專利名稱：大黃及其提取物在制備降低餐后血糖的藥物中的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及中藥及其提取物新的用途，具體的說，本發明涉及中藥大黃及其提取物在制備降低餐后血糖的藥物中的用途，可用于制備α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物。
背景技術：
多年來糖尿病的治療主要以控制空腹血糖為目標，治療藥物長期以來主要集中于磺脲類與雙胍類藥物。近年來研究發現，餐后血糖也是糖尿病并發癥發生的主要危險因子，糖尿病時餐后血糖是一天中血糖水平最高的階段，其持續時間可達8小時之久或更長，長時間高水平的餐后血糖可加重糖尿病本身，使血糖進一步升高，如果在進餐時就能很好的控制高血糖，則可以避免其餐后血循環中的糖分堆積，因此，控制餐后血糖可以說是控制高血糖、防治糖尿病的重要舉措。現有的糖尿病治療藥物中，磺脲類藥物通過刺激胰島素的分泌而降低血糖；雙胍類藥物則通過增加外周組織對葡萄糖的利用而降低血糖，兩者對降低II型糖尿病病人空腹血糖均有較好療效，但對降低餐后血糖的作用卻非常有限。
食物中的絕大多數碳水化合物為淀粉與蔗糖等，淀粉先后經唾液及胰液中α-淀粉酶分解為寡糖，寡糖在小腸上皮細胞刷狀緣處被α-葡萄糖苷酶分解為葡萄糖而被吸收后，導致餐后血糖高峰，因此，抑制α-葡萄糖苷酶的活性成為降低餐后血糖的一個有效途徑。
α-葡萄糖苷酶抑制劑是七十年代后期研究開發出的一類新型口服降血糖藥物，其作用機理在于競爭性的抑制α-葡萄糖苷酶，延緩和阻礙碳水化合物的消化，延遲來自雙糖，低聚糖及多糖的葡萄糖的吸收，有效推遲并減輕餐后血糖升高的時間及程度，長期服用還可以降低空腹血糖水平，此類藥物對I、II型糖尿病均適用。α-葡萄糖苷酶抑制劑不僅對糖尿病有確切的療效，而且對于肥胖癥、慢性乙肝、艾滋病及腫瘤都有一定的治療作用。目前用于臨床的此類藥物有阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇。傳統中藥及天然植物藥具有相對安全和價格低廉的特點，開發中藥及天然植物藥作為α-葡萄糖苷酶抑制劑可以提供更廣泛的糖尿病治療藥物來源。
大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.唐古特大黃Rheumtanguticum Maxim ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖，性寒味苦，具有瀉下攻積，清熱瀉火，止血解毒，活血祛瘀的功效。常用于治療熱結便秘，胃腸積滯；血熱妄行之出血；熱毒瘡瘍，燒燙傷以及瘀血證。現代研究表明大黃主要含蒽醌衍生物，還含有大黃鞣質、脂肪酸、草酸鈣、葡萄糖、果糖和大量淀粉。現代藥理研究表明大黃煎劑及其提取物具有廣泛的藥理作用。《中藥現代研究與應用》(第一卷)(鄭虎占主編，學苑出版社出版425-426)報道大黃水煎劑具有消除II型糖尿病胰島素抗性，改善糖脂代謝的作用；大黃醇提物能明顯改善實驗大鼠的腎功能，抑制腎臟肥大，減少蛋白尿，改善糖尿病腎病的脂代謝紊亂，降低血糖和糖代血紅蛋白水平；大黃與其它藥物(糖尿寧)合用，能明顯降低高胰島素血癥，改善病鼠的糖耐量異常及多種脂代謝障礙指標。此外大黃中的有效成分能增加腸蠕動抑制腸內水分吸收，促進排便；還具有抗感染作用，對多種革蘭氏陽性和陰性細菌均有抑制作用；有健胃、利膽、保肝、降壓等作用(中藥學，雷載權主編，上海科學技術出版社出版98-99)。大黃的研究進展中國藥學進展，1998，10(33)中報道了大黃具有清除氧自由基、抑制血管平滑肌細胞增殖的作用，對免疫系統具有雙向調節等作用。但目前尚未見大黃在制備具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的藥物和降低餐后血糖的藥物中的應用報道。

發明內容
本發明人經過大量的篩選實驗發現，中藥大黃具有良好降低餐后血糖的作用，能抑制α-葡萄糖苷酶的活性。本發明的目的是提供中藥大黃及其提取物在制備降低餐后血糖的藥物中的用途。
技術方案本發明提供大黃及其提取物在制備降低餐后血糖的藥物中的用途。更進一步地，提供大黃及其提取物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物中的用途。所述的大黃來自于蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim ex Balf.或藥用大黃Rheumofficinale Baill.的干燥根及根莖。
