專利名稱：：用于歐洲油菜的新雜交系統的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種歐洲油菜(Brassicanapus)核條件性雄性不育系統。本發明的實施方案提供了預基礎(prebasic)(雄性不育)雌性系(MsMsrfrf)、(雄性能育)保持系(msmsrfrf)、基礎(雄性不育)雌性系(Msmsrfrf)和雜交系。進一步提供了用于生產那些品系的方法。本發明的進一步的實施方案涉及與不育性、能育性和保持系等位基因分別相關的標記，以及那些標記在提供雜交系統中的應用。發明背景來自蕓苔屬植物的含油種子是一種愈加重要的農作物。作為植物油的來源，在商業重要性上其目前僅排在大豆和棕櫚之后，與向日葵相當。其油被用作為色拉油和烹飪用油，并且在生物燃料(生物柴油)中起著日益重要的作用。蕓苔油(Brassicaoil)即菜籽油(rapeseedoil)最初由于其相對高水平的芥子酸，因此對人有害。芥子酸通常以基于總脂肪酸含量的30-50%(重量)的濃度存在于自然栽培品種中。當植物科學家鑒定到低芥子酸種質時(Stefansson，1983)，就克服了該問題。盡管在它們的總脂肪酸組成中具有小于2%的芥子酸(一致的零點精度(singlezeroquality))的這些品種出產食用油，但在高蛋白質粕(meal)中稱為芥子油苷(GSLs)的含硫化合物的持續存在仍然是進一步市場擴張的主要約束。由于種子中存在GSLs，因此阻礙了油菜籽粕被廣泛接受用于動物營養。此外，由于在提煉油過程中在酶裂解下以及在破碎過程中通過內源性酶——黑芥子酶作用消化下，芥子油苷可導致抗營養分解產物(例如硫氰酸鹽、異硫氰酸鹽和亞硝酸鹽)的產生，因此它們也是不希望有的。結果，開發了所謂的“雙低”品種(在油中低芥子酸以及在提煉油后在固體粕中低芥子油苷)，其具有基于總脂肪酸含量的小于2%(重量)的芥子酸含量，以及小于30μmol/g無油粕的芥子油苷含量。在加拿大首先開發了這些油菜優質品種，被稱為雙低油菜(canola)。目前，歐洲法律所允許的最大閾值為通過HPLC所測量的，25μmol總芥子油苷(GSL)/克(g)種子(8.5%水分含量)(EU法令2294/92)。當通過TMS測量時，在加拿大栽培的雙低春油菜(springcanola)品種必須具有小于30μmolGSLs/g風干的無油粕(0%水分含量)的GSL水平。在歐洲和加拿大所通常栽培的雙零油菜品種的GSL水平明顯低于閾值水平，為官方閾值水平的60%或甚至更低。然而，為了登記雙低油菜品種，許多國家需要甚至更低的芥子油苷水平。此外，植物科學家已嘗試改良菜籽油的脂肪酸組成(R6bbelen,1984；Ratledge等，1984；Robbelen,1975；Rakow&McGregor,1973)。尤其是，在溫帶農業區中冬油菜(歐洲油菜(BrassicanapusL.ssp.oleifera(Metzg.))，十字花科)是一種重要的含油種子生產作物。在德國，在2006年大約1.5百萬公頃(12%的總農業區)播種油菜。油菜(oilseedrape)是一種具有約1/3遠交的優勢自花傳粉作物(Becker等，1992)。油菜籽植物的育種業已集中于通過利用所述植物的高自交親和性所得到的開放傳粉種子。在雜種栽培品種開發中，對該用于油菜種子生產的顯著的雜種優勢產生了興趣(Riaz等，2001)。雜種優勢意味著通過兩個遺傳學上不同的、純合基因型雜交得到的雜種與它們的親本相比，具有生長和產量優勢(Shull，1922)。油菜籽雜種在產量上總顯示顯著的雜種優勢。在油菜籽雜交育種初期，多位作者報道了對于歐洲油菜(BrassicanapusL.)F1雜種的種子產量值得考慮的雜種優勢(Schuster，1969；Robbelen,1985；Grant&Beversdorf，1985；Lefort-Buson等，1987；Brandle&McVetty,1989；Paulmann&Frauen,1991；Stefansson,1983；Brandle&McVetty,1990；Shen,2005)。大體上，在春油菜籽中雜種優勢水平可高達20%-30%,以及在冬油菜籽中為約30%-40%。雜種種子的有效生產既需要鑒定雜種優勢群(heteroticgroups)(遺傳上差異基因庫；Melchinger&Gumber，1998，Becker&Link,2000)又需要一種用于那些雜種優勢群定向雜交的方法。在冬油菜中，在歐洲登記的一代雜種品種是使用INRAogura體系的雜交系組合以及使用MSL體系的全恢復的雜種(詳見下文)。然而，與優良近交系相比，雜種優勢效應仍是適中的。然而，相對低的產量增加并不是由雜交系統的低效所引起的，而是由于數十年的育種以及政府法規(例如芥子油苷或芥子酸含量)的緣故，因此在油菜籽中缺少遺傳多樣的基因庫，其還造成有限的種質變異性。更多樣的基因庫會產生較強的雜種優勢效應，但在最近才開始對它們的開發。盡管如此，對于在未來實現油菜籽顯著增產，商業上有用的雜交系統是主要的先決條件。那些增產不僅是食物目的的需求增加所需，還是生物燃料(生物柴油)需求的快速增加所需。除化學試劑誘導的雄性不育(CHA)之外，在蕓苔屬品種中已研究了三種基于遺傳學的雜交系統原則育種人員使用了自交不親和(Si)、細胞質雄性不育(CMS)和核雄性不育(WS；以前也稱為雄性核不育或遺傳雄性不育，GMS)的蕓苔屬植物作為母本(關于蔬菜中雜交系統的評述參見Kumar等，2004)。SI植物由于它們的遺傳組成(geneticconstitution)，因此無法自花傳粉，并且CMS和匪S雌株也不能產生花粉。因此，所有這些植物必須通過雄性能育親本異花傳粉。在使用這些植物中，育種人員嘗試改善種子生產的效率和Fl雜種的品質，以及減少育種成本。當不使用Si、CMS或匪S植物進行雜交時，由于親本能同時經歷異花傳粉和自花傳粉，因此更難以在后代(Fl代)中獲得并分離期望的性狀。對于在商業化雜種種子生產中利用雜種優勢，簡單且有效的傳粉控制系統是關鍵步驟。如果親本之一是Si、CMS或匪S植物，則無法自花傳粉或不能產生花粉，僅會發生異花傳粉。通過在雜交中除去一方親本品種的花粉，植物育種人員確信獲得了質量一致的雜種種子，前提是親本是質量一致的并且育種人員實施單交。自交不親和性系統迄今為止尚未開發用于油菜籽的商業上可用的SI系統。加拿大專利CA2，143，781描述了一種用于十字花科作物的雜交育種方法，其中通過將自交不親和的雄性不育系的母本與父本雜交生產Fl種子。然而，對于SI主要問題在于大規模繁殖SI親本系，其使得該系統難以商業應用。細胞質雄性不育(CMS)=CMS是一種母系遺傳的現象，其遺傳因子位于胞質器線粒體的基因組中。這種植物產生功能性花粉粒的能力嚴重受損。對于CMS系統，恢復系基因是顯性核基因，其抑制細胞質的雄性不育效應。在cms植物中雄性不育的表現是隱性核基因(稱為保持系等位基因；rf)和雄性不育特異性胞質基因組之間不親和性的結果。用于油菜籽植物Fl雜種商業性生產的CMS系統是Polima(pol；Fu,1981),Kosena禾口Ogura系統(Ogura,1968；Makaroff,1989；PeIlan-DeIourme等，1987；US5，254，802；US20040237141,US20020032916,EP0599042；US6,229，072)。在中國，Polima細胞質雄性不育(PolCMS)系統已主要用于雜種油菜籽生產。然而，由于其固有局限，例如不育性的不穩定性、有限數量的恢復系以及細胞質的潛在不利影響，因此大面積使用具有單一CMS細胞質的雜種并不理想。polCMS的主要不利之處在于在高溫下雄性不育的不穩定性。在相對低或高的溫度條件下雄性不育系能變得部分能育(Yang&Fu,1987)。Ogura(ogu；Ogura,1968；Pelletier等，1983；Heyn,1976)禾口Kosena系統均依賴于蘿卜來源的CMS基因。已將一種用于Ogura細胞質雄性不育植物的育性恢復系從蘿卜(Raphanussativus)(蘿卜(radish))中轉移到蕓苔中(Pelletier等，1987)，因為油菜籽缺少相應于所述CMS基因的Rf等位基因。Ogura系統描述于EP0599042、EP0671121和W02005/074671中。描述了來源于蘿卜的恢復系等位基因的表型(W092/05251；DeIourme等，1991)。最初，Ogura恢復系材料顯示與其育性恢復基因緊密連鎖的降低的雌性能育性和高含量的芥子油苷，其通過漫長回交得以克服(Delourme等，1991,Renard等，1997)。EP1493328描述了一種生產用于Ogura細胞質雄性不育的歐洲油菜雙低恢復系的方法。盡管在艱辛地回交后，在那些品系中芥子油苷含量降低了，但似乎存在某些與Rf等位基因相關的固有問題例如在較高溫度下產量下降、降低的結實率和每個長角果減少的胚珠數(Pellan-De1ourme&Renard,1988；DeIourme等，1994)、較低的種子產量、弱抗病性和倒伏易感性。這些特性的某些與恢復系等位基因緊密連鎖(Delourme等，1994，1995)并有數據暗示那些特性的某些可能對恢復系等位基因是內源的，并且通過育種或甚至使用分離的恢復系等位基因的轉基因方法可能無法得到克服。CMS系統的一個固有缺點在于純合CMS雌性系的繁殖。由于雄性不育，因此CMSA雌性系無法自花傳粉，其必須通過將所述A系與雄性能育的并且在遺傳學上相同于A系的保持系B系雜交而得以保持。該雜交的結果是雄性不育CMSA系。核雄性不育(匪S)核雄性不育(早期稱為雄性核不育gms)受來自細胞核區域的基因控制。大多數天然存在或誘導的雄性不育突變體在自然界中是隱性的，但在甘藍類蔬菜(例如卷心菜和花椰菜)和遺傳轉化的雄性不育系中存在極少例外(Kaul，1988，Williams等，1997)。盡管產生了具有功能的花粉，但是因為花粉沒有裂開或植物的特殊花形態，如在番茄中位置性不育(Atanassova，1999)和在茄子中功能性雄性不育(Phatak&Jaworski，1989)，因此某些突變體的花粉無法自受精(selffertilize)0出現優勢隱性雄性不育表明在任何基因控制的小孢子發生(花粉發育過程)、雄蕊發育或小配子發生(雄配子發育過程)中，gms是突變的結果。NMS系統具有幾乎不帶有不利細胞質效應的完全且穩定的不育性優點。在歐洲油菜中已發現了幾種匪S突變體，并且也已報道了這些突變體的不育性受一種基因(Takagi，1970；Mathias,1985；Hu，2000)、兩種基因(Li等，1985，1988，1993，1995；Hou等，1990；Tu等，1997a)、三種基因(Chen等，1998；Wang等，2001)和具有復等位基因的一種基因(Song，2005)控制。然而，該系統在實踐上難以操作并且常常顯示對環境效應如熱的高敏感性。因此，與CMS系統相比，在油菜籽生產中應用該顯性匪S法則相差很遠，主要因為復雜的能育性遺傳以及在分離種群中區分不同基因型的困難。用于純合兩型系的育種過程是非常復雜的，并且使用傳統的育種方法鑒定回交或自身世代中具有預期性狀的不同基因型(MsRf)是費力費時的。在中國，有三種匪S系統已被用于雜交育種中，以及有幾種雜種已登記。盡管隱性匪S具有優點(其僅需要兩系)，但其還具有難以驅動整個雄性不育群的致命缺陷。由于gms在整個回交中都被保持，因此在雜種種子生產中，在田地中50%的雄性能育分離子(Msms)需要鑒定并在它們脫落花粉之前除去。可例如通過標記輔助選擇實現從雌性系中除去50%的雄性能育植物(Tu等，1999)。然而，這些方法昂貴、費力且在商業上沒有競爭力。由于非常冗長的保持過程以及未利用蔬菜作物中合適的標記基因，因此gms的利用只局限于非常少的蔬菜中。迄今為止沒有開發油菜籽中的系統。對于特定的核雄性不育基因鑒定能育細胞質(H0rner&Palmer，1995)是一項感興趣的研究領域，其一旦成功，就可提供最有效地利用品系如cms系的機會。一種特殊類型的核ms系統是轉基因雄性不育系統，其在1990年初期得到早期開發(Mariani，1992)。由于花藥或花粉特異性基因和啟動子序列的分離、克隆和鑒定(Williams等，1997)，因此這些系統變得可以接受。然而，轉基因系統必須經歷漫長且耗費巨大的政府批準過程，使得與其他系統相比，那些系統處于明顯的競爭不利中。環境敏感的雄性不育(enms)系統植物中某些nms系是條件突變體，因此意味著在特定的環境中，雄性不育突變體植物變成雄性能育。在針對不育性和能育性表現確定關鍵的環境(通常是溫度或光周期)之后，上述GMS突變體被分成環境敏感的核雄性不育(enms)系。在蔬菜作物中，已報道了主要的溫度敏感的enms系(表1)。從實際應用的觀點來看，在溫度和光周期敏感的雄性核不育系統中，對于能育性/不育性表現需要分別鑒定關鍵的溫度或光周期。表1蔬菜中環境敏感的雄性不育突變體蔬菜突變體參考文獻卷心菜TGMS,PGMSRundfeldt,1961抱子甘藍(Brusselssprout)TGMSNieuwhof,1968「花椰菜TGMSDickson,1970胡椒TGMS,TCMSDaskalov,1972;Shifriss,1997*胡蘿卜TGMSKaul,1988番蒜_TGMS_Rick,1948;Sawhney,1983TGMS-熱敏感的基因雄性不育PGMS-光周期敏感的基因雄性不育*TCMS-熱敏感的細胞質雄性不育表格來自Kumar等，2004使用enms系的雜種種子生產更具吸引力，原因在于容易進行雄性不育系的種子繁殖。可在其表現雄性能育性狀的環境中繁殖enms系的種子，與此同時可在其表現雄性不育的另一環境中生產雜種種子。NPZ("NorddeutschePflanzenzuchtLembke，，)MSL系統MSL(雄性不育Lembke)系統是一種NPZ/Lembke提供的系統，目前在歐洲市場有售(Pinochet等，2000)。在2006年，在歐洲使用該系統生產的雜種覆蓋了大約1.15百萬公頃的面積(其中在德國為850，000公頃(Frauen等，2007))。據稱MSL系統是在1984年于NPZ育種場中基于自發突變和選擇得到的(Frauen，1999；Paulmann&Frauen,1999)。在德國，1996年批準了第一種恢復的MSL雜種品種(Frauen&Baer，1996)，與優良的常規非雜種品種相比顯示增加了大約12%的產量。該系統被描述為一種可供選擇的CMS系統(Frauen，1999；“Hybridrapsfiebel”，Rapoolpromotionmaterial)，其使用了用于繁殖不育母系的能育保持系以衍生全恢復的雜種。對于該雄性不育系統，所有已知的常規油菜籽栽培品種以及品系都是恢復系。這種情況以及所宣稱的該系統來源于自發突變暗示了其不同于其他已知的不育系統。公眾既不知道MSL系統的親本系，也不知道制備該雜種種子的方法，其作為商業秘密得到保持。這限制了使用MSL系統及其在油菜籽品種中的更廣泛地應用。MSTakagi通過Y-照射誘變，Takagi(1970)在日本品種Murasakinatane中誘導了雄性不育。該系統被Takagi描述為單基因隱性。Theis(1990)在他的博士論文(P.14-18)中描述了MSTakagi受兩種基因控制，一種是純合隱性的雄性不育基因以及另一種是顯性的“修飾基因”。Theis描述了MSTakagi在正常田地條件下是不育的，但可在7-10后于一周的溫度處理(38°C日白天溫度/18°C夜間溫度)下恢復能育性(p.49)。Theis進一步提議通過用不育的、溫度處理的植物的花粉給不育植物授粉生產100%能育親本系(P.55)。然而，公眾不知道該系統的商業應用并且也沒有開發在商業上可行的其雜交系統。對于不育基因或“修飾基因”，Takagi和Theis都沒有描述純合系。當討論核雄性不育系統時，Denis等(1993)描述了Takagi系統，涉及該系統問題的一個原因是缺少標記基因，其使得在后代中不能分選雄性不育或雄性能育植物，因此需要提供純合系(詳細討論參見如下)。如上所述，目前在商業上僅使用兩種雜交系統(I)NPZMSL系統，但其起源未知，和(2)0gUra系統，因為某些與恢復系等位基因連鎖的農藝學缺點，因此也不是最佳的。另外能獲得的InVigor雜種雙低油菜系統(BayerCropScience)是一種轉基因系統，因此涉及高管理費用和公眾關注。然而，這幾個系統在數量上有限。因此，不僅從經濟角度還從農業原因來看，額外的系統應當有益在作物如油菜籽中大量使用單一雜交系統會致使種群在抗病時容易受傷，這種易傷性在同一遺傳種群中可能更容易地傳播。平行利用幾種雜交系統會提供較大的遺傳變異并會減少這種易傷性。因此本發明待解決的問題是提供一種代替的在商業上可行的新的油菜籽核雄性不育雜交系統，其產生了商業上可行的油菜籽粕和油，并且是一種便利且具成本效益的生產雜種種子(優選具有不超過25μπι01/克9%水分含量的風干種子的芥子油苷含量)的方法，此外其不具有目前所用系統的缺點。通過本發明解決了該問題。附圖描述圖1恢復的雜交系統(RHS)遺傳和品種發展。用于Ms系和保持系固定的育種計劃以及隨后用于雜交系統的雜交計劃。該計劃的上半部分描述了MsMsrfrf基因型(預基礎雌性系)和msmsrfrf基因型(保持系)的固定。下半部分描述了用于提供雜種種子的雜交計劃，首先通過將預基礎雌性系(MsMsrfrf)和保持系(msmsrfrf)雜交提供基礎雌性系(Msmsrfrf)，然后通過將基礎雌性系(Msmsrfrf)與恢復系(msmsRfRf)雜交提供雜種種子。圖2與雄性能育植物的花相比，顯示條件性雄性不育植物(在溫度誘導的再受精后)的白色條紋/白色斑點表型的圖。A在高溫誘導的再受精后，條件性雄性不育歐洲油菜植物的白色條紋/白色斑點表型。B白色條紋/白色斑點花(雄性不育歐洲油菜植物；左邊的花)與雄性能育歐洲油菜植物的正常的花(右邊的花)的比較。C:與A相同，具有通過重疊的陰影線區域標記的白色區域D與B相同，具有通過重疊的陰影線區域標記的白色區域E雄性能育歐洲油菜植物的花。圖3顯示條件性雄性不育歐洲油菜植物的芽敗育表型的圖像。A具有芽敗育的雄性不育植物的不育枝B-D:在于同一枝條上具有不育和能育的花的熱處理后雄性不育植物的枝條E在熱處理受精和自交后具有莢的雄性不育植物枝條圖4:A顯示與不育性連鎖以及之后與Ms等位基因(alt1)分離連鎖的多態性的BSA候選標記的分布圖。在雄性能育集團(bulks)中顯示的片段的大小與對于雄性能育親本所觀察到結果的相同。然而，雄性不育集團顯示了兩條片段對于雄性不育親本觀察到一條，以及對于雄性能育親本也觀察到一條。該觀察結果與期望值一致，因為對于Ms等位基因，雄性不育植物可以既是純合的又是雜合的。B通過引物HiNK6702和6707(分別為SEQIDNOs:13和14)組合在雄性能育(F)和雄性不育(S)系中獲得的擴增產物的瓊脂糖分布圖。圖5根據熒光發射類型及其強度，使用在三塊不同的云簇(clouds)中分離的純合不育(MsMs)、雜合不育(Msms)或純合能育(msms)植物，針對標記SR0002A獲得的典型的SNP圖。圖6標記序列NR1116。加下劃線的是用于SSR擴增的正向和反向引物。SSR自身以黑體字母標出。在該序列的5’-末端，某些核苷酸無法得到清楚鑒定，因此用可代表A、T、C或G的“N”標記。圖7標記序列NR2525。加下劃線的是用于SSR擴增的正向和反向引物。SSR自身以黑體(bold)字母標出。圖8標記序列NR2219。加下劃線的是用于SSR擴增的正向和反向引物。SSR自身以黑體字母標出。圖9:A=SNP共有序列1(SEQIDNO3)B=SNP共有序歹Ij2(SEQIDNO6)顯示的是能育和不育等位基因的共有序列。突變區示于(括號)中，并且對于能育和不育單倍體型均列出核苷酸(詳情參見實施例)。在共有序列1的5’-末端的黑體字母標記的是SSR重復的3’-末端。圖10:TaqMan檢測基本原理(來自Pre_DevelopedTaqManAssayReagentsAllelicDiscriminationProtocol；件號4312214Rev.C5/2005；AppliedBiosystems)圖11橫貫5條擬南芥(Arabidopsisthaliana)染色體的23種蕓苔候選基因的擬南芥同系物的圖位。以堿基對表示的物理距離列于條左側，擬南芥基因的參考ID列于條右側。圖12顯示了純合不育(rfrf)、純合能育(RfRf)和雜合能育(Rfrf)植物個體實例的來源于PUT-161a-Brassica_napus-59218的SSCP標記的GeneMapper輸出結果。定義應當理解本發明不限于如在此描述的具體方法學、實驗方案、細胞系、植物種或屬、構建體和試劑。還應當理解在本文中使用的術語僅為了描述具體實施方案的目的，并不意在限制本發明的范圍，其僅受限于附加的權利要求。應當指出，除非上下文另有清楚指示，當在本文中以及在附加的權利要求中使用時，單數形式“a”、“an”和“the”包括復數。因此，例如提及“一種植物”時，則是提及一種或多種植物并包括本領域技術人員所知的其等價物，等等。當在本文中使用時，詞語“或”指具體列表的任何一個成員，并且還包括該列表成員的任意組合(即還包括“和”)。術語“約”在本文中用于指大約地、約略地、左右或在......附近。當術語“約”與數值范圍連用時，其通過延伸所列數值的上邊界和下邊界從而改變了該范圍。一般而言，術語“約”在本文中用于改變數值使之高過并低于設定值，具有20%，優選10%上下的變化(更高或更低)。高于溫度，術語“約指士1.0°C，優選士0.5°C。在術語約用于本發明上下文的情況下(例如與溫度或分子量值連用)，優選精確值(即沒有“約”)。術語“等位基因”指基因的一種或多種可供選擇的形式中的任何一種，所有的等位基因均涉及至少一種性狀或特性。在二倍體細胞中，給定基因的兩個等位基因占據了一對同源染色體上的相應基因座。在某些情況下(例如對于QTLs)，其更準確地指“單倍體型”(即染色體區段的等位基因)而非“等位基因”，然而，在那些情況下，術語“等位基因”應當理解為包含術語“單倍體型”。如果兩個個體在一個特定的基因座上具有相同的等位基因，以及如果等位基因由一個共同的祖先遺傳而來(即該等位基因是同一親本等位基因的拷貝)，則該等位基因被稱為“后裔一致(identicalbydescent)”。另一種情況是等位基因是“狀態一致(identicalbystate)”(即等位基因看上去是相同的，但來源于等位基因的兩個不同拷貝)。對于連鎖研究后裔一致性信息是有用的；盡管后裔一致性信息可能是特別有用的，但是后裔一致性和狀態一致性信息都可用于例如在本文中描述的那些相關研究中。在本發明的范圍中，術語“回交”被理解為指一種其中將雜種后代與親本之一重復雜交的方法。術語“蕓苔(Brassica)”指蕓苔屬，非常具體地指其中的種mapus(歐洲油菜)、campestris(舌甘菜)、oleraceacvTastie(甘藍)、oleraceacvSnowballY(花挪菜)禾口oleraceacvEmperor(花蓮甘藍)。術語“歐洲油菜(Brassicanapus)”或“油菜(oilseedrape)”指歐洲油菜的植物、種子、植物部分和細胞，并包括一年生春油菜、半年生(biannual)冬油菜以及半年生中間型油菜。在上下文中，一年生或半年生表示品種是否能越過冬季生長期生長。一般而言，冬油菜在西北歐種植，而春油菜則主要在加拿大、中國、印度、澳大利亞和南美種植。油菜(oilseedrape)來源于甘藍(B.oleracea)與甜菜(B.campestris)的種間雜交。因此，該術語也包括任何由這兩個品種實施的再整合。一種優選的春油菜是雙低油菜型油菜。包括了用于表達低芥子油苷含量的遺傳手段并在歐洲市售的代表性的冬油菜品種包括例如CAPITOL、cv.CAMPALA,cv.CALIFORNIUM(可獲得自Dekalb，孟山都的商標)、cv.LORENZ,CV.0ASE(可獲得自RAP00L)。包括了用于表達低芥子油苷含量的遺傳手段并加拿大市售的代表性的春油菜品種包括例如cv.BULLET、cv.GARRISON和cv.KRISTANA(各自可獲得自Svalofffeibull)。其他包括了用于表達低芥子油苷含量的遺傳手段并在歐洲市售的冬油菜品種包括cv.APEX、cv.NKFAIR、cv.VIKING、cv.BILLY、cv.LADOGA和cv.CASTILLE。在含油種子蕓苔中這樣低的芥子油苷含量足以提供給粕以增加的商業價值。術語“歐洲油菜-特異性DNA序列”指與顯示與其最大相似性的物種歐洲油菜(或產生(整合)自即蕪菁(Brassicarapa)和甘藍(Brassicaoleracea)的兩種歐洲油菜中的任何一種)的基因組序列具有大于80%，優選大于85%，更優選大于90%，還更優選大于95%，仍更優選大于97%，最優選大于99%的核苷酸序列同源性的多核苷酸序列。術語“雙低油菜(Canola)”指一種產生包含小于2%芥子酸的油類的歐洲油菜，并且種子的固體成分必須包含小于30μM/g風干無油固體的3-丁烯基芥子油苷、4-戊烯基芥子油苷、2-羥基-3丁烯基芥子油苷、2-羥基-4-戊烯基芥子油苷的任何一種或任何混合物。如同本領域所公認的一樣，術語“染色體”在本文中用于指包含細胞核DNA并在其核苷酸序列中攜帶線性基因陣列的細胞核中的自我復制的遺傳結構。術語“條件性雄性不育”指一種可為某些條件所誘導和/或抑制的雄性不育表型(即不能產生能育花粉)。因此，通過應用所述某些條件，植物可從雄性不育“轉換”為雄性能育表型。雄性不育可由多種因素引起，并可例如表現為完全缺少雄性器官(花藥)、花粉退化、花粉不育等。基于條件的強度，從雄性不育“轉換”為雄性能育可以是完全或不完全的。最優選地，在本發明的上下文中，術語“條件性雄性不育”指溫度依賴的雄性不育，從而指一種核雄性不育表型，其中不育性是溫度依賴的并且能在高于35°C(優選35°C-43°C，更優選37°C-40°C，最優選在約39°C；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長)的溫度下恢復能育性。“基因”在本文中定義為一種由DNA序列組成的遺傳單位，該DNA序列占據了染色體上特定位置并包含針對生物體中特定特性或性狀的遺傳指令。“遺傳工程”、“轉化”和“遺傳修飾”在本文中都用作為將分離的和克隆的基因轉移入另一生物體的DNA，通常是染色體DNA或基因組中的同義詞。術語“基因型”指細胞或生物體的遺傳組成。個體的“對于遺傳標記組的基因型”包括對于存在于個體中的一個或多個遺傳標記基因座，特定的等位基因。如本領域所知的，基因型可涉及單基因座或多基因座，與基因座相關或不相關和/或連鎖或不連鎖無關。在某些實施方案中，個體的基因型涉及一種或多種基因，所述一種或多種基因涉及與目標表型(例如本文中所定義的數量性狀)表達相關的一種或多種基因。因此，在某些實施方案中，基因型包含位于數量性狀的一個或多個遺傳基因座上的，存在于個體中的一個或多個等位基因的總和。在某些實施方案中，用單倍體型(在本文中如下定義的)來表示基因型。術語“種質”指種群或另一個組個體(例如物種)的基因型的總和。術語“種質”還可指植物材料；例如一組充當各種等位基因庫的植物。短語“適應種質”指被證明具有遺傳優勢的植物材料；例如對于給定的環境或地理區域，而短語“非適應種質”、“粗種質”和“外來種質”指未知或未被證明具有遺傳價值的植物材料；例如對于給定的環境或地理區域；同樣，在某些實施方案中，短語“非適應種質”指不是已建立的繁殖種群一部分并且與該已建立的繁殖種群的成員不具有已知關系的植物材料。術語“芥子油苷”指在種子已被磨碎并提取油之后，仍留在在種子的固體成分_固體粕中的硫基化合物。它們的結構包括與脂肪族烴結合的葡萄糖(3_丁烯基芥子油苷、4-戊烯基芥子油苷、2-羥基-3-丁烯基芥子油苷和2-羥基-4-戊烯基芥子油苷)或與芳香族烴結合的葡萄糖(3-吲哚基甲基芥子油苷、1-甲氧基-3-吲哚基甲基芥子油苷)。脂肪族芥子油苷也稱為烯基芥子油苷。芳香族芥子油苷也稱為吲哚。術語“總芥子油苷含量”指在所示材料例如在粕或干燥種子中包含的所有芥子油苷的總和。總芥子油苷含量可以ymol(芥子油苷)/克種子(例如9%水分含量的風干種子)或粕來顯示。術語“單倍體型”指從一個親本遺傳來的個體等位基因的組合。因此，二倍體個體具有兩個單倍體型。術語“單倍體型”可更加狹義地用于指與表型性狀相關的物理連鎖和/或未連鎖的遺傳標記(例如序列多態性)。短語“單倍域”(haplotypeblock)(有時在文獻中也簡稱為單倍體型)指一組兩種或更多種在單條染色體(或其一部分)上物理連鎖的遺傳標記。通常，每個域都具有幾個共同的單倍體型，并且可挑選唯一鑒定這些單倍體型中每一個的遺傳標記亞組(即“單倍體型標簽”)。術語核苷酸或氨基酸序列的“同源性”、“序列相似性”或“序列同一性”指兩條或更多條序列的同一性或相似性的程度，并可按慣例通過使用已知的軟件或計算機程序如BestFit或Gap成對比較程序(GCGWisconsin程序包，GeneticsComputerGroup,575ScienceDrive,Madison,Wis.53711)進行測定。BestFit使用Smith和Waterman,AdvancesinAppliedMathematics2:482-489(1981)的局部同源性算法來發現兩條序列間同一性或相似性最佳的片段。通常通過在整個比較窗口上比較兩條序列的一部分以鑒定并比較局部區域的序列相似性，從而進行兩條或更多條多核苷酸或聚氨基酸序列之間的序列比較。比較窗口通常為約20-200個連續的核苷酸。使用Needleman和Wunsch，J.Mol.Biol.48=443-453(1970)的方法，Gap執行一條序列的全部與另一條相似序列的全部的全局比對。當使用序列比對程序例如BestFit來測定DNA序列同源性、相似性或同一性程度時，可使用默認設置，或可選擇合適的打分矩陣來優化同一性、相似性或同源性得分。類似地，當使用程序如BestFit來測定兩條不同的氨基酸序列之間的序列同一性、相似性或同源性時，亦可使用默認設置，或可選擇合適的打分矩陣如blosum45或blosumSO來優化同一性、相似性或同源性得分。“同源重組”指在相同的核苷酸序列區域中，兩個DNA分子或配對染色體的染色單體之間的DNA片段的交換(“互換”)。“重組事件”在本文中被理解為指減數分裂交換。術語“雜合的”指在同源染色體的相應基因座上存在不同的等位基因時所存在的遺傳狀況。術語“純合的”指在同源染色體的相應基因座上存在相同的等位基因時所存在的遺傳狀況。在植物育種上下文中，術語“雜種”、“雜種植物”和“雜種后代”指一種植物，其是由不同品系或品種或種的植物雜交產生的子代或遺傳上不同的親本，所述雜交包括但不限于在兩種近交系(例如遺傳上雜合的或主要雜合的個體)之間的雜交。短語“單交F1雜種”指由兩種近交系之間雜交產生的F1雜種。在核酸上下文中，術語“雜合體(hybrid)”指在互補核苷酸堿基之間通過氫鍵形成的雙鏈核酸分子或雙鏈體。術語“雜交(hybridise)”或“退火”指在互補堿基之間核酸序列單鏈通過氫鍵形成雙螺旋區段的過程。短語“近交系”指遺傳上純合的或接近純合的種群。例如，可通過幾個循環的兄弟/姐妹育種或自交得到近交系。在某些實施方案中，對一種或多種目標表型性狀進行近交系純育。“近交”、“近交個體”或“近交后代”是采樣自近交系的個體。術語“近交”指基本上純合的個體或品系。術語“基因滲入(基因滲入)”、“基因滲入(introgressed)”和“基因滲入(introgressing)”指一種既是天然又是人工的過程，籍此通過雜交，一種物種、品種或栽培品種的基因組區域移入另一物種、品種或栽培品種的基因組中。該過程可任選地通過與輪回親本回交而得以完成。術語“連鎖”及其語法上的變型指在同一染色體上不同基因座處的等位基因分離聯合超過預期碰巧組合的傾向，如果它們的傳遞是獨立的話，在某些實施方案中，是它們的物理鄰近的結果。短語“連鎖不平衡”(也稱為“等位基因關聯”)指一種現象，其中當從親本分離給子代時，在處于兩個或更多個基因座上的特定等位基因傾向于以連鎖群聯合，具有較在給定種群中所預期的它們的個體頻率更高的頻率。例如，當遺傳標記等位基因和QTL等位基因同時出現時，它們可顯示連鎖不平衡，具有較預期來自個體等位基因的那些頻率更高的頻率。連鎖不平衡可能產生的幾個原因包括但不限于在染色體上密切鄰近的等位基因。術語“連鎖群”指位于同一條染色體上的全部基因或遺傳性狀。在連鎖群中，那些近得足以在一起的基因座會在遺傳雜交中顯示連鎖。由于交換概率隨染色體上基因間物理距離的減小而增加，因此在直接的遺傳檢測中在連鎖群中其位置彼此遠離的基因就不顯示任何可檢測的連鎖。術語“連鎖群”主要用于指在尚未進行染色體定位的情況下，在遺傳系統中顯示連鎖行為的遺傳基因座。因此，在本發明的上下文中，術語“連鎖群”與(物理實體的)染色體同義。術語“基因座”指在給定物種的染色體上的位置(例如基因、遺傳標記等的)。術語“分子標記”或“遺傳標記”指一種用于肉眼觀察核酸序列特性差異的方法中的指示物。其涉及一種與一種或多種目標基因座相關的個體基因組(例如存在于個體基因組中的核苷酸或多核苷酸序列)的特征。在某些實施方案中，取決于上下文，在目的種群中或在多態性占據的基因座中遺傳標記是多態的。遺傳標記包括例如單核苷酸多態性(SNPS)、indelS(即插入/缺失)、簡單序列重復(也稱為微衛星標記；SSRs)、限制性片段長度多態性(RFLPs)、隨機擴增多態DNAs(RAPDs)、分裂擴增多態序列(CAPS)標記、多樣性陣列技術(DArT)標記和擴增片段長度多態性(AFLPs)等。額外的標記包括插入突變、序列特異性擴增區(SCARs)或同工酶標記或限定了特定的遺傳和染色體位置的在本文中所述的標記的組合。遺傳標記可例如用于定位染色體上包含在表型性狀表達中有助于變異性的等位基因的遺傳基因座。短語“遺傳標記”還可指一種與基因組序列互補的多核苷酸序列，例如用作探針的核酸的序列。遺傳標記可在物理上位于染色體上的位置中，該位置位于與該遺傳標記相關的遺傳基因座之內或之外(即分別為基因內或基因外)。換種說法，雖然遺傳標記通常在相應于目標基因座的基因的染色體上位置未被鑒定并且在遺傳標記和目標基因座之間的重組率不為零時使用，但本文中所公開的主題還可使用在物理上位于遺傳基因座(例如在相應于一種基因的基因組序列內部，例如但不限于在基因的內含子或外顯子中的多態性)邊界之內的遺傳標記。在本發明的某些實施方案中，一種或多種遺傳標記包含1-10種標記，以及在某些實施方案中，一種或多種遺傳標記包含多于10種的遺傳標記。在本發明的范圍中，術語“基于標記的選擇”被理解為指在核酸與期望性狀相關的情況下，使用遺傳標記來檢測來自植物的一種或多種核酸以鑒定攜帶有負責期望(或不期望的)性狀的基因的植物，使得那些植物可用于(或免于)選擇育種計劃。在本發明的范圍中，術語“微衛星或SSRs(簡單序列重復)標記”被理解為指一種由多個DNA堿基短序列重復組成的遺傳標記，其見于遍及植物的DNA的基因座上，并且有可能是高度多態的。短語“核酸”指可相應于核苷酸鏈的任何單體單元的物理鏈，包括核苷酸聚合物(例如典型的DNA或RNA聚合物)、修飾的寡核苷酸(例如包含對于生物學RNA或DNA非典型的堿基的寡核苷酸，例如2'-0-甲基化寡核苷酸)等。在某些實施方案中，核酸可以是單鏈、雙鏈、多鏈或它們的組合。除任何明示的序列之外，除非另有指示，本發明的具體核酸序列任選地包含或編碼的互補序列。短語“表型性狀”指個體外觀或其他可檢測的特性，由其基因組與環境的相互作用而產生。術語“多數”指多于一個的實體。因此，“多數個體”指至少兩個個體。在某些實施方案中，術語多數指多于全體的一半。例如，在某些實施方案中，“多數種群”指多于種群成員的一半。術語“后代”指特定雜交的后裔。通常，后裔由兩個個體繁殖而產生，盡管某些物種(特別是某些植物和雌雄同體的動物)能自交(即同一植物充當雄配子和雌配子的供體)。后裔可以是例如FpF2或任何后代。短語“質量性狀”指一種受一種或幾種顯示主要表型效應的基因控制的表型性狀。