本發明涉及一種中藥組合物的新用途，具體為中藥組合物在制備預防或治療阿爾茨海默癥藥物或保健品中的用途。
背景技術：
：阿爾茨海默癥(alzheimer'sdisease,ad)是慢性退行性中樞神經系統變性病導致的癡呆，是癡呆最常見的病因和最常見的老年期癡呆。ad以漸進性記憶障礙、認知功能障礙、人格改變以及語言障礙等神經精神癥狀為特征。alzheimer病是最常見和最重要的腦變性疾病，隨著全球人口老齡化，ad的發病率呈逐年顯著上升趨勢。多數資料顯示65歲以上患病率約為5％，85歲以上為20％，婦女患病率約3倍于男性。目前在世界范圍內約有1500萬人罹患ad，65歲以上老年人中ad發病率以每年0.5％的速度穩定增加，85歲以上老年人則以每年8％的速度增長。嚴重危害老年人的身心健康并影響生存質量，給病人造成深重的痛苦，給家庭及社會帶來沉重的負擔，已成為嚴重的社會問題，引起各國政府和醫學界的普遍關注。作為老年癡呆的主要類型，阿爾茨海默癥的病理特征包括大腦局部尤其是海馬和皮層神經元退行性病變，細胞內神經元纖維纏結和細胞外老年斑沉淀[1,2]。現代醫學對ad的發病機制進行了多年的研究，但是由于其病因復雜，該病的發病機制至今仍不明確，在對ad的病因研究中，很多證據表明aβ(β-淀粉樣蛋白，老年斑的主要成分)是誘導ad發生的主要病理環節。首先，aβ自身的清除和降解代謝障礙導致aβ沉積形成淀粉樣斑塊，幾乎在所有ad病人的腦中都發現了大量的淀粉樣斑塊沉積[3]。其次，aβ能促進神經細胞凋亡[4]。再次，aβ還可以激活神經膠質細胞，釋放細胞因子和炎癥反應介質，產生炎癥反應，aβ作為刺激物通過激活周圍小膠質細胞產生細胞因子和神經系統免疫炎癥應答，加速神經細胞死亡，導致記憶減退和認知障礙[5]。因此，β淀粉樣蛋白已成為公認的篩選抗ad藥物靶標。ad病因復雜、病程漫長、且發病環節較多，需要長期服藥，目前主要的抗阿爾茨海默癥藥物乙酰膽堿酯酶抑制劑(如加蘭他敏)和n-甲基-d-天冬氨酸受體(nmda受體)拮抗劑(如美金剛)，但上述藥物價格昂貴，服藥后幻覺、意識混沌、頭暈、頭痛和疲倦等副作用顯著，且只能控制卻不能逆轉患者病情。到目前為止，治療ad還沒有特效藥，絕大部分藥物尚處于基礎研究及臨床試驗階段。經過長期的應用實踐證實天然藥物對ad的治療有一定優勢。且ad的發病機理非常復雜，中藥對ad的治療是多靶點、多途徑的，因此引起了多方面的重視。本發明公開的中藥組合物，包括炙黃芪6份，炙甘草1份，出自《太平惠民和劑局方》卷五，別名：黃芪湯(《普濟方》卷二二九)。處方：黃芪(去蘆，蜜炙)180g，甘草(炙)30g。主要用于補氣生津。大治男子、婦人諸虛不足，肢體勞倦，胸中煩悸，時常焦渴，唇口干燥，面色萎黃，不能飲食；或先渴而欲發瘡癤，或病癰疽后而渴者尤宜服此。常服平補氣血，臓腑。炙黃芪味甘，溫。歸肺、脾經。益氣補中。用于氣虛乏力，食少便溏。炙甘草，味甘，平。歸心、肺、脾、胃經。補脾和胃，益氣復脈。用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心動悸，脈結代。秀麗隱桿線蟲(caenorhabditiselegans)是一個非常有用的多功能藥物篩選和藥物作用機制的研究平臺。它廉價、易培養；世代周期短、后代數目多，同時可獲得大量背景一致的個體，保證實驗重復性和采用大樣本量進行實驗，從而排除個體差異的影響；與高等生物在基因和分子通路方面高度保守[6]。它作為一個從細胞體外水平藥物初篩到小鼠體內水平藥物復篩的一個橋梁，越來越受到藥學家的青睞。美國devgen公司利用人源化線蟲篩選的抗心律不齊藥物已被fda批準進入臨床研究。