一種靈芝提取物及其制備方法和應用
【專利摘要】本發明公開了一種靈芝提取物的制備方法，該方法包括以下步驟：(1)將靈芝菌種注入培養基中，在溫度25～30℃，濕度70～95％的條件下培育45?60天得到培養體；(2)將培養體在60～90℃條件下烘干至含水量為12％以下，再將烘干后的培養體粉碎，過20～60目篩，得到靈芝粉；(3)向靈芝粉中加入水和中性蛋白酶，40～55℃條件下酶解6～24h；(4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈芝提取物。本發明將廉價易得的蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲，蚯蚓等作為培養基，快速培育出靈芝菌絲及子實體，通過酶解?過濾?濃縮?干燥制得靈芝提取物，其營養價值獲得了極大的提高，保健功能明顯提升。
【專利說明】
_種靈芝提取物及其制備方法和應用
技術領域
[0001] 本發明涉及生物和酶工程技術領域，具體涉及靈芝培育、靈芝精華物質的制備方 法及其應用。
【背景技術】
[0002] 靈芝屬于自然界分布的一類真菌生物，是傳統名貴中藥材之一，藥食兼用。古今藥 理與臨床研究均證明，靈芝確有防病治病、延年益壽之功效，具有廣泛的藥理作用，如抗腫 瘤作用、免疫調節作用、抗放射與抗化療作用，鎮靜作用、強心及抗心肌缺血作用、調節血脂 作用、降血糖作用、平喘作用、保肝作用、抗缺氧作用和抗衰老作用等。
[0003] 經化學分析，靈芝中含有多種多糖、多肽、氨基酸、三萜類、核苷等，具有廣闊的市 場前景。但為數眾多的靈芝品種中，只有赤靈芝、紫芝、云芝等具有較高的藥用價值，野生靈 芝的數量遠遠不能滿足人們對藥用靈芝的需求。而且，目前人們利用靈芝的方式多為直接 食用或制成飲品，大部分營養成分未能被人體所吸收。因此，亟需一種高效制備靈芝精華物 質的方法。

【發明內容】

[0004] 本發明的目的在于提供一種靈芝提取物及其制備方法和應用，用以解決靈芝難以 大規模生產，以及靈芝中的營養成分難以被人體充分吸收的問題。
[0005] 為實現上述目的，本發明第一方面提供了一種靈芝提取物的制備方法。具體地，該 方法包括如下步驟：
[0006] (1)將靈芝菌種注入培養基中，在溫度25~30°C，濕度70~95%的條件下培育45~ 60天得到培養體，即靈芝菌絲、靈芝子實體和培養基的混合物；
[0007] (2)將所述培養體在60~90°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培 養體粉碎，過20~60目篩，得到靈芝粉；
[0008] (3)向所述靈芝粉中加入水和中性蛋白酶，40~55°C條件下酶解6~24h;
[0009] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物；
[0010]其中，所述培養基為蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲，蚯蚓，螞蟻，蟬中的一種或多種。
[0011 ] 優選地，所述菌種的接種量為10~30%。
[0012] 優選地，所述中性蛋白酶為木瓜酶、胰蛋白酶、枯草芽孢桿菌蛋白酶中的一種或多 種。
[0013] 優選地，所述步驟(3)中加入水的質量為靈芝粉質量的1~10倍，加入中性蛋白酶 的質量為靈芝粉質量的〇. 1~1 %。
[0014] 優選地，步驟（3)中酶解時還加入脂肪酶，所述脂肪酶的添加量為靈芝粉質量的 0.1 ~0.5%〇
[0015] 優選地，靈芝精華提取物粒徑小于800nm。
[0016] 優選地，所述靈芝精華提取物制成沖劑、片劑或膠囊。
[0017] 本發明第二方面提供了一種靈芝提取物，所述靈芝提取物是本發明第一方面提供 的一種靈芝提取物的制備方法制得的。優選地，所述靈芝提取物含有靈芝多肽20~60%、三 萜1~5%、靈芝多糖1~10%、氨基酸10~30%、核苷1~3%、生物堿0.1~3%、灰分1~5%、 其余為水分。
[0018] 本發明第三方面提供了一種根據本發明第二方面提供的靈芝提取物的應用，所述 靈芝提取物用于食品、保健或醫藥領域。
[0019] 本發明方法具有如下優點：
[0020] 1、本發明利用蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲，蚯蚓，螞蟻，蟬為培養基，操作方法簡單，材料易 于取得，具有低成本、高產出、易于大規模推廣的特點。
[0021] 2、本發明中的培養體的培育條件易于控制，具有菌絲生長速度快，生物量高，培育 周期短，成本低的優點。
[0022] 3、本發明中的靈芝精華提取物具有易溶于水的特點，可根據需要制成各種水溶性 制劑，使用方便。
[0023] 4、本發明中的靈芝精華提取物蛋白含量比普通方法培育出的靈芝蛋白含量提高 了 6倍，營養價值大大提高。
[0024] 5、本發明中的靈芝精華提取物靈芝三萜和靈芝多糖含量比普通方法培育出的靈 芝三萜和靈芝多糖含量提高了 2~3倍，抗腫瘤，抗血栓，抗氧化，抗衰老，抗輻射，保肝，降血 糖，降血脂，調節免疫，調節核酸，增強體液免疫功能的作用明顯提升。
【具體實施方式】
[0025] 以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。
[0026] 實施例1
[0027] 本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0028] (1)將8g靈芝菌種注入50g蟬中，在溫度為25 °C，濕度95 %的條件下培育50天得到 培養體(即靈芝菌絲、靈芝子實體和培養基的混合物）；
[0029] (2)將培養體在90°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過25目篩得到靈芝粉；
[0030] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的6倍的水和質量為靈芝粉質量的1 %的胰 蛋白酶，54°C條件下酶解6h;
[0031] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物(靈芝精華提取物粒徑小于800nm)。
