齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體在制備藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體在制備藥物 中的應用。
【背景技術】
[0002] 大黃素別名朱砂蓮甲素，英文名稱Emodin，化學名：1'3'8-三羥基-6-甲基蒽醌， 橙黃色長針狀結晶（丙酮中結晶為橙色，甲醇中結晶為黃色），熔點256°C~257°C。具有 蒽醌的特殊反應。幾乎不溶于水，溶于乙醇及堿溶液。大黃素可用作瀉藥，雖有瀉下活性，但 由于體內易被氧化破壞，實際上瀉下作用很弱，如與糖結合成苷類，則可發揮瀉下作用。大 黃素-1-0-β -D-葡萄糖苷和大黃素-8-0-β -D-葡萄糖苷者是大黃素與葡萄糖結合的苷， 二者只是結合的位置不同，同時存在于大黃中。另有抗菌、止咳、抗腫瘤、降血壓等作用。
[0003] 齊墩果酸為肝病輔助藥，臨床用于治療傳染性急性黃疸型肝炎，具有明顯的降低 谷丙轉氨酶及退黃效果，改善病毒性和慢性迀延性肝炎患者的癥狀，體征和肝功能；還可用 于銀肩病，風濕性關節炎，腎炎水腫，肝硬化腹水，急慢性肝炎，胃痛淋池，血崩，跌打損傷， 癰腫，腰膝酸軟，胎動不安等癥。
[0004] 大黃素為脂溶性，生物利用度低，且給藥后在體內分布廣泛，缺乏靶向性。有學者 將大黃素制成磁性納米脂質體，脂質納米微泡以改善其生物利用度低的缺點。但是普通的 脂質體靶向性效果有待增強，有文獻報道引經藥與靶向給藥有相似性，中醫理論認為，引經 藥可改變其它藥物的作用方向或部位，或使其作用側重或集中于特定的方向和部位。申請 人采用薄膜-超聲分散法制備齊墩果酸-大黃素脂質體，研宄齊墩果酸-大黃素脂質體在 小鼠體內藥代動力學，為研宄其組織分布提供實驗依據，為研宄齊墩果酸是否增強大黃素 脂質體靶向性做鋪墊。

【發明內容】

[0005] 本發明的目的在于提高大黃素的利用率，增強大黃素的在人體內的靶向性，通過 將中藥引經藥中的活性成分齊墩果酸作為表面修飾材料修飾大黃素脂質體，從而提高大黃 素的藥用效率和靶向作用。
[0006] 本發明具體通過以下技術方案實現：
[0007] 本發明提供了齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體的應用。
[0008] 本發明還提供了齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體在制備藥物中的應用。
[0009] 本發明所屬的藥物按照加工需要可以制備成任何醫藥上可接受的劑型，其配置通 常由本領域技術人員公知的加工方法制備，即將活性組分與液體溶劑或者固體載體混合， 在添加至少一種表面活性劑制備而成，其中較優選為片劑、顆粒劑、口服液或膠囊劑。
[0010] 本發明所述的藥物在使用前可由使用者經稀釋或直接使用。
[0011] 本發明所述的齊墩果酸還可與大黃素同時給藥，可以提高大黃素對靶器官的識別 能力，或直接增加大黃素在靶器官的濃集，較大程度降低藥物毒性，進一步提高大黃素脂質 體的靶向性，增強治療效果。
[0012] 本發明的有益效果為：利用齊墩果酸對大黃素脂質體進行修飾，研宄表明齊墩果 酸-大黃素脂質體可延長在小鼠體內循環時間，降低在小鼠體內分布范圍，提高藥物的利 用效率和靶向性。
【附圖說明】
[0013] 圖1是本發明實施例大黃素脂質體組藥時曲線；
[0014] 圖2是本發明實施例齊墩果酸-大黃素脂質體組藥時曲線。
【具體實施方式】
[0015] 下面結合實施例對本發明做進一步的說明，以下所述，僅是對本發明的較佳實施 例而已，并非對本發明做其他形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示 的技術內容加以變更為同等變化的等效實施例。凡是未脫離本發明方案內容，依據本發明 的技術實質對以下實施例所做的任何簡單修改或等同變化，均落在本發明的保護范圍內。
[0016] 對照品：齊墩果酸對照品（中國食品藥品檢定研宄院，批號：);大 黃素對照品（中國食品藥品檢定研宄院，批號：);
[0017] 原料藥：齊墩果酸（南京市澤朗醫藥科技有限公司，批號：ZL11225A，純度98%); 大黃素（西亞試劑，批號：1〇16837,純度98% );
[0018] 其他材料：膽固醇（成都市科龍化工試劑廠，純度99% );大豆卵磷脂（成都市科 龍化工試劑廠，純度99%);
[0019] 動物：雄性昆明小鼠66只，體重20~25g[重慶醫科大學實驗動物中心證號 SCXK-(渝）2007-0001]。
[0020] 大黃素標準品溶液：精密稱取大黃素標準品10. 〇mg，用甲醇溶解并定容至100mL 容量瓶中，配成濃度為〇. lmg/ml標準儲備液，存于4°C，臨用前稀釋為一系列濃度。
[0021] 內標溶液：精密稱取內標1，8-二羥基蒽醌標準品10.0 mg，用甲醇溶解并定容至 100mL容量瓶中，配成濃度為0. lmg/ml標準儲備液，存于4°C，臨用前稀釋為濃度4. Oug/ml。
[0022] PBS溶液：準確稱取磷酸二氫鈉0. lg、磷酸氫鈉0. 78g、氯化鈉4. 10g，溶于400ml 蒸餾水，鹽酸調節pH值至6. 7,蒸餾水定容至500ml。
