專利名稱：沙門氏菌分離過程中銅綠假單孢多克隆抗體的應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于沙門氏菌的分離鑒定范圍。
背景技術：
沙門氏菌是當前公共衛生上重要的腸道致病菌之一，同時也是引起動物腸道傳染病的致病菌之一。目前對于沙門氏菌的檢測方法多使用常規的細菌分離鑒定，即先采用非選擇性增菌、選擇性增菌、分離和鑒定等步驟。通常在分離過程中會出現干擾菌，銅綠假單胞菌即是其中之一，而且出現的幾率較大。這些干擾菌給后續的鑒定工作帶來不必要的損失。本發明專利就是通過將銅綠假單胞菌的多克隆抗體添加到選擇性增菌液中，以消除銅 綠假單胞菌造成的干擾。

發明內容
本發明專利首先通過利用銅綠假單胞菌菌體抗原作為疫苗免疫新西蘭大白兔，然后采血分離血清，用飽和硫酸銨法純化兔的多克隆抗體。以制備的多克隆抗體作為抑制劑添加到沙門氏菌的選擇性增菌液中從而達到抑制銅綠假單胞菌的目的。
具體實施例方式(I)銅綠假單胞菌抗體的制備與純化將銅綠假單胞菌接種于營養瓊脂，37°C 12h后收取菌苔，溶于O. 85%的NaCl中。配置成2mg/mL的菌液，然后加入等體積的IFA(不完全弗氏佐劑)乳化后免疫新西蘭大白兔，每只Img的抗原劑量。2周后同樣劑量免疫兔子，然后于2周后進行加強免疫，劑量為初免的一半。加強免疫后I周采血，并用飽和硫酸銨法純化抗體。(2)抗體的添加將適量抗體添加于沙門氏菌的增菌液中，37°C 12h后按常規方法分離沙門氏菌。
權利要求
1.本發明專利應用于沙門氏菌的分離，包括醫學臨床、衛生檢疫、獸醫衛生中的沙門氏菌分離。該專利的技術特征是將銅綠假單孢菌的多克隆抗體添加到沙門氏菌分離過程中的選擇性增菌液中，這些增菌液包括亞烯酸鹽胱氨酸肉湯、氯化鎂孔雀綠肉湯、RVS肉湯(Rappaport-Vassiliadis medium with soya)和 MKTTn 肉湯(Muller-Kauffmanntetrathionate novobiocin broth)。
該專利要求保護的范圍將銅綠假單孢菌多克隆抗體添加到沙門氏菌分離過程中。
全文摘要
本發明涉及沙門氏菌分離過程中銅綠假單孢多克隆抗體的應用。本發明將多克隆抗體應用于沙門氏菌的檢測，具體的是首先制備沙門氏菌的分離過程中的干擾菌-銅綠假單胞菌的多克隆抗體，經飽和硫酸銨法純化后，將純化的抗體添加到沙門氏菌分離過程中的選擇性增菌肉湯中，經37℃12h作用后，再進行隨后的分離培養。
文檔編號C07K16/06GK102732441SQ20111010614
公開日2012年10月17日 申請日期2011年4月12日 優先權日2011年4月12日
發明者盧瑜, 吳振興, 孫敏, 孫濤, 岳志芹, 徐彪, 朱來華, 林超, 梁成珠, 王群, 肖西志, 臧偉, 鄧明俊, 鄭小龍, 高宏偉 申請人:山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心