專利名稱:一種鑒別卵磷脂純度的方法
技術領域:
本發明屬于農產品質量檢測技術領域,特別涉及卵磷脂純度的鑒別方法。
背景技術:
卵磷脂是重要的營養補充劑和食品添加劑,不同的提取純化工藝對卵磷脂的純度影響很大,同時卵磷脂在貯存過程中或在酶的作用下會發生水解,水解程度的不同也會影響產品的純度,產品純度直接影響其功能特性。卵磷脂純度鑒別可采用薄層層析法(TLC)、 柱層析、高效液相色譜法和核磁共振檢測方法。國外通常采用高效液相色譜或核磁共振法對卵磷脂純度進行分析,盡管分析結果準確,但設備價格昂貴;國內一般采用的柱層析法, 其檢測周期長、耗用的試劑量大、原料浪費嚴重;所以對卵磷脂純度的鑒別,一直是困擾科研和生產的難題。經典的薄層層析法不僅設備要求簡單、操作方便、分離條件易于掌握,而且結果直觀,適合于卵磷脂的純度鑒別。通常使用薄層層析法對卵磷脂成分進行分析時,主要局限于對其具體組分或脂肪酸構成進行分析,卵磷脂的分析范圍較窄(主要局限于幾種磷脂或其分子種),不能兼顧甘油酯及其水解產物脂肪酸和溶血卵磷脂,因此很大程度上限制了運用該方法對卵磷脂純度及其水解程度的鑒別。
發明內容
本發明的目的是提供一種方便操作、直觀、準確地鑒別卵磷脂純度的方法。本發明操作步驟是
1)將卵磷脂樣品用氯仿溶解,配制成濃度為5mg/mL的卵磷脂溶液;
2)將上述卵磷脂溶液點樣于距一矩形薄層層析板底端1.Ocm處,使點樣下方的薄層層析與展開劑液面接觸,當展開劑上緣距離薄層層析板頂端1. 3cm時立即取出薄層層析板, 待薄層層析板上展開劑涼干后,再將薄層層析板完全浸泡于顯色劑中,然后取出;
3)薄層層析板上的卵磷脂、脂肪酸和甘油酯、溶血卵磷脂的顯色斑點分別是黃色、白色和乳黃色,將薄層層析板掃描后測量出卵磷脂、 脂肪酸和甘油酯、溶血卵磷脂的面積分別為S、S1和S2,
權利要求
1. 一種鑒別卵磷脂樣品純度的方法,包括以下步驟1)將卵磷脂樣品用氯仿溶解,配制成濃度為5mg/mL的卵磷脂溶液;2)將上述卵磷脂溶液點樣于距一矩形薄層層析板底端1.Ocm處,使點樣下方的薄層層析與展開劑液面接觸,當展開劑上緣距離薄層層析板頂端1. 3cm時立即取出薄層層析板, 待薄層層析板上展開劑涼干后,再將薄層層析板完全浸泡于顯色劑中,然后取出;3)薄層層析板上的卵磷脂、脂肪酸和甘油酯、溶血卵磷脂的顯色斑點分別是黃色、白色和乳黃色,將薄層層析板掃描后測量出卵磷脂、 脂肪酸和甘油酯、溶血卵磷脂的面積分別為S、S1和S2,卵磷脂的純度=S-X100% ;S + S1+S2其特征在于所述展開劑由氯仿、甲醇、異丙醇、水和三乙胺組成,所述氯仿甲醇異丙醇水和三乙胺的體積比為23 9 1 1 0. 67 ;所述顯色劑由溴百里香酚藍、NaOH和水組成,所述溴百里香酚藍、NaOH分別占顯色劑總質量的0. 035%和0. 36%。
全文摘要
一種鑒別卵磷脂純度的方法,屬于農產品質量檢測技術領域,該方法提供一種高效展開劑,使卵磷脂主要成分、脂肪酸、甘油酯和溶血卵磷脂在薄層層析板上得到快速分離,然后采用顯色劑確定各種成分,最后依據其斑點面積計算卵磷脂的純度。該方法具有設備要求簡單、快速、直觀的特點,既可用于卵磷脂純度的檢測,也可以用于研究磷脂酶水解進程。
文檔編號G01N30/94GK102175811SQ20111000338
公開日2011年9月7日 申請日期2011年1月10日 優先權日2011年1月10日
發明者劉芳, 卞歡, 張露娟, 徐為民, 王道營, 諸永志 申請人:江蘇省農業科學院