專利名稱：一種治療慢性疲勞綜合癥的藥物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種植物藥物，特別是一種由植物復方組成的用于治療慢性并疲勞綜 合癥的藥物。
背景技術：
慢性疲勞綜合癥(chronic fatigue syndrome, CFS)是由美國疾病預防與控制中 心(Centers for Disease Control and Prevention, CDC)于 1988 年正式命名的，以持續 或反復發作6個月以上的慢性疲勞為主要表現，且伴有記憶力下降、新發頭痛、咽喉炎、肌 痛、睡眠障礙和神經精神癥狀等非特異性癥狀的一組癥候群。隨著生活節奏的加快，其發病 率正呈現逐年的增加趨勢。祖國醫學治療慢性疲勞綜合癥多采用以下的方法1從肝論治，如陳世宏在“慢性疲勞綜合癥從肝論治體會”([J].中國中醫藥信 息雜志，2005，12(11) 84) 一文中以黃芪、仙鶴草、紅參、百合、山茱萸、柴胡、枳殼、陳皮、當 歸、白芍、白術、茯苓構成的補肝消疲湯治療慢性疲勞綜合癥。朱廣文在“自擬補肝益氣湯治 療慢性疲勞綜合癥46例” 一文中([J].浙江中醫雜志，2000,35(11) :476)。2從心論治，俞方亭在“慢性疲勞綜合癥研究現狀與中醫治療進展” [J].(中國中 西醫結合雜志，1995，15 (12) 751-754) 一文公開用酸棗仁湯與百合地黃湯、百合知母湯加 用人參、沙參、丹參、白茅根等組成百合參湯治療CFS多例。3從脾論治，曹艷杰，王福波，曹彥英等人在“人參歸脾湯加減治療慢性疲勞綜合 癥” [J]·(中國臨床康復，2004，8(9) 1657)中公開了以人參歸脾湯加減(其主方為人參、 白術、茯苓、黃芪、當歸、遠志、酸棗仁、龍眼肉、木香、炙甘草、生姜)治療CFS癥。4從肺論治，陳華，陳建華在“從肺論治慢性疲勞綜合癥” [J].(湖北中醫雜志， 2007,29(2) 20-21)中取參芪桔草湯(北沙參、黃芪、桔梗、甘草、桑葉、枇杷葉、麥芽、香附) 治療慢性疲勞綜合癥。5從腎論治，卞景芝，陳慧媧，張麗，王利平在“應用補腎安神膠囊治療慢性疲勞綜 合癥1630例臨床觀察” [J].(天津中醫藥，2005，22(6) 517)中應用藥物組成為人參、靈芝、 仙靈脾、枸杞子、女貞子、旱蓮草、鹿角片、酸棗仁、五味子等的補腎安神膠囊治療慢性疲勞 綜合癥。6綜合論治，曹繼剛，周安方，舒勁松，陳國光.在“論脾虛腎虧肝實是慢性疲勞綜 合癥的基本病機” [J].(中醫藥學報，2007，35 (2) 37-39)中以紅參、黃芪、白術、枸杞子、淫 羊藿、川芎、郁金、丹參組成的抗疲方治療CFS46癥。以上各藥方對慢性疲勞綜合癥均有較好的療效。

發明內容
本發明提供一種以植物藥物復方組成的用于治療慢性疲勞綜合癥的藥物，以及這 種藥物的制備方法。
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本發明的藥物由黃芪25 35g，當歸8 12g，黃精13 18g，川芎10 15g，枸 杞8 12g，五味子8 12g，丹參18 24g，香附8 12g，肉蓯蓉8 12g，砂仁4 8g組 成。本發明治療慢性疲勞綜合癥藥物的制備方法是將稱取的各藥物加水煎煮得水提 液，在煎煮的同時收集揮發油，再將水提液濃縮干燥處理得顆粒物，用乙醇溶解所得揮發油 并噴灑于顆粒物上，再將顆粒物制粒或裝入膠囊。本發明的制備方法中最好是第一次加12倍重量的水提取揮發油3h，蒸餾后收集 揮發油，水提液另存；第二次藥渣加10倍水煎煮2h ；合并2次煎液，過濾，濾液濃縮至比重 為1.06，噴霧干燥；用95%乙醇溶解揮發油，噴灑于干燥顆粒，拌勻后，制粒或裝入膠囊。經相關的動物實驗表明本發明的藥物有極好的臨床效果，而且急性毒性和長期毒 性試驗表明本發明未見到有明顯毒性反應，提示其使用安全無毒，臨床使用安全可靠。


附圖1為急性毒性實驗腎的病理切片，附圖2為急性毒性實驗肝臟病理切片，附圖 3為長期毒性實驗腎的病理切片，附圖4長期毒性實驗肝臟病理切片.