[0032] 實施例2
[0033]本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0034] (1)將18g靈芝菌種注入120g蚯蚓中（即菌種的接種量為15%)，在溫度為29°C，濕 度90 %的條件下培育45天得到培養體；
[0035] (2)將培養體在85°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過30目篩得到靈芝粉；
[0036] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的7倍的水和質量為靈芝粉質量的0.8%的 酶為木瓜酶，40 °C條件下酶解12h;
[0037] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0038] 實施例3
[0039] 本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0040] (1)將14.4g靈芝菌種注入80g黃粉蟲中，在溫度26°C，濕度80%的條件下培育47天 得到培養體；
[0041] (2)將培養體在75°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過40目篩得到靈芝粉；
[0042] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的1倍的水和質量為靈芝粉質量的0.7%的 枯草芽孢桿菌蛋白酶以及質量為靈芝粉質量的0.1%的脂肪酶，53°C條件下酶解14h;
[0043] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0044] 實施例4
[0045] 本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0046] (1)將48g靈芝菌種注入160g雞蛋中，在溫度27°C，濕度72%的條件下培育48天得 到培養體；
[0047] (2)將培養體在80°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過45目篩得到靈芝粉；
[0048] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的2倍的水和質量為靈芝粉質量的0.4%的 木瓜酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶，52 °C條件下酶解8h;
[0049] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0050] 實施例5
[0051] 本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0052] (1)將25g靈芝菌種注入100g螞蟻中，在溫度28°C，濕度70%的條件下培育58天得 到培養體；
[0053] (2)將培養體在65°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過60目篩得到靈芝粉；
[0054] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的8倍的水和質量為靈芝粉質量的0.2%的 木瓜酶和胰蛋白酶，42 °C條件下酶解20h;
[0055] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0056] 實施例6
[0057] 本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0058] (1)將30g靈芝菌種注入150g蠶蛹中，在溫度30°C，濕度75%的條件下培育60天得 到培養體；
[0059] (2)將培養體在60°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過50目篩得到靈芝粉；
[0060] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的9倍的水和質量為靈芝粉質量的0.1 %的 木瓜酶、胰蛋白酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶以及質量為靈芝粉質量的0.5%的脂肪酶，50°C條 件下酶解21h;
[0061] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0062] 實施例7
[0063]本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0064] (1)將24g靈芝菌種注入200g干蠶蛹中，在溫度25 °C，濕度89 %的條件下培育52天 得到培養體；
[0065] (2)將培養體在63°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過20目篩得到靈芝粉；
[0066] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的3倍的水和質量為靈芝粉質量的0.5%的 胰蛋白酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶，48 °C條件下酶解24h;
[0067] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0068] 實施例8
[0069] 本實施例靈芝提取物的制備方法，按以下步驟進行：
[0070] (1)將18g靈芝菌種注入180g干螞蟻中，在溫度28°C，濕度92%的條件下培育56天 得到培養體；
[0071] (2)將培養體在70°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體粉碎， 過35目篩得到靈芝粉；
