闊葉豐花草三萜化合物的制備方法及其在制備糖苷酶抑制劑藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供了闊葉豐花草三萜化合物的制備方法及其在制備糖苷酶抑制劑藥物中的應用。本發明的六種具強效抑制α-糖苷酶活性的化合物為安全性高并在環境中能快速自然降解無殘留的天然化合物，它們可自闊葉豐花草等植物材料中分離獲得，植物材料來源豐富，制備過程易于操作。所述的六種化合物的單體均較穩定、易存放，它們的α-糖苷酶抑制活性顯著強于臨床用藥阿卡波糖，極可能進一步發展為有效、安全的預防和治療Ⅱ型糖尿病的α-糖苷酶抑制劑類藥物，具有較好前景。
【專利說明】闊葉豐花草三萜化合物的制備方法及其在制備糖苷酶抑制 劑藥物中的應用

【技術領域】
[0001] 本發明屬于天然藥物化學領域，具體涉及六種三萜類化合物即 mesembryanthemoidigenic acid (I)>29-hydroxyhederagenin(2)>3 β , 6 β -dihydroxy-〇l ean_12_ene_28_oic acid(3)、scutellaric acid(4)、arjunic acid(5)、3β，6β，23_trih ydroxy-〇lean-12-en_28-〇ic acid(6)或其可藥用的鹽在制備糖苷酶抑制劑或藥物中的應 用，以及它們的制備方法。
[0002] 發明背景
[0003] 糖尿病為臨床上常見的內分泌代謝失調性疾病，其與心血管疾病和癌癥等逐年高 發具有重要的相關性，是人類健康重要的殺手。目前，在全球范圍內糖尿病的發病率正在提 高，在我國更是有超過1億人的患病率，并呈現逐年增加的趨勢。糖尿病正給我國人民健康 和國民經濟造成越來越重大的損失。
[0004] 糖尿病西醫分為I型糖尿病（或稱胰島素依賴性，DM1)和II型糖尿病（或稱 非胰島素依賴性，DM2)，其中II型糖尿病發病與患病率均遠高于I型糖尿病，因而危害更 大。競爭性α-糖苷酶抑制劑具有推遲糖類物質消化吸收、控制飯后血糖急劇升高、進而 使血糖濃度在一天內變化波動幅度減小等功能，是可開發用于治療II型糖尿病的潛在藥 物。目前已開發上市正臨床試用作治療II型糖尿病的重要α-糖苷酶抑制劑包括一線用藥 acarbose (阿卡波糖）、voglibose、miglitol 和 emigliate 等。
[0005] 六種三貓化合物 me s embr yan themo i d i gen i c ac i d (1)、 29_hydroxyhede;ragenin (2)、3 β，6 β _dihydroxy_olean_12_ene_28_oic acid (3)、 scutellaric acid (4) > ar junic acid(5)、30，60,2 3_tri hydroxy _〇 lean-12_en_2 8-oic acid(6)分別曾自其他植物中分離獲得（具體見文獻：Magina et al.,Quim Nova, 2012, 35:1184-1188 ；Huu et al. , J Chem, 2007, 45:363-367 ；Kuo et al., Chem Pharm Bull, 1988, 36:3619-3622 ；Ponouet al. , Chem Biodivers, 2011, 8:1301-1309 ；Lavaud et al., Phytochemistry, 2001, 57:469-478 ；Khan et al. , J Nat Prod, 1993, 56:2163-2165), 它們的化學結構式如下式（I )所示，到目前還未見這些化合物具有糖苷酶抑制劑活性的 報道，以及未見其自闊葉豐花草（Spermacoce Iatifolia)植物中分離獲得的報道。
[0006]

【權利要求】
1. 六種三 化合物 mesembryanthemoidigenic acid、29_hydroxyhederagenin、 30.60 -dihydroxy-〇lean-12-ene-28-〇ic acid、 scutellaric acid、 arjunic acid 或 30，60，23-trihydroxy-〇lean-12_e n_28-〇ic acid，或它們的可藥用鹽，在制備 a-糖苷 酶抑制劑或藥物中的應用，所述六種三萜化合物結構如式（I )所示：