中藥大黃在用于制備降低餐后血糖的藥物時，可以是將大黃原生藥直接加工成藥物，也可以是對大黃原生藥進行分離提取，將其提取物(水或有機溶劑提取物)制備成藥品，也可以是將中藥大黃與其它藥物組成復方制劑。
所述的大黃有機溶劑提取物為甲醇、乙醇、含水乙醇提取物。
所述的大黃提取物的制備方法，包括以下步驟a、將中藥大黃粉碎，用水、甲醇或乙醇，或濃度為20～95％的含水乙醇提取、濃縮成浸膏，浸膏溶于蒸餾水，離心，取上清液備用；b、將a步驟處理后得到的上清液，再過大孔吸附樹脂柱，以水洗凈不吸附的雜質，再用醇、酮或濃度為25～95％的含水醇洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥，得到成品。
中藥大黃，即掌葉大黃(Rheum palmatum L.)唐古特大黃(Rheumtanguticum Maxim ex Balf.)或藥用大黃(Rheum officinale Baill.)的干燥根及根莖為原料，直接加工制備成藥品，可以是將上述原生藥直接凈制后粉碎，過80-120目篩，制成細粉，再將細粉裝膠囊，或制備成片劑、丸劑、顆粒劑、散劑。
用中藥大黃原生藥為原料，進行初步提取后制備成藥品。可以采用現代技術中的各種常規提取方法進行提取，例如，以水為溶劑提取，或者以乙醇、甲醇等有機溶劑提取，優選乙醇提取。也可以采用以下方法制備大黃提取物a、將中藥大黃粉碎，用水、甲醇或乙醇，或含水乙醇類提取、濃縮、沉淀離心，得上清液備用；具體地，將原材料經過適當的粉碎，用水、甲醇或乙醇，或含水乙醇在靜或動態環境下，室溫或加熱回流提取，提取溶劑為原生藥重量的5～12倍，可重復提取1～3次，合并提取液、濾去藥渣，在常壓或減壓狀態下濃縮致一定濃度，通過醇沉、絮凝等方法，使雜質沉淀，再經過離心或過濾(包括常壓、減壓、微濾、超濾)，除去不溶物質，得上清液備用；b、將a步驟處理得到的上清液，再上大孔樹脂柱，以水洗凈不吸附的雜質，再用醇、酮或含水醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，真空干燥、冷凍、干燥收集液直接噴霧干燥得干粉。
本發明還提供一種作為降低餐后血糖的藥物組合物，其含有所述的大黃原生藥粉、或其水或有機溶劑提取物。
更進一步地，它是以所述的大黃原生藥粉、或其水或有機溶劑提取物為活性成分，加上藥學上可接受的載體或輔助性成分制備而成的藥物制劑。
所述的藥物制劑是膠囊劑、顆粒劑、片劑、散劑、口服液、糖漿劑。
有益效果中藥大黃，或其水提物，或其有機溶劑提取物，或提取物、或其藥物復方制備的藥物及其制劑，具有良好降低餐后血糖、抑制α-葡萄糖苷酶的作用。中藥大黃來源于天然植物，藥源充足，提取制備方法簡便易行，可將其制成膠囊、片劑、顆粒劑、口服液多種劑型，能有效地抑制α-葡萄糖苷酶活性，降低餐后血糖，具有療效顯著、價格低廉、使用安全方便等優勢特點。
顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術和慣用手段，在不脫離本發明上述基本思想的前提下，還可以作出其他多種形式的修改、替換與變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。


圖1為大黃提取物對α-葡萄糖苷酶活性的抑制效應的測定結果。縱坐標代表酶活性抑制率，橫坐標代表DH-01、DH-02、DH-03、拜唐蘋。圖中比較了以麥芽糖、蔗糖、淀粉為底物時，大黃提取物DH-01、DH-02、DH-03、拜唐蘋對α-葡萄糖苷酶的抑制活性。
具體實施例方式
實施例1大黃原生藥藥品的制備取中藥大黃原生藥，即掌葉大黃(Rheum palmatum L.)唐古特大黃(Rheum tanguticum Maxim ex Balf.)或藥用大黃(Rheum officinaleBaill.)的干燥根及根莖凈制以后，按常規方法粉碎，過篩，制成粒度為60-80目的大黃細粉，細粉裝入膠囊，滅菌，分裝即成。
