一種農用殺線蟲組合物及其應用
【專利摘要】本發明提供了一種農用殺線蟲組合物，包括以下重量份數的組分：藥物活性組分20～90份，所述藥物活性組分包括重量份數比為(30～90):(20～80)的淡紫擬青霉和阿維菌素；藥物載體15～60份；輔助劑0.1～15份。本發明中，淡紫擬青霉和阿維菌素的復配，使得到的農用殺線蟲組合物高效、低毒，殺蟲效果穩定。實驗結果表明，淡紫擬青霉和阿維菌素復配的農用殺線蟲組合物，防效最高可達86％以上，殺線蟲效果要遠遠高于單獨噴施淡紫擬青霉或阿維菌素。CGMCC No.799420130813
【專利說明】
一種農用殺線蟲組合物及其應用
技術領域
[0001] 本發明涉及農藥技術領域，尤其涉及一種農用殺線蟲組合物及防治農作物病害的 應用。
【背景技術】
[0002] 線蟲可侵襲和寄生植物，被侵襲和寄生的植物因線蟲吸收體內營養而影響正常的 生長發育，而且在線蟲代謝過程中的分泌物還會刺激寄主植物的細胞和組織，導致植株畸 形，使農作物減產或質量下降。較為嚴重的植物線蟲病有根結線蟲病、大豆胞囊線蟲病、小 麥粒線蟲病、甘薯莖線蟲病、水稻干尖線蟲病、粟線蟲病、松材線蟲病、柑橘半穿刺線蟲病 等。現有技術中常常選用藥物進行防治，比如采用90%晶體敵百蟲800倍溶液處理，防效僅 為45.8%，1.5%阿維菌素顆粒劑2.5kg/667m 2的防效為39.6%，采用阿維菌素與氨基寡糖 素母藥的組合物進行防治，其防治效果為73.91%，達到的防治效果都比較低。
[0003] 淡紫擬青霉(Paecilomyces lilacinus Samson)屬于內寄生性真菌，此菌廣泛分 布于世界各地，具有功效高、寄主廣、易培養等優點，特別在控制植物病原線蟲方面功效卓 著，比如對南方根結線蟲、孢囊線蟲、白色球孢囊線蟲、穿刺線蟲、金色線蟲、異皮線蟲和珍 珠線蟲有較強的寄生能力，可侵染線蟲的卵，進而達到殺蟲的目的，該病原真菌具有致病性 強，有效期較長。阿維菌素是由微生物發酵的抗生素殺蟲劑，該殺蟲劑以防治鱗翅目害蟲、 害螨和木虱為主，兼治蚜蟲等同翅目害蟲，對其具有胃毒和觸殺作用。但是單一采用淡紫擬 青霉或阿維菌素進行防治，其防治效果較低，防治效果不甚理想。
[0004] 為了克服單一類型殺蟲劑或復合類型殺蟲劑防治效果低的問題，急需提供一種廣 譜高效的農用殺線蟲組合物。

【發明內容】

[0005] 有鑒于此，本發明的目的在于針對現有技術的不足，而提供一種農用殺線蟲組合 物。
[0006] 本發明提供了一種農用殺線蟲組合物，包括以下重量份數的組分：
[0007] 藥物活性組分20~90份，所述藥物活性組分包括重量份數比為（30~90): (20~ 80)的淡紫擬青霉和阿維菌素；
[0008] 藥物載體15~60份；
[0009] 輔助劑0.1~15份。
[0010]進一步，所述的淡紫擬青霉選自生物保藏編號為CGMCC No.7994的菌種。
[0011] 進一步，所述的淡紫擬青霉的制備方法包括以下步驟：
[0012] 1)將淡紫擬青霉菌種活化；
[0013] 2)將所述活化后的淡紫擬青霉接種于淡紫擬青霉液體培養基中進行液體發酵，培 養55~75h停止發酵，得到淡紫擬青霉發酵液；
[0014] 3)將所述步驟2)得到的淡紫擬青霉發酵液接種于淡紫擬青霉固體培養基中，鋪 盤，進行淺盤發酵，得到淡紫擬青霉。
[0015] 進一步，所述活化后的淡紫擬青霉接種于液體培養基的接種量為10~30%;所述 淡紫擬青霉發酵液接種于固體培養基的接種量為10~30%。
[0016] 進一步，所述淡紫擬青霉的液體培養基包括以下組分:蔗糖20~40g/L，黃豆粉1.0 ~10g/L，硝酸銨1.0~2. Og/L，磷酸氫二鈉1.5~3 .Og/L，硫酸鎂0.15~0.32g/L，氯化鉀0.1 ~1 · Og/L，硫酸鐵0 · 01 ~0 · 1 Og/L。
[0017]進一步，所述淡紫擬青霉的固體培養基包括以下重量份數的組分：麥麩60~100 份，玉米粉5~15份，谷殼5~15份。
