專利名稱：：在受試者中抑制免疫復合物形成的方法
技術領域：
：本發明涉及對免疫復合物形成的抑制，更具體地，涉及通過多肽和其它小分子抑制免疫復合物形成。背景當抗原特異性結合于抗體時，促發體液免疫應答。抗體分子與抗原的結合形成小的、相對可溶的免疫復合物。抗原可以是外來物質，諸如病毒或細菌多肽，或者可以是“自身抗原”，諸如通常在人體中發現的多肽。免疫系統通常將外來物質與自身抗原區別開來。然而，當這一系統破壞時，以致免疫系統攻擊機體并且破壞組織或器官系統，好像它們是外來物質一樣，可以發生“自體免疫”疾病。這一過程的實例包括類風濕性關節炎(RA)中關節的毀壞以及在狼瘡性腎炎中腎臟的毀壞。更大的免疫復合物比小的、更加可溶的免疫復合物更有致病性。由于抗體分子與抗原的相互作用和抗體分子之間的相互作用引起大的、相對不溶的免疫復合物的形成。這樣的免疫復合物還可以由于在沒有抗原存在時抗體之間的相互作用形成。抗體可以通過包被病毒或細菌來預防感染，但是它們本身是相對無害的。相反，當抗體與抗原結合并且由此導致的免疫復合物結合于機體中某些效應器分子時，可以發生器官特異性組織損害。效應器分子被如此命名是由于它們實現免疫復合物的致病作用。通過抑制大的、不溶的免疫復合物的形成，或者通過抑制免疫復合物與效應器分子的結合，可以預防免疫復合物的組織損害作用。概述本發明基于這樣的發現具有基于在SEQIDNO1中提出的氨基酸序列的多肽可以特異性并且高親和力地結合于免疫球蛋白分子的CH2-CH3結構域，因此抑制含有抗體和抗原的不溶性免疫復合物的形成，并且防止所述復合物與效應器分子的結合。本發明提供這樣的多肽，以及應用所述多肽和化合物抑制免疫復合物的形成和治療諸如類風濕性關節炎的自體免疫疾病的方法。一方面，本發明著重描述用于抑制受試者中免疫復合物形成的方法。所述方法可以包括給受試者施用含有純化的多肽的組合物，其中所述多肽包括氨基酸序列Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO8)，并且其中Xaa為精氨酸(Arg)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)或苯丙氨酸(Phe)。免疫復合物形成可以與類風濕性關節炎相關。所述方法還包括對于類風濕性關節炎的臨床或分子特征對受試者進行監測的步驟。所述多肽還可以含有末端穩定基團。末端穩定基團可以是在多肽的氨基端(N端)或羧基端(C端)，或者兩端，并且可以是具有氨基酸序列Xaa-Pro-Pro的三肽，其中Xaa是任何氨基酸(例如，丙氨酸(Ala))。末端穩定基團可以是小的穩定蛋白(例如，4螺旋束蛋白，諸如Rop)。所述多肽還可以包括在氨基酸序列的N端添加的氨基酸。所添加的氨基酸可以是任何除了Cys的氨基酸(例如，N端氨基酸可以是Asp)。所述多肽可以具有約10-約50個氨基酸的長度。多肽可以包括氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO2)。多肽可以包括氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Asp-Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO32)。本發明還著重描述用于治療類風濕性關節炎的方法。所述方法可以包括識別患有類風濕性關節炎或處于形成類風濕性關節炎的危險的個體，并且給這樣的個體施用含有純化的多肽的組合物，所述多肽含有氨基酸序列Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO8)，其中Xaa為精氨酸(Arg)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)或苯丙氨酸(Phe)。所述方法還包括對于類風濕性關節炎的臨床或分子特征對受試者進行監測的步驟。所述多肽還可以在氨基酸序列的N端包括天冬氨酸(Asp)。多肽還可以包括末端穩定基團。所述末端穩定基團可以是在多肽的N端或C端，或者兩端，并且可以是具有氨基酸序列Xaa-Pro-Pro的三肽，其中Xaa是任何氨基酸(例如，丙氨酸(Ala))。末端穩定基團可以是小的穩定蛋白(例如，4螺旋束蛋白，諸如Rop)。所述多肽可以具有約10-約50個氨基酸的長度。多肽可以包括氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO2)。多肽可以包括氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Asp-Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO32)。在另一方面，本發明著重描述含有氨基酸序列Xaa1-Pro-Pro-Cys-Ala-Xaa2-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO12)的純化的多肽，其中Xaa1為任何氨基酸(例如，丙氨酸(Ala))，和Xaa2為精氨酸(Arg)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)或苯丙氨酸(Phe)。本發明還著重描述含有所述多肽的組合物。另一方面，本發明著重描述含有氨基酸序列Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO9)的純化的多肽。所述純化的多肽可以具有不多于約20個氨基酸的長度。純化的多肽還可以包括末端穩定基團。所述末端穩定基團可以是在多肽的N端或C端，或者兩端，并且可以是具有氨基酸序列Xaa-Pro-Pro的三肽，其中Xaa是任何氨基酸(例如，丙氨酸(Ala))。末端穩定基團可以是小的穩定蛋白(例如，4螺旋束蛋白，諸如Rop)。所述純化的多肽還可以在氨基酸序列的N端包括天冬氨酸(Asp)。本發明還著重描述含有所述純化的多肽的組合物。在另一方面，本發明著重描述純化的多肽，其氨基酸序列由下列序列組成(Xaa1)n-Xaa2-Cys-Ala-Xaa3-His-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Leu-Val-Trp-Cys-(Xaa7)n(SEQIDNO1)，其中Xaa1可以不存在或為任何氨基酸，Xaa2為苯丙氨酸(Phe)或精氨酸(Arg)，Xaa3為任何氨基酸，Xaa4為甘氨酸(Gly)或丙氨酸(Ala)，Xaa5為谷氨酸(Glu)或丙氨酸(Ala)，以及Xaa6為任何非芳族氨基酸。在另一方面，本發明著重描述純化的多肽，其氨基酸序列由下列序列組成(Xaa1)n-Cys-Ala-Xaa2-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-(Xaa3)n(SEQIDNO35)，其中Xaa1為任何氨基酸，Xaa2為精氨酸(Arg)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)或苯丙氨酸(Phe)，Xaa3為任何氨基酸，以及n為0、1、2、3、4或5。在另一方面，本發明著重描述純化的多肽，其氨基酸序列由下列序列組成(Xaa1)n-Cys-Ala-Xaa2-His-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Leu-Val-Trp-Cys-Xaa6-(Xaa7)n(SEQIDNO34)，其中Xaa1為任何氨基酸，Xaa2為苯丙氨酸(Phe)或精氨酸(Arg)，Xaa3為任何氨基酸，Xaa4為甘氨酸(Gly)或丙氨酸(Ala)，Xaa5為谷氨酸(Glu)或丙氨酸(Ala)，Xaa6為任何非芳族氨基酸，Xaa7為任何氨基酸，以及n為0、1、2、3、4或5。除非另外定義，本文所用的全部技術和科學術語具有與本發明所屬于的領域中的一名普通技術人員常規理解的相同的意思。盡管與本文所描述的那些相似或等同的方法和材料可以用于實施本發明，下文還是描述適當的方法和材料。本文所提及的所有公布、專利申請、專利和其它參考文獻通過參考加入本文。出現矛盾時，本詳述，包括定義，將會控制。另外，所述材料、方法以及實例只是舉例說明，并不意欲成為限制。本發明的1個或多個實施方案的詳情在下文的附圖和描述中闡述。本發明的其它特征、目的和優點將通過描述和附圖、以及通過權利要求而明顯起來。附圖描述圖1A和1B是計算機產生的IgG分子的CH2-CH3裂口(cleft)的三維結構模型，其顯示當IgG處于Fc-介導的免疫復合物中或為非免疫復合的時，所述裂口的構象，如圖所顯示的那樣。圖2A是對于通過CH2-CH3裂口結合于肽配體的IgG分子的原子坐標列表。圖2B對于通過CH2-CH3裂口結合于類風濕因子的IgG分子的原子坐標列表。圖3是計算機產生的結合于多肽的IgGFcCH2-CH3裂口的三維結構模型，其中所述多肽具有在SEQIDNO5中提出的氨基酸序列。圖4A-4C是顯示小鼠關節炎指數(arthriticindices)的線圖，所述小鼠如圖所示那樣患有或沒患有膠原誘導的關節炎和治療或未治療。圖4A顯示用指示量的ID14多肽(SEQIDNO14)治療的小鼠的結果。圖4B顯示用指示量的ID2多肽(SEQIDNO2)治療的小鼠的結果。圖4C顯示用指示量的潑尼松龍或REMICADE治療的小鼠的結果。詳述本發明提供能夠與免疫球蛋白分子的CH2-CH3裂口相互作用的多肽和其它化合物，以致阻滯免疫球蛋白與其它分子的相互作用(例如，效應器或其它免疫球蛋白)。還提供用于識別這樣的多肽和其它化合物的方法，以及含有所述多肽和化合物的組合物和產品。另外，本發明提供關于應用所述多肽和化合物抑制免疫復合物形成和治療諸如，例如類風濕性關節炎的疾病的方法。這些在下述部分描述。免疫球蛋白免疫球蛋白組成在血漿和其它體液中發現的一類蛋白，其表現出抗體活性并且以高度的特異性結合于其它分子(例如，抗原和其它細胞表面受體)。基于其結構和生物活性，免疫球蛋白可以分成5類IgM，IgG，IgA，IgD，和IgE。IgG是機體中最豐富的抗體種類；這一分子呈現扭曲的“Y”型構型。除了IgMs之外，免疫球蛋白主要由4條肽鏈組成，所述肽鏈通過一些鏈內和鏈間二硫鍵連接。例如，IgGs由2條多肽重鏈(H鏈)和2條多肽輕鏈(L鏈)組成，其通過二硫鍵和非共價鍵偶聯形成具有大約160,000道爾頓的分子量的蛋白分子。一般IgG分子含有大約4.5個鏈間二硫鍵和大約12個鏈內二硫鍵(Frangione和Milstein(1968)J.Mol.Biol.33893-906)。免疫球蛋白分子的輕鏈和重鏈由恒定區和可變區組成(參見，例如，Padlan(1994)Mol.Immunol.31169-217)。例如，IgG1分子的每一條輕鏈含有可變結構域(VL)和恒定結構域(CL)。每一條重鏈具有4個結構域N端可變結構域(VH)，接著是3個恒定結構域(CH1，CH2，和C端CH3)。鉸鏈區對應在CH1和CH2結構域之間的柔性結合。用木瓜蛋白酶消化完整的IgG分子導致在鉸鏈區的蛋白水解斷裂，并且產生含有CH2和CH3結構域的Fc片段，和2條相同的Fab片段，其中每一條Fab片段含有CH1、CL、VH和VL結構域。Fc片段具有補體和組織結合活性，而Fab片段具有抗原結合活性。免疫球蛋白分子可以通過可變區與其它多肽相互作用。大多數的抗原結合，例如，通過Fab片段的VL/VH區發生。由于免疫學教義闡述用于Fc受體(FcR)的結合位點發現于IgG分子的鉸鏈區(參見，例如，Raghavan和Bjorkman(1996)Annu.Rev.Dev.Biol.12181-200)，所以還認為鉸鏈區是重要的。然而，更近的證據表明當免疫球蛋白是單體(即，非免疫復合的)時，FcR主要與鉸鏈區相互作用。這樣的相互作用典型地包括Ig分子的位置234-237的氨基酸(Wiens等.(2000)J.Immunol.1645313-5318)。免疫球蛋白分子還可以通過CH2-CH3結構域內的裂口與其它多肽相互作用。“CH2-CH3裂口”典型地包括-CH2結構域內位置251-255的氨基酸和-CH3結構域內位置424-436的氨基酸。如此處所用，編號方式涉及完整的IgG分子，如在Kabat等中那樣(SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版，PublicHealthService，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices，Bethesda，MA)。本領域的那些普通技術人員可以容易地確定其它免疫球蛋白種類中對應的氨基酸。CH2-CH3裂口是不尋常的，原因在于其特征在于高度的溶劑可及性和突出的疏水特征，這表明暴露的疏水表面的包埋是在這一位點結合的重要驅動力。一旦抗原結合，在IgGCH2-CH3裂口發生三維變化，這允許某些殘基(例如，位置435的組氨酸)變成暴露的并且可用于結合。使用對人IgG的Fc區的構象變化敏感的單克隆抗體，在研究中發現在抗原結合時發生的三維結構變化的直接證據。5個IgG表位通過抗原結合而改變2個在鉸鏈區之內和3個在CH2-CH3裂口內(Girkontraite等.(1996)CancerBiother.Radiopharm.1187-96)。因此，抗原結合對于確定免疫球蛋白是否通過鉸鏈區或FcCH2-CH3裂口區結合于其它分子可以是重要的。Fc區可以結合于許多的效應器分子和其它蛋白，其包括下列(1)FcRn-新生的Fc受體決定抗體分子在基本循環中的半衰期(Leach等，(1996)J.Immunol.1573317-3322；Gheti和Ward(2000)Ann.Rev.Immunol.18739-766)。