一種細胞分離柱及分離裝置制造方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種細胞分離柱及分離裝置。一種細胞分離裝置，其特征在于，包含細胞分離柱，包含細胞分離柱柱體，所述細胞分離柱柱體為空心圓柱，其下方可拆卸安裝有用于分離純化精細胞核的上層濾膜與下層濾膜，所述上層濾膜的濾孔孔徑大于下層濾膜的濾孔孔徑，所述細胞分離柱可拆卸安裝于廢液收集管內，所述廢液收集管內部包含分離柱卡口，卡口上還包含導氣凹槽，導氣凹槽將廢液收集管內部與外部空氣連通起來。可高效分離純化性犯罪案件檢材中的男性精細胞核與其他女性上皮細胞成分；廢液收集管使精細胞核分離過程中廢棄液處理問題得到人性化解決。
【專利說明】一種細胞分離柱及分離裝置
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種精細胞核與上皮細胞成分的分離裝置，尤其適用于法醫實驗室中分離性犯罪案件檢材的男性和女性成分，具體是一種細胞分離柱及分離裝置。
【背景技術】
[0002]性犯罪案件中有多種方法可以直接獲得精細胞。一種是采用物理方法將犯罪者的精子細胞從受害人的上皮細胞中分離出來。用精子蛋白特異性抗體包被的磁粒或磁珠收集精子細胞(Marshall，2002)，然后洗去珠子上的女性上皮細胞。最后，純化的精子進行DNA分型分析。這種方法適用于未被處理過的精子，不適用于放置時間較長的性犯罪案件檢材。
[0003]另一種方法是臨床上眾所周知的激光捕獲顯微操作儀選擇性捕獲精子，
[0004]這種顯微操作儀通常用于顯微鏡下分離腫瘤細胞和周圍的正常組織。涂在載玻片上的性犯罪案件的精子細胞可被激光捕獲顯微操作儀收集，進行STR檢測(Elliot et al.，2003)。當用顯微鏡觀察精子細胞時，一小束激光被激活，蒙在載玻片上的塑料薄膜在特定的激光點熔化，這樣就可以將目標細胞捕獲。翻轉載玻片后，精子細胞就這樣被正上方的薄膜收集。收集膜隨后被轉移到管中并用于DNA提取和PCR擴增(法醫DNA分型:STR遺傳標記的生物學、方法學及遺傳學侯一平，劉雅誠譯)。但這種方法需要特定的儀器與專業的技術人員以及復雜的操作過程。
[0005]在法醫實驗室中廣泛用于分離性犯罪案件檢材的男性和女性成分的方法是差異分離法。差異分離法最早見于1985年(Gill et al.，1985)，這種分離方法的過程包括在樣本中首先加入SDS、蛋白酶K的混合物，孵育破壞女性上皮細胞，隨后用含SDS、蛋白酶K以及DTT的混合物裂解精細胞核。DTT可以破壞組成精子核膜蛋白的二硫鍵(Gill et al.，1985)。差異分離法的原理是沒有DTT時精子細胞核不能被消化。但該方法在傳統的操作過程中或多或少會存在樣本的損失，對于精子含量較少的樣本則存在著較高的局限性。
【發明內容】
[0006]為了克服現有方法在操作性和高效便捷上的不足，本實用新型提供一種細胞分離柱，該柱不僅能高效的分離檢材中女性細胞成分和男性精細胞核，而且對于樣本中的男性精細胞核有富集作用，有極低的樣本損失。同時能去除樣本中較大的細胞碎片以及分子量較小的雜質。
[0007]本實用新型發明解決其技術問題所采用的技術方案是:
[0008]方案1:
[0009]一種細胞分離柱，其特征在于，包含細胞分離柱柱體，所述細胞分離柱柱體為空心圓柱，其下方可拆卸安裝有用于分離純化精細胞核的上層濾膜與下層濾膜，所述上層濾膜的濾孔孔徑大于下層濾膜的濾孔孔徑。
[0010]本實用新型進一步技術方案在于，所述上層濾膜與下層濾膜位于濾膜固定裝置上，濾膜固定裝置和細胞分離柱柱體螺紋連接，所述濾膜固定裝置和細胞分離柱柱體的連接處還包含O形密封圈。