因此，質量性狀通常是簡單遺傳的。在植物中的實例包括但不限于花色、穗軸顏色和抗病性，例如玉米大斑病(Northerncornleafblight)抗性。在本發明的范圍中，“PCR(聚合酶鏈反應)”被理解為指一種產生相對大量的DNA特定區域，從而使多種基于那些區域的分析變成可能的方法。在本發明的范圍中，“表型”被理解為指一種遺傳受控性狀的可區分的特性。“植物”是處于任意發育階段的任意植物，特別是種子植物。“植物細胞”是一種包含原生質體和細胞壁的植物結構和生理學單位。植物細胞可以分離的單細胞或培養細胞的形式存在，或作為更高級組織單位例如植物組織、植物器官或全植物的一部分。“植物細胞培養物”指植物單位例如原生質體、細胞培養物細胞、植物組織中的細胞、花粉、花粉管、胚珠、胚囊、合子和處于不同發育階段的胚的培養物。“植物材料”指葉、莖、根、花或花部分、果實、花粉、卵細胞、合子、種子、插條、細胞或組織培養物或植物的任何其他部分或產物。“植物器官”是一種具有截然不同且可見結構的并且分化的植物部分，例如根、莖、葉、花芽或胚。當在本文中使用時，“植物組織”指一群組織成結構和功能單位的植物細胞。包括處于植物或培養物中的任何植物組織。該術語包括但不限于全植物、植物器官、植物種子、組織培養物和任何組織成結構和/或功能單位的植物細胞群。在該術語與如上所列的或包含于該定義中的任何特定類型的植物組織連用或不存在該術語時，并不意在排除任何其他類型的植物組織。術語“植物部分”指植物的一部分，包括單細胞和細胞組織，例如在植物中完整的植物細胞、可再生植物的細胞團和組織培養物。植物部分的實例包括但不限于來自花粉、胚珠、葉、胚、根、根尖、花藥、花、果、莖、枝條和種子的單細胞和組織；以及花粉、胚珠、葉、胚、根、根尖、花藥、花、果、莖、枝條、接穗、砧木、種子、原生質體、愈傷組織等。在本發明的范圍中，“多態性”被理解為指在一個種群中兩種或更多種不同類型的基因、遺傳標記或遺傳性狀的存在。術語“種群”指享有共同的遺傳起源的在遺傳上異質的植物集合。術語“優勢雄性不育”指在至少100株植物的種群中，不超過10%，優選不超過5%，更優選不超過的在所有那些植物上的花具有產生能育花粉的功能性雄性器官。應當理解單株植物可同時具有能育和不育的花。在優選的實施方案中，不超過10%，優選不超過5%，更優選不超過的在單株植物上的花具有產生能育花粉的功能性雄性器官。術語“探針”指一種會與靶核酸序列分析物或其cDNA衍生物中的互補序列形成氫鍵雙鏈體的單鏈寡核苷酸序列。當在本文中使用時，術語“引物”指一種能退火至擴增靶標上，讓DNA-聚合酶附著，從而在置于其中引物延伸產物的合成被誘發的條件(即在核苷酸和用于聚合的物質如DNA聚合酶存在下以及處于合適的溫度和pH下)下時作為DNA合成引發點的寡核苷酸。在擴增中為了達到最高效率，(擴增)引物優選是單鏈。優選地，引物是一種寡脫氧核糖核苷酸。引物必須足夠長以致于在用于聚合的物質存在下能引發延伸產物的合成。引物的精確長度取決于許多因素，包括溫度和引物組成(A/T和G/C含量)。如在DNA擴增領域例如在PCR擴增中所通常使用的，雙向引物對由一條正向和一條反向引物組成。當在本文中使用時，應當理解“引物”可指多于一條引物，特別是在關于要被擴增的靶區末端序列的信息有些含糊的情況下。因此，“引物”包括包含代表序列中可能變化的序列的引物寡核苷酸的集合，或包括能使典型的堿基配對得以進行的核苷酸。可通過任何合適的方法制備寡核苷酸引物。用于制備特定序列的寡核苷酸的方法是本領域已知的，包括例如合適序列的克隆和限制性酶切以及直接化學合成。化學合成方法可包括例如磷酸二酯或三酯法、二乙氨基磷酸酯(diethylphosphoramidate)法和披露于例如US4，458，066中的固相載體法。視情況，通過可檢測的摻入手段例如通過光譜、熒光、光化學、生物化學、免疫化學或化學手段可檢測的，引物可被標記。在包含合適的鹽類、金屬陽離子和PH緩沖系統的反應介質中，在足夠量的四種脫氧核糖核苷酸三磷酸酯(dATP、dGTP、dCTP和dTTP，即dNTPs)或類似物存在下，聚合劑催化了寡核苷酸引物的模板依賴的延伸。合適的聚合劑是已知催化引物和模板依賴的DNA合成的酶類。已知的DNA聚合酶包括例如大腸桿菌DNA聚合酶I或其Klenow片段、T4DNA聚合酶和TaqDNA聚合酶。使用這些DNA聚合酶用于催化DNA合成的反應條件是本領域已知的。該合成的產物是由模板鏈和引物延伸鏈組成的雙鏈分子，其包括靶序列。這些產物又用作模板用于另一輪的復制。在第二輪復制中，第一次循環的引物延伸鏈用其互補引物進行退火；合成產生了通過引物序列或它們的互補序列結合5'-末端和3'-末端的“短”產物。變性、引物退火和延伸的重復循環導致為引物所限定的靶區的指數式累積。運行足夠的循環以獲得所需數量的飽含核酸靶區的多核苷酸。該所需數量可改變，并取決于產物多核苷酸所服務的作用。PCR法為手冊所詳細描述，并且是技術人員所知的。在通過PCR擴增后，可通過在高至中等嚴格雜交和洗滌條件下與探針多核苷酸雜交檢測靶多核苷酸，其形成了帶有靶序列的穩定的雜合體。如果預期探針與靶序列會基本上完全互補(即約99%或更多)，則使用嚴格條件。如果預期有某些錯配，例如如果預期變體品系具有探針不會完全互補的結果，則雜交嚴格性可降低。然而，要選擇消除非特異性/不定結合的條件。影響雜交并且選擇性抗非特異性結合的條件是本領域已知的，并描述于例如Sambrook和RuSSell，2001中。一般而言，更低的鹽濃度和更高的溫度增加雜交條件的嚴格性。在本發明的范圍中，“PCR引物”優選被理解為指在DNA特定區域的PCR擴增中使用的單鏈DNA的相對短的片段。術語“子代”植物指由一種或多種親本植物或其后代的營養體或有性生殖獲得的作為后代的任何植物。例如，子代植物可通過克隆或自交親本植物或通過雜交兩種親本植物獲得，并可包括與F1或&或更遠的世代自交獲得。F1是由親本產生第一代子代，親本至少之一首次用作性狀供體，而第二代子代(F2)或后代爾3、&等)則是由FpF2等自交產生的范本。因此，F1可以是(以及通常是)由兩種不分離親本(對于一種性狀，不分離系是純合的)雜交產生的雜種，而F2則可以是(以及通常是)由所述F1雜種自花傳粉產生的子代。“重組”是減數分裂過程中兩條同源染色體之間的信息交換。雙重組的頻率是單重組體頻率的產物。例如，可發現在IOcM區域中的重組體具有10%的頻率，則發現雙重組體具有10%xl0%=的頻率(1厘摩規定為在測交中的重組體后代)。術語“RHS”或“恢復的雜交系統”指本發明的基于核雄性不育的雜交系統。在本發明的上下文中，短語“有性雜交”和“有性生殖”指配子融合產生后代(例如通過受精，例如在植物中通過傳粉產生種子)。在某些實施方案中，“有性雜交”或“異花受精”是某一個體受精自另一個體(例如在植物中異花傳粉)。在某些實施方案中，術語“自交”指通過自花受精或自花傳粉產生種子；即花粉和胚珠來自同一植株。在本發明的范圍中，“選擇育種”被理解為指一種利用具有或顯示所需性狀的植物作為親本的育種計劃。術語“嚴格條件”或“嚴格雜交條件”包括提及與其他序列相比，在多肽會與其靶序列雜交的情況下，在更大程度上可檢測到的條件(例如至少超過背景2-倍)。嚴格條件是序列依賴的且在不同的情況下會有不同。通過控制雜交和/或洗滌條件的嚴格性，可鑒定與探針100%互補的靶序列(同源探查)。可選地，可調節嚴格條件以容許某些序列中的錯配，使得能檢測到較低程度的相似性(異源探查)。一般而言，嚴格條件是那些其中鹽濃度低于大約1.5MNa離子，通常為約0.01-1.OMNa離子(或其他鹽類)；pH7.0-8.3；以及對于短探針(例如10-50個核苷酸)，溫度為至少約30°C，和對于長探針(例如大于50個核苷酸)，溫度為至少約60°C的條件。還可通過添加去穩定劑如甲酰胺獲得嚴格條件。例證性的低嚴格條件包括在37°C下使用30-35%甲酰胺，IMNaCl,1%SDS(w/v；十二烷基硫酸鈉)的緩沖溶液進行雜交，以及在50-55°C下于IX-2XSSC(20XSSC=3.OMNaCl/0.3M檸檬酸三鈉)中洗滌。例證性的中等嚴格條件包括在37°C下于40-45%甲酰胺，IMNaCl,1%SDS中雜交，以及在55-60°C下于0.5X-IXSSC中洗滌。例證性的高嚴格條件包括在37°C下于50%甲酰胺，IM恥(1，1%305中雜交，以及在60-651下于0.1\55(中洗滌。特異性通常是雜交后洗滌的函數，關鍵因素是離子強度和最終洗滌溶液的溫度。對于DNA-DNA雜合體，Tm可從Meinkoth和Wahl(Anal.Biochem.，138:267_284，1984)的方程式中近似得到Tm=81.5°C+16.6(logΜ)+0.41(%GC)-0.61(%form)-500/L；其中M是單價陽離子的摩爾濃度，%GC是DNA中鳥苷和胞嘧啶核苷酸的百分數，%form是雜交溶液中甲酰胺的百分數，以及L是堿基對中雜合體的長度。Tm是在50%的互補靶序列與完全匹配的探針雜交(在規定的離子強度和PH下)時的溫度。Tm每降低約1°C，就意味著的錯配；因此，可調節Tm、雜交和/或洗滌條件以與所需同一性的序列雜交。例如，如果尋找具有大約90%同一性的序列，則1可降低10°C。一般而言，對于特定序列及其互補序列，嚴格條件選擇為在規定的離子強度和PH下低于熱熔點(Tm)約5°C。然而，高嚴格條件可利用在比熱熔點(Tm)低1、2、3或4°C下進行雜交和/或洗滌；中等嚴格條件可利用在比熱熔點(Tm)低6、7、8、9或10°C下進行雜交和/或洗滌；低嚴格條件可利用在比熱熔點(Tm)低11、12、13、14、15或20°C下進行雜交和/或洗滌。使用上述方程式、雜交和洗滌組合物以及所需的Tm，本領域技術人員應當理解固有地描述了雜交和/或洗滌溶液的嚴格性變化。如果所需的錯配程度導致低于45°C(水溶液)或32°C(甲酰胺溶液)的Tm，則優選增加SSC濃度，使得可使用更高的溫度。關于核酸雜交白勺大量指導見于:Tijssen,LaboratoryTechniquesinBiochemistryandMolecularBiology-HybridizationwithNucleicAcidProbes,PartI,第2章〃Overviewofprinciplesofhybridizationandthestrategyofnucleicacidprobeassays",Elsevier,N.Y.(1993)；禾口CurrentProtocolsinMolecularBiology,第2章，Ausubel,等，編，GreenePublishingandffiley-Interscience,NewYork(1995)。嚴格雜交的方法是本領域已知的，其條件可通過本領域已知手段進行計算。這披露于Sambrook等，MolecularCloning:ALaboratoryManual,第2版·，ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989,ColdSpringHarbor,N.Y.禾口CurrentProtocolsinMolecularBiology，Ausebel等，編，JohnWileyandSons，Inc.，2000中。測定序列同一性百分數的方法是本領域已知的，其實例為GCG計算機序列分析軟件(GCG，Inc,MadisonWis.)。在本發明的范圍中，“測交植物”(testerplant)被理解為指一種用于在遺傳學上鑒定要被測試的植物中性狀的植物。通常，將要被測試的植物與“測交系”植物雜交，并記錄雜交后代中性狀的分離比率。術語“測交系”指具有標準基因型、已知特性和確認性能的品系或個體。“測交親本”是來自在有性雜交中用作親本的測交系的個體。通常，測交親本與其所要雜交的個體無關，并且在遺傳學上也與之不同。當與個體或近交系雜交用于表型評估時，測交系通常用于產生F1后代。短語“頂交組合”指將單測交系與多個品系雜交的過程。產生該雜交的目的是要確定雜種后代的表型特性；也就是說，評估多種品系中的每一種在通過測交系雜交來源于其的雜種后代中產生所需表型的能力。術語“品種”或“栽培品種”指一群在結構或遺傳特征和/或特性上能與相同種中的其他品種區分的相似的植物。發明詳述本發明提供了一種用于生產歐洲油菜雜種種子的商業上可行的系統。該系統使用了顯性核雄性不育基因。可通過顯性恢復系等位基因恢復能育性。本發明的貢獻包括但不限于1.提供條件性核雄性不育系，其包含以純合子存在的雄性不育基因(基因型MsMsrfrf)。有可能通過提供用于作為本發明一部分的雄性不育基因的遺傳標記，從而提供該品系。2.提供一種通過經特定的熱處理導入能育性，繁殖以未改變類型存在的條件性雄性不育系的方法。3.提供歐洲油菜保持系，其既不包含核雄性不育基因，也不包含恢復系等位基因(基因型msmsrfrf)的功能性拷貝。由于在所有雜交系統中雌性系的繁殖是主要的數量限制且昂貴的步驟，因此現有系統提供了在2-步操作中繁殖雌性系首先，發現本發明的系統是一種環境敏感的核雄性不育(enms)系統。由于在田間生長條件下不育性可能意外丟失，因此大多數這些系統在商業上并不可行，而現有系統可通過高溫處理轉換開關，因此上述不育性的意外丟失不太可能在油菜籽正常生長的條件下發生。通過利用enms特性的本發明的自交方法，使用該系統提供了足夠數量的預基礎雌性系。在第二步中，將預基礎雌性系與保持系(msmsrfrf)雜交產生包含以雜合形式存在的雄性不育基因(基因型Msmsrfrf)的雄性不育基礎雌性系。當在本文中使用時，術語“預基礎雌性系(prebasicfemale)”指例如具有基因型MsMsrfrf的條件性(例如高溫調節的)雄性不育歐洲油菜品系，該基因型可例如獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子(參見以下第1節“提供預基礎雌株和種子的方法”)，其中所述歐洲油菜雌株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是純合的，ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(rf等位基因)是純合的，iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。此外，當在本文中使用時，術語“基礎雌性系(basicfemale)”指例如具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(參見以下第2節“基礎種子生產”)，其中所述歐洲油菜雌株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的，ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(rf等位基因)是純合的，iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。在雜種種子生產中預基礎和基礎雄性不育雌性系都適合作為雌性系。最后，當在本文中使用時，術語“保持系”指具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物，其基因型存在于在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子中(參見以下第2.1節，“保持系”)，其中所述歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的能育等位基因(ms等位基因)是純合的，ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(rf等位基因)是純合的，和iii.優勢雄性能育。本發明的雜交系統的特殊優點在于實際上每個可能獲得的油菜籽品系都包含功能性恢復系等位基因，并且能用作為雄性能育系以與(雄性不育)雌性系組合來產生雜種種子。在提供商業上可行的核雄性不育雜交系統中，一個最阻礙的困難是繁殖和增殖(雄性不育)雌株。在大多數系統中，僅起始于對于Ms等位基因是雜合的植物的繁殖是可行的。這就導致需要選取所有那些作為完全缺少Ms等位基因的自交結果的植物。因此，其對于提供條件性不育系統是有利的，其中能育性/不育性可基于在正常生長條件下不存在的以及其中能育性/不育性的分布幾乎完整的因素而被轉換開/關。迄今為止沒有描述這樣的在商業上可行的系統。現在，令人驚奇地發現某些包含于MSL雜種種子中的組分可被利用來獲得商業化gms系統。在工作期間，觀察到驚人的且意外的與Takagi系統的相似性。盡管本發明的雜交系統的遺傳學分離自雜交系(事實上，雄性不育植物最初選自市售NPZ雜交系“Panther”；參見實施例3)，該雜交系不能與Takagi種質明確連鎖(以及在事實上被描述屬于cms系統)，但是仍有某些表型指示(例如熱敏感性)來假定該遺傳學至少的相似性。基于業已開發的MSL材料標記(參見實施例)以及通過利用這些標記，分離了本發明系統的組分。然而，現在無法獲得Takagi原系的種子，因此不可能進行詳細的比較。即使Takagi種質中的遺傳學會等同于在此描述的某一種質，但是Takagi的原文以及Theis(1990)的相關的后繼工作都沒有提供對于本發明下文所述內容的啟示。如果不了解雜交系統的確切遺傳，那么將其簡化成商業上可行的方法就行不通。Theis描述了如下的Takagi系統如果對于隱性雄性不育(ms)基因是純合的植物在非純合的隱性形式中還包括了所謂的修飾基因(md)，則僅存在雄性不育植物。結果，Theis推定一種隱性雄性不育基因和一種顯性修飾基因。然而，本發明人的發現完全不同通過提供標記，使得在Takagi系統下的兩種基因的分離變得有可能，證實了顯性雄性不育(Ms)基因和隱性恢復系等位基因(rf等位基因)。能育性恢復通過存在于所有基于非Takagi的品系(事實上所有公眾可得到的歐洲油菜品系)中的顯性恢復系等位基因(rf等位基因)是有可能實現的。顯然，Theis沒有分離這兩種基因，也沒有提供對于這些基因是26純合的品系(如通過在其的雜交試驗中的分離方式所證實的)。如在本發明的上下文中所證實的，Theis錯誤命名為“ms等位基因”的該基因無法同樣地提供雄性不育表型。與此相反，其僅僅是恢復系等位基因(rf)的無活性形式。這種Theis命名為“修飾基因”的基因事實上是雄性不育基因。基于沒有標記，這樣的分離分析可能是非常麻煩的事實，這并不令人驚奇。其他與Ms等位基因連鎖的表型特性并不適合用于區分雜合個體和純合個體。因此，Theis提供了令人誤解的信息，其會阻礙本領域技術人員開發商業上可行的雜交系統。此外，隱性雄性不育基因與商用雜交系統中的許多困難相關。同樣從這一角度來看，Theis的教導偏離了Takagi系統的商業應用。此外，提供純合的雄性不育系仍無法產生商業上可行的系統。兩個重要的問題需要解決首先，純合雄性不育(Ms)系(在本發明的上下文中，稱為預基礎雌株)的繁殖問題，其使得所有其他迄今已知的核雄性不育系統在商業上都不可行。其次，提升至商業規模的問題。該純合Ms系的繁殖問題已為本發明通過提供條件性、熱誘導的再受精方法所解決。該方法使雄性不育預基礎系得以容易繁殖。盡管預基礎雌株能大體上直接用作雌性系用于雜種種子的生產，但是熱處理步驟并不適合于提供足夠數量的所述品系。因此，本發明的方法使用了重新設計的步驟，其中將條件性雄性不育(預基礎雌性)系與保持系雜交以再次提供雄性不育種子。該種子對于雄性不育基因是雜合的，但仍具有條件性雄性不育表型。只有通過提供既不具有功能性ms等位基因又不具有功能性恢復系等位基因的保持系該繁殖才得以可能。該重新設計的步驟是商業上可行的系統所需要的。有趣地以及作為本發明的具體創造性和有利特征，能育恢復系等位基因存在于所有非-Takagi系中，即實際上存在于所有可獲得的歐洲油菜品系中。這是有益的，因為這意味著實際上在雜種種子生產過程中所有品系都可用作雄性系，無需基因滲入恢復系等位基因。與例如Ogura系統相比，這是一個明顯的優點，并且驚人地相似于其遺傳學公眾未知的NPZMSL系統，盡管NPZMSL系統據說是一種細胞質雄性不育(cms)系統(Frauen，1999)。1.提供預基礎雌株和種子的方法本發明的第一個實施方案涉及一種生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性(高溫調節的)雄性不育歐洲油菜品系的種子(適合作為預基礎雌性系用于生產歐洲油菜雜種種子)的方法，所述方法包括步驟a)提供具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，該基因型存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子中，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或4148下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的。和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型，和b)將所述條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于高于35°C的溫度至少4小時，和27c)將步驟(b)中獲得的熱處理的條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于低于33°C的溫度，直至雄性能育花發育，和d)使具有在步驟(c)中獲得的所述雄性能育花的歐洲油菜植物自花傳粉，讓種子發育，并收獲種子，其中所收獲的種子特征在于它們是具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子。術語“基因型MsMsrfrf”指一種對于顯性Ms等位基因是純合的以及對于隱性保持系等位基因(也稱為功能失常的恢復系等位基因或rf等位基因)也是純合的植物。該基因型可存在于蕓苔屬植物，優選歐洲油菜植物的任何遺傳背景中，前提是不存在功能性恢復系等位基因(Rf等位基因)拷貝。在本發明的一個優選的實施方案中，在上述生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法的步驟(a)中提供的條件性雄性不育歐洲油菜植物進一步特征在于iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下之時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選35°C_43°C的溫度，更優選暴露于37°C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型；最優選暴露如下(例如在步驟b中)規定的優選的熱處理時間以及隨后在如下(例如在步驟c中)規定的環境溫度下生長。在本發明的一個優選的實施方案中，在上述生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法的步驟(b)中，條件性雄性不育歐洲油菜植物在開花之前和/或開花期間暴露于約35°C-約43°C，優選約36-約42°C，更優選約37°C-約41°C，還更優選約38-約40°C和最優選約39°C的溫度至少4小時，優選至少8或12小時，更優選至少24或36小時，還更優選至少48或96小時和最優選至少112小時。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，在上述生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法的步驟(c)中，將條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于低于30°C，優選低于28°C，更優選16-25°C，還更優選18_20°C的溫度，直至雄性能育花發育。對于Ms等位基因是純合的歐洲油菜植物代表了本發明的貢獻。因此，本發明的另一個實施方案涉及一種具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，其中所述條件性雄性不育歐洲()(femaleconditionallymalesterileBrassicanapusplant)ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。在本發明的上下文中，如上所述具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物也稱為“預基礎雌性系”或“預基礎雌株”。優選地，所述具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物可獲得自通過本發明的生產預基礎雌性種子的方法所生產的種子。本發明的另一個實施方案涉及種子，其生長成所述具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物、所述植物的部分，以及所述植物在雜種種子生產過程中的應用。優選地，所述植物的遺傳背景不是雜種，更優選其是一種歐洲油菜近交系。優選地，所述植物部分選自種子、小孢子、原生質體、細胞、胚珠、花粉、營養體部分、子葉、合子。在本發明的一個優選的實施方案中，具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，進一步特征如下iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下之時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選35°C_43°C的溫度，更優選暴露于37°C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長。在本發明的一個優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子用于獲得具有基因型MsMsrfrf的雄性不育歐洲油菜植物(即在此所披露的預基礎雌性系)。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，任何NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德國基于他們的MSL系統生產的種子可用于獲得具有基因型MsMsrfrf的雄性不育歐洲油菜植物。這樣的種子的實例包括但不限于品系j0ker、Pr0nt0、Panther、Artus>Baldur>Elan>Marcant>Mendel>Talent>Taurus>Tenno>Titan>Trabant>Zeppelin>Visby、Horus和Siesta的種子。其他可獲得具有基因型MsMsrfrf的雄性不育歐洲油菜植物的種子的實例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio、Elektra和Libretto的種子。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子被用于生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的種子的方法中，如用于以上所描述的方法中。本發明的預基礎雄性不育系優選具有不大于50ymol/克9%水分含量的風干種子(小于40iimol/克，更優選5-35iimol/克，最優選10-25ymol/克)的總芥子油苷含量。應當指出在預基礎雌性系繁殖中利用的熱處理(如在加熱室環境下)在某些情況下，增加芥子油苷含量至超過30umol/克的水平。同樣，由于在種子生產中的低結實率，因此從不育的基礎雌性系收獲的h雜種可能超過30ymolGSL。然而，這并不是品系遺傳的結果，而是因為環境脅迫之故，與此同時由本發明的雜種植物(F2種子)所產生的籽粒中芥子油苷水平處于商用水平(具有不超過25ymol/克9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量(優選1-22umol/克，更優選5-20umol/克，最優選8-17umol/克))。1.lMs等位基因，其相關的表型和標記關于在布達佩斯條約下進行的保藏物以及關于Ms、Rf、ms、rf等位基因或任何包含它們的組合的基因型，術語“可獲得”指這些基因或基因型可獲得自所述保藏材料，但也29可獲得自其他材料。獲得自其他材料的基因的序列可不同于所保藏的材料中基因的序列(“變體”)。因此，術語“Ms等位基因”包含可獲得自保藏材料的基因及其變體。因此，在本發明的一個優選的實施方案中，Ms等位基因是存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中Ms等位基因或其遺傳變體，與存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中的Ms等位基因相比，該遺傳變體賦予基本上相同的表型。在本發明的一個優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子用于獲得雄性不育等位基因(Ms等位基因)。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，雄性不育等位基因(Ms等位基因)還可獲得自NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德國基于他們的MSL系統生產的種子。這樣的種子的實例包括但不限于品系Joker、Pronto、Panther、Artus、Baldur、Elan、Marcant、Mendel、Talent、Taurus、Tenno、Titan、Trabant、Zeppelin、Visby、Horus和Siesta的種子。其他可獲得雄性不育等位基因(Ms等位基因)的種子的實例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio、Elektra和Libretto的種子。此外，雄性不育等位基因(Ms等位基因)還可獲得自Syngenta(或其附屬公司之一)生產的種子，例如但不限于品系NKPetrol、NKKaribik、NKSpeed、NKOctans、NKKick、NKTechnik、NKPicolo、NKCaravel的種子。當在本文中使用時，“基本上相同的表型”指賦予條件性(優選高溫調節的)核雄性不育表型的能力。優選地，如果獲得自其他來源，則所述其他來源的起源是Takagi(1970)提供的突變的品系。應當理解盡管Ms等位基因可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，但所述Ms等位基因可獲得自的其他來源仍可存在(以相同或不同的形式存在)。在本發明的上下文中提供的基因和基因型(無論獲得自保藏物還是其他來源)的相同和/或相似性都可通過與所述基因或基因型連鎖的下述一種或多種特性而得以證實。在本發明的上下文中利用的Ms等位基因的最主要特性和獨特性質在于能育性能通過實際上任何公眾可獲得的歐洲油菜品系(除由Takagi種質產生的品系之外)而得以恢復，但不為其種子在保藏編號NCIMB41481下保藏的保持系所恢復的這一事實。本發明所提供的保持系包含以純合子(rfrf)存在的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因)，而“常規的”歐洲油菜植物則包含以功能型(RfRf)存在的恢復系。除來源于Takagi種質的種質之外，尚不知道不包含至少一個Rf等位基因功能拷貝的品系。結果，發現在本發明之日實際上所有可獲得的油菜籽品系都是恢復系。推測在Takagi種質中出現雙突變的兩種基因Ms和rf的存在對于本發明所披露的功能性雜交系統是必不可少的。這還意味著通過使用保藏材料，Ms或rf等位基因的存在可容易地確定。基于Ms等位基因的雄性不育系可通過與其種子在保藏編號NCIMB41481下保藏的保持系雜交得以“保持”其雄性不育表型，但還可通過與任何恢復系雜交而得以恢復能育性(參見以下實施例)。因此，Ms等位基因與雄性不育表型連鎖，所述雄性不育表型可為任何包含至少一個顯性Rf等位基因的植物當在本文中提及時，所謂的“恢復系植物”)恢復(至少在后代的一部分中)能育性，但不為來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子(保持系)的植物恢復能育性。因此，Ms等位基因優選具有賦予條件性核雄性不育表型的特性，其a)通過暴露于高于35°C的溫度，暫時恢復能育性，b)在至少一部分的&植物中恢復能育性，所述&植物獲得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物與任何包含至少一個顯性Rf等位基因的歐洲油菜植物的雜交，和c)在&植物中得以保持，所述&植物獲得自具有所述Ms等位基因賦予的條件性雄性不育表型的植物與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的雄性能育植物的雜交。在本發明的一個優選的實施方案中，Ms等位基因優選具有賦予條件性核雄性不育表型的特征，其a)通過暴露于高于35°C的溫度，優選暴露于35°C_43°C的溫度，更優選暴露于37°C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C，暫時恢復能育性；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長，b)在至少一部分的&植物中恢復能育性，所述&植物獲得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物與任何包含至少一個顯性Rf等位基因的歐洲油菜植物的雜交，或在所有&植物中恢復能育性，所述&植物獲得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物與對于Rf等位基因是純合的歐洲油菜植物，即具有基因型RfRf的歐洲油菜植物的雜交。和c)在h植物中得以保持，所述&植物獲得自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育植物(例如一種具有所述Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物)與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的植物的雜交。“能育性的時序恢復”指僅有在高溫處理過程中誘導的花發育成雄性能育花，而在此之前或之后誘導的花則只發育成雄性不育花，即使在同一植物上發育。因此，高溫處理是暫時的，同樣能育性恢復也是暫時的并且與高溫處理的持續時間相關。因此，通過將雄性不育植物與如下植物雜交a)任何包含至少一個Rf等位基因，優選對于Rf等位基因(恢復系植物)是純合的雄性能育、自交的歐洲油菜植物，和b)來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的植物，可清楚地鑒定Ms等位基因的存在與否。“恢復系植物”或“恢復系”指任何包含至少一個Rf等位基因的能育的、自交的歐洲油菜植物，優選對Rf等位基因是純合的。恢復系植物包括所有被商業化作為種子用于栽培的(開放傳粉的，非雜種)歐洲油菜能育近交系，優選在本發明的優先權日之前。本發明人沒有發現例外。