具體實施例方式以下提供本發明的實驗及結果。一、試驗藥物1、按以下組方和比例稱取各藥物黃芪25 35g，當歸8 12g，黃精13 18g，川芎10 15g，枸杞8 12g，五味 子8 12g，丹參18 24g，香附8 12g，肉蓯蓉8 12g，砂仁4 8g。2、藥物的制備將前述稱取的各藥物加水進行煎煮。第一次加12倍重量的水提取揮發油3h，蒸餾 后收集揮發油，水提液另存；第二次藥渣加10倍水煎煮2h ；合并2次煎液，過濾，濾液濃縮 至比重為1.06，噴霧干燥；用95%乙醇溶解揮發油，噴灑于經干燥處理后的顆粒，拌勻后， 制粒或裝入膠囊。本發明藥物的另一制備方法是按傳統方法將各藥物加水進行煎煮，取水提液進行 實驗，其實驗結果與前述類似，但其效果遠低于前述制備方法制備的藥物效果。二、動物實驗1. 1試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g 藥物相當于生藥23. 08g;所使用的復方阿膠漿由山東東阿阿膠股份有限公司生產，批號 080824。1. 2實驗動物昆明種小鼠，體重(20 士 2) g，早、$各半，蘭州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合 格備用。1. 3 儀器動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平，上海精密科學儀器有限公司。96孔培養板(英國CORNING)，二氧化碳培養箱(德國 HEREUS)，倒置顯微鏡(日本OLYMPUS)，960型酶標儀(臺灣ERMAINC)。所有實驗數據均用 SPSS 11.0統計軟件進行分析。1.4 試劑苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司；無水乙醇，天津市化學試劑六廠三分廠； RPMI-1640培養液(美國GIB CO)，四甲基偶氮唑鹽(MTT，美國SIG MA)，二甲亞砜(DMS0，美 國SIG MA)，刀豆蛋白A(C0NA，美國SIG ΜΑ), α -甲基甘露糖苷(a-mm，美國GIB CO)，滅活 新生小牛血清(天津生化制品廠)(一 )本發明對慢性疲勞小鼠免疫調節功能的影響1. 1實驗動物飼養小鼠室溫飼養，自由進食飲水，第1周適應性訓練，第2周開始除正常組外，各組小 鼠于直徑65cm、水深70cm的靜止水中進行游泳訓練，水溫保持在15士2°C，每天訓練。第1 周起開始訓練時間為lOmin，以后每日增加lOmin，加至50min時維持此訓練量至實驗結束。 同時每日小鼠進食時電刺激。1. 2干預措施小鼠40只，隨機分成5組，每組8只，分別為正常組、模型對照組、復方阿膠漿陽 性對照組[50g/(kg. d)]、本發明藥物低劑量
和高劑量[1.38g/(kg. d)]2 個給藥組。根據以上劑量將復方阿膠漿和本發明藥物膠囊分別配制成混懸液。灌胃量每次 0. 4mL, 2次/d ；正常組及模型組灌胃生理鹽水，連續3w。1. 3脾細胞懸液制備實驗動物停藥后摘眼球放血，脫白處死，無菌取出脾臟，用橡皮塞輕輕擠壓過200 目不銹鋼篩網，制成細胞懸液，收集濾液于試管中，1500r/min離心5min，棄上清。每管加 3mLpH 7. 2的Tris-NH4Cl溶液溶解紅細胞，離心，Hanks液洗2次。用RPMI-1640完全營養 液調整細胞濃度至IXIO1VI細胞懸液，以備檢測時使用。1. 4自然殺傷細胞活性的測定 將脾細胞懸液分別加入96孔培養板中，每孔100 μ L，每組設3復孔，以L929作為靶 細胞，檢測自然殺傷細胞活性，其活性以靶細胞溶解的百分率表示。1. 5IL-2 活性測定將脾細胞懸液分別加入96孔培養板中，每孔100 μ L，每組設3復孔，再加入IOmg/ L ConAlOO μ L，37°C，50mL/L CO2培養24h，收集上清液，即IL-2待測樣品。