本發(fa)(fa)明屬(shu)于(yu)微生物發(fa)(fa)酵及(ji)食品加工，尤其(qi)涉及(ji)一(yi)種抗乳(ru)(ru)腺癌疲勞發(fa)(fa)酵豌(wan)豆蛋白(bai)乳(ru)(ru)及(ji)其(qi)制備方法和應用(yong)。

背景技術：

1、癌(ai)(ai)癥引(yin)起的(de)(de)(de)疲(pi)(pi)(pi)勞為(wei)(wei)乳腺(xian)癌(ai)(ai)癥患(huan)(huan)者最常見的(de)(de)(de)手術前后綜合性(xing)癌(ai)(ai)因性(xing)疲(pi)(pi)(pi)勞，嚴重(zhong)的(de)(de)(de)妨礙了患(huan)(huan)者的(de)(de)(de)日(ri)常活(huo)動和(he)(he)生(sheng)活(huo)質量(liang)。癌(ai)(ai)因性(xing)疲(pi)(pi)(pi)勞(cancer-related?fatigue，crf)是由腫瘤本身(shen)及其(qi)相關(guan)治(zhi)(zhi)療(liao)所引(yin)起的(de)(de)(de)一系列主(zhu)觀感受，可表(biao)現為(wei)(wei)乏(fa)(fa)力、精力差、思想不集中、抑郁、冷(leng)漠(mo)、焦慮等，一般持續時間較長，休息或睡眠難以緩解，嚴重(zhong)損(sun)害患(huan)(huan)者的(de)(de)(de)預后康復(fu)(fu)。據相關(guan)報道(dao)，在(zai)癌(ai)(ai)癥綜合治(zhi)(zhi)療(liao)中，乳腺(xian)癌(ai)(ai)患(huan)(huan)者的(de)(de)(de)疲(pi)(pi)(pi)乏(fa)(fa)程度明顯高(gao)于(yu)其(qi)他種(zhong)類(lei)的(de)(de)(de)癌(ai)(ai)癥患(huan)(huan)者。crf屬于(yu)“虛(xu)勞病”范圍。富含γ-氨基丁酸(suan)(gaba)的(de)(de)(de)飲食已被研究(jiu)表(biao)明對改善睡眠質量(liang)和(he)(he)減輕神經(jing)性(xing)疲(pi)(pi)(pi)勞有潛在(zai)益處(chu)。此外，其(qi)還(huan)能支持身(shen)體的(de)(de)(de)能量(liang)需求(qiu)并(bing)(bing)促進修復(fu)(fu)過程，這意(yi)味(wei)著在(zai)調節(jie)癌(ai)(ai)癥患(huan)(huan)者的(de)(de)(de)疲(pi)(pi)(pi)勞中具有積極意(yi)義(yi)。以往公(gong)開的(de)(de)(de)專利(li)中，并(bing)(bing)未公(gong)開γ-氨基丁酸(suan)可以抵抗乳腺(xian)癌(ai)(ai)癌(ai)(ai)因性(xing)疲(pi)(pi)(pi)勞的(de)(de)(de)研究(jiu)，且gaba的(de)(de)(de)抗疲(pi)(pi)(pi)勞活(huo)性(xing)也(ye)并(bing)(bing)未公(gong)開過。