合適的恢復系還包括在2006年12月0E⑶品種列表上的那些恢復系(確認合格的0ECD品種列表-2006/2007；2006年12月；//www.oecd.org/dataoecd/1/44/33999447.PDF；//www.oecd.org/document/14/0,2340,en_2649_33909_2485070_l_l_l_l,00.html)，優選被商業化作為種子用于栽培(用于油料生產)的非雜交系，更優選在所述0ECD列表上那些沒有標記為“d”(只要它們代表雜交親本系，就是近交系)或“b”(雜種)的品種。雖然該特性是只有在下文中提供的本發明的雜交系統才有的，但仍有其他與Ms等位基因連鎖或與之相關的特性。在本發明的一個優選的實施方案中，條件性雄性不育表型和/或Ms等位基因與選自如下的一種或多種特性連鎖和/或與之相關I.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的芽敗育表型，II.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的白色條紋或白色斑點花瓣表型，和III.在包含至少一個拷貝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，存在Ms等位基因特異性標記。在本發明的另一個優選的實施方案中，條件性雄性不育表型和/或Ms等位基因與選自由如下組成的組(“MS基因標記組”)的一種或多種標記(Ms等位基因標記)連鎖和/或與之相關I.選自由如下組成的NR1116標記區中多態性(突變)組的標記a)具有位于相應于SEQIDNO:3中第85位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO:3中第87位的位置處的G的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO3中第139位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO記，e)具有位于相應于SEQIDNO記，f)具有位于相應于SEQIDNO記，g)具有位于相應于SEQIDNO記，h)具有位于相應于SEQIDNO記，i)具有位于相應于SEQIDNO記，j)具有位于相應于SEQIDNO記，k)在位于相應于SEQIDNO:3中第221位的位置處的5'-TTGGTGAACAATC-3‘缺失突變，1)在位于相應于SEQIDNO:3中第328-330位的位置處的5'-GAA-3'插入突變，II.選自由如下組成的NR2525標記區中多態性組(突變)的標記a)具有位于相應于SEQIDNO6中第60位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO6中第92位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO6中第105位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO6中第158位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO6中第431位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，3中第214位的位置處的C的單核苷酸多態性標3中第218位的位置處的G的單核苷酸多態性標3中第277位的位置處的G的單核苷酸多態性標3中第286位的位置處的A的單核苷酸多態性標3中第312位的位置處的T的單核苷酸多態性標3中第319位的位置處的T的單核苷酸多態性標3中第359位的位置處的C的單核苷酸多態性標f)在位于相應于SEQIDNO6中第82位的位置處的單核苷酸缺失突變，g)在位于相應于SEQIDNO:6中第17-25位的位置處的5‘-TGAGCAAAA-3‘缺失突變，III.選自由如下組成的SNP標記組的標記a)在使用包含SEQIDNO:12所示的核苷酸序列(不育等位基因特異性探針HiNK6701)的SNP-探針(SNP-探針1)的SNP檢測(優選基于TaqMan的SNP檢測)中，陽性信號，和使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列(能育等位基因特異性探針HiNK6700)的SNP-探針(SNP-探針2)，陰性信號，b)在使用包含SEQIDNO:17所示的核苷酸序列(不育等位基因特異性探針HiNK6775)的SNP-探針(SNP-探針3)的SNP檢測(優選基于TaqMan的SNP檢測)中，陽性信號，和使用包含SEQIDNO:18所示的核苷酸序列(能育等位基因特異性探針HiNK6776)的SNP-探針(SNP-探針4)，陰性信號，IV.選自由如下組成的SSR標記組的標記a)由使用SEQIDNOs:1和2所示的引物的PCR反應產生的具有96.7(+/_1.0)bp的表觀分子量的PCR片段，b)由使用SEQIDNOs4和5所示的引物的PCR反應產生的具有192.8(+/_0.3)bp的表觀分子量的PCR片段，和V.選自與SEQIDNOs:3、6、11和18所示的序列至少之一連鎖的標記組的標記，其中一種或多種標記(Ms等位基因標記)還包括選自如下序列的分離的核苷酸序列，所述序列I.與在上述I.-V.中定義的標記序列具有至少80%的序列同一性，或II.在嚴格條件下與在上述I.-V.中定義的標記序列雜交，或III.包含在上述I.-V.中定義的標記序列的至少25個連續的核苷酸。在一個優選的實施方案中，條件性雄性不育表型和/或Ms等位基因與選自NR1116標記區中多態性(突變)組的標記連鎖和/或與之相關，所述NR1116標記區由至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個組1的突變組成，更優選由至少在相應于5￡0IDNO:3中第214位(T/C)和第218位(T/G)的位置處的突變組成。優選地，該NR1116標記區存在至少1、2、3、4、5、6或7個組II的突變，更優選存在至少在相應于SEQIDNO:6中第158位的位置處的突變。此外，與條件性雄性不育表型和/或Ms等位基因連鎖和/或與之相關的上述組V的一種或多種標記可與SEQIDNOs:3、6、11和18所示的1、2、3條或所有的序列連鎖。如上所述的標記可用于本發明的多個其他方面中。然而，本發明的方面不限于使用在本申請中披露的標記。進一步強調的是這些方面還可使用沒有在本文中明確披露的標記或仍待鑒定的標記。術語“SNP”或“單核苷酸多態性”指當在物種成員之間或個體中配對染色體或等位基因之間，優選在基因組(或其他共有序列)中單核苷酸(優選A、T、C或G)不同時，發生的核苷酸(優選DNA)序列變異。例如，來自不同個體的兩條測序的DNA片段，AAGCCTA對AAGCTTA，包含了單個核苷酸的差異。在該情況下，可以說存在兩個等位基因C和T。單核苷酸多態性可落入基因的編碼序列、基因的非編碼區或基因間的基因間區中。由于遺傳密33碼的簡并性，編碼序列中的SNPs可未必改變所產生的蛋白的氨基酸序列。其中兩種類型都產生相同的多肽虛序列的SNP稱為“同義的”(有時稱為沉默突變)，如果產生了不同的多肽序列，則它們是非同義的。沒有位于蛋白編碼區中的SNPs仍可具有基因剪接、轉錄因子結合或非編碼RNA序列的結果。然而，像這樣的SNP可能根本不具有功能相關性，并且可能僅僅與某一表型和/或基因型“連鎖”或相關(即與所述基因型和/或表型具有一定可能性的分離)。術語“SNP-探針”指適合于檢測SNP的探針，更優選適合于自動化檢測的標記的探針(如下所述)。短語“相應于SEQIDNO:Y中第X位的位置”指SEQIDNO:Y所示的序列是共有序列。在具體植物(其中SNP存在與否有待檢測)中相應的序列(在大多數情況下)將不同于所述共有序列。然而，在一個優選的實施方案中，可確定在所述共有序列與所述具體植物中的所述序列的比對中的序列同一性。序列比對是一種排列核苷酸(例如DNA)的一級序列以鑒定可能是序列之間功能上、結構上或進化關系上結果的相似性區域的方法。比對的核苷酸殘基序列Aligned通常在矩陣中排成行。空位可插入殘基之間，使得具有同一或相似特性的殘基能在連續的欄中進行比對。可通過例如ClustalW或BLAST程序產生序列比對。如果在一次比對中兩條序列享有共同的祖先，則錯配可解釋為點突變以及空位可解釋為indels(即插入或缺失突變)，即由于它們彼此趨異，從而在漫長的時間中導入到一個或兩個譜系中的突變。因此，作為缺失和突變的結果，所述具體植物中的序列與共有序列的長度可以不同。結果，特異性SNP的絕對位置(如由序列起點所測定的)也可以不同。然而，當以適當的方式進行比對時，那些位置仍然彼此匹配。短語“相應于SEQIDN0:Y中第X位的位置”指這樣的事實，并因此意味著盡管在獲得自具體植物的序列中絕對位置可以不同，但是在與共有序列(“Y”)的比對中，其仍會匹配所示位置(“X”)。術語“SNP檢測”指任何一種本領域已知適合于檢測或顯現單核苷酸多態性的方法。這些方法可例如基于雜交。通過將互補的DNA探針與SNP位點雜交，業已開發了幾種調查SNPs的應用(Rapley&Harbron，2004)。這樣的方法包括動力等位特異性雜交(DASH)。其他用于SNP檢測的方法包括使用利用了包含熒光團和熒光猝滅劑的特異性工程化的單鏈寡核苷酸探針的分子信標(Abravaya等，2003)。SNPs還可通過包含排列在小芯片上的成百上千條探針的高密度寡核苷酸SNP陣列進行檢測，使得大量的SNPs能同時得到調查(Rapley&Harbron,2004)。此外，各種酶包括DNA連接酶、DNA聚合酶和核酸酶已用于產生高保真SNP基因分型方法。另一種方法是基于限制性片段長度多態性(RFLP)。業已基于PCR開發了多種SNP檢測方法。這樣的方法包括四引物ARMS-PCR，其在一次PCR反應中使用兩對引物來擴增兩種等位基因。Flap核酸內切酶(FEN)是一種催化結構特異性切割的核酸內切酶。該切割對錯配高度敏感并能用于調查SNPs，具有高度特異性(Olivier，2005)。在基礎侵入者測定(basicInvaderassay)中，被叫做裂解酶的FEN與兩條特異性寡核苷酸探針結合，其與靶DNA—起可形成為裂解酶所識別的三層型結構(Olivier，2005)。引物延伸是一種兩步過程，第一步包括探針與緊接SNP核苷酸上游堿基的雜交，然后是‘微測序(mini-sequencing)’反應，其中DNA聚合酶通過添加與該SNP核苷酸互補的堿基延伸雜交的引物。檢測該摻入的堿基并確定SNP等位基因(SyVanen，2001；Rapley&Harbron,2004)。Illumina公司的Infinium檢測是一種基于引物延伸法的全基因組基因分型流水線的實例。在Infinium檢測中，超過100，000條SNPs可被基因分型。該檢34測在引物延伸反應中使用了半抗原標記的核苷酸(Gimderson等，2006)。寡核苷酸連接酶檢測利用了DNA連接酶，其催化DNA片段的3'末端與直接相鄰的DNA片段的5‘末端的連接。通過雜交兩條直接跨越SNP多態位點的探針，該機制可用于調查SNP(Rapley&Harbron,2004)。在本發明的上下文中，最優選的是使用TaqMan_檢測來檢測SNPs。術語“TaqMan檢測”通常指一種使用雙重標記的熒光團探針(TaqMan探針；Heid等，1996)的定量實時PCR法。在PCR指數期過程中，而非在常規PCR終點，TaqMan實時PCR通過熒光團測量產物積累。該產物的指數式增加則被用于確定閾值循環，CT，即檢測到熒光明顯指數式增加時PCR循環的數目，并且其與存在于反應中的DNA模板的拷貝數直接相關。不同于常規PCR，在TaqMan實時PCR中，將探針(即與處于DNA模板中并位于兩條引物之間的20-60個核苷酸的區段互補的單鏈寡核苷酸)添加到反應中。熒光報道分子或熒光團(例如6-羧基熒光素，簡稱FAM，或四氯熒光素，簡稱TET)以及猝滅劑(例如四甲基若丹明，簡稱TAMRA，或二氫環吡咯并吲哚三肽“小溝結合物”，簡稱MGB)被分別共價連接于探針的5'和3'末端(Kutyavin，2000)。連接在探針上的熒光團和猝滅劑之間密切接近，從而抑制了來自熒光團的熒光。在PCR過程中，當DNA合成開始時，Taq聚合酶的5'至3'核酸外切酶活性降解了一定比例的已退火到模板上的探針。探針降解釋放了來自其的熒光團并破壞了與猝滅劑的密切相鄰，從而減輕了猝滅效應，并產生了熒光團的熒光。因此，在實時PCR熱循環儀檢測到的熒光與在PCR中釋放的熒光團和存在的DNA模板的量成正比。更具體地說，對于SNP檢測，在Taqman檢測中使用TaqDNA聚合酶的5’-核酸酶活性來進行SNP基因分型。Taqman檢測與PCR反應同時進行，當PCR反應進行時可實時讀出結果(MCGuigan&RalSton，2002)。該檢測需要會擴增包括SNP多態位點的區域的正向和反向PCR引物。使用結合有一種或兩種與該SNP多態位點雜交的等位基因特異性探針(優選的SNP-探針，例如本發明的SNP-探針1、2、3或4)的FRET，實現了等位基因區分。所述探針(例如本發明的SNP-探針1、2、3或4)優選具有與它們的核酸核心序列的5’末端相連的熒光團以及與它們的3’末端相連的猝滅劑分子。當探針是完整的時候，猝滅劑會留下來接近熒光團，除去熒光團的信號。在PCR擴增步驟過程中，如果等位基因特異性探針與SNP等位基因完全互補，則其會結合靶DNA鏈，然后當其由PCR引物延伸DNA時為Taq聚合酶的5’-核酸酶活性所降解。探針降解導致熒光團與猝滅劑分子分離，從而產生可檢測的信號。如果等位基因特異性探針沒有完全互補，則其會具有較低的解鏈溫度并且不會有效結合。這就阻止了核酸酶作用于探針(MCGuigan&RalStOn，2002)。該Taqman檢測是基于PCR的，并且對設備要求相對簡單。該Taqman檢測可通過在一次反應中組合多達7個SNPs的檢測從而實現多重檢測(Syvanen，2001)。還參見Affymetrix(2007)Genome-WideHumanSNPArray5.0.[在線]網址//www.affymetrix.com/products/arrays/specific/genome_wide/genome_wide_snp_5.affx(檢索日期2007年2月27日)。用于基于TaqMan的SNP檢測的試劑和詳細實驗方案是可獲得且得以描述的(US5，876，930；Livak等，1995；Pre-DevelopedTaqManAssayReagentsAllelicDiscriminationProtocol；件號4312214Rev.C5/2005；AppliedBiosystems)。另外的SNP檢測法對于本領域技術人員是公知的，并且是基于DNA的物理特性、單鏈構象多態性的，使用了溫度梯度凝膠電泳或變性高效液相色譜、整個擴增子的高分辨率解鏈或測序。術語“PCR片段”指通過利用一條或多條引物、DNA聚合酶(優選耐熱DNA聚合酶)和一次或多次擴增循環，獲得自靶DNA(例如基因組DNA)擴增的核酸片段(優選DNA片段)。聚合酶鏈反應(PCR)是一種經酶促復制用于指數式擴增DNA的生化和分子生物學技術。由于PCR是一種體外技術，因此其能得以進行而無針對DNA形式的限制，并且可對其進行廣泛修改以執行大陣列的基因操作。術語“表觀分子量”指如與分子量標準物比較所測量得到的分子(例如DNA片段)的分子量。例如，該分子量可通過凝膠(例如瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠)電泳(以平板凝膠、毛細管或本領域已知的其他手段)得到測量。優選地，通過使用DNA測序儀和熒光標記的探針作為標準物進行分子量測定。更具體地說，當在本發明的上下文中使用時，表觀分子量指通過使用3700DNA分析儀或等效設備，在與GeneScan500R0X大小標準物(R0X染料標記的大小標準物，用于片段分析數據的可重現大小分級)相比下測定的分子量。該GeneScan500R0X大小標準物被設計用來分級35-500個核苷酸范圍內的DNA片段，并提供35、50、75、100、139、150、160、200、250、300、340、350、400、450、490和500個核苷酸的16條單鏈標記片段。由這些短片段產生的大小曲線使得GeneScan500R0X大小標準物能理想地用于多種片段分析應用中，例如微衛星、片段長度多態性和相對熒光定量。每條DNA片段都用R0X熒光團標記，當在變性條件下運轉時其產生單峰。在另一個優選的實施方案中，Ms等位基因、ms等位基因和/或雄性不育表型進一步特征在于定位于歐洲油菜染色體N7上，優選處于標記序列NRl116(例如SEQIDNO21)和NR2525(例如SEQIDNO22)之間，更優選與NRl116具有2.8cM的距離以及與NR2525具有6.OcM的距離，還更優選處于SNP標記SR0002A和SR0003B之間，最優選與SR0002A具有大約2.8cM的距離以及與SR0003B具有大約3.3cM的距離。術語“標記序列NR1116”指如SEQIDNO21所示序列及其變體，該變體i)與SEQIDNO21所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與SEQIDNO21所示序列雜交，或iii)包含SEQIDNO21所示序列的至少25個連續的核苷酸。術語“標記序列NR2525”指如SEQIDNO22所示序列及其變體，該變體i)與SEQIDNO22所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與SEQIDNO22所示序列雜交，或iii)包含SEQIDNO22所示序列的至少25個連續的核苷酸。術語“SNP標記SR0002A”指包含通過SEQIDNOs8和10所示的引物對擴增的SNP突變的片段，其優選在使用包含SEQIDNO:12所示的核苷酸序列(不育等位基因特異性探針HiNK6701)的SNP-探針1的SNP檢測(優選基于TaqMan的SNP檢測)中，對于能育等位基因，產生陰性信號，以及優選在使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列(能育等位基因特異性探針HiNK6700)的SNP-探針2中，產生陽性信號(以及對于不育等位基因則結果是相反的)。術語“SNP標記SR0003B”指包含通過SEQIDNOs15和16所示的引物對擴增的SNP突變的片段，其對于能育等位基因，優選在使用包含SEQIDNO17所示的核苷酸序列(不育等位基因特異性探針HiNK6775)的SNP-探針3的SNP檢測(優選基于TaqMan的SNP檢測)中產生陰性信號，以及優選使用包含SEQIDNO:18所示的核苷酸序列(能育等位基因特異性探針HiNK6776)的SNP-探針3，產生陰性信號(以及對于不育等位基因則是相反的)。因此，以純合子存在的雄性不育基因(Ms等位基因)與雄性不育表型連鎖，其-可通過與任何包含至少一個顯性功能性Rf等位基因(恢復系等位基因)的植物雜交恢復能育性，和-能通過與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的植物(保持系)雜交得以保持，其中所述Ms等位基因選自a)可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的Ms等位基因，和b)具有相同的表型特性的其變體(即與雄性不育有關)。更優選，所述Ms等位基因是處于在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中的Ms等位基因，其與一種或多種選自如下的特性連鎖和/或與之相關I.在具有Ms等位基因賦予的條件性雄性不育表型的植物中的芽敗育表型，II.在包含至少一個拷貝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，一種或多種選自MS基因標記組(如上定義的)的標記，III.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的白色條紋或白色斑點花瓣表型，或所述Ms等位基因的變體，其顯示具有相同恢復特性的條件性雄性不育表型。因此，在一個優選的實施方案中，對于與雄性不育表型連鎖的雄性不育基因(Ms等位基因)具有基因型MsMsrfrf的雄性不育歐洲油菜植物是純合的，其-通過與任何包含至少一種顯性功能性Rf等位基因的植物(恢復系)雜交可恢復能育性，和-其可通過與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的植物(保持系)雜交得以保持，其中所述的Ms等位基因選自a)可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的Ms等位基因，和b)具有相同的表型特性的其變體(即雄性不育)。當在包含Ms基因(即與Rf等位基因存在與否無關)的雄性能育和雄性不育植物中都存在與Ms等位基因標記(如上定義的特性II.)的連鎖時，僅在雄性不育表型(即在Rf等位基因不存在的情況下)中可觀察到芽敗育和白色條紋或白色斑點花瓣的表型特性(分別是特性I.和III.)。因此，該觀察結果能容易地區分雄性不育和雄性能育植物。應當理解，盡管在保藏的種子中Ms等位基因與Ms等位基因標記(如上定義的特性II.)和/或芽敗育和/或白色條紋或白色斑點花瓣的表型特性(分別是如上定義的特性I.和III.)連鎖，但是在育種計劃過程中，可能存在這樣一種情況，在該情況下所述連鎖可能丟失或被有意或無意破壞。破壞所述連鎖的可能性取決于標記與Ms等位基因的距離。本領域技術人員熟知如何破壞標記和所連鎖的基因之間的連鎖。然而，還是有可能通過額外的標記分析、表型分析或雜交實驗來證實在這樣的具有保藏的種子中的Ms等位基因的改性品系中Ms等位基因的一致性。對于白色條紋或白色斑點花瓣的表型(特性III.)，迄今為止尚不清楚其是否直接由Ms等位基因或與之緊密連鎖的基因所致。存在某些該表型無法觀察到或不能清楚表達的品系。然而，還知道這樣的表型可為其他表型所遮蔽，例如在花瓣中具有高水平類胡蘿卜素表達的表型。迄今為止，沒有發現雄性不育表型和芽敗育表型(特性I.)的分離。結果，很可能該表型或是與Ms等位基因緊密連鎖或就由之所引起。當涉及Ms或ms等位基因，使用術語“變體”時，指優選不影響Ms等位基因的功能性但可影響其序列的遺傳變異。在原系(例如Takagi原系)繁殖過程中，可能會偶然發現存在于Ms等位基因的基因序列中但不影響其功能的某些序列多態性或體細胞突變。這樣的突變可位于基因的功能非相關區域例如內含子中。優選地，與可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的Ms等位基因或可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的ms等位基因相比，Ms等位基因和/或ms等位基因變體的基因同一性大于90%，優選大于95%，更優選大于98%。或者，變體優選在嚴格條件(優選中等嚴格條件，更優選高嚴格條件)下仍與可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的Ms等位基因雜交。由于Ms等位基因是一種ms等位基因的功能失常的拷貝(其可能是一種在歐洲油菜發育中與花粉或花藥有關的功能基因)無法被排除(事實上有可能)，因此關于Ms等位基因，術語變體還包括ms等位基因(或如上定義的其變體)的其他功能失常型，只要那些變體能通過在保藏編號NCIMB41481下保藏的保持系保持不育性即可。這樣的變體通過例如不同的突變、缺失、截短等可不同于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的Ms等位基因。當涉及Ms或ms等位基因，使用術語“變體”時，還指在與上述Ms或ms等位基因相同的區中定位的Ms或ms等位基因的變體，即該變體也被定位在歐洲油菜染色體N7上，優選處于標記序列NR1116(例如SEQIDNO:21)和NR2525(例如SEQIDNO:22)之間，更優選分別與NRl116具有2.ScM的距離以及與NR2525具有6.OcM的距離，還更優選處于SNP標記SR0002A和SR20003B之間，最優選分別與SR0002A具有大約2.8cM的距離以及與SR0003B具有3.3cM的距離。該類型的變體還優選在嚴格條件(優選中等嚴格條件，更優選高嚴格條件)下與可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的Ms等位基因雜交。優選地，Ms或ms等位基因的變體顯示與對以上Ms等位基因所描述的具有相同的恢復特性的條件性雄性不育表型。1.2rf等位基因及其表型術語“保持系等位基因”、“功能失常的恢復系等位基因”或“rf等位基因”指不存在功能性恢復系等位基因(rf等位基因)，以及更具體地說，可獲得自在保藏編號NCIMB41480和/或41481下保藏的歐洲油菜種子的rf等位基因及其變體。該rf等位基因優選與如下表型特性連鎖并以如下表型特性為特征a)不能恢復Ms等位基因賦予的雄性不育表型的能育性，和b)能保持Ms等位基因賦予的雄性不育表型。應當理解盡管保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因或rf)可獲得自在保藏編號NCIMB41480和/或41481下保藏的歐洲油菜種子，但可存在其他可獲得所述rf等位基因的來源。在本發明的一個優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子或在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子用于獲得保持系等位基因(rf等位基因)。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，保持系等位基因(rf等位基因)還可獲得自NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德國基于他們的MSL系統生產的種子。這樣的種子的實例包括但不限于品系Joker、Pronto、Panther、Artus,Baldur>Elan>Marcant>Mende1>Talent>Taurus>Tenno>Titan>Trabant、Zeppelin、Visby、Horus和Siesta的種子。其他可獲得保持系等位基因(rf等位基因)的種子的實例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio、Elektra和Libretto的種子。此外，保持系等位基因(rf等位基因)還可獲得自Syngenta(或其附屬公司之一)生產的種子，例如，獲得自品系NKPetrol、NKKaribik、NKSpeecUNKOctans、NKKick、NKTechnik、NKPicolo、NKCaravel的種子。保持系等位基因(rf等位基因)與雄性不育保持表型連鎖，其以純合子存在使得由Ms所致的雄性不育表型得以表達。所述雄性不育保持表型可通過至少一種功能性顯性Rf等位基而你裝。所述Rf等位基因可獲得自任何基于非Takagi的種質。除來源于Takagi種質的種質之外，尚不知道不包含至少一個功能性Rf等位基因拷貝的品系。結果，實際上發現在本發明之日可獲得的所有油菜籽品系都是恢復系。在本發明的另一個優選的實施方案中，rf等位基因、Rf等位基因和/或雄性不育保持表型進一步的特征在于定位于歐洲油菜染色體N19上，優選在標記序列NR2219(例如SEQIDNO23)和NR3454(例如SEQIDNO:26)之間，更優選與NR2219具有10.2cM以及與NR3454具有26.5cM的距離，最優選在標記序列NR3454(例如SEQIDNO26)禾口PUT-161a-Brassica_napus-59218(例如SEQIDNO31)之間，更優選與NR3454具有26.5cM以及與PUT-161a-Brassicanapus-59218具有4.IcM的距離。當在本文中使用時，術語“標記序列NR2219”指如SEQIDNO23所示序列及其變體，該變體i)與SEQIDNO23所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與SEQIDNO23所示序列雜交，或iii)包含SEQIDNO23所示序列的至少25個連續的核苷酸。當在本文中使用時，術語“標記序列NR3454”指如SEQIDNO26所示序列及其變體，該變體i)與SEQIDNO26所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與SEQIDNO26所示序列雜交，或iii)包含SEQIDNO26所示序列的至少25個連續的核苷酸。當在本文中使用時，術語“標記序列PUT-161a_Brassicanapus-59218”指如SEQIDNO31所示序列及其變體，該變體i)與SEQIDNO31所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與SEQIDNO31所示序列雜交，或iii)包含SEQIDNO31所示序列的至少25個連續的核苷酸。因此，保持系等位基因(rf等位基因)以純合子與雄性不育保持表型連鎖，該保持系等位基因a)不能恢復包含至少一個Ms等位基因的植物的能育性，b)能保持包含至少一個Ms等位基因的植物的不育性，其中所述rf等位基因選自a)可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的rf等位基因，和b)與恢復和保持Ms等位基因賦予的雄性不育有關的具有相同的表型特性的其變體。在本發明的另一個優選的實施方案中，條件性雄性不育保持表型和/或rf等位基因與一種或多種標記連鎖和/或與之相關，所述標記選自由SSR標記組成的組(“rf等位基因標記組”)，該SSR標記由具有240.8(+/-0.4)bp的表觀分子量的PCR片段組成，該PCR片段來自使用具有如SEQIDNOs19和20所示序列的引物的PCR反應。因此，在一個優選的實施方案中，對以純合子與雄性不育保持表型連鎖的保持系等位基因(rf等位基因)，具有基因型MsMsrfrf或msmsrfrf的歐洲油菜植物是純合的，該保持系等位基因-不能恢復包含至少一個Ms等位基因的植物的能育性，-能保持包含至少一個Ms等位基因的植物的不育性，-與一種或多種選自rf等位基因標記組(如上定義的)的標記連鎖，其中所述rf等位基因選自a)可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的rf等位基因，和b)具有相同的表型特性的其變體。在本發明的上下文中，具有基因型msmsrfrf的歐洲油菜植物稱為“保持系”或“保持系植物”。當涉及rf或Rf等位基因使用時，術語“變體”指優選不影響rf等位基因功能性但可影響其序列的遺傳變異。在原系(例如Takagi原系)繁殖過程中，可能會偶然發現存在于rf等位基因的基因序列中但不影響其功能的某些序列多態性或體細胞突變。這樣的突變可位于基因的功能非相關區域例如內含子中。優選地，與可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的rf等位基因或可獲得自任何恢復系的Rf等位基因相比，rf等位基因和/或Rf等位基因變體的基因同一性大于90%，優選大于95%，更優選大于98%。或者，變體優選在嚴格條件(優選中等嚴格條件，更優選高嚴格條件)下仍與可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的rf等位基因雜交。由于rf等位基因是一種Rf等位基因(其可代表一種涉及歐洲油菜中花粉或花藥發育的功能基因)的功能失常型無法被排除(事實上其可能)，因此關于rf等位基因，術語變體還包括Rf等位基因(或如上定義的其變體)的其他功能失常型，只要那些變體能保持在保藏編號NCIMB41480下保藏的雄性不育Ms系的不育性即可。這樣的變異可不同于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的種子的rf等位基因，例如通過不同的突變、缺失、截短等。已如上所述，當涉及rf或Rf等位基因使用時，術語“變體”還指在與上述rf或Rf等位基因相同的區中定位的rf或Rf等位基因的變體，即該變體還定位于歐洲油菜染色體N19上，優選處于標記序列NR2219(例如SEQIDNO23)和NR3454(例如SEQIDNO26)之間，更優選與NR2219具有10.2cM的距離以及與NR3454具有26.5cM的距離，最優選處于標記序列NR3454(例如SEQIDNO26)和PUT-161a-Brassica_napus_59218(例如SEQIDNO:31)之間，更優選與NR3454具有26.5cM的距離以及與PUT-161a-Brassica_napus_59218具有4.IcM的距離。該類型的變體還優選在嚴格條件(優選中等嚴格條件，更優選高嚴格條件)下與可獲得自保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的種子的rf等位基因雜交。優選地，該rf或Rf等位基因的變體顯示與對以上rf或Rf等位基因所描述的相同的表型特性。1.3優選的組合更進一步地，在一個特別優選的實施方案中，本發明涉及一種生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系(適合作為雄性不育預基礎雌性系用于生產歐洲油菜雜種種子)的種子的方法，所述方法包括步驟a)提供具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜植物是i.對于與雄性不育表型連鎖的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，所述雄性不育表型可通過與任何包含至少一種顯性功能性Rf等位基因(恢復系基因)的植物雜交而得以恢復能育性，以及其可通過與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的植物(保持系)雜交而得以保持，和其中所述Ms等位基因選自I)可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的Ms等位基因，和II)具有基本上相同的表型特性(即賦予核條件性雄性不育表型)的其變體，和其中所述Ms等位基因優選是在在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中與一種或多種選自如下的特性連鎖和/或與之相關的Ms等位基因I.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的芽敗育表型，II.在包含至少一個拷貝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，存在一種或多種選自MS基因標記組(如上定義的)的標記，III.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的白色條紋或白色斑點花瓣表型，或其變體，其賦予核條件性雄性不育表型(通過保持系(如上定義的)可保持的，但通過任何包含Rf等位基因的植物可恢復能育性的；并因此具有基本相同的表型特性)，ii.