用IL-2依賴株 CTLL細胞作為檢測細胞，調整細胞濃度至1 X 1010/L,接種于96孔培養板，每孔100 μ L，再加 Λ IOOyL待測IL-2樣品，37°C，50mL/L CO2培養24h，用MTT比色法在酶標儀上檢測A值。1. 6干擾素活性測定將脾細胞加入96孔培養板中，每孔100 μ L，再加入10mg/L ConA 100yL,37°C, 50mL/L CO2培養48h，離心，收集上清，用微量細胞病變抑制法測定干擾素活性，用Reed Muench法計算干擾素活性。1. 7實驗結果與討論本發明的藥物對慢性疲勞模型小鼠IL-2-干擾素_自然殺傷細胞免疫調節網的影 響見表1。
表1各組小鼠白細胞介素2、干擾素和自然殺傷細胞活性變化
白細胞介素2活性 干擾素活性 自然殺傷細胞活性 與正常組比較TP < 0. 01 ；與模型組比較*P < 0.05, AP < 0. 01 ；與陽性對照組 比較 P < 0. 05，Ο ρ < 0. 01 ；與低劑量組比較_ P < 0. 05。中醫學認為慢性疲勞綜合征是一種涉及多臟腑、多系統功能失調的疾病，與肝腎 虧損、心脾兩虛關系密切，其發病多與情志不遂、勞逸、外邪有關。實驗和臨床研究均表明， 慢性應激能導致機體行為改變、多種功能失調，甚至會引起組織結構的改變。在各種慢性應 激中，不可預期的應激比可預期的應激更易對機體產生不良影響。基于以上認識并參考有 關文獻，本實驗選用強制冷水游泳作為應激源，在每天的不同時間造模，并改變造模持續時 間，減少機體對應激的耐受，同時小鼠進食時電刺激，力圖制造一個包括溫度刺激(寒冷)、 體力消耗(游泳)、電刺激以及精神刺激(強制冷水游泳所致情緒刺激)在內的由多種應激 因素所致的應激動物模型。它既模擬了中醫有關疲勞的發病過程，也符合西醫所認為的由 慢性應激導致疲勞從而使免疫力低下的理論。IL-2、干擾素、自然殺傷細胞都是機體極為活 躍的免疫調節因素，三者組成的IL-2-干擾素-自然殺傷細胞免疫調節網在調節機體免疫 應答中起重要作用，實驗結果顯示，模型對照組與正常組比較差異顯著，慢性疲勞模型動物 免疫調節網水平比正常動物明顯降低，說明造模成功；經本發明藥物膠囊治療后，慢性疲勞 模型動物低下的IL-2、干擾素、自然殺傷細胞活性皆有明顯升高，并且高劑量組恢復至接近 正常水平，在提高IL-2、自然殺傷細胞活性方面，本發明藥物膠囊高劑量組作用均優于小劑 量組及復方阿膠漿組，而在提高干擾素活性方面，本發明藥物膠囊高、低劑量組的作用都比 復方阿膠漿顯著；從而說明本發明藥物膠囊具有免疫增強和免疫調節作用，提高和調整機 體低下的IL-2、干擾素、自然殺傷細胞免疫調節網水平，可能是本發明藥物膠囊發揮補中益 氣，滋陰養血功效，治療慢性疲勞綜合征機制之一，并與中醫虛勞病理論中“虛則補之”的治 法相吻合。因此，本發明藥物具有抗應激、抗疲勞和提高機體免疫力的作用。( 二)本發明藥物對小鼠耐疲勞能力的影響用游泳法制備小鼠疲勞探討本發明藥物膠囊抗疲勞作用。2. 1試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g藥 物相當于生藥23. 08g ；人參，購于本市醫藥公司，用水提取法，制成每mL含原藥材0. 4g的 藥液備用。
6
2. 2實驗動物昆明種小鼠，體重(20 士 2) g，早、$各半，蘭州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合 格備用。2. 3 儀器動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平， 上海精密科學儀器有限公司。所有實驗數據均用SPSS11. 0統計軟件進行分析。2. 4 試劑苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司。2. 5試驗方法小鼠32只，隨機分成4組，每組8只，第1周適應性飼養，第2周分別為正常組、 人參提取液陽性對照組[相當于原藥材16g/(kg. d)]、本發明藥物膠囊低劑量