2、此(ci)外(wai)，豌豆(dou)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)具有(you)脂肪低、熱量低、零膽固醇、非轉基因等優(you)(you)勢，且豌豆(dou)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)產品中(zhong)不(bu)含有(you)乳(ru)(ru)(ru)糖，是乳(ru)(ru)(ru)糖不(bu)耐受患者(zhe)補充蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質的(de)(de)(de)(de)(de)(de)良好選擇，豌豆(dou)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)成(cheng)本幾乎是牛(niu)奶(nai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)一半，經濟(ji)成(cheng)本更低。因此(ci)豌豆(dou)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)在(zai)(zai)食品工(gong)(gong)業中(zhong)潛(qian)力巨大，是制(zhi)備植物基代乳(ru)(ru)(ru)制(zhi)品的(de)(de)(de)(de)(de)(de)優(you)(you)選原(yuan)料。在(zai)(zai)以豌豆(dou)為發(fa)酵(jiao)食品加工(gong)(gong)原(yuan)料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)研(yan)究(jiu)方面，現有(you)技術研(yan)究(jiu)了(le)燙漂、脫(tuo)殼、堿泡的(de)(de)(de)(de)(de)(de)制(zhi)漿工(gong)(gong)藝對(dui)豌豆(dou)漿揮發(fa)性(xing)(xing)風(feng)(feng)味的(de)(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)響(xiang)，同(tong)(tong)時研(yan)究(jiu)了(le)6種不(bu)同(tong)(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)市售(shou)直投式發(fa)酵(jiao)劑(ji)對(dui)豌豆(dou)酸(suan)奶(nai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)品質影(ying)響(xiang)，該研(yan)究(jiu)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)制(zhi)漿工(gong)(gong)藝顯著改善了(le)豌豆(dou)漿的(de)(de)(de)(de)(de)(de)風(feng)(feng)味，同(tong)(tong)時選出了(le)最(zui)適合豌豆(dou)漿的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)酵(jiao)菌(jun)種，改善了(le)酸(suan)奶(nai)質構(gou)和(he)風(feng)(feng)味特性(xing)(xing)，整(zheng)體接受度(du)高(gao)。另外(wai)，已(yi)有(you)研(yan)究(jiu)揭示了(le)添加10％的(de)(de)(de)(de)(de)(de)豌豆(dou)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)對(dui)凝膠結構(gou)和(he)凝膠特性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)響(xiang)，結果(guo)表明(ming)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質含量的(de)(de)(de)(de)(de)(de)增加加速了(le)凝膠網(wang)絡結構(gou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)形成(cheng)。以及(ji)不(bu)同(tong)(tong)配(pei)比的(de)(de)(de)(de)(de)(de)牛(niu)乳(ru)(ru)(ru)和(he)豆(dou)乳(ru)(ru)(ru)混合發(fa)酵(jiao)后酸(suan)奶(nai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)理化性(xing)(xing)質、流變學特性(xing)(xing)、微觀結構(gou)和(he)感官(guan)特性(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)響(xiang)，結果(guo)表明(ming)牛(niu)乳(ru)(ru)(ru)與豆(dou)乳(ru)(ru)(ru)1:1制(zhi)備的(de)(de)(de)(de)(de)(de)酸(suan)奶(nai)在(zai)(zai)28d貯存(cun)期內具有(you)良好的(de)(de)(de)(de)(de)(de)風(feng)(feng)味、較高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)感官(guan)分數和(he)貯存(cun)穩(wen)定性(xing)(xing)。

3、目前，關(guan)于豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白發(fa)酵的(de)(de)研(yan)究主要停留在凝膠或(huo)發(fa)酵劑選(xuan)擇的(de)(de)研(yan)究層面，關(guan)于豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白發(fa)酵乳的(de)(de)加工工藝及產(chan)品特性的(de)(de)研(yan)究相(xiang)對有限。以(yi)豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白為(wei)發(fa)酵原(yuan)料，利用高(gao)產(chan)gaba的(de)(de)乳酸菌制作抗(kang)乳腺癌疲(pi)勞食療配(pei)方(fang)的(de)(de)發(fa)明鮮有報道，且最佳配(pei)方(fang)設計(ji)尚不明朗。

技術實現思路

1、為(wei)解決上述(shu)技術(shu)問(wen)題，本發明提出了(le)一(yi)種抗乳腺癌疲勞發酵(jiao)豌豆蛋(dan)白乳及(ji)其制備方(fang)法和應用，本發明所述(shu)發酵(jiao)豌豆蛋(dan)白乳富(fu)含(han)gaba，還含(han)有豐富(fu)的氨基酸、活性肽和益生菌，可(ke)有效緩解乳腺癌癌因性疲勞。

2、為實(shi)現(xian)上述目的，本發明(ming)提(ti)供(gong)了一種抗(kang)乳腺癌疲(pi)勞(lao)發酵豌豆蛋(dan)白乳的制備(bei)方法(fa)，包(bao)括以下步驟：

