一種快速分離細胞的帶柄細胞篩的制作方法
【專利摘要】本實用新型專利涉及一種原代細胞分離培養過程中快速分離細胞的細胞篩，尤其是涉及組織塊經酶消化后將剩余組織塊與游離細胞快速分離。本實用新型的細胞篩由一根硬質塑料長柄和能與15ml或50ml離心管內壁無縫銜接的細胞篩組成，能有效分離游離細胞和未完全消化的組織塊。
【專利說明】
一種快速分離細胞的帶柄細胞篩
技術領域
[0001]本實用新型涉及細胞原代細胞分離培養領域，具體而言涉及原代培養中將游離細胞與組織塊分離的裝置。
【背景技術】
[0002]在醫學及生物學領域通常會涉及到細胞的原代培養，在各類細胞的原代培養中，尤其是心肌細胞的分離培養過程中需要對組織塊進行多次消化，并將細胞從含有組織塊的消化液中分離出來。
[0003]通常步驟為:
[0004](I)將所采組織用75%酒精消毒后，剔除多余組織，用加入鏈霉素+青霉素的PBS緩沖液漂洗5-6次。
[0005](2)將組織剪成Imm3大小，加入含胰酶和膠原酶的混合消化液多次消化，每次消化5-8min，靜置后用巴氏吸管吸取或用離心的方法將每次消化后含游離細胞的上清液吸出至另一離心管中。
[0006](3)將多次消化后細胞懸液用40或70μπι細胞篩過濾，制得單細胞懸液。
[0007](4)按一定密度接種至細胞培養皿或培養瓶，置于37°C含5% C02培養箱中進行培養。
[0008]傳統方法中存在以下不足，第一，消化液經靜置或離心后用吸管吸取上清液耗時長;第二，組織塊與細胞懸液分離不完全;第三，吸管吸取上清液容易將組織塊一并吸出。以上不足，均降低了細胞存活率和消化效率，如何克服上述問題，成為了亟待解決的目標。
【實用新型內容】
[0009]本實用新型的目的就是提供一種帶柄的細胞篩，可插入15mL或50mL離心管底部，快速分離組織塊與游離細胞，以解決現有技術中依靠重力或離心等方法不能有效分離組織塊與游離細胞的不足之處。
[0010]本實用新型的目的通過下述技術方案來實現:
[0011]—種細胞過濾篩，包括細胞篩部分和上面連接的的長柄部分，長柄與篩網連接部分為三叉結構，遠端為一根長柄。
[0012]作為優選，所述細胞篩網面最好為尼龍絲制成，篩網孔徑為
[0013]作為優選，所述細胞篩除網面部分均采用聚丙烯制成，一次性使用。
[0014]作為優選，所述細胞篩大小能與15ml或50ml離心管內壁緊密貼合，手持篩網柄部能插入離心管底部。
[0015]與現有技術相比，本實用新型的有益效果在于:
[0016]本實用新型細胞篩設計結構簡單、合理，使用簡便、高效;通過使用本實用新型裝置可快速、有效分離離心管中未完全消化的組織塊和已消化出的游離細胞，大大提高細胞存活率和消化效率;這個細胞篩制作工藝簡單、成本低，適于推廣與應用。
【附圖說明】
[0017]圖1為本實用新型細胞篩的結構示意圖。
[0018]圖2為本實用新型細胞篩的具體使用方法示意圖。
【具體實施方式】
[0019]如圖1所示，本實用新型細胞篩包括細胞篩體和上面手握部分的長柄。
[0020]該細胞篩體的結構包括外部硬質塑料環裝支撐架I和內部尼龍絲編織成的篩網格
2。本實事例中篩網格2為20-40目，硬質塑料環狀支撐架I直徑與15ml或50ml離心管內徑一致。
[0021]該手握部分長柄由連接細胞篩體的三叉結構4和連接三叉結構4的用于手握的長柄5組成，其材料為聚丙烯。
[0022]如圖2所示，本實用新型細胞篩的使用方式為:
[0023](I)組織塊經含胰酶和膠原酶的混合消化液消化5-8min后，將本實用新型細胞篩用力壓入離心管底部，使含游離細胞的消化液與未完全消化的組織塊分離。
[0024](2)倒出含游離細胞的消化液至另一離心管中，加入適量含10%胎牛血清的培養液終止消化。取出本實用新型細胞篩，再在離心管中加入新的消化液繼續消化。過一段時間后重復步驟(I)，直至組織塊完全消化。
[0025]將分離得到的細胞按一定密度接種至細胞培養皿或培養瓶，置于37°C含5%CO2培養箱中進行培養。本實用新型細胞篩設計結構簡單、合理，使用簡便、高效;通過本實用新型裝置可快速、有效分離未完全消化的組織塊和已消化出的游離細胞，大大提高細胞存活率和消化效率;這個細胞篩制作工藝簡單、成本低，適于推廣與應用。
[0026]以上所述，為本實用新型的一個典型實施例，并非為對本實用新型的使用形式的限制，而依據本實用新型的技術實質所作的任何修改或等同變化，仍屬于本實用新型所要求保護的范圍。
【主權項】
1.一種快速分離細胞的帶柄細胞篩，其特征在于由一個篩網上面連接長柄，與篩網連接部分為三叉結構，遠端為一根長柄;所述篩網孔徑為40-70μπι，篩網面由尼龍絲制成，其余部分由硬質塑料制成;所述細胞篩部分能與15ml或50ml離心管內壁無縫銜接，并能在管內上下自如運動。
【文檔編號】C12M1/12GK205420435SQ201520773264
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2015年10月8日
【發明人】羅毅, 王宇豪, 王鵬俊, 王訊, 李明洲, 李學偉
【申請人】四川農業大學