一種治療膝骨性關節炎的中藥復方及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種治療膝骨性關節炎的中藥復方及其制備方法，由如下重量份比例的生藥制備而成：五加皮，40～60份；三七，50～70份；杜仲，40～60份；過山龍，20～30份；木香，20～30份；紅花，20～30份；竹根七，15～25份；牛膝，20～30份；伸筋草，5～15份；當歸，60～80份；丹參和珠子參共40～60份，二者重量份之比為3～5:1。本發明提供的中藥復方經藥理實驗證明對膝骨性關節炎具有顯著的治療作用；本發明提供的中藥活性成分浸膏通過本發明提供的中藥復方經提取、濃縮制備而成，對膝骨性關節炎具有顯著的治療作用；本發明提供的中藥復方制劑含有本發明提供的中藥活性成分浸膏和藥學上可以接受的輔料載體，可以用于治療膝骨性關節炎。
【專利說明】
一種治療膝骨性關節炎的中藥復方及其制備方法
技術領域
[0001] 本發明屬于中藥領域，涉及一種中藥復方，具體涉及一種治療膝骨性關節炎的中 藥復方及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 膝骨性關節炎是一種以退行性病理改變為基礎的疾患，多患于中老年人群，主要 病理特征是關節軟骨的退變，其癥狀多表現為膝蓋紅腫痛、上下樓梯痛、坐起立行時膝部酸 痛不適等。也會有患者表現腫脹、彈響、積液等，如不及時治療，則會引起關節畸形，殘廢。在 膝關節部位還常患有膝關節滑膜炎、韌帶損傷、半月板損傷、膝關節游離體、胭窩囊腫、髕骨 軟化、鵝足滑囊炎、膝內/外翻等關節疾病。
[0003] 膝骨性關節炎的發生一般由膝關節退行性病變、外傷、過度勞累等因素引起。膝骨 性關節炎多發于中老年人，是引起老年人腿疼的主要原因。另外，體重過重、不正確的走路 姿勢、長時間下蹲、膝關節的受涼受寒也是導致膝骨性關節炎的原因。
[0004] 研究者通過對關節軟骨生化成份的研究表明：年幼者關節軟骨硫酸軟骨素含量較 高，軟骨的剛性與彈性較高;而年長者硫酸角質素和蛋白質的含量及纖維化程度增高;硫酸 軟骨素減少可能是軟骨退變的重要原因之一。
[0005] 目前的治療方案包括：
[0006] 1、防止軟骨進一步磨損。軟骨保護劑如硫酸氨基葡萄糖能促進軟骨的合成、抑制 關節軟骨的分解，同時還具有抗炎作用。硫酸氨基葡萄糖中富含的硫酸根也是合成軟骨基 質的必需成分之一。此類藥物能夠緩解疼痛癥狀，改善關節功能，長期服用還能夠遲滯關節 結構的破壞。硫酸氨基葡萄糖起效較慢，但藥物安全性佳，適合作為基礎治療用藥長期服 用。
[0007] 2、關節鏡治療膝骨性關節炎。將直徑5_的棒狀光學內窺鏡，通過關節間隙置入關 節腔內，并將病變部位和組織放大4~6倍顯示在監控器上，利用細小的工具修復關節軟骨， 并對關節腔進行清理。
[0008] 臨床上還缺少對膝骨性關節炎治療顯著的中藥復方。

【發明內容】

[0009] 本發明的第一目的在于提供一種中藥復方，用于治療膝骨性關節炎；
[0010] 本發明的第二目的在于提供一種利用上述中藥復方制備的中藥活性成分浸膏，用 于治療膝骨性關節炎；
[0011] 本發明的第三目的在于提供一種治療膝骨性關節炎的中藥復方制劑，含有上述的 中藥活性成分浸膏和藥學上可以接受的輔料。
[0012] 本發明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現的：
[0013] -種治療膝骨性關節炎的中藥復方，由如下重量份比例的生藥制備而成:五加皮， 40~60份；三七，50~70份;杜仲，40~60份;過山龍，20~30份;木香，20~30份；紅花，20~ 30份;竹根七，15~25份；牛膝，20~30份;伸筋草，5~15份；當歸，60~80份;丹參和珠子參 共40~60份，二者重量份之比為3~5:1。
[0014]進一步地，所述中藥復方由如下重量份比例的生藥制備而成:五加皮，50份;三七， 60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花，25份;竹根七，20份;牛膝，25份;伸筋草， 10份;當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量份之比為4:1。
