一種假黃單孢菌株kyli-01及其培養與應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供了一種假黃單孢菌株KYLI-01，保藏號為CGMCC No.10174，所述假黃單孢菌株KYLI-01在好氧的條件下能夠降解造紙污水中的木質素，以達到降低污水COD的目的。與物理、化學方法相比具有成本低、無二次污染的特點，在造紙污水處理領域有廣泛的應用前景。
CGMCC No10174
20141215
【專利說明】一種假黃單孢菌株KYLI-01及其培養與應用

【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物【技術領域】，尤其是一種假黃單孢菌株KYLI-01及其培養與應用。

【背景技術】
[0002] 造紙工業污水排放量大，污水中又含有大量的纖維素、木質素、無機堿以及樹脂、 單寧、蛋白質等，致使污水色度深、堿度大，難降解有機物含量高、耗氧量大，屬于典型的綜 合性高濃度有機污水。我國的造紙工業污染尤為嚴重。造紙工業對水環境的污染已經嚴重 威脅環境安全和人類的身體健康，在世界范圍內受到廣泛關注，因此解決造紙污水的污染 成為當務之急。
[0003] 普通微生物和活性污泥都很難實現木質素的有效降解。因此，目前針對造紙污水 中木質素的處理方法多集中于Fenton試劑處理法等化學氧化方法。但是，化學方法需要投 加大量的藥劑，成本較高，還容易造成二次污染。因此，通過篩選降解菌，用生物法來處理木 質素成為了最佳選擇。所述假黃單孢菌株KYLI-01在好氧條件下能夠有效的降解木質素， 實現降低水體C0D的效果。


【發明內容】

[0004] 本發明所要解決的技術問題在于提供一種假黃單孢菌株KYLI-01，可有效降解污 水中木質素。
[0005] 本發明所要解決的另一技術問題在于提供用于上述假黃單孢菌株KYLI-01的培 養基及其培養方法。
[0006] 本發明所要解決的另一技術問題在于提供上述假黃單孢菌株KYLI-01的應用。
[0007] 為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：
[0008] 提供一種假黃單孢菌株（Pseudoxanthomonas. Sp)KYLI_01，其保藏號為CGMCC No. 10174(保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽 區北辰西路1號院3號、保藏日期：2014年12月15日，保藏編號：CGMCC No. 10174)。
[0009] 優選的，上述假黃單孢菌株KYLI-01，由制漿車間泥土中篩選出來，其菌落在培養 平板上呈透明圓形細小顆粒狀，革蘭氏染色呈陰性，通過16SrDNA測序鑒定為假黃單孢菌， 16SrDNA 序列如 SEQ ID No. 1 所示。
[0010] 優選的，上述假黃單孢菌株KYLI-01，具有較強的可溶性木質素降解能力。優選 的，可降解污水中的木質素含量為=1500mg/L，更優選木質素含量200-570mg/L，更優選 250_570mg/L。
[0011] 本發明還提供一種用于上述假黃單孢菌株KYLI-01的培養基，每1L水中，含有：
[0012] MgS()4 0.5 g, K2f IP()4 0.5 g, NaCl 0.5g, KN()3 1.0g , 木質素磺酸鹽 0.5-1.5g，優選為0.8-1.2g,更優選為l.Og pH 6.0 -8.0 , 固態加2%的瓊脂。
[0013] 優選的，上述培養基，是由下述方法制備得到的：上述各組分按組方稱量好后用水 溶解制成備用培養基，于121°C，102kpa下滅菌20-30min。
[0014] 本發明還提供一種假黃單孢菌株KYLI-01的培養方法，用上述培養基進行培養。
[0015] 本發明還提供一種假黃單孢菌株KYLI-01在制備污水處理菌劑中的用途。
[0016] 本發明還提供一種菌劑，其中，該菌劑包括上述分離的KYLI-01菌株。
[0017] 本發明還提供一種菌劑的制備方法，其中，該菌劑由包括上述分離的KYLI-01菌 株制備而來。其制備方法可以是本領域技術人員公知的任一方法。
[0018] 優選的，所述制備方法包括：（1)發酵KYLI-01菌株，至發酵液中菌濃約為105-1〇7 ml ; (2)干燥發酵液，控制水分在15-20%。
[0019] 本發明還提供一種上述KYLI-01菌株或者所述菌劑在污水處理中的應用。
[0020] 本發明還提供一種污水處理方法，包括在水體中投放上述KYLI-01菌株或者上述 菌劑。
[0021] 優選的，所述污水是富含木質素的污水，更優選的，所述污水是造紙污水。優選的， 所述菌株或者菌劑培養至菌濃度約為10 5-108/1111時，優選105-106/1111時，以5-15 (%的接種 量投入。
[0022] 優選的，所述假黃單孢菌株KYLI-01或其菌劑投放至含有木質素的污水中。優選 的，污水中的木質素含量=1500mg/L，更優選木質素含量200-570mg/L，更優選250-570mg/ L 〇
[0023] 優選的，在好氧條件下，實現其降解木質素的作用。
[0024] 本發明的有益效果是：
[0025] 本發明提供了假黃單孢菌株KYLI-01 (保藏號為CGMCC No. 10174)，在好氧的條件 下可以降解污水中的木質素，從而降低污水的C0D，并且降解起效時間短，在第2天降解率 就能達到大約15%。與物理、化學方法相比具有成本低、無二次污染等優點，在造紙污水處 理領域有廣泛的應用前景。
[0026] 保藏信息
[0027] 分類名詞：假黃單抱菌（Pseudoxanthomonas. Sp)
[0028] 保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC)
[0029] 保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號
[0030] 保藏日期：2014年12月15日，
[0031] 保藏號：CGMCC No. 10174