[0072] (3)向靈芝粉中加入質量為靈芝粉質量的10倍的水和質量為靈芝粉質量的0.6% 的酶為木瓜酶、胰蛋白酶和枯草芽孢桿菌蛋白酶以及質量為靈芝粉質量的0.2%的脂肪酶， 55°C條件下酶解22h;
[0073] (4)將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈 芝提取物。
[0074] 本申請實施例1~8中培養基以溫度25~30°C，濕度70~95%的條件下培育，不僅 可以促進子實體的均衡生長，而且可以避免子實體的僵化。在一個實施例中，可以在培養基 培育過程中，在晚間或清晨開窗門1~2次，每次1~2小時，或全天長緩氣流通風，以促進子 實體的正常發育。其次，子實體發育過程中，還可以增加光照，光照強度在4000~6000LX下 對子實體進行照射，使菌柄粗壯，菌蓋厚大。
[0075]表1實施例1~8靈芝提取物產出率
[0077]從表1中可以看出，實施例1~8制得的靈芝提取物產出率均在9.3%左右。實施例1 ~8中的蠶蛹培養基、雞蛋培養基、黃粉蟲培養基，蚯蚓培養基，螞蟻培養基，蟬培養基靈芝 提取物產出率大體相同，且本實施例中的活體培養基和干培養基的靈芝提取物產出率，都 明顯高于現有產品中產出率的8.2%。本發明實施例1~8制得的靈芝提取物粒徑小于 800nm，且易溶于水，使用時可根據需要制成各種水溶性制劑。
[0078] 表2實施例1~8培養體菌絲生物量
[0080]從表2中可以看出，實施例1~8的培養體菌絲生物量均達到了 6mg/g以上，高于現 有產品的4.7mg/g。實施例1~8中的培養體培養天數均在45-60天，所需培養條件為溫度25 ~30 °C，濕度70~95%，具有培育條件易于控制，菌絲生長速度快，生物量高，培育周期短， 成本低的優點。
[0081]另外，本實施例中的培養體可以采用活體的蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲，蚯蚓，螞蟻，蟬等， 也可以采用干蠶蛹、干黃粉蟲、干蚯蚓、干螞蟻、干蟬等，材料易于取得，具有低成本、高產 出、易于大規模推廣的特點。
[0082]表3實施例1~8制得的靈芝提取物靈芝蛋白、靈芝三萜及靈芝多糖的含量
[0084] 從表3中可以看出，實施例1~8制得的靈芝提取物中靈芝蛋白、靈芝三萜和靈芝多 糖與普通方法培育出的靈芝中的靈芝蛋白、靈芝三萜和靈芝多糖相比有了明顯的提高。本 實施例1~8制得的靈芝提取物中的靈芝蛋白含量與普通方法培育出的靈芝中的靈芝蛋白 含量提高了 6倍;本實施例1~8制得的靈芝提取物中的靈芝三萜含量與普通方法培育出的 靈芝中的靈芝三萜含量提高了 2~3倍;本實施例1~8制得的靈芝提取物中的靈芝多糖含量 與普通方法培育出的靈芝中的靈芝多糖含量提高了 2~3倍。
[0085] 此外，靈芝中靈芝多糖是一種非特異性免疫增強劑，不僅能增強細胞免疫作用，而 且能夠增強體液免疫作用，促進巨噬細胞的吞噬能力，直接地產生抗腫瘤作用;靈芝三萜類 是靈芝菌絲體一、二級代謝產物，是靈芝發揮抗炎、鎮痛、鎮靜、抗衰老、毒殺腫瘤細胞、抗缺 氧等作用的主要功效成分;靈芝中含有18種氨基酸，其中人體必需氨基酸的相對含量高于 50%，為一般食用菌的2~3倍。
[0086]雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施例對本發明作了詳盡的描述，但在本 發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此， 在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。
【主權項】
1. 一種靈芝提取物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟： (1) 將靈芝菌種注入培養基中，在溫度25~30°C，濕度70~95%的條件下培育45-60天 得到培養體，即靈芝菌絲、靈芝子實體和培養基的混合物； (2) 將所述培養體在60~90°C條件下烘干至含水量為12%以下，再將烘干后的培養體 粉碎，過20~60目篩，得到靈芝粉； (3) 向所述靈芝粉中加入水和中性蛋白酶，40~55 °C條件下酶解6~24h; (4) 將酶解的靈芝粉通過板框過濾器過濾，真空濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥得到靈芝提 取物； 其中，所述培養基為蠶蛹、雞蛋、黃粉蟲，蚯蚓，螞蟻，蟬中的一種或多種。2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述菌種的接種量為10~30%。3. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述中性蛋白酶為木瓜酶、胰蛋白酶、枯草 芽孢桿菌蛋白酶中的一種或多種。4. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中酶解時加入水的質量為靈 芝粉質量的1~10倍，加入中性蛋白酶的質量為靈芝粉質量的0.1~1%。5. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中酶解時還加入脂肪酶，所述脂肪 酶的添加量為靈芝粉質量的0.1~0.5%。6. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述靈芝精華提取物粒徑小于800nm。7. 根據權利要求1-6中任一項所述的方法，其特征在于，所述靈芝精華提取物制成沖 劑、片劑或膠囊。8. -種靈芝提取物，其特征在于，所述靈芝提取物是利用權利要求1中的方法制得的。9. 根據權利要求8所述的靈芝提取物，其特征在于，所述靈芝提取物含有靈芝多肽20~ 60%、三萜1~5%、靈芝多糖1~10%、氨基酸10~30%、核苷1~3%、生物堿0.1~3%、灰分 1~5 %、其余為水分。10. -種權利要求8所述的靈芝提取物的應用，其特征在于，所述靈芝提取物用于食品、 保健或醫藥領域。
【文檔編號】A23L31/00GK106072632SQ201610424911
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月15日
【發明人】錢衛文, 錢容
【申請人】錢衛文