由于自體抗體的縮短的半衰期，遺傳上缺少FcRn的小鼠免于受到致病性自體抗體的有害作用(Liu等.(1997)J.Exp.Med.186777-783)。結合免疫復合物或與致病性自體抗體的FcRn的抑制劑將有效用于治療包括致病性自體抗體和/或免疫復合物的疾病。(2)FcR-細胞Fc受體提供在體液免疫應答和細胞介導的效應器系統之間的聯系(Hamano等.(2000)J.Immunol.1646113-6119；Coxon等.(2001)Immunity14693-704；Fossati等.(2001)Eur.J.Clin.Invest.31821-831)。Fc...受體對IgG分子特異，并且包括Fc...RI、Fc...RIIa、Fc...RIIb和Fc...RIII。這些同種型(isotypes)以不同的親和力與單體的和免疫復合的IgG結合。(3)RF-類風濕因子是與其它免疫復合的免疫球蛋白分子結合的免疫球蛋白，并且其可以加劇類風濕性關節炎的動物模型中的關節炎(參見，例如，Ezaki等.(1996)Clin.Exp.Immunol.104474-482)。(4)組蛋白-組蛋白是非常堿性的、正電荷的蛋白，其在腎臟中結合于DNA和負電荷的基膜。在狼瘡性腎炎中，組蛋白首先結合于腎臟，然后免疫復合物與這些腎-結合組蛋白結合(Gussin等.(2000)Clin.Immunol.96150-161)。(5)MBP-髓鞘堿性蛋白是多發性硬化病中的初級自體免疫靶點(MS；Sindic等.(1980)Clin.Exp.Immunol.411-7；Poston(1984)Lancet11268-1271)。(6)Clq-經典補體路徑的第一個成分是Cl，其作為3個蛋白，Clq、Clr和C1s的復合體存在于血清中。當Clq結合于抗原結合的IgG或IgM的Fc區時，激活經典補體路徑。盡管Clq與單個Fc區的結合是微弱的，Clq仍可以形成與Fc區的簇的牢固鍵合。在這一點上Cl變得具有蛋白水解活性。通過免疫球蛋白Fc區與其它抗體或其它因子(例如，上文所描述的那些)之間的相互作用的免疫復合物的形成在本文稱為“Fc-介導的免疫復合物形成(Fc-mediatedinmmunecomplexformation)”或者“免疫復合物的Fc-介導的形成(theFc-mediatedformationofanimmunecomplex)”。含有這樣的相互作用的免疫復合物被稱為“Fc-介導的免疫復合物”。Fc-介導的免疫復合物可以包括帶有或不帶有結合的抗原的免疫球蛋白分子，和典型地包括CH2-CH3裂口-特異性配體，其具有的對于免疫復合的抗體的親和力比對于單體抗體的更高。可以由于Fc-介導的免疫復合物形成引起的大的、通常不溶的復合物典型地參與疾病的病理學過程，諸如，例如RA和狼瘡性腎炎。純化的多肽如此處所用，“多肽”是氨基酸殘基的任何鏈，不管翻譯后修飾(例如，磷酸化或糖基化)。本發明的多肽典型地為10-50個氨基酸的長度(例如，長度為10，11，12，13，14，15，20，25，30，35，40，45或50個氨基酸)。長度為10-20個氨基酸的本發明的多肽(例如，長度為10，11，12，13，14，15，16，17，18，19或20個氨基酸)是特別有效的。本文所提供的多肽的氨基酸序列是稍微限定的，但是可以有一些變化。例如，本文所提供的多肽典型地包括氨基酸序列Xaa1-Cys-Ala-Xaa2-His-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Leu-Val-Trp-Cys-Xaa6(SEQIDNO1)，其中由Xaan表示的殘基可以表現出可變性。例如，Xaa1可以不存在或為任何氨基酸(例如，精氨酸(Arg)或天冬氨酸(Asp))。Xaa2可以為苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)或精氨酸(Arg)。Xaa3可以為任何氨基酸。Xaa4可以為甘氨酸(Gly)或丙氨酸(Ala)，而Xaa5可以為谷氨酸(Glu)或丙氨酸(Ala)。與Xaa1相同，Xaa6也可以不存在或為任何氨基酸。在一個實施方案中，多肽可以包含氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO2)。備選地，多肽可以包含氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO3)或Asp-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO4)。在另一實施方案中，多肽可以包含氨基酸序列Arg-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO5)、Arg-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO6)或Arg-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO7)。另一實施方案中，多肽可以包含氨基酸序列Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys(SFQIDNO8)，其中Xaa可以為苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)或精氨酸(Arg)。例如，本發明提供包含下述氨基酸序列的多肽Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO9)、Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SFQIDNO10)和Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO11)。為了體內應用，可以通過在N-端或C-端、或兩端添加穩定試劑，對本文提供的多肽進行修飾，以促進多肽在體內的存活。這可以用于這樣的情形在細胞吸收前，肽末端趨向于被蛋白酶降解。這樣的穩定基團(本文也稱為封閉試劑)可以包括，但不限于，添加的相關的或不相關的肽序列，其可以附著于多肽的N-端或C-端殘基上(例如，附著于N-端氨基酸的乙酰基或者附著于C-端氨基酸的酰胺基)。應用本領域的普通技術人員熟悉的方法，可以在多肽合成過程中通過化學方法或者通過重組DNA技術獲得這樣的附著。備選地，封閉試劑，諸如焦谷氨酸或其它本領域已知的分子，可以附著于N-端和/或C-端殘基，或者N端氨基或C端的羧基可以用不同的部分(moiety)替代。在另一實施方案中，本文提供的多肽可以被修飾，以致一種穩定的蛋白被安置在N端、在C端、或者兩端。盡管沒有指定關于蛋白錨定的特定大小限制，這樣的穩定基團(還叫作“蛋白錨定(ptoteinanchor)”)典型地為小的穩定的蛋白，諸如，但不限于，硫氧還蛋白、谷胱甘肽磺基轉移酶、麥芽糖結合蛋白、谷胱甘肽還原酶或諸如Rop蛋白的4螺旋束蛋白。適合用作穩定基團的蛋白可以是天然存在的或非天然存在的。這樣的穩定基團可以從內源來源分離，化學或酶促合成，或者應用重組DNA技術生產。特別適合用作穩定基團的蛋白是那些長度相對短并且在溶液中形成非常穩定的結構的蛋白。具有小于約70kD的分子量的蛋白(例如，小于約65、60、50、40、25或12kD)用作穩定基團可以特別有效。例如，人血清白蛋白具有約64kD的分子量；大腸桿菌(E.coli)硫氧還蛋白具有約11.7kD的分子量；大腸桿菌谷胱甘肽磺基轉移酶具有約22.9kD的分子量；ColE1復制子的Rop具有約7.2kD的分子量；以及麥芽糖結合蛋白(不帶其信號序列)具有約40.7kD的分子量。由于小的Rop蛋白比更大的蛋白更不可能干擾所結合的肽的可及性，因此保留其生物活性，所以小的Rop蛋白使其特別適合用作穩定基團。Rop的高度規則的反向平行4螺旋束拓撲結構(二聚化作用后)、緩慢的解折疊動力學(unfoldingkinetics；參見，例如，Betz等.(1997)Biochem.362450-2458)、以及二硫鍵的缺乏也有助于其用作按照本發明的蛋白錨定。具有相似的折疊動力學和/或熱力學穩定性的其它蛋白(例如，Rop具有約71℃的變性中點溫度；Steif等.(1993)Biochem.323867-3876)也可用作穩定基團。具有高度穩定的三級模體(tertiarymotifs)，諸如4螺旋束拓撲結構的肽或蛋白特別有用。在另一實施方案中，諸如脯氨酸、Pro-Pro序列或Xaa-Pro-Pro序列(例如，Ala-Pro-Pro)的穩定基團可以位于多肽的N端(參見，例如，WO00/22112)。例如，多肽可以包含氨基酸序列Xaa1-Pro-Pro-Cys-Ala-Xaa2-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO12)，其中Xaa1為任何氨基酸(例如，丙氨酸(Ala))，和Xaa2為色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)或精氨酸(Arg)，例如，多肽可以包含氨基酸序列Xaa1-Pro-Pro-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO13)，Xaa1-Pro-Pro-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO14)，或Xaa1-Pro-Pro-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO15)。備選地，多肽可以包含氨基酸序列Xaa1-Pro-Pro-Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO16)，Xaa1-Pro-Pro-Asp-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO17)，Xaa1-Pro-Pro-Asp-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO18)，Xaa1-Pro-Pro-Arg-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO19)，Xaa1-Pro-Pro-Arg-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO20)或Xaa1-Pro-Pro-Arg-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO21)。備選地，本文提供的多肽可以具有位于其C端的脯氨酸、Pro-Pro序列或Pro-Pro-Xaa序列(例如，Pro-Pro-Ala)。例如，多肽可以包含氨基酸序列Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO22)，Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO23)，Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO24)，Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO25)，Asp-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO26)，Asp-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO27)，Arg-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO28)，Arg-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO29)或Arg-Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Pro-Pro-Xaa(SEQIDNO30)，其中Xaa可以為任何氨基酸。在一個實施方案中，多肽可以同時具有在其N端的Xaa-Pro-Pro(例如Ala-Pro-Pro)序列和在其C端的Pro-Pro-Xaa(例如，Pro-Pro-Ala)序列。本文提供的多肽還可以包含添加的氨基酸序列，其在SEQIDNO1提出的序列的N端、SEQIDNO1提出的序列的C端，或兩端。例如，多肽可以包含氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Xaa1-Cys-Ala-Xaa2-His-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Leu-Val-Trp-Cys-Xaa6-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO31)，其中Xaan所示的殘基可以表現出可變性。對于SEQIDNO1提出的氨基酸序列，Xaa1可以不存在或為任何氨基酸(例如，精氨酸(Arg)或天冬氨酸(Asp))；Xaa2可以為苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)或精氨酸(Arg)；Xaa3可以為任何氨基酸；Xaa4可以為甘氨酸(Gly)或丙氨酸(Ala)；Xaa5可以為谷氨酸(Glu)或丙氨酸(Ala)；和Xaa6可以不存在或為任何氨基酸。