專利名稱：一種肌氨肽苷注射液的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種制備方法，特別涉及一種肌氨肽苷注射液的制備方法，屬于醫藥生物技術領域。
背景技術：
肌氨肽苷注射液用于腦功能紊亂；腦卒中、鬧供血不足所致腦功能減退；周圍神經疾病等，療效顯著，毒副作用小。目前，現有肌氨肽苷提取工藝對多肽和次黃嘌呤的提取效果不好，收率相對較低。本發明與現有肌氨肽苷注射液制備方法均不同。在申請號分別為03104642. 8,200510119095. X,200610150889. 7,200910067227. 7 的專利中所述的肌氨肽苷 提取得液收率均較低，質量也不穩定。

發明內容
本發明目的在于公開一種肌氨肽苷注射液的制備方法。本發明目的是通過如下技術方案實現的本發明肌氨肽苷注射液的制備方法包括如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備過程(I)取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調pH至4-6，用膠體磨制成勻漿；(2)將勻漿液在3000r/min下離心5_30分鐘或用1_10 u m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；(3)取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調pH至4-6,用膠體磨制成勻楽;；(4)將第二次制成的勻漿再以3000r/min離心5_30分鐘或用1_10 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液；(5)合并兩次提取液，濾過，收集濾液；(6)將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I 3倍；(7)在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為70-90%，靜置8 24小時、濾過，收集濾液；(8)回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；(9)將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. I 0. 5倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備過程(I)取總量為20% 30%注射用水，冷卻至25°C以下；(2)量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至40% 60%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 0005-0. 002重量份活性炭，攪拌循環10-20分鐘，用鈦棒過濾；
(3)加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 0 8. 0，取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 003-0. 004重量份，次黃嘌呤0. 0002-0. 0008重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的90. 0% 110. 0% ;(4)半成品化驗合格后，用0. 22 iim微孔濾膜除菌過濾，檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；(5)燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。本發明肌氨肽苷注射液的制備方法還可以優選為如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調pH至5，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液離心或過濾，將勻漿液在3000r/min離心18分鐘或用5 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調pH至5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min離心25分鐘或用3iim微孔濾膜過濾，收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為80%，靜置15小時、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 3倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備取總量為25%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至50%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環15分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 5，取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 0035重量份，次黃嘌呤0. 0005重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。本發明肌氨肽苷注射液的制備方法還可以優選為如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備過程取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5. 2的重量比例混合，用醋酸調pH至4. 6，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心20分鐘或用2 U m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照1.2 4.8的重量比例混合，用醋酸調pH至
5.5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min下離心10分鐘或用8 y m微孔濾膜過濾，離收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為85%，靜置10小時、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 4倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備過程取總量為22%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重、量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至55%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環12分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 8、取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 0032重量份，次黃嘌呤0. 0007重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。本發明肌氨肽苷注射液的制備方法還可以優選為如下步驟I、肌氨肽苷提取液的制備過程取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照1.3 4. 6的重量比例混合，用醋酸調pH至4. 4，用膠體磨 制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心15分鐘或用4 U m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5.3的重量比例混合，用醋酸調pH至
5.8，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min下離心12分鐘或用6 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為75%，靜置20小時、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 2倍，即得肌氨肽苷提取液；2、肌氨肽苷注射液的制備過程取總量為28%注射用水，冷卻至25 V以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至48%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環18分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 4、取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 0038重量份，次黃嘌呤0. 0004重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。上述發明所述的重量份和體積份的關系是g/ml。本發明方法簡單、常規，肌氨肽苷提取得液收率高，制成的肌氨肽苷注射液的質量穩定。下述實驗例和實施例用于進一步說明但不限于本發明。實驗例I肌氨肽苷提取收率試驗
表I肌氨肽苷提取收率試驗
權利要求