對于保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，其中以純合子存在的所述保持系等位基因(rf等位基因)與雄性不育保持表型連鎖，該雄性哺育保持表型無法恢復包含至少一種Ms等位基因的植物的能育性，以及能保持包含至少一種Ms等位基因的植物的不育性，和其中所述rf等位基因選自I)可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的rf等位基因，和II)具有相同的表型特性的其變體，以及其中所述rf等位基因優選為處于在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中的rf等位基因，該等位基因與一種或多種選自rf等位基因標記組(如上定義的)的標記連鎖和/或與之相關，或所述rf等位基因的變體，其具有基本上相同的表型特性(即保持Ms基因賦予的核條件性雄性不育表型)，iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度(優選暴露于低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下)之時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度(優選35°C-43°C，更優選37°C-40°C，最優選在約39°C；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長)時，恢復優勢雄性能育表型，b)在開花之前和/或開花期間將所述條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于約35-430C的溫度(優選約36°C-約42°C，更優選約37°C-約41°C，還更優選約38°C-約400C，最優選約39°C)至少4小時(優選至少8或12小時，更優選至少24或36小時，還更優選至少48或96小時，最優選至少112小時)，和c)將步驟b)中獲得的熱處理的條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于低于33°C的溫度(優選低于30°C，更優選低于28°C，還更優選14°C-25°C，最優選18°C-20°C)，直至雄性能育花發育，和d)使具有在步驟(C)中獲得的所述雄性能育花的歐洲油菜植物自花傳粉，讓種子發育，并收獲所述具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子。對于Ms等位基因是純合的歐洲油菜植物代表了本發明的貢獻。因此，本發明的另一個實施方案涉及具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜雌株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)或其具有相同的表型特性(即它們賦予核條件性雄性不育表型(其是通過保持系(如上定義的)可保持的，但通過任何包含Rf等位基因的植物可恢復能育性))的變體是純合的，其中所述雄性不育基因(Ms等位基因)或其變體與雄性不育表型連鎖，通過與任何包含至少一種功能性Rf等位基因(恢復系等位基因)的植物雜交，其能恢復能育性，和通過與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子(保持系)的植物雜交其能被保持，以及其中所述Ms等位基因優選與選自如下的一種或多種特性連鎖和/或與之相關I.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的芽敗育表型，II.在包含至少一個拷貝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，一種或多種選自MS基因標記組(如上定義的)的標記，和III.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的白色條紋或白色斑點花瓣表型，ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)或其具有相同表型特性(即它們保持Ms基因賦予的核條件性雄性不育表型)的變體是純合的，其中以純合子存在的所述保持系等位基因(rf等位基因)或其變體與不能恢復包含至少一個Ms等位基因的植物能育性以及其能保持包含至少一個Ms等位基因的植物的不育性的雄性不育保持表型連鎖，iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。在本發明的一個優選的實施方案中，具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，進一步具有如下特征I.當在開花之前和/或開花期間(參見上述iii.)暴露于優選低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下之時，優勢雄性不育，和II.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選35°C_43°C的溫度，更優選暴露于370C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長。在本發明的上下文中，如上所述具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物被稱為“預基礎雌性系(預基礎雌株)”。1.4熱處理步驟使用熱誘發的能育性誘導進行預基礎雄性不育雌性系(基因型MsMsrfrf)的繁殖。在一個優選的實施方案中，優勢雄性不育和優勢雄性能育表型之間的“轉換”優選指不是所有的植物和/或不是單株植物中所有的花都具有相同的表型(不育性/能育性)。因此，能育和不育的花可在一定程度上并行出現在同一植物上。然而，本發明的條件性雄性不育植物(預基礎或基礎雌株)優選在低于30°C的溫度下于單一植物上具有大于80%(優選大于90%，更優選大于95%，還更優選大于98%)的雄性不育花(最優選基本上在所有的植物上都不出現任何孕性花(fertileflowers))，但在高于35°C的溫度下產生大于20%(優選大于40%，更優選大于60%，最優選大于80%)的雄性能育花。雄性能育花與雄性不育花的比率優選在熱暴露結束后1-2周進行測定。如果應用約1周的熱處理，則該比率優選在熱暴露開始后約2-3周進行測定。包含Ms等位基因(以及沒有Rf等位基因)植物的雄性不育表型可通過暴露于高溫恢復為雄性能育表型，所述高溫優選約35-43°C(更優選37°C-40°C，最優選約39°C)。在開花之前和開花期間處于低于28°C，優選低于25°C，更優選20°C的溫度下僅存在雄性不育表型。然而，在開花之前和/或開花期間處于高于35°C的溫度下孕性花生長。發現在大約39°C的溫度下存在花發育和熱暴露之間的最佳比率，即由升高溫度所誘發的熱脅迫導致的損害易為植物所應付，而反之雄性能育花的發育則足以被誘導來獲得上述在同一植物上雄性能育花與雄性不育花的比率。熱暴露可在帶有溫度(允許誤差士1°C)和濕度控制的人工氣候室(RedekerKaeltetechnik；D-3279ILage,Germany)中進行。在一個進一步優選的實施方案中，在溫室隔室中進行熱暴露，在其中可應用類似的溫度動態變化。還優選在生長期期間在塑料大棚田地中進行熱處理，通過天然加熱或使用任何類型的加熱器進行額外加熱施加高溫。甚至有可能將雄性不育植物保持在田地中，如果在開花期期間生長的田地提供了足夠的溫度水平的話。關于高溫處理，術語“暴露”指用高溫進行處理，優選另外處于最佳生長條件下如處于高濕度(>80%)、施肥和作物保護處理等之下。暴露優選進行至少4小時，優選至少8或12小時，更優選至少24或36小時，還更優選至少48或96小時，最優選至少112小時(“熱處理時間”)。在正常(環境)溫度(優選在約19°C-22°C)下，熱處理時間可以是連續或斷續的一段時間。優選地，應用的熱處理時間為1-14天，更優選3-10天，還更優選4-9天或5-8天，最優選約7天。如上所述，熱處理并不一定指在整個時間段內處于高溫下的處理。在本發明的一個優選的實施方案中，針對預基礎雌性系受精的熱處理的實施具有白天溫度/夜間溫度改變，以避免過度的溫度脅迫。這減少了對植物的熱脅迫。優選在白天增加供熱(如上定義的)，而在夜晚溫度減少供熱至低于33°C，優選低于30°C，更優選低于28°C，還更優選降低至16_25°C，最優選19_22°C的溫度。優選地，通過將熱處理時間調節至日夜時間段，使之均勻分布于上述周期中。日/夜比為約0.51-約31，優選約11-約2.51，更優選約1.21-約2.01，最優選約1.81(優選具有39°C(白天溫度)-21.5°C(夜間溫度)的日夜間溫度)。在本發明的一個優選的實施方案中，再熱處理/生長室中通過人造光調節日夜時間段。優選使用至少lOOOOlux的人造日光。取決于暴露的溫度和時間，植物可包含能育和不育的花。然而，如果在開花過程結束之前停止熱暴露，則除雄性能育花之外可發育出額外的雄性不育花。然而，優選調節暴露的溫度和時間以產生具有多于30%(優選多于50%)雄性能育花的預基礎植物。在熱暴露和孕性花發育已被誘導后，可將植物轉移到“常規”條件(通常低于28°C的溫度)_例如在溫室中)下并繼續這些花的發育(盡管不會誘導更多的孕性花，但已誘導的芽會開放為孕性花)。優選地，將熱處理的歐洲油菜植物轉移到具有低于33°C，優選低于30°C，更優選低于28°C，還更優選16-25°C，最優選18°C-20°C的溫度的環境中)，直至雄性能育花發育。通常，植物在這些條件下保持約5-14天(優選5-7天)，直至雄性能育花發育。如此獲得的雄性能育Ms預基礎植物是“自花受精的”，即它們能自花傳粉。這樣的自花傳粉能在具有或不具有人工干預的情況下發生。然而，重要的是不發生與其他蕓苔屬植物的異花傳粉。因此，植物或孕性花要與不同的傳粉者保持隔離。可通過例如刷子介導的花粉轉移或其他本領域已知方法增加自交。在成功的傳粉(自交)后，熱處理的“已受精”植物可用作雄性系(傳粉者)與作為雄性不育雌性系的相同基因型的無熱處理的品系相組合。可選地，熱處理的品系可用作單系，即代表雌性系和雄性系。兩種操作在此在此都被理解為基于相同的遺傳背景的自花傳粉。在傳粉后，讓已被傳粉的植物發育為成熟的種子，如本領域技術人員所知的進行收獲并貯存用于進一步的應用(例如用于生產基礎雌性種子)。應當指出_以及也是本發明的一個優選的實施方案-無需將所有預基礎雄性不育雌性系(基因型MsMsrfrf)植物暴露于熱處理用于獲得預基礎雄性不育雌性系的花粉。為了獲得足夠量的花粉，只要預基礎雄性不育雌性系植物的一部分或只要這些植物的某些或一些用升高的溫度進行處理。使用在經處理的植物中獲得的花粉給其他預基礎雄性不育雌性系植物傳粉。為了獲得足夠數量的花粉，必須暴露于熱處理中的植物的數目是本領域技術人員已知的。2.基礎種子生產大體上，預基礎雌性系應適合作為(雄性不育)雌性系直接用于雜種種子的生產。然而，盡管可在相當大規模的程度(在開花期之前或開花期過程中提供了足夠的熱量用于雄性能育性誘導的氣候室中或天然條件下進行生長)上進行通過熱處理步驟的繁殖，但是其在商業上吸引力較小，原因在于加熱室的專用設備所產生的額外費用，或在天然條件下低的和/或不可控的種子產量。因此，本發明的一項創造性貢獻在于提供無需熱處理繁殖雄性不育表型、品系和種子的步驟。其可通過將預基礎(雄性不育)雌性系與不包含Ms等位基但僅包含保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；保持系；基因型msmsrfrf)的保持系雜交而實現。這樣的雜交產生了仍然是雄性不育但僅包含一個拷貝的Ms等位基因的品系。該雄性不育預基礎雌性系和作為雄性系的保持系的雜交可用于在商業規模上提供雄性不育基礎種子(即雄性不育基礎雌性系的種子)。因此，本發明的另一個優選的實施方案涉及一種生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系種子的方法，該品系適合作為(雄性不育)基礎雌性系用于生產歐洲油菜雜種種子，所述方法包括步驟a)提供作為雌株的具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育(預基礎)歐洲油菜植物，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，其中所述具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜雌株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型，和b)提供作為雄株的具有基因型msmsrfrf的雄性能育保持系歐洲油菜植物，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子，其中所述具有基因型msmsrfrf的歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在NCIMB保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的能育等位基因(功能失常的雄性不育基因；ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.優勢雄性能育，和c)使步驟b)的雄株傳粉給步驟a)的雌株，讓種子發育(優選直至成熟)，并收獲種子，其中收獲的種子特征在于它們是具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系(即基礎雌株)的種子。對于預基礎雌性系，Ms等位基因和rf等位基因定義如上，具有相同的參數選擇。能育等位基因(功能失常的雄性不育基因；ms等位基因)定義如下。在本發明的一個優選的實施方案中，在生產上述具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系種子的方法的步驟(a)中提供的條件性雄性不育歐洲油菜植物進一步特征如下a.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下之時(上述步驟a的子步驟iii.))，優勢雄性不育，和b.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選35°C_43°C的溫度，更優選暴露于370C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型；最優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長。在本發明的一個優選的實施方案中，在生產或繁殖上述具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法的步驟(b)中提供的條件性雄性不育歐洲油菜植物任選地具有不超過25μmol/克(優選1-22μmol/克，更優選5_20μmol/克，最優選8-17μmol/克)9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量。在生產適合作為(雄性不育)基礎雌性系用于生產歐洲油菜雜種種子的具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法的一個優選的實施方案中，用作雌株并在步驟a)中提供的具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育(預基礎)歐洲油菜植物生長自已使用上述生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法生產的種子，即通過a)提供具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，該基因型存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子中，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或4148下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型，和b)將所述條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于高于35°C的溫度至少4小時，和c)將步驟(b)中獲得的熱處理的條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于低于33°C的溫度，直至雄性能育花發育，和d)使具有在步驟(C)中獲得的所述雄性能育花的歐洲油菜植物自花傳粉，讓種子發育，并收獲種子，其中所收獲的種子特征在于它們是具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子。優選地，在基礎雌性種子生產中使用的雄性系和(雄性不育)雌性系都基于相同的遺傳背景。更優選地，通過雜交系統相應基因的基因滲入歐洲油菜近交系中，然后通過針對所述品系進行至少1次(優選2、3或4次)回交，從而提供所述雄性系和所述(雄性不育)雌性系。例如，基因滲入包括選自如下的一種或多種方法分離和轉化、常規育種、譜系選擇、雜交、自花傳粉、單倍性、雙單倍體技術、胚拯救、單粒傳法、標記輔助育種、誘發突變以及回交。在本發明的一個優選的實施方案中，可通過以交替帶狀培育相應的(雄性不育)雌株和雄株實現基礎雌性種子的生產，其中傳粉者(雄性能育系)在傳粉后拋棄。對于足夠的雌性系產量優選良好的傳粉條件。母本和傳粉者的比率應優選21、31或41，優選31。可通過使用具有2/3設置的播種機來設定該比率。如果在田地中進行生產，則每公頃3-5個蜂箱是有益的。如果旨在產生具有一致的Msmsrfrf基因型的預基礎種子，優選地，如果在田地中進行，則在溫度不增加超過33°C，優選30°C的條件和/或場所中進行基礎雌性種子的生產。對于在早春種植的冬油菜，大多數場所通常不是關鍵的。對于春油菜(例如雙低油菜)，具有高于環境溫度條件的場所(瑞典，加拿大)是優選的。然而，在該階段于更高的溫度下生產并不是不利的。當溫度超過35°C時，其僅僅會導致預基礎雌性系能自花傳粉并且所生產的基礎種子包含一定水平的預基礎種子。然而，預基礎種子和基礎種子都同樣適合于生長成用于生產雜種種子的雌株。因此，對于預基礎雌性系生產，溫度控制僅僅是任選的，并且較阻止預基礎雌性系受精與高種子產量(其在更高的溫度下減產)更相關。為避免用來自除保持系之外的其他植物的花粉異花傳粉，用于生產基礎種子的田地要與其他歐洲油菜植物，優選其他蕓苔屬植物保持隔離。隔離距離為至少500m，優選Ikm,更優選2km,最優選5km。業已發現與在這些生產步驟中使用的雄性能育植物相比，(雄性不育)雌株延遲開花。為了能最佳傳粉，因此優選通過選自如下的一種或多種方法同步化雄株和(雄性不育)雌株的開花i.修剪雄性能育植物(即開花部分)以延遲開花直至(雄性不育)雌株開花(優選所述植在開花后立刻使用電動或機械切割器修剪大約30cm)，ii.使用生長和/或成熟延遲化學藥品(例如Folicur，一種具有生長調節特性的殺真菌劑)處理開花植物，和iii.延遲雄性能育親本播種至多3周(即與(雄性不育)雌株相比，(雄性能育)雄株播種延遲至多3周)。優選在低于33°C，優選低于28°C，更優選低于25°C的溫度下進行基礎雌性種子和/或雜種種子的生產。從預基礎到基礎種子的繁殖效果通常為大約1500-11000。由該方法產生的基礎(雄性不育)雌株代表了本發明的另一個發明目的。因此，本發明的另一個實施方案涉及具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其中所述(條件性雄性不育)歐洲油菜雌株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。在本發明的一個優選的實施方案中，如上所述的具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物進一步具有如下特征I.當在開花之前和/或開花期間(參見上述iii.)暴露于優選低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下之時，優勢雄性不育，和II.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選35°C_43°C的溫度，更優選暴露于37°C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所定義的環境溫度下生長(參見上述iv.)0在本發明的一個優選的實施方案中，如上所述的具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的進一步的特征在于具有不超過25umol/克9%水分含量的風干種子，優選1-22ymol/克9%水分含量的風干種子，更優選5-20ymol/克9%水分含量的風干種子，最優選8-17umol/克9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量。對于預基礎雌性系，Ms等位基因和rf等位基因如上定義具有相同的優先選擇。能育等位基因(功能失常的雄性不育基因；ms等位基因)定義如下。優選地，具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌株)是i.對于與雄性不育表型連鎖的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的，其可通過與任何包含至少一個顯性功能性Rf等位基因(恢復系)的植物雜交恢復能育性，并且可通過與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子(保持系)的植物雜交得以保持，其中所述Ms等位基因選自I)可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的Ms等位基因，和II)具有基本上相同的表型特性的其變體(即賦予核條件性雄性不育表型(通過如上定義的保持系可保持的，但通過任何包含Rf等位基因的植物可恢復能育性的))，以及其中所述Ms等位基因優選與選自如下的一種或多種特性連鎖和/或與之相關I.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的芽敗育表型，和II.在包含至少一個拷貝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，一種或多種選自MS基因標記組(如上定義的)的標記，和III.具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的白色條紋或白色斑點花瓣表型，或賦予了核條件性雄性不育表型的其變體(通過保持系(如上定義的)可保持的，但通過包含Rf等位基因的任何植物可恢復能育性；因此具有基本上相同的表型特性)，ii.對于保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，其中所述保持系等位基因(rf等位基因)以純合子與雄性不育保持表型連鎖，其不能恢復包含至少一個Ms等位基因的植物的能育性，以及能保持包含至少一個Ms等位基因的植物的不育性，其中所述rf等位基因選自I)可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的rf等位基因，和II)具有相同的表型特性的其變體(即保持Ms等位基因賦予的核條件性雄性不育表型)，以及其中所述rf等位基因優選是在在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中與一種或多種選自rf等位基因標記組(如上定義的)的標記連鎖和/或與之相關的rf等位基因，或所述rf等位基因的變體，其具有基本上相同的表型特性(即保持Ms基因賦予的核條件性雄性不育表型)，iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度(優選低于25°C的溫度，更優選低于20°C，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下)之時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度(優選35°C-43°C，更優選37°C-40°C，最優選在約39°C；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長)時，恢復優勢雄性能育表型，和v.任選地具有不超過25μmol/克9%水分含量的風干種子(優選1_22μmol/克，更優選5-20μmol/克，最優選8-17μmol/克)的總芥子油苷含量。另一方面，對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的植物對于能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)是雜合的。詳細定義提供于下。在本發明的一個優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子被用于生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，即根據本發明的基礎雌性系的方法中。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德國基于他們的MSL系統生產的種子也可被用于生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的方法中。這樣的種子的實例包括但不P艮于品系Joker、Pronto、Panther>Artus>Baldur>Elan>Marcant、Mende1、Talent、Taurus>Tenno>Titan、Trabant>Zeppelin、Visby>Horus禾口Siesta的禾中子。其他還可用于生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的方法中的種子的實例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio>Elektra禾口Libretto的種子。此夕卜，Syngenta(或其附屬公司之一)所生產的種子，例如來自品系NKPetrol.NKKaribik,NKSpeecUNKOctans,NKKick、NKTechnik,NKPicolo、NKCaravel的種子也可用于生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的方法中。優選地，在用于雜種種子的生產系統中，具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物適合作為基礎雌性種子。在一個優選的實施方案中，所述基礎雌株可獲得自通過本發明用于生產基礎雌性種子的方法所生產的種子。另一個實施方案涉及生長成所述具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的種子，所述植物的部分，以及所述植物在雜種種子生產過程中的應用。優選地，所述基礎雌株的遺傳背景不是雜種，更優選其是近交的。所述植物部分優選自包含種子、小孢子、原生質體、細胞、胚珠、花粉、營養體部分、子葉、合子的組。本發明的其他優選的實施方案涉及在本發明的雜種種子生產系統中使用的植物成分預基礎雌性系、保持系、基礎雌性系、所得到的雜種植物和生長成所述植物的種子。基礎種子(即生長成基礎雌株的種子)的生產優選在通過使用條件性雄性不育預基礎雌性系和雄性能育保持系的田地中進行。優選將這兩個品系以帶狀種植(如Sauermann&Lamp,1997所描述的)。僅收獲雄性不育預基礎雌性系獲得的種子。保持系僅用于傳粉者并在開花后移除并處置。2.1保持系本發明的另一個實施方案涉及一種具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(在本發明的上下文中，也稱為“保持系”)，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子，其中所述雄性能育歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.優勢雄性能育，和iv.任選地具有不超過25umol/克(優選1-22umol/克，更優選5-20umol/克，最優選8-17umol/克)的由所述植物產生的9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量。rf等位基因定義如上，具有相應的參數選擇。在本發明的進一步優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子用作獲得具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即如上所述的保持系)或用作提供能育等位基因(如上所述在2.2下的ms等位基因)和/或保持系等位基因(如上所述在1.2下的rf等位基因)，以供本發明任一方法使用。本發明的一個進一步優選的方面涉及在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子用于保持種子的條件性雄性不育的應用，所述種子是在根據本發明的生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即本發明的預基礎雌性系)的種子的方法(即在第1節中描述的方法)中生嚴的。2.2ms等位基因、其相關的表型和標記術語“ms等位基因”、“能育等位基因”或“功能失常的雄性不育等位基因”指不存在功能性雄性不育等位基因(Ms等位基因或Ms基因)，以及更具體地說，可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的ms等位基因及所述等位基因的變體賦予了基本上相同的表型(即雄性能育表型)。該ms等位基因優選與如下表型特性連鎖和/或以如下表型特性為特征a)不能恢復由Ms等位基因所引起的雄性不育表型的能育性，和b)在不存在Ms等位基因的情況下不能賦予雄性不育表型。當這些特性只有是ms等位基因才有時，存在其他與ms等位基因連鎖或與之相關的特性。在本發明的一個優選的實施方案中，ms等位基因與一種或多種選自由如下組成的組(“ms等位基因標記組”)的標記(“ms等位基因標記”)連鎖I.選自由如下組成的NR1116標記區中多態性(突變)組的標記a)具有位于相應于SEQIDNO3中第85位的位置處的G的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO3中第87位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO3中第139位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO3中第214位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO3中第218位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，f)具有位于相應于SEQIDNO3中第277位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，50g)具有位于相應于SEQIDNO3中第286位的位置處的G的單核苷酸多態性標記，h)具有位于相應于SEQIDNO3中第312位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，i)具有位于相應于SEQIDNO3中第319位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，j)具有位于相應于SEQIDNO3中第359位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，k)在相應于SEQIDNO:3中第221位的位置處的5‘-TTGGTGAACAATC-3‘插入突變，1)在相應于SEQIDNO3中第328-330位的位置處的5'-GAA-3'缺失突變，II.選自由如下組成的NR2525標記區中多態性(突變)組的標記a)具有位于相應于SEQIDNO6中第60位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO6中第92位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO6中第105位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO6中第158位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO6中第431位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，f)具有位于相應于SEQIDNO6中第82位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，g)在位于相應于SEQIDNO:6中的第17_25位的位置處的插入突變5'-TGAGCAAAA-3‘，III.選自由如下組成的SNP標記組的標記a)在使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列(能育等位基因特異性探針ΗΝΚ6700)的SNP-探針(SNP-探針2)的SNP檢測中，產生陽性信號，和優選在使用包含SEQIDNO:12所示的核苷酸序列(不育等位基因特異性探針HiNK6701)的SNP-探針(SNP-探針1)的SNP檢測(優選基于TaqMan的SNP檢測)中，產生陰性信號，和b)在使用包含SEQIDNO18所示的核苷酸序列(能育等位基因特異性探針ΗΝΚ6776)的SNP探針(SNP-探針4)的SNP檢測中，產生陽性信號，和優選在使用包含SEQIDNO:17所示的核苷酸序列(不育等位基因特異性探針HiNK6775)的SNP探針(SNP-探針3)的SNP檢測(優選基于TaqMan的SNP檢測)中，產生陰性信號，IV.選自由如下組成的SSR標記組的標記a)具有選自由94(+/-0·9)bp、110.4(+/-0·5)bp、112.3(+/-0·4)bp和116.3(+/"O.4)bp組成的表觀分子量組的表觀分子量的PCR片段，該片段產生自使用具有SEQIDNOs:1和2所示序列的引物的PCR反應，b)具有183.8(+/-0.4)bp的表觀分子量的PCR片段或無能育等位基因相關的PCR片段，該片段產生自使用具有SEQIDNOs:4和5所示序列的引物的PCR反應，其中一種或多種標記(Ms等位基因標記)還包括選自如下序列的分離的核苷酸序列，所述序列I.與在上述I.-IV.中定義的標記序列具有至少80%的序列同一性，或II.在嚴格條件下與在上述I.-IV.中定義的標記序列雜交，或III.包含在上述I.-IV.中定義的標記序列的至少25個連續的核苷酸。優選地，存在至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個組1.的突變，更優選地存在至少位于相應于SEQIDNO3中第214位(T/C)和218位(T/G)的位置處的突變。優選地，存在至少1、2、3、4、5、6或7個組II.中的突變，更優選地，存在至少位于相應于SEQIDNO6中第158位的位置處的突變。