人源化秀麗隱桿線蟲ad病理模型的建立是將人源aβ1-42基因轉入肌球蛋白啟動子下游并受溫度控制表達，該線蟲株系可在15℃正常生長，當轉移至25℃條件下aβ1-42表達并在其肌肉內累積，導致線蟲失去運動能力而麻痹。加入受試藥物可延緩肌肉麻痹表型，其結果以肌肉麻痹線蟲數量占受試線蟲群體數量的百分比表示。未麻痹線蟲比率越高，藥物抗ad效果越顯著。這一模型早已被用于抗ad疾病發生機制和抗ad藥物及候選物的篩選及其作用機制研究[7]。發明人經采用秀麗隱桿線蟲ad病理模型對大量中藥組合物進行篩選后，發現本發明公開的中藥組合物有抗ad的作用。因此，本發明現提供的中藥組合物具有治療阿爾茨海默癥的潛力，可在制備預防或治療阿爾茨海默癥的藥物或保健品中應用。參考文獻[1]mattsonmp.pathwaystowardsandawayfromalzheimer’sdisease.nature,2004,430；631-639.[2]hardyj,selkoedj.theamyloidhypothesisofalzheimer’sdisease:progressandproblemsontheroadtotherapeutics.science,2002,297:353-356.[3]fuhj,liub,frostjl,etal.amyloid-betaimmunotherapyforalzheimer’sdisease[j].cnsneuroldisorddrudtargets,2010,9(2):197-206.[4]nelsontj,alkondl.oxidationofcholesterolbyamyloidprecursorproteinandbeta-amyloidpeptide[j].jbiolchem,2005,280(8):7377-7387.[5]韋美丹，林繼宗，朱寧，等。aβ(1-42)作用的小膠質細胞對體外培養的神經干細胞生存的影響[j]。中國病理生理雜志，2012(4)：683-688。[6]kalettat,hengartnermo.findingfunctioninnoveltargets:c.elegansasamodelorganism.natrevdrugdiscov2006,5:387e398.[7]linkcd.transgenicinvertebratemodelsofage-associatedneurodegenerativediseases.mechageingdev2001,122:1639e1649.技術實現要素：本發明的目的是提供一種中藥組合物的新用途。其中，所述的用途為在制備預防或治療阿爾茨海默癥藥物或保健品中的應用。其中，所述中藥組合物按重量份計，包括炙黃芪6份，炙甘草1份。優選地，所述中藥組合物中炙黃芪為15g，炙甘草為2.5g。其中，所述中藥組合物是通過下列方法制備得到的：按配方稱取炙黃芪15g，炙甘草2.5g，混勻加水150ml，浸泡30min，加熱煮沸并保持30min，自然冷卻至室溫后進行過濾，將濾液和濾渣分離，濾渣再用100ml去離子水浸泡10分鐘，再用大火加熱至沸騰后，再加熱25min，自然冷卻至室溫后進行過濾，棄掉濾渣，合并兩次濾液，定容至50ml，過濾除菌，即得到中藥組合物。另外，將所述中藥組合物加入適宜的輔料即可制備成為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液、丸劑及其他任一種劑型，這是本領域研究人員可以理解的。本發明以秀麗隱桿線蟲作為阿爾茨海默癥病理模型進行實驗，結果顯示，本發明公開的中藥組合物能顯著延緩阿爾茨海默癥秀麗隱桿線蟲的肌肉麻痹表型，表明該中藥組合物對于罹患阿爾茨海默癥的秀麗隱桿線蟲具有顯著的治療作用，提示本發明提供的中藥組合物具有治療阿爾茨海默癥的潛力，可在制備預防或治療阿爾茨海默癥的藥物或保健品中應用。