[0018] 進一步，所述的阿維菌素為90wt%~97wt%固體粉狀阿維菌素或10wt%~15wt% 的阿維菌素油膏。
[0019] 進一步，所述淡紫擬青霉在固體發酵結束后還包括干燥步驟，所述干燥的溫度為 30~50°C，所述干燥的時間為20~45h。
[0020] 進一步，所述藥物載體包括硅藻土、滑石粉、白炭黑、硫酸鈉、陶土和高嶺土中的一 種或幾種。
[0021 ]進一步，所述輔助劑包括葡萄糖和/或玉米淀粉。
[0022] 進一步，所述的農用殺線蟲組合物在防治農作物線蟲方面的應用。
[0023] 本發明提供了一種農用殺線蟲組合物，包括以下重量份數的組分:藥物活性組分 20~90份，所述藥物活性組分包括重量份數比為（30~90): (20~80)的淡紫擬青霉和阿維 菌素;藥物載體15~60份;輔助劑0.1~15份。在本發明中，淡紫擬青霉和阿維菌素的復配， 使得到的農用殺線蟲組合物高效、低毒，殺蟲效果穩定，安全性高，環保性能好。實驗結果表 明，淡紫擬青霉和阿維菌素復配的農用殺線蟲組合物，防效最高可達86%以上，殺線蟲效果 要遠遠高于單獨噴施淡紫擬青霉或阿維菌素。
[0024]生物保藏說明
[0025] 淡紫擬青霉(Paecilomyces lilacinus)，于2013年08月13日保藏在中國微生物菌 種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院 微生物研究所，生物保藏編號為CGMCC No. 7994。
【具體實施方式】
[0026] 本發明提供了一種農用殺線蟲組合物，包括以下重量份數的組分：
[0027] 藥物活性組分20~90份，所述藥物活性組分包括重量份數比為（30~90) : (20~ 80)的淡紫擬青霉和阿維菌素;藥物載體15~60份;輔助劑0.1~15份。
[0028]本發明提供的農用殺線蟲組合物包括20~90份藥物活性組分，優選為50~80份， 更優選的為70份。在本發明中，所述的藥物活性組分包括重量比為(30~90): (20~80)的淡 紫擬青霉和阿維菌素，所述的藥物活性組分中，淡紫擬青霉和阿維菌素的重量份數比優選 的為(40~80): (30~70)，更優選的為(45~60): (40~60)，最優選為50:50。
[0029]在本發明中，所述淡紫擬青霉為選自生物保藏編號為CGMCC No.7994的菌種，在實 施例中，可具體采用經過固體發酵后并烘干粉碎得到的固體粉狀淡紫色擬青霉。
[0030] 在本發明中，所述的淡紫擬青霉的制備方法包括以下步驟：
[0031] 1)將淡紫擬青霉菌種活化；
[0032] 2)將所述活化后的淡紫擬青霉接種于淡紫色擬青霉液體培養基中進行液體發酵， 培養55~75h停止發酵，得到淡紫擬青霉發酵液；
[0033] 3)將所述步驟2)得到的淡紫擬青霉發酵液接種于淡紫擬青霉固體培養基中，鋪 盤，進行淺盤發酵，得到淡紫擬青霉。
[0034]本發明中淡紫擬青霉菌種的活化是將保藏的淡紫擬青霉菌種接種于裝有營養瓊 脂培養基的茄型瓶中，25~30°C培養10~14h進行活化培養。
[0035]在本發明中，所述活化后的淡紫擬青霉接種于液體培養基的接種量優選為10~ 30%，更優選為15~25%，最優選為20% ;所述淡紫擬青霉發酵液接種于固體培養基的接種 量優選為10~30%，更優選為15~25%，最優選為20%。
[0036]在本發明中，所述淡紫擬青霉液體培養基優選包括以下組分:蔗糖20~40g/L，黃 豆粉1.0~10g/L，硝酸銨1.0~2. Og/L，磷酸氫二鈉1.5~3 .Og/L，硫酸鎂0.15~0.32g/L，氯 化鉀0.1~1.0g/L，硫酸鐵0.01~0.10g/L;更優選為蔗糖25~35g/L，黃豆粉3.0~7g/L，硝 酸銨1 · 3~1 · 7g/L，磷酸氫二鈉1 · 8~2 · 4g/L，硫酸鎂0 · 20~0 · 28g/L，氯化鉀0 · 3~0 · 7g/L， 硫酸鐵0.03~0.07g/L;最優選為蔗糖30g/L，黃豆粉5g/L，硝酸銨1.5g/L，磷酸氫二鈉 2 · 06g/L，硫酸鎂 0 · 24g/L，氯化鉀 0 · 5g/L，硫酸鐵 0 · 05g/L。