3、(1)嗜熱(re)(re)(re)鏈球(qiu)菌(jun)(jun)(streptococcus?thermophilus)、植(zhi)物乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)(lactiplantibacillusplantarum)和保(bao)加利(li)亞(ya)短乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)(lactobacillus?brevis)分(fen)別(bie)與乳(ru)(ru)(ru)酸(suan)(suan)細(xi)菌(jun)(jun)培(pei)養基混合(he)，分(fen)別(bie)進行活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)孵育(yu)(yu)16～20h，得初(chu)步(bu)(bu)活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)嗜熱(re)(re)(re)鏈球(qiu)菌(jun)(jun)、初(chu)步(bu)(bu)活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)植(zhi)物乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)和初(chu)步(bu)(bu)活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)保(bao)加利(li)亞(ya)短乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)，取初(chu)步(bu)(bu)活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)嗜熱(re)(re)(re)鏈球(qiu)菌(jun)(jun)、初(chu)步(bu)(bu)活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)植(zhi)物乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)和初(chu)步(bu)(bu)活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)保(bao)加利(li)亞(ya)短乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)分(fen)別(bie)與乳(ru)(ru)(ru)酸(suan)(suan)細(xi)菌(jun)(jun)培(pei)養基混合(he)，分(fen)別(bie)進行二次活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)孵育(yu)(yu)16～20h，得活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)嗜熱(re)(re)(re)鏈球(qiu)菌(jun)(jun)、活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)植(zhi)物乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)和活(huo)(huo)(huo)化(hua)(hua)保(bao)加利(li)亞(ya)短乳(ru)(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)(jun)；

4、(2)脫脂(zhi)奶粉與(yu)水混(hun)合(he)(he)，滅(mie)菌(jun)，得(de)(de)滅(mie)菌(jun)脫脂(zhi)乳(ru)(ru)；取步(bu)(bu)(bu)驟(1)所述活(huo)化(hua)嗜熱(re)鏈球菌(jun)、活(huo)化(hua)植物(wu)(wu)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)和活(huo)化(hua)保(bao)(bao)加(jia)(jia)利亞短(duan)(duan)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)分(fen)別(bie)與(yu)滅(mie)菌(jun)脫脂(zhi)乳(ru)(ru)混(hun)合(he)(he)，分(fen)別(bie)孵育(yu)，得(de)(de)初步(bu)(bu)(bu)孵育(yu)嗜熱(re)鏈球菌(jun)、初步(bu)(bu)(bu)孵育(yu)植物(wu)(wu)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)和初步(bu)(bu)(bu)孵育(yu)保(bao)(bao)加(jia)(jia)利亞短(duan)(duan)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)，取初步(bu)(bu)(bu)孵育(yu)嗜熱(re)鏈球菌(jun)、初步(bu)(bu)(bu)孵育(yu)植物(wu)(wu)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)和初步(bu)(bu)(bu)孵育(yu)保(bao)(bao)加(jia)(jia)利亞短(duan)(duan)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)分(fen)別(bie)與(yu)滅(mie)菌(jun)脫脂(zhi)乳(ru)(ru)混(hun)合(he)(he)，二次孵育(yu)，得(de)(de)嗜熱(re)鏈球菌(jun)發(fa)酵(jiao)劑(ji)(ji)、植物(wu)(wu)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)發(fa)酵(jiao)劑(ji)(ji)和保(bao)(bao)加(jia)(jia)利亞短(duan)(duan)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)發(fa)酵(jiao)菌(jun)劑(ji)(ji)；

5、(3)豌豆蛋白、食用糖、谷(gu)氨酸鈉和去離子水(shui)混(hun)合，高(gao)壓滅菌，得發酵基質；

6、(4)步(bu)驟(2)所(suo)述嗜熱鏈球(qiu)菌發(fa)酵劑(ji)、植物乳桿菌發(fa)酵劑(ji)和(he)保(bao)加利(li)亞短乳桿菌發(fa)酵菌劑(ji)與步(bu)驟(3)所(suo)述發(fa)酵基質混合，厭氧發(fa)酵，得發(fa)酵豌(wan)豆(dou)蛋白乳。