炙黃芪單用時，在本發明所采用的濃度下，對ad線蟲治療作用較弱；炙甘草單獨使用時，對ad線蟲無治療作用。而二者組合使用時，具有顯著抗ad效果。說明本發明提供的中藥組合物水煎液中炙黃芪和炙甘草發揮協同作用抗ad。說明書附圖圖1為中藥組合物延緩ad秀麗隱桿線蟲肌肉麻痹的結果。其中，a組為含35mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、b組為含7mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、c組為含3.5mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、對照組為加有與中藥組合物水煎液等體積無菌水的ngm培養基。圖2為中藥組合物中的各成分發揮協同作用延緩ad秀麗隱桿線蟲的肌肉麻痹的結果。其 中，中藥組涂布有op50并含有7mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、炙黃芪組涂布有op50并含有6mg/ml炙黃芪水煎液的ngm培養基、炙甘草組涂布有op50并含有1mg/ml炙甘草水煎液的ngm培養基和對照組為涂布有op50并加有與炙黃芪水煎液等體積無菌水的ngm培養基。具體實施方式下面結合具體實施例進一步詳細描述本發明的技術方案，但本發明的保護范圍不局限于以下所述。實施例一中藥組合物水煎液顯著延緩ad秀麗隱桿線蟲的肌肉麻痹1.生物材料(1)秀麗隱桿線蟲cl4176購自caenorhabditisgeneticscenter(cgc)；為轉基因品系，在25℃溫度誘導下肌肉特異性表達人類aβ1-42，aβ1-42在肌肉組織聚集，最終導致線蟲麻痹，本實施例采用秀麗線蟲cl4176株系作為篩選抗ad藥物的病理模型。(2)大腸桿菌op50(尿嘧啶滲漏突變株)，購自caenorhabditisgeneticscenter(cgc)，作為秀麗隱桿線蟲的食物。2.試劑(1)固體ngm(nematodegrowthmedium)培養基成分與制作(以1升為例)：成分含量nacl3.00gk2hpo42.34gkh2po417.23g蛋白胨2.50g瓊脂17.00g補充h2o至1000ml固體ngm培養基配制好后，121℃下高壓恒溫滅菌20min，在無菌操作臺下加入5mg/ml膽固醇1ml，1mmgso41ml,1mcacl21ml搖勻，趁熱倒入已滅菌的9cm培養板，約20ml/板。靜置等待培養基凝固，備用。(2)m9液配方(3)裂解液的配制：6.4％naclo溶液和1mnaoh溶液按體積比1:1混合。3.配制含有中藥組合物水提物的ngm平板中藥組合物水煎液的制備：炙黃芪15g，炙甘草2.5g，混勻加水150ml，浸泡30min，加熱煮沸并保持30min，自然冷卻至室溫后進行過濾，將濾液和濾渣分離，濾渣再用100ml去離子水浸泡10min，再用大火加熱至沸騰后，再加熱25min，自然冷卻至室溫后進行過濾，棄掉濾渣，合并兩次濾液，定容至50ml，過濾除菌，備用。配制含有藥物水煎液的ngm平板：取不同稀釋度的炙黃芪水煎液、炙甘草水煎液或中藥組合物水煎液，分別加入ngm培養基中，倒板。最終制備成含有炙黃芪30mg/ml水煎液的ngm培養基；含有炙甘草5mg/ml水煎液的ngm培養基；含有中藥組合物35mg/ml、7mg/ml、3.5mg/ml水煎液的ngm培養基；靜置等待培養基凝固。在培養基上均勻涂布大腸桿菌op50作為線蟲的食物。4.實施步驟(1)線蟲的培養：將線蟲接在涂有大腸桿菌op50的固體ngm板上，然后置于16℃的培養箱中培養，當線蟲長到成蟲時進行同步化處理。