在一個實施方案中，多肽可以包含氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Asp-Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO32)，其中Xaa為精氨酸(Arg)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)或苯丙氨酸(Phe)。例如，多肽可以包含氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO33)。在另一實施方案中，多肽可以由氨基酸序列(Xaa1)n-Xaa2-Cys-Ala-Xaa3-His-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Leu-Val-Trp-Cys-(Xaa7)n(SEQIDNO34)組成，其中Xaa所示的殘基可以表現出可變性，以及n可以是從0-10的整數(例如，0，1，2，3，4，5，6，7，8，9或10)。例如，Xaa1可以為任何氨基酸；Xaa2可以不存在或為任何氨基酸(例如，精氨酸(Arg)或天冬氨酸(Asp))；Xaa3可以為苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)或精氨酸(Arg)；Xaa4可以為任何氨基酸；Xaa5可以為甘氨酸(Gly)或丙氨酸(Ala)；Xaa6可以為谷氨酸(Glu)或丙氨酸(Ala)；Xaa7可以為任何氨基酸；以及n可以從0-5(例如，0，1，2，3，4或5)。備選地，多肽可以由氨基酸序列(Xaa1)n-Cys-Ala-Xaa2-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-(Xaa3)n(SEQIDNO35)組成，其中Xaa1為任何氨基酸，Xaa2為苯丙氨酸(Phe)或精氨酸(Arg)，Xaa3為任何氨基酸，以及n是從0-5的整數(例如，0，1，2，3，4或5)。在這些實施方案內的多肽的實例包括，但不限于，由氨基酸序列Ala-Pro-Pro-Leu-Asp-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Ala-Leu-Pro-Pro-Ala(SEQIDNO36)，Ala-Ala-Arg-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Ala-Ala(SEQIDNO37)，或Ala-Pro-Pro-Asp-Cys-Ala-Phe-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Ala-Ala(SEQIDNO38)組成的多肽。在SEQIDNOs1-38中提出的氨基酸序列典型地包含2個半胱氨酸殘基。由于這2個半胱氨酸殘基之間的二硫鍵的形成，含有這些氨基酸序列的多肽典型地環化。例如，本領域的普通技術人員可以應用Ellman’s試劑(Ellman’sReagent)來確定含有多個半胱氨酸殘基的肽是否環化。在一些實施方案中，這些半胱氨酸殘基可以用其它天然或非天然的氨基酸殘基取代，所述氨基酸可以形成內酰胺鍵而不是二硫鍵。例如，一個半胱氨酸可以用天冬氨酸或谷氨酸取代，而另外一個可以用鳥氨酸或賴氨酸取代。這些組合的任一種都可以產生內酰胺鍵。通過變化形成內酰胺鍵的氨基酸，可以生成本文提供的多肽，其包含與二硫鍵長度近似相等的鍵，如果多肽中存在2個半胱氨酸殘基就可能形成所述二硫鍵。本文提供的多肽可以包含氨基酸標記。“標記(tag)”一般為短的氨基酸序列，其通過與抗所述標記的抗體的相互作用或者通過識別所述標記的其它化合物或分子提供檢測或純化的便捷方法。例如，可以應用諸如c-myc、血凝素、多組氨酸或FLAG的標記來輔助多肽的純化和檢測。例如，基于組氨酸殘基對鎳離子的親和力(例如，在Ni-NTA柱上)，可以純化帶有多組氨酸標記的多肽，并且可以通過抗多組氨酸的抗體(例如，5組氨酸抗體；Qiagen，Valencia，CA)在蛋白質印跡上檢測。盡管在N-或C-端插入是特別有效的，但是標記可以插入在多肽序列的任何位置。術語“氨基酸”指天然氨基酸、非天然氨基酸和氨基酸類似物、其全部的D和L立體異構體，如果其結構允許這樣的話。天然氨基酸包括丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬酰胺(Asn)、天冬氨酸(Asp)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、賴氨酸(Lys)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、和纈氨酸(Val)。非天然氨基酸包括，但不限于，鈴蘭氨酸、2-氨基己二酸、3-氨基己二酸、β-丙氨酸、氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基異丁酸、3-氨基異丁酸、2-氨基庚二酸、2，4-二氨基異丁酸、鎖鏈賴氨素、2，2′-二氨基庚二酸、2，3-二氨基丙酸、N-乙基甘氨酸、N-乙基天冬酰胺、羥基賴氨酸、別-羥基賴氨酸，3-羥基脯氨酸、4-羥基脯氨酸、異鎖鏈賴氨素、別-異亮氨酸、N-甲基甘氨酸、N-甲基異亮氨酸、N-甲基纈氨酸、正纈氨酸、正亮氨酸、鳥氨酸和2-哌啶酸。“類似物(analog)”是一種化合物，其彼此結構上相似，但在組成上稍微不同(如在用不同元素的原子替代1個原子上或者在特定官能團存在上)。因此，“氨基酸類物”與在天然多肽中典型發現的天然存在的氨基酸結構相似，但是在組成上不同，以致C端羧基、N端氨基、或側鏈官能團已經被化學修飾成其它官能團。氨基酸類似物包括天然或非天然氨基酸，其在其N端氨基或其側鏈基團進行可逆或不可逆地化學保護、或修飾，并且包括，例如，甲硫氨酸亞砜、甲硫氨酸砜、S-(羧甲基)-半胱氨酸、S-(羧甲基)-半胱氨酸亞砜和S-(羧甲基)-半胱氨酸砜。氨基酸類似物可以是天然存在的，或可以是合成制備的。氨基酸類似物非限制性的實例包括天冬氨酸-(β-甲酯)，天冬氨酸的類似物；N-乙基甘氨酸，甘氨酸的類似物；以及丙氨酰胺，丙氨酸的類似物。氨基酸和氨基酸類似物的其它實例在Gross和Meienhofer，ThePeptidesAnalysis，Synthesis，Biology，AcademicPress，Inc.，NewYork(1983)中列出。根據多肽骨架附近的側鏈氨基酸殘基的拓撲化學排列可以描述多肽的立體化學，其通過氨基酸殘基之間的肽鍵和鍵合的殘基的∩-碳原子而定義。另外，多肽骨架具有不同的末端和這樣的方向。大多數天然存在的氨基酸為L-氨基酸。天然存在的多肽主要由L-氨基酸組成。D-氨基酸是L-氨基酸的對映異構體，并且可以形成本文稱為“反轉(inverso)”多肽的肽(即，對應天然肽但由D-氨基酸而非L-氨基酸組成的肽)。“反(retro)”多肽由L-氨基酸組成，但是具有氨基酸殘基按天然肽序列的反方向組裝的氨基酸序列。天然存在的多肽的“反-反轉(retro-inverso)”修飾包括將具有與對應的L-氨基酸相反的∩-碳立體化學的氨基酸(即，D-或D-別-氨基酸)按照與天然多肽序列相反的順序合成組裝。因此，反-反轉類似物具有反轉的末端和反轉的肽鍵方向，然而其近似地保留了如在天然肽序列中的側鏈的拓撲結構。術語“天然(native)”是指對于制備部分或完全的反、反轉或反-反轉類似物用作起始序列的L-氨基酸的任何序列。部分反-反轉多肽類似物是只有部分序列反轉并且用對映異構氨基酸殘基替代的多肽。由于這樣的類似物的反向反轉部分具有反轉的N和C端，側生在反向-反轉部分的氨基酸殘基可以分別用∩-取代的側鏈類似物雙-二氨基甲烷和丙二酸替代。備選地，多肽可以為完全的反-反轉類似物，其中全部序列反轉并且用D-氨基酸替代。本發明還提供基于多肽的氨基酸序列設計的擬肽(peptidomimetic)化合物。擬肽化合物是合成的、非肽化合物，其具有基本上與選擇的肽的三維構象相同的三維構象(即“肽模體，”)，并且因此可以賦予與選擇的肽相同或相似的功能。本發明的擬肽化合物可以設計成模擬本發明的任何多肽。蛋白酶抗性的擬肽化合物特別有用。并且，擬肽化合物可以具有增加治療效用的附加特征，諸如增加細胞滲透性和延長生物半衰期。這樣的化合物典型地具有部分或完全是非肽的骨架，但是具有與在擬肽化合物依據的肽中發生的氨基酸殘基的側鏈基團相同或相似的側鏈基團。一些類型的化學鍵(例如，酯基、硫酯基、硫胺基、逆胺基、還原羰基、二亞甲基和酮亞甲基)是本領域已知的在擬肽化合物構建中用于肽鍵的有效取代鍵。本發明的多肽和免疫分子之間的相互作用典型地通過免疫球蛋白的CH2-CH3裂口發生。通過物理接近發生這樣的相互作用，并且例如，通過疏水相互作用介導。多肽對于免疫球蛋白分子的“結合親和力”是指多肽和免疫球蛋白之間相互作用的強度。結合親和力典型地表示為平衡離解常數(Kd)，其以Kd＝koff/kon進行計算，此處koff＝反應的動力學離解常數，和kon＝反應的動力學締合常數。Kd表示為濃度，其低Kd值(例如，低于100nM)表示高親和力。可以與免疫球蛋白分子相互作用的本發明的多肽典型地具有對于免疫球蛋白的CH2-CH3裂口至少1μM的親和力(例如，至少500nM，至少100nM，至少50nM或至少10nM)。本文提供的多肽可以以基本相等的親和力結合于和抗原結合的免疫球蛋白分子，以及單體免疫球蛋白。備選地，對于與抗原結合的免疫球蛋白分子，本發明的多肽可以具有比對于單體免疫球蛋白更高的親和力(例如，至少10倍，至少100倍，或至少1000倍更高的親和力)。當抗原結合于Fab區時在免疫球蛋白分子的Fc區內發生的構象變化可能參與親和力的差異。結合和非結合的NC6.8Fab(來自鼠單克隆抗體)的晶體結構表明，與其在非結合的Fab中的位置相比，Fab重鏈尾在抗原/抗體復合物的晶體中移動了19埃(Guddat等.(1994)J.Mol.Biol.236-247-274)。由于在完整的抗體中Fab區的C端尾與Fc區連接，這一移動(shift)預計將影響CH2-CH3裂口的構象。并且，完整免疫球蛋白的一些三維結構檢驗揭示Fab重鏈和FcCH2-CH3裂口之間的直接的物理聯系(Harris等.(1997)Biochemistry361581-1597；Saphire等.(2001)Science2931155-1159)。單體(即，不結合的)和免疫復合的IgG的CH2-CH3裂口的分子模型(參見圖1A和1B)揭示單體的FcCH2-CH3裂口具有封閉的構型(closedconfiguration)，其可以防止與關鍵(critical)氨基酸殘基結合(例如，His435；參見，例如，O’Brien等.(1994)Arch.Biochem.Biophys.31025-31；Jefferies等.(1984)Immunol.Lett.7191-194；和West等.(2000)Biochemistry399698-9708)。然而，免疫復合的(抗原結合的)IgG具有更加開放的構型，并且因此更加利于配體結合。例如，對于免疫復合的IgG的RF的結合親和力比對于單體IgG的RF的結合親和力更大(Corper等.(1997)Nat.Struct.Biol.4374；Sohi等.(1996)Immunol.88636)。典型地，相同的結果對于本發明的多肽也正確。由于本發明的多肽可以結合于免疫球蛋白分子的CH2-CH3裂口，它們可有效用于阻滯其它因子(例如，FcRn、FcR、RF、組蛋白、MBP和其它免疫球蛋白)與免疫球蛋白的Fc區的相互作用，并且因此可以抑制Fc介導的免疫復合物形成。“抑制”意指在本發明的多肽的存在下，Fc介導的免疫復合物形成減少。這樣的抑制可以在體外(例如，在測試試管中)或在體內(例如，在個體中)發生。可以應用任何適當的方法評估免疫復合物形成的水平。在本領域內已知許多這樣的方法，并且本文描述了這些方法中的一些。本發明的多肽典型地以單體方式與免疫球蛋白分子的CH2-CH3裂口相互作用(即，只與一個免疫球蛋白分子相互作用，并且因此不會將2個或更多的免疫球蛋白分子結合在一起)。因此，多肽的存在排除了通過Fc區與其它免疫球蛋白分子的相互作用。可以在體外評估Fc介導的免疫復合物形成的抑制，例如，通過在本發明的多肽存在或不存在時，將IgG分子與標記的免疫球蛋白分子(例如，熒光標記的RF分子)一起培養，并且測量組合到免疫復合物中的標記的免疫球蛋白的量進行評估。如下文所討論，還可以應用適于檢測免疫復合物形成的其它方法。多肽的制備和純化本發明的多肽可以通過許多方法生產，其中的許多方法為本領域所公知。通過實例的方式，但不限于，多肽可以通過從天然來源中(例如，從分離的細胞、組織或體液中)提取，通過編碼所述多肽的重組核酸的表達(例如，下文所描述的)，或通過化學合成(例如，通過固相合成或本領域公知的其它方法，包括用ABI肽合成器合成；AppliedBiosystems，FosterCity，CA)而獲得。還描述了用于合成反-反轉多肽類似物的方法(Bonelli等.(1984)Int.J.PeptideProteinRes.24553-556；和Verdini和Viscomi(1985)J.Chem.Soc.PerkinTrans.I697-701)，以及用于部分反-反轉肽類似物的固相合成的一些方法(參見，例如，歐洲專利號EP0097994)。本發明提供此處所描述的編碼多肽的分離的核酸分子。如此處所用，“核酸”是指RNA和DNA，包括cDNA、基因組DNA和合成的(例如，化學合成的)DNA。核酸可以是雙鏈的或單鏈的(即，有義和反義單鏈)。如此處所用涉及到核酸的術語“分離的(isolated)”是指天然存在的核酸，其不會立即毗連這樣的2個序列在其衍生的生物體的天然存在的基因組中，其立即與所述序列毗連(1個在5’端和1個在3’端)。