【具體實施方式】
[0032] 下面結合具體實施例對本發明所述技術方案作進一步的說明。
[0033] 實施例1 :菌株篩選
[0034] 假黃單孢菌的富集分離培養基，組分如下，每升水中：
[0035] MgS()4 0.5 g, K2fIP()4 0.5 g, NaCJ (?.5g, KN()3 l.Og , 木質素磺酸鹽 l.Og , pf I 6.0 -8.0 , 固態加2%的瓊脂。
[0036] 該富集分離培養基的制備方法為：按組方稱量好后水溶解，于12rC，102kpa下滅 菌 20_30min。
[0037] 取制漿車間泥土（天津市星河紙業制漿車間泥土）樣品lg溶于配好的富集分 離培養基中，在30°C恒溫箱中180r/min的條件下培養5天，然后培養產物離心沉淀，將沉 淀物轉接到新的培養基中繼續培養，反復3次，最后將培養產物按梯度稀釋，10'1(T 2…直 至稀釋到1〇_7,每個濃度下涂平板，挑取單菌落接入斜面上；得到菌株KYLI-01，KYLI-02， KYLI-03和KYLI-04,進行木質素降解實驗，其中，以KYLI-01的降解效果最好。
[0038] 對菌株KYLI-01進行16SrDNA測序鑒定，確定為假黃單孢菌株KYLI-01，該假黃單 孢菌測序的16SrDNA序列如下：
[0039] SEQ ID No. 1 ：

【權利要求】
1. 一種假黃單孢菌株（Pseudoxanthomonas.Sp)KYLI-〇l，其特征在于：其保藏號為 CGMCCNo. 10174。
2. 根據權利要求1所述的假黃單孢菌株KYLI-01，其特征在于：由制漿車間泥土中篩選 出來，其菌落在培養平板上呈透明圓形細小顆粒狀，革蘭氏染色呈陰性，通過16SrDNA測序 鑒定為假黃單孢菌，16SrDNA序列如SEQIDNo. 1所示。
3. 根據權利要求1所述的假黃單孢菌株KYLI-01，其特征在于：具有較強的降解水溶性 木質素的能力。
4. 一種用于權利要求1-3任一所述假黃單孢菌株KYLI-Ol的培養基，其特征在于：每 IL水中， MgS( )4 0 5 g, Κ2? ?Ρ()4 0.5 g, NaCT. 0.5g, KN 03 1.0g , 木質素磺酸鹽（).5-1.5g， pH 6· 0_8· 0， 固態加2%的瓊脂。
5. 權利要求1-3任一所述的假黃單孢菌株KYLI-Ol的培養方法，其特征在于用權利要 求4的培養基進行培養。
6. 權利要求1-3任一所述的假黃單孢菌株KYLI-Ol在制備污水處理菌劑中的用途。
7. -種菌劑，其特征在于，包括權利要求1-3任一所述的假黃單孢菌株KYLI-Ol。
8. -種菌劑的制備方法，其特征在于，由包括權利要求1-3任一所述的假黃單孢菌株 KYLI-01制備而來。
9. 權利要求1-3任一所述的假黃單孢菌株KYLI-01或者權利要求7所述菌劑在污水處 理中的應用，優選的，所述污水是富含木質素的污水，更優選的，所述污水是造紙污水。
10. -種污水處理方法，包括在污水中投放權利要求1-3任一所述的假黃單孢菌株 KYLI-01或者權利要求7所述的菌劑，優選的，所述污水是富含木質素的污水，更優選的，所 述污水是造紙污水。
【文檔編號】C02F101/30GK104450591SQ201410833416
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月28日 優先權日:2014年12月28日
【發明者】李玉慶, 張建, 王曉陽, 薛二軍 申請人:天津凱英科技發展有限公司