專利名稱：：枳實或枳實提取物的新用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種枳實或枳實提取物的新用途。屬于藥物領域。
背景技術：
：腸易激綜合征(IrritableBowelSyndrome,IBS)最早于1820年由Powell報道，屬于胃腸功能紊亂性疾病，指一組包括腹痛、腹脹、排便習慣和大便性狀異常，持續存在或間歇發作，而無形態學和生化異常改變的癥候群，是臨床上最為常見的功能性胃腸病之一。目前IBS診斷主要以癥狀學為依據并建立在排除器質性疾病的基礎上。近年來許多研究顯示胃腸動力障礙和內臟感覺異常是本病癥狀的主要病理生理基礎，而其發病明顯受到心理社會因素的影響。各地研究報道顯示IBS是一種世界范圍內的常見病、多發病，其發病率相當高。根據流行病學調查，西方國家的人群患病率約9%_22%，以女性較男性多見，比例約21-31。在我國所進行的調查顯示，北京地區IBS的人群患病率是(羅馬標準)-7%(Manning標準)，廣東地區用羅馬Π標準調查的IBS人群患病率為5.67%，中國人群患病率估計在20%。IBS的病因與發病機制尚未完全清楚，盡管人們不斷提出各種假說試圖闡明其發病機制及病理生理，但都不能以一種單一的發病機制來完全解釋所有IBS的臨床表現，而且各種可能的發病機制間又有著相互的聯系。其發病機制包括動力異常、內臟感覺異常、腦-腸軸異常、炎癥、內分泌異常、神經-免疫-內分泌網絡調控異常及心理社會因素等。由于臨床上IBS的病因病機以肝郁脾虛型最為常見，因此多數醫家在治療腹瀉型IBS時均采用疏肝健脾法為基礎隨證加減。常用的基礎方主要有四逆散、痛瀉要方、柴胡疏肝散、參苓白術散、逍遙散、芍藥甘草湯等。中藥枳實，為蕓香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種或甜橙C.sinensisOsbeck的干燥幼果。其味苦、辛、酸，性微寒，歸脾、胃經，能破氣消積，化痰散痞。目前研究認為，枳實可殺滅幽門螺旋桿菌，對胃、十二指腸潰瘍有一定的治療作用，它還能夠增加冠脈流量，對心血管有一定保護作用。由于枳實的藥用功效較為突出，目前市面上已經出現了以枳實提取物為原料的保健品或藥品。例如，焦士蓉等發現，枳實的70%乙醇提取物具有增強肝臟的抗氧化能力的作用，其所得枳實提取物中，總黃酮含量達到了70%以上。(《衛生研究》，2007年36卷6期，P689-692)。當前也有人對枳實提取物的標準進行了研究，如《中藥天然提取物質量技術標準規范實用手冊》，蕭三貫，中國醫藥科技電子出版社，第393頁，該標準中指出，枳實醇提物中辛弗林的含量應>30%。目前，還未見將枳實及其提取物用于治療腸易激綜合征的報道。
發明內容本發明的目的在于提供一種枳實或枳實提取物的新用途。本發明提供了枳實或枳實提取物在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。進一步地，所述藥物是治療內臟高敏感性腸易激綜合征的藥物。進一步地，所述藥物是治療腹痛、結腸功能紊亂的藥物。其中，所述枳實提取物中，總黃酮含量以柚皮苷計不得低于50%。進一步地，所述枳實提取物中，柚皮苷含量2.5-3.0%W/W，陳皮苷含量:0.6-1.0%W/W。進一步地，所述枳實提取物中，辛弗林的含量大于2.5%W/W。其中，所述枳實提取物是由如下方法制備得到的(1)取枳實粗粉，加水煎煮后，水提液和濾渣備用；(2)取步驟(1)所得濾渣，用60-80%V/V乙醇提取，提取液回收乙醇后，得醇提液；(3)將步驟(1)的水提液和步驟O)的醇提液合并，濃縮后，加入乙醇至含醇量不低于50%V/V，醇沉后，過濾，沉淀備用，將上清液濃縮、干燥后，與沉淀混合，即得枳實提取物。進一步地，步驟⑵所述乙醇的濃度為70%V/V。更進一步地，步驟(3)中所述含醇量不低于60%V/V。本發明還提供了一種治療腸易激綜合征的藥物組合物，它是由枳實提取物為活性成分，加上、藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。本發明還提供了枳實在制備治療腸易激綜合征藥物的原料中的用途。枳實提取物可以改善腸敏感性，降低結腸頻率、峰電位、峰峰值及峰面積，在對腸易激綜合征的治療過程中發揮顯著療效，能夠抑制腸易激綜合征所致的腹痛，改善結腸功能紊亂的現象，為臨床用藥提供了一種新的選擇。以下通過具體實施方式，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應該將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。