(2)線蟲同步化：挑選含有大量成蟲并且有部分線蟲卵已經孵出的ngm培養基，用m9液將線蟲從培養基上沖下，轉移到離心管中，靜置使線蟲自由沉降至管底，棄上清。視線蟲量多少向離心管中加入裂解液，在渦旋攪拌器上振蕩5-7min待線蟲全部斷裂時停止渦旋,并分裝于1.5ml離心管中，用m9溶液洗線蟲卵三次。(3)中藥組合物水煎液對阿爾茨海默癥秀麗隱桿線蟲cl4176的作用將同步化后分裝于離心管中的線蟲卵轉移到a組為含35mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、b組為含7mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、c組為含3.5mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基，對照組為加有與中藥組合物水煎液等體積無菌水的ngm培養基，每組培養皿中均涂布有等量的op50作為線蟲食物，每個培養皿60條線蟲，每個藥物濃度三個平行，16℃培養3天至l3期。為了使線蟲表達aβ，之后將l3期線蟲轉在25℃下進行誘導，35h后開始計數線蟲麻痹條數。每兩小時計數一次，直至所有線蟲都麻痹(麻痹是指機械刺激線蟲身體時，線蟲不能運動或者只有頭部運動)。結果見圖1。圖1的縱坐標表示沒有麻痹的秀麗隱桿線蟲占的百分比，在同一個時間點，此值越大，表明該處理組中沒有麻痹的秀麗隱桿線蟲比例越大，即藥物延緩麻痹的作用越強。實驗結果表明，中藥組合物水煎液可延緩ad秀麗隱桿線蟲的肌肉麻痹，并在中等濃度時效果較好。通過以上實施例證明，本發明提供的中藥組合物水煎液對ad秀麗隱桿線蟲發揮治療作用，提示本發明提供的中藥組合物具有抗阿爾茨海默癥潛力，可在制備防治阿爾茨海默癥的藥物中應用。實施例二炙黃芪和炙甘草發揮協同作用延緩ad秀麗隱桿線蟲的肌肉麻痹(1)炙黃芪水煎液的制備：炙黃芪15g，加水150ml，浸泡30min，加熱煮沸并保持30min，自然冷卻至室溫后進行過濾，將濾液和濾渣分離，濾渣再用100ml去離子水浸泡10min，再用大火加熱至沸騰后，再加熱25min，自然冷卻至室溫后進行過濾，棄掉濾渣，合并兩次濾液，定容至50ml，過濾除菌，備用。(2)炙甘草水煎液的制備：炙甘草2.5g，加水150ml，浸泡30min，加熱煮沸并保持30min，自然冷卻至室溫后進行過濾，將濾液和濾渣分離，濾渣再用100ml去離子水浸泡10min，再用大火加熱至沸騰后，再加熱25min，自然冷卻至室溫后進行過濾，棄掉濾渣，合并兩次濾液，定容至50ml，過濾除菌，備用。中藥組涂布有op50并含有7mg/ml中藥組合物水煎液的ngm培養基、炙黃芪組涂布有op50并含有6mg/ml炙黃芪水煎液的ngm培養基、炙甘草組涂布有op50并含有1mg/ml炙甘草水煎液的ngm培養基和對照組為涂布有op50并加有與炙黃芪水煎液等體積無菌水的ngm培養基。其它操作同實施例一。實驗結果如圖2所示，圖2的縱坐標表示沒有麻痹的秀麗隱桿線蟲占的百分比，在同一個時間點，此值越大，表明該處理組中沒有麻痹的秀麗隱桿線蟲比例越大，即藥物延緩麻痹的作用越強。實驗結果表明，在本實施例中單用炙黃芪對ad線蟲肌肉麻痹的延緩作用較弱，單用炙甘草未顯示對ad線蟲肌肉麻痹的延緩作用，而中藥組合物組對ad線蟲肌肉麻痹的延緩作用要明顯強于單用炙黃芪或單用炙甘草的效果，可以看出，當將二者組合應用后，組合物對ad線蟲肌肉麻痹的延緩作用顯著增強。這表明炙黃芪和炙甘草在質量比為6:1時可發揮協同作用抗ad作用，所述中藥組合物可用于制備預防或治療阿爾茨海默癥保健品或藥物。當前第1頁12