應當指出與Ms等位基因不同，與ms等位基因相關的標記變化更多。結果，如上所示可能存在一條或多條具有不同表觀分子量的條帶。原因非常簡單Ms等位基因由一種未經歷頻繁的后發遺傳修飾的單一種質來源產生的，而ms等位基因則是一種存在于不同的遺傳背景中的歐洲油菜“天然等位基因”，并且其的遺傳環境受諸多繁殖活動的影響。因此，相關標記的明顯更高的變異性是有可能的。業已如上所述，標記可用于本發明的多個其他方面中。然而，本發明的這些方面并不限于使用本申請中所披露的標記。需要強調的是這些發明還可使用沒有在本文中明確披露的標記或仍待鑒定的標記。此外，應當理解盡管能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因或ms)可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子，但可存在可獲得所述ms等位基因的其他來源。事實上，ms等位基因的存在是有規則的而非出現例外，并且應當實際上存在于所有的歐洲油菜種質中(除來源于Takagi種質的種質以外)。在本發明的一個優選的實施方案中，在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子用于獲得能育等位基因(如上定義的ms等位基因)。以純合子存在的能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)與雄性能育表型連鎖。在雜合型(即與Ms等位基因結合)中，其容許由Ms所引起的雄性不育表型在純合的rf等位基因(rfrf；或換言之，在不存在Rf等位基因的情況下)存在下表現。所述ms等位基因存在于任何基于非-Takagi的種質中。除來源于Takagi種質的種質之外，尚不知道不包含至少一個功能性ms等位基因拷貝的品系。因此，以純合子存在的能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)與雄性能育表型連鎖，其中所述ms等位基因優選自a)存在于在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子中的ms等位基因，和b)具有相同的表型特性的其變體。在本發明的一個優選的實施方案中，所述具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物在本發明的基礎雌性種子生產方法中適合作為保持系。另一個實施方案涉及生長成所述具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物的種子，所述植物的部分，以及所述植物在雜種種子生產方法中的應用。優選地，所述植物的遺傳背景不是雜種，更優選地，其是自交的。另一個實施方案涉及生長成所述具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育歐洲油菜雜種植物的種子，所述植物的部分，以及所述植物用于栽培用于油料生產的歐洲油菜籽粒的應用。3.雜種種子生產本發明的另一個實施方案涉及一種生產歐洲油菜的雄性能育雜種種子的方法，所述方法包括步驟a)提供作為雌株的具有基因型Msmsrfrf(基礎雌性系)或MsMsrfrf(預基礎雌性系)的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜雌株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的(基礎雌性系)或純合的(預基礎雌性系)，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的功能失常的恢復系等位基因(rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型，和b)提供作為雄株的具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物(如下定義的“恢復系”)，其中所述雄性能育歐洲油菜植物是i.對于功能性恢復系等位基因(Rf等位基因)是純合的，該等位基因可獲得自任何被商業化作為種子用于栽培的歐洲油菜能育近交系，和ii.優勢雄性能育，和c)使步驟b)的雄株傳粉給步驟a)的條件性雄性不育雌株，讓種子發育，并收獲所述雄性能育雜種種子。在一個優選的實施方案中，在上述生產歐洲油菜的雄性能育雜種種子的方法的步驟a)中提供作為雌株的條件性雄性不育歐洲油菜植物具有基因型Msmsrfrf(即為上文中所描述的基礎雌性系)。結果，步驟a)中提供的雌株優選對于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的。在一個進一步優選的實施方案中，在上述生產歐洲油菜的雄性能育雜種種子的方法的步驟a)中作為雌株提供的條件性雄性不育歐洲油菜植物進一步具有如下特征I.當在開花之前和/或開花期間(參見上述iii.在步驟a)下)暴露于優選低于25°C的溫度，更優選暴露于低于20°C的溫度，但至少在容許正常生長的溫度例如至少12°C，優選至少14°C，更優選至少16°C下之時，優勢雄性不育，和II.當在開花之前和/或開花期間暴露于優選35°C_43°C的溫度，更優選暴露于37°C-40°C的溫度，最優選暴露于約39°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型；優選暴露如本文中所規定的優選的熱處理時間以及隨后在如本文所規定的環境溫度下生長(參見上述iv.在步驟a)下)。在一個進一步的實施方案中，在上述生產歐洲油菜的雄性能育雜種種子的方法的步驟a)中作為雌株提供的條件性雄性不育歐洲油菜植物進一步具有如下特征具有不超過25iimol/克，優選1-22umol/克，更優選5-20umol/克，最優選8-17umol/克9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量。在生產歐洲油菜的雄性能育雜種種子的方法的一個優選的實施方案中，在步驟a)中作為雌株提供的具有基因型Msmsrfrf(基礎雌性系)或MsMsrfrf(預基礎雌性系)的條件性雄性不育歐洲油菜植物由已使用上述方法之一生產的種子生長成，所述方法例如對于預基礎雌性系，生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系種子的方法，所述方法包括步驟a)提供具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其基因型存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子中，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或4148下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型，和b)將所述條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于高于35°C的溫度至少4小時，和c)將步驟(b)中獲得的熱處理的條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于低于33°C的溫度，直至雄性能育花發育，和d)使具有在步驟(C)中獲得的所述雄性能育花的歐洲油菜植物自花傳粉，讓種子發育，并收獲種子，其中所收獲的種子特征在于它們是具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子，或對于基礎雌性系，使用該上述生產具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法的優選的實施方案，其中用作雌株并在該方法的步驟a)中提供的具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育(預基礎)歐洲油菜植物由已用上述生產或繁殖具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子的方法生產的種子生長成，即通過a)提供具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，該基因型存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子中，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜植物是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育基因(Ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或4148下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型，和b)將所述條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于高于35°C的溫度至少4小時，和c)將步驟(b)中獲得的熱處理的條件性雄性不育歐洲油菜植物暴露于低于33°C的溫度，直至雄性能育花發育，和d)使具有在步驟(C)中獲得的所述雄性能育花的歐洲油菜植物自花傳粉，讓種子發育，并收獲種子，其中所收獲的種子特征在于它們是具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜品系的種子。術語“恢復系”指任何對于Rf基因是純合的蕓苔屬植物(優選任何歐洲油菜植物)(即具有基因型RfRf)。關于Ms基因，這樣的植物可具有任何ms和Ms等位基因的組合，盡管優選具有msms基因型，原因在于其是“天然”能育等位基因表型。結果，恢復系可具有選自msmsRfRf、MsmsRfRf和MsMsRfRf的基因型。優選地，恢復系對于能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)是純合的，所述等位基因優選可獲得自任何被商業化作為種子用于栽培的歐洲油菜能育近交系，或可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子。在另一個實施方案中，上述生產歐洲油菜的雄性能育雜種種子的方法的步驟b)中提供的具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物進一步特征在于具有不超過25umol/克，優選1-22umol/克，更優選5-20umol/克，最優選8-17umol/克9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量。在最優選的實施方案中，在收獲前讓步驟c)中發育的種子發育直至成熟。在本發明的一個較少優選的實施方案中，恢復系是具有基因型Rfrf的雄性能育歐洲油菜雄株，其中雄性能育歐洲油菜植物是i.對于功能性恢復系等位基因(rf等位基因)是雜合的，所述等位基因優選可獲得自任何被商業化作為種子用于栽培的歐洲油菜能育近交系，和ii.優勢雄性能育，和iii.任選地具有不超過25umol/克(優選1-22umol/克，更優選5-20umol/克，最優選8-17umol/克)9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量。在本發明的一個優選的實施方案中，將在保藏編號NCIMB41480和/或NCIMB41481下分別保藏的種子用于生產如本文中所描述的歐洲油菜的能育雜種種子的方法中。優選地，在該雜種種子生產中使用的雄性能育系(保持系)和雌性雄性不育系(基礎雌性系或預基礎雌性系，優選基礎雌性系)是基于遺傳多樣性背景的。可通過使用例如Knaak(1996)中所描述的分子標記測定遺傳距離。本發明的另一個優選的實施方案涉及具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育歐洲油菜雜種植物，其中所述雄性能育歐洲油菜雜種植物是i.對于功能性恢復系等位基因(rf等位基因)或保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是雜合的，和ii.優勢雄性能育，和iii.任選地產生具有不超過25iimol/克(優選1_22umol/克，更優選5-20umol/克，最優選8-17umol/克)的由所述植物產生的9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量的籽粒(F2種子；優選當通過不同的蕓苔品種異花傳粉時，是基本上不存在的)。在一個優選的實施方案中，上述具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育歐洲油菜雜種植物優選產生具有不超過25umol/克，優選1-22umol/克，更優選5_20umol/克，最優選8-17ymol/克的由所述植物產生的9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量的籽粒(F2種子；優選當通過不同的蕓苔品種異花傳粉時，是基本上不存在的)。本發明的另一個優選的實施方案涉及本發明的所述雜種蕓苔屬植物的部分，優選所述部分選自包含種子、小孢子、原生質體、細胞、胚珠、花粉、營養體部分、子葉、合子的組。在一個優選的實施方案中，根據本發明的雜種種子的生產可通過以交替帶狀栽培55相應的雌性(雄性不育)和雄性能育植物而得以實現，其中傳粉者(雄性能育系)在傳粉后拋棄。對于足夠的雌性系產量優選良好的傳粉條件。母本(雄性不育雌性系)和傳粉者的比率應優選31，以及如果在田地中進行生產，則每公頃3-5個蜂箱是有益的。以交替帶狀進行的種子生產優選得到高的雜交性水平。盡管如此，還是有可能(盡管在某些國家中不被接受)通過將(母本)雌性系與傳粉者(雄性系)混合來生產雜種種子。混合生產的優點在于降低生產成本。已發現在本發明的過程中，與在這些生產步驟中使用的雄性不育雌株相比，雄性能育植物更早開花。為了能最佳傳粉，為此優選修剪雄性能育植物以延遲開花，直至雄性不育雌株開花。優選地，基礎雌性種子和/或雜種種子的生產在低于33°C，優選低于28°C，更優選低于25°C的溫度下進行。在本發明的一個進一步優選的實施方案中，無需利用熱介導的雄性不育植物自交來實施歐洲油菜的雄性能育雜種種子的生產。在該實施方案中，如本領域所知的自交具有基因型MsmsRfrf的雄性能育植物。可通過將RHS雌株與正常的油菜進行雜交并隨后通過使用標記(例如本發明的標記)鑒定所需基因的存在，進行自交，從而獲得具有基因型MSmsRFrf的植物。還可通過在每一世代中回交和標記分析，以保持只有那些對于Ms和Rf基因都是雜合的植物，從而獲得這些植物。甚至有可能從熱介導的雄性不育植物自交中選擇具有基因型MsMsrfrf的植物(如上所述用于常規的RHS開發)，并將它們與正常的msmsRfRf油菜籽品系品種雜交。這兩種品系應當是近等基因以獲得純系用于進一步的開發。在分離后代中，預計有雄性不育植物(具有基因型Msmsrfrf和MsMsrfrf)和雄性能育植物(具有基因型MsMsRfRf、MsmsRfRf、msmsRfRf、MsMsRfrf,MsmsRfrf,msmsRfrf或msmsrfrf)。通過利用使用如在上文中所述的緊密連鎖的分子標記的選擇獲得具有基因型MsMSRfrf和msmsrfrf的雄性能育植物。如本領域所知的，自交這些植物。將雄性不育MsMsRfrf植物的后代播種在田地中作為雌性系，與雄性能育msmsrfrf植物(在此稱為保持系)的后代呈交替帶狀。在雌性條帶中植物會在具有基因型MsMsRfRf或MsMsRfrf的雄性能育表型和具有基因型MsMsrfrf的雄性不育表型中分離，分離比率為3能育的1不育的。業已如上所述，雄性不育植物具有花序的第一個芽敗育和白色條紋或斑點花瓣為特征的表型。此外，雄性不育植物開始開花明顯遲于近等基因雄性能育植物。這些表型差異使得能在雄性不育植物開始開花前除去雄性能育(早期開花)植物。在雄性不育植物開始開花前完全除去雄性能育植物毫無疑問能避免均來源于雄性能育MsmsRfrf植物自交的雜種生產中雄性能育植物(如保持系)和雄性不育植物之間的異花傳粉。修剪雄性能育植物是不足夠的，因為僅僅延遲了雄性能育植物開花，且仍有可能存在之前提及的不合需要的異花傳粉。一旦在開花前除去雄性能育植物，則保留在田地里的雄性不育植物通過雄性能育恢復系植物(優選地如上所述以交替帶狀存在)傳粉用于&雜種種子生產。種子僅獲得自在雌性條帶中生長的雄性不育MSMSrfrf植物，并且會具有基因型Msmsrfrf；從這些種子生長成的植物會是雄性不育的。該完全雄性不育種群是大量生產雜種種子的先決條件。然而，這種類型的基礎種子生產需要小規模田地，以便能盡可能地粗選雄性能育植物。取決于用于傳粉的傳粉者，在上述方法中具有基因型MsmsRfrf的植物通常有可能產生(1)基礎雌性系的種子(使用具有基因型msmsrfrf的保持系作為傳粉者)或^F1雜種種子(使用具有基因型msmsRfRf的恢復系作為傳粉者)。然而，此后用于生產&雜種種子的方法卻并不有效，原因在于需要大量的Fi雜種種子。臨近沒有雄性不育雌性純系，具有基因型MsmsRfrf的植物就不得不通過拋棄75%的全部子代(雄性能育植物)來進行選擇，從而導致種子生產植物的大量損失。因此，優選產生用于雜種種子生產的雄性不育雌性純系。在生產雜種植物中，優選與恢復系雜交的基礎雌性系以及自身具有足夠低的芥子油苷水平的恢復系以確保？工雜種植物的籽粒(或生長成的種子)具有處于控制水平內的芥子油苷水平。收獲自h雜種的種子的芥子油苷水平約略為母本和父本的芥子油苷水平的平均水平(或略低于平均水平(例如10-20%))。雜種籽粒(F2)的芥子油苷水平反映了&雜種的基因型。例如，如果目標是獲得具有低于25ymol/克(優選低于20i!mOl/克)的芥子油苷水平的雜種籽粒(F2)，則雄性能育親本(恢復系)具有15ymol/克的芥子油苷水平，母本優選具有低于25umol/克的芥子油苷水平。3.1恢復系和Rf等位基因術語“(功能性)恢復系等位基因”或“Rf等位基因”或“功能失常的保持系等位基因”指具有顯性的等位基因，其能(即Rf等位基因與選自如下的一種或多種特性連鎖和/或與之相關)a)在h植物中恢復能育性，所述&植物獲得自與由在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子生長成的歐洲油菜植物雜交，和b)在&植物中恢復能育性，所述&植物獲得自與由獲得自作為雄性不育雌株的獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的歐洲油菜植物與作為雄性能育植物的獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的歐洲油菜植物的雜交的種子生長成的歐洲油菜植物的雜交。Rf等位基因可獲得自任何基于非-Takagi的種質。除來源于Takagi種質的種質之外，尚不知道不包含至少一個功能性Rf等位基因拷貝的歐洲油菜能育近交系。結果，發現實際上所有在本發明之日可獲得的歐洲油菜能育近交系都是恢復系(即包含Rf等位基因)。因此，恢復系等位基因(Rf等位基因)選自可獲得自任何被商業化作為種子用于栽培的歐洲油菜能育近交系(“恢復系”)(不包括其的任何雜種系或親本系)的Rf等位基因，優選可獲得自在本發明優先權之日市售的品系，更優選自Bounty、Cyclone,Delta、Ebony>Garrison、Impact、Legacy>Legend、Profit、Quantum、Campala、Pollen、Grizzly、Expert、Aviso、NKJetix、Oase、Smart、NKFair、NKNemax、Ladoga、Cooper、Billy、Lorenz、Aurum、Lilian、Californium、Lisek、Orkan、Winner>Licorne、Castille、Fortis的品系和在它們的譜系中具有前述品種的歐洲油菜能育近交系。合適的恢復系還包括在2006年12月0ECD品種列表上的那些恢復系(確認合格的0ECD品種列表-2006/2007；2006年12月；//www.oecd.org/dataoecd/1/44/33999447.pdf；//www.oecd.org/document/14/0,2340,en_2649_33909_2485070_l_l_l_l,00.html)，優選被商業化作為種子用于栽培的非雜交系(用于油料生產)，更優選在所述0ECD列表上那些沒有標記為“d”(只要它們代表雜交親本系，就是近交系)或“b”(雜種)的品種。本發明的一個優選的實施方案涉及任何一種被商業化作為種子用于栽培的歐洲油菜能育近交植物用于獲得供生產在此披露的歐洲油菜的能育雜種種子使用的功能性恢復系等位基因(rf等位基因)的應用。育性恢復表型和/或Rf等位基因與一種或多種SSR標記(“Rf等位基因標記”)連鎖和/或與之相關，所述SSR標記不存在于具有240.8(+/-0.4)bp的表觀分子量的PCR片段中，所述PCR片段來自使用SEQIDNOs:19和20所示引物的PCR反應。在上下文中，應當指出與rf等位基因不同，與Rf等位基因相關的標記有可能變化更多。結果，可能存在更多具有不同表觀分子量的條帶。原因非常簡單rf等位基因由一種未經歷頻繁的后發遺傳修飾的單一種質來源產生的，而Rf等位基因則是一種存在于不同的遺傳背景中的歐洲油菜“天然等位基因”，并且其的遺傳環境受諸多繁殖活動的影響。因此，相關標記的更高的變異性是有可能的。在本發明的一個優選的實施方案中，在一個整合的生產過程中實施繁殖預基礎種子、生產基礎雌性種子和生產雜種種子的方法。因此，優選地，本發明的另一個實施方案涉及一種生產生長成產種子(或籽粒(即非栽培目的的種子)；任選地，但優選地，具有不超過25iimol/克(優選l_22iimol/克，更優選5-20iimol/克，最優選8-17iimol/克)的9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量)歐洲油菜植物的歐洲油菜雜種種子的方法；其中所述方法包括繁殖預基礎雌性種子(如上定義的)的方法、生產基礎雌性種子(如上定義的)的方法，以及生產雜種種子(如上定義的)的方法。本發明的一個進一步優選的實施方案涉及任何一種被商業化作為種子用于栽培攜帶至少一種“(功能性)恢復系等位基因”、“Rf等位基因”或“功能失常的保持系等位基因”(“恢復系”)(即如上所述的“恢復系植物”或“恢復系”)的歐洲油菜能育近交系在由本發明的條件性雄性不育歐洲油菜植物(參見如上)雜交獲得的&植物中恢復雄性能育性的作用。4.用于Ms、ms、rf、Rf等位基因的標記以及標記技術的應用分子標記可用于顯現核酸序列的差異。例如由于在用限制性內切酶消化后的DNA-DNA雜交技術(RFLP)和/或由于使用聚合酶鏈反應的技術(如STS、微衛星、AFLP)，因此使得該顯現得以可能。如下所述在此鑒定的標記可用于本發明的各個方面中。本發明的方面不限于使用在此鑒定的標記。強調指出這樣的方面也可使用沒有在此明確披露的標記或甚至待鑒定的標記。分子標記即SNP和SSR被用于雜種育種計劃中，以及被用于開發在該育種計劃中使用的近交系，以指引等位基因(例如MS、mS、Rf、rf等位基因)的遺傳或評估所選擇的育種品系的遺傳距離。通過將所選擇的品系標記輔助回交入本發明的雜交系統中(或反之亦然)，該回交步驟可從5代回交減少到3代回交。有幾種分子標記可用于基于標記的選擇，包括限制性片段長度多態性(RFLP)、多態DNA隨機擴增(RAPD)、擴增片段長度多態性(AFLP)、單序列重復(SSR)和單核苷酸多態性SNPs。RFLP涉及使用限制性內切酶在特定的短限制酶切位點處切割染色體DNA，多態性產生自位點或在該限制酶切位點處突變之間的重復或缺失。RAPD利用了低嚴格性聚合酶鏈反應(PCR)擴增，使用單條隨機序列引物來產生未知DNA片段的鏈特異性陣列。該方法僅需要很好的DNA樣品，卻能分析大量的多態性基因座。AFLP需要在使用PCR和引物中選擇性的核苷酸來擴增特異性片段前，用限制性內切酶消化細胞DNA。一種特別優選的方法利58用了基于廣泛分布于真核生物基因組中的DNA微衛星(短重復)序列的SSR標記分析，該DNA微衛星(短重復)序列被選擇性擴增以檢測簡單序列重復中的變異。對于SSR分析僅需要很少的DNA樣品。還優選的是SNP標記，其使用了能有效地挑選點突變的PCR延伸檢測。該方法對每個樣品只需要很少的DNA。一種或兩種上述方法可用于典型的基于標記的選擇育種計劃中。對于標記輔助選擇，用于實現植物基因組跨多態性區域的核苷酸片段擴增的最優選的方法利用了聚合酶鏈反應(“PCR”)(Mullis等，1986)，使用能與在其雙鏈形式中限定了多態性的近側序列雜交的包括反向引物和正向引物的引物對。備選的方法可被用于擴增這樣的片段，例如“連接酶鏈反應”(“LCR”)(Barany，1991)，其使用兩對寡核苷酸探針來指數式擴增特異性靶標。挑選每對寡核苷酸的序列以容許該寡核苷酸對與靶標的同一條鏈的鄰接序列雜交。這種雜交產生了用于模板依賴的連接酶的底物。因此，如同PCR—樣，所得到的產物在隨后的循環中用作模板并獲得了所需序列的指數式擴增。可用具有多態位點的同一條鏈的近側和遠側序列的寡核苷酸來執行LCR。在一個實施方案中，任何一條寡核苷酸都被設計以包括多態性的實際多態位點。在這樣一種實施方案中，如果靶分子包含或缺少與寡核苷酸上存在的多態位點互補的特異性核苷酸，則可選擇反應條件使得該寡核苷酸只能連接在一起。可選地，可選擇該寡核苷酸使得它們不包括該多態位點(參見WO90/01069)。另一種被利用的可替代的方法是“寡核苷酸連接檢測”(“OLA”)(Landegren等，1988))。該OLA實驗方案使用了兩條被設計成能雜交靶單鏈的鄰接序列的寡核苷酸。0LA，像LCR—樣，特別適用于檢測點突變。然而，不像LCR，OLA產生了“線性”而非指數式的靶序列擴增。Nickerson等描述了一種結合了PCR和OLA特性的核酸檢測方法(Nickerson等，1990)。在該方法中，PCR用于實現靶DNA的指數式擴增，然后使用OLA進行檢測。除需要多個和分離的處理步驟之外，與上述組合相關的一個問題是它們繼承了與PCR和OLA相關的所有問題。基于在具有合成的“二寡核苷酸”的序列的核酸存在下連接兩條(或更多條)寡核苷酸，從而擴增該二寡核苷酸的方案也是已知的(Wu等，1989)，并可容易地適應于本發明的用途。在一個實施方案中，分子標記是通過PCR擴增的DNA片段，如SSR標記。在一個實施方案中，擴增的DNA片段的存在與否是性狀自身或該性狀特定等位基因存在與否的指示。在一個實施方案中，擴增的DNA片段的長度差異是性狀特定等位基因存在的指示，并因此能區分不同的性狀等位基因。在本發明的一個具體實施方案中，簡單序列重復(SSR)標記用于在親本植物和/或其祖先中，以及在由所述親本植物雜交產生的后代植物中，鑒定發明相關的等位基因。簡單序列重復是短重復的DNA序列，存在于所有真核生物的基因組中，并由幾個到超過幾百個1-4個核苷酸基序的重復組成。由于在植物中存在于基因組中特定位置處的SSRs數目通常不同，因此可分析SSRs以確定特定等位基因的存在與否。在一個方面，本發明涉及選自SEQIDNOs:1、2、4、5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20所示的序列組的寡核苷酸引物。這些引物優選用作由正向引物和反向引物組成的PCR寡核苷酸引物對或用作SNP突變檢測探針。優選地，用于擴增SSR標記的引物對由SEQIDNOs1和2(引物對1)、SEQIDNOs4和5(引物對2)或SEQIDNOs19禾口20(引物對3)所示的引物組成。優選地，用于擴增SNP標記片段(即包含SNP突變的片段)的引物對由SEQIDNOs:8和10(引物對4)或由SEQIDNOs:15和16(引物對5)所示的引物組成。在此提供的其他引物對也可能適合作為標記序列(例如對于RFLP標記)，例如SEQIDNOs:13和14所示的引物(引物對6)，或SEQIDNOs:7和8所示的引物(引物對7)。適合于檢測單核苷酸多態性(SNP)的探針可包含作為核酸部分的選自SEQIDNOs:11、12、17和19所示序列的序列。業已測序了包含SSRs和SNPs的區域。在那些與相應的等位基因(例如MS等位基因、ms等位基因、Rf等位基因、rf等位基因)和相關表型連鎖的序列之間存在著相當大的突變差異。其結果是，那些區域存在著本發明的創造性特征，因為它們能鑒定更多的標記和/或開發用于鄰近基因組測序的引物，所述鄰近基因組可包含相應的MS等位基因、ms等位基因、Rf等位基因、rf等位基因。為了序列比較，對不育和能育的植物比對變化的區域以創建共有序列(分別為SEQIDN0:3和6)。該序列可優選用于檢測迄今未被分析歐洲油菜種質的相應序列。作為結果，本發明的另一個實施方案涉及一種分離的核苷酸序列，選自a)序列，其i)與選自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與選自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列雜交，或iii)包含選自SEQIDNOs:3和6所示序列的共有序列的至少25個連續的核苷酸，和b)序列，其i)與選自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與選自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列雜交，或iii)包含選自SEQIDNOs-.21,22和23所示序列的序列的至少25個連續的核苷酸。在本發明中披露的序列在標記輔助育種和選擇中是特別有用的。然而，這些序列可用于不限于使用如在本申請中所描述的標記的本發明的多個其他方面中。需要強調的是本發明還可利用沒有在此明確披露的序列或仍待鑒定的序列。關于標記輔助選擇，本發明的另一個實施方案涉及一種使用本發明的核酸序列(或與所述核苷酸序列享有90%-99%,優選95%-98%序列同一性的其片段)用于將選自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或rf等位基因等位基因基因滲入缺少所述等位基因集合的蕓苔種質中的方法。本發明的一個進一步優選的實施方案涉及根據本發明的核酸序列在基于標記的選擇中的應用，所述基于標記的選擇用于將選自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或Rf等位基因的等位基因基因滲入至如上所述缺少所述等位基因集合的蕓苔種質中。賦予雄性不育或保持雄性不育的本發明的植物可例如具有基因型MsMsrfrf、Msmsrfrf或msmsrfrf，而本發明的雜種植物具有MsmsRfrf或msmsRfrf的基因型，其中Ms、ms、rf、Rf具有上述含義。因此，本發明還提供了通過在所述植物中檢測如在此定義的Ms和/或rf等位基因的存在，用于選擇顯示賦予或保持雄性不育表型的物種歐洲油菜植物的方法。在本發明的一種優選的用于選擇這樣的植物的方法中，所述方法包括i)從要被檢測的植物或植物種群獲得植物材料并從所述材料提取DNA；ii)通過使用一種或多種本發明的核酸序列，分析步驟i)中獲得的DNA樣品以確定Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因和/或Rf等位基因的存在/不存在。更優選地，上述方法的步驟ii)包括在所述基因組DNA的樣品中檢測至少一種與Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因或Rf等位基因連鎖的分子標記，更優選地，檢測至少來自所述組的兩種分子標記，其中一種標記檢測Ms等位基因或ms等位基因，另一種標記檢測rf等位基因或Rf等位基因。該分析可以多種方法來進行，并可包括例如下列步驟a)使用PCR寡核苷酸引物對鑒定至少一個標記基因座，所述引物對由具有如SEQIDNOs:1、2、4、5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20任一所示的核苷酸序列的正向引物和反向引物組成，和b)通過測定步驟a)中獲得的PCR擴增產物的分子量鑒定標記等位基因，和c)使用標記分析數據鑒定具有所需組成的植物。DNA樣品可獲得自合適的植物材料，例如通過使用已知技術提取DNA的葉組織。在一個優選的實施方案中，檢測分子標記的步驟(步驟b)可包括使用一組雙向引物，該雙向引物用于SSR法中來產生隨后被證實是適合用于Ms、ms、Rf或rf等位基因的標記的擴增產物。這樣的一組引物在此稱為規定SSR標記的引物或標記特異性引物。“雙向”意味著在核酸的擴增反應中引物的一個方向起正向引物作用以及另一個方向起反向引物作用。該檢測分子標記的步驟(步驟b)還可包括針對所述基因組DNA執行核酸擴增反應來檢測一種或多種Ms、ms、Rf或rf等位基因。這可通過使用一組標記特異性引物進行PCR反應而得以合適地進行。在一個優選的實施方案中，所述步驟b)包括使用至少一組規定用于所述等位基因的SSR標記的引物，或一種在嚴格條件下與用于所述等位基因的SSR標記的核酸序列特異性雜交的引物。然后，使用本領域技術人員公知的聚合酶鏈反應(PCR)法，將側接包含與在此披露的本發明的等位基因連鎖的SSRs或SNPs區域的引物用于擴增DNA樣品。基本上，該PCR擴增法涉及使用包含兩條側接要被擴增的DNA區段的短寡核苷酸引物序列的引物對。重復的DNA加熱和變性循環之后是在低溫下引物退火至它們的互補序列上，以及使用DNA聚合酶的退火引物的延伸。弓丨物與DNA靶序列的相反鏈雜交。雜交指互補DNA鏈的退火，其中互補指核苷酸序列如此以致一條鏈中的核苷酸能鍵合相反鏈上的核苷酸以形成雙鏈結構。引物如此定向使得通過聚合酶的DNA合成跨引物之間的核苷酸序列雙向進行。該方法有效地在一次循環中倍增了DNA區段的數量。由于PCR產物與引物互補并能與之結合，因此每輪成功的循環倍增了在之前循環中合成的DNA的量。該方法的結果是特異性靶片段的指數式累積，其系數為大約2n，其中n為循環數。通過PCR擴增，制備了成百萬拷貝的側接引物的DNA片段。對于SSRs，不同等位基因中側接引物之間的重復序列數量的差異反映在擴增的DNA片段的長度變化上。這些變化可通過在凝膠上電泳分離擴增的DNA片段而檢測到。通過分析凝膠，能確定植物是否以純合或雜合形式包含所需的等位基因，或者所需的等位基因是否不存在于植物基因組中。使用提取自非常年輕的植物的葉組織的DNA樣品，標記分析可在植物發育初期進61行。該標記分析容許鑒定在繁殖周期早期具有所需遺傳組成的植物，并可在傳粉前拋棄不含有所需的、本發明相關的等位基因的植物，從而減少繁殖種群的大小。此外，通過使用分子標記，可在攜帶兩拷貝的所需的、本發明相關的等位基因的純合植物和僅攜帶一個拷貝的雜合植物之間進行區分。可通過標準的凝膠電泳技術或通過使用自動化DNA測序儀執行檢測具有預計長度或預計核酸序列的擴增的DNA片段的步驟。該方法無需在此描述，因為它們是本領域技術人員所熟知的。本發明的標記還可用于將本發明的等位基因定位至歐洲油菜基因組中的某一位置處。一般而言，可通過鄰接的顯示與表型性狀統計相關標記串(string)指示某一性狀基因(例如Ms或rf等位基因)的位置。一旦發現標記位于該串之外(即具有低于某一閾值的L0D-計分，表明該標記距離之遠以致標記和基因(或等位基因)之間的區域中的重組如此頻繁地發生，使得標記的存在不以統計顯著方式與表型的存在相關)，就設定了該基因(或等位基因)的邊界。因此，還有可能通過其他位于該指定區域中的標記來指示基因(或等位基因)的位置。