[0011]本實用新型進一步技術方案在于，所述濾膜固定裝置的底部包含支撐底面，所述支撐底面上包含非也流出孔。
[0012]本實用新型進一步技術方案在于，所述所述上層濾膜與下層濾膜均可拆卸安裝于濾膜固定裝置上。
[0013]本實用新型進一步技術方案在于，所述O形密封圈外徑小于濾膜固定裝置內徑。
[0014]方案2:
[0015]一種細胞分離裝置，其特征在于，包含細胞分離柱，包含細胞分離柱柱體，所述細胞分離柱柱體為空心圓柱，其下方可拆卸安裝有用于分離純化精細胞核的上層濾膜與下層濾膜，所述上層濾膜的濾孔孔徑大于下層濾膜的濾孔孔徑，所述細胞分離柱可拆卸安裝于廢液收集管內，所述廢液收集管內部包含分離柱卡口，卡口上還包含導氣凹槽,導氣凹槽將廢液收集管內部與外部空氣連通起來。
[0016]本實用新型進一步技術方案在于，所述細胞分離柱上方有凸臺，所述廢液收集管內部上方有能與凸臺契合的安裝凹口。
[0017]本實用新型進一步技術方案在于，所述廢液收集管下方為倒圓臺形。
[0018]本發明的優點在于:
[0019]1.可高效分離純化性犯罪案件檢材中的男性精細胞核與其他女性上皮細胞成分；
[0020]2.獨特的可拆卸濾膜固定裝置，方便樣本的后處理；
[0021]3.獨有的雙層過濾分離設計，有效地分離大小碎片及雜質；
[0022]4.濾過式設計使得樣本中男性DNA損失更少，女性成分去除更完全；
[0023]5.過濾的濃縮效應使本發明適用于精細胞含量少而女性細胞成分多的檢材；
[0024]6.廢液收集管使精細胞核分離過程中廢棄液處理問題得到人性化解決。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0025]圖1是本實用新型細胞分離柱廢液收集管的主視圖；
[0026]圖2是本實用新型分離柱柱體的主視圖；
[0027]圖3是本實用新型分離柱濾膜固定裝置的主視圖；
[0028]圖4是本實用新型分離柱濾膜固定裝置的俯視圖；
[0029]圖5是本實用新型分離柱柱體與濾膜固定裝置及O形密封圈、上下層濾膜組合的主視圖；
[0030]圖6是本實用新型分離柱組合的主視圖；
[0031 ] 附圖中標號說明:
[0032]1.廢液收集管，2.分離柱柱體，3.濾膜固定裝置，4.0形密封圈，5.上層濾膜，
6.下層濾膜，1-1.分離柱卡口，1-2.導氣凹槽。
【具體實施方式】
[0033]請參閱圖1本實用新型細胞分離柱廢液收集管的主視圖，開模具制作塑料材質的廢液收集管1，廢液收集管I下半部為倒圓臺形，上端開口。[0034]請參閱圖2本實用新型細胞分離柱分離柱柱體的主視圖，開模具制作塑料材質的分離柱柱體2。
[0035]請參閱圖3與圖4本實用新型分離柱濾膜固定裝置的主視圖與俯視圖，開模具制作塑料材質的濾膜固定裝置3，該裝置內螺紋應與分離柱柱體2下部外螺紋緊密接合。
[0036]請參閱圖5組合本實用新型發明分離柱柱體2與濾膜固定裝置3及O形密封圈4、上層濾膜5、下層濾膜6。上層濾膜5孔徑應大于下層濾膜6孔徑，下層濾膜6孔徑應小于精細胞核直徑。
[0037]請參閱圖6本實用新型發明分離柱組合后其下部外徑應略小于廢液收集管I的內徑但能卡在分離柱卡口 1-1上。分離柱凸階以下高度應等于廢液收集管I上的分離柱卡口1-1上緣至廢液收集管I管口的高度。
[0038]基于分子篩原理的離心過濾與差異分離方法的組合。
[0039]為了有效分離純化精細胞核，濾膜固定裝置上固定放置二層孔徑不同的濾膜，較大孔徑的濾膜位于上層，用于過濾較大的細胞碎片及雜質；孔徑較小的濾膜位于下層，用于收集和吸附精細胞核和濾過較小的雜質。
[0040]為了方便取出吸附精細胞核的濾膜，分離柱底部濾膜固定裝置采用螺口設計，可以方便地取出濾膜進行下一步實驗。
