一種用于覆蓋燒傷創傷創面的人體生物敷料及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種燒傷創傷創面覆蓋材料及其應用，特別是一種用于覆蓋燒傷創傷 創面的異體皮去抗原降低免疫原性的人體生物敷料及其具體應用。
【背景技術】
[0002] 燒傷是平時和戰爭年代最普遍的皮膚創傷，燒傷后引起的各種損害均與皮膚屏障 作用的破壞與喪失有關。如：新陳代謝加劇、體溫下降、水分過度散失、蛋白質的大量丟失及 內分泌和免疫系統的失調。因此用敷料覆蓋創面，作為臨時體表保護屏障，促進創面愈合， 尤其是大面積燒傷顯得尤為重要。人們早就發現生物材料有助于皮膚創傷的愈合。隨著對 傷口愈合研究不斷的深入，人們逐漸認識到使用敷料的目的遠遠不僅是為了覆蓋創面，敷 料還應能夠促進創面愈合。1962年，倫敦大學的Winter博士在Nature雜志上發表著名論 文，論證了濕潤環境對創面的愈合作用。與用聚乙烯膜封閉豬斷層皮膚缺損創面相比，暴露 在空氣中的創面再上皮化概率增加50%，隨后的國內外大量臨床實踐和基礎研究都支持這 一觀念。
[0003] 近40年來國內外研制開發了多種暫時性創面覆蓋敷料，并廣泛應用于臨床。目前 臨床使用的暫時性創面覆蓋敷料主要包括：傳統敷料、合成敷料、天然生物敷料三大類。而 燒傷創面覆蓋材料的選擇是燒傷治療，特別是大面積燒傷創傷救治中重要的一環。
[0004] 傳統敷料如紗布、棉墊等存在以下缺點：①無法保持創面濕潤，創面愈合延遲； ②敷料纖維易脫落，造成異物反應，影響愈合；③創面肉芽組織易長入敷料的網眼中，換藥 時可引起疼痛；④敷料被浸透時，病原體易通過；⑤換藥時，易損傷新生的組織；⑥換藥工 作量大。
[0005] 在合成敷料中，薄膜類合成敷料如Tegaderm、Dermafilm、Oprafiex、Opsite等產 品的水蒸汽透過率太低，容易積液，可誘發或加重感染。泡沫型合成敷料如Al levyn、Ixralo 等產品孔隙大，創面肉芽組織易長入，造成脫膜困難從而帶來再次創傷，且易受細菌污染， 易遺留殘屑于創面。噴霧型合成敷料如Hydron、Aeroplast等產品存在以下缺點：粘附性 和抗張強度較差；保濕性差，創面水分蒸發量大；噴霧膜的水溶性可使其被創面滲液軟化， 保持時間短；無控制感染作用，用于污染創面易發生膜下感染。水凝膠類敷料如Duoderm、 Comfeel、Restore、Intrasite等產品的機械性能太差，在大量吸收滲出物后可因膠體的膨 脹而導致敷料與傷口分離，給細菌的侵入繁殖提供了機會。
[0006] 天然生物敷料包括自體皮、同種異體皮（簡稱異體皮）、輻照豬皮（異種皮）、羊 膜、無細胞真皮基質、膠原類敷料等。目前覆蓋創面最理想的方法是移植自體皮，但是燒傷 面積超過50%的大面積燒傷患者，自體皮源顯得嚴重不足。同種異體皮膚是近40年來被證 實較為有效的皮膚代用品之一，是一種比較理想的創面覆蓋物，具有較佳的皮膚屏障功能。 異體皮的透濕性、粘附性與自體皮膚相似，能阻止細菌入侵和阻止創面水、電解質、蛋白質 及熱量的丟失，且具有良好的止血和促進上皮化功能。
[0007] 異體皮在燒傷領域的應用已有很長的歷史，在燒傷治療中具有減輕患者痛苦，促 進創面愈合的作用。1966年Cochrane最早將冰凍保存異體皮（cryopreserved allograft, CPA)應用于燒傷創面獲得成功，但CPA的處理及保存相當麻煩，且抗原性較強，排異快， 在臨床上無法推廣應用。1984年后一種改良的甘油保存異體皮（glycerol preserved al lograft，GPA)開始在臨床上應用，與CPA皮相比，GPA易于生產和保存，抗原性較低，抗感 染能力也較強，存活時間顯著延長，在臨床上得到了較廣泛的推廣應用。但目前現有的異體 皮存在保存條件要求高、抗原性、有占位性、病原微生物易感染等臨床問題。特別是由于其 存在的抗原性而造成的明顯免疫排斥反應，一般2-3周左右溶解、脫落，創面裸露，影響一 期愈合。近年來隨著生物技術的發展，更為新型的異體皮人體生物敷料開始進人臨床。

【發明內容】

[0008] 為了克服現有技術的不足，本發明提供了一種用于覆蓋燒傷創傷創面的人體生 物敷料，本發明利用異體皮作為原材料，通過生物學、生物化學等手段對異體皮進行了去抗 原降低免疫原性處理，保留了真皮與表皮，與GPA相比，其免疫排斥反應延遲，應用及保存 更為簡便。產品不僅達到了早期覆蓋創面的目的，而且還能夠促進創面愈合，臨床應用未發 現明顯的免疫排斥反應及全身炎癥反應。
[0009] 本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種用于覆蓋燒傷創傷創面的人體 生物敷料半成品和覆蓋燒傷創傷創面的人體生物敷料，其中，人體生物敷料半成品的制備 方法包括下述步驟1-10,人體生物敷料的制備方法包括下述步驟1-11，具體為按順序進行 的下列步驟：