7、優選的(de)，步(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所(suo)(suo)述(shu)嗜熱鏈球(qiu)菌(jun)與(yu)(yu)乳(ru)酸細菌(jun)培(pei)養基混合(he)(he)的(de)重量份(fen)比為0.2:10，步(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所(suo)(suo)述(shu)植(zhi)物(wu)乳(ru)桿菌(jun)與(yu)(yu)乳(ru)酸細菌(jun)培(pei)養基混合(he)(he)的(de)重量份(fen)比為0.2:10，步(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所(suo)(suo)述(shu)保加(jia)利亞短(duan)乳(ru)桿菌(jun)與(yu)(yu)乳(ru)酸細菌(jun)培(pei)養基混合(he)(he)的(de)重量份(fen)比為0.2:10；步(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所(suo)(suo)述(shu)活化孵育的(de)溫度為37℃。

8、優選的(de)(de)，步(bu)(bu)(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所述初步(bu)(bu)(bu)活(huo)化(hua)(hua)嗜熱鏈球菌(jun)與(yu)(yu)乳(ru)(ru)酸(suan)細(xi)菌(jun)培(pei)養基(ji)混合的(de)(de)重量(liang)份比為(wei)0.2:10，步(bu)(bu)(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所述初步(bu)(bu)(bu)活(huo)化(hua)(hua)植物乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)與(yu)(yu)乳(ru)(ru)酸(suan)細(xi)菌(jun)培(pei)養基(ji)混合的(de)(de)重量(liang)份比為(wei)0.2:10，步(bu)(bu)(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所述初步(bu)(bu)(bu)活(huo)化(hua)(hua)保(bao)加利(li)亞短(duan)乳(ru)(ru)桿(gan)菌(jun)與(yu)(yu)乳(ru)(ru)酸(suan)細(xi)菌(jun)培(pei)養基(ji)混合的(de)(de)重量(liang)份比為(wei)0.2:10；步(bu)(bu)(bu)驟(zou)(1)中(zhong)所述二次活(huo)化(hua)(hua)孵育的(de)(de)溫度為(wei)37℃。

9、優選(xuan)的(de)(de)(de)，步(bu)驟(2)中所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)脫(tuo)脂奶粉與水(shui)的(de)(de)(de)混合(he)(he)重(zhong)量份比(bi)為(wei)10:100；步(bu)驟(2)中所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)滅(mie)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)溫度為(wei)120℃，所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)滅(mie)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)時間為(wei)15min；步(bu)驟(2)中所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)活(huo)化嗜熱鏈球菌(jun)(jun)與滅(mie)菌(jun)(jun)脫(tuo)脂乳(ru)(ru)混合(he)(he)的(de)(de)(de)重(zhong)量份比(bi)為(wei)2:100，步(bu)驟(2)中所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)活(huo)化植物(wu)乳(ru)(ru)桿菌(jun)(jun)與滅(mie)菌(jun)(jun)脫(tuo)脂乳(ru)(ru)混合(he)(he)的(de)(de)(de)重(zhong)量份比(bi)為(wei)2:100，步(bu)驟(2)中所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)活(huo)化保加(jia)利亞(ya)短乳(ru)(ru)桿菌(jun)(jun)與滅(mie)菌(jun)(jun)脫(tuo)脂乳(ru)(ru)混合(he)(he)的(de)(de)(de)重(zhong)量份比(bi)為(wei)2:100；步(bu)驟(2)中所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)孵育(yu)的(de)(de)(de)溫度為(wei)37℃，所(suo)(suo)(suo)述(shu)(shu)孵育(yu)的(de)(de)(de)時間為(wei)16～20h。

10、優(you)選(xuan)的，步(bu)驟(2)中(zhong)所述(shu)(shu)(shu)初(chu)步(bu)孵(fu)育(yu)嗜(shi)熱(re)鏈球菌(jun)(jun)(jun)與(yu)滅菌(jun)(jun)(jun)脫脂乳(ru)混(hun)合的重量(liang)份(fen)比為(wei)2:100，步(bu)驟(2)中(zhong)所述(shu)(shu)(shu)初(chu)步(bu)植物乳(ru)桿菌(jun)(jun)(jun)與(yu)滅菌(jun)(jun)(jun)脫脂乳(ru)混(hun)合的重量(liang)份(fen)比為(wei)2:100，步(bu)驟(2)中(zhong)所述(shu)(shu)(shu)初(chu)步(bu)孵(fu)育(yu)保加(jia)利亞短(duan)乳(ru)桿菌(jun)(jun)(jun)與(yu)滅菌(jun)(jun)(jun)脫脂乳(ru)混(hun)合的重量(liang)份(fen)比為(wei)2:100；步(bu)驟(2)中(zhong)所述(shu)(shu)(shu)二(er)次孵(fu)育(yu)的溫度為(wei)37℃，所述(shu)(shu)(shu)二(er)次孵(fu)育(yu)的時間為(wei)16～20h。