由于所述非天然存在的序列沒有在自然中發現，并且在天然存在的基因組中沒有立即毗連的序列，所以如此處所用涉及到核酸的術語“分離的”還包括任何非天然存在的核酸序列。分離的核酸可以是，例如，DNA分子，條件是在天然存在的基因組中與DNA分子立即毗連的1條核酸序列被移除或不存在。因此，分離的核酸可以包括，但不限于，不依賴其它序列作為獨立的分子存在的DNA分子(例如，化學合成的核酸、或通過PCR或限制性核酸內切酶處理產生的cDNA或基因組DNA片段)，以及整合到載體、自主復制的質粒、病毒(例如，逆轉錄病毒、慢病毒、腺病毒或皰疹病毒)、或整合到原核或真核的基因組DNA中的DNA。另外，分離的核酸可以包括工程核酸，諸如重組DNA分子，其為雜合或融合核酸的一部分。例如，存在于在cDNA文庫或基因組文庫、或含有基因組DNA限制性內切消化液的凝膠切片內的數百-數百萬其它核酸中的核酸不被認為是分離的核酸。本發明還提供含有本文所描述的核酸的載體。如此處所用，“載體(vector)”是一種復制子，諸如質粒、噬菌體、或黏端質粒，其中可以插入其它DNA片段，以使所插入的片段得以復制。本發明的載體優選表達載體，其中核苷編碼帶有起始密碼子甲硫氨酸的本發明的多肽，其有效地連接于表達控制序列。如此處所用，“有效連接(operablylinked)”意指組合到遺傳構建體中以便表達控制序列有效地控制目的編碼序列的表達。“表達控制序列(expressioncontrolsequence)”為控制和調節其它DNA序列的轉錄和翻譯的DNA序列，以及“表達載體(expressionvector)”是包括表達控制序列的載體，以便轉錄和翻譯整合到載體中的相關的DNA片段。當RNA聚合酶將所述編碼序列轉錄成mRNA時，該mRNA然后翻譯成由所述編碼序列編碼的蛋白，所述編碼序列“有效連接”并且受到細胞中轉錄和翻譯控制序列的“控制”。可以應用本領域的技術人員公知的方法將分離的編碼目的多肽的核酸分子亞克隆到表達載體中，所述表達載體包含相關編碼序列和適當的轉錄/翻譯控制信號。參見，例如，Sambrook等.，MolecularCloningALaboratoryManual(第二版)，ColdSpringHarborLaboratory，NewYork(1989)；和Ausubel等.，CurrentProtocolsinMolecularBiology，GreenPublishingAssociatesandWileyInterscience，NewYork(1989)。如本文所述，本發明的表達載體可以用于各種系統(例如，細菌、酵母菌、昆蟲細胞和哺乳動物細胞)。適宜的表達載體的實例包括，但不限于，質粒和衍生于，例如，皰疹病毒、逆轉錄病毒、痘苗病毒、腺病毒以及腺伴隨病毒的病毒載體。可以商購獲得廣泛種類的適宜的表達載體，包括pET系列的細菌表達載體(Novagen，Madison，WI)、腺-X表達系統(Clontech)、Baculogold桿狀病毒表達系統(BDBiosciencesPharmingen，SanDiego，CA)和pCMV-Tag載體(Stratagene，LaJolla，CA)。編碼本發明的多肽的表達載體可以用于生產多肽。可以用于本發明的多肽的小量或大量生產的表達系統包括，但不限于，微生物，諸如細菌(例如，大腸桿菌(E.coli)和枯草芽孢桿菌(B.subtilis)，其轉化了含有本發明的核酸分子的重組噬菌體DNA、質粒DNA、或黏端質粒DNA；酵母菌(例如，釀酒酵母菌(S.cerevisiae))，其轉化了含有本發明的核酸分子的重組酵母菌表達載體；昆蟲細胞系統，其感染了含有本發明的核酸分子的重組病毒表達載體(例如，桿狀病毒)；植物細胞系統，其感染了含有本發明的核酸分子的重組病毒表達載體(例如，煙草花葉病毒)或轉化了重組質粒表達載體(例如，Ti質粒)；或哺乳動物細胞系統(例如，初級細胞或無限增殖化細胞，諸如COS細胞、CHO細胞、HeLa細胞、HEK293細胞和3T3L1細胞)，其帶有含有衍生于哺乳動物細胞基因組的啟動子(例如，金屬硫蛋白啟動子)或衍生于哺乳動物病毒的啟動子(例如，腺病毒后期啟動子和巨細胞啟動子)，以及本發明的核酸分子。如此處所用，術語“純化的多肽(purifiedpolypeptide)”是指這樣的多肽其沒有天然存在的副本(例如，擬肽)，或是化學合成的并且因此不被其它多肽污染，或者是從其天然伴隨的其它細胞成分中分離或純化出來的(例如，其它細胞蛋白、多聚核苷酸或細胞成分)。典型地，當其為至少70干重％，沒有與其天然締合的蛋白和天然存在的有機分子時，認為所述多肽是“純化的”。因此，本發明的純化的多肽的制劑可以是，例如，至少80干重％、至少90干重％或至少99干重％的本發明的多肽。用于純化本發明的多肽的適合的方法包括，例如，親和層析、免疫沉淀法、大小排阻層析以及離子交換層析。可以通過適當的方法測量純化的程度，這些方法包括，但不限于柱層析、聚丙烯酰胺凝膠或高效液相色譜。模擬、設計和鑒別化合物的方法本發明提供用于設計、模擬和鑒別化合物的方法，其中所述化合物可以結合于免疫球蛋白分子的CH2-CH3裂口，并且因此作用為Fc介導的免疫復合物形成的抑制劑。此處，這樣的化合物還叫作“配體(ligands)”。通過本發明的方法設計、模擬或鑒別的化合物典型地可以通過CH2-CH3裂口與免疫球蛋白分子相互作用，并且典型地對于免疫球蛋白的CH2-CH3裂口具有至少1μM的結合親和力(例如，至少500nM，至少100nM，至少50nM，或至少10nM)。對于免疫復合的免疫球蛋白分子，所述化合物通常具有比對于單體免疫球蛋白分子更高的結合親和力(例如，至少10倍，至少100倍，或至少1000倍更高的結合親和力)。本發明的化合物典型地以單體方式與免疫球蛋白分子的CH2-CH3裂口相互作用(即，只與一個免疫球蛋白分子相互作用，并且因此不會將2個或更多的免疫球蛋白分子結合在一起)。化合物分子和免疫球蛋白分子之間的相互作用典型地包括免疫球蛋白的位置252、253、435和436的氨基酸殘基(按照Kabat編號，如前所述)。本發明的化合物和CH2-CH3裂口之間的相互作用使得所述化合物能夠通過阻滯其它因子(例如，RF、組蛋白、Clq、MBP和銀屑病相關抗原psop27)與CH2-CH3裂口的結合而抑制Fc介導的免疫復合物的形成。通過本發明的方法鑒別的化合物可以是多肽，諸如，例如，本文所描述的那些。備選地，化合物可以是能夠特異性結合于免疫球蛋白CH2-CH3裂口的任何適宜類型的分子。諸如櫟精、乳香酸和抑制素的化合物是特別有效的。“模擬(modeling)”意指基于三維結構信息和受體-配體相互作用模型對受體-配體結構/功能進行的定量和/或定性的分析。這包括常規的基于數目的分子動力學和能量最小化模型、交互式計算機立體圖、修飾的分子力學模型、距離幾何學和其它基于結構的限制模型。模擬典型地使用計算機進行，并且可以使用已知方法進一步最優化。設計與已經結合抗原的免疫球蛋白CH2-CH3裂口特異性結合(即，以高親和力)的配體的方法典型地是基于計算機的，并且包括使用具有能夠產生原子模型的程序的計算機。對于設計可以與FcCH2-CH3裂口相互作用的配體，應用X-射線結晶學數據的計算機程序是特別有用的。例如，諸如RasMol的程序可以用于產生CH2-CH3裂口的三維模型和/或確定參與配體結合的結構。諸如INSIGHT(Accelrys，Burlington，MA)，GRASP(AnthonyNicholls，ColumbiaUniversity)，Dock(MolecularDesignInstitute，UniversityofCaliforniaatSanFrancisco)，和Auto-Dock(Accelrys)的計算機程序允許進一步的處理和引入新結構的能力。本發明的方法可以包括，例如，給計算機提供位于Fc介導的免疫復合物中免疫球蛋白分子CH2-CH3裂口內的氨基酸殘基(例如，在裂口的位置252，253，435和436的氨基酸殘基)的原子結構坐標(例如，圖2A和2B中所示的坐標)，使用計算機來產生CH2-CH3裂口的原子模型，進一步提供候選化合物的原子結構坐標，并且產生最優化位于CH2-CH3裂口內的化合物的原子模型，并且，如果所述化合物與裂口位置252，253，435和436的氨基酸殘基相互作用，鑒定候選化合物為目的配體。提供給計算機的數據還可以包括除了在位置252，253，435和436之外的氨基酸殘基的原子坐標。“最優化位于(optimallypositioned)”意指進行放置以最優化候選化合物和CH2-CH3裂口的位置252，253，435和436的氨基酸殘基之間的疏水性相互作用。備選地，用于設計具有對于免疫球蛋白分子CH2-CH3裂口的特異結合親和力的配體的方法可以利用在其內存中存儲裂口的原子模型的計算機。然后，可以將候選化合物的原子坐標提供給計算機，并且可以產生最優化安置的候選化合物的原子模型。如本文所描述，如果，例如，所述化合物與裂口位置252，253，435和436的氨基酸殘基相互作用，可以鑒定候選化合物為具有對于免疫球蛋白分子CH2-CH3裂口的特異結合親和力的配體。還可以應用其它基于結構的設計/模擬技術，從本文所述的化合物的結構信息交互式地設計本發明的化合物(參見，例如，Jackson(1997)SeminarsinOncology24L164-172；和Jones等.(1996)J.Med.Chem.39904-917)。本發明的化合物和多肽還可以通過，例如，通過計算機模擬鑒定候選化合物進行鑒定，其立體地并優選地適配(即，具有高親和力)到免疫球蛋白分子的CH2-CH3裂口，然后在體外或體內篩選那些具有抑制Fc介導的免疫復合物形成的能力的化合物。對于所述體外和體內篩選適用的方法包括本文所描述的那些。組合物和制品本發明提供用于治療由異常Fc介導的免疫復合物形成(例如，Fc介導的免疫復合物超量生產)引起的疾病的方法。通過這些方法，將按照本發明的多肽和化合物施用給受試者(例如，人或其它哺乳動物)，其患有可以通過調節Fc介導的免疫復合物形成而減輕的疾病或紊亂(例如，類風濕性關節炎)。典型地，可以給懷疑患有與免疫復合物形成相關的疾病或病況的受試者施用1種或多種多肽或者化合物。本文提供的多肽和化合物可以用于生產用于治療由異常Fc介導的免疫復合物形成引起的疾病的藥劑(即，組合物)。本發明的組合物典型地含有本文所述的1種或多種多肽和化合物。CH2-CH3結合多肽，例如，可以在藥用載體或稀釋劑中，并且可以按量和周期施用，所述的量和周期將取決于具體疾病的性質、其嚴重度和受試者的總體情況而變化。典型地，所述多肽以抑制量施用(即，以有效抑制多肽接觸的細胞或組織中免疫復合物的產生的量)。本發明的多肽和方法還可以預防性地應用，例如，將處于免疫復合物異常或超量生產的風險受試者(例如，移植受體)中的免疫反應性減小到最低。多肽抑制Fc介導的免疫復合物形成的能力可以通過，例如，在治療之前和之后測量受試者中免疫復合物的水平進行評估。許多方法可以用于測量組織或生物樣品中免疫復合物水平，其包括本領域公知的那些方法。例如，如果受試者是研究動物，可以通過安樂處死后的免疫染色評估關節處的免疫復合物水平。還可以通過直接方法，諸如測量血清樣品中的循環免疫復合物的水平，來評估抑制性多肽的效用。備選地，可以應用間接方法來評估多肽在活的受試者中的效用。例如，可以從類風濕性關節炎患者中減少的疼痛推斷減少的免疫復合物形成。動物模型還可以用來研究諸如類風濕性關節炎的疾病的發展和減輕。用于配制和后續施用的治療組合物的方法是為本領域的技術人員公知的。劑量定量通常取決于要治療的疾病狀態的嚴重度和反應性，治療的療程持續幾天到幾個月，或者直到實現治愈或獲得疾病狀態的減輕。本領域的普通技術人員常規確定最適劑量、定量方法和重復率。最適劑量可以取決于個體多肽的相對強度(potency)而變化，并且通常可以基于在體外和體內動物模型中發現有效的EC50進行估算。典型地，劑量為0.01μg-100g每kg體重，并且可以給藥每天1次或多次、每二周1次、每周1次、每月1次或甚至更不經常。成功治療后，可以讓患者經受維持治療，以防止所述疾病狀態的復發。本發明提供包含本發明的多肽和/或化合物的藥用組合物和制劑。因此，多肽可以與其它分子、分子結構或化合物的混合物，諸如，例如，脂質體、聚乙二醇、受體靶點分子、或者口服、直腸、局部或其它制劑，進行混合、膠囊化、綴合或締合，用于輔助攝入、分布和/或吸收。“藥用載體”(本文也叫作“賦形劑”)是用于運送1種或多種治療化合物(例如，CH2-CH3結合多肽)到受試者的藥用溶劑、混懸劑或其它藥用惰性賦形劑。藥用載體可以是液體或固體，并且，當其與1種或多種治療化合物和給出的藥用組合物的任何其它成分組合時，可以考慮計劃的施用方式進行選擇，以便提供需要的大小、密度和其它相關的轉運和化學特性。不與氨基酸有有害反應的典型的藥用載體包括，通過實例方式但不限于水；鹽溶液；結合試劑(例如，聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)；填料(例如，乳糖和其它糖，白明膠，或硫酸鈣)；滑潤劑(例如，淀粉，聚乙二醇或乙酸鈉)；崩解劑(例如，淀粉或淀粉甘醇酯鈉)；以及加濕劑(例如，硫酸月桂酯鈉)。本發明的藥用組合物可以通過許多方法施用，其取決于需要的是局部還是全身性的治療，以及要治療的面積。例如，施用可以是局部的(經皮的(transdermal)、舌下的、眼的、或鼻內的)；肺部的(例如，通過粉劑或氣溶膠劑的吸入或吹入)；口服的；或腸胃外的(例如，通過皮下、鞘內、心室內、肌內、或腹膜內注射，或者通過靜脈內點滴)。施用可以是快速的(例如，通過注射)或者可以在一段時間內發生(例如，通過緩慢灌輸或施用緩慢釋放制劑)。