和高劑量[1.38g/(kg.d)]2個給藥組。根據以上劑量將本發明藥物膠囊分別配制成相 應濃度的混懸液。灌胃量每次0.4mL，2次/d;正常組灌胃生理鹽水，連續lw。末次給藥后， 各組動物尾根部負重為體重的8%，投人深30cm、溫度為21 士 2°C的水中，以小鼠入水至沉 入水底停止掙扎的時間作為游泳時間，各組與空白組比較，作組間t檢驗。2. 6結果與討論本發明藥物膠囊對疲勞模型小鼠的耐力影響見表2。結果顯示，本發明藥物膠囊高、低劑量組的游泳時間分別比空白對照組分別延長 101%,70%,該差異均有顯著性意義。提示本發明藥物膠囊能提高小鼠耐疲勞能力。表2本發明藥物膠囊對小鼠游泳時間的影響結果
(三)本發明藥物膠囊對小鼠紅細胞、肝臟超氧化物歧化酶活性影響
通過測定小鼠紅細胞、肝臟超氧化物歧化酶活性探討本發明藥物膠囊的藥理作用。3. 1試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g藥 物相當于生藥23. 08go3. 2實驗動物昆明種小鼠，體重(20 士 2) g，早、$各半，蘭州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合 格備用。3. 3 儀器動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平，上海精密科學儀器有限公司。所有實驗數據均用SPSS11. 0統計軟件進行分析。3. 4 試劑苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司；鄰苯三酚，江蘇省無錫科技實驗二廠產
ρ
BFI ο3. 5試驗方法小鼠24只，隨機分成3組，每組8只，第1周適應性飼養，第2周分別為正常組、 本發明藥物膠囊低劑量
和高劑量[1. 38g/(kg. d)] 2個給藥組，根據以上劑 量將本發明藥物膠囊分別配制成相應濃度的混懸液。灌胃量每次0. 4mL, 2次/d ；正常組灌 胃生理鹽水，連續10d。末次給藥后次日，各鼠均摘眼球采血，剖取肝臟，提取S0D，以改進鄰 苯三酚自氧化法測其活性，各組與空白組比較，作組間t檢驗。3. 6結果與討論本發明藥物膠囊對小鼠紅細胞、肝臟超氧化物歧化酶活性影響見表3。表3本發明藥物膠囊對小鼠紅細胞、肝臟超氧化物歧化酶活性的影響 與正常組比較AP< 0.05，*P < 0.01。結果可見，本發明藥物膠囊高低劑量組紅細胞及肝臟的超氧化物歧化酶活性均高 于空白對照組，差異均有顯著性意義，提示本品有提高小鼠及肝臟超氧化物歧化酶活性的 作用。(四)本發明藥物膠囊對小鼠脾臟、胸腺重量的影響通過測定環磷酰胺致小鼠模型的紅細胞、肝臟超氧化物歧化酶活性探討本發明藥 物膠囊的藥理作用。4. 1試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g藥 物相當于生藥23. 08g ；注射用環磷酰胺(CPA，081003)，上海第十二制藥廠產品。4. 2實驗動物昆明種小鼠，體重(20 士 2) g，早、$各半，蘭州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合 格備用。4. 3 儀器動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平， 上海精密科學儀器有限公司。所有實驗數據均用SPSS11. 0統計軟件進行分析。4. 4 試劑
苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司。4. 5試驗方法小鼠32只，隨機分成4組，每組8只，第1周適應性飼養，第2周分別為除正常組 外余三組均以20m/kg腹腔注射CPA，隔日1次，共3次。給CPA后第2天，模型對照組及正 常組給生理鹽水，本發明藥物膠囊低劑量
和高劑量[1. 38g/(kg. d)]2個給 藥組分別給藥。根據以上劑量將本發明藥物膠囊分別配制成相應濃度的混懸液。灌胃量每 次0. 4mL，2次/d，連續10d。末次給藥后次日，剖取脾臟及胸腺稱重，按體重所含的臟器重 量換算成臟器重量系數，各組與空白組比較，作組間t檢驗。4. 6結果與討論本發明藥物膠囊對小鼠脾臟、胸腺重量的影響見表4。表4本發明藥物膠囊對小鼠脾臟、胸腺重量的影響 與模型組比較▲ P < 0. 05。結果可見，本發明藥物膠囊高劑量組對模型小鼠的脾臟及胸腺重量系數與模型對 照組比較，差異有顯著性意義，低劑量組對脾臟重量系數與空白對照組比較也有顯著性差 異，提示本品對所致小鼠脾臟及胸腺的萎縮有一定的拮抗作用。(五)本發明藥物膠囊對失血性貧血小鼠血液的Hb、RBC、WBC的影響通過測定失血性貧血小鼠血液Hb、RBC、WBC探討本發明藥物膠囊的藥理作用。5.1試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g藥 物相當于生藥23. 08go
格備用

5. 2實驗動物
昆明種小鼠，體重(20 士 2) gU各半，.州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合
5. 3儀器
動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平， 上海精密科學儀器有限公司。倒置顯微鏡(日本OLYMPUS)。所有實驗數據均用SPSS11.0 統計軟件進行分析。5. 4 試劑苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司。5. 5試驗方法小鼠24只，雌雄兼用，隨機分成3組，每組8只，第1周適應性飼養，第2周實驗動 物均從眼球后靜脈叢放血(5滴/IOg體重)作血虛造模，同時取血作Hb含量(HICN法)、RBC數及WBC數(顯微鏡計數法)測定，作為造模前正常值。次日同法放血，第3日再同法 放血測定上述三項指標，作為造模后值。隨即給藥，分別為空白對照組生理鹽水灌胃，本發 明藥物膠囊低劑量
和高劑量[1. 38g/(kg. d)] 2個給藥組，根據劑量將本發 明藥物膠囊分別配制成相應濃度的混懸液灌胃。灌胃量每次0.4mL，2次/d，連續lw。給藥 第4天的給藥后3h，同法采血測定上述三項指標，作為給藥后值。第7日再采血測WBC (表 5為第7日測值)，以給藥后升高值(給藥后值-造模后值)、恢復率(給藥后值/造型前正 常值X 100% )為指標，各組與空白組比較，作組間t檢驗。5. 6結果與討論本發明藥物膠囊對失血性貧血小鼠血液Hb、RBC, WBC的影響見表5。表5本發明藥物膠囊對失血性貧血小鼠血液Hb、RBC, WBC的影響 與造模前值比較AP < 0. 05 ；與空白對照組比較*P < 0.05。結果可見，本發明藥物膠囊高、低劑量組的給藥后升高值與空白對照組比較，恢復 率均高于空白對照組，其中低劑量組的Hb、RBC差異有顯著性意義，提示本品對失血性貧血 小鼠Hb、RBC的恢復有一定的促進作用。由于造型方法為放血法，結果顯示對WBC的影響不 明顯，故此造型不足以了解本品對WBC的影響。(六)本發明藥物膠囊對小鼠小腸推進功能和大腸水分含量影響本試驗從正常小鼠小腸推進功能和大腸水分含量的角度探討本發明藥物膠囊滋 陰養血，行氣潤燥的治療作用。6.1試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g藥 物相當于生藥23. 08go ；墨汁的配制準確稱取阿拉伯樹膠100g，加水800mL，煮沸至溶液 透明，稱取活性碳(粉狀)50g,加至上述溶液中煮沸3次，待溶液涼后加水定容到1000mL。 苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司；無水乙醇，天津市化學試劑六廠三分廠；阿拉伯明 膠、活性炭，重慶東試化工有限公司生產。10%水合氯醛，由蘭州市第一人民醫院藥劑科提 {共。6. 2實驗動物