實施例2大黃水提取物、大黃乙醇提取物的制備中藥大黃，即掌葉大黃(Rheum palmatum L.)唐古特大黃(Rheumtanguticum Maxim ex Balf.)或藥用大黃(Rheum officinale Baill.)的干燥根及根莖為原料，除去雜質。取大黃原生藥500g，粉碎后加入10倍量水，加熱回流提取2小時，濾渣再加十倍量水，加熱回流提取2小時，過濾，合并兩次濾液，濃縮得大黃水提取物(以下稱DH-1)。另取大黃原生藥1000g，粉碎后加入70％乙醇溶液10L，加熱回流提取2小時，濾渣再加70％乙醇溶液6L，加熱回流提取2小時，過濾，合并兩次濾液，濃縮得大黃乙醇提取物(以下稱DH-2)。
實施例3大黃提取物的制備取200g大黃原生藥，粉碎后，分別用1600ml95％與30％乙醇浸漬兩次，每次12小時，合并浸漬液，減壓濃縮制成浸膏，將浸膏溶于2L蒸餾水，取上清液，上清液依次流經非極性(D-140)和極性(D-160)大孔吸附樹脂柱，用3倍柱體積蒸餾水，將極性樹脂柱洗脫至流出液無色，再分別用75％和25％的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮干燥，得到固體粉末630mg(以下稱DH-3)。
實施例4大黃提取物DH-1、DH-2、DH-3對α-葡萄糖苷酶的體外抑制作用1)以淀粉為底物時，大黃提取物對α-葡萄糖苷酶抑制活性測定分別稱取一定量的大黃提取物DH-1、DH-2、DH-3，用生理鹽水均配置成濃度為0.1mg/ml的藥物溶液，再取三種溶液各20μl分別與2μlα-淀粉酶(0.4U/μl，購自SIGMA公司)混合，在37℃孵育10分鐘，加入1％的淀粉溶液室溫放置3-5分鐘，用碘滴定顯色法，在630nm波長下測定OD值，通過淀粉消耗量計算α-葡萄糖苷酶活性抑制率；設定空白對照、陰性對照、陽性對照(拜唐蘋，北京拜耳醫藥保健有限公司生產)，抑制率＝((樣品-陰性)/(空白-陰性))×100％，結果見圖1。
2)以麥芽糖為底物時，大黃提取物對α-葡萄糖苷酶抑制活性測定分別稱取一定量的大黃提取物DH-1、DH-2、DH-3，用生理鹽水均配置成濃度為0.28mg/ml的藥物溶液，再取三種溶液各20μl分別與2μlα-葡萄糖苷酶(0.02U/μl，購自SIGMA公司)混合，在37℃孵育10分鐘，加入麥芽糖，37℃繼續孵育10分鐘；采用葡萄糖氧化酶法，在490nm波長條件下，測定OD值，以葡萄糖的生成量計算α-葡萄糖苷酶活性抑制率；設定空白對照、陰性對照、陽性對照(拜唐蘋，北京拜耳醫藥保健有限公司生產)，抑制率＝((陰性-樣品)/(陰性-空白))×100％，結果見圖1。
3)蔗糖為底物時，大黃提取物對α-葡萄糖苷酶抑制活性測定分別稱取一定量的大黃提取物DH-1、DH-2、DH-3，用生理鹽水均配置成濃度為0.28mg/ml的藥物溶液，再取三種溶液各20μl分別與2μlα-轉化酶(0.106U/μl，購自SIGMA公司)混合，在37℃孵育10分鐘，加入蔗糖，37℃繼續孵育10分鐘；采用葡萄糖氧化酶法，在490nm波長條件下，測定OD值，以葡萄糖的生成量計算α-葡萄糖苷酶活性抑制率；設定空白對照、陰性對照、陽性對照(拜唐蘋，北京拜耳醫藥保健有限公司生產)，抑制率＝((陰性-樣品)/(陰性-空白))×100％，結果見圖1。
由圖1結果可以看出，大黃提取物DH-1、DH-2、DH-3在體外對α-葡萄糖苷酶有顯著抑制作用。
實施例5大黃提取物DH-3對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量影響試驗取體重22-26g昆明種小鼠，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶，72小時后測定血糖，選取血糖值在13mM以上的小鼠，按每組10只，雌雄各半分為6組，即糖尿病模型組、拜唐蘋組、大黃提取物DH-3高劑量組、中劑量組、低劑量組，拜唐蘋劑量為20mg/kg(體重)，大黃提取物DH-3高劑量組為400mg/kg、中劑量組為200mg/kg、低劑量組為100mg/kg；測定空腹血糖(0min)，給藥十分鐘后(模型組灌胃以生理鹽水)，各組均灌胃以淀粉5g/kg，分別于30min、60min、90min、120min取眶后靜脈叢血，用葡萄糖氧化酶法在96孔板中測定血糖含量，結果見表1。