對于治療中樞神經系統內的組織，可以通過注射或灌輸將CH2-CH3結合多肽施用到腦脊髓液中，優選地和一種或多種能夠促進所述多肽穿過血腦屏障的滲透性的藥劑一起施用。用于CH2-CH3結合多肽局部施用的制劑包括，例如，無菌的和未滅菌的水性溶液，在諸如醇類的常規溶劑中的非水性溶液，或者在液態或固態油基(oilbases)中的溶液。這樣的溶液還可以含有緩沖液、稀釋劑以及其它適宜的添加劑。用于局部施用的藥用組合物和制劑可以包括透皮貼片(transdermalpatches)、油膏、洗液、膏劑、凝膠、滴劑、栓劑、噴霧劑、液體和粉劑。鼻部噴霧劑特別有效，并且可以通過，例如，噴霧器或其它鼻部噴霧裝置進行施用。通過吸入器的施用也是特別有效的。常規藥用載體、水、粉劑或油基、增稠劑等可以是必要的或是需要的。用于口服的組合物和制劑包括，例如，粉劑或粒劑、混懸液或者在水或非水性介質中的溶液、膠囊、香囊或片劑。這樣的組合物還可以結合增稠劑、調味劑、稀釋劑、乳化劑、分散輔劑或結合劑。用于腸胃外、鞘內或心室內施用的組合物和制劑可以包括無菌的水性溶液，其還可以含有緩沖液、稀釋劑和其它適當的添加劑(例如，滲透增強劑、載體化合物和其它藥用載體)。本發明的藥用組合物包括，但不限于，溶液、乳狀液、水性混懸液和含脂質體制劑。這些組合物可以從各種成分產生，其中所述成分包括，例如，預制的液體、自身乳化固體和自身乳化半固體。乳狀液通常為兩相系統，其包括密切混合并且分散在彼此之中的2個不相溶的液相一般地，乳狀液是水-在-油(water-in-oil，w/o)或油-在-水(oil-in-water，o/w)種類。由于其配制的容易度和溶解、吸收以及生物利用度的功效，乳狀液制劑已經廣泛地用于口服運送的治療。脂質體是具有由親脂性材料和可以包含要運送的組合物水性內核組成的膜的賦形劑。由于其從藥物運送的觀點上提供的特異性和作用的持續性，脂質體可以特別有效。脂質體組合物可以由，例如，磷脂酰膽堿，二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿，二棕櫚酰磷脂酰膽堿，二肉豆蔻酰磷脂酰甘油，或二油酰基磷脂酰乙酰胺形成。許多親脂性試劑可以商購，包括LIPOFECTIN(Invitrogen/LifeTechnologies，Carlsbad，CA)和EFFECTENETM(Qiagen，Valencia，CA)。本發明的多肽還包含任何藥用鹽、酯或者所述酯的鹽、或任何其它化合物，所述化合物在施用給包括人在內的動物時，能夠提供(直接地或間接地)生物活性代謝物或其殘基。因此，例如，本發明提供多肽的藥用鹽、原藥物(prodrug)以及所述原藥物的藥用鹽、和其它生物等價物。術語“原藥物(prodrug)”是指一種治療藥劑，其以無活性形式制備，并且通過內生酶或其它化學制劑和/或條件在機體或其細胞內轉化成活性形式(例如，藥物)。術語“藥用鹽(pharmaceuticallyacceptablesalts)”是指本發明的多肽在生理學上和制藥學上可用的鹽(即，保留母多肽(parentpolypeptide)的需要的生物活性而沒有給予不必要的毒性作用的鹽)。藥用鹽的實例包括，但不限于，與陽離子(例如，鈉、鉀、鈣或多胺，諸如精胺)形成的鹽；與無機酸(例如，鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸或硝酸)形成的酸式加成鹽；以及與有機酸(例如，乙酸、檸檬酸、草酸、棕櫚酸或延胡索酸)形成的鹽。含有本發明的多肽的藥用組合物還可以結合促進多肽向動物皮膚的有效運送的滲透增強劑。滲透增強劑可以增強親脂性和非親脂性藥物穿過細胞膜的擴散。滲透增強劑可以分類為屬于5大類的1種，即，表面活性劑(例如，硫酸月桂酯鈉、聚氧化乙烯基-9-十二烷基醚和聚氧乙烯基-20-十六烷基醚)；脂肪酸(例如，油酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸和硬脂酸)；膽酸鹽(例如，膽酸、脫氫膽酸和脫氧膽酸)；螯合劑(例如，乙二胺四乙酸二鈉、檸檬酸和水楊酸)；以及非螯合非表面活性劑(例如，不飽和環狀脲)。備選地，抑制性多肽可以通過離子電滲療法運送，其包括帶有電荷的透皮貼片以“驅動”多肽通過真皮。本發明的某些實施方案提供藥用組合物，其包含(a)1種或多種多肽，和(b)1種或多種通過不同機制作用的其它試劑。例如，本發明的組合物可以包括消炎藥物，其包括但不限于非類固醇消炎藥物和皮質甾類，以及抗病毒藥物，其包括但不限于利巴韋林、阿糖腺苷、阿昔洛韋和更昔洛韋。其它非多肽試劑(例如，化學治療試劑)也在本發明的范圍內。所述組合的化合物可以一同或先后使用。本發明的組合物又可以包含常規在藥用組合物中發現的其它輔助成分。因此，所述組合物還可以包括相容的、藥用活性材料，諸如例如，止癢劑、收斂劑、局部麻醉劑或消炎藥物、或者用于在身體上配制本發明的多肽的不同劑量形式的添加材料，諸如染料、調味劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、增稠劑和穩定劑。并且，所述組合物可以與輔劑混合，例如，滑潤劑、防腐劑、穩定劑、加濕劑、乳化劑、用于影響滲透壓的鹽、緩沖液、染料、調味劑以及芳香物質。然而，當添加時，這樣的材料不應該不適當地妨礙本發明的組合物內的多肽成分的生物活性。如要需要，可以將制劑滅菌。可以按照制藥工業中公知的常規技術制備本發明的藥用制劑，其可以便利地以單位劑量形式存在。所述技術包括使活性組分(例如，本發明的CH2-CH3結合多肽)與需要的藥用載體或賦形劑締合的步驟。典型地，可以通過這樣的方式制備所述制劑均一地并且使活性組分與液態載體或細碎的固體載體或者兩者緊密締合，然后，如果必要，將產品定型。如果需要，可以將制劑滅菌，條件是滅菌方法不妨礙制劑中包含的多肽的效力。本發明的組合物可以配制成許多可能的劑量形式的任何一種，諸如，但不限于，片劑、膠囊、液態糖漿、軟凝膠、栓劑和灌腸劑。本發明的組合物還可以配制成在水性、非水性或混合介質中的混懸液。水性混懸液還可以包含增加所述混懸液黏度的物質，其包括，例如，羧甲基纖維素鈉、山梨醇和/或葡聚糖。混懸液還可以包含穩定劑。本發明的CH2-CH3結合多肽可以與包裝材料組合，并且作為用于減少Fc-介導的免疫復合物形成的試劑盒出售。用于生產產品的成分和方法是公知的。產品可以與前述部分提出的1種或多種多肽和化合物組合。另外，產品還可以包括，例如，緩沖液或其它用于減少或監測減少的免疫復合物形成的控制試劑。描述所述多肽怎樣有效用于減少Fc-介導的免疫復合物形成的用法說明可以包含在這樣的試劑盒中。應用CH2-CH3結合多肽來抑制Fc-介導的免疫復合物形成的方法CH2-CH3結合多肽可以用于Fc-介導的免疫復合物形成的體外測定。例如，所述方法有效用于評估CH2-CH3裂口-結合多肽阻滯Fc-介導的免疫復合物形成的能力。體外方法可以包括，例如，在本發明的多肽存在和不存在的情況下，將免疫球蛋白分子(例如，抗原結合的免疫球蛋白分子)和效應器分子(例如，RF，FcR，FcRn，組蛋白，MBP或其它抗體)接觸，并且確定每種樣品中免疫復合物形成的水平。免疫復合物形成的水平可以通過，例如，聚丙烯酰胺凝膠電泳和考馬斯蘭或銀染，或者通過共免疫沉淀進行評估。所述方法為本領域的普通技術人員所知。本文提供的方法還可用來抑制受試者中的免疫復合物形成，和通過抑制體內Fc-介導的免疫復合物形成來治療受試者中的自體免疫疾病。這樣的方法可包含，例如，給受試者施用任何本文提供的多肽，或含有任何本文提供的多肽的組合物。例如，一種方法可包括給個體施用含有包括氨基酸序列Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO10)的多肽的組合物。備選地，一種方法可包括給受試者施用包含下列氨基酸序列的多肽Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO2)，或Ala-Pro-Pro-Asp-Cys-Ala-Arg-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO14)。此處提供的方法可用于治療患有，例如，類風濕性關節炎(RA)，全身性狼瘡性紅斑癥(systemiclupuserythematosus(SLE))，狼瘡性腎炎，自體免疫腎小球腎炎，動脈粥樣硬化，多發性硬化病(MS)，帕金森癥，局限性回腸炎，銀屑病，關節強硬性脊椎炎(AS)，或癌癥的患者，或者用于移植受體。下述部分描述這些Fc-介導的免疫復合物形成的疾病和參與。本發明的方法還可包括用于鑒定需要所述治療的受試者和/或監測受治療的個體在癥狀或免疫復合物形成水平的減少的步驟。類風濕性關節炎-RA的特征在于慢性關節炎癥，其最終導致不可逆的軟骨毀壞。在RA中，異常IgG抗體由滑膜中的淋巴細胞產生。然后，這些異常IgG抗體作用為抗原。稱為類風濕因子(RheumatoidFactors，RF)的其它IgG和IgM抗體存在于血清和滑膜中，并且接著與這些異常的IgG抗體/抗原反應，以產生免疫復合物。在患有RA的患者的滑膜組織中富含包含RF的免疫復合物。RF被導向IgG的Fc區，并且與CH2-CH3裂口反應(Zack等.(1995)J.Immunol.1555057-5063)。盡管RF在RA中的準確作用還有待于充分地闡明，但是RF的存在與全身性癥狀、關節侵蝕和預后差相關。膠原II(CII)誘導的關節炎，RA的鼠模型，特征在于多發性關節炎、滑膜增生、單核細胞滲透、關節翳形成以及軟骨和骨骼的破壞。缺乏FcγRI和FcγRIII的小鼠免受CII誘導的關節炎，這表明FcγRs的封閉對于治療RA是有效的(Kleinau等.(2000)J.Exp.Med.1911611-1616)。盡管沒有充分理解RA的病因學，但是遺傳上傾向于發生所述疾病的個體產生了高水平的抗CII抗體。用含有CII的免疫復合物免疫產生抗-個體遺傳型的(anti-idiotypic)抗-CII抗體，其已表明實際上為RF(Holmdahl等.(1986)Scand.J.Immunol.24197-203)。結合于IgGCH2-CH3裂口的抑制劑將阻滯這種抗CII和RF抗-個體遺傳型的抗體的循環生產。在RA中由免疫復合物引起的炎癥和后續的軟骨損害可以與Fc...Rs在巨噬細胞上的發生相關(Blom等.(2000)ArthritisRes.2489-503)。敲除小鼠中，在誘導免疫復合物-介導的關節炎后，功能型Fc...RI和Fc...RIII的缺失防止了炎癥和軟骨毀壞，然而，在同樣處理的易得自體免疫性關節炎的小鼠的定居關節(residentjoint)巨噬細胞上Fc...Rs的高基底表達與顯著更多的滑膜炎癥和軟骨毀壞相關。在最近的研究中，在炎癥和組織損傷中的這些受體的重要性已經在各種炎癥疾病中得以闡明，其中炎癥疾病包括自體免疫溶血性貧血和血小板減少癥、自體免疫性腎小球腎炎、以及誘導的腎小球腎炎。由于大多數的人RF結合于IgGCH2-CH3裂口(Sasso等.(1988)J.Immunol.1403098-3107；Corper等.如前所述；和Sohi等.如前所述)，結合于CH2-CH3裂口的多肽將直接抑制RF與免疫復合的IgGFc的結合，并且因此將改善RF對RA病理學的貢獻作用。全身性狼瘡性紅斑和狼瘡性腎炎-SLE是一種具有許多表現的慢性自體免疫疾病。自體抗體的產生導致免疫復合物形成，并且隨后沉積在許多組織中(例如，腎小球、皮膚、肺、滑膜和間皮)，導致疾病的表現。由于免疫復合物常常沉積在腎小球中，腎病通常具有SLE。盡管治療，慢性腎衰竭的進展是常見的。狼瘡性腎炎是一種腎臟的炎癥，其由SLE-相關的免疫復合物和Fc...R的腎小球沉積引起(參見，例如，Clynes等.(1998)Science2791052-1054)。在SLE的小鼠模型中，還觀察到顯著的蛋白尿癥，其伴隨著對于DNA和組蛋白，以及IgG1、IgG2a和IgG2b亞綱的免疫復合物的抗體的血清學呈現。平均存活為6個月，并且腎衰竭導致死亡。認為B細胞和自體抗體在疾病發展中起主要作用，并且已經表明妨礙自體抗體產生的藥劑能減輕疾病。缺失這一路徑的成分的確定的鼠科品系的可用性促進了關于Fc...Rs的作用的研究。小鼠品系...-/-，其缺失FcR...鏈，不表達活化受體Fc...RI和Fc...RIII，但是還帶有抑制性受體Fc...RIIIB。缺乏Fc...RI和Fc...RIII的小鼠免于發展狼瘡性腎炎。通過Fc...R/免疫復合物相互作用的遺傳中斷，Clynes等(如前所述)表明免疫復合物和細胞Fc受體的相互作用對于狼瘡性腎炎的發展是重要的。然而，缺乏FcR的小鼠還證明了顯著的腎免疫復合物沉積。已經表明組蛋白H1結合于免疫復合物(Gussin等.(2000)Ann.Rheum.Dis.59351-358；和Costa等.(1984)J.Immunol.Methods74283-291)。Costa等還表明類風濕因子競爭性地抑制組蛋白H1與免疫復合物的結合，這表明組蛋白H1與免疫復合物的結合包括IgGFcCH2-CH3裂口。其它研究表明用組蛋白、DNA和抗-DNA抗體灌注大鼠腎臟導致了DNA/抗-DNA免疫復合物在腎小球基膜(GBM)的沉積，這表明結合于GBM的免疫復合物直接由組蛋白與GBM的結合所調控(Termaat等.(1992)KidneyInt.421363-1371；和Gussin等.如前所述)。結合于CH2-CH3裂口的多肽的應用將抑制組蛋白與免疫復合的IgGFc的結合，并且因此將改善這些Fc-介導的免疫復合物對SLE和狼瘡性腎炎的病理學的貢獻作用。在應用IgGFc片段的競爭性抑制研究中，沉積的IgG免疫復合物和注射的Fc片段在共定位于(colocalized)Fc-治療的腎炎動物的血管系膜中，這表明FcR的封閉可能是Fc片段的有益作用的基本機制(Gómez-Guerrero等.