應當指出(如上所述)，當本發明所述的等位基因(例如Ms等位基因或rf等位基因)被基因滲入另一遺傳背景種(即基因滲入另一植物物種或另一歐洲油菜品種的基因組中)時，某些標記可不再發現于子代中，盡管在其中存在性狀，表明在最初的親本系中這樣的標記位于代表了特定性狀的基因組區之外，以及該新的遺傳背景具有不同的基因組結構。在其不存在時指示在子代中成功地導入了遺傳元件的這樣的標記稱為“反式標記”，并可同樣適用于本發明中的MAS法。本發明的Ms或rf等位基因的核苷酸序列可例如通過如下得以解析測定與所述等位基因(例如在下文中披露的核酸序列)相關的一種或多種標記的核苷酸序列并針對所述標記序列設計內部引物，然后引物用于進一步測定在所述標記序列之外的基因序列。在這樣的用于檢測受懷疑的涉及或保持雄性不育的植物(或雜種植物)中Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因存在的方法的實施方案中，該方法還可包括步驟提供能在嚴格雜交條件下與標記的核酸序列雜交的寡核苷酸或多核苷酸，所述標記與所述Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因連鎖，將所述寡核苷酸或多核苷酸與所述受懷疑的植物的消化的基因組核酸接觸，以及確定所述寡核苷酸或多核苷酸與所述消化的基因組核酸的特異性雜交的存在。優選地，盡管還可以使用原位雜交法，但是對獲得自所述受懷疑的植物的核酸樣品執行所述方法。可選地，以及在一個更優選的實施方案中，一旦Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因的核苷酸序列被測序，技術人員就可設計能在嚴格雜交條件下與所述Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因的核苷酸序列雜交的特異性雜交探針或寡核苷酸，并可將這樣的雜交探針用于本發明的在懷疑的歐洲油菜植物中檢測Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因存在的方法中。在一個進一步的實施方案中，本發明涉及一種檢測包含Ms等位基因(用于核雄性不育)的蕓苔屬植物的方法，包括步驟a)從蕓苔屬植物獲得樣品；和b)在所述樣品中檢測能通過使用至少一種如上定義的本發明的Ms等位基因標記得以鑒定的DNA片段。在一個進一步優選的實施方案中，本發明涉及一種檢測包含恢復系等位基因(rf)的蕓苔屬植物的方法，包括步驟a)從蕓苔屬植物獲得樣品；和b)在所述樣品中檢測能通過使用至少一種如上定義的本發明的Rf等位基因標記得以鑒定的DNA片段。在一個進一步優選的實施方案中，本發明涉及一種檢測包含ms等位基因(與核雄性能育性相關)的蕓苔屬植物的方法，包括步驟a)從蕓苔屬植物獲得樣品；和b)在所述樣品中檢測能通過使用至少一種如上定義的本發明的ms等位基因標記得以鑒定的DNA片段。在一個進一步優選的實施方案中，本發明涉及一種檢測包含保持系等位基因(rf)的蕓苔屬植物的方法，包括步驟a)從蕓苔屬植物獲得樣品；和b)在所述樣品中檢測能通過使用至少一種如上定義的本發明的rf等位基因標記得以鑒定的DNA片段。在另一個優選的實施方案中，根據本發明檢測蕓苔屬植物(具有Ms、Rf、ms或rf等位基因)的方法進一步包括選擇包含所述DNA片段的所述蕓苔屬植物或其部分的步驟c)。還在另一個實施方案中，根據本發明檢測蕓苔屬植物的方法進一步包括自交包含所述DNA片段的所述蕓苔屬植物的步驟d)。還在另一個實施方案中，根據本發明檢測蕓苔屬植物的方法進一步包括將所述蕓苔屬植物與另一種蕓苔屬植物雜交的步驟e)。5.本發明植物的農業和工業用途本發明的植物-特別是雜種植物_和/或從其中獲得的產物可用作農業和/或工業用途(例如在食品和飼料工業中)。因此，本發明的另一個實施方案涉及基于使用本發明的雜種種子的農業方法。一個實施方案涉及一種用于栽培和/或生產歐洲油菜籽粒或種子的方法，包括步驟a)播種本發明的雜種種子或通過本發明的方法提供的雜種種子，b)由所述種子培育雜種歐洲油菜植物，和c)由所述植物收獲成熟種子或籽粒。本發明的又一個優選的實施方案涉及本發明的雜種種子在這樣的過程中的應用。在一定的環境下，能經濟可行地再植由雜種蕓苔屬植物收獲的種(例如如果那些種子產生高價值特種油料的話)。因此，本發明的另一個實施方案涉及一種使用歐洲油菜植物的方法，包括步驟由本發明的(或由通過生產本發明的雜種種子的方法提供的種子生長成的)蕓苔屬雜種植物收獲種子，和種植所述種子以產生后代。優選地，所述收獲的種子具有不超過25μmol/克(優選1-22μmol/克，更優選5-20μmol/克，最優選8-17μmol/克)9%水分含量的風干種子的芥子油苷含量。更優選，所述再植種子對于功能失常的恢復系等位基因(rf等位基因)是至少雜合的或對于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是至少雜合的，即具有選自如下的表型MsmsRfRf、MsMsRfrf、MsmsRfrf、msmsRfrf■禾口Msmsrfrf。該再植方法可重復進行，并因此可包括重復種植收獲的后代植物的種子的步驟。本發明的又一個優選的實施方案涉及歐洲油菜植物在方法中的應用，包括步驟由通過如在此所提供的本發明的方法提供的種子生長成的蕓苔屬植物收獲種子，和種植所述種子以產生后代。優選地，該應用進一步包括步驟重復種植所收獲的后代植物的種子的步驟。本發明的另一個實施方案涉及使用本發明的雜種種子，特別是由該種子生長成和/或由其可獲得油的植物生產油的方法。因此，一個實施方案涉及一種生產油菜籽(歐洲油菜)油和粕(優選粕基本上是無油的，即具有小于10%，優選小于5%，更優選小于2%的含油量)的方法，包括步驟a)播種本發明提供的或通過本發明的方法提供的雜種種子，b)由所述種子生長成雜種歐洲油菜植物，c)由所述植物收獲成熟的種子或籽粒，和d)破碎所述種子或籽粒并由粕中分離或提取油(以及優選進一步包括將油和粕分離的步驟)。生產油和粕的方法產生了兩種產物(油和粕)，它們可作為方法的分離產物獲得并具有不同的效用。油用于食品和飼料工業中用于不同的用途。粕用于飼料用途或生產生物氣體。粕的代表性用途包括用于牲畜的飼料。所述油類代表性的用途包括涼拌、油炸、烹飪、噴涂和粘性食品應用。由于本發明的內源性蔬菜粕和油滿足了大量最終應用的要求，因此處理和庫存考慮得到大大簡化。在固有優良的健康和營養特性的內源性產物中，這些益處中的每一個都可以直接的方式得以實現。“種子”指適合于和/或被選定用于進一步種植的由歐洲油菜植物收獲的種子材料。“籽粒(Grain)”指不適合于(在商業上或在實踐上)和/或未被選定用于進一步種植的由歐洲油菜植物收獲的種子材料。本發明的又一個實施方案涉及本發明的雜種種子在這樣的方法中的應用。另一個實施方案涉及一種生產歐洲油菜(油菜籽)油和粕的方法，包括步驟a)提供對于功能失常的恢復系等位基因(rf等位基因)是至少雜合或對于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是至少雜合的油菜籽籽粒，和b)破碎所述種子并分離或提取油。在一個優選的實施方案中，所述油具有選自如下所述的優選組成的組的脂肪酸組成。本發明的另一個實施方案涉及歐洲油菜粕，其基本上無油并且是使用任何一種本發明的植物的含油種子生產的。本發明的另一個實施方案涉及一種通過破碎任何一種本發明的植物的含油種子提供歐洲油菜粕的方法。優選地，所述含油種子對于功能失常的恢復系等位基因(rf等位基因)是至少雜合的或對于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是至少雜合的，即具有選自MsmsRfRf、MsMsRfrf、MsmsRfrf、msmsRfrf和Msmsrfrf的表型。本發明的又一個實施方案涉及一種通過如下經營種子生意的方法a)提供選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即預基礎雌性系)、具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌性系)或具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)的本發明的種子生產植物給感興趣生產雜種油菜籽的育種人員，和b)讓所述育種人員在許可下通過將所述步驟(a)的種子生產植物與所述育種人員可獲得的雄性能育歐洲油菜近交系(即所述育種人員可獲得的恢復系，其優選不是基于Takagi種質的)雜交創建歐洲油菜雜種種子。在本發明的更優選的實施方案中，在上述經營種子生意的方法的步驟a)中提供給育種人員的種子生產植物是本發明的基礎雌性系(例如具有基因型Msmsrfrf的歐洲油菜自交植物)。在一個進一步優選的實施方案中，本發明涉及一種在生產雜種種子的方法中使用一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即預基礎雌性系)、具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌性系)或具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)的本發明的歐洲油菜植物的方法。該雜種種子的生產優選如上所述來進行(例如在第3節中所描述的)。本發明的又一個優選的實施方案涉及一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即預基礎雌性系)、具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌性系)或具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)的本發明的歐洲油菜植物在生產雜種種子的方法中的應用。該生產雜種種子的方法優選是上述本發明的方法之一。在一個更優選的實施方案中，本發明涉及具有基因型MsMsrfrf的本發明的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即預基礎雌性系)和具有基因型msmsrfrf的本發明的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)在生產雜種種子的方法中的應用。此外，該生產雜種種子的方法優選是上述本發明的方法之一。在一個還進一步優選的實施方案中，本發明涉及一種在生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌性系)或其種子的方法中使用一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即預基礎雌性系)和具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)的本發明的歐洲油菜植物的方法。該具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的生產優選如上所述來進行(例如在第3節中所描述的)。在一個進一步優選的實施方案中，本發明涉及一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即預基礎雌性系)和具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)的本發明的歐洲油菜植物在生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌性系)或其種子的方法中的應用。該雜種種子的生產優選如上所述來進行(例如在第3節中所描述的)。在一個更優選的實施方案中，本發明涉及具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物(即保持系)在生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物(即基礎雌性系)或其種子的方法中的應用。此外，該生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物的方法優選是上述本發明的方法之一。在一個優選的實施方案中，用于使用本發明的歐洲油菜植物生產雜種種子的方法中的歐洲油菜植物選自由在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子生長成或來源于所述種子的品種。在又一個優選的實施方案中，本發明涉及一種在提供如上所述的歐洲油菜的能65育雜種種子的方法中使用具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物的方法。優選地，所述在提供如上所述的歐洲油菜的能育雜種種子的方法(即生產本發明的歐洲油菜的能育雜種種子方法)中使用具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物的方法，其中具有基因型Msmsrfrf或MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物被提供作為雌株，而具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物則被提供作為雄株，以及讓所述雄株傳粉給條件性雄性不育雌株，讓種子發育并作為能育雜種種子收獲。關于該方法以及在該方法中使用的本發明的植物的詳情參見如上。本發明另一個優選的實施方案涉及具有的基因型RfRf能育歐洲油菜植物在提供如上所述的歐洲油菜的能育雜種種子的方法中的應用。優選地，具有基因型RfRf的能育歐洲油菜植物用于提供能育雜種種子的方法中，所述方法是上述生產本發明的能育雜種種子的方法之一。在一個進一步優選的實施方案中，本發明涉及通過上述應用或在上述使用方法中獲得的歐洲油菜植物、其種子或雜種種子。6.具有遺傳背景和其他性狀的雜交系統的組合大體上，本發明的預基礎雌性系、基礎雌性系、保持系和/或雜種植物可與具有任意遺傳背景的歐洲油菜組合。然而，這些植物(尤其是雜種植物)優選具有選自如下的一種或多種特性黃色種皮顏色、除草劑抗性、生物脅迫抗性(例如抗例如昆蟲、真菌、細菌、線蟲、病毒等的病原體抗性)和非生物脅迫抗性(例如干旱、鹽、熱、霜凍等)。在商業上期望的額外的性狀是那些會降低蕓苔屬作物生產成本的性狀(輸入性狀)或會增加蕓苔屬作物或來自其的油類或粕的品質的性狀(輸出性狀)。輸入性狀可選自除草劑抗性、抗蟲性、抗病性和脅迫抗性(例如旱、冷、熱和鹽抗性)。輸出性狀可優選自具體所需的油類或脂肪酸組成。病原體抗性性狀包括但不限于a)單基因Rlm7Phoma抗性(油菜莖基潰瘍病菌(L印tosphaeriamaculans))；這樣的性狀易得自歐洲油菜品種cv.Roxet，和cv.Caiman；b)根腫病抗性(甘藍根腫菌(Plasmodiophorabrassicae))；這樣的性狀易得自歐洲油菜品種cv.Tosca，禾口cv.Mendel；禾口c)TUYV病毒抗性(蕪菁黃化病毒)；這樣的性狀易得自歐洲油菜品種cv.Caletta。本領域技術人員可利用本發明的蕓苔屬植物來開發生產含油種子的，對于核雄性不育的能育性預基礎或基礎雌性系、保持系或恢復系的蕓苔屬植物，其優選具有低芥子油苷含量以及任何其他期望的性狀。由本發明的植物和種子產生的粕和油取決于預期用途還可具有多種特性。這樣的用途可以是工業用途或作為飼料或食品的用途。作為食品目的的用途可包括用作為油炸用油，廣義來講，作為烹飪用油或作為色拉油。所有這些預期用途均與優選的脂肪酸組成相關。優選地，本發明的蕓苔屬植物和/或所述植物的種子和/或由所述植物獲得的種子均具有雙低油菜品質。6.1.油組成性狀在一個優選的實施方案中，本發明的預基礎系、基礎系、保持系和雜種植物產生具有大于40%，優選大于42%和最優選大于44%的含油量的籽粒。蕓苔油種子的食用內源性植物油包含受遺傳手段控制的脂肪酸和其他性狀(W091/15578；US5，387，758)。優選地，基于總脂肪酸含量，為人或動物消費所設計的蕓苔油種子包括不超過2襯％的低濃度的芥子酸，其受控于與其他所列指定組分相結合的遺傳手段。用于表達這樣的芥子酸性狀的遺傳手段可來源于多種具有良好農藝學特性的市售雙低油菜品禾中，例如Bounty、Cyclone、Delta、Ebony、Garrison、Impact、Legacy、Legend、Profit、Quantum、Campala、Pollen、Grizzly、Expert、Aviso、NKJetix、Oase、Smart、NKFair、NKNemax、Ladoga、Cooper、Billy、Lorenz、Aurum、Lilian、Californium、Lisek、Orkan、Winner、Licorne、Castilie、Fortis。在一個優選的實施方案中，本發明的雜種歐洲油菜植物(或用于其育種的本發明的基礎、預基礎或保持系)產生特有的油組成。對于蕓苔中優選的特有的油組成的評述參見Scarth&Tang(2006)及其中引用的參考文獻；均在此以其整體并入作為參考。傳統的蕓苔油種子栽培品種產生的菜籽油通常具有5%棕櫚酸(C16:0)、1%硬脂酸(C18:0)、15%油酸(C18:l)、14%亞油酸(C18:2)、9%亞麻酸(C18:3)和45%芥子酸(C22:l)的脂肪酸組成(Ackman，1990)。C221是一種在營養上不合需要的脂肪酸，并且在蕓苔油中為了可食用業已降至非常低的水平。低C22:l蕓苔油具有在營養上合乎需要的脂肪酸組成，具有低飽和脂肪酸和高水平的C18:3-—種《-3脂肪酸(Eskin等，1996)。C22:1在工業應用上具有重要價值，并且對于這些應用，期望在傳統的菜籽油中盡可能高地增加45%水平，以提高高芥子酸菜籽(HEAR)油及其衍生物的經濟競爭力。除在蕓苔油中常見的脂肪酸之外，植物界成員產生超過200種不常見的脂肪酸，特別是在非農學植物中(vandeLoo等，1993；Thelen&0hlrogge,2002Jaworski&Cahoon，2003)。許多這些脂肪酸具有營養益處或工業用途。然而，大多數這些植物具有有限的馴化潛力。由于含油種子生產相對低的成本和可再生的特性，因此包括蕓苔含油種子在內的含油種子作物可被改性來產生新的脂肪酸，作為石油衍生的工業原料的替代來源(CahOOn，2003；Thelen&0hlrogge,2002)。常規育種有助于開發瞄準不同市場的四種主要類型的具有改變的脂肪酸組成的蕓苔油(Burton等，2004；Przybylski，2005)。這些開發是在蕓苔屬物種中使用天然和人工誘發突變的植物育種的結果。低芥子酸在使用高C22:1的菜籽油的動物飲食研究中鑒定了潛在的人體健康影響之后，于1950年代開始了低C22:1的蕓苔油的選擇和開發。動物研究顯示高C22:1菜籽油飲食與心肌損傷相關，表現出心臟和腎臟周圍脂肪沉積以及心臟中肌肉損傷。1959年，從德國春季型歐洲油菜飼料栽培品種Liho中首次鑒定到了具有在種子油中低水平的C22:l的突變體(Stefansson等，1961)。將低C221植物與適合的栽培品種回交。在北美洲和歐洲，已有從傳統油菜籽和低芥子酸品種完整轉換為雙低油菜品質品種的商業性生產存在。高芥子酸和超高芥子酸盡管在營養上不合需要，但是高C22:l油類和C22:l衍生物具有超過200種潛在的工業應用，例如作為潤滑劑和溶劑中的添加劑，作為織物軟化劑以及酰胺衍生物用于制造聚合物、高溫流動性潤滑劑、表面活性劑、增塑劑、表面涂層和藥物(Scarth&McVetty，2006)，以及公布了超過1000項關于C221應用的專利(Mietkiewska等，2004)。為與基于石油的產品競爭，期望盡可能高地增加C22:1水平以減少純化費用。最初的具有低芥子油苷含量的高芥子酸油菜籽(HEAR)栽培品種，例如cv.Hero(Scarth等，1991，1992)、cv.Mercury(54%C22:1；Scarth等，1995a)、cv.Castor和MilleniUM01(C22:155%;McVetty等1998,1999)是可以利用的。此外，具有高芥子酸含量的合適的品種是cv.Hearty,Maruca.Maplus.已通過經雜交挑選的兩種祖二倍體品系——蕪菁(B.rapa)和甘藍(B.oleracea)再合成歐洲油菜(Taylor等，1995)，從而逼近了增加C22:l水平的目標。再合成的植物可積累C22:l水平至高達60%(Liihs&Friedt，1995)。已知涉及C22:l合成的基因和等位基因(Scarth&McVetty，2006)，因此利用定向(標記輔助育種)和/或轉基因方法來增加C22:1含量都是有可能。具有大于80%C22-.1水平的超高芥子酸菜籽(SHEAR)油期望能降低生產作為一種可再生的、環境友好的工業原料的該脂肪酸及其衍生物的成本。通過表達旱金蓮(TropaeolummajusL.)FAE基因C221水平增加90%(Mietkiewska等，2004)，證實了使用FAE基因由高-C22:l累積物種來增加蕓苔種子油中C22:l積累的潛在應用。低亞麻酸C18:3和C18:2，與它們的更長鏈和更不飽和的衍生物一起構成了人體發育和健康所必需的兩個系列的必需多不飽和脂肪酸(PUFA)，分別屬于n-3和n-6脂肪酸。然而，在PUFA的化學結構中增加數目的雙鍵使得它們對氧化敏感。與C18:l相比，C18:2和C18:3的氧化速率分別高大約10和25倍。因此，高C18:2和C18:3的油類在暴露在空氣中時就會變質得越快，特別是處于高溫時，導致縮短的油類貨架期，使得該油類對于人消費是較不健康的。通常地，較不穩定的油類會被氫化以增加穩定性，但氫化步驟會導致反式脂肪酸形成，由于它們的生理功能，其又引起關注。此外，氫化增加了加工商品油類的成本。最初的低C183雙低油菜品種，例如cv.stellar(3%C183)，品系‘Ml1，(Robbelen&Nitsch,1975)和cv.Apollo(Scarth等，1995b)是可利用的。已知涉及C221合成的基因和等位基因(Scarth&McVetty，2006)，因此利用定向(標記輔助育種)和/或轉基因方法來增加C22:l含量都是有可能的。高和非常高油酸具有高C18:1和低C18:3水平的油類具有更高的氧化穩定性，無需部分氫化，并且在油炸期間產生較少的不合需要的產物。高油酸油具有與飽和脂肪相當的熱穩定性，并且適合在需要長期穩定性的商業飲食服務應用中取代它們。描述了具有80-90%C18:l的高油酸含量的品系(Vilkki&Tanhuanpaa,1995；Riicker&R6bbelen，1995；Schierholt&Becker,1999；Wong等，1991)。市售的是具有70-75%C18:l和降低的C18:3水平的cv.ClearValley75和M0N0LA(Scarth&McVetty，1999)。高C18:l突變與歐洲油菜中fad2基因相關(Laga等，2004)。在芥菜型油菜(B.juncea)中，在C18:l水平中，兩個QTLs共同可占32.2%變化(Sharma等，2002)。在通過A12-去飽和酶和FatB硫酯酶工程化開發非常高C18:l含油種子中已取得了相當大的進展。使用有義或反義A12-去飽和酶構建體的轉基因歐洲油菜在種子油中能積累高達89%C18:l，并且PUFA級分減少(評述于Scarth&McVetty，2006中)。特別優選地是高油酸和低亞油酸組合的油組成，其產生了具有非常好的油炸品質的油類。這樣的性狀存在于例如品種cv.Splendor中。低和非常低飽和脂肪酸C16:0是包括蕓苔油的植物油的總飽和脂肪酸水平的主要組成部分。C16:0以及更短鏈的脂肪酸C8:0-C14:0被廣泛報道增加動物和人中血漿總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。雙低油菜油是唯一符合美國和加拿大的標簽條例中所規定的低飽和油類(<7%)標準的商用植物油。期望進一步降低飽和脂肪酸水平以達到零飽和脂肪水平。描述了具有小于6%的進一步減少的水平的品系(Raney68等，1999)。一種替代“傳統”育種用于減少飽和水平的方法在于調節包括KAS、去飽和酶和硫酯酶的多種基因的表達(DeheSh，2004；Scarth&McVetty，2006)。描述了與在非轉化的歐洲油菜植物中約6.0%的水平相比，具有低于3.4%的總飽和脂肪酸水平的轉基因蕓苔(Dehesh，2004)。高水平的短鏈和中鏈脂肪酸(高月桂酸、高辛酸和癸酸)富含短鏈和中鏈脂肪酸(SMCFA)的植物油在多個食品和非食品工業中是有用的。目前，SMCFA的商業來源是椰子油和棕櫚仁油。蕓苔種子油具有幾乎無法被檢測到的水平的C8:0、C10:0和C12:0的痕量SMCFA。通過使用各種基因的轉基因方法，可獲得顯著水平的SMCFA。這樣地轉基因植物產生具有高達56mol%C12:0的種子油(Voelker等，1996)。Bay-FatB轉化的歐洲油菜植物的種子油在SMCFA水平中類似于椰子油和棕櫚仁油的組成(Voelker等，1996)，所述椰子油和棕櫚仁油用于食品例如巧克力、糖果包衣、糖膏、非乳制奶油、低脂人造黃油、肥皂、洗滌劑和化妝品中。在用CupheaFatB2硫酯酶基因轉化后的蕓苔中獲得了高達40%C8:0和C10:0(Dehesh等，1996)。高棕櫚酸在表達FatB硫酯酶和來自MCFA-累積植物物種的KAS的轉基因植物中觀察到種子油C16:0水平的明顯增加。表達CupheaChFatBl基因的轉基因植物具有高達34mol%的C16:0水平(Jones等，1995)。在表達來自榆樹(美國榆(UlmusamericanaL.))和肉豆蔻(MyristicafragransHoutt.)的FatB基因的轉基因歐洲油菜植物的種子油中發現了類似的C16:0水平(Voelker等，1997)。高硬脂酸具有高飽和脂肪酸水平的植物油用于制造固體脂肪食品，例如人造黃油和起酥油，節約了氫化成本并避免了產生不需要的反式脂肪酸。C18:0優于其他類型飽和脂肪酸，原因在于其降低了血清脂蛋白膽固醇或對之沒有影響。雙低油菜栽培品種在種子油中僅具有1.1_2.5%C18:0。業已報道了非天然或誘導的高C18:0蕓苔種質。但是，描述了控制C18:0水平的基因(評述于Scarth&McVetty，2006中)。描述了歐洲油菜ffestar品種(B.napuscv.ffestar)產生的種子油具有高達10.1%C180(Hitz等，1995)。歐洲油菜Quantum品種(B.napuscv.Quantum)中來自倒捻子(mangosteen)的FatA基因的表達增加了超過22%的C180水平(Hawkins&Kridl，1998)。與野生型FatA版本相比，來自位點特異性誘變的突變的倒捻子FatA的表達導致C180水平55-68%的增加(Facciotti等，1999)。第二種策略是過表達八9-去飽和酶，該酶指導碳流至(18:14〔？生產。降低的A9-去飽和酶活性會導致更高的C18:0累積(Knutzon等，1992)。盡管使用大豆A9-去飽和酶的有義抑制在歐洲油菜中無效(Hitz等，1995)，但是使用蕪菁A9-去飽和酶基因的反義抑制在轉基因蕪菁中增加C18:0水平至大于32%以及在歐洲油菜中增加至大于40%(Knutzon等，1992)。第三種策略是同時操縱兩種酶的活性。過表達FatA硫酯酶并下調節A9-去飽和酶，增加C18:0水平至45%，較單獨表達FatA硫酯酶轉基因(11%C18:0)和A9-去飽和酶轉基因(13%C18:0)更高(T6pfer等，1995)。啟動了具有包含靶基因反向重復序列的雙沉默構建體的歐洲油菜和芥菜型油菜中FatA和FatB的下調節(Pandian等，2004)。一種用于開發高C18:0蕓苔油的額外方法可下調節A9和△12去飽和酶的活性，如在對于兩種去飽和酶用發夾RNA沉默構建體工程化的棉籽中所示的，將棉籽C180水平從2-3%增加到40%(Liu等，2002)。多不飽和脂肪酸(PUFA)y-亞麻酸(GLA)是一種必需脂肪酸n_6家族中的PUFA。69GLA是一種人和動物飲食中在營養上重要的多不飽和脂肪酸。描述了用于表達這些脂肪酸的基因(論述于Scarth&McVetty，2006)。極長鏈多不飽和脂肪酸(VLCPUFA)具有20或22個碳原子，帶有4-6個中斷的雙鍵，包括在人中具有重要治療和營養益處的脂肪酸，例如花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。蕓苔物種像其他高等植物一樣不產生極長鏈PUFAs例如ARA、EPA和DHA。GLA和ALA并不常見于高等植物中。為開發富含ARA和EPA的含油種子，必須導入至少三個基因(Abbadi等，2004)。在煙草中證實了工程化ARA途徑的可行性(Huang等，2004)。共軛脂肪酸是具有不為甲叉單元所分離的雙鍵的多不飽和脂肪酸。在涂層應用中，富含共軛脂肪酸(例如十八碳三烯酸)的油類具有作為干性油的優異特性。來自編碼將共軛雙鍵導入多不飽和脂肪酸的酶的金盞花(CalendulaofficinalisL.)基因的表達導致在大豆油中累積了20-25%總脂肪酸的十八碳三烯酸(Cahoon等，2001)。環氧脂肪酸例如斑鳩菊酸是通過單加氧酶和二鐵去飽和酶的趨異型所產生的(Hatanaka等，2004)，并且是用于生產樹脂、膠、塑料、聚合物等的有價值的原材料。其他新的脂肪酸“新的”或“不常見的”脂肪酸寬廣地定義為具有不同于在主要含油種子作物中常見的那些脂肪酸的化學結構的脂肪酸(JaWOrSki-&Cah00n，2003)。通過特定的去飽和酶產生了不常見的單不飽和脂肪酸，該去飽和酶將雙鍵插入酰基鏈中不常見的位置處，而非如在常見的脂肪酸C18:l中所看到的碳8-9之間。在生產生物可降解的潤滑劑、表面活性劑和塑料前體中，富含巖芹酸或棕櫚油酸的植物油可用作石油的代用品。此外，在本發明的一個優選的實施方案中，由雜種種子生長成的本發明的蕓苔屬植物產生了種子，在收獲和破碎后，其產生了具有選自如下組成的油a)小于2%的芥子酸(erucicacid)含量，b)大于45%的芥子酸水平，c)大于70%的油酸含量，d)小于8%的a-亞油酸含量，e)小于8%的亞麻酸含量，f)小于10%的飽和脂肪酸含量，g)大于20%(優選20-35%)的硬脂酸含量，h)大于10%，優選大于20%的短鏈和中鏈脂肪酸(優選自月桂酸、辛酸和癸酸)含量，i)大于20%，優選大于30%的棕櫚酸含量，和j)大于10%，優選大于20%的多不飽和脂肪酸(優選地，長鏈多不飽和脂肪酸選自花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，或共軛多不飽和脂肪酸例如共軛亞油酸(CLA))含量。6.2除草劑抗性性狀在本發明的另一個優選的實施方案中，本發明的歐洲油菜植物進一步包含除草劑抗性性狀。除草劑抗性可包括例如針對孟山都以ROUNDUP商標名出售的除草劑草甘膦的抗性。草甘膦是一種廣泛使用的除草劑，因為迄今在植物的生長部分種類及并且具有很少的土壤殘留物或沒有土壤殘留物。視情況，如在公知的US5，387，758(在此并入作為參考)中所描述的，用于容忍當按能破壞本發明缺少所述遺傳手段的油菜植物的比例應用的除草劑的遺傳手段任選地還70可摻入本發明的油菜植物中。在雙低油菜中有兩種基因涉及草甘膦抗性。一種編碼解毒的酶除草劑；其稱為G0X，草甘膦氧化還原酶。另一種是編碼EPSP合酶突變體的突變的靶基因。基本上，將上述基因導入植物細胞中，例如攜帶有Ms系統的遺傳成分的本發明的植物細胞中，然后將該植物細胞生長成蕓苔屬植物。另一種優選的除草劑抗性，其既可作為轉基因又可作為天然突變的基因型獲得，是針對咪唑啉和/或碘酰脲類除草劑(例如PURSUIT)家族的抗性。針對咪唑啉的抗性是基因AHAS或ALS所賦予的。本領域技術人員會將存在于任意的CLEARFIELD油菜籽中的AHAS的突變型導入還攜帶有本發明的Ms系統的遺傳成分的蕓苔屬植物中。可選地，通過本領域公知的幾種方法的任何一種，可以將帶有合適的啟動子的AHAS基因的修飾型導入油菜籽植物細胞中。基本上，將上述基因導入植物細胞中，例如攜帶有任何一種本發明的Ms系統的遺傳成分的本發明的植物細胞中，然后將該植物細胞生長成蕓苔屬植物。7.一般技術7.1性狀和基因滲入本發明的Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因、rf等位基因(或它們的任何組合)可滲入歐洲油菜和其他蕓苔屬品種的任何遺傳背景中。轉基因技術根據本發明的另一個方面，對于Ms和/或rf等位基因，包含基因組序列的核酸(優選DNA)序列可用于生產轉基因雜交系統。所述核酸序列可來源于在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的種子。本發明還涉及一種生產具有基因型MsMsrfrf的雄性不育歐洲油菜植物或具有基因型msmsrfrf的歐洲油菜保持系植物的方法，包括步驟執行一種檢測與雄性不育相關的Ms等位基因和/或rf等位基因存在的方法，和/或執行一種如上所述在根據本發明的歐洲油菜植物中保持雄性不育的方法，和將包含至少一種如此檢測到的Ms等位基因或rf等位基因的核酸序列，或賦予或保持雄性不育的其部分，從所述供體植物轉移到受體植物(優選蕓苔屬植物，更優選歐洲油菜植物)。可通過任何本領域已知的方法包括農桿菌介導的基因轉移或微粒介導的基因轉移，進行所述核酸序列的轉移。非轉基因技術這樣的方法的一個優選的實施方案包括通過雜交所述植物，由基礎雌性或保持系歐洲油菜植物(例如來源于在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的種子的植物)基因滲入所述核酸序列的轉移。因此，該轉移可適合與傳統的育種技術一起使用。在每一世代中，確定Ms等位基因和/或rf等位基因的存在與否。由于雄性不育表型，恢復系等位基因的存在與否可容易在每一世代中檢測，例如通過能育性計分(fertilityscoring)。在最后一次回交發生后，優選進行自交步驟。在下一世代中，如在本發明中所描述的，分子標記用于選擇對于Ms等位基因和/或rf等位基因是純合的植物。這些植物代表了可用于生產雜種種子的預基礎雌性系(MsMsrfrf)或保持系(msmsrfrf)。優選通過使用上述的標記輔助選擇(MAS)或標記輔助育種(MAB)，將Ms等位基因和/或rf等位基因基因滲入商用歐洲油菜品種中。MAS和MAB涉及使用一種或多種分子標記用于鑒定和選擇那些包含一種或多種編碼所需性狀的基因的子代植物。在本發明的實例中，這樣的鑒定和選擇是基于Ms等位基因和/或rf等位基因或與之相關的標記的選擇。根據該實施方案開發的歐洲油菜植物可有利地從受體植物中獲得它們的大部分性狀，以及71從供體植物(即基礎雌性系或保持系)中獲得賦予或保持特性的雄性不育。在一種稱為譜系選擇的方法中，將顯示賦予或保持特性的雄性不育的供體歐洲油菜植物(如本發明的預基礎雌株或保持系植物)與缺少所述特性但優選顯示商業上所需特性的受體歐洲油菜植物雜交，所述商業上所需特性例如但不限于抗病性、抗蟲性、有價值油類和/或粕特性等。然后，將所得到的植物種群(表示為&雜種)進行自花傳粉，并使之產生種子(F2種子)。接著，對由F2種子生長成的F2植物篩選賦予或保持特性的雄性不育。可以多種不同方式篩選該種群。首先，可通過分別評估品系的不育性或能育性或它們的特性篩選種群以保持不育性。其次，可使用上述一種或多種分子標記進行標記輔助選擇以鑒定那些包含Ms等位基因和/或rf等位基因的后代。涉及上文中通過相關的表型用于檢測Ms等位基因和/或rf等位基因存在的方法的其他方法也可使用。同樣，標記輔助選擇可用于證實由定量生物測定所獲得的結果，因此，幾種方法還可組合使用。