[0015]進一步地，所述中藥復方由如下重量份比例的生藥制備而成:五加皮，40份;三七， 50份;杜仲，40份;過山龍，20份;木香，20份;紅花，20份;竹根七，15份;牛膝，20份;伸筋草，5 份;當歸，60份;丹參和珠子參共40份，二者重量份之比為3:1。
[0016]進一步地，所述中藥復方由如下重量份比例的生藥制備而成:五加皮，60份;三七， 70份;杜仲，60份;過山龍，30份;木香，30份;紅花，30份;竹根七，25份;牛膝，30份;伸筋草， 15份;當歸，80份;丹參和珠子參共60份，二者重量份之比為5:1。
[0017] -種治療膝骨性關節炎的中藥活性成分浸膏，由上述中藥復方制備而成，包括如 下步驟：取配方量的生藥用50~90%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密度為 1.03~1.30，噴霧干燥得浸膏粉。
[0018] 進一步地，取配方量的生藥用70%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液。
[0019] 進一步地，濃縮至密度為1.10~1.20。
[0020]進一步地，每克浸膏粉相當于生藥3~6g。
[0021] 一種治療膝骨性關節炎的中藥復方制劑，含有上述中藥活性成分浸膏和藥學上可 以接受的輔料，按照常規方法制備成制劑。
[0022 ]進一步地，所述制劑包括顆粒劑、片劑、膠囊劑、注射液、口服液。
[0023]本發明的優點：
[0024] 1、本發明提供的中藥復方經藥理實驗證明對膝骨性關節炎具有顯著的治療作用；
[0025] 2、本發明提供的中藥活性成分浸膏通過本發明提供的中藥復方經提取、濃縮制備 而成，對膝骨性關節炎具有顯著的治療作用；
[0026] 3、本發明提供的中藥復方制劑含有本發明提供的中藥活性成分浸膏和藥學上可 以接受的輔料載體，可以用于治療膝骨性關節炎。
【具體實施方式】
[0027]下面結合實施例進一步說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對 本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。
[0028]實施例1:活性成分浸膏的制備
[0029] 生藥配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量 份之比為4:1。
[0030] 制備方法:取配方量的生藥用70%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.15,噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥4.5g。
[0031] 實施例2:活性成分浸膏的制備
[0032] 生藥配方：五加皮，40份;三七，50份;杜仲，40份;過山龍，20份;木香，20份;紅花， 20份;竹根七，15份;牛膝，20份;伸筋草，5份；當歸，60份;丹參和珠子參共40份，二者重量份 之比為3:1。
[0033] 制備方法:取配方量的生藥用50%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.10,噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥3g。
[0034]實施例3:活性成分浸膏的制備
[0035] 生藥配方：五加皮，60份;三七，70份;杜仲，60份;過山龍，30份;木香，30份;紅花， 30份;竹根七，25份；牛膝，30份;伸筋草，15份；當歸，80份;丹參和珠子參共60份，二者重量 份之比為5:1。
[0036] 制備方法:取配方量的生藥用90%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.20，噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥6g。
[0037]實施例4:活性成分浸膏的制備
