一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法
【專利摘要】一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，屬于植物提純方法【技術領域】。其包括以下工藝步驟：1）提取：取老鴉柿枝或根，粉碎，用10～15倍量的溶劑提取，提取液回收溶劑，得粗提物；2）分離：將粗提物過硅膠或氧化鋁柱層析，用石油醚-乙酸乙酯或正己烷-氯仿梯度洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得粗羽扇豆醇；3）純化：采用無水乙醇或乙酸乙酯對粗羽扇豆醇進行反復重結晶，得純羽扇豆醇。本發明所采用的老鴉柿野生植物資源豐富，本發明所采用的提取純化方法過程簡單，操作簡便，適合大規模制備羽扇豆醇，本發明所得到的羽扇豆醇采用高效液相色譜法（HPLC法）進行測定，純度均大于95%。
【專利說明】—種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于植物提純方法【技術領域】，具體涉及一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法。
【背景技術】[0002]羽扇豆醇是一種三萜類化合物，具有抗腫瘤、降壓、抗炎等多種生物活性。專利CN101692822A “羽扇豆醇的新用途”介紹了羽扇豆醇作為植物源農藥用于殺螨劑。老鴉柿(Diospyros rhombifolia Hemsl.)為柿科柿屬落葉小喬木或灌木,另Il名山柿子、野山柿、野柿子，分布于中國浙江、江蘇、安徽、江西、福建等地。野生資源豐富。
[0003]本發明人研究發現老鴉柿中羽扇豆醇的含量較大，約為0.2~0.4%。專利CN1793161A “樺木屬植物中提取羽扇豆醇的方法”公開了一種從樺木屬植物中提取純化羽扇豆醇的方法。樺木屬植物野生資源較少，本發明提供了一種新的且野生資源豐富的植物來源用于提取純化羽扇豆醇。
【發明內容】
[0004]針對現有技術存在的問題，本發明的目的在于設計提供一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法的技術方案。
[0005]所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于包括以下工藝步驟:
1)提取:取老鴉柿枝或根，粉碎，用10~15倍量的溶劑提取，提取液回收溶劑，得粗提
物；
2)分離:將粗提物過硅膠或氧化鋁柱層析，用石油醚-乙酸乙酯或正己烷-氯仿梯度洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得粗羽扇豆醇；
3)純化:采用無水乙醇或乙酸乙酯對粗羽扇豆醇進行反復重結晶，得純羽扇豆醇。
[0006]所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟I)中溶劑為95%乙醇、甲醇、苯或氯仿。
[0007]所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟I)中提取為回流提取，提取兩次，第一次提取2小時，第二次提取I小時。
[0008]所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟2)中所述的石油醚-乙酸乙酯的洗脫比例為10:0、9:1、8:2，洗脫體積為柱體積的3~5倍，收集石油醚-乙酸乙酯8:2洗脫部分；正己烷-氯仿的洗脫比例為9:1、7:3、5:5，洗脫體積為柱體積的3~5倍，收集正己烷-氯仿5:5洗脫部分。
[0009]所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟3)中反復重結晶的次數為2~3次。
[0010]上述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，設計合理，本發明所采用的老鴉柿野生植物資源豐富，本發明所采用的提取純化方法過程簡單，操作簡便，適合大規模制備羽扇豆醇，本發明所得到的羽扇豆醇采用高效液相色譜法(HPLC法)進行測定，純度均大于 95%。
【具體實施方式】
[0011]以下結合實施例來進一步說明本發明，但本發明并不僅限于此。