[0037]在本發明中，所述淡紫擬青霉液體發酵所接種的液體培養基優選經120~130°C滅 菌30~45min后使用。本發明對培養基的滅菌設備沒有特殊限定，采用本領域技術人員熟知 的滅菌設備即可，如高壓蒸汽滅菌鍋。本發明對所述發酵的設備沒有特殊的限定，采用本技 術領域熟知的發酵設備即可，如發酵罐。
[0038]在本發明中，所述淡紫擬青霉液體發酵的溫度優選為25~30°C，更優選的為26~ 29°C，最優選為28°C ;所述淡紫擬青霉液體發酵的pH值優選為6.6~7.2，更優選的為6.8~ 7.0，最優選為6.9;罐內壓力優選為0.05~0.1 MPa，更優選的為0.07~0.08MpPa;所述液體 發酵的通氣量優選為0.8~1.2V/V · min，更優選的為1V/V · min;所述淡紫擬青霉液體發酵 的時間優選為55~75h，更優選為60~70h，更優選為65h。
[0039] 完成所述淡紫擬青霉液體發酵后，本發明將得到的淡紫擬青霉發酵液接種于固體 培養基中，進行淺盤發酵，得到固體發酵淡紫擬青霉。在本發明中，所述淡紫擬青霉固體培 養基優選包括以下重量份的組分:麥麩60~100份，玉米粉5~15份，谷殼5~15份;更優選為 麥麩70~90份，玉米粉7~12份，谷殼7~12份;最優選為麥麩80份，玉米粉10份，谷殼10份。 本發明優選在所述淡紫擬青霉固體培養基中添加蒸餾水，使固體培養基含水量優選為45% ~55%，更優選為47%~52%，最優選為50%，然后鋪盤，進行淺盤發酵。本發明對所述添加 的蒸餾水沒有特殊的限定，采用本領域技術人員常規使用的蒸餾水即可。
[0040] 在本發明中，所述阿維菌素為90wt%~97wt%固體粉狀阿維菌素或10wt%~ 15wt%的阿維菌素油膏；更優選為92wt%~95wt%固體粉狀阿維菌素或12wt%~14wt%的 阿維菌素油膏；最優選為93wt%固體粉狀阿維菌素或13wt%的阿維菌素油膏。本發明對所 述的阿維菌素的來源沒有特殊的限定，采用市售商品即可。
[0041] 在本發明中，所述淡紫擬青霉固體發酵的溫度優選為24~30°C，更優選的為26~ 29°C，最優選為28°C ;所述淡紫擬青霉固體發酵的時間優選為5~10d，更優選為6~9d，最優 選為7d;所述淡紫擬青霉固體發酵的濕度前三天優選為60%~90%，剩余時間優選為10% ~40 % ;更優選為70 %~85 %，15 %~35 % ;最優選為80 %，30 %。
[0042]完成所述淡紫擬青霉固體發酵后，本發明優選將得到固體發酵培養基烘干、粉碎 和過篩，得到固體粉狀淡紫擬青霉。在本發明中，所述烘干的溫度優選為30~50°C，干燥的 時間優選為20~45h，更優選為35~45°C，30~40h，最優選為40°C，35h;本發明將固體發酵 培養基烘干至水分含量優選在25~35 %之間，更優選為27~32 %，最優選為30 %。本發明對 所述固體發酵培養基粉碎的方法沒有特殊的限定，采用本領域技術人員熟知的粉碎方法即 可。在本發明中，所述固體粉狀淡紫擬青霉過篩優選采用80~100目，更優選為85~95目，最 優選為90目。
[0043]本發明提供的農用殺線蟲組合物優選包括15~60份藥物載體，更優選為25~50 份，最優選為35份。在本發明中，對所述的藥物載體沒有特殊的限定，采用市售商品即可。具 體的可優選輕質硅藻土、滑石粉、白炭黑、硫酸鈉、陶土和高嶺土中的一種或幾種。藥物載體 具體的可為上述物質中的任意幾種，可任意比例混合。本發明所述的藥物載體具有良好的 藥物穩定性，亦可提高藥物的藥效。