(2000)J.Immunol.1642092-2101)。這一研究還證明了免疫復合物對于在調節狼瘡性腎炎中的FcR相互作用的重要性。另外，多種炎性細胞因子的減少證明通過抑制1種或多種炎性分子預防炎性級聯而不是試圖妨礙所述級聯的重要性。因此，結合于CH2-CH3裂口的多肽還將抑制FcR與免疫復合的IgGFc的結合，并且將減少FcR對SLE和狼瘡性腎炎的病理學的貢獻作用。Gómez-Guerrero等還證明在未治療的腎炎小鼠中觀察到的上升的膽固醇(227±27mg/dl)在用Fc片段治療的腎炎小鼠中減少多于一半(103±16mg/dl)。在35-44歲之間患有全身性狼瘡性紅斑的婦女與沒有免疫復合物疾病的相似年齡的婦女相比，具有50倍更高的幾率形成高級動脈粥樣硬化/心肌梗死(Manzi等.(2000)Ann.Rheum.Dis.59321-325)。盡管沒那么明顯，但是這種相同的關系對于患有類風濕性關節炎的患者也是事實。。動脈粥樣硬化和心肌梗死的上升幾率可以歸因于慢性免疫復合物的形成引起的慢性炎癥狀態。可以通過結合于IgGFcCH2-CH3裂口的抑制性多肽防止這些免疫復合物的形成。自體免疫腎小球腎炎-自體免疫腎小球腎炎，一種與狼瘡性腎炎相關的疾病，是由于T細胞依賴型多克隆B細胞活化，其負責產生抗自身成分(例如，GBM，免疫球蛋白，DNA，髓過氧化物酶)和非自身成分(例如，綿羊紅血細胞和三硝基苯酚)的抗體。增加的血清IgE濃度是這種疾病的特點。動脈粥樣硬化-動脈粥樣硬化損害主要被認為是炎性性質。最近的研究已經聚焦在動脈粥樣硬化的炎性成分上，其試圖突出穩定和不穩定冠狀斑(coronaryplaques)之間的差異。增加的證據支持動脈粥樣硬化與其它炎性/自體免疫疾病共有許多相似性的假說。實際上，在動脈粥樣硬化、不穩定的絞痛、和自體免疫疾病的典型類風濕性關節炎中觀察到的炎性/免疫應答中存在令人驚訝的相似性(Pasceri和Yeh(1999)Circulation100(21)2124-2126)。充滿膽固醇酯的活化的巨噬細胞和巨噬細胞衍生的泡沫細胞是動脈粥樣硬化的主要要素，并且可以通過一些潛在的機制影響損傷形成。一種這樣的機制是Fc...R活化和/或Fc...R-介導的諸如脂蛋白免疫復合物的含有膽固醇的免疫復合物的清除。最近的研究表明，高度細胞的前動脈粥樣硬化損傷(preatheromatouslesions)在表達每種Fc...R(Fc...RIA，Fc...RIIA，和Fc...RIIIA；(Ratcliffe等.(2001)Immunol.Lett.77169-174))的增殖區包含許多巨噬細胞。這些數據為Fc...R-介導的免疫復合物的清除可以在動脈粥樣硬化形成過程中發生在動脈損傷中的觀點提供進一步的支持。高親和力(Fc...RIA)和更低親和力(Fc...RIIA/Fc...RIIIA)受體的表達表明單價和多價包含IgG的免疫復合物可能結合Fc...R，并且通過由受體活化促發的一些不同的炎性機制影響損傷形成。在慢性肺炎衣原體(Chlamydiapneumoniae)感染和動脈粥樣硬化之間還存在建立的聯系(Glader等.(2000)Eur.HeartJ.21(8)639-646)。通過形成含有肺炎衣原體-特異性IgG抗體的循環免疫復合物可以提高和/或部分調節肺炎衣原體(C.pneumoniae)脂蛋白的促動脈硬化形成(proatherogenic)的作用。在慢性肺炎衣原體感染和動脈粥樣硬化之間的聯系至少部分可以由通過形成循環的免疫復合物與肺炎衣原體的相互作用而解釋。因此，本發明的CH2-CH3結合多肽還可以有效用于治療上升的膽固醇水平和動脈粥樣硬化/心肌梗死。多發性硬化病-MS是一種攻擊包圍神經元的隔離的髓鞘的自體免疫性疾病。這損害機體和大腦之間的神經信號傳導。癥狀可以是輕微的或嚴重的，持續時間可短可長，并且可以包含視力模糊、失明、頭暈、麻木、肌肉虛弱、缺乏協調和平衡、言語障礙、疲勞、顫動、性功能障礙、以及腸和膀胱問題。盡管許多人具有部分或完全的減緩，但是對于一些進展更加嚴重的癥狀很少或沒有減緩。研究表明患有MS的患者具有正在進行的全身性病毒產生，其導致免疫復合物形成。另外，MS患者常常具有含有大腦-反應成分的血清復合物(Coyle和Procyk-Dougherty(1984)Ann.Neurol.16660-667)。MS的病因學可能是多因子的，并且包括異常免疫應答，其可能由遺傳上易感染的個體在兒童時期獲得的感染劑促發。所述免疫應答包括髓鞘堿性蛋白(myelinbasicprotein)濃度、CSF中抗髓鞘抗體和免疫復合物活性、和血液淋巴細胞的體外刺激、抑制和遷移抑制的改變。這些應答似乎與MS的階段和CNS損傷的嚴重性相關(Iivanainen(1981)J.Neuroimmunol.1141-172)。并且，在患有漸進的和活性復發-間歇的MS的患者血清中，發現循環免疫復合物的水平顯著地增加(Procaccia等.(1988)ActaNeurol.Scand.77373-381)。在處于復發-間歇的MS患者的腦脊髓液中，也發現免疫復合物水平增加。髓鞘堿性蛋白(myelinbasicprotein，MBP)在MS的免疫發病機制中是重要的。已表明MBP結合于免疫復合物和免疫復合的IgGFc(Sindic等.如前所述)。表明這些免疫復合物結合位點在MBP上是多化合價的，并且組蛋白通過MBP完全抑制免疫復合的IgGFc乳膠-包被珠粒(IgGFclatex-coatedbeads)的凝集。另外，某些FcR等位基因與MS的疾病過程相關(Vedeler等.(2001)J.Neuroimmunol.118187-193)。通過表明FcR...-/-小鼠免受實驗性自體免疫腦脊髓炎的研究，其為由髓鞘少突膠質糖蛋白誘導的MS模型，進一步表明FcRs參與MS(Abdul-Majid等.(2002)Scand.J.Immunol.5570-81)。使用結合于CH2-CH3裂口的多肽治療MS患者將抑制MBP與免疫復合的IgGFc的結合，并且將干擾免疫復合物結合于FcRs，因此，改善MS的病理。帕金森癥-帕金森癥(PD)的臨床癥狀由在已知為黑質(substantianigra，SN)的大腦切片中的多巴胺能神經元的死亡引起。應答過度的免疫系統可能通過在應答初始損傷中產生細胞因子而在延長PD中起作用，其可能進一步損害大腦中的細胞。并且，已經表明來自PD個體的免疫球蛋白對SN細胞的發病機理起貢獻作用(Chen等.(1998)Arch.Neurol.551075-1080)。酪氨酸氫化酶(TH)是兒茶酚胺神經遞質生物合成中的限速酶，并且只在那些通常合成并釋放所述神經遞質的神經元(例如，SN的神經元)中表達。TH的結構分析表明，免疫復合物可以結合于所述酶，并且對PD病理起貢獻作用。因此，CH2-CH3裂口-結合多肽可以通過抑制Fc-介導的免疫復合物與TH的結合而有效用于治療PD。局限性回腸炎-局限性回腸炎導致胃腸道，通常是小腸的慢性炎癥。它在美國影響大約500,000人，大部分常常不到30歲，其引起輕微到嚴重的腹痛、腹瀉、發燒和體重減輕。盡管所述疾病的起因未知，但是普遍的理論是，在局限性回腸炎患者中，腸免疫系統與病毒的或細菌的試劑過量反應，并且引發正在進行的、不可控制的腸炎。已經表明IgG種類的免疫復合物可能在局限性回腸炎中激活炎性嗜中性粒細胞(Nielsen等.(1986)Clin.Exp.Immunol.65465-471)。已在局限性回腸炎患者的血清中檢測到RF和循環的免疫復合物(Procaccia等.(1990)BollIstSieroterMilan69413-421；和Elmgreen等.(1985)ActaMed.Scand.21873-78)。在這些患者中含有IgG的免疫復合物的普遍存在和增加的IgGRF水平表明抑制Fc-介導的免疫復合物形成將有效用于治療局限性回腸炎。銀屑病-認為諸如白介素-2的細胞因子的釋放參與銀屑病。在這種疾病中，細胞因子發出信號使得皮膚細胞以加快的速率再生和成熟，其引發其它反應，諸如激活多余的T細胞并將T細胞“恢復”到皮膚中。T細胞的起始活化引發一個循環，其最終導致在皮膚表明形成銀屑病損傷。銀屑病相關的抗原，psop27，是銀屑病免疫反應中的主要抗原。這種特殊的抗原的合成隨著銀屑病皮膚損傷中的炎癥的減輕而減少。參見Dalaker等.(1999)ActaDerm.Venereol.79281-284。來自銀屑病鱗屑的抗psop27的兔抗血清與人IgG的Fc區反應。另外，商業的抗人IgG抗血清識別用作用于免疫兔的抗原來源的含有psop27的溶液中的一種成分(Asbakk等.(1991)APMIS99551-556)。因此，在銀屑病患者中，psop27抗原可以引起具有類風濕因子活性的抗體的產生。應用叫作“類風濕性”玫瑰花結測試(“rheumatoid”rosettetest)證明了在銀屑病患者中細胞水平的抗IgG活性。純化的細胞群體的應用表明參與類風濕性玫瑰花結形成現象的淋巴細胞缺少常規的T和B細胞膜標記。攜帶FcR的這樣的單核細胞能夠作為對于IgG包被的靶細胞的殺傷細胞。這種細胞毒性可能對銀屑病中的損傷的病因論起貢獻作用(Clot等.(1978)Brit.J.Derm.9925-30)。因此，抑制所述淋巴細胞與具有CH2-CH3結合多肽的IgG分子的結合將有效用于治療銀屑病。關節強硬性脊椎炎-對于與兔IgG的Fc區交叉反應的抗體的存在，分析來自患有關節強硬性脊椎炎患者和來自健康獻血者的血清和滑液，這顯示出顯著數量的游離RF，然而，IgGRF在堿性解離的循環免疫復合物(CIC)中被觀察到。在來自AS患者的堿性解離的CIC中還檢測到與psop27反應的大量的IgG和中量的IgM(Rodahl等.(1988)Ann.Rheum.Dis.47628-633)。因此，與psop27相關的抗原似乎參與AS中的CIC形成，并且可能負責患有AS的患者中RF的激發。癌癥-科學證據表明能夠結合免疫球蛋白的因子可以抑制癌癥轉移(參見，例如，Mathiot等.(1992)Immunol.Res.11296-304；andHooveretal.(1990)Curr.Top.Mircobiol.Immunol.16677-85)。本發明提供的多肽和其它化合物可以抑制轉移過程的一些關鍵元件。癌細胞上的Fc受體與癌癥轉移有關(參見，例如，Gergely等.(1994)Adv.CancerRes.64211；Wallace等.(1994)J.Leuk.Biol.55816-823；和Witz和Ran.(1992)Immunol.Res.11283-295)。FcR陽性腫瘤細胞可以結合于腫瘤-特異性抗體的Fc區。因此，FcRs可以保護細胞，其通過抵消抗體依賴型效應器的作用，諸如補體-介導的溶解或抗體依賴型細胞-介導的細胞毒性(Gergely等.如前所述)。在這種方式下，FcR表達賦予腫瘤細胞逃脫免疫機制的能力。FcRs在腫瘤細胞上的表達還可以促進細胞生長。另外，腫瘤細胞可以使用FcRs以結合于黏著分子，并且引起導致血管發生的局部的炎性應答。使用FcγR體外轉染的腫瘤細胞與不表達所述受體的細胞相比，表現出更高的體內轉移和腫瘤發生率(Witz和Ran，如前所述)。使用CH2-CH3結合多肽來阻滯免疫球蛋白分子與癌細胞上的FcRs之間的相互作用將有效用于預防或減少癌癥轉移。移植后的移植排斥-本發明的CH2-CH3結合多肽還有效用于預防組織或器官移植后的移植排斥。移植排斥典型地由移植組織上的細胞-介導的和體液免疫攻擊引起。固體器官(組織)移植包括，例如，腎臟、心臟、肺、肝臟、胰腺、皮膚和骨骼轉移。骨髓移植用在下述疾病的治療中諸如，免疫缺陷疾病、再生障礙性貧血、白血病、淋巴瘤和造血作用的遺傳疾病。最近的研究表明FcR非結合抗-CD3單克隆抗體通過運送不完整的信號到活化的T細胞而深入地影響T細胞功能。這些不完整的信號可以導致調控移植排斥的炎性Th1T細胞亞型的功能性滅活。本發明的CH2-CH3結合多肽還可以有效用于阻止到活化的T細胞的信號，因此抑制移植排斥。本發明將在下述實例中進一步描述，所述實例不會限制權利要求中描述的本發明的范圍。實施例實施例1-模擬對結合測試多肽重要的CH2-CH3裂口內的氨基酸殘基.基于結構的分子藥物設計的第一步是確定目標受體的三維結構。展示測試配體的三維結構的計算機程序(例如，RasMol2.6，ProteinExplorer，或Chime，分別獲得于UniversityofMassachusettsMolecularVisualization在互聯網上的網址)，以及展示目標受體的準確的三維結構的程序(例如，Auto-dock或Dock)，可以用來預測將與目標受體結合的配體的結構。可以通過給包含適當軟件的計算機提供由所述目標受體和測試配體的原子坐標組成的數據產生三維結構。圖1A和1B顯示IgG分子的FcCH2-CH3裂口在非復合的和抗原結合的狀態下計算機產生的、三維結構，這揭示本文所述的開放和封閉的構象。與肽配體和類風濕因子復合的IgG分子的CH2-CH3裂口的原子坐標分別在圖2A和2B中顯示。對IgGFcCH2-CH3裂口和具有氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Ala-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO39)的多肽之間的相互作用的計算機模擬的檢驗，表明多肽的色氨酸(Trp)殘基可能在CH2區的Ile253和CH3區的His435之間形成對于裂口的氫鍵(圖3)。在CH2-CH3裂口內對于結合于所述多肽關鍵的氨基酸為Leu251，Met252，Ile253，Ser254，His433，Asn434，His435和Tyr436。實施例2-實施例1中的多肽的氨基酸取代.