[0012]實施例1:
取老鴉柿根lKg，粉碎，第一次用15倍量95%乙醇回流提取2小時，第二次用10倍量95%乙醇提取I小時；合并兩次提取液，減壓回收溶劑，得粗提物；將粗提物過硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯(10:0，9:1, 8:2)進行梯度洗脫，前兩個梯度洗脫3倍量柱體積，最后一個梯度洗脫5倍量柱體積，分別回收洗脫液，得洗脫物；將最后一個梯度的洗脫物用適量無水乙醇重結晶3次，得羽扇豆醇純品2.3g (含量97.1%)。
[0013]實施例2:
取老鴉柿根lKg，粉碎，第一次用15倍量甲醇回流提取2小時，第二次用10倍量甲醇提取I小時；合并兩次提取液，減壓回收溶劑，得粗提物；將粗提物過硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯(10:0，9:1, 8:2)進行梯度洗脫，前兩個梯度洗脫3倍量柱體積，最后一個梯度洗脫5倍量柱體積，分別回收洗脫液，得洗脫物；將最后一個梯度的洗脫物用適量無水乙醇重結晶3次，得羽扇豆醇純品2.1g (含量98.3%)。
[0014]實施例3:
取老鴉柿根lKg，粉碎， 第一次用15倍量苯回流提取2小時，第二次用10倍量苯提取I小時；合并兩次提取液，減壓回收溶劑，得粗提物；將粗提物過硅膠柱層析，用正己烷-氯仿(9:1，7:3, 5:5)進行梯度洗脫，前兩個梯度洗脫4倍量柱體積，最后一個梯度洗脫5倍量柱體積，分別回收洗脫液，得洗脫物。將最后一個梯度的洗脫物用適量乙酸乙酯重結晶2次，得羽扇豆醇純品2.6g (含量96.7%)。
[0015]實施例4:
取老鴉柿根lKg，粉碎，第一次用15倍量氯仿回流提取2小時，第二次用10倍量氯仿提取I小時；合并兩次提取液，減壓回收溶劑，得粗提物；將粗提物過硅膠柱層析，用正己烷-氯仿(9:1，7:3, 5:5)進行梯度洗脫，前兩個梯度洗脫4倍量柱體積，最后一個梯度洗脫5倍量柱體積，分別回收洗脫液，得洗脫物。將最后一個梯度的洗脫物用適量乙酸乙酯重結晶2次，得羽扇豆醇純品2.1g (含量97.4%)。
[0016]上述實施例中羽扇豆醇的純度采用高效液相色譜法(HPLC法)進行測定，色譜條件:色譜柱為Kromasil C18 (250X4.6mm, 5 y m)，流動相為甲醇-水(99:1)，流速為Iml ? mirT1,檢測波長為2IOnm,柱溫為30。。。
【權利要求】
1.一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于包括以下工藝步驟: 1)提取:取老鴉柿枝或根，粉碎，用10~15倍量的溶劑提取，提取液回收溶劑，得粗提物； 2)分離:將粗提物過硅膠或氧化鋁柱層析，用石油醚-乙酸乙酯或正己烷-氯仿梯度洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得粗羽扇豆醇； 3)純化:采用無水乙醇或乙酸乙酯對粗羽扇豆醇進行反復重結晶，得純羽扇豆醇。
2.如權利要求1所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟I)中溶劑為95%乙醇、甲醇、苯或氯仿。
3.如權利要求1所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟I)中提取為回流提取，提取兩次，第一次提取2小時，第二次提取I小時。
4.如權利要求1所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟2)中所述的石油醚-乙酸乙酯的洗脫比例為10:0、9:1、8:2，洗脫體積為柱體積的3~5倍，收集石油醚-乙酸乙酯8:2洗脫部分；正己烷-氯仿的洗脫比例為9:1、7:3、5:5，洗脫體積為柱體積的3~5倍，收集正己烷-氯仿5:5洗脫部分。
5.如權利要求1所述的一種從老鴉柿中分離制備羽扇豆醇的方法，其特征在于所述的步驟3)中反復重結晶的 次數為2~3次。
【文檔編號】C07J63/00GK103626829SQ201310619326
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月29日 優先權日:2013年11月29日
【發明者】張永勇, 孫駿威, 潘家榮 申請人:中國計量學院