[0038] 生藥配方：五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量 份之比為3:1。
[0039] 制備方法:取配方量的生藥用70%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.15,噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥4.5g。
[0040]實施例5:活性成分浸膏的制備
[0041 ] 生藥配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量 份之比為5:1。
[0042] 制備方法:取配方量的生藥用70%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.15,噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥4.5g。
[0043]實施例6:活性成分浸膏的制備
[0044] 生藥配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量 份之比為2:1。
[0045] 制備方法:取配方量的生藥用70%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.15,噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥4.5g。
[0046]實施例7:活性成分浸膏的制備
[0047] 生藥配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量 份之比為6:1。
[0048] 制備方法:取配方量的生藥用70%乙醇熱回流提取2~3次，合并提取液，濃縮至密 度為1.15,噴霧干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相當于生藥4.5g。
[0049] 實施例8:對膝骨性關節炎的治療作用
[0050] 1、材料與方法
[0051 ] 1.1動物
[0052] 10月齡普通級日本大耳白兔84只，體重2.9~3. lkg，雌雄不限。由貴陽醫學院實驗 動物中心提供，飼料由該中心提供標準飼料。
[0053] 1.2試劑與樣品
[0054] 分別按實施例1~7方法制備活性成分浸膏1~7。木瓜蛋白酶(Papain) :Merk公司 廣品；硫酸軟骨素標準品：Sigma公司廣品；膜蛋白酶、胃蛋白酶、HC1、NaOH、尚嶺土、活性炭、 95%乙醇、乙醚。
[0055] 1.3儀器
[0056] 骨科常用手術器械、溫度計、濾紙、分液漏斗、離心機、干燥器、試管、恒溫水浴箱、 冷凍庫、紫外分光光度計、間苯三酚、冰醋酸、超聲波清洗機、全自動電子分析天平。
[0057] 1.4白兔分組及模型制備
[0058]按照組間均衡一致的原則，將84只日本大耳白兔隨機分成7組，分別為正常對照 組、模型對照組、活性成分浸膏1組(80mg · kg-1)、活性成分浸膏4組(80mg · kg-1)、活性成分 浸膏5組(80mg · kg-"、活性成分浸膏6組(80mg · kg-"、活性成分浸膏7組(80mg · kg-每 組12只。適應環境1周后，按照兔膝關節腔內注入木瓜蛋白酶造成骨關節炎病變模型方法， 將日本大耳白兔右膝關節腔內注入1.6 %木瓜蛋白酶生理鹽水溶液0.5ml，隔2d后再注射第 2次，再隔2d后注射第3次，共注射3次。60只健康日本大耳白兔正常飼養1周后，模型組、活性 成分浸膏組按上述造模方法造模。于末次造模注射后的第28d開始，模型組給予 0.9NS8.4ml/(kg · d)灌胃每天一次，正常組按正常飼養4、8、12周后，正常組、模型組、活性 成分浸膏組每次4只取軟骨后宰殺，留取標本。
[0059] 1.5硫酸軟骨素的提取
[0060] (1)高溫蒸煮與堿解:將軟骨投入恒溫蒸煮器內于80°C煮4~6h，蒸餾水洗凈，放入 冷庫于-25°(：速凍6~811后立即絞碎，稱重后按原料與2%他0!1的比例為1 :6.25的量加入2% NaOH，室溫提取1.5h，然后用2mol/LHCl調pH到6~6.5，定量濾紙、漏斗過濾。留下濾液。濾渣 再以1:0.12的比例加2 % NaOH，于40 °C下提取lh，再用定量濾紙過濾，棄濾渣，取濾液。合并 兩次濾液，并測量體積待用。
