本實用(yong)新(xin)型涉及一(yi)(yi)種試劑(ji)盒，特別涉及一(yi)(yi)種建立穩定表達SpCas9細胞株(zhu)的試劑(ji)盒。

背景技術：

構建(jian)穩定(ding)細(xi)(xi)胞(bao)株是將外(wai)源(yuan)DNA克(ke)隆到具有某種抗(kang)性的(de)(de)載體上，載體被轉(zhuan)染到宿(su)主細(xi)(xi)胞(bao)并整合到宿(su)主染色體中，用載體中所(suo)含的(de)(de)抗(kang)性標志(zhi)進行篩選，建(jian)立穩定(ding)表達SpCas9細(xi)(xi)胞(bao)株的(de)(de)工程是需要很多(duo)的(de)(de)試(shi)驗。為此(ci)，我(wo)們(men)提出一(yi)種建(jian)立穩定(ding)表達SpCas9細(xi)(xi)胞(bao)株的(de)(de)試(shi)劑盒。

技術實現要素：

本實用(yong)新型的(de)主要目的(de)在于提供(gong)一(yi)種建立穩定表(biao)(biao)達(da)SpCas9細胞(bao)株的(de)試劑盒，通過轉座子系統將(jiang)SpCas9的(de)表(biao)(biao)達(da)片段插入(ru)哺乳動物基因組，并通過熒(ying)光篩選標(biao)記mCherry得到穩定表(biao)(biao)達(da)SpCas9的(de)細胞(bao)株。該系統安(an)全，簡便，高效，適合大多數實驗室(shi)的(de)應用(yong)，能很好滿足科學、醫療工作需要，可以(yi)有效解決背景技術中的(de)問題(ti)。

為實現上述目(mu)的(de)，本實用新型采取的(de)技(ji)術方案為：

一(yi)種建立穩定表(biao)(biao)達(da)SpCas9細胞株的試劑盒(he)，包括盒(he)體(ti)，所(suo)(suo)述(shu)盒(he)體(ti)內(nei)部設置有(you)襯(chen)墊，所(suo)(suo)述(shu)的襯(chen)墊上(shang)設有(you)容器孔，分別盛裝(zhuang)SpCas9表(biao)(biao)達(da)質粒(li)pT-SpCas9-mCherry，轉座酶表(biao)(biao)達(da)質粒(li)SB100X，轉染試劑，Opti-MEM培(pei)(pei)養(yang)基(ji)和(he)去(qu)離(li)子(zi)水，所(suo)(suo)述(shu)SpCas9表(biao)(biao)達(da)質粒(li)pT-SpCas9-mCherry，轉座酶表(biao)(biao)達(da)質粒(li)SB100X，轉染試劑，Opti-MEM培(pei)(pei)養(yang)基(ji)和(he)去(qu)離(li)子(zi)水的中間放(fang)置著(zhu)(zhu)容器控(kong)(kong)制臺(tai)，所(suo)(suo)述(shu)容器控(kong)(kong)制臺(tai)上(shang)設置著(zhu)(zhu)控(kong)(kong)制開(kai)關并(bing)通過導線連接著(zhu)(zhu)。

進一步地，所述容器控制臺的下(xia)方設置(zhi)有試劑(ji)工作(zuo)臺，所述試劑(ji)工作(zuo)臺的下(xia)端連(lian)接(jie)著驅(qu)動(dong)盤(pan)，所述驅(qu)動(dong)盤(pan)的輸入端連(lian)接(jie)著電動(dong)機(ji)。

進一(yi)步地，所述試(shi)(shi)(shi)劑(ji)工作臺一(yi)側剪切著(zhu)試(shi)(shi)(shi)驗物品輸送(song)臺，所述試(shi)(shi)(shi)驗物品輸送(song)臺的另(ling)一(yi)側設(she)置有放置口。

進一(yi)步地，所述SpCas9表達質粒pT-SpCas9-mCherry，轉座酶表達質粒SB100X，轉染(ran)試劑，Opti-MEM培養基和去(qu)離子水的下方各設置一(yi)個點滴針，所述點滴針的開關連(lian)接著控制開關。

進一(yi)步(bu)地，所述(shu)試劑工作臺的外側設置觀(guan)測窗口(kou)，所述(shu)觀(guan)測窗口(kou)是(shi)采(cai)用(yong)透明玻璃制成。

與現有技術相(xiang)比，本實用新型具有如(ru)下有益效果(guo)：本試(shi)劑盒通過(guo)轉(zhuan)座(zuo)子系(xi)統(tong)將SpCas9的(de)表(biao)達片段插入(ru)哺乳動(dong)物基因組，并通過(guo)熒光篩選(xuan)標記mCherry得(de)到穩定表(biao)達SpCas9的(de)細胞株(zhu)。該(gai)系(xi)統(tong)安全(quan)，簡便，高效，適合大多數實驗室的(de)應(ying)用，能很好滿足科學、醫療工作需要。

【附圖說明】

圖1為本實用新型醫(yi)療用制(zhi)藥攪拌設備的整體結構示意圖。

圖2為本實用(yong)新型醫療用(yong)制藥攪拌設備的內部結構俯(fu)視圖。

圖中：1、盒體；2、襯(chen)墊(dian)；3、SpCas9表(biao)達(da)質粒pT-SpCas9-mCherry；4、轉座酶表(biao)達(da)質粒SB100X；5、轉染試(shi)劑；6、Opti-MEM培養(yang)基；7、去離(li)子水；8、控制開關；9、容(rong)器(qi)控制臺；10、點滴針；11、放置口；12、試(shi)驗物品輸送臺；13、試(shi)劑工作臺；14、電動機；15、驅(qu)動盤(pan)；16、觀測窗口。

