一種Icetexane型二萜二聚體類化合物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于植物有效成分提取技術領域，具體涉及一種Icetexane型二貓二聚體 類化合物biperovskatone及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 分藥花屬植物全球約7種，主要分布在伊朗、巴基斯坦、印度以及 我國的西藏和新疆。我國西藏有2種。研宄表明，分藥花屬植物富含松香烷型二萜和 Icetexane型二萜。這類二萜類成分結構新穎多樣，且具有廣泛的藥理活性，其中的丹參醌 類結構具有廣譜強效的抗腫瘤活性。我們在前期抗HBV活性篩選過程中，發現濱藜葉分藥 花的90%乙醇提取物具有顯著的抗HBV活性。乙型肝炎病毒（HBV)是目前嚴重危害人類健 康的病毒之一。當前對于HBV主要是采用乙肝疫苗預防，但是這些疫苗對于后期乙型肝炎 患者則沒有作用。當前臨床一線用藥均為核苷及其類似物，如拉米夫定（3-TC)、阿德福韋 酯、替諾夫韋、替比夫定等，這些核苷類似物均存在毒副作用大、長期服用導致病毒產生耐 藥性和變異，且停藥后病毒反彈大的缺點。為了尋找天然抗病毒活性成分，我們對前期篩選 具有顯著抗HBV活性的分藥花屬植物濱藜葉分藥花進行了較系統的活性成分研宄工作。本 發明從分藥花屬植物濱藜葉分藥花中分離得到一個結構新穎的Icetexane型二貓二聚體， 該化合物具有顯著的抑制表面抗原（HBsAg)和e抗原（HBeAg)的活性，并能使HBV DNA顯 著下降，該化合物至今尚未見到相關報道。

【發明內容】

[0003] 本發明的第一目的在于提供一種新的Icetexane型二萜二聚體類化合物 biperovskatone ;第二目的在于提供所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法； 第三目的在于提供所述Icetexane型二萜二聚體類化合物在制備抗乙型肝炎病毒藥物中 的應用。
[0004] 本發明的第一目的是這樣實現的，所述的化合物是從干燥的分藥花屬植物全草中 分離得到的，其分子式為C 4tlH56O6，具有下述結構：
【主權項】
1. 一種Icetexane型二貓二聚體類化合物，其特征在于所述Icetexane型二貓二聚體 類化合物是以干燥的分藥花屬植物全草為原料分離得到，命名為biperovskaton，其分子式 為(： 4(|115606,具有下述結構：
2. -種權利要求1所述的Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于 是以干燥的分藥花屬植物全草為原料，經浸膏提取、有機溶劑萃取、硅膠柱層析、反相柱層 析、高壓液相色譜分離獲得，具體為： A、 浸膏提取：取濱藜葉分藥花全草，粉碎至20~40目，用有機溶劑在85-90°C下回流提 取2~4次，每次30~60分鐘，提取液合并、過濾，減壓濃縮提取液至1/4 ~ 1/2體積時，靜 置，濾除沉淀物，濃縮成浸膏a ; B、 有機溶劑萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用與水等體積的有機溶劑萃取 3~4次，合并有機溶劑萃取相，減壓濃縮成浸膏b ; C、 硅膠柱層析：浸膏b上硅膠柱層析，裝柱硅膠為160~200目，用量為浸膏b重量6~8 倍量；以體積配比為1 :〇~〇: 1的混合有機溶劑梯度洗脫，收集梯度洗脫液、濃縮，經TLC檢 測，合并相同的部分； D、 反相柱層析：C步驟洗脫液的10:1的部分上反相柱層析，反相柱用反相材料C-18裝 柱；用體積含量為20~100%的甲醇水溶液進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液并濃縮，經TLC 檢測，合并相同的部分； E、 高效液相色譜分離：將以體積含量60~85%甲醇水溶液洗脫得到的洗脫液經高效液 相色譜分離純化，即得所述的Icetexane型二貓二聚體類化合物。
3. 根據權利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述A步驟的有機溶劑為70~90 %的丙酮、乙醇或甲醇。
4. 根據權利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述B步驟的有機溶劑為乙酸乙酯、氯仿、石油醚或苯。
5. 根據權利要求2所述的Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在 于所述C步驟的浸膏b在經硅膠柱層析前，用重量比1. 5~3倍量的氯仿溶解后用重量比 0? 8~L 2倍的80~100目硅膠拌樣。
6. 根據權利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述C步驟的混合有機溶劑為石油醚-丙酮、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇、正己烷-丙酮或石油 醚-乙酸乙酯。
7. 根據權利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述C步驟的混合有機溶劑的體積配比為1:0、20:1、10:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1。
8. 根據權利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述E步驟的高效液相色譜分離純化是以70%的甲醇為流動相，流速為2 ml/min，10 X 250 mm，5ym的Agilent Zorbax C18制備色譜柱為固定相，紫外檢測器檢測波長為254 nm，每 次進樣50~100 y L，收集19. 5~23. 0 min的色譜峰，多次累加后蒸干。
9. 一種權利要求1所述的Icetexane型二萜二聚體類化合物在制備抗乙型肝炎病毒 (HBV)藥物中的應用。
【專利摘要】本發明公開了一種Icetexane型二萜二聚體類化合物及其制備方法和應用，所述Icetexane 型二萜二聚體類化合物是從分藥花屬植物中分離得到，是目前為止首個C環C-11位羰基與C-10位羥基形成分子內半縮酮結構的二萜二聚體，命名為biperovskatone，其分子式為C40H56O6，具有下述結構：所述Icetexane型二萜二聚體是以干燥的分藥花屬植物全株為原料，經浸膏提取、有機溶劑萃取、硅膠柱層析、反相柱層析、高壓液相色譜分離步驟而得到。該化合物對HepG2.2.15細胞分泌表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)有顯著的抑制活性，還能顯著降低細胞內HBV DNA。本發明化合物為結構新穎的二萜類二聚體，活性好，可作為抗HBV藥物的先導性化合物，有良好的應用前景。
【IPC分類】C07D493-10, A61P31-20
【公開號】CN104804014
【申請號】CN201510139862
【發明人】江志勇, 黃相中, 周俊, 黃超冠, 胡秋芬, 高雪梅, 楊光宇, 李干鵬
【申請人】云南民族大學
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年3月27日