[0061 ] (2)酶解:濾液用2mol/L HC1調pH到8·0~9·0，按濾液與胰蛋白酶1000:0·5的比例 加入胰酶，于40~50°C水解lh后，再按1000:0.5的比例加入胃蛋白酶，40~50°C水解1.5h。 水解完畢后定量濾紙過濾并加入高嶺土和活性炭(使其濃度為〇. 5% )進行吸附，同時慢速 間歇攪拌4h，置4 °C下自然澄清，取上清液，棄沉淀。
[0062] (3)反萃取:按體積比1:1向上清液中加入氯仿充分混合。
[0063] (4)沉淀：將上述水層，調pH到6.8~7.2，再加入2.5體積95%以上乙醇沉淀，待澄 清后，棄清液，以1500r/min離心7~lOmin，收集沉淀，其沉淀物即為硫酸軟骨素。
[0064] (5)干燥:將上述沉淀于盛有五氧化二磷的干燥器中即得成品。
[0065] 1.6硫酸軟骨素質量的測定
[0066] 原理:利用硫酸軟骨素（CS)與含有間苯三酚的無機酸在100°C反應30min，生成有 色物質在波長558nm處有最大吸收，通過比色測定硫酸軟骨素的含量。
[0067] (1)硫酸軟骨素標準溶液的配制：準確稱取已干燥至恒重的硫酸軟骨素0.25g，于 25ml量瓶中，加蒸鎦水使其溶解稀釋至刻度并搖勻。
[0068] (2)間苯三酚溶液(反應試劑）的配制：取冰醋酸30ml，鹽酸40ml和50mg/ml間苯三 酚乙醇溶液l〇ml混合(臨用時配制）。
[0069] (3)吸收光譜的測定:準確吸取硫酸軟骨素標準溶液0.4ml，置于10ml量瓶中，用蒸 餾水稀釋至1.0ml，加入間苯三酚溶液3ml，蓋塞后混勻。將量瓶置于沸水浴中加熱30min后 取出，立即置于冰水浴中冷卻5min，用冰醋酸稀釋至刻度，混勻，以試劑空白為參比，在400 ~800nm波長范圍內掃描。見在波長558nm處有最大吸收。選擇波長558nm作為測定波長。
[0070] (4)繪制標準曲線:吸收硫酸軟骨素標準溶液，分別配制濃度為0.1、0.2、0.3、0.4、 0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0011^/1111溶液，同（3)步操作，在波長55811111處測定吸收度，以吸收 度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。得其回歸方程。
[0071] (5)硫酸軟骨素(CS)的樣品測定:取105°C干燥至恒重的硫酸軟骨素(CS)的樣品， 精密稱定其質量，置l〇〇ml量瓶中，加蒸餾水適量溶解，并加蒸餾水至刻度，搖勻。取lml溶 液，按上述方法測定。
[0072] 1.7統計學方法
[0073]實驗數據用均數土標準差(X土s)表示，應用SPSS18.0版統計軟件進行單因素方差 分析和t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。
[0074] 2、實驗結果
[0075]與正常對照組相比，模型對照組硫酸軟骨素的含量4周有差異(P〈0.05)，8、12周時 有顯著差異(P〈〇.01) ;4、8、12周，活性成分浸膏1組、活性成分浸膏4組、活性成分浸膏5組的 硫酸軟骨素的含量呈上升趨勢;與模型組相比，活性成分浸膏4組、活性成分浸膏5組硫酸軟 骨素測定值8、12周時有差異(P〈0.05)，且隨時間的推移差異逐漸明顯。與模型組相比，活性 成分浸膏1組硫酸軟骨素測定值4、8、12周時都有顯著差異(P〈0.01)。活性成分浸膏6組、活 性成分浸膏7組與模型組差異不明顯。試驗結果見表1。
[0076]表1對膝骨性關節炎模型家兔硫酸軟骨素含量(mg)的影響
[0078] 活性成分浸膏2、3的治療效果分別與活性成分浸膏4、5相似。
[0079] 骨性關節炎的實質是軟骨的退行性改變，其中包括軟骨結構及成分的改變。一系 列的研究證明，無論是人還是動物模型的骨性關節炎病變軟骨，軟骨基質所含的蛋白多糖 漸進性減少，而膠原的含量則相對穩定不變。研究證明，隨著年齡的增長軟骨基質中蛋白多 糖的主要改變表現在:大分子降解成小分子，糖醛的含量減少，硫酸軟骨素和半乳糖胺的比 例降低，而硫酸角質素和蛋白質的比例增高。本發明提供的活性成分浸膏可以升高膝骨性 關節炎模型家兔硫酸軟骨素含量，對膝骨性關節炎具有治療作用，可以開發成治療膝骨性 關節炎的藥物。