【具體實施方式】

為使本(ben)實(shi)用新型實(shi)現的技術(shu)手段、創作特征(zheng)、達(da)成目的與功效易(yi)于(yu)明白了解，下面(mian)結(jie)合具體實(shi)施方式，進一步闡述本(ben)實(shi)用新型。

如圖(tu)1-2所示，一種建立穩定(ding)表達(da)SpCas9細胞株(zhu)的試(shi)劑盒(he)(he)(he)，包括(kuo)盒(he)(he)(he)體1，所述(shu)盒(he)(he)(he)體1內部(bu)設(she)置有襯墊(dian)2，所述(shu)的襯墊(dian)2上設(she)有容(rong)器(qi)孔，分別盛裝(zhuang)SpCas9表達(da)質粒(li)pT-SpCas9-mCherry3，轉(zhuan)(zhuan)座酶(mei)(mei)表達(da)質粒(li)SB100X4，轉(zhuan)(zhuan)染試(shi)劑5，Opti-MEM培養(yang)基6和(he)(he)去離子(zi)水7，所述(shu)SpCas9表達(da)質粒(li)pT-SpCas9-mCherry3，轉(zhuan)(zhuan)座酶(mei)(mei)表達(da)質粒(li)SB100X4，轉(zhuan)(zhuan)染試(shi)劑5，Opti-MEM培養(yang)基6和(he)(he)去離子(zi)水7的中(zhong)間(jian)放(fang)置著容(rong)器(qi)控制(zhi)臺9，所述(shu)容(rong)器(qi)控制(zhi)臺9上設(she)置著控制(zhi)開關(guan)8并通(tong)過導(dao)線(xian)連接著。

本實(shi)用(yong)新型(xing)建立穩定表(biao)(biao)(biao)達SpCas9細(xi)胞株的試劑(ji)盒，通過轉座(zuo)子系(xi)統將SpCas9的表(biao)(biao)(biao)達片段插入哺乳動物(wu)基因(yin)組，并通過熒(ying)光篩選標記mCherry得到穩定表(biao)(biao)(biao)達SpCas9的細(xi)胞株。該系(xi)統安全，簡便，高效(xiao)，適合大多數實(shi)驗室(shi)的應用(yong)，能很好滿足科學、醫療工作需(xu)要。

其中，所述容器控(kong)制臺9的下方設置有試(shi)劑(ji)(ji)工(gong)作(zuo)臺13，所述試(shi)劑(ji)(ji)工(gong)作(zuo)臺13的下端(duan)連(lian)(lian)接(jie)著驅(qu)動盤(pan)15，所述驅(qu)動盤(pan)15的輸入(ru)端(duan)連(lian)(lian)接(jie)著電動機14，在試(shi)驗(yan)過程中可(ke)以旋轉試(shi)劑(ji)(ji)工(gong)作(zuo)臺13，對試(shi)驗(yan)有很(hen)大的幫助。

其中，所(suo)述試劑工(gong)作臺(tai)13一側剪切著(zhu)試驗物品輸送臺(tai)12，所(suo)述試驗物品輸送臺(tai)12的另(ling)一側設置有放置口11，來把(ba)試驗的材(cai)料放進(jin)來。

其中，所述SpCas9表(biao)達(da)質(zhi)粒(li)(li)pT-SpCas9-mCherry3，轉座酶表(biao)達(da)質(zhi)粒(li)(li)SB100X4，轉染(ran)試劑5，Opti-MEM培養基6和去(qu)離子(zi)水(shui)7的(de)下方各設置一(yi)個點(dian)滴(di)針(zhen)10，所述點(dian)滴(di)針(zhen)10的(de)開關連(lian)接(jie)著(zhu)控制(zhi)開關8，使(shi)得在試驗過程中隨時控制(zhi)點(dian)滴(di)針(zhen)10來點(dian)滴(di)容器內的(de)藥物(wu)。

其中(zhong)，所述試(shi)劑(ji)工(gong)作臺13的外側設置觀測(ce)窗(chuang)口16，所述觀測(ce)窗(chuang)口16是采用透明玻璃制成，在試(shi)驗(yan)過程(cheng)中(zhong)清楚看(kan)到試(shi)驗(yan)所發(fa)生的變化。

以上顯(xian)示和描(miao)述(shu)了本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)的(de)(de)基本原(yuan)理和主要(yao)特征和本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)的(de)(de)優(you)點(dian)。本行業的(de)(de)技術(shu)人員應該(gai)了解，本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)不(bu)受上述(shu)實(shi)(shi)施(shi)例(li)的(de)(de)限制，上述(shu)實(shi)(shi)施(shi)例(li)和說(shuo)明書(shu)中(zhong)描(miao)述(shu)的(de)(de)只是說(shuo)明本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)的(de)(de)原(yuan)理，在不(bu)脫離(li)本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)精神和范圍(wei)(wei)的(de)(de)前(qian)提下，本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)還會有各種變化和改進，這些(xie)變化和改進都落入要(yao)求保護的(de)(de)本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)范圍(wei)(wei)內。本實(shi)(shi)用(yong)(yong)新(xin)型(xing)(xing)要(yao)求保護范圍(wei)(wei)由所附的(de)(de)權利要(yao)求書(shu)及(ji)其等效(xiao)物界定。