專利名稱：：一種乳酸球菌增殖培養基及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及一種乳酸球菌增殖培養基產品及其生產方法。屬于食品微生物
技術領域：
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背景技術：
：乳酸球菌為乳品工業微生物中重要的菌種資源之一，具有良好的發酵特性以及改善或調節腸道微生物菌群的平衡、增強機體免疫力、降低膽固醇水平、緩解乳糖不耐癥以及抑制腫瘤細胞形成等功效。在食品向天然型、功能型發展的今天，乳酸菌制品正越來越受到人們的重視。發酵乳制品是乳酸球菌的天然載體，已被廣大消費者所認知。發酵制品的品質取決于發酵劑，優良的發酵劑不僅需要菌體自身的發酵特性和生理功效，同時也需要較高的活菌體濃度。由此，菌體的增殖培養成為制備優良發酵劑的關鍵因素之一。現階段乳酸球菌相應的增殖培養基多以番茄汁、胡蘿卜汁等植物汁為主要成分，但是其沒有相應的質量標準，致使產品質量無法控制與監管，造成質量不一，因此不利于大工業生產。培養時間基本為12-18小時，菌體濃度為5X109cfu/ml左右。
發明內容本發明的目的是提供一種成本低、安全、且適于乳酸球菌快速增殖的培養基及制備方法。本發明提供了一種乳酸球菌增殖培養基，包括培養基A、培養基B，其中，以重量比計，培養基A包括脫脂乳粉5%-12%;全脂乳粉3%-10%;乳糖l%-4%;水50%-80%;培養基B包括酵母浸粉0.4%-2%;抗壞血酸鈉0.02%-0.50%;0.1-1%的吐溫80;脯氨酸0.02-0.5X;L-半胱氨酸鹽酸鹽0.002-0.05%;纈氨酸0.02%-0,2%;水5%-30%。3本發明還提供了一種制備上述的乳酸球菌增殖培養基的方法，包括將培養基和B各組分分別溶于水中，分別滅菌，冷卻后將所述培養基A和培養基B在無菌條件下混合均勻。培養基A部分為乳基質，培養基B部分為非乳基質，將培養基A和培養基B分別滅菌可以防止高溫條件下物質的相互反應。本發明中，所述所述滅菌條件為110-12rC、15-30分鐘。上述冷卻為降溫至55-3(TC以下。上述方法進一步還包括將乳酸球菌增殖培養基冷藏儲存，儲存溫度為4r以下。本發明的培養基采用脫脂乳粉和全脂乳粉，利用它們乳脂肪的區別，來平衡碳氮比。如果只用全脂乳粉培養，菌體不好分離收集，而單純采用脫脂乳，這樣培養效果不好，菌體濃度低。一般的培養基培養菌體的濃度只能達到109cfu/ml，而采用本發明的培養基來培養乳酸球菌，培養4-6h后菌體濃度達到6X10Wcfu/ml左右。本發明的培養基為一種低成本、安全且適于乳酸球菌快速增殖的培養基，進而能夠滿足乳酸球菌工業化的大量應用，同時也降低其產品的生產成本。此外、本發明的培養基培養乳酸球菌，在菌體濃度和培養吋間方面均優于現有培養基質，而且培養基的各組分均有相應的國家標準、行業標準或者其他相應質量標準，進而可以控制原料的質量，因此其更利于工業化生產。具體實施例方式下面將結合具體實施方案對本發明的方法做更詳細的說明。本領域技術人員應當理解，下述實施例均用于對本發明所要求保護的范圍進行實例性的描述，以此概括本發明的各參數的相對范圍，因而不能將之理解為對本發明的一種具體限制。實施例ll.乳酸球菌增殖培養基的配方，見表l:表1培養基配方<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2.