一種金針菇液體菌種轉固體再液化的制種方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種金針菇液體菌種轉固體再液化的制種方法，屬于金針菇栽培技術領域。
【背景技術】
[0002]目前，食用菌企業中，菌種的使用主要分為固體菌種和液體菌種。其中，液體菌種具有生產周期短、菌齡一致、操作簡便、出菇整齊等眾多優點，適合金針菇工廠化標準生產，但是也具有所需成本設備投入大，技術要求高，風險也多等缺點。而固體菌種雖然有諸多弊端，但是成本低、制種工藝簡單、菌種穩定性高，尤其在菌種提純、復壯、出菇試驗與菌種保藏、運輸方面亦有不可替代的優勢。如何將兩者的優勢有機的結合而避免各自的不利之處，是食用菌實際生產過程中需要解決的問題。
【發明內容】
[0003]針對上述現存的技術問題，本發明提供一種金針菇液體菌種轉固體再液化的制種方法，通過綜合液體菌種和固體菌種兩者的優點，以達到縮短周期、減少投入的同時，簡化生產工藝、降低成本、減少雜菌污染率的目的。
[0004]為實現上述目的，本發明提供一種金針菇液體菌種轉固體再液化的制種方法，包括如下具體步驟:
一、液體菌種培養:
(1-1)制作液體培養基??每1000ml液體三角瓶培養液所需配料為:白糖20g、豆奶寶
3.3g、磷酸二氫鉀0.66g、硫酸鎂0.66g，稱取各種原料后混合均勾；將配好的料裝入1000ml的三角瓶中，并充分攪拌溶解，放入一個轉子，然后用純水定容至600ml，且要求PH值在6.2至6.5 ;將裝好料的三角瓶塞上棉塞，并在棉塞外套上錫箔紙，確保錫箔紙完全包裹住棉塞，然后放于高壓滅菌鍋中，于121°C條件下滅菌60min后取出；將取出的三角瓶在超凈臺中冷卻至18°C至22°C即可準備接種；
(1-2)接種:將接種針深入平板培養基，刮掉斜面表面的氣生菌絲，再用直徑10mm的打孔器沿著菌絲蔓延生長的邊緣均勻打孔一圈；蓋上平板蓋備；將冷卻后的液體三角瓶瓶口靠近酒精燈火焰，并取下錫箔紙和棉塞，快速用接種針分別從平板培養基內選取4顆菌種，放置過程中接種針不要觸碰三角瓶內壁；操作完成后分別將棉塞和錫箔紙在火焰上過火后再把三角瓶塞緊包好；
(1-3)培養:重復步驟(1-2)操作直至接種結束，每個平板可轉接2至3個三角瓶，然后將三角瓶放入搖床中震蕩培養；培養溫度為20度左右，振幅為250r/min ;培養至第四天取出三角瓶，將液體菌種打碎20s，然后放回繼續培養；培養至第9天取出三角瓶，將液體菌種打碎lOmin，即可用于制作原種；
二、固體菌種培養:
(2-1)配料??每1100ml透明玻璃菌種瓶所需培養料為:紙漿顆粒280g、米糠100g、水310g ;把水倒入米糠中攪拌成糊狀后，倒入紙漿顆粒攪拌均勻，然后等待裝料；
(2-2)裝料:將上述配好的料裝入1100ml透明玻璃菌種瓶中，裝料高度為瓶口以下
2-3cm，中央打一個直徑1-1.5cm、且直至瓶底的孔洞，采用透氣瓶蓋蓋住菌種瓶并包上牛皮紙；
(2-3)滅菌:將制作好的菌種瓶放于滅菌鍋中，于121°C條件下滅菌90min ;
(2-4)接種:待菌種瓶及瓶中的培養料降至室溫以后進行接種，每個液體菌種瓶可以轉接16個左右的固體培養瓶；
(2-5)培養:菌種瓶接種好以后放于恒溫室中進行培養，培養溫度為18-20°C，避光培養，培養濕度為55-70，培養24-26天，原種菌種瓶中長滿菌絲即可；
三、固體菌種液化:
將固體菌種瓶放置于接種機上打碎，在固體儲存罐內液化、稀釋，菌種稀釋后儲存在菌種罐內，連續間歇性提供給接種機，再接種到液體菌種瓶內培養。
[0005]相比于現有技術，本發明的制種方法具有如下的優點:
A、液體菌種轉固體培養:將三角瓶中培養的液體菌種打碎后，均勻的接種到滅菌冷卻后的固體培養基質中，進行培養發菌，省去了一級種、二級種的培養過程，從而大大縮短了生產周期。
[0006]B、固體培養轉液體菌種:用特殊紙漿團代替傳統的木肩，將干紙漿預濕后，再和米糠等營養物質混合裝入培養瓶，經過高壓滅菌和培養，制作出優質的固體菌種。并在培養過程中通過檢查和試驗，再通過出菇試驗，確定菌種的品質，將最優秀的無雜菌的菌種用于栽培接種。接種前用微酸性電解水將液體接種機清洗一遍，然后用設置在接種室里的設備，將經過確認后的優質固體菌種直接液化、稀釋、存積、調制后可連續接種，每次接種后用無菌水清洗一次設備，再用蒸汽將液體菌種機的導管、儲菌罐、噴嘴等殺菌一次即可，由于不在液化設備的罐內進行菌絲培養，而是在菌種瓶內培養，所以不需要供氧處理，節省設備投入，減少故障率。
[0007]綜上所述，本發明這種新菌種制作方式，拋棄了液體菌種采用的發酵罐的繁瑣的生產模式。采用紙漿作為固體培養原料，因紙漿細嫩，從而保持了木生菌類需要木質素的特點，制成顆粒狀，使菌絲在培養容器內具有一定的間隙度，滿足菌絲蔓延過程對氧氣的需求。并且，菌種制作簡單，雜菌感染率低，接種前可以再次確認菌種品質，安全可靠。
【具體實施方式】
[0008]下面結合實施例對本發明作進一步說明。
[0009]本發明方法第一步:液體菌種培養，具體步驟如下。
[0010](1-1)制作液體培養基??每1000ml液體三角瓶培養液所需配料為:白糖20g、豆奶寶3.3g、磷酸二氫鉀0.66g、硫酸鎂0.66g，稱取各種原料后混合均勻；將配好的料裝入1000ml的三角瓶中，并充分攪拌溶解，放入一個轉子，然后用純水定容至600ml，且要求PH值在6.2至6.5 ;將裝好料的三角瓶塞上棉塞，并在棉塞外套上錫箔紙，確保錫箔紙完全包裹住棉塞，然后放于高壓滅菌鍋中，于121°C條件下滅菌60min后取出；將取出的三角瓶在超凈臺中冷卻至18°C至22°C即可準備接種；
(1-2)接種:將接種針深入平板培養基，刮掉斜面表面的氣生菌絲，再用直徑10mm的打孔器沿著菌絲蔓延生長的邊緣均勻打孔一圈；蓋上平板蓋備；將冷卻后的液體三角瓶瓶口靠近酒精燈火焰，并取下錫箔紙和棉塞，快速用接種針分別從平板培養