水質惡化，成為制約海水養殖業發展的主要因素之一。如果在養殖過程中，對水體中總氮含量能進行實時監測，可以及時獲得水體質量的相關信息，從而可根據水體中總氮的變化量采取相應的處理方法。目前海水總氮的測定方法是國標GB/T12763. 4-2007，具體為海水樣品在堿性和110°C 120°C條件下，用過硫酸鉀氧化，有機氮化合物被轉化為硝酸氮，同時，水中的亞硝酸氮、銨態氮也定量地被氧化為硝酸氮。硝酸氮經還原為亞硝酸鹽后與對氨基苯磺酰胺進行重氮反應，反應物再與1-奈替乙二胺二鹽酸鹽作用，生成深紅色偶氮染料，于543nm波長處進行分光光度測定。由于上述方法涉及兩步轉化，不僅步驟繁復，耗時長(通常耗時6-8小時)，而且容易因物質轉化產生總氮測定誤差。而且現有的總氮檢測方法中，樣品使用量和試劑的使用量也相當多，造成了不必要的浪費。

發明內容
本發明的目的是提供一種海水總氮含量的檢測方法，該方法通過直接測試水體中的硝酸氮的含量就能得到總氮的含量，測定效率高、測定過程更快捷。為了實現以上技術效果，本發明是通過如下步驟實現一種海水總氮含量的檢測方法，其步驟包括(I)標準液吸光度的測定將硝酸鉀標準液用稀釋劑稀釋后，加入堿性過硫酸鉀溶液氧化，然后將混合液加熱后冷卻得到消解產物，在該消解產物中加入鹽酸溶液溶解后用稀釋劑稀釋，利用紫外分光光度計測定吸光度；根據吸光度校正值繪制標準曲線。硝酸鉀標準液與稀釋劑的混合液中，氮的含量為0_9ii g/mL吸光度校正值為用紫外分光光度法分別于波長220和275nm處測出吸光度A220及A275，并按公式①，求出校正吸光度A A = A220-2A275。①(2)海水樣品吸光度的測定將海水樣品按照步驟(I)中的吸光度的測定方法測得吸光度值；根據步驟(I)中繪制的標準曲線計算樣品中的總氮含量。即從步驟(I)中的標準曲線上查出相應的總氮量m，再用公式②計算總氮含量。總氮(mg/L)=m/v ②式中m—從標準曲線上查得的含氮量(Ug)
V—所取水樣體積(ml)所述步驟(I)中，硝酸鉀標準液中的氮離子的濃度為9-lOy g/mL。所述步驟(I)中，硝酸鉀標準液與稀釋劑的混合液中，硝酸鉀標準液的體積百分比 0-80% o所述步驟(I)的堿性過硫酸鉀溶液中，溶劑為無氨水，過硫酸鉀含量為35 45g/L ;氫氧化鈉含量為12 16g/L。所述紫外分光光度計以無氨水作為參比，比色皿光程為1cm，紫外光波長為220nm和275nm處測定吸光度。所述步驟(I)中，稀釋劑為氯化鈉溶液，該氯化鈉溶液的質量濃度為32%。-37%。，溶劑為無氨水。所述鹽酸溶液為質量濃度是30%-37%的鹽酸和無氨水按照體積比為1-2 9的比例進行混合。所述混合液的加熱溫度為120°C _124°C，加熱時間為0. 5-1小時。所述海水為養殖海水。本發明的有益效果是本發明提供的海水養殖水體中總氮含量的測定方法，比現有技術中測定海水的測定方法少了將水體中的硝酸氮經還原為亞硝酸鹽，然后與對氨基苯磺酰胺進行重氮反應，反應物再與1-奈替乙二胺二鹽酸鹽作用，生成深紅色偶氮染料的過程，而是直接測試水體中的硝酸氮的含量就能得到總氮的含量，測定過程更加簡便，比現有檢測技術節約了 2. 5個小時；所述海水總氮測定方法中無容器的轉換，減少了實驗誤差；所述海水總氮測定方法中使用到的試劑品種少，用量少，節約了檢測成本；所述海水總氮測定方法中只涉及到一步轉化，減少了物質因多重轉化而產生的測定誤差，提高了檢測正確率。


圖1是本發明根據吸光度校正值繪制的標準曲線。
具體實施例方式下面結合實施例，對本發明作進一步說明實驗所用到的設備ALP高壓滅菌鍋CL-32L、Merk Millipore純水機SheEA00003D, HACH 紫外分光光度計 DR5000。實驗所用到的試劑氫氧化鈉溶液稱取20gNa0H，溶于無氨水中，稀釋至1000mL。堿性過硫酸鉀溶液稱取40g過硫酸鉀(K2S2O8), 15gNa0H,溶于無氨水中，稀釋至IOOOmL0(1+9)鹽酸質量濃度為30% -37%的鹽酸和無氨水按照體積比為1: 9的比例混合。硝酸鉀貯備液稱取0. 7218g經105°C 110°C烘干4h的優級純KN O3溶于無氨水中，移至IOOOmL容量瓶中，加入2mL三氯甲烷為保護劑，無氨水定容至1000ml。。硝酸鉀標準液將硝酸鉀貯備液用無氨水稀釋10倍而得。氯化鈉溶液稱取35gNaCl，溶于無氨水中，稀釋至1000mL。