制備300g乳酸球菌增殖培養基，采用以下步驟1)按照上述的重量比例，將上述培養基A和B的組分分別溶解于水中；2)將培養基A和培養基B分別混合均勻；3)將培養基A和培養基B分別滅菌110-121°C、15-30分鐘；4)將培養基分別冷卻至55-3CTC以下；5)在無菌條件下將培養基A和培養基B混合均勻，制成乳酸球菌增殖i肯養基o6)制備好的乳酸球菌增殖培養基儲藏于4'C以下備用。采用表1中的培養基1的配方制備培養基，培養嗜熱鏈球菌，用于增殖培養。培養方法接菌量5%，200rpm，42。C條件下培養，以15%(W/V)氫氧化鈉堿液控制發酵液pH值6.1。發酵6個小時后，結束發酵，乳酸球菌的菌體濃度可達8.7X10^fu/ml。實施例3采用表l中的培養基2的配方制備培養基，培養嗜熱鏈球菌，用于增殖培養。培養方法接菌量5%，200rpm，42。C條件下培養，以15%(W/V)氫氧化鈉堿液控制發酵液pH值6.5。發酵6個小時后，結束發酵，乳酸球菌的菌體濃度可達7.9X10fli/ml。實施例4采用表l中的培養基3的配方制備培養基，培養嗜熱鏈球菌，用于增殖培養。培養方法接菌量5%，200rpm，42。C條件下培養，以15%(W/V)氫氧化鈉堿液控制發酵液pH值6.1。發酵6個小時后，結束發酵，乳酸球菌的菌體濃度可達8.2X10氣fu/ml。一般的培養基培養菌體的濃度只能達到109cfu/ml，而采用本發明的培養基來培養乳酸球菌，培養4-6h后菌體濃度達到6Xl(Pcfu/ml左右，培養時間短、菌體濃度高。同時本發明的培養基具有成本低、能夠滿足乳酸球菌工業化的大量應用的優點。以上所述僅為本發明示意性的具體實施方式，并非用以限定本發明的范圍。任何本領域的技術人員，在不脫離本發明的構思和原則的前提下所作的等同變化、修改與結合，均應屬于本發明保護的范圍。權利要求1.一種乳酸球菌增殖培養基，包括培養基A和培養基B，以重量比計，其中，所述培養基A包括脫脂乳粉5％-12％；全脂乳粉3％-10％；乳糖1％-4％；水50％-80％；所述培養基B包括酵母浸粉0.4％-2％；抗壞血酸鈉0.02％-0.50％；0.1-1％的吐溫80；脯氨酸0.02-0.5％；L-半胱氨酸鹽酸鹽0.002-0.05％；纈氨酸0.02％-0.2％；水5％-30％。2.—種制備如權利要求1所述的乳酸球菌增殖培養基的方法，包括將培養基A和B各組分分別溶于水中，分別滅菌，冷卻后將所述培養基A和培養基B在無菌條件下混合。3.如權利要求2所述的方法，其中，所述所述滅菌條件為110-121"、15-30分鐘。4.如權利要求3所述的方法，其中，所述冷卻為降溫至55-3(TC以下。5.如權利要求4所述的方法，進一步還包括將所述乳酸球菌增殖培養基冷藏儲存。6.如權利要求5所述的方法，其中，所述儲存溫度為4"C以下。全文摘要本發明涉及一種乳酸球菌增殖培養基，包括培養基A和培養基B，以重量比計，培養基A包括脫脂乳粉5％-12％；全脂乳粉3％-10％；乳糖1％-4％；水50％-80％；培養基B包括酵母浸粉0.4％-2％；抗壞血酸鈉0.02％-0.50％；0.1-1％的吐溫80；脯氨酸0.02-0.5％；L-半胱氨酸鹽酸鹽0.002-0.05％；纈氨酸0.02％-0.2％；水5％-30％。本發明同時公開了該培養基的制備方法。本發明的培養基具有成本低、培養周期短、菌體濃度高的優點。采用本發明的培養基培養乳酸球菌，4-6h后菌體濃度達到6×10¹⁰cfu/ml。文檔編號C12R1/01GK101538546SQ20091013598公開日2009年9月23日申請日期2009年5月8日優先權日2009年5月8日發明者劉衛星,康小紅,張久龍,胡新宇,南齡申請人:內蒙古蒙牛乳業(集團)股份有限公司