對具有氨基酸序列Arg-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO6)的多肽的檢驗，表明在第一位置用精氨酸(Arg)取代天冬氨酸(Asp)沒有影響對IgGFc區的結合。在第四位置用精氨酸(Arg)替代色氨酸(Trp)也不期望對免疫球蛋白結合有重要影響。將這些殘基的1個或2個取代為精氨酸(Arg)(例如，如在SEQIDNO5中提出的)不期望使得所述多肽更加水溶，因此增加其生物利用度。這種結合于FcCH2-CH3區的修飾肽的三維結構在圖3中顯示。實施例3-用于測定結合于CH2-CH3裂口的配體的體外測定法.應用包括酶聯免疫吸附測定(ELISA)和雙向免疫擴散技術的體外測定法來證明本發明的多肽和化合物對結合于諸如FcR，RF，FcRn，Clq，組蛋白，CII，和MBP的因子的免疫復合的IgGFc的競爭性抑制。標準的試劑和ELISA試劑盒有效地減少成本并且增加實驗的重復性。在標準的ELISA中，將抗原免疫吸附到塑料微孔上。適當封閉和洗滌后，將具有定向于抗原的特異性的初級抗體添加到微孔中。再洗滌一次后，將定向于初級抗體并且與諸如辣根過氧化物酶(HRP)的酶標記綴合的二級抗體添加到微孔中。隨著另一洗滌循環后，添加適當的酶底物。如果形成抗原與初級抗體與二級抗體/HRP綴合物，綴合的酶催化與底物的比色化學反應，其用微量培養板讀數儀(microplatereader)或分光光度計讀取。通過標準化抗原和二級抗體/HRP綴合物的水平，建立初級抗體(可變的)的效價(titer)。在標準的ELISA系統中，初級抗體通過其位于Fab臂的互補決定區(CDR)與抗原結合。由于HRP綴合到二級抗體的Fc區，直接的Fc結合非常有限或者被消除了。由于這一原因，應用“反式ELISA”技術來評估Fc區與結合于免疫復合的IgGFc的配體的結合。在方式ELISA中，所述酶(例如，HRP)沒有共價綴合到二級抗體的Fc部分。相反地，應用預制的過氧化物酶-兔(或鼠)抗-過氧化物酶IgG(“PAP”復合物)的免疫復合物。在這種方法中，HRP作為酶標記，但是不封閉Fc區。在反式ELISA系統中，FcCH2-CH3裂口結合配體(例如，純化的人Clq)結合于微孔平板上。在不存在競爭者時，PAP復合物結合于固定的配體，并且在HRP和其底物之間的反應產生信號。抑制PAP與固定的配體結合的本發明的多肽和化合物減少這種信號。Clq結合的抑制將20μl過氧化物酶(P)(Sigma)在2ml樣品稀釋劑(QuidelCorp，SanDiego，CA)中稀釋。將20μl抗-過氧化物酶(AP)(Sigma)在2ml樣品稀釋劑中稀釋，并將20μl稀釋的AP添加到稀釋的P中(1∶100抗原∶抗體比例)，以形成過氧化物酶-抗-過氧化物酶(PAP)復合物。極度的抗原過剩保證任何單個抗體將與2個過氧化物酶分子結合，并且不會形成更大的免疫復合物，因此防止更大的免疫復合物與多聚體Clq(六聚體)的橋接。將100μl肽或Clq與新鮮制備的PAP預先溫育30分鐘，添加到Clq包被的培養板(QuidelCorp.)，并且溫育1小時。洗滌后，將ABTS底物(QuidelCorp.)添加到所述培養板中，溫育30分鐘，并且在405nm處對培養板進行讀數。所有的肽都通過在2個半胱氨酸殘基之間形成二硫鍵而環化。結果在表1中顯示。可溶的Clq導致更低的OD405值，并且因此提供固相結合的Clq對免疫復合物最大的競爭性抑制。大多數其它的肽防止免疫復合物與固相Clq的結合，其中APPCARHLGELVWCT(SEQIDNO14)給出另一個最低OD值。丙氨酸取代的肽(DCAAHLGELAACT；SEQIDNO40)，其關鍵的結合殘基取代成丙氨酸，導致與陽性對照沒有顯著差別的OD讀數。表1FcR結合的抑制一旦應用Clq測定法建立起反式ELISA方法，應用FcγIIa，FcγIIb和FcγIII代替Clq重新設計測定法。將高度純化的FcγIIa，FcγIIb和FcγIII免疫吸附到塑料微孔上。在將FcγR反式ELISA系統最優化之后，應用本發明的多肽進行簡單的競爭性抑制實驗，以研究其對于免疫復合物與純化的FcγR結合的抑制能力。將Falcon微量滴定板用高度純化的FcγIIa，FcγIIb和FcγIII的1∶10稀釋液包被，并且溫育24小時。洗滌柱子，然后用5XBSA封閉溶液(AlphaDiagnosticInternational，SanAntonio，Texas)封閉24小時。將等量(50μl)的肽和1∶10PAP免疫復合物預先溫育1小時，然后在FcR包被的培養板上溫育1小時。洗滌后，將培養板與TMB底物(AlphaDiagnosticInternational)溫育30分鐘。加入終止溶液(10μl)并且在450nm對培養板進行讀數。結果在表2中顯示。由于不能獲得大量的可溶FcR；對于這些實驗沒有包括炎性對照抑制劑。在所測試的肽中，DCAWHLGELVWCT(SEQIDNO2)引起最大的結合抑制，而APPCARHLGELVWCT(SEQIDNO14)導致第二個最低的OD讀數。表2RF結合的抑制除了多克隆IgMRF代替Clq包被在微孔上以外，測試對RF與IgGFcCH2-CH3裂口結合的能力的測定法與上文所描述的Clq-CICEIA測定法非常相似。最優化后，應用如對于Clq-CICEIA所描述的相同的競爭性抑制技術來證明多克隆RF對免疫復合結合的抑制。高效價、RF陽性的血清購自ResearchDiagnostics(Flanders，NJ)。將200μl的200I.U.類風濕因子(RF)(+)對照的1∶10稀釋液(由ResearchDiagnostics提供陽性標準)包被在Falcon微量滴定板上并且溫育24小時。將培養板用1∶5BSA封閉緩沖液(AlphaDiagnosticInternational)封閉1小時。將新鮮配制的1∶10PAP(抗原∶抗體)免疫復合物與肽或RF(只含有緩沖液的陽性對照)預先溫育30分鐘。洗滌后，將培養板與ABTS底物(ResearchDiagnostics)溫育30分鐘，然后在405nm讀數。結果在表3中顯示。表3可溶的類風濕因子(RF)提供對于固相RF結合于免疫復合物的抑制。肽APPCARHLGELVWCT(SEQIDNO14)，PCARHLGELVWCT(SEQIDNO41)，和DCARHLGELVWCT(SEQIDNO4)具有與可溶的RF的讀數基本上相同的OD讀數，并且因此提供對于RF結合于免疫復合物的非常有效的抑制。組蛋白結合的抑制在狼瘡性腎炎中免疫復合物與腎臟的結合似乎包括(a)組蛋白與GBM的結合，然后(b)免疫復合物(通過IgGFcCH2-CH3裂口)與結合的組蛋白的結合。應用與上文描述的那些相似的實驗來抑制純化的組蛋白與IgGFc結合區的結合。將組蛋白(Sigma)在包被緩沖液(AlphaDiagnosticInternational)中稀釋1∶10，并在Falcon微量滴定板上溫育24小時。將培養板用5XBSA封閉溶液(AlphaDiagnosticInternational)封閉24小時。將新鮮制備的1∶10兔PAP(Sigma)與任何一種肽或組蛋白預先溫育1小時，然后將100μl混合物添加到組蛋白包被的培養板上放置1小時。洗滌后，將培養板與ABTS底物(QuidelCorp.)溫育45分鐘，并且讀取OD450。結果在表4中顯示。DCAWHLGELVWCT肽(SEQIDNO2)是最好的肽抑制劑，其具有第二最低的OD值。表4MBP結合的抑制將MBP(Sigma)用包被緩沖液(AlphaDiagnosticInternational)1∶10稀釋，并在Falcon微量滴定板上溫育24小時。洗滌培養板，然后用5XBSA封閉緩沖液(AlphaDiagnosticInternational)封閉24小時。將兔1∶10PAP免疫復合物與等量的肽或MBP預先溫育30分鐘。然后將100μlPAP免疫復合物/肽或PAP/MBP添加到MBP包被的培養板上并溫育1小時。洗滌培養板并與TMB底物(AlphaDiagnosticInternational)溫育30分鐘。加入終止溶液(AlphaDiagnosticInternational)后，將培養板在450nm讀數。結果在表5中顯示。除了在位置10和11用丙氨酸取代的肽(SEQIDNO42)之外，所測試的肽表現出對于固相MBP結合于免疫復合物的不同量的抑制。表5Fc:Fc相互作用的抑制IgG4的Fc區以Fc對Fc的方式與免疫復合的IgG相互作用。應用純化的IgG4與本發明的多肽一起來檢驗對免疫復合物形成和Fc:Fc相互作用的抑制。已知本發明的多肽結合的關鍵IgGFc氨基酸，His435的化學修飾，可以抑制Fc:Fc相互作用。除了完整的IgG4代替Clq包被在微孔上以外，測試本發明的多肽妨礙Fe:Fc結合的能力的測定法與上文描述的Clq-CICEIA測定法非常相似。最優化這種CIC測定法后，應用與對于Clq-CICEIA描述相同的競爭性抑制技術來證明gG4Fc:Fc免疫復合物結合的抑制。結果在表6中顯示。在所測試的肽中，DCARHLGELVWCT(SEQIDNO4)，DCAWHLGELVWCT(SEQIDNO2)，和APPDCARHLGELVWCT(SEQIDNO14)提供最強的Fc:Fc結合的抑制。表6膠原II和FcRn結合的抑制還測試本發明的多肽對于其抑制CII與抗-CII抗體的結合以及FcRn與免疫復合物的結合的能力。除了用CII或FcRn代替Clq包被微孔之外，測試本發明的多肽干擾所述結合的能力的測定法與上文描述的Clq-CICEIA測定法非常相似。CII肽的免疫結構域是一段小的線性肽，并且易于合成，純化的CII提取物還可以商購。最優化后，應用對于Clq-CICEIA所描述的相同的競爭性抑制技術來證明結合的抑制。實施例4-類風濕因子與單體IgG結合的抑制.測試多肽抑制類風濕因子與單體IgG的結合的能力。由于其可以增加特別的肽的半衰期并且允許它們更加有生物活性，與單體IgG的結合可能是重要的。應用標準的類風濕因子商業測試(ResearchDiagnostics)，其具有下述修改將100μl測試肽與人單體IgG(ResearchDiagnostics)預先溫育30分鐘。洗滌培養板，并且與測試試劑盒提供的200I.U.類風濕因子陽性對照物一起溫育。按照制造者的用法說明進行余下的測試。結果在表7中顯示。對于這一實驗沒有應用RF對照。在所測試的肽中，DCAWHLGELVWCT(SEQIDNO2)明顯地超出其它的肽，得到了最低的OD讀數。表7實施例5-應用添加的肽抑制RF與免疫復合物的結合.測試添加的肽抑制RF與免疫復合物結合的能力。通過在1ml蒸餾水中將2μl兔抗-過氧化物酶與50μl過氧化物酶混合形成免疫復合物(PAP)。將PAP(100μl)與100μl肽預先溫育1小時。將用RF包被的培養板用5XBSA封閉24小時。將PAP/肽混合物(100μl)與RF包被的培養板一起溫育30分鐘。應用RF(100μl的200I.U.標準，由ResearchDiagnostics提供)作為陰性對照。洗滌并與ABTS底物(QuidelCorp.，SanDiego，CA)溫育15分鐘后，培養板在405nm處讀數。結果在表8中顯示。表8所測試的所有的肽導致相似的抑制率，其中APPDCAWHLGELVWCT(SEQIDNO16)提供最好的抑制。實施例6-應用添加的肽抑制Clq與免疫復合物的結合.PAP復合物如在實施例5中所描述的那樣制成，并取100μl與100μl的肽或人Clq(QuidelCorp.)預先溫育1小時。將Clq/PAP和肽/PAP混合物(100μl)與Clq包被的培養板一起溫育30分鐘。洗滌后，將培養板與ATBS(QuidelCorp.)溫育15分鐘，并在405nm讀數。結果在表9中顯示。如在實施例5中一樣，APPDCAWHLGELVWCT(SEQIDNO16)導致對Clq結合的最大抑制，幾乎相當于Clq自身。肽APPCARHLGELVWCT(SEQIDNO14)給出次最好的結果。表9實施例7-通過添加的肽抑制RF與單體IgG的結合.測試添加的肽抑制RF與單體IgG結合的能力。應用標準的類風濕因子商業測試(ResearchDiagnostics，NewJersey)，其具有下述修改將100μl測試肽與人單體IgG(ResearchDiagnostics，NewJersey)預先溫育1小時。然后洗滌培養板，并且與測試試劑盒提供的200I.U.類風濕因子陽性對照物一起溫育。按照制造者的用法說明進行余下的測試。結果在表10中顯示。肽DCAWHLGELVWCT(SEQIDNO2)導致對RF與單體IgG結合的最大抑制，其次是肽DCAFHLGELVWCT(SEQIDNO3)。表10實施例8-通過添加的肽抑制FcR與PAP的結合.將Falcon微量滴定板用高度純化的FcγIIa，FcγIIb和FcγIII的1∶10稀釋液包被，密封，并在4℃溫育1年。洗滌培養板，然后用5XBSA封閉溶液(AlphaDiagnosticInternational，SanAntonio，Texas)封閉24小時。按在實施例5中描述的那樣形成PAP免疫復合物。將PAP(100μl)與100μl肽預先溫育1小時。將PAP/肽混合物添加到FcR包被的培養板中，并溫育1小時。洗滌后，將培養板與ABTS底物溫育15分鐘，并在405nm處讀數。結果在表11中顯示。肽APPDCAWHLGELVWCT(SEQIDNO16)似乎導致對FcR與PAP結合的最大抑制，其次是肽DCAWHLGELVWCT(SEQIDNO2)。表11實施例9-在膠原誘導的關節炎鼠科模型中體內測定FD5的治療功效.DBA/1J小鼠獲得于Jackson實驗室(BarHarbor，ME)，并且保持檢疫隔離4天，每天檢查。一旦確定動物是明顯的健康良好的，就將它們從檢疫隔離中釋放出來進行常規培養。在第-2天，將10mg膠原(SigmaChemicalCo.