[0041]為了方便分離柱在離心后取出，在廢液收集管中部設有分離柱卡口，與分離柱上的濾膜固定裝置相匹配。且在卡口處設有導氣凹槽，方便離心時濾出液進入廢液收集管。
[0042]為了分離過程中沒有廢液溢出廢液收集管，分離柱上端有一凸階，與廢液收集管上方開口相匹配。另外濾膜固定裝置與分離柱柱體連接處有O形密封圈密封。
[0043]包括分離柱、廢液收集管，廢液收集管套在分離柱外側，分離柱底部具有濾膜固定裝置，其特征在于:置于廢液收集管內的分離柱上可拆卸濾膜固定裝置固定有用于分離純化精細胞核的上層濾膜與下層濾膜。分離柱底部具有可拆卸的濾膜固定裝置以及上層濾膜與下層濾膜。所述濾膜固定裝置，其特征在于:與分離柱柱體以螺口接合，配合O形密封圈與上下層濾膜在離心過濾過程中有良好的密封性與濾過性。所述濾膜固定裝置，其特征在于:底部不是中空，具有孔狀結構用于支撐濾膜同時保證廢液流出。所述上層濾膜與下層濾膜，其特征在于:兩層濾膜具有不同孔徑，較大孔徑的濾膜位于較小孔徑濾膜的上方，下層濾膜孔徑略小于精細胞核直徑。分離柱柱體與濾膜固定裝置可通過手工分離并取出濾膜。O形密封圈外徑小于濾膜固定裝置內徑，表面光滑可以與濾膜固定裝置和分離柱柱體以及上下層濾膜緊密接合。廢液收集管中部有一個用于阻止分離柱在離心過程中塞緊的卡口，卡口上有利于離心過程中空氣流出的導氣凹槽。所述細胞分離柱，其特征在于分離柱上部有一個凸階，與廢液收集管相匹配。
[0044]以上顯示和描述了本發明的基本原理、主要特征和本發明的優點。本領域的技術人員應該了解本發明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發明的原理，在不脫離本發明精神和范圍的前提下，本發明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的范圍內。
【權利要求】
1.一種細胞分離柱，其特征在于，包含細胞分離柱柱體，所述細胞分離柱柱體為空心圓柱，其下方可拆卸安裝有用于分離純化精細胞核的上層濾膜與下層濾膜，所述上層濾膜的濾孔孔徑大于下層濾膜的濾孔孔徑。
2.如權利要求1所述的一種細胞分離柱，其特征在于，所述上層濾膜與下層濾膜位于濾膜固定裝置上，濾膜固定裝置和細胞分離柱柱體螺紋連接，所述濾膜固定裝置和細胞分離柱柱體的連接處還包含O形密封圈。
3.如權利要求2所述的一種細胞分離柱，其特征在于，所述濾膜固定裝置的底部包含支撐底面，所述支撐底面上包含非也流出孔。
4.如權利要求2所述的一種細胞分離柱，其特征在于，所述所述上層濾膜與下層濾膜均可拆卸安裝于濾膜固定裝置上。
5.如權利要求2所述的一種細胞分離柱，其特征在于，所述O形密封圈外徑小于濾膜固定裝置內徑。
6.一種細胞分離裝置，其特征在于，包含細胞分離柱，包含細胞分離柱柱體，所述細胞分離柱柱體為空心圓柱，其下方可拆卸安裝有用于分離純化精細胞核的上層濾膜與下層濾膜，所述上層濾膜的濾孔孔徑大于下層濾膜的濾孔孔徑，所述細胞分離柱可拆卸安裝于廢液收集管內，所述廢液收集管內部包含分離柱卡口，卡口上還包含導氣凹槽，導氣凹槽將廢液收集管內部與外部空氣連通起來。
7.如權利要求6所述的一種細胞分離裝置，其特征在于，所述細胞分離柱上方有凸臺，所述廢液收集管內部上方有能與凸臺契合的安裝凹口。
8.如權利要求6所述的一種細胞分離裝置，其特征在于，所述廢液收集管下方為倒圓臺形。
【文檔編號】C12M1/12GK203754716SQ201320609122
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2013年9月30日 優先權日:2013年9月30日
【發明者】張威, 陳永軍, 邵武 申請人:基點認知技術(北京)有限公司