11、優選的(de)，步驟(3)中所(suo)(suo)述(shu)豌豆蛋白、食用糖、谷氨酸鈉和(he)去(qu)離子水(shui)的(de)混合重(zhong)量份比例為(wei)(wei)(wei)40:10:2:1000；步驟(3)中所(suo)(suo)述(shu)高(gao)壓滅菌(jun)的(de)溫度為(wei)(wei)(wei)120℃，所(suo)(suo)述(shu)高(gao)壓滅菌(jun)的(de)時間為(wei)(wei)(wei)15min，所(suo)(suo)述(shu)高(gao)壓滅菌(jun)的(de)壓力為(wei)(wei)(wei)100kpa。

12、進一步(bu)優(you)選(xuan)的，步(bu)驟(zou)(3)中所述食用(yong)糖(tang)為果糖(tang)和/或白(bai)砂糖(tang)。

13、優(you)選的，步驟(4)中(zhong)所(suo)述嗜熱(re)鏈球菌發(fa)(fa)酵(jiao)劑、植物乳桿菌發(fa)(fa)酵(jiao)劑和保加利亞短乳桿菌發(fa)(fa)酵(jiao)菌劑與(yu)步驟(3)所(suo)述發(fa)(fa)酵(jiao)基(ji)質的混合重量(liang)份比例為(wei)(wei)10～20:10～20:10～20:1000；步驟(4)中(zhong)所(suo)述厭氧(yang)發(fa)(fa)酵(jiao)的溫(wen)度為(wei)(wei)37℃，所(suo)述厭氧(yang)發(fa)(fa)酵(jiao)的時(shi)間(jian)為(wei)(wei)24～48h。

14、本發明還提供(gong)了所述制備方法制備所得發酵豌豆蛋白(bai)乳(ru)。

15、本發(fa)明還提供(gong)了(le)所述制備方法制備所得發(fa)酵豌(wan)豆蛋(dan)白乳(ru)或(huo)所述發(fa)酵豌(wan)豆蛋(dan)白乳(ru)在制備緩解和(he)/或(huo)治療乳(ru)腺癌癌因性疲勞(lao)的(de)產品中的(de)應用。

16、與現有技(ji)術相比，本發明具(ju)有如下優點和技(ji)術效果：

17、1、本(ben)發明制(zhi)備的發酵豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白(bai)乳富含gaba活性成(cheng)分和活性肽，有(you)效提(ti)高了發酵豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白(bai)乳的抗癌因性疲(pi)勞的效果，提(ti)高了人體對豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白(bai)的吸收(shou)能力，促(cu)進了對豌(wan)(wan)豆(dou)蛋(dan)白(bai)資源的開發利用。

18、2、本發明所述發酵(jiao)豌(wan)豆(dou)(dou)蛋(dan)白乳制備過程中會產(chan)生胞外多(duo)糖(tang)和多(duo)種屬于乳酸菌副產(chan)物(wu)(wu)的(de)風(feng)味物(wu)(wu)質，降低了豌(wan)豆(dou)(dou)蛋(dan)白的(de)豆(dou)(dou)腥味，可以(yi)促(cu)進發酵(jiao)豌(wan)豆(dou)(dou)蛋(dan)白乳質地黏(nian)稠，為發酵(jiao)豌(wan)豆(dou)(dou)蛋(dan)白乳提供柔和的(de)口感和誘(you)人的(de)芬芳，易于被廣(guang)大消費者接受。

19、3、本(ben)發明制(zhi)備(bei)的富含gaba的發酵豌豆蛋白乳(ru)能(neng)(neng)有(you)效減輕患有(you)乳(ru)腺癌(ai)的小(xiao)鼠的癌(ai)因性疲勞感，增(zeng)強癌(ai)癥小(xiao)鼠的運動(dong)能(neng)(neng)力，是具有(you)實用價值(zhi)和(he)市(shi)場前(qian)景的植(zhi)物(wu)功能(neng)(neng)乳(ru)飲料。