[0044] 本發明提供的農用殺線蟲組合物優選包括0.1~15份輔助劑，更優選為6~12份， 最優選為10份。在本發明中，對所述的輔助劑沒有特殊的限定，采用市售商品即可。具體的 可為葡萄糖或玉米淀粉的一種或兩種。輔助劑具體的可為上述物質中的兩種，可任意比例 混合。在本發明中，所述的輔助劑可使藥物性狀穩定，提高藥效。
[0045] 本發明對所述的農用殺線蟲組合物的制備方法沒有特殊的限定，采用本領域技術 人員熟知的組合物的制備方法即可。具體的可將所述的藥物活性組分、藥物載體和輔助劑 混合后制備得到。
[0046] 本發明所述的農用殺線蟲組合物可應用于農作物防治線蟲的方面，提供了一種所 述農用殺線蟲組合物在防治農作物線蟲方面的應用。具體的，可應用的農作物種類包括糧 食作物、經濟作物、蔬菜作物、果類作物、飼料作物等。本發明所述的農用殺線蟲組合物可防 治各類線蟲和害螨，包括南方根結線蟲、孢囊線蟲、白色球孢囊線蟲、穿刺線蟲、金線蟲、異 皮線蟲、珍珠線蟲、蚜蟲、木虱等。
[0047] 本發明對所述的農用殺線蟲組合物的施藥方法沒有特殊限定，采用本領域技術人 員熟知的施藥方法即可。具體可包括以下步驟:將本發明所述的農用殺線蟲組合物用水稀 釋得到1000~4000倍稀釋液后，進行順壟噴施。
[0048]下面將結合本發明中的實施例，對本發明中的技術方案進行清楚、完整地描述。顯 然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實 施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬 于本發明保護的范圍。
[0049] 實施例1
[0050] 固體粉狀淡紫擬青霉的制備:將保藏的淡紫擬青霉菌種接種于裝有營養瓊脂培養 基的茄型瓶中，28 °C培養12h進行活化培養;活化培養后的淡紫擬青霉以20 %的接種量接種 于121°C滅菌35min后的液體培養基中，在發酵罐中進行液體發酵，具體的發酵條件為:溫度 為28°C ;pH值為6.9;罐內壓力為0.08MPa，發酵通氣量為1V/V · min;發酵65h后停止發酵，得 到淡紫擬青霉發酵液;將得到的淡紫擬青霉發酵液以20%的接種量接種于固體培養基中， 在固體培養基中加入蒸餾水，使固體培養基含水量為50%，然后鋪盤，進行淺盤發酵，發酵 條件為：發酵溫度為28°C，發酵濕度前三天為80%，后四天發酵濕度為30%，發酵時間為7 天；固體發酵結束后將得到的固體發酵的淡紫擬青霉在40°C條件下烘干35h，烘干至固體發 酵的淡紫擬青霉的水分含量為30 %，粉碎過90目篩，得到固體粉狀淡紫擬青霉。
[0051 ] 實施例2
[0052] 農用殺線蟲組合物的制備：以重量份數計，將實施例1中制備得到的固體淡紫擬青 霉50份、阿維菌素50份，硅藻土 26.7份，葡萄糖6.7份混合，得到農用殺線蟲組合物。
[0053] 實施例3
[0054] 農用殺線蟲組合物的制備：以重量份數計，將實施例1中制備得到的固體淡紫擬青 霉40份、阿維菌素25份，娃藻土 10份，白炭黑10份，高嶺土5份，葡萄糖5份，玉米粉5份混合， 得到農用殺線蟲組合物。
[0055] 實施例4
[0056] 農用殺線蟲組合物的制備：以重量份數計，將實施例1中制備得到的固體淡紫擬青 霉45份、阿維菌素20份，硅藻土 50份，滑石粉10份，陶土 8份，硫酸鈉7份，玉米粉5份混合，得 到農用殺線蟲組合物。
[0057] 實施例5
[0058] 農用殺線蟲組合物的制備：以重量份數計，將實施例1中制備得到的固體淡紫擬青 霉32.5份、阿維菌素32.5份，娃藻土 10份，滑石粉10份，白炭黑5份，葡萄糖5份，玉米粉5份混 合，得到農用殺線蟲組合物。
[0059] 實施例6