I、標準曲線的繪制( I)分別吸取 0、0. 50、1. 00,2. 00,3. 00,5. 00,7. 00,8. OOmL 的硝酸鉀標準溶液于25mL的比色管中，用氯化鈉溶液稀釋至IOml標線。(2)在比色管中分別加入5ml堿性過硫酸鉀溶液，塞緊磨口塞，用紗布和橡皮筋裹緊管塞，以防進濺出。(3)將比色管置于壓力蒸汽消煮器中，加熱0. 5小時，放氣使壓力指針回零。然后升溫至120°C 124°C，加熱0. 5小時。將混合液冷卻至室溫后再加入(1+9)鹽酸lmL，用氯化鈉溶液稀釋至25mL標線。在紫外分光光度計上，以無氨水作為參比，用IOmm石英比色皿分別在220nm及275nm波長處測定吸光度。(4)用校正的吸光度作為縱坐標，溶液中氮濃度作為橫坐標，繪制標準曲線。具體標準曲線見圖1。2、海水樣品的測定取IOmL海水樣品，按標準曲線繪制步驟的(2)至(4)操作，然后按校正吸光度，在校準曲線上查出相應的總氮量，再用公式總氮(mg/L) = m/v，計算總氮含量為64. 19 u g/
mLo式中m—從標準曲線上查得的含氮量(U g)V—所取水樣體積(mL)3、本檢測方法與現用測定方法精準度比較(I)將3個海水樣品分別用本發明的測定方法和現用國際方法進行測試，具體結果如表I所示表I
__本發明檢測方法__國標方法
測定濃度測定滾度漏定濃度
海水樣a
權利要求
1.一種海水總氮含量的檢測方法，其步驟包括(1)標準液吸光度的測定將硝酸鉀標準液用稀釋劑稀釋后，加入堿性過硫酸鉀溶液氧化，然后將混合液加熱后冷卻得到消解產物，在該消解產物中加入鹽酸溶液溶解后用稀釋劑稀釋，利用紫外分光光度計測定吸光度；根據吸光度校正值繪制標準曲線；硝酸鉀標準液與稀釋劑的混合液中，氮的含量為0-9 μ g/mL ；(2)海水樣品吸光度的測定將海水樣品按照步驟(I)中的吸光度的測定方法測得吸光度值；根據步驟(I)中繪制的標準曲線計算樣品中的總氮含量。
2.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述步驟(I)中，硝酸鉀標準液中的氮離子的濃度為9-10 μ g/mL。
3.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述步驟(I)中，硝酸鉀標準液與稀釋劑的混合液中，硝酸鉀標準液的體積百分比0-80%。
4.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述步驟(I)的堿性過硫酸鉀溶液中，溶劑為無氨水，過硫酸鉀含量為35 45g/L ;氫氧化鈉含量為12 16g/L。
5.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述紫外分光光度計以無氨水作為參比，比色皿厚度為1cm，紫外光波長為220nm-275nm處測定吸光度。
6.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述步驟(I)中，稀釋劑為氯化鈉溶液，該氯化鈉溶液的質量濃度為32%。-37%。，溶劑為無氨水。
7.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述鹽酸溶液為質量濃度是30%-37%的鹽酸和無氨水按照體積比為1-2 9的比例進行混合。
8.根據權利要求I所述的海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述混合液的加熱溫度為120。。_124°C，加熱時間為O. 5-1小時。
9.根據權利要求I至7中任一種海水總氮含量的檢測方法，其特征在于所述海水為養殖海水。
全文摘要
本發明屬于海洋水質標準測定領域，特別涉及一種海水養殖中水體總氮含量的測定方法，首先測定標準液的吸光度將硝酸鉀標準液用稀釋劑稀釋后，加入堿性過硫酸鉀溶液氧化，然后將混合液加熱后冷卻得到消解產物，在該消解產物中加入鹽酸溶液溶解后用稀釋劑稀釋，利用紫外分光光度計測定吸光度，根據吸光度校正值繪制標準曲線；然后將海水樣品按照標準液吸光度的測定步驟檢測，得到吸光度值；最后根據標準曲線計算樣品中的總氮含量。本測定方法比現有技術中測定海水的測定方法少了中間的轉化過程，測定步驟更加簡便、快速、精準，比現用測定方法少了2.5個小時。本測定方法使用到的試劑品種少，用量少，節約了檢測成本。
文檔編號G01N21/33GK102980865SQ20121046623
公開日2013年3月20日 申請日期2012年11月17日 優先權日2012年11月17日
發明者時旭, 顧兆俊, 劉興國 申請人:中國水產科學研究院漁業機械儀器研究所