[0023] 大黃素脂質體的制備：稱取大黃素20.0 mg，卵磷脂263. 2mg，膽固醇15. 7mg，溶于 20ml二氯甲烷中，將混合溶液盛裝于250mL圓底燒瓶，超聲溶解，于40°C水浴下旋轉蒸發， 燒瓶壁內形成類脂質薄膜，加入IOmlPBS (pH = 6. 7)溶液，水合2. 5h，超聲20min，過0. 22um 微孔濾膜，制備大黃素脂質體。
[0024] 齊墩果酸-大黃素脂質體的制備：稱取大黃素10.0 mg，齊墩果酸10.0 mg，卵磷脂 263. 2mg，膽固醇15. 7mg，溶于20ml二氯甲燒中，將混合溶液盛裝于250ml圓底燒瓶，超聲溶 解，于40°C水浴下旋轉蒸發，燒瓶壁內形成類脂質薄膜，加入10ml PBS(pH = 6. 7)溶液，水 合2. 5h，超聲20min，過0. 22um微孔濾膜，制備齊墩果酸-大黃素脂質體。
[0025] 實施例1線性關系
[0026] 取6份空白血漿，依次加入一系列大黃素標準品及4. 0ug/ml內標溶液IOOul，分別 配制成 0· 02、0· 10、0· 50、1· 00、5· 00、8· 00ug/ml 標準血漿樣品。
[0027] 加100ull5%硫酸，渦旋混勻，（70±2) °C水浴加熱水解30min。冷卻，加入乙醚 2. Oml,禍旋5min，4000r/min離心5min，吸取乙醚層，水相用2. Oml乙醚同法再萃取一次， 合并兩次乙醚液，氮氣吹干，殘澄IOOul甲醇溶解。12000r/min離心10min取上清液。按色 譜柱：Thermo Syncronis C18(250_X4. 6mm, 5um)柱；流動相：0· 1%磷酸緩沖溶液：甲醇 =15:85(V/V);紫外檢測波長：254nm ;流速：1.0ml/min ;柱溫：30°C ;進樣20ul測定。
[0028] 以血漿樣品濃度x(ug/ml)為橫坐標，大黃素與內標色譜峰面積比值y為縱坐 標，進行線性回歸，得線性回歸方程為y = 〇. 316x+0. 0055r = 0. 9988,結果表明大黃素在 0.02~8.00ug/ml濃度范圍內有良好線性關系。定量限為0.02ug/ml，檢測限為O.Olug/ ml 〇
[0029] 實施例2藥代動力學研宄
[0030] 取60只健康雄性昆明小鼠，隨機分為a，b兩組，a組為大黃素脂質體組，b組為齊 墩果酸-大黃素脂質體組。禁食12h后，按大黃素劑量5mg/kg，a組尾靜脈注射大黃素脂 質體，b組尾靜脈注射齊墩果酸-大黃素脂質體。給藥后于時間點0. 083h、0. 16h、0. 25h、 0. 5h、lh、2h、4h、6h、12h、24h每組3只小鼠眼眶取血至加有肝素的離心管中，于4000r/min 離心10min，取上清液血漿，于-20°C中保存，待用。
[0031] 精密量取上層血漿IOOul置5ml試管中，加入IOOul內標1，8-二羥基蒽醌（4ug/ ml),加100ull5%硫酸，渦旋混勻，（70±2)°C水浴加熱水解30min。冷卻，加入乙醚2. 0ml， 禍旋5min，4000r/min離心5min，吸取乙醚層，水相用2. Oml乙醚同法再萃取一次，合并兩 次乙醚液，氮氣吹干，殘澄IOOul甲醇溶解。12000r/min離心10min取上清液。按色譜 柱：Thermo Syncronis C18(250mmX4. 6mm, 5um)柱；流動相：0· 1%磷酸緩沖溶液：甲醇= 15:85 (V/V);紫外檢測波長：254nm ;流速：1.0ml/min ;柱溫：30°C ;進樣20ul測定。藥時曲 線如圖1和圖2所示。Kinetica 2000軟件計算藥動學參數，藥動學參數結果見表1。
[0032] 表1大黃素脂質體與齊墩果酸-大黃素脂質體給藥后藥動學參數（η = 3)(元土SD)
[0033]
【主權項】
1. 齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體的應用。
2. 權利要求1所述的齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體在制備藥物中的應用。
3. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于：該藥物制成片劑、顆粒劑、口服液或膠囊 劑。
【專利摘要】本發明提供了齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體的應用，還提供了齊墩果酸用于修飾大黃素脂質體在制備藥物中的應用，該藥物配置通常由本領域技術人員公知的加工方法制備，其中較優選為片劑、顆粒劑、口服液或膠囊劑，利用齊墩果酸對大黃素脂質體進行修飾，可以提高大黃素對靶器官的識別能力，或直接增加大黃素在靶器官的濃集，較大程度降低藥物毒性，進一步提高大黃素脂質體的靶向性，增強治療效果。
【IPC分類】A61K31-122, A61K31-56, A61K47-28
【公開號】CN104667284
【申請號】CN201510061160
【發明人】尚京川, 張夢, 辜鵬程
【申請人】重慶醫科大學
【公開日】2015年6月3日
【申請日】2015年2月6日