1.一種肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.肌氨肽苷提取液的制備過程 (1)取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液，按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調pH至4_6，用膠體磨制成勻漿； (2)將勻漿液在3000r/min下離心5_30分鐘或用1_10u m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液； (3)取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液按照0. 5-1. 5 4. 5-5. 5的重量比例混合，用醋酸調pH至4-6,用膠體磨制成勻楽;； (4)將第二次制成的勻漿再以3000r/min離心5_30分鐘或用1_10u m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液； (5)合并兩次提取液，濾過，收集濾液； (6)將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I 3倍； (7)在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為70-90%，靜置8 24小時、濾過，收集濾液； (8)回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾； (9)將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0.I 0. 5倍，即得肌氨肽苷提取液； B.肌氨肽苷注射液的制備過程 (1)取總量為20% 30%注射用水，冷卻至25°C以下； (2)量取肌氨肽苷提取液，含多肽3.5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至40% 60%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 0005-0. 002重量份活性炭，攪拌循環10-20分鐘，用鈦棒過濾； (3)加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 0 8. O、取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 003-0. 004重量份，次黃嘌呤0. 0002-0. 0008重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的90. 0% 110. 0% ; (4)半成品化驗合格后，用0.22 u m微孔濾膜除菌過濾，檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封； (5)燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。
2.如權利要求I所述的肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液，按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調pH至5，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液離心或過濾，將勻漿液在3000r/min離心18分鐘或用5 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0.9%氯化鈉溶液，按照I : 5的重量比例混合，用醋酸調pH至5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在3000r/min離心25分鐘或用3 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為80%，靜置15小時、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎 組織的0. 3倍，即得肌氨肽苷提取液；B.肌氨肽苷注射液的制備 取總量為25%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至50%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環15分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 5、取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 0035重量份，次黃嘌呤0. 0005重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的.90. 0% 110. 0% ;半成品化驗合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。
3.如權利要求I所述的肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.肌氨肽苷提取液的制備過程 取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5. 2的重量比例混合，用醋酸調pH至4. 6，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心20分鐘或用2 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照I. 2 : 4. 8的重量比例混合，用醋酸調pH至5. 5，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在在3000r/min下離心10分鐘或用8 y m微孔濾膜過濾，離收集第二次提取液；合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的I. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為85%，靜置10小時、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 4倍，即得肌氨肽苷提取液； B.肌氨肽苷注射液的制備過程 取總量為22%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至55%，攪拌循環，每體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環12分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 8、取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 0032重量份，次黃嘌呤0. 0007重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的.90. 0% 110. 0% ;半成品化驗合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。
4.如權利要求I所述的肌氨肽苷注射液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 A.肌氨肽苷提取液的制備過程 取家兔肌肉和心肌，用純化水將家兔肌肉和心肌清洗干凈，置絞肉機中絞碎，將絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照1.3 4. 6的重量比例混合，用醋酸調pH至4. 4，用膠體磨制成勻漿；將勻漿液在3000r/min下離心15分鐘或用4 y m微孔濾膜過濾，收集第一次提取液；取剩余絞碎組織加0. 9%氯化鈉溶液按照0. 6 5. 3的重量比例混合，用醋酸調pH至5. 8，用膠體磨制成勻漿；將第二次制成的勻漿在在3000r/min下離心12分鐘或用6 y m微孔濾膜過濾，收集第二次提取液合并兩次提取液，濾過，收集濾液；將上述濾液，重量濃縮至絞碎組織的2. 5倍；在上述濃縮液中加乙醇至溶液的含醇量為75%，靜置20小時、濾過，收集濾液；回收乙醇至無醇味，過分子量為10000的超濾柱超濾；將超濾液重量濃縮至絞碎組織的0. 2倍，即得肌氨肽苷提取液； B.肌氨肽苷注射液的制備過程 取總量為28%注射用水，冷卻至25°C以下；量取肌氨肽苷提取液，含多肽3. 5重量份、次黃嘌呤0. 5重量份，加入上述注射用水中，再加注射用水至48%，攪拌循環，每 體積份溶液中加0. 001重量份活性炭，攪拌循環18分鐘，用鈦棒過濾；加注射用水至2000體積份后，冷卻至25°C以下，攪拌均勻，調pH值至7. 4、取樣化驗含量，按照規格要求每2體積份含多肽0. 0038重量份，次黃嘌呤0. 0004重量份；控制多肽與次黃嘌呤均應為標示量的90. 0% 110. 0% ;半成品化驗合格后,用0. 22 ii m微孔濾膜除菌過濾,檢查可見異物合格后，用2體積份潔凈安瓿灌裝，同時充入氮氣，熔封；燈檢、包裝、入庫，即得本發明肌氨肽苷注射液。
全文摘要
本發明提供一種肌氨肽苷注射液制備方法，取家兔肌肉和心肌，加氯化鈉溶液，用醋酸調節混合液，離心、過濾，濾液加乙醇，過超濾柱超濾，濃縮得肌氨肽苷提取液；肌氨肽苷提取液中加入活性炭處理，微孔濾膜除菌過濾，灌裝，熔封等工藝制成本發明肌氨肽苷注射液。本發明方法簡單、常規，肌氨肽苷提取得液收率高，制成的肌氨肽苷注射液的質量穩定。
文檔編號A61K38/17GK102727428SQ20111009087
公開日2012年10月17日 申請日期2011年4月12日 優先權日2011年4月12日
發明者余啟波, 吳中華, 張德奎, 張煜華, 梁隆, 申志春, 程志鵬, 胡思玉 申請人:河南科倫藥業有限公司