本發明進一步包括一種基因滲入Ms等位基因和/或rf等位基因的方法，包括步驟獲得包含Ms等位基因和/或rf等位基因的蕓苔屬植物，例如在保藏編號NCIMB41480或41481下分別保藏的蕓苔近交系，將該植物與另一種蕓苔屬植物雜交并選擇包含Ms等位基因和/或rf等位基因的種子。將得到的h植物與輪回親本雜交以取代更多的蕓苔近交系的基因組，特別是80-99.5%的基因組，更特別是90%-99%的基因組，但尤其是95%-98%的基因組。將包含Ms等位基因和/或rf等位基因的植物對具有目標遺傳背景的品種至少回交兩次。在第2次回交中，進行能育雌性系(包含來自具有目標背景的能育品種的Rf等位基因)的平行自交以獲得BC0S1植物。在隨后的育種步驟中只利用包含Ms和rf等位基因(自交后產生不育植物)的植物。在每一個BC世代中進行個自交和平行雜交過程。可選地，可使用標記技術追蹤Ms等位基因和/或rf等位基因的存在與否。可使用輪回選擇和回交、自交和/或雙單倍體技術或任何其他用于制備親本系統的技術開發雄性不育基礎雌性近交系或保持系。在輪回選擇和回交方法中，通過將輪回親本與第一供體植物雜交，可將涉及或保持雄性不育的基因型基因滲入靶受體植物(“輪回親本”)中，所述第一供體植物不同于輪回親本并在此被稱為“非輪回親本”。輪回親本是一種缺少賦予或保持雄性不育特性并且優選具有商業上所需特性的植物，所述商業上所需特性例如但不限于(額外的)抗病性、抗蟲性、有價值油類或粕特性等。非輪回親本顯示雄性不育賦予或保持特性并包含編碼Ms等位基因和/或rf等位基因的核酸序列。非輪回親本可以是任何與輪回親本雜交可育的植物品種或近交系。將輪回親本和非輪回親本之間雜交所得到的后代與輪回親本回交。然后針對所需特性篩選所得到的植物種群，該篩選可以多種不同方式來進行。例如，可使用本領域已知的表型病理學篩查法或定量生物測定法進行種群篩選。可選地，代替使用生物測定法，可使用一種或多種上文中描述的分子標記、雜交探針或多核苷酸來鑒定那些包含編碼Ms等位基因和/或rf等位基因的核酸序列的后代，以進行標記輔助選擇(MAS)。同樣，MAS可用于證實定量生物測定獲得的結果。因此，在此定義的標記最終適合于通過基因型篩選來選擇合適的子代植物。篩選后，選擇顯示雄性不育賦予或保持表型的或更優選顯示雄性不育賦予或保持基因型并因此包含編碼Ms等位基因和/或rf等位基因的必需核酸序列的歐洲油菜植物，并與輪回親本回交持續多個世代，以致使得歐洲油菜植物變得格外近交。該方法可進行2-5個或更多個世代。原則上，由輪回親本與涉及或保持雄性不育的非輪回親本雜交過程產生的后代對于Ms等位基因或rf等位基因是雜合的。純合植物可通過該植物自交并通過標記分析評估后代的基因型或進一步自交并檢測表型分離模式而獲得。一般而言，一種將所需的賦予或保持雄性不育性狀導入歐洲油菜品種中的方法包括步驟(a)將歐洲油菜近交親本與另一包含Ms等位基因和/或rf等位基因的歐洲油菜植物雜交以產生&后代植物；(b)選擇具有所需Ms等位基因和/或rf等位基因的所述后代植物以產生經選擇的&后代植物，優選使用在此定義的分子標記；(c)將經選擇的后代植物與所述的歐洲油菜近交親本植物回交以產生回交后代植物；(d)對回交后代植物選擇具有所需Ms等位基因和/或rf等位基因以及所述歐洲油菜近交植物的形態學和生理學特性的植物，其中所述選擇包括分離基因組DNA并針對Ms等位基因和/或rf等位基因測試所述DNA中至少一種分子標記的存在，優選如在此所描述的；(e)重復步驟(c)和(d)兩次或更多次繼而產生經選擇的第三代或更高代回交后代植物；和(f)任選地自交選擇的回交后代以便鑒定純合植物。如所指示的，可自交最后一個回交世代以便提供用于賦予或保持雄性不育的純合的純育(近交)后代植物。因此，輪回選擇、回交和自交的結果是產生了在遺傳學上對于Ms等位基因和/或rf等位基因以及對于與商業上感興趣的性狀相關的其他基因是純合的品系。在一個用于生產本發明的雄性不育系或保持系蕓苔屬植物的可選的實施方案中，原生質體融合可用于將本發明的Ms等位基因或rf等位基因轉移到受體植物。通過該方法，本發明的雜交系統可在用于其他物種，優選用于其他蕓苔物種例如甘藍。原生質體融合是一種誘發或自發的聯合，例如在兩個或更多個原生質體(其細胞通過酶處理除掉細胞壁)之間進行體細胞雜交產生單一雙核或多核細胞。融合細胞可甚至獲得自在自然界中沒有進行品種間雜交的植物物種，經組織培養成具有所需性狀組合的雜種植物。更具體地說，第一原生質體可獲得自本發明的歐洲油菜植物(例如來源于在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的種子的植物)。第二原生質體可獲得自另一種歐洲油菜例如其他蕓苔物種或其他植物品種，優選包含商業上有價值的特性例如但不限于抗病性、抗蟲性、有價值的果實特性等的蕓苔品系。然后，使用本領域已知的傳統的原生質體融合方法融合原生質體。可選地，胚拯救可用于將在此描述的包含Ms和/或rf等位基因的核酸從供體植物轉移到受體植物。胚拯救可用作一種從其中植物無法產生有活力的種子的雜交中分離胚的方法。在該方法中，對植物已受精的子房或不成熟的種子進行組織培養以產生新植物(Pierik,1999)。其他技術可額外地或替代地用于基因和性狀的基因滲入。這樣的技術可包括使用雙單倍體技術(Fletcher等，1998)，對于預基礎系和保持系，其能顯著增加近交世代的速度。對于預基礎系，需要利用熱處理操作，因為要不然小孢子會敗育。7.2創建差異基因庫利用雜種優勢最大效應以及長期成功的雜種優勢育種需要具有高遺傳差異性的親本。油菜的窄遺傳基礎是在長期育種中增加雜種性能的限制因素。通過導入再合成的基因型(Girke，2002)并使用相互反復選擇方法，該遺傳基礎肯定會逐步延伸。尤其在冬雙低油菜中，可觀察到現有商用品種的窄遺傳相關(r=0,87)(Girke,2002)。具有較固定最小值更低的遺傳距離的親本系并不值得在田間進行檢測。可通過同工酶分析(Miindges等，1990)或更便利地通過標記(RFLP:Beckmann&Soller,1983；Botstein等，1980；RAPD(隨機擴增多態DNA):Williams等，1990；Forster&Knaak,1995)檢測距離。這減少了產量試驗的工作量。7.3在育種中的應用本發明的植物可用于多種繁殖活動，包括但不限于a)雜種的自交遞降(SelfingDown)培養包含本發明的新的Ms等位基因和/或rf等位基因的低芥子油苷雜種。能育植物進行自花傳粉，一些使用袋子，其他通過人工刷花粉。由這些&植物收獲&種子并種植作為種群。選擇來自該種群的能育植物并生長作為F3畦(row)，從而提供用于育種方法例如譜系選擇、輪回選擇等的起始材料。b)在傳統育種中作為親本將包含本發明的Ms等位基因和/或rf等位基因的品系與作為育種計劃一部分的其他種質品系雜交。生長來自這些雜交的&。能育植物自花傳粉并收獲所得到的F2種子。挑選、收獲來自F2種群的能育植物并生長作為F3畦，從而提供用于育種方法例如譜系選擇、輪回選擇等的起始材料。c)在雙單倍體中作為親本將本發明的Ms等位基因和/或rf等位基因的來源與改良的種質雜交。所得到的雜種經歷小孢子培養產生雙單倍體恢復系。所利用的小孢子培養類似于Chen等(1994)和Mollers等(1994)所描述的那些小孢子培養。因此，本發明的另一個實施方案涉及一種生產本發明的歐洲油菜植物(例如基礎、預基礎或保持系)的方法，包括步驟i.選擇具有包含選自Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因和Rf等位基因的等位基因的小孢子的雄性能育親本；ii.由所選擇的步驟(i)的雄性能育植物培養經選擇的小孢子，形成單倍體并包括雙單倍體；iii.對雙單倍體后代檢測與所述等位基因相關的表型或通過標記檢測等位基因的存在；和iv.選擇對于所述等位基因的存在是陽性的后代。d)在回交計劃中作為起源將包含Ms等位基因和/或rf等位基因的材料與挑選的近交系雜交。雄性能育植物去雄并再與近交系(輪回親本)雜交。將所得到的雄性能育植物再與近交系回交。在任一世代，材料的自交遞減可開始產生新的恢復系。這些計劃例證了一種將Ms等位基因和/或rf等位基因帶入優良種質中的回交計劃。可使用標記分析(如上所述的)。根據閱讀下列實施例和附加的權利要求，本發明的這些和其他目的和優點對于本領域技術人員是顯而易見的。保藏物歐洲油菜近交系07055001(雄性不育預基礎種子系；基因型MsMsrfrf)的種子樣品于2007年5月16日保藏在NCIMB，Ltd.(NCIMBLtd；FergusonBuilding,CraibstoneEstate,Bucksburn,Aberdeen,AB219YA,UK；Tel:+44(0)1224711lOOFax+44(0)1224711299)，保藏編號NCIMB41480。歐洲油菜近交系04058001(“保持系”;基因型msmsrfrf)的種子樣品于2007年5月16Hf^^NCIMB,Ltd.(NCIMBLtd；FergusonBuilding,CraibstoneEstate,Bucksburn,Aberdeen,AB219YA,UK；Tel+44(0)1224711lOOFax:+44(0)1224711299)，保藏編號NCIMB41481。關于生物材料來源的聲明Ms和rf等位基因獲得自1998年歐盟(德國和其他國家)市售的歐洲油菜材料。具體實施例方式下列實施例旨在提供本發明應用的例證，并不意在完全規定或限制本發明的范圍。實施例1:GSL分析在育種計劃全過程中監測蕓苔種子的芥子油苷(GSL)含量。芥子油苷含量以iUmol/克9%水分含量的種子給出。可使用現有技術例如HPLC或近紅外反射光譜法(NIRS)進行芥子油苷分析。利用NIRS法，可對未受破壞的蕓苔種子樣品分析它們的品質構成油類、蛋白和芥子油苷。在此討論的芥子油苷水平根據兩種標準方法進行測定，S卩(1)如用于總全芥子油苷定量的ISO9167-11992(E)中所描述的高效液相色譜法(HPLC)(“油菜籽-芥子油苷含量的測定一第1部使用高效液相色譜的方法，國際標準化組織”，日內瓦)，和(2)如通過Sosulski和DabrOWSki(1984)所描述的，用于提取并純化的脫硫芥子油苷的三甲基甲硅烷(TMS)衍生物定量的氣相色譜法。在此討論的用于測定芥子油苷水平的HPLC和TMS法均涉及破碎和提煉油后種子固體成分(即脫脂或無油粕)的分析。更優選地，使用近紅外反射光譜法進行芥子油苷分析。該分析在F0SSNIRSystemsModel5000-c上進行。芥子油苷分析描述于Williams&Sobering(1992)中。實施例2測定脂肪酸組成的方法根據標準方法測定在此討論的脂肪酸濃度，其中通過破碎從蕓苔含油種子中除去油，隨后與甲醇和甲醇鈉(sodiummethoxide)反應作為脂肪酸甲酯提取。接著，通過使用毛細管柱的氣液色譜法對所得到的酯分析脂肪酸含量，該氣液色譜法容許在不飽和度和鏈長的基礎上進行分離。該分析方法描述于Daim等(1983)的工作中，其在此并入作為參考。實施例3純合的預基礎雄性不育系的開發使用歐洲油菜品種Zenith的花粉對雄性不育Takagi種質歐洲油菜植物傳粉。該雜交的&后代是雄性能育的。在溫室中將那些植物與人工除雄后的品種Smart的雄性能育植物雜交。？工植物由溫室中每一植物的雜交種生長起來。所有植物都顯示雄性能育表型。通過用塑料袋(CryovacCrispacBeutelSuperMicroLochung360x830mm，供應商BaumannSaatzuchtbedarfD-74638ffaldenburg)分離單株植物，自交在該種群之外的單株植物。在溫室中對雄性不育/能育性測試F2自交后代。10個種群中的8個是能育的，其他2個種群顯示不育性/能育性分離。如在以下實施例10中所描述的，在高溫度條件下自交75來自這些種群的不育植物。那些雄性不育植物的&種群再在溫室中生長并自交。僅3個種群顯示雄性不育植物，而10個種群分離成雄性不育和雄性能育植物。在熱處理下自交來自非分離種群的雄性不育植物。根據圖1給出的遺傳方案并通過標記分析證實，這些植物顯示基因型MSMSrfrf。在溫室中生長出264株F4植物。它們都顯示雄性不育表型。在熱處理后，可從所有植物中收獲總計232g的種子。實施例4:保持系的開發當它們顯示rfrfmsms時，自交在來自實施例3的分離F3種群之外的雄性能育植物(圖1)。進行與完全雄性不育F3種群植物的測交。使用16株植物各自評估5種不同的雜交。所有植物均顯示雄性不育表型，前提是雜交是如所推測的rfrfMSMSxrfrfmsms。在保持系中不存在Rf等位基因是關鍵的。為確保這一點，對該等位基因必須具有標記。來自恢復系的異花傳粉無法被檢測到，因為在保持系和恢復系之間不存在表型差異。實施例5鑒定與RHS不育等位基因(Ms等位基因)連鎖的分子標記對對于RHS不育性基因座分離的162株個體的F2種群運行分離種群分組分析法(BSA)(Michelmore等，1991)實驗。該種群來源于RHS-不育系(ID=03550015-34；如通過在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子樣品所代表的)和相應的RHS-能育保持系(ID03560006-08；如通過在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子樣品所代表的)之間的雜交。將在&種群中觀察到的對于雄性不育的分離擬合對于單顯性基因預期的31比率。一組762條微衛星標記(SSR)用于檢測在親本系之間以及在雄性不育和雄性能育&植物集團之間的多態性。兩個不同的雄性能育和雄性不育集團得到分析。所述集團由來自10株能育或10株不育F2植物的葉樣品混合物組成。BSA披露了在兩個親本系之間以及在雄性不育和雄性能育集團之間的5個顯示多態性的SSR標記(圖4-A)。隨后在整個F2種群中對這些5個SSR標記進行基因分型并使用Mapmaker/Exp(3.Ob版)作圖。作圖結果證實標記NR1116(通過寡核苷酸引物SEQIDNO:1和2擴增的SSR;SSR區如SEQIDNO:21所示；對于引物和SSR基序的定位還參見圖6)和NR2525(通過寡核苷酸引物SEQIDN0:4和5擴增的SSR;SSR區如SEQIDNO:22所示；對于引物和SSR基序的定位還參見圖7)與染色體N7上的雄性不育等位基因(Ms)緊密連鎖(表2)。NR1116正向引物序列5，-TCTTCAAGGGATTCATTCGG-3，(SEQIDNO1)NR1116反向引物序列5，-GAAACTTCGTCGAATCCTCG-3，(SEQIDNO2)NR2525正向引物序列5，-ATTACCATTTCCAACGAATCT-3，(SEQIDNO4)NR2525反向引物序列5，-GTCTCTTTCTCAACTCTTGTATC-3，(SEQIDNO5)SSR標記NR1116由大約20個單元的GA/CA重復組成。在RHS_Ms作圖群(使用ABI3700測序儀)中觀察到的等位基因大小對于RHS-不育系(0355015-34)為96.7(+/_1)bp(雄性不育等位基因)，以及對于RHS-保持系(03560006-08)為112.3(+/-0.4)bp(雄性能育等位基因)。SSR標記NR2525由大約20個單元的AG重復組成。在RHS_Ms作圖群(使用ABI763700測序儀)中觀察到的等位基因大小對于RHS-不育系(0355015-34)為192.8(+/_0.3)bp(雄性不育等位基因)以及對于RHS-保持系(03560006-08)(雄性能育等位基因)沒有條帶。原因在，對于MsNR2525被計為顯性標記。觀察到另一條194.6(+/-0.5)bp的片段，但沒有考慮到該條帶，因為其不變地出現在所有植物個體中，而與它們的表型無關。根據表型預測Ms等位基因的基因型雄性不育植物可以是‘Msms’或‘MsMs’，但雄性能育植物則總是‘msms，。因此，Ms等位基因被定位為顯性標記。因此，NR1116和NR2525定位在Ms性狀的任意一側，分別具有2.8cM和6.OcM的遺傳距離(參見表2)。對于Ms和ms等位基因，計算的距離基本上相同。表2使用Mapmaker(3.Ob版)計算的位于染色體N7上的Ms和側翼標記之間的圖距。標記間的遺傳距離以厘摩(cM)來估計，并與種群中發現的重組體數目成正比。用于BSA或用于SSR標記的定位的試驗條件由分子標記領域技術人員公知的常規的實驗方案組成。用于BSA篩選的PCR擴增在來自AppliedBiosystemsInc.的GeneAMPPCRSystem9700設備上的384孔板的10yl的總反應體積中運行，使用SigmaJumpstartTaq聚合酶。PCR混合物由來自Sigma的IX反應緩沖液，1.65mMMgCl2，0.25mMdNTPs和400nM每種引物組成。PCR條件通常由如下組成94°C，2min，然后40個循環(94°C，15秒，59°C，45秒)，以及最終在72°C溫育2min。隨后，根據供應商的使用說明書，將擴增產物加載并遷移到3%Resophor瓊脂糖1000(來自InvitrogenCorp.)凝膠上。為了定位目的，用于PCR擴增的引物包含至少一條標記有HEX(5’-六氯-熒光素)、NED(苯并氟三氯羧基-熒光素)或FAM(羧基熒光素)的引物，以便能在ABI3700測序儀上進行熒光檢測以解析并計分長度多態性。除使用熒光標記的引物之外，用于SSRs定位的PCR條件與用于BSA篩選的相同。實施例6:SSR標記轉換為SNP標記.為了將SSR標記轉換為被證實對于標記輔助育種更通用的SNP標記，在包含純合的雄性不育系(MsMs)和純合的雄性能育系或保持系(msms)的品系組中對SSR標記的擴增產物進行測序，每次8條。每個雄性不育系和保持系的組合代表了不同的遺傳背景。BLAST分析使用NR1116的核苷酸序列(SEQIDNO:21)作為針對NCBI上的基因組測繪序列數據庫(genomicsurveysequencedatabase)(GSS)的詢問，顯示在NR1116和具有登錄號BH708933的來自甘藍的GSS片段之間的高序列同源性。該同源性在緊接下微衛星基序的游延續了大約0.4Kb的長度，并能用于設計推定的基因組(蕪菁)_特異性引物HiNK6440和6442(分別為SEQIDNOs:7和8)。77寡核苷酸引物HiNK64405，-GTTCACTTCTCATCTTCTTCCAG-3，(SEQIDNO7)寡核苷酸引物HiNK64425，-TCCTGGCAATCAGACAATACTT-3，(SEQIDNO8)對在MsMs和msms品系中獲得的擴增產物的序列分析揭示了兩個顯示與雄性不育性狀相關的單倍體型。表3概述了區分兩種單倍體型的多態位置的位置；共有序列如SEQIDNO3所示。表3觀察到的雄性不育和雄性能育單倍體型的特性。根據參考序列SEQIDNO3觀察到的多態性的類型和位置。(indel=缺失)使用AppliedBiosystemsInc.發布的引物Express2.0軟件并遵循相應的使用說明，選擇位于第214(T/C)和218(T/G)位的SNPs來來發TaqMan.檢測。稱為SR0002A的相應于該檢測的引物和探針序列列于表4中。表4用于Taqman檢測SR0002A的引物和探針的核苷酸序列。熒光染料FAM(羧基熒光素)；VIC(AppliedBiosystems專有縮語)。MGB小溝結合物。NFQ非熒光猝滅劑。微衛星標記NR2525的序列在登錄號BZ061557(SEQIDNO22)下公開。為了測量該序列片段與雄性不育性狀相關的等位變異性，針對該序列設計側接微衛星基序的PCR引物。寡核苷酸引物HiNK67025，-AGTAACATCAGCGGGGAAC-3，(SEQIDNO13)寡核苷酸引物HiNK67075，-TTTAAGAGCATTGGAACTCTCC-3，(SEQIDNO14)引物HiNK6702和6707的組合(分別為SEQIDNO13和14)顯示了兩種大概相應于A和C基因組的擴增產物；在多種不同的遺傳背景中，0.6Kb的較大的片段結果弄清楚是單態的，但較小的片段則顯示與雄性不育性狀相關的長度多態性，對于雄性能育等位基因為0.5Kb，與之相比對于雄性不育等位基因為0.4Kb(圖4B)。跨MsMs和msms系的該多態片段的序列分析揭示了三種單倍體型(表5)，如所期望的雄性不育Ms等位基因的一種單一的單倍體型(單倍體型B)，和雄性能育ms等位基因的兩種單倍體型(單倍體型A和C)。表5觀察到的雄性不育和雄性能育單倍體型的特征。根據參考序列SEQIDNO6觀察到的多態性的類型和位置(“.”指單核苷酸缺失)位置17-2560^S92105158224-302單倍體型BINDELA□TTCTAAAAACAGAAGGGAAAACCCACC79三種單倍體型的共有序列如SEQIDNO:6所示。如通過單倍體型的比對所顯示的，在多個位置上包括在為如上所述的TaqMan襝測設計所靶向的第158位的SNP上，雄性不育等位基因可與雄性能育等位基因相區分。被稱為SR0003B的在該檢測中使用的引物和探針的序列列于表6中。表6用于Taqman檢測SR0003B的引物和探針的核苷酸序列。熒光染料FAM(羧基熒光素)；VIC(AppliedBiosystems專有縮語)。MGB小溝結合物。NFQ非熒光猝滅劑。使用來自InvitrogenCorp的PlatinumTaq聚合酶和相應的酶混合物，衍生于NR1116和NR2525的TaqMan檢測通常在來自AppliedBiosystemsInc.的GeneAMPPCRSystem9700設備上的384孔板的10yl的反應體積中運行。PCR條件通常由如下組成最初的變性步驟94°C，2分鐘，然后是的40個擴增循環(94°C，15秒和62°C，60秒)。隨后使用SDS2.1軟件包，在來自AppliedBiosystemsInc的7900HT測序系統上定量熒光FAM和VIC信號。圖5顯示了一張使用在三塊不同的云簇中分離的純合雄性不育(MsMs)、雜合雄性不育(Msms)和純合雄性能育(msms)植物，針對標記SR0002A獲得的典型的圖。使用上述實驗方案，兩個標記都被定位在如實施例1中所描述的對于雄性不育性狀分離的&種群中。如所期望的，基于原始SSR標記的作圖位置，SNP測定了SR0003B和SR0002A定位在Ms性狀的任意一側，相對于Ms性狀分別具有的2.8cM和3.3cM的距離(表7)。表7使用Mapmaker(3.Ob版)計算的位于染色體N7上的Ms和側翼標記之間的圖距。標記間的遺傳距離以厘摩(cM)來估計，并與種群中發現的重組體數目成正比。Ms和ms等位基因顯示基本上相同的距離。如上所述，對于本領域技術人員顯而易見的是組合使用兩種標記能在油菜中進行可靠的Ms性狀基因分型。實施例7鑒定與RHS恢復系等位基因(rf等位基因)連鎖的分子標記為了開發用于Rf基因座的標記，對對于RHS能育性分離的190株個體的F2種群進行BSA(Michelmore等，1991)。該種群來源于RHS-不育系(MsMsrfrf)(ID:05056504，如在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子樣品所代表的)和恢復系(msmsRfRf)(ID:NKFAIR)之間的雜交。由于對于雄性不育Ms基因座在該雜交中同樣分離，因此如實施例5中所描述的在基于對SSRs標記NR1116和NR2525獲得的基因型的BSA篩選之前從種群中除去能育的msms植物個體。在僅包含MsMs和Msms植物的190株個體的亞種群中，將對于能育性的分離擬合對于單顯性基因預期的31比率。一組1225條微衛星標記(SSR)用于檢測在親本系之間以及在雄性不育和雄性能育F2植物集團之間的多態性。三個不同的雄性能育和雄性不育集團得到分析。所述集團由來自10株能育或10株不育F2植物的葉樣品混合物組成。BSA披露了在親本系之間以及在雄性不育和雄性能育F2植物集團之間的37個SSRs多態性。隨后在整個F2種群中對這些37個SSRs進行基因分型并使用Mapmaker/Exp(3.Ob版)作圖。根據所觀察到的表型預測Rf等位基因的基因型雄性能育植物可以是‘Rfrf’或‘RfRf’，但雄性不育植物則總是‘rfrf’。因此。Rf等位基因被定位為顯性標記。該作圖結果揭示了兩種與染色體N19上雄性能育性基因(Rf)緊密連鎖的SSRs，NR2219(SEQIDNO23)和NR3454(SEQIDNO26)(表8)。事實上，NR2219和NR3454分別定位在Rf任何一側的10.2cM和26.5cM的遺傳距離上。對于rf和Rf等位基因，所計算的距離基本上相同。業已如實施例5中所描述的，用于BSA或用于SSR標記的定位的試驗條件由分子標記領域技術人員公知的常規的實驗方案組成。用于SSRNR2219擴增的引物如下NR2219正向引物序列5，-ATTATCCTCTCGCCATTTC-3，(SEQIDNO19)NR2219反向引物序列5，-AAACTCCTGAACACCTCCTAC-3，(SEQIDNO20)用于SSRNR3454擴增的引物如下NR3454正向引物序列5，-GATGGTGATGGTGATAGGTC-3，(SEQIDNO24)NR3454反向引物序列5，-GAAGAGAAGGAGTCAGAGATG-3，(SEQIDNO25)SSRNR2219由大約27個單元的TA重復組成。對于雌性親本系(ID=05056504,如在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子樣品所代表的)的rf等位基因，在ABI3700測序儀上觀察到的等位基因大小為240.8(+/-0.4)bp，而對于恢復系(NKFAIR:Rf等位基因；恢復系等位基因)，則沒有獲得條帶。因此，NR2219在分離種群中起顯性標記作用等位基因240.8(+/-0.4)的存在相應于rf等位基因的純合和雜合狀況，而不存在等位基因240.8(+/-0.4)則相應于Rf等位基因的純合狀態。SSRNR3454由大約4個單元的TCA重復組成。對于雌性親本系(ID=05056504,如在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子樣品所代表的)的rf等位基因，在ABI3700測序儀上觀察到的等位基因大小為282(+/-0.38)bp,以及對于恢復系(NKFAIR:Rf等位基因；恢復系等位基因)則為290(+/-0.38)bp。表8使用Mapmaker(3.0b版)計算的位于染色體N19上的Rf和側翼標記之間的圖距。標記間的遺傳距離以厘摩(cM)來估計，并與種群中發現的量組體數目成正比基因座基因座之間的遺傳距離NR345426.5cM82實施例8在基因芯片上通過單特征多態性(SFP)檢測進行RHS恢復系基因(rf基因)的精細作圖通過在Syngenta專有的蕓苔Affymetrix基因芯片上對Rf基因進行近等基因系(NILs)雜交，獲得RHS恢復系基因(rf基因)的精細作圖。該蕓苔基因芯片的設計是一種通過Affymetrix實現的用戶定制設計。該基因芯片包含來源于代表了歐洲油菜、蕪菁或甘藍的152，362條蕓苔11111§61168的2.56百萬條探針。該unigenes由來源于位于PlantGDB(www.plantgbd.org,161A版，用于歐洲油菜和蕪菁，157a版，用于甘藍)的蕓苔EST集群的結合的共有序列組成。通過使用具有98%序列同一性閾值的cd-hit程序(//bioinformatics.ljcrf.edu/cd-hi/)組合3個集群獲得了結合的共有序列。共有序列各自被分成150個堿基長的探針選擇區(PSR)。平均起來，每個PSR4條探針，并沿著整個轉錄物避開內含子/外顯子邊界對每條轉錄物設計16條探針(僅僅完全匹配的探針)。將該約束條件應用于探針設計，從而確保了探針序列的唯一性、可比較的雜交效率并除去了Affymetrix推薦的雜交探針。為了能夠評估本底信號，17.000條抗基因組探針包括在芯片上。8對近等基因系用于該實驗中。這8對由8種不同的油菜品系(恢復系；Rf等位基因；恢復系等位基因)和它們相應的通過1次回交基因滲入保持系等位基因(rf等位基因)然后通過5次連續自交固定的近等基因系(表9)組成。通過55種沿19條歐洲油菜染色體適當分布的多態SSR標記的基因分型評估品系的基因純化水平。表9用于Rf精細作圖(參見實施例8)的16種NILs的列表和特性除NIL對NO1的品系進行兩倍6次雜交以便獲得足夠的統計顯著性之外，在基因芯片上對每一個體品系雜交兩次。總數合計達36塊芯片用于該實驗。如在公開的國際專利申請W02007/005305中所描述的進行DNA制備和標記、雜交以及和芯片掃描，以及數據歸一化，該文獻特此以其整體在此并入作為參考。為了數據分析，通過將所有恢復系(RfRf系)的雜交結果與所有保持系(rfrf系)的雜交結果進行比較執行單向方差分析(ANOVA)，使得36次個體雜交被分析為18次RfRf基因型重復和18次rfrf基因型重復。該策略導致統計能力增加。選擇用Bonferormi檢驗計算的α-值閾值來聲明SFP為顯著的，意思是在RfRf和rfrf系之間的雜交信號是統計學差異的。Bonferroni校正是一種當幾次相關或獨立的統計檢驗同時進行時所使用的多重比較校正(雖然對于每次個體比較給出的α值可能是合適的，但對于所有比較的集合卻并不合適)。為了避免偽陽性，需要將α值降低來解決正在進行的比較的數目。因此，將0.05的理論α-值除以基因芯片上0.05/152362=3.310_7。該閾值產生代表30種蕓苔imigenes的55條顯著的SFP，稱為蕓苔候選基因。通過在蕓苔屬和擬南芥屬基因組之間使用同線性進一步確認30條蕓苔候選基因。對TAIR擬南芥蛋白數據庫進行的蕓苔imigenes核苷酸序列的TBLASTX分析得以對23條蕓苔候選基因鑒定了擬南芥同系物。隨后，基于擬南芥同系物的物理位置，將該23條蕓苔候選基因投射到擬南芥基因組上(圖11)，從而鑒定了染色體5上14條擬南芥基因的簇。由于蕓苔imigenes被預測定位在Rf基因座周圍，因此可假定Rf基因位于擬南芥中該1.77百萬堿基對的同線區中。14條擬南芥基因和14條蕓苔候選基因之間的對應關系在表10中給出。表10在14種定位在染色體5上簇中的擬南芥基因和它們的蕓苔候選基因同系隨后，列于表10中的14條蕓苔候選基因被調查作為靶用于標記開發。由于在芯片檢測到的多態性的確切特性未知，因此單鏈構型多態性(SSCP)技術被用于基因分型以及隨后的作圖。用于該目的的對Rf分離的種群與實施例7中所描述的相同。對于每種蕓苔候選基因。設計包圍用于SFP鑒定的探針區的引物。使用添加到5’末端的M13F尾(5，CACGACGTTGTAMACGAC3'；SEQIDNO:27)合成正向引物，反向引物攜帶位于5’末端的M13R尾(5，CAGGAAACAGCTATGACC3，；SEQIDNO28)。在包含5μ15ng/μ1濃度的基因組DNA、1.5μIlOX反應緩沖液、1.2μIlOmMdNTPs、0.5μ150mMMgCl2、0.3μ110μM濃度的每種引物、0.12μIInvitrogenTaqplatinium(5U/μ1)的15μ1終體積中進行最初的PCR反應。所有PCR反應均在ABIGeneAmpPCR系統9700上進行。最初的PCR的熱循環條件由如下組成在94°C下初始溫育2分鐘以活化Taq聚合酶，然后35個擴增循環(94°C，變性30秒，550C，退火30秒，和72°C，延伸30秒)。最終在72°C下延伸5分鐘完成PCR反應。將PCR產物稀釋100倍，然后使用各自處于10μM濃度下的5μ1稀釋的產物作為模板和0.4μ1M13F標記的尾作為正向引物PET-5，-CACGACGTTGTAAAACGAC-3，(SEQIDNO27)以及0·4μ1M13R標記的尾FAM-5，-CAGGAAACAGCTATGACC-3，(SEQIDNO28)作為反向引物進行第二次PCR。除引物濃度和退火溫度被設定在50°C以外，第二次PCR反應的試驗條件與第一次反應相同。在ABI3130x1基因分析儀上進行SSCP分析。在加載和運行樣品前，將來自AppliedBiosystems的0.2μ1Genescan500LIZ大小標準物和9μIHi-Di甲酰胺添加到2ul40-倍稀釋的最終PCR產物中。在95°C下對該混合物變性5分鐘，并在冰上冷卻3分鐘以避免重退火。根據供應商推薦制備7.2%濃度的由來自ABI的POP構象分析聚合物(CAP)組成的電泳聚合物。加載樣品并遷移到36cm毛細管陣列上，與此同時應用下列參數箱溫25°C,Poly_Fill_Vol6500階，電流穩定度:5μΑ，預運行電壓15kV，預運行時間180秒，注入電壓1.2kV，注入時間24秒，電壓步數40nk，電壓階躍間隔15秒，數據延遲時間1秒，運行電壓15kV和運行時間3000秒。使用來自ABI的GeneMapper軟件v4.0分析電泳期間收集的數據。在所測試的14種蕓苔候選基因中，unigeneID:PUT-161a_Brassica_napus-59218(SEQIDNO:31)被定位為最接近于Rf基因，處于Rf下方4.IcM的距離。圖12顯示了在分離種群中對于該基因座觀察到多態性的類型。因此，對于Rf相應的SSCP標記容許縮小定位間隔并代表了現有可獲得的最接近的標記(表11)。PUT-161a-Brassica_napus_59218正向引物序歹Ij5，-ACAGAGACAGAGGAGGTAGC-3，(SEQIDNO29)PUT-161a-Brassicanapus-59218反向引物序列5，-ATCATAATCCCTCGTTCTTT-3，(SEQIDNO30)表11使用Mapmaker(3.Ob版)計算的位于染色體N19上的Rf和側翼標記之間的圖距。標記間的遺傳距離以厘摩(cM)來估計，并與種群中發現的重組體數目成正比。對于rf和Rf等位基因，該距離基本上相同。基因座基因座之間的遺傳距離實施例9在RHS系統分離種群中對雄性不育和雄性能育植物進行標記選擇如果植物例如由RHS-不育系和恢復系雜交產生的F2植物是雄性不育或雄性能育的，則一種可能的用于上述雄性不育或雄性能育的測定是使用與Ms(如實施例1和2中所描述的)和Rf等位基因(如實施例3中所描述的)連鎖的標記檢測該植物。實施例9.1預測Ms基因型NR1116、NR2525、SR0002A和SR0003B標記的基因型提供對Ms-基因型的預測(表12；圖5)。表12對NR1116和NR2525下劃線的等位基因的特性，以及Ms和ms等位基因的指定。‘Ms’是不育基因的雄性不育等位基因以及‘ms’是不育基因的雄性能育等位基因。給出的等位基因大小已在ABI3700測序儀上計分過。針對分子量標準物ROX500(AppliedBiosystem)進行表觀片段分子量的校正。基因座Ms/ms等位基因等位基因大小(bp)如果僅存在雄性不育等位基因，則可預測該植物對于雄性不育(MsMs)是純合的。如果既存在雄性不育等位基因又存在雄性能育等位基因，則可預測該植物對于雄性不育(Msms)是雜合的。以及如果僅存在能育等位基因，則可預測該植物對于雄性能育(msms)是純合的。實施例9.2預測Rf基因型NR3454、NR2219和PUT-161a_Brassicanapus-59218標記容許預測Rf-基因型(表12)。對于SSCP標記PUT-161a-Brassicanapus-59218,由于所使用的技術，其不可能給出等位基因大小來計分。總是必須參看對參照恢復系‘RfRf’和保持系‘rfrf’品系所觀察到的多態性(圖13)。表13對NR2219下劃線的等位基因的特性以及Rf和rf等位基因的指定。‘Rf，是恢復系等位基因的能育等位基因以及‘rf’是恢復系等位基因的不育等位基因。給出的等位基因大小已在ABI3700測序儀上計分過。針對分子量標準物ROX500(AppliedBiosystem)進行表觀片段分子量的校正。如果僅存在保持系‘rf’等位基因，則可預測該植物對于雄性不育(rfrf)是純合的。如果既存在保持系等位基因又存在恢復系等位基因，則可預測該植物對于雄性不育(Rfrf)是雜合的。以及如果僅存在恢復系‘Rf’等位基因，則可預測該植物對于雄性能育(RfRf)是純合的。