昆明種小鼠，體重(20 士 2) g，早、$各半，蘭州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合 格備用。6. 3 儀器動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平， 上海精密科學儀器有限公司。所有實驗數據均用SPSS11. 0統計軟件進行分析。6. 4試驗方法小鼠24只，雌雄兼用，隨機分成3組，每組8只，第1周適應性飼養，第2周后，空白 對照組生理鹽水灌胃，本發明藥物膠囊低劑量
和高劑量[1. 38g/(kg. d)]2 個給藥組，根據劑量將本發明藥物膠囊分別配制成相應濃度的混懸液灌胃。灌胃量每次 0. 4mL, 2次/d，連續lw。第8天實驗動物均禁食不禁水12h后，2 %墨汁蒸餾水灌胃，15min后 頸椎脫白處死，打開腹腔，分離腸系膜，取出自幽門至回盲部的腸管，在沒有牽拉的情況下 輕輕將小腸拉成直線，測量幽門至回盲部的距離為小腸總長度，測量自幽門至墨汁推進前 沿的距離為墨汁推進距離，以公式“墨汁推進率=墨汁推進長度/小腸總長度X100%”計 算推進率；在計算墨汁推進率后計算水分含量，在沒有牽拉情況下準確剪取小鼠大腸(直 腸上部5cm處)5cm，稱濕重；然后放入60°C烘箱中干燥5h，再在105°C干燥20h后至恒重， 稱其干重，以公式“水分含量％=(濕重-干重)/濕重X100%”。各組與空白組比較，作 組間t檢驗。6. 5結果與討論本發明藥物膠囊對小鼠小腸推進功能和大腸水分含量影響見表6。表6本發明藥物膠囊對小鼠小腸推進功能和大腸水分含量影響
低劑量組834 士 5α72 士 6*
高劑量組836±7α76±4α與造模前值比較AP < 0. 05 ；與空白對照組比較*Ρ > 0.05。結果可見，本發明藥物膠囊高、低劑量組分別與空白對照組比較，小腸推進率和大 腸水分含量均高于空白對照組，其中高劑量組的小腸推進率和大腸水分含量差異有顯著性 意義，提示本發明藥物膠囊具有滋陰養血，行氣潤燥之功，可顯著增加正常小鼠小腸推進率 和大腸水分含量。試驗總結綜上實驗結果表明，本發明藥物膠囊可提高和調整小鼠低下的IL-2、干擾素、自然 殺傷細胞免疫調節網水平、耐疲勞能力、小腸推進率和大腸水分含量和紅細胞及肝臟的超 氧化物歧化酶活性；對所CPA致小鼠脾臟及胸腺萎縮有一定拮抗作用；對失血性貧血小鼠 Hb和RBC的恢復有一定促進作用。本發明藥物膠囊方中黃芪、當歸、黃精、川芎益氣補血，行氣潤燥為君。枸杞、肉蓯 蓉、丹參、香附滋陰養血，行氣為臣；黃芪補氣升陽，攝血散結，輔以肉蓯蓉可載黃芪補氣之 力達于腎，共舉補腎氣助腎陽之效；當歸，養血潤燥，增水行舟，輔以丹參偏于養血；黃精補中益氣，輔以枸杞助黃精養陰潤肺；川芎行氣開郁，入血分理血中之氣，輔以香附暢通氣血。 五味子滋腎斂肺為佐，砂仁醒脾和胃為使。十味合用，補中有通，滋陰不膩，養血活血，恢復 營血。以上實驗結果表明，與本品臨床用于治療氣血兩虛，腹脹便結等證基本一致，給本品 的臨床應用提供了一定的動物實驗依據七、本發明的安全性評價試驗用藥本發明的藥物膠囊采用前述2、藥物的制備中第一段的方法制備，經計算，每g藥 物相當于生藥23. 08go7. 2實驗動物昆明種小鼠，體重(20 士 2) g，早、$各半，蘭州大學實驗動物中心提供，經檢疫后合 格備用。7. 