具體實施例方式實施例1本發明枳實提取物的制備(1)取枳實粗粉，加水煎煮8小時，加水12倍量，水提取液和濾渣備用；(2)取步驟(1)所得濾渣，加10倍量70%V/V乙醇回流提取2次，每次1小時，回收乙醇后，得醇提液；(3)將步驟(1)的水提取液和步驟(2)的醇提液合并，濃縮后，加入95%V/V乙醇至含醇量60%V/V，醇沉后，過濾，沉淀備用，將上清液濃縮、干燥后，與沉淀混合，即得枳實提取物。枳實提取物中總黃酮含量測定采用紫外分光光度法測定枳實總黃酮含量。標準曲線的測定精密稱取柚皮苷對照品5.;3mg，置50ml量瓶中，甲醇定容至刻度，作為對照品溶液。精密吸取對照品溶液0.5，1.0，1.5,2.0,2.5,3.Oml于IOml量瓶中，甲醇定容至刻度，以甲醇為空白，在觀311111處測吸收度。得回歸方程為A=0.026C-0.001，r=0.999。線性范圍為5.330.71μg實驗結果枳實提取物中總黃酮含量52.89%W/W。本發明枳實提取物，是從蕓香科常綠小喬木植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種或甜橙C.sinensisOsbeck的幼果中提取得到。實施例2本發明枳實提取物中陳皮苷和柚皮苷的含量測定色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相乙腈-水0377)；流速lml/min(檢測波長283nm)。對照品溶液的制備變色硅膠干燥M小時，用水配成柚皮苷12ug/ml，陳皮苷14ug/mlο供試品溶液的制備取枳實提取物0.3g(實施例1制備)，精密稱定，置圓底燒瓶中，加入甲醇30ml，搖勻，置水浴中回流提取lh，取出，冷卻至室溫，濾過，用甲醇分次洗滌容器、濾紙和藥渣，洗液與濾液合并，蒸干，殘渣加甲醇溶解并定容至25ml，備用。(提取物12mg/ml)進樣量20ul實驗結果枳實提取物中柚皮苷含量2.695%W/W，陳皮苷含量0.841%W/W。實施例3本發明枳實提取物中辛弗林含量測定色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-磷酸二氫鉀水溶液(取磷酸二氫鉀0.6g，十二烷基磺酸鈉1.0g，冰醋酸1ml，加水溶解并稀釋至1000ml)(5050)為流動相；檢測波長為275nm。對照品溶液的制備變色硅膠干燥M小時，辛弗林對照品30ug/ml水。供試品溶液的制備取枳實提取物約Ig(實施例1制備)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流1.5小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸干，殘渣加水IOml使溶解，搖勻，通過聚酰胺柱(6090目，2.5g，內徑1.5cm，干法裝柱)，用水25ml洗脫，收集洗脫液，轉移至25ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。(提取物8mg/ml)進樣量20ul(滿環進樣)實驗結果本發明枳實提取物中辛弗林含量為2.578%W/W。以下通過藥效學試驗進一步證明本發明的有益效果。本發明的藥效實驗中，均采用冰醋酸、芥末油制作腸易激綜合征(IBS)模型，對目標藥物進行藥效研究。本發明所用具體造模方法，是采用朱力陽等報道的內臟高敏感性模型建立的(朱力陽，等，《中國藥理學通報》，2010年沈卷2期，267-269頁)。使用該造模方法，在一段時間內連續給予化學刺激后，實驗動物出現了明顯的IBS臨床表現，實驗表明，該方法重復性良好。實驗例1枳實提取物治療冰醋酸內臟高敏感性IBS疾病模型的實驗研究1.1材料和方法L1.1藥物1.1.1.1受試藥物枳實提取物(實施例1制備)，實驗前用蒸餾水配制成濃度為3.7%U.85%,0.926%1.1.1.2陽性藥物曲美布丁片，天津田邊制藥有限公司生產，生產批號0905005，規格0.Ig/片X20片/盒。實驗時用蒸餾水配制成濃度為2%(每毫升含曲美布丁0.02g)的藥液，備用。1.1.1.3主要試劑0.5%冰醋酸(體積分數)，1.5%戊巴比妥鈉，生理鹽水，液體石蠟。1.1.2動物SD大鼠，雌雄兼有，體重200士20g，由成都中醫藥大學實驗動物研究中心提供，許可證號SCXK(川)2008-11，檢疫后備用。1.1.3器材電子天平PA2003(上海天平儀器廠生產)8F導尿管(湛江市事達實業有限公司)BL-420E生理機能儀(成都泰盟科技有限公司生產)秒表、溫度計、卷尺、注射器1.1.4實驗方法SD大鼠雌雄兼有，隨機分為空白組，模型組，自然恢復組，陽性藥組，枳實提取物高、中、低劑量組。