實施例9.3；預測雄性不育和雄性能育表型根據預測的Ms-基因型和Rf-基因型，我們能預測植物的雄性不育性或雄性能育性(表14)。由于在雄性不育基因(Ms)上恢復系等位基因(rf)是顯性的，因此在Rf處每次都具有雄性能育等位基因的植物是雄性能育的。如果在Rf處的能育等位基因不存在并且在Ms處的雄性不育等位基因存在，則僅可獲得雄性不育。表14根據雄性不育基因(Ms)和恢復系等位基因(rf)的基因型確定雄性不育和雄性能育表型。實施例10=RHS雄性不育植物自交為了產生花粉，在開第一朵花之后，優選用大約38°C的白天溫度(16小時)和大約20°C的夜間溫度(8小時)處理RHS雄性不育植物7天。該處理在空調房(空調設備制造商www.redeker-kaeltetechnik.de)中進行，該空調房裝備有8盞400W飛利浦SON-TP400WAgro溫室用燈。在熱處理后一周，將植物送回溫室并在至少18°C白天溫度和14°C夜間溫度的自然條件下培育。在所述熱處理后7-14天，植物顯示具有擴大的花藥的花。那些花藥能釋放花粉。花粉用于傳粉給同一植物的雄性不育和雄性能育花。使用塑料袋(CryovacCrispacBeutelSuperMicroLochung360x830mm，i"共商BaumanriSaatzuchtbedarfD-74638ffaldenburg)分離相鄰的植物以防止不受控制的傳粉。已被傳粉的植物顯示正常的莢發育，并且在干燥作為正常的能育油菜籽植物的植物后可收獲種子。實施例11生產雜合的基礎種子雌性系將來自實施例10的F4雄性能育植物和F4雄性不育植物的種子播種在隔離的大棚中。大棚長20m，寬Sm。覆蓋材料是具有16x10網眼大小的防蟲網。該設計是一行雄株，接著6行雌株，4行雄株，6行雌株以及再一行的雄株。每行播種大約1.5g單一植物自交種子。在開花開始前覆蓋大棚。在開花前對雄性能育植物選擇雌株。不管在自交過程中多么細心，通過來自溫室中的恢復系花粉的異花傳粉還是無法完全排除。雄性能育植物可根據它們不顯示雄性不育個體的芽敗育表型來進行選擇。由于芽敗育，因此雄性不育植物開始開花較能育植物為遲。為了使開花同步，通過在開始開花時人工修剪主芽延遲雄性能育植物開花。在開花后，除去在大棚邊界的兩行傳粉者。人工分離兩塊6行雄性不育雌株和4行雄株以避免種子混雜。在成熟后，單獨收獲雄性不育雌性系和雄性能育保持系植物。在2005年，一個大棚中的基礎雌性種子的種子產量為11.9kg未清潔的種子。在同一個大棚中的保持系植物的種子產量為8.9kg。也可以田地生產方式進行預基礎種子生產。因此，兩塊油菜籽地的最小距離必須是5km。還要確保在周圍5km內不存在能與油菜籽異花傳粉的能育油菜籽或十字花科植物。重要的是要檢查油菜籽植物經常生長的路邊。實施例12雜種開發以露地生產方式生產雜種。雌性系是實施例4中所描述的基礎種子雌性系。恢復系是任何一種常規的油菜籽品系。技術是帶狀生長，在恢復系植物田地周圍具有至少3m的邊界。在田地中雄雌比率為13-14，取決于農場主的條播機，1個條帶在2.5-4m之間。在開花前，50%的恢復系植物必須截去約50cm高度。這可通過任何一種常規的割草機來進行。如實施例4中所描述的，在開花前雄性不育植物需要進行針對雄性能育植物的選擇。毫無疑問是要確保在不育條帶中能育植物的數量不超過總數的0.2%以確保超過90%的雜種性。隔離距離必須為200m。必不可少的是要控制開花期間的環境溫度。如果溫度超過20°C，則必須在開花3周內對雄性不育雌株檢查雄性能育花。在開花后，傳粉者必須除去以保證所收獲的F1雜種種子的純度。實施例13雜種性能在不同國家的產量試驗中測試雜種。試驗進行至少3個復本，具有至少15m2土地面積。收獲土地并以dt/ha再計算土地產率。使用NIRS技術在FOSSNIRSystemsModel5000-c上分析種子。那些分析的原則描述于Williams&Sobering(1992)中。那些在德國和波蘭試驗的結果在表15中給出(RNX本發明的各種雜種種子；msl基于NPZmsl的雜種種子；Ogura=InraOgura雜種種子)。與現有可獲得的雜交系統相比，相對種子產量的性能如果不是更好的話，至少也是一樣好。表15在2006年(德國和波蘭)和2007年(德國、波蘭和法國)，RHS雜種的性能12.Brandle,J.E.andMcVetty,P.B.E.(1989):CropScience,29:1191-1195.13.Burton,J.ff.，J.F.Miller,B.A.Vick,R.Scarth,andC.C.Holbrook.2004.Alteringfattyacidcompositioninoilseedcrops.Adv.Agron.4:273-306.14.Cahoon,E.B.2003.AgBioForum,611-13.15.Cahoon,E.B.,K.G.Ripp,S.E.Hall,andA.J.Kinney.2001.J.Biol.Chem.276:2637_2643.16.Chen,F.X.，B.C.Hu,C.Li,Q.S.Li,ff.S.Chen,andM.L.Zhang,1998:GeneticstudiesonGMSinBrassicanapusL.I.InheritanceofrecessiveGMSline9012A.ActaAgron.Sin.24，431-438.17.Chen,Z.Z.,S.Snyder,Z.G.Fanandff.H.Loh.1994PlantBreedingl1318.DaskalovS.1972.Proc.EucarpiaMeet.Capsicum7202~210.19.DaunJKetal,J.Amer.OilChem.Soc.,601751-1754(1983)20.Dehesh,K.2004.UnitedStatesPatentApplication20040132189.21.Dehesh,K.,A.Jones,D.S.Knutzon,andT.A.Voelker.1996.PlantJ.-172,Applied22.DelourmeR,A.Bouchereau,N.Hubert,M.Renard,B.S.Landry.TheoreticalGenetics,vol.88，pp.741-748，1994.23.DelourmeR.andF.Eber.TheoreticalandAppliedGeneticsvol.85,pp222-228,1992.24.DelourmeR.,F.Eber,M.Renard."BreedingDoubleLowRestorerLinesinRadishCytoplasmicMaleSterilityofRapeseed(BrassicaNapusL.)."Proc.9thInt.RapeseedConf.Cambridge.England(1995).25.DelourmeR.,F.Eber,M.Renard."RadishCytoplasmicMaleSterilityinRapeseed:BreedingRestorerLineswithaGoodFemaleFertility."Proc8thInt.RapeseedConf.,Saskatoon,Canada.1506-1510(1991).26.DenisM.,DelourmeR.,GourretJ.P.,MarianiC.,andRenardM.PlantPhysiol.101，1295-1304(1993).27.DicksonMH.1970.J.Amer.Soc.Hort.Sci.95:13—14.28.Eskin,N.A.M.，B.E.McDonald,R.Przybylski,L.J.Malcolmson,R.Scarth,T.Mag，K.Ward，andD.Adolph.1996.Canolaoil.p.1-96.InY.H.Hui(ed.)Edibleoilandfatproducts:0ilandoilseeds.JohnWiley&SonsInc.,NewYork.29.Facciotti,M.T.，P.B.Bertain,andL.Yuan.1999.17:593-597.30.Fletcher,R.；Coventry,J.andScott,L.S.(1998):DoubledHaploidTechnologyforSpringandWinterBrassicanapus.RevisedEdition.UniversityofGuelphToronto,DepartmentofPlantAgriculture,TechnicalBulletin,OACPublication.31.Forster，J.undKnaak,C.1995Estimationofthegeneticdistanceof21winterrapeseedvarietiesbyRAPDanalyssincomparisontoRFLPresults.Proc.9thInt.RapeseedCongress,4-7July1995,Cambridge,UK.32.Frauen,M.(1999a)Ernahrungsdienst46:13.33.FrauenM,J.Noack,A.Girke,ff.Paulmann(2007):TenyearsexperienceofdevelopmentandcultivationofwinteroilseedrapehybridsinEuropebasedontheMSLsystemPoc.12.th.Int.RapeseedCongress,Wuhan,China(2007)34.Frauen,M.，andA.Baer(1996)GCIRCBulletin12:47_5L35.FuTD(1981)EucarpiaCruciferaeNewsl6:6D736.GirkeA.,Ph.DThesis(Dissertation)Gottingen,May2002"NeueGenpoolsausresynthetisiertemRaps(BrassicanapusL.)fiirdieHybridziichtung"37.Grant,I.andBeversdorf,ff.D.(1985)CanadianJournal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雄性植株延遲至多3周來延遲雄性植株開花。9.根據權利要求2-8任一項的方法，其中所述方法在低于28°C的溫度下實施。10.一種生產歐洲油菜雜種種子的方法，所述歐洲油菜雜種種子生長成產生籽粒的歐洲油菜植物，所述籽粒任選地具有不超過25umol/克9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量，其中所述方法包括如在以下所請求保護的一種或多種方法a)權利要求1，和b)權利要求2-5任一項，和c)權利要求6-9任一項。11.權利要求1-10任一項的方法，其中Ms等位基因具有賦予條件性核雄性不育表型的特征，其a)通過暴露于高于35°C的溫度，暫時恢復能育性，b)在至少一部分的F1植物中恢復能育性，所述F1植物獲得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物與任何包含至少一個顯性Rf等位基因的歐洲油菜植物的雜交，和c)在F1植物中得以保持，所述F1植物獲得自具有所述Ms等位基因涉及的條件性雄性不育表型的植物與來源于在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的雄性能育植物的雜交。12.權利要求1-11任一項的方法，其中Ms等位基因是存在于在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子中Ms等位基因或其遺傳變體，其賦予條件性雄性不育表型。13.權利要求1-12任一項的方法，其中條件性雄性不育表型和/或Ms等位基因與選自如下的一種或多種特性連鎖和/或與之相關I.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的芽敗育表型，II.在具有Ms等位基因賦予的雄性不育表型的植物中的白色條紋或白色斑點花瓣表型，和III.在包含至少一個拷貝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中存在Ms等位基因特異性標記。14.權利要求1-13任一項的方法，其中條件性雄性不育表型和/或Ms等位基因與選自如下的一種或多種標記連鎖和/或與之相關I.選自由如下組成的NR1116標記區中多態性組的標記a)具有位于相應于SEQIDN03中第85位的位置處的A的單核苷酩〖多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO3中第87位的位置處的G的單核苷酩〖多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO3中第139位的位置處的A的單核苷!脧多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO3中第214位的位置處的C的單核苷!脧多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO3中第218位的位置處的G的單核苷!脧多態性標記，f)具有位于相應于SEQIDNO3中第277位的位置處的G的單核苷!脧多態性標記，g)具有位于相應于SEQIDNO3中第286位的位置處的A的單核苷!脧多態性標記，h)具有位于相應于SEQIDNO3中第312位的位置處的T的單核苷!脧多態性標記，i)具有位于相應于SEQIDNO3中第319位的位置處的T的單核苷!脧多態性標記，j)具有位于相應于SEQIDNO3中第359位的位置處的C的單核苷!脧多態性標記，k)在相應于SEQIDNO:3中第221位的位置處的5'-TTGGTGAACAATC-3'缺失突變和1)在相應于SEQIDNO3中第328-330位的位置處的5'-GAA-3'插入突變II.選自由如下組成的NR2525標記區中多態性組的標記a)具有位于相應于SEQIDNO6中第60位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO6中第92位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO6中第105位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO6中第158位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO6中第431位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，f)在相應于SEQIDNO6中第82位的位置處的單核苷酸缺失突變，和g)在相應于SEQIDNO6中第17-25位的位置處的5'-TGAGCAAAA-3‘缺失突變，III.選自由下列組成的SNP標記組的標記a)在使用包含SEQIDN0:12所示的核苷酸序列的SNP-探針的SNP檢測中，產生陽性信號，和使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列的SNP-探針，產生陰性信號，和b)在使用包含SEQIDNO17所示的核苷酸序列的SNP-探針的SNP檢測中，產生陽性信號，和使用包含SEQIDNO:18所示的核苷酸序列的SNP-探針，產生陰性信號，IV.選自由下列組成的SSR標記組的標記a)具有96.7(+/-1.0)bp的表觀分子量的PCR片段，該片段產生自使用具有SEQIDNOs:1和2所示序列的引物的PCR反應，和b)具有192.8(+/-0.3)bp的表觀分子量的PCR片段，該片段產生自使用具有SEQIDNOs:4和5所示序列的引物的PCR反應，和V.選自與SEQIDNOs:3、6、11和18所示的至少一條序列連鎖的標記組的標記，其中一種或多種標記(Ms等位基因標記)還包括選自如下序列的分離的核苷酸序列，所述序列IV.與在上述I.-V.節中定義的標記序列具有至少80%的序列同一性，或V.在嚴格條件下與在上述I.-V.節中定義的標記序列雜交，或VI.包含在上述I.-V.節中定義的標記序列的至少25個連續的核苷酸。15.權利要求1-10任一項的方法，其中ms等位基因特征在于具有如下的表型特性a)不能恢復Ms等位基因賦予的雄性不育表型的能育性，和b)在不存在Ms等位基因的情況下，不能賦予雄性不育表型。16.權利要求1-10和15任一項的方法，其中ms等位基因與選自如下的一種或多種標記連鎖和/或與之相關I.選自由如下組成的NR1116標記區中多態性組的標記a)具有位于相應于SEQIDNO3中第85位的位置處的G的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO3中第87位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO3中第139位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO3中第214位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO3中第218位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，f)具有位于相應于SEQIDNO3中第277位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，g)具有位于相應于SEQIDNO3中第286位的位置處的G的單核苷酸多態性標記，h)具有位于相應于SEQIDNO3中第312位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，i)具有位于相應于SEQIDNO3中第319位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，j)具有位于相應于SEQIDNO3中第359位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，k)在相應于SEQIDNO3中第221位的位置處的5'-TTGGTGAACAATC-3‘插入突變，和1)在相應于SEQIDNO3中第328-330位的位置處的5'-GAA-3'缺失突變II.選自由如下組成的NR2525標記區中多態性組的標記a)具有位于相應于SEQIDNO6中第60位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，b)具有位于相應于SEQIDNO6中第92位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，c)具有位于相應于SEQIDNO6中第105位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，d)具有位于相應于SEQIDNO6中第158位的位置處的A的單核苷酸多態性標記，e)具有位于相應于SEQIDNO6中第431位的位置處的C的單核苷酸多態性標記，f)具有位于相應于SEQIDNO6中第82位的位置處的T的單核苷酸多態性標記，和g)在相應于SEQIDNO:6中第17-25位的位置處的5'-TGAGCAAAA-3‘插入突變，III.選自由下列組成的SNP標記組的標記a)在使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列的SNP-探針的SNP檢測中，產生陽性信號，和使用包含SEQIDN0:12所示的核苷酸序列的SNP-探針，產生陰性信號，和b)在使用包含SEQIDNO18所示的核苷酸序列的SNP-探針的SNP檢測中，產生陽性信號，和使用包含SEQIDNO:17所示的核苷酸序列的SNP-探針，產生陰性信號，IV.選自由下列組成的SSR標記組的標記a)具有選自由94(+/-0.9)bp、110.4(+/-0.5)bp、112.3(+/-0.4)bp和116.3(+/_0.4)bp組成的表觀分子量組的表觀分子量的PCR片段，該片段產生自使用具有SEQIDN0s:l和2所示序列的引物的PCR反應，和b)具有183.8(+/-0.4)bp的表觀分子量的PCR片段或無能育等位基因相關的PCR片段，該片段產生自使用具有SEQIDN0s:4和5所示序列的引物的PCR反應，其中一種或多種標記還包括選自如下序列的分離的核苷酸序列，所述序列a)與在上述I.-IV.節中定義的標記序列具有至少80%的序列同一性，或b)在嚴格條件下與在上述I.-IV.節中定義的標記序列雜交，或c)包含在上述I.-IV.節中定義的標記序列的至少25個連續的核苷酸。17.權利要求1-10任一項的方法，其中rf等位基因具有如下表型特性的特征a)不能恢復Ms等位基因賦予的雄性不育表型的能育性，和b)能保持Ms等位基因賦予的雄性不育表型。18.權利要求1-10和17任一項的方法，其中rf等位基因選自a)可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的rf等位基因，和b)以能保持Ms等位基因賦予的雄性不育表型的純合形式存在的其變體。19.權利要求1-10、17和18任一項的方法，其中rf等位基因與SSR標記連鎖和/或與之相關，該SSR標記由具有240.8(+/-0.4)bp的表觀分子量的PCR片段組成，該PCR片段來自使用具有如SEQIDNOs19和20所示序列的引物的PCR反應。20.權利要求1-10任一項的方法，其中能育性恢復表型和/或Rf等位基因與選自如下的一種或多種特性連鎖和/或與之相關a)在獲得自與在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子生長成的歐洲油菜植物雜交的F1植物中，恢復能育性，和b)在獲得自與種子生長成的歐洲油菜植物雜交的F1植物中，恢復能育性，所述種子獲得自作為雄性不育雌性植株(femalemalesterileplant)的獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的種子的歐洲油菜植物與作為雄性能育植物的獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的種子的歐洲油菜植物的雜交。21.權利要求1-10和20任一項的方法，其中Rf等位基因可獲得自任何被商業化作為種子用于栽培的歐洲油菜能育近交系。22.權利要求1-21任一項的方法，其中Rf等位基因和/或ms等位基因可獲得自市售歐洲油菜能育近交系，所述市售歐洲油菜能育近交系選自包括在2006年12月確認合格的0ECD品種列表中的被商業化作為種子用于栽培目的的非雜種歐洲油菜品種。23.權利要求1-10和20-22任一項的方法，其中能育性恢復表型和/或Rf等位基因與SSR標記連鎖和/或與之相關，所述SSR標記由缺少具有240.8(+/-0.4)bp的表觀分子量的PCR片段的SSR標記組成，所述PCR片段來自使用具有SEQIDNOs:19和20所示序列的引物的PCR反應。24.—種具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜雌性植株是i.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是純合的，和ii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(rf等位基因)是純合的，和iii.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和iv.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。25.權利要求24的植物，其中所述條件性雄性不育植物可獲得自通過權利要求1的方法生產的種子。26.一種具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物，其中所述條件性雄性不育歐洲油菜雌性植株是iii.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480下保藏的歐洲油菜種子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是雜合的，iv.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(rf等位基因)是純合的，v.當在開花之前和/或開花期間暴露于低于28°C的溫度時，優勢雄性不育，和vi.當在開花之前和/或開花期間暴露于高于35°C的溫度時，恢復優勢雄性能育表型。27.權利要求26的植物，其中所述條件性雄性不育植物可獲得自通過權利要求2的方法生產的種子。28.一種具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物，該基因型可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子，其中所述雄性能育歐洲油菜植物為v.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的能育等位基因(ms等位基因)是純合的，和vi.對于可獲得自在保藏編號NCIMB41481下保藏的歐洲油菜種子的保持系等位基因(rf等位基因)是純合的，和vii.優勢雄性能育。29.—種具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育歐洲油菜雜種植物，其中所述雄性能育歐洲油菜雜種植物為i.對功能性恢復系等位基因(Rf等位基因)或保持系等位基因(功能失常的恢復系等位基因；rf等位基因)是雜合的，ii.優勢雄性能育，和iii.任選地產生具有不超過25iimol/克的由所述植物產生的9%水分含量的風干種子的總芥子油苷含量的籽粒。30.權利要求24-29任一項的植物，其中a)Ms等位基因如權利要求11-14中任一項所定義的，和b)ms等位基因如權利要求15-16任一項中所定義的，和c)rf等位基因如權利要求17-19任一項中所定義的，和d)Rf等位基因如權利要求20-23任一項中所定義的。31.權利要求24-30任一項的植物，其中所述植物包含選自黃色種皮顏色、除草劑抗性、生物脅迫抗性和非生物脅迫抗性的性狀。32.權利要求24-31任一項的植物，其中所述植物產生籽粒，該籽粒產生具有選自如下組成的油類a)小于2%的芥子酸含量，b)大于45%的芥子酸水平，c)大于70%的油酸含量，d)小于8%的a-亞油酸含量，e)小于8%的亞麻酸含量，f)小于10%的飽和脂肪酸含量，g)大于20%的硬脂酸含量，h)大于10%的短鏈和中鏈脂肪酸含量，i)大于20%的棕櫚酸含量，和j)大于10%的多不飽和脂肪酸含量。33.權利要求24-32任一項的蕓苔屬植物的部分，選自種子、小孢子、原生質體、細胞、胚珠、花粉、營養體部分、子葉和合子。34.一種產生如權利要求24-32任一項所請求保護的植物的歐洲油菜種子。35.一種生產歐洲油菜種子或籽粒的方法，包括步驟a)播種通過權利要求6-10任一項的方法提供的雜種種子，b)由所述種子生長成雜種歐洲油菜植物，和c)收獲所述植物的成熟種子或籽粒。36.一種生產歐洲油菜油和粕的方法，包括步驟a)播種通過權利要求6-10任一項的方法提供的雜種種子，b)由所述種子生長成雜種歐洲油菜植物，c)收獲所述植物的成熟種子或籽粒，d)破碎所述種子或籽粒并由粕中分離或提取油。37.權利要求36的方法，其中所述油具有選自由如下組成的組成a)小于2%的芥子酸含量，b)大于45%的芥子酸水平，c)大于70%的油酸含量，d)小于8%的a-亞油酸含量，e)小于8%的亞麻酸含量，f)小于10%的飽和脂肪酸含量，g)大于20%的硬脂酸含量，h)大于10%的短鏈和中鏈脂肪酸含量，i)大于20%的棕櫚酸含量，和j)大于10%的多不飽和脂肪酸含量。38.使用歐洲油菜植物的方法，包括步驟收獲來自由通過權利要求6-10任一項的方法提供的種子培育的蕓苔屬植物的種子，以及種植所述種子以產生后代。39.權利要求38的方法，進一步包括步驟重復種植收獲的后代植物的種子的步驟。40.一種經營種子生意的方法，包括步驟a)提供如權利要求24-28任一項所請求保護的種子生產植物給感興趣生產雜種油菜籽的育種人員，b)讓所述育種人員在許可下通過將步驟(a)中提供的所述植物與所述育種人員可獲得的雄性能育歐洲油菜品系雜交創建歐洲油菜雜種種子。41.根據權利要求40的方法，其中步驟(a)中提供的種子生產植物是權利要求26或27的條件性雄性不育歐洲油菜植物。42.一種寡核苷酸引物，選自SEQIDNOs:1、2、4、5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20所示序列。43.一種適合于檢測單核苷酸多態性的探針，包含作為核酸部分的選自SEQIDNOs11、12、17和19所示序列的序列。44.一種分離的核苷酸序列，選自a)序列，其i)與選自SEQIDNOs:3和6所示序列的共有序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與選自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列雜交，或iii)包含選自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列的至少25個連續的核苷酸的序列，和b)序列，其i)與選自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在嚴格條件下與選自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列雜交，或iii)包含選自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列的至少25個連續的核苷酸。45.一種在基于標記的選擇中使用根據權利要求42或44的核酸序列用于將選自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或rf等位基因的等位基因基因滲入缺少所述等位基因集合的蕓苔種質中的方法。46.一種鑒定或表征根據權利要求24-32任一項的歐洲油菜植物的方法，該方法包括如下步驟iii)從要被測試的根據權利要求24-32任一項的植物或植物種群獲得植物材料并從所述材料中提取DNA；iv)通過使用根據權利要求42-44任一項的核酸序列，分析步驟i)中獲得的DNA樣品以確定Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因和/或Rf等位基因的存在/不存在。47.一種使用根據權利要求24-32任一項的歐洲油菜植物生產雜種種子的方法。48.權利要求47的方法，其中歐洲油菜植物選自由在保藏編號NCIMB41480或41481下保藏的歐洲油菜種子培育的或來源于該種子的品種。49.一種在生產歐洲油菜能育雜種種子的方法中使用具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物的方法。50.權利要求49的方法，其中所述生產能育雜種種子的方法是根據權利要求6-8任一項的方法。51.具有基因型RfRf的雄性能育歐洲油菜植物在生產歐洲油菜能育的雜種種子的方法中的用途。52.根據權利要求51的用途，其中所述生產能育的雜種種子的方法是根據權利要求6-9任一項生產能育的雜種種子的方法。53.歐洲油菜植物在方法中的用途，所述方法包括步驟由通過權利要求6-10任一項的方法提供的種子生長成的蕓苔屬植物收獲種子，和種植所述種子以生產后代。54.根據權利要求53的用途，進一步包括重復種植收獲的后代植物種子步驟的步驟。55.根據權利要求42或44任一項的核酸序列在用于將選自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或rf等位基因的等位基因基因滲入缺少所述等位基因集合的蕓苔種質中的基于標記的選擇中用途。56.在生產雜種種子的方法中使用一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物、具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物或具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物的歐洲油菜植物的方法。57.一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物、具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物或具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物的歐洲油菜植物在生產雜種種子的方法中的用途。58.根據權利要求57的用途，其中具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物和具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物用于生產雜種種子的方法中。59.根據權利要求56-58任一項的用途，其中所述方法是如權利要求6-23任一項中所請求保護的方法。60.在生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物或其種子的方法中使用一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物和具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物的歐洲油菜植物的方法。61.一種或多種選自具有基因型MsMsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物和具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物的歐洲油菜植物在生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物或其種子的方法中的用途。62.根據權利要求61的用途，其中具有基因型msmsrfrf的雄性能育歐洲油菜植物用于生產具有基因型Msmsrfrf的條件性雄性不育歐洲油菜植物或其種子的方法中。63.根據權利要求60-62任一項的用途，其中所述方法是如權利要求2-5、8、9和11-23任一項中所請求保護的方法。全文摘要本發明涉及一種歐洲油菜(Brassicanapus)核條件性雄性不育系統。本發明的實施方案提供了預基礎(雄性不育)雌性系(MsMsrfrf)、(雄性能育)保持系(msmsrfrf)、(雄性不育)基礎雌性系(Msmsrfrf)和雜交系。進一步提供了用于生產那些品系的方法。本發明的進一步的實施方案涉及與不育性、能育性和保持系等位基因相關的標記，以及那些標記在提供雜交系統中的應用。文檔編號C12N15/82GK101861390SQ200880020023公開日2010年10月13日申請日期2008年6月13日優先權日2007年6月13日發明者岡瑟·施蒂韋,斯蒂芬·普萊尼斯,約翰尼斯·J·L·吉倫,馬里·科克申請人:先正達參股股份有限公司