3 儀器動物天平、秒表、手術剪、眼科鑷、灌胃針及注射器、動物籠具。FA2004B電子天平， 上海精密科學儀器有限公司。OlympusU-PMTVC雙目顯微鏡。RM2135切片機(德國Leica 公司)。所有實驗數據均用SPSS11. 0統計軟件進行分析。7. 4 試劑苦味酸，沈陽瑞豐精細化學品有限公司。7. 5試驗方法7. 5.1急性毒性實驗取小鼠40只，隨機分2組，雌雄各半，實驗前禁食不禁水12h，按可灌服的最大體 積(0.4mL/10g)，給藥組每次給每只小鼠灌服最大濃度的本發明膠囊混懸液lmL，并于1日 之內連給5次，每次間隔4. 8h，日累積劑量為25. 88g/(kg. d)；空白對照組灌服同體積生理 鹽水。然后實驗動物正常飲食，連續觀察7天，未見動物發生死亡，灌藥后動物活動略有減 少，無其它異常生物學特征，一般Ih內恢復正常。第7天稱重，然后處死小鼠，解剖，未有肉 眼可見的肝、心、脾、肺、腎、胃、腸的異常，空白組小鼠第7天體重為24. 6士2. 3g，給藥組第7 天體重為23. 1 士 1.8g。7. 5. 2長期毒性實驗取小鼠60只，雌雄各半，隨機分成3組對照組、本發明膠囊低劑量
和高劑量[1.38g/(kg.d)]2個給藥組。根據以上劑量將復方阿膠漿和本發明膠囊分別 配制成混懸液。灌胃量每次0.4mL，2次/d;對照組灌胃生理鹽水，連續10w。測定小鼠體 重、心肝腎功能、心電圖等指標，給藥組分別與對照組比較，未見明顯異常。7. 5. 3組織切片制備方法取急性毒性和長期毒性實驗動物的肝、腎等臟器10%甲醛溶液固定，48h混合酸 脫鈣，10天流動水沖洗，4h乙醇梯度脫水，石蠟包埋，切片，用HE染色鏡下觀察組織形態。7. 4結果與討論急性毒性實驗腎、肝等臟器病理切片觀測見附圖1和附圖2，以上日累積劑量為 25. 88g/(kg. d)，該劑量換算為人用劑量相當于臨床最高用量的19倍以上，可以認為本品 臨床應用安全性比較高。病理學檢查肝、腎等臟器，給藥組分別與對照組比較，均未見中毒性改變。以上結果提示本發明安全無毒,可用于臨床。 長期毒性實驗腎、肝等臟器病理切片觀測見附圖3和附圖4，急性毒性和長期毒性 試驗表明都未見到明顯毒性反應，提示本發明安全無毒，臨床使用比較安全可靠。
權利要求
一種治療慢性疲勞綜合癥的藥物，其特征是黃芪25～35g，當歸8～12g，黃精13～18g，川芎10～15g，枸杞8～12g，五味子8～12g，丹參18～24g，香附8～12g，肉蓯蓉8～12g，砂仁4～8g。
2.權利要求1所述的治療慢性疲勞綜合癥的藥物的制備方法，其特征是將稱取的各藥 物加水煎煮得水提液，在煎煮的同時收集揮發油，再將水提液濃縮干燥處理得顆粒物，用乙 醇溶解所得揮發油并噴灑于顆粒物上，再將顆粒物制粒或裝入膠囊。
3.權利要求2所述的制備方法，其特征是稱取各藥物，第一次加12倍重量的水提取揮 發油3h，蒸餾后收集揮發油，水提液另存；第二次藥渣加10倍水煎煮2h ；合并2次煎液，過 濾，濾液濃縮至比重為1.06，噴霧干燥；用95%乙醇溶解揮發油，噴灑于干燥顆粒，拌勻后， 制粒或裝入膠囊。
全文摘要
本發明涉及一種由植物復方組成的用于治療慢性并疲勞綜合癥的藥物。本發明的藥物由黃芪25～35g，當歸8～12g，黃精13～18g，川芎10～15g，枸杞8～12g，五味子8～12g，丹參18～24g，香附8～12g，肉蓯蓉8～12g，砂仁4～8g組成，其制備方法是將稱取的各藥物加水煎煮得水提液，在煎煮的同時收集揮發油，再將水提液濃縮干燥處理得顆粒物，用乙醇溶解所得揮發油并噴灑于顆粒物上，再將顆粒物制粒或裝入膠囊。
文檔編號A61K36/9064GK101879293SQ20101020490
公開日2010年11月10日 申請日期2010年6月18日 優先權日2010年6月18日
發明者王孝義, 賀殿, 賈忠, 邱楠楠 申請人:甘肅效靈生物開發有限責任公司