所有需造模大鼠禁食24h后，在清醒狀態下用鈍針頭經肛門插入直腸灌注0.5%冰醋酸(體積分數)，5ml/kg，首劑劑量濃度加倍，連續6天，灌注后使大鼠頭部朝下，肛門朝上托10秒。從第7天開始，除空白組、模型組外，各組分別灌胃生理鹽水，2%曲美布丁，各組分高、中、低劑量藥液，IOmlAg01次/天，連續3天。末次給藥/造模前禁食Mh，末次給藥/造模后Ih經肛門直腸擴張(CRD)后，觀察動物腹部撤離反射(AWR)，評價動物的內臟敏感性。腸敏感性測定結束后，立即用1.5%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉動物，按外科常規手術行下腹正中切口，將自制針灸針銀電極埋置于結腸漿膜面，距回盲部約2cm，雙極的間距5mm，用BL-420E生理記錄儀同步描記胃腸電，時間常數^，高頻濾波0.3Hz0待波形穩定后，記錄5分鐘內的電生理活動，計算頻率、峰電位、峰峰值、峰面積。1.2實驗結果見表1、2。表1枳實提取物對冰醋酸所致IBS模型大鼠腸敏感性的影響(χ士SD)ii~生藥給藥量提取物給藥量~~有效成分給藥組別抬腹閾值(ml)拱背閾值(ml)_(只)(g/kg)(mg/kg)暈(mg/kg)__空對照組8^——0.75+0.08*"0.80+0.08"IBS模型組11~^~^^^~0.60+0.12~0.65+0.12自然恢復組10——————0.67±0.100.72±0.10曲美布丁組902^^^0.74±0.14*0.79±0.14*枳實醇提物卨劑量組83368^194.960.78±0.24"0.84±0.24"~枳實醇提物中劑量組101.5184.397.48~0.65+0.110.70+0.11枳實醇提物低劑量組90.7592.1548.74~0.74+0.18*0.79+0.18*注與模型組比較*P<0.05，**P<0.01。表2枳實提取物對冰醋酸所致IBS模型大鼠結腸肌電的影響(f±SD)權利要求1.枳實或枳實提取物在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。2.根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述藥物是治療內臟高敏感性腸易激綜合征的藥物。3.根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述藥物是治療腹痛、結腸功能紊亂的藥物。4.根據權利要求1-3任意一項所述的用途，其特征在于所述枳實提取物中，總黃酮含量以柚皮苷計不得低于50%。5.根據權利要求4所述的用途，其特征在于所述枳實提取物中，柚皮苷含量:2.5-3.0%W/W,陳皮苷含量0.6-1.0%ff/ff06.根據權利要求5所述的用途，其特征在于所述枳實提取物中，辛弗林的含量大于2.5%W/W。7.根據權利要求1-6任意一項所述的用途，其特征在于所述枳實提取物是由如下方法制備得到的(1)取枳實粗粉，加水煎煮后，水提液和濾渣備用；(2)取步驟(1)所得濾渣，用60-80%V/V乙醇提取，提取液回收乙醇后，得醇提液；(3)將步驟(1)的水提液和步驟O)的醇提液合并，濃縮后，加入乙醇至含醇量不低于50%V/V,醇沉后，過濾，沉淀干燥后備用，將上清液濃縮、干燥后，與沉淀混合，即得枳實提取物。8.根據權利要求7所述的用途，其特征在于步驟⑵所述乙醇的濃度為70%V/V；步驟(3)中所述含醇量不低于60%V/V。9.一種治療腸易激綜合征的藥物組合物，其特征在于它是由枳實提取物為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。10.枳實在制備治療腸易激綜合征藥物的原料中的用途。全文摘要本發明提供了枳實或枳實提取物在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。本發明還提供了以枳實或枳實提取物為基礎的藥物組合物。枳實提取物可通過改善腸敏感性，降低結腸頻率、峰電位、峰峰值及峰面積，從而在對腸易激綜合征的治療過程中發揮顯著療效，能夠抑制腸易激綜合征所致的腹痛，改善結腸功能紊亂的現象，為臨床用藥提供了一種新的選擇。文檔編號A61K36/752GK102416062SQ20111040085公開日2012年4月18日申請日期2011年12月6日優先權日2010年12月6日發明者彭成,朱力陽,李瑜,郭力申請人:成都中醫藥大學