[0080] 實施例9:顆粒劑的制備
[0081] 按實施例1方法先制得活性成分浸膏，按其與賦形劑重量比為1:10的比例加入賦 形劑，制成顆粒劑。
[0082] 實施例10:片劑的制備
[0083] 按實施例1方法先制得活性成分浸膏，按其與賦形劑重量比為1:10的比例加入賦 形劑，制粒壓片。
[0084]實施例11:注射液的制備
[0085]按實施例1方法先制得活性成分浸膏，按常規加注射用水，精濾，灌封滅菌制成注 射液。
[0086]實施例12: 口服液的制備
[0087]按實施例1方法先制得活性成分浸膏，按常規口服液制法制成口服液。
[0088]實施例13:膠囊劑的制備
[0089] 按實施例1方法先制得活性成分浸膏，按其與賦形劑重量比為1:10的比例加入賦 形劑，制成膠囊劑。
[0090] 上述實施例的作用在于說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明的保護 范圍。本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發明技術方案的實質和保護范圍。
【主權項】
1. 一種治療膝骨性關節炎的中藥復方，其特征在于，由如下重量份比例的生藥制備而 成：五加皮，40~60份;三七，50~70份;杜仲，40~60份;過山龍，20~30份;木香，20~30份； 紅花，20~30份;竹根七，15~25份;牛膝，20~30份;伸筋草，5~15份；當歸，60~80份;丹參 和珠子參共40~60份，二者重量份之比為3~5:1。2. 根據權利要求1所述的治療膝骨性關節炎的中藥復方，其特征在于，由如下重量份比 例的生藥制備而成:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;過山龍，25份;木香，25份;紅花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；當歸，70份;丹參和珠子參共50份，二者重量 份之比為4:1。3. 根據權利要求1所述的治療膝骨性關節炎的中藥復方，其特征在于，由如下重量份比 例的生藥制備而成:五加皮，40份;三七，50份;杜仲，40份;過山龍，20份;木香，20份;紅花， 20份;竹根七，15份;牛膝，20份;伸筋草，5份；當歸，60份;丹參和珠子參共40份，二者重量份 之比為3:1。4. 根據權利要求1所述的治療膝骨性關節炎的中藥復方，其特征在于，由如下重量份比 例的生藥制備而成:五加皮，60份;三七，70份;杜仲，60份;過山龍，30份;木香，30份;紅花， 30份;竹根七，25份；牛膝，30份;伸筋草，15份；當歸，80份;丹參和珠子參共60份，二者重量 份之比為5:1。5. -種治療膝骨性關節炎的中藥活性成分浸膏，由如權利要求1~4任一所述的中藥復 方制備而成，其特征在于，包括如下步驟:取配方量的生藥用50~90%乙醇熱回流提取2~3 次，合并提取液，濃縮至密度為1.03~1.30，噴霧干燥得浸膏粉。6. 根據權利要求5所述的中藥活性成分浸膏，其特征在于:取配方量的生藥用70%乙醇 熱回流提取2~3次，合并提取液。7. 根據權利要求5所述的中藥活性成分浸膏，其特征在于:濃縮至密度為1.10~1.20。8. 根據權利要求5所述的中藥活性成分浸膏，其特征在于:每克浸膏粉相當于生藥3~ 6g〇9. 一種治療膝骨性關節炎的中藥復方制劑，其特征在于:含有如權利要求5~8任一所 述的中藥活性成分浸膏和藥學上可以接受的輔料，按照常規方法制備成制劑。10. 根據權利要求9所述的中藥復方制劑，其特征在于:所述制劑包括顆粒劑、片劑、膠 囊劑、注射液、口服液。
【文檔編號】A61K36/896GK105832962SQ201610194444
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月31日
【發明人】丁震, 武愛玲, 孫實, 何建玲, 劉運濤, 張宏都
【申請人】河南省洛正制藥廠