其中化合物1為mesembryanthemoidigenic acid ; 化合物2為 29-hydroxyhederagenin ;化合物 3 為 3 0，6 0 -dihydroxy-〇lean-12-ene_28-〇ic acid ;化 合物 4 為 scutellaric acid ;化合物 5 為 ar junic acid ;化合物 6 為 3 0，6 0，23-trihydr oxy-〇lean-12-en-28-〇ic acid〇
2. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述a _糖苷酶抑制劑或藥物，其劑型為 可濕性粉劑、片劑、顆粒劑、膠囊、口服液、滴丸、控釋或緩釋劑型或納米制劑。
3. -種a-糖苷酶抑制劑或藥物，其特征在于，包含有效量的三萜化合物 mesembryanthemoi digenic acid、29-hydroxyhederagenin、3 0，6 0 -dihydroxy-olean-1 2_ene_28_oic acid、scutellar ic acid、arjunic acid 或 30，60，23_trihydroxy_olea n-12-en-28-〇ic acid中的一種或多種，或它們的可藥用鹽，和藥學上可以接受的載體或輔 料。
4. -種 化合物 mesembryanthemoidigenic acid、29_hydroxyhederagenin、 30.60 -dihydroxy-olea n-12-ene-28-〇ic acid、scutellaric acid、arjunic acid、30， 6 0，23-trihydroxy-〇lean-12-en_28-〇 ic acid的制備方法，其特征在于，所述的化合物 mesembryanthemoidigenic acid、29-hyd roxyhederagenin、3 0，6 0 -dihydroxy-olean-1 2_ene_28_oic acid、scutellaric acid、arjunic acid、30，60，23_trihydroxy_olean_l 2-en_28-〇ic acid 是從闊葉豐花草（Spermacoce latifolia Aubl.K.Schum.)植株中分離 得到的。
5. 根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，具體步驟為： 將干燥的闊葉豐花草全株粉碎后用乙醇或乙醇水溶液提取，提取液經濃縮后得到浸 膏，浸膏加水混懸，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，濃縮后分別得到石油醚萃取部分和乙酸 乙酯萃取部分；石油醚萃取部分經正相硅膠柱層析，以石油醚/丙酮從體積比100 :0-0-100 梯度洗脫，收集石油醚-丙酮體積比10 :1洗脫的餾分E6,餾分E6經MCI柱除去色素， 用甲醇洗脫得到甲醇洗脫部分E6-1，E6-1依次通過反相中壓柱層析，甲醇/水體積比從 30:70-100:0梯度洗脫、Sephadex LH-20凝膠柱，以甲醇洗脫，和正相娃膠層析，以氯仿/甲 醇體積比100:1洗脫，得到化合物1 ; 乙酸乙酯萃取部分經正相硅膠柱層析，以氯仿/甲醇從體積比100:1-0:100梯度洗 脫，收集氯仿/甲醇體積比25:1洗脫的餾分F5, F5經反相中壓柱層析，甲醇/水從體積比 30:70-100:0,梯度洗脫，收集甲醇/水體積比80:20洗脫的餾分F 5_4和甲醇/水體積比 90:10洗脫的餾分F5_5;餾分F 5_4經S印hadex LH-20凝膠柱以甲醇洗脫，再經正相硅膠層析 柱分離純化，以氯仿/甲醇體積比50:1洗脫，得到化合物3,4,5和6 ;餾分F5_5經Sephadex LH-20凝膠柱以甲醇洗脫，得到化合物2。 6?闊葉豐花草在制備化合物mesembryanthemoidigenic acid、 29-hydroxyhederageninN3 0,60 -dihydroxy-〇lean-12-ene-28-〇ic acid、scutellaric acid、ar junic acid 或 3 0，6 0，23_trihydroxy_olean_12_en_28_oic acid 中的應用。
【文檔編號】A61K31/56GK104490894SQ201410718340
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月1日 優先權日:2014年12月1日
【發明者】譚建文, 羅應, 周忠玉, 任慧, 徐巧林 申請人:中國科學院華南植物園