表1大黃提取物DH-3對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量的影響組別 例數劑量血糖值(mM)(只)(mg/kg)0min 30min 60min 90min 120min模型組10 25.42±8.30 42.43±7.1041.37±7.2537.83±8.25 36.14±8.73拜唐蘋10 20 26.57±4.76 28.57±3.53** 30.85±5.54** 30.64±4.51* 31.32±5.31DH-3(高) 10 40026.16±4.12 30.75±4.57** 31.98±5.19** 31.54±5.21* 32.05±4.56DH-3(中) 10 20027.32±4.58 32.95±5.83* 35.62±7.35* 35.62±5.33 33.41±4.68DH-3(低) 10 10025.98±8.34 34.83±5.78* 37.32±6.4436.79±5.98 36.10±5.46與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01
從表1可以看出糖尿病小鼠在給予淀粉后，血糖值(模型組)明顯升高。大黃提取物DH-3高劑量組在各時間點均顯著抑制糖尿病小鼠的血糖升高，除30min作用較弱外，其余時間點的作用與拜唐蘋相當；與模型組相比，DH-3中、低劑量組對各時間點糖尿病小鼠的血糖升高均有一定的抑制作用，但作用不及DH-3高劑量組。
通過上述的體外試驗和藥效學試驗，證明大黃及其提取物具有降低餐后血糖的作用，能抑制α-葡萄糖苷酶的活性，提供一種新的用藥選擇，具有療效顯著、價格低廉、使用安全方便等特點。
權利要求
1.大黃及其提取物在制備降低餐后血糖的藥物中的用途。
2.大黃及其提取物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物中的用途。
3.根據權利要求1，2所述的用途，其特征在于所述的大黃來自于蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.唐古特大黃Rheum tanguticumMaxim ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。
4.根據權利要求1，2所述的用途，其特征在于所述的大黃為大黃的原生藥粉。
5.根據權利要求1，2所述的用途，其特征在于所述的大黃提取物是水或有機溶劑提取物。
6.根據權利要求5所述的用途，其特征在于所述的大黃有機溶劑提取物為甲醇、乙醇、含水乙醇提取物。
7.根據權利要求5所述的用途，其特征在于所述的大黃提取物的制備方法，包括以下步驟a、將中藥大黃粉碎，用水、甲醇或乙醇，或濃度為20～95％的含水乙醇提取、濃縮成浸膏，浸膏溶于蒸餾水，離心，取上清液備用；b、將a步驟處理后得到的上清液，再過大孔吸附樹脂柱，以水洗凈不吸附的雜質，再用醇、酮或濃度為25-95％的含水醇洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥，得到成品。
8.一種作為降低餐后血糖的藥物組合物，其特征是含有權利要求4～6所述的大黃原生藥粉、或其水或有機溶劑提取物。
9.根據權利要求8所述的藥物組合物，其特征是它是以權利要求4～6所述的大黃原生藥粉、或其水或有機溶劑提取物為活性成分，加上藥學上可接受的載體或輔助性成分制備而成的藥物制劑。
10.根據權利要求8所述的藥物組合物，其特征是所述的藥物制劑是膠囊劑、顆粒劑、片劑、散劑、口服液、糖漿劑。
全文摘要
本發明提供中藥大黃及其提取物在制備降低餐后血糖的藥物中的用途。大黃原生藥、大黃的水或有機溶劑提取物具有降低餐后血糖的作用，能抑制α－葡萄糖苷酶的活性，在以淀粉、麥芽糖以及蔗糖為底物的體外實驗中，顯示了良好的α－葡萄糖苷酶抑制作用；糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量試驗顯示，給予大黃提取物后，顯著降低糖尿病小鼠淀粉負荷后的血糖升高，對控制餐后血糖的升高有效，為臨床提供一種新的用藥選擇，具有療效顯著、價格低廉、使用安全方便等特點。
文檔編號A61K9/16GK1569067SQ0313545
公開日2005年1月26日 申請日期2003年7月21日 優先權日2003年7月21日
發明者高小平, 徐大勇, 鄒文俊, 劉忠榮, 李伯剛 申請人:成都地奧制藥集團有限公司