[0010] 步驟[1]按每平方厘米異體皮取0. 5-3ml的比例取相應量的質量分數為 0. 25% -3%的戊二醛溶液，將異體皮放入所取戊二醛溶液中，浸泡15-60分鐘；更換戊二醛 溶液，繼續浸泡15-30分鐘；取出異體皮，按每平方厘米異體皮取0. 5-3ml的比例取相應量 的質量分數為〇. 5% -1. 5 %的氯化鈉溶液，將異體比放入所取氯化鈉溶液中，浸泡30-120 分鐘，取出異體皮得到半成品A ;
[0011] 步驟[2]將半成品A按所需規格進行分割，用取皮鼓對分割后的半成品A進行反 取，去除殘存的脂肪組織，得半成品B ;
[0012] 步驟[3]按每平方厘米半成品B取0. 5-3ml的比例取相應量的純化水，將半成品B 和所取純化水置于同一容器中，放置于搖床震蕩15-60分鐘，更換純化水，再次置于搖床震 蕩15-60分鐘。重復以上步驟，直至置換出的純化水的pH值在5. 5-6. 5之間時，棄去純化 水，得半成品C ;
[0013] 步驟[4]按每平方厘米半成品C取0.5-3ml的比例取相應量的質量分數為 0. 05%-0. 3%的聚山梨酯80溶液，將半成品C及所取聚山梨酯80溶液置于同一容器中，放 置于搖床震蕩15-60分鐘，更換聚山梨酯80溶液，再次置于搖床震蕩15-60分鐘。重復以 上步驟，直至置換出的聚山梨酯80溶液的pH值在6. 0-7. 0之間時，棄去聚山梨酯80溶液， 得半成品D ;
[0014] 步驟[5]按每平方厘米半成品D取0. 5-3ml的比例取相應量的純化水，將半成品D 和所取純化水置于同一容器中，放置于搖床震蕩15-60分鐘，更換純化水，再次置于搖床震 蕩15-60分鐘。重復以上步驟，直至置換出的純化水的pH值在5. 5-6. 5之間時，棄去純化 水，得半成品E ;
[0015] 步驟[6]按每平方厘米半成品E取0. 5-3ml的比例取相應量的氨基酸溶液，將半 成品E和所取氨基酸溶液置于同一容器中，置搖床震蕩15-60分鐘，然后靜置15-30分鐘， 棄去氨基酸溶液，得半成品F ;
[0016] 步驟[7]按每平方厘米半成品F取0. 5-3ml的比例取相應量的純化水，將半成品F 和所取純化水置于同一容器中，放置于搖床震蕩15-60分鐘，更換純化水，再次置于搖床震 蕩15-60分鐘。重復以上步驟，直至置換出的純化水的pH值變在6. 0-7. 0之間時，棄去純 化水，得半成品G ;
[0017] 步驟[8]按每平方厘米半成品G取0. 5-3ml的比例取相應量的PBS緩沖液，將半 成品G和所取PBS緩沖液置于同一容器中，放置于搖床震蕩15-60分鐘，然后靜置15-30分 鐘，棄去所使用的PBS緩沖液，得半成品H ;
[0018] 步驟[9]將半成品H的真皮面、表皮面上所有異物清除干凈，若存在直徑為1厘米 以上的孔洞，則用醫用縫線將孔洞縫上，若形狀不規整則將其修剪整齊，得半成品I ;
[0019] 步驟[10]按每平方厘米半成品I取〇.5-3ml的比例取相應量的質量分數為 0. 5% -1. 5%的氯化鈉溶液，然后將半成品I和所取氯化鈉溶液置于同一容器中，放置于搖 床震蕩15-60分鐘，更換氯化鈉溶液，再次置于搖床震蕩15-60分鐘。重復以上步驟，直至 置換出的氯化鈉溶液的pH值在6. 5-7. 5之間時，取出半成品I ;按每1-3平方厘米半成品 I取Iml的比例取相應量的質量分數為0. 5% -1. 5%的氯化鈉溶液，將半成品I和所取氯化 鈉溶液置于同一容器中，靜置浸泡15-60分鐘，棄去溶液，得半成品J ;
[0020] 步驟[11]將半成品J裝入內包裝袋，于內包裝袋中鋪平，將內包裝袋密封，然后裝 入外包裝袋并將其密封，最后經鈷Co 6tl輻照，最終得成品K。
[0021] 上述步驟[1]中所述異體皮來源于健康人體捐獻體的皮膚，其厚度為0. 2-0. 3毫 米，所取異體皮之間的厚度差值不超過〇. 1毫米。
[0022] 上述步驟[6]中所述的氨基酸溶液，其中所含的氨基酸為谷氨酸、丙氨酸、甘氨 酸、天門冬氨酸當中的一種或數種，每1000毫升氨基酸溶液當中，谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、 天門冬氨酸的一種或數種的含量分別各為〇. l_3g。
[0023] 上述步驟[8]中所述的PBS緩沖液的pH值為7. 0-8. 0。
[0024] 上述步驟[9]中所述用醫用縫線逢孔洞時應控制針腳之間的距離不大于1厘米。
[0025] 上述步驟[11]中經鈷Co6tl福照的劑量為：20kGy <輻照劑量< 30kGy。
[0026] 本發明的積