，St.Louis，MO)溶解在5ml0.01M醋酸中，并且在4-8℃攪拌過夜。在第-1天，通過將10.6mg結核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis，Difco)懸浮在5.3ml角鯊烯中制備佐劑。將混懸液勻漿一整天。在第0天，將3.7ml的佐劑混懸液用3.7ml的膠原溶液乳化。將小鼠耳朵標記以用于識別的目的，稱重，并用異氟醚(isoflurane)麻醉。將90只“患病”鼠真皮下注射0.05ml的佐劑/膠原乳劑。10只對照小鼠(“無病”)獲得0.01M醋酸/角鯊烯的真皮下注射。沒有觀察到關于注射的不利反應，并且將所述動物放回常規培養。在第6和13天制備膠原和佐劑的新鮮制劑。在第7和14天，將小鼠麻醉，并且按照第0天它們被注射那樣進行注射。同樣，在每次注射后沒有記錄到對注射方法不利的反應。從第15天開始每天檢驗小鼠的關節炎癥狀。在第21天，在3只小鼠身上觀察到第一次癥狀(一個腫脹的腳趾)。到第31天，50％的患病小鼠有癥狀，而無病小鼠沒有一只有癥狀。按下述對每一只個體小鼠記分關節炎癥狀的程度0，正常；2.5，輕微的病灶性慢性侵蝕性的骨性關節炎；5，中度的病灶性化膿性侵蝕性的骨性關節炎；10，中度的多病灶性慢性侵蝕性的骨性關節炎。在第32天，將患病小鼠稱重，對關節炎癥狀進行記分，并分成9個治療組，每組10只小鼠。每組具有相似的平均關節炎指數。從每只小鼠身上采集血液用于標準化學/CBC分析。具有在SEQIDNOS14和2中提出的氨基酸序列的多肽“ID14”和“ID2”，分別獲得于SigmaGenosys(TheWoodlands，TX)。在第32天，將305.2mgID14溶解于91.7mlpH7.4的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)中，產生3.33mg/ml的溶液。將248.7mgID2溶解于74.7mlPBS中，以產生3.33mg/ml的溶液。將這些溶液等分并在-20℃凍存備用。REMICADE獲得于Centocor(Malvern，PA)。通過在30.03mlPBS中溶解100mgREMICADE制備3.33mg/ml的溶液。將這種溶液的等分試樣保存-20℃。通過在15mlPBS中溶解14.1mg制備21-半琥珀酸脫氫皮質甾醇酯的溶液。在環境溫度下保存等分試樣。采血后，將90只患病小鼠分成9組，每組10只小鼠。將這些組每組分別以30ml/kg的體積量皮下注射賦形劑，1mg/kgID14，10mg/kgID14，100mg/kgID14，1mg/kgID2，10mg/kgID2，100mg/kgID2，3mg/kg潑尼松龍，或10mg/kgREMICADE。從第33天到第47天每天稱重小鼠并對關節炎癥狀記分。另外，如在第32天那樣，小鼠獲得賦形劑，ID14，ID2，潑尼松龍，或REMICADE的每日注射。每天檢驗注射位點，并沒有觀察到不利反應。在第48天，將小鼠稱重，并對關節炎癥狀記分。將所有的動物麻醉并放血，用于標準化學/CBC分析。將后肢移除并置于10％緩沖的福爾馬林中用于組織學分析，以檢驗包括滑膜、關節軟骨、關節周組織和骨骼的炎性損傷的程度。應用下述數值對每個后肢的分析進行等級評分0，正常；2.5，輕微的病灶性慢性侵蝕性骨性關節炎；5，中度的病灶性化膿性侵蝕性骨性關節炎；10，中度的多病灶性慢性侵蝕性骨性關節炎。表12體內關節炎研究對于在治療的最后3天的各組的平均關節炎指數的計算揭示出，施用1mg/kg和10mg/kgID14導致26-29％的關節炎癥狀逆轉(圖4A和表12)。100mg/kg劑量的ID14對所述疾病沒有顯著的作用。1，10，或100mg/kgID2的每日注射導致關節炎癥狀的劑量-依賴型逆轉(圖4B和表12)。使用10mg/kg劑量觀察到37％的最大抑制。通過比較，相對于賦形劑-治療的患病大鼠，使用潑尼松龍的治療防止關節炎癥狀的進一步發展(圖4C和表12)。在使用潑尼松龍治療8天后，觀察到63％的關節炎癥狀的最大逆轉。相反，使用REMICADE治療對于關節炎癥狀沒有作用(圖4C)。因此，多肽ID2和ID14能夠逆轉這些動物中的關節炎癥狀。小鼠后肢的組織學檢驗揭示出，以1mg/kg，10mg/kg和100mg/kg施用ID2導致44-78％的關節炎癥狀逆轉(表12)。每日注射1mg/kg，10mg/kg，和100mg/kg的ID14沒有顯著作用。使用潑尼松龍的治療導致44％的關節炎癥狀逆轉。相反地，使用REMICADE治療對于關節炎的組織學癥狀沒有作用。因此，多肽ID2能夠逆轉這些動物中的關節炎癥狀。實施例10-在小鼠RA模型中評估Fc-介導的免疫復合物形成的抑制的體內測定法.還在CII-誘導的關節炎動物模型中測試本發明多肽的抑制作用。將易得關節炎的DBA/1小鼠真皮內注射100μg在完全弗氏佐劑中乳化的牛CII。60天后，這些小鼠典型地發展RA-類似的疾病。將小鼠分成3組(1)對照組，其期望發展關節炎；(2)治療組，其在CII免疫時用本發明的多肽或化合物治療；和(3)治療組，其在CII免疫后45-60天，在已經開始表現出關節炎跡象的小鼠中開始用本發明的多肽或化合物治療。監測治療之前和之后的關節炎癥狀，以確定本發明的多肽和化合物的體內功效。實施例11-在小鼠SLE模型中評估Fc-介導的免疫復合物形成的抑制的體內測定法.MRL/MpJ-Fas(MRL/lpr)小鼠發展一種在血清學上和病理學上與人SLE相似的綜合征。這些小鼠具有高水平的對諸如單鏈和雙鏈DNA的核抗原的IgG自體抗體，并且，由于體內免疫復合物形成以及在腎臟的腎小球中的沉積，還表現出漸進的腎小球腎炎。在第7周齡，將MRL/lpr小鼠每兩周注射一次本文所描述的多肽進行治療。每周測量一次蛋白尿水平，持續40周，以確定使用所述多肽治療的動物是否具有更低的蛋白尿水平。40周后，進行腎臟活體解剖來確定治療的動物是否具有更少的腎小球腎炎和/活IgG免疫復合物沉積。另外，計算平均存活率，以確定所述治療的動物的平均存活率是否增加了。應用另外一種SLE鼠科模型，(NZBxNZW)F1小鼠，實行相似的研究。其它實施方案應該理解盡管已經結合其詳細描述對本發明進行了描述，前述描述意欲舉例說明并不縮小本發明的范圍，其由附加的權利要求的范圍定義。其它方面、優點和修改在下述權利要求的范圍內。權利要求1.一種用于抑制受試者中免疫復合物形成的方法，所述方法包括給所述受試者施用一種包含純化的多肽的組合物，所述多肽包括氨基酸序列Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO8)，其中Xaa為Arg、Trp、Tyr或Phe。2.權利要求1的方法，其中所述免疫復合物形成與類風濕性關節炎相關。3.權利要求2的方法，其還包括對于類風濕性關節炎的臨床或分子特征對所述受試者進行監測的步驟。4.權利要求1的方法，其中所述多肽還包括末端穩定基團。5.權利要求4的方法，其中所述末端穩定基團位于所述多肽的氨基端，并且是具有氨基酸序列Xaa-Pro-Pro的三肽，其中Xaa為任何氨基酸。6.權利要求5的方法，其中所述Xaa是Ala。7.權利要求4的方法，其中所述末端穩定基團位于所述多肽的羧基端，并且是具有氨基酸序列Pro-Pro-Xaa的三肽，其中Xaa為任何氨基酸。8.權利要求7的方法，其中所述Xaa是Ala。9.權利要求4的方法，其中所述末端穩定基團是小的穩定蛋白。10.權利要求9的方法，其中所述小的穩定蛋白包括4螺旋束拓撲結構。11.權利要求9的方法，其中所述小的穩定蛋白是Rop。12.權利要求1的方法，其中所述多肽還包括在所述氨基酸序列的氨基端的添加的氨基酸。13.權利要求12的方法，其中所述添加的氨基酸是除Cys外的任何氨基酸。14.權利要求12的方法，其中所述添加的氨基酸是Asp。15.權利要求1的方法，其中所述多肽具有約10-約50個氨基酸的長度。16.權利要求1的方法，其中所述多肽包括氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO2)。17.權利要求1的方法，其中所述多肽包括氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Asp-Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO32)。18.一種用于治療類風濕性關節炎的方法，其中所述方法包括鑒別患有類風濕性關節炎或處在形成類風濕性關節炎的危險中的個體，以及給所述個體施用包含純化的多肽的組合物，所述多肽包括氨基酸序列Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO8)，其中Xaa為Arg、Trp、Tyr或Phe。19.權利要求18的方法，其還包括對于類風濕性關節炎的臨床或分子特征對所述受試者進行監測的步驟。20.權利要求18的方法，其中所述多肽還在所述氨基酸序列的氨基端包括Asp。21.權利要求18的方法，其中所述多肽還包括末端穩定基團。22.權利要求21的方法，其中所述末端穩定基團位于所述多肽的氨基端，并且是具有氨基酸序列Xaa-Pro-Pro的三肽，其中Xaa為任何氨基酸。23.權利要求22的方法，其中所述Xaa是Ala。24.權利要求21的方法，其中所述末端穩定基團位于所述多肽的羧基端，并且是具有氨基酸序列Pro-Pro-Xaa的三肽，其中Xaa為任何氨基酸。25.權利要求24的方法，其中所述Xaa是Ala。26.權利要求21的方法，其中所述末端穩定基團是小的穩定蛋白。27.權利要求26的方法，其中所述小的穩定蛋白包括4螺旋束拓撲結構。28.權利要求26的方法，其中所述小的穩定蛋白是Rop。29.權利要求18的方法，其中所述多肽具有約10-約50個氨基酸的長度。30.權利要求18的方法，其中所述多肽包括氨基酸序列Asp-Cys-Ala-Trp-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO2)。31.權利要求18的方法，其中所述多肽包括氨基酸序列Trp-Glu-Ala-Asp-Cys-Ala-Xaa-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-Lys-Val-Glu-Glu(SEQIDNO32)。32.一種純化的多肽，其包含氨基酸序列Xaa1-Pro-Pro-Cys-Ala-Xaa2-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO12)，其中Xaa1為任何氨基酸和Xaa2為Arg、Trp、Tyr或Phe。33.權利要求32的純化的多肽，其中Xaa1為Ala。34.一種組合物，其包含權利要求32的多肽。35.一種純化的多肽，其包含氨基酸序列Cys-Ala-Phe-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr(SEQIDNO9)。36.權利要求35的純化的多肽，其中所述多肽包括不多于約20個氨基酸。37.權利要求35的純化的多肽，其中所述還多肽包括末端穩定基團。38.權利要求37的純化的多肽，其中所述末端穩定基團位于所述多肽的氨基端，并且是具有氨基酸序列Xaa-Pro-Pro的三肽，其中Xaa為任何氨基酸。39.權利要求38的純化的多肽，其中所述Xaa是Ala。40.權利要求37的純化的多肽，其中所述末端穩定基團位于所述多肽的羧基端，并且是具有氨基酸序列Pro-Pro-Xaa的三肽，其中Xaa為任何氨基酸。41.權利要求40的純化的多肽，其中所述Xaa是Ala。42.權利要求37的純化的多肽，其中所述末端穩定基團是小的穩定蛋白。43.權利要求42的純化的多肽，其中所述小的穩定蛋白包括4螺旋束拓撲結構。44.權利要求42的純化的多肽，其中所述小的穩定蛋白是Rop。45.權利要求35的純化的多肽，其還在所述氨基酸序列的氨基端包括Asp。46.一種組合物，其包含權利要求35的多肽。47.一種純化的多肽，其氨基酸序列由下列序列組成(Xaa1)n-Xaa2-Cys-Ala-Xaa3-His-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Leu-Val-Trp-Cys-(Xaa7)n(SEQIDNO1)，其中Xaa1不存在或為任何氨基酸，Xaa2為Phe或Arg，Xaa3為任何氨基酸，Xaa4為Gly或Ala，Xaa5為Glu或Ala，以及Xaa6為任何非芳族氨基酸。48.一種純化的多肽，其氨基酸序列由下列序列組成(Xaa1)n-Cys-Ala-Xaa2-His-Leu-Gly-Glu-Leu-Val-Trp-Cys-Thr-(Xaa3)n(SEQIDNO35)，其中Xaa1為任何氨基酸，Xaa2為Arg、Trp、Tyr或Phe，Xaa3為任何氨基酸，以及n為0、1、2、3、4或5。49.一種純化的多肽，其氨基酸序列由下列序列組成(Xaa1)n-Cys-Ala-Xaa2-His-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Leu-Val-Trp-Cys-Xaa6-(Xaa7)n(SEQIDNO34)，其中Xaa1為任何氨基酸，Xaa2為Phe或Arg，Xaa3為任何氨基酸，Xaa4為Gly或Ala，Xaa5為Glu或Ala，Xaa6為任何非芳族氨基酸，Xaa7為任何氨基酸，以及n為0、1、2、3、4或5。全文摘要描述了能夠特異性結合于免疫球蛋白分子C文檔編號C07K14/47GK1950394SQ200580007711公開日2007年4月18日申請日期2005年3月10日優先權日2004年3月10日發明者N·M·博迪,E·奧爾特曼申請人:三一治療公司