[0060]藥效試驗:本次試驗在江西省進行，防治品種為火龍果，管理良好，根結線蟲發生 中等偏重。本次試驗將實驗田均分為四個區域，區域1為對照組，只順壟噴施清水；區域2順 壟噴施實施例2中制備的農藥殺線蟲組合物2000倍稀釋液；區域3順壟噴施不含淡紫擬青 霉，只含阿維菌素及載體和輔助劑的組合物，藥物活性組分的濃度與區域2相同；區域4順壟 噴施不含阿維菌素，只含淡紫擬青霉及載體和輔助劑的組合物，藥物活性組分的濃度與區 域2和3相同；四個區域的用藥量相同，施藥后1天，3天，5天，7天各調查一次活蟲數，計算蟲 口減退率。具體結果如表1所示，由表1的數據可以得出，區域2的蟲口減退率最高，表明本發 明制備的農藥殺線蟲組合物的殺蟲效果最好，其藥效均高于同濃度的單獨噴施阿維菌素或 者淡紫擬青霉。
[0061] 表1農用殺線蟲組合物的殺蟲(根結線蟲)效果
[0062]
[0063] 從表1的試驗數據可以得出，本發明制備的農用殺線蟲組合物7天的蟲口減退率可 高達86.2%，其殺蟲效果遠遠高于單獨順壟噴施淡紫擬青霉或阿維菌素。
[0064] 實施例7
[0065] 藥效試驗:本次試驗在江西省進行，防治品種為柑橘，管理良好，穿刺線蟲發生中 等偏重。本次試驗將實驗田均分為四個區域，區域1為對照組，只順壟噴施清水；區域2順壟 噴施實施例2中制備的農藥殺線蟲組合物2000倍稀釋液；區域3順壟噴施不含淡紫擬青霉， 只含阿維菌素及載體和輔助劑的組合物，藥物活性組分的濃度與區域2相同；區域4順壟噴 施不含阿維菌素，只含淡紫擬青霉及載體和輔助劑的組合物，藥物活性組分的濃度與區域2 和3相同；四個區域的用藥量相同，施藥后1天，3天，5天，7天各調查一次活蟲數，計算蟲口減 退率。具體結果如表2所示，由表2的數據可以得出，區域2的蟲口減退率最高，表明本發明制 備的農藥殺線蟲組合物的殺蟲效果最好，其藥效均高于同濃度的單獨噴施阿維菌素或者淡 紫擬青霉。
[0066] 表2農用殺線蟲組合物的殺蟲(穿刺線蟲)效果
[0067]
[0068] 從表2的試驗數據可以得出，本發明制備的農用殺線蟲組合物7天的蟲口減退率可 高達86.4%，其殺蟲效果遠遠高于單獨順壟噴施淡紫擬青霉或阿維菌素。
[0069] 由以上實施例可知，本發明制備的農用殺線蟲組合物，對蟲害的防治率可高達 86%以上，殺蟲效果要遠遠高于單獨使用淡紫色擬青霉或阿維菌素。
[0070] 以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人 員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應 視為本發明的保護范圍。
【主權項】
1. 一種農用殺線蟲組合物，包括以下重量份數的組分： 藥物活性組分20~90份，所述藥物活性組分包括重量份數比為（30~90): (20~80)的 淡紫擬青霉和阿維菌素； 藥物載體15~60份； 輔助劑0.1~15份。2. 根據權利要求1所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述的淡紫擬青霉選自生物 保藏編號為CGMCC No.7994的菌種。3. 根據權利要求1所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述的淡紫擬青霉的制備方 法包括以下步驟： 1) 將淡紫擬青霉菌種活化； 2) 將所述活化后的淡紫擬青霉接種于淡紫擬青霉液體培養基中進行液體發酵，培養55 ~75h停止發酵，得到淡紫擬青霉發酵液； 3) 將所述步驟2)得到的淡紫擬青霉發酵液接種于淡紫擬青霉固體培養基中，鋪盤，進 行淺盤發酵，得到淡紫擬青霉。4. 根據權利要求3所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述活化后的淡紫擬青霉接 種于液體培養基的接種量為10~30% ; 所述淡紫擬青霉發酵液接種于固體培養基的接種量為10~30%。5. 根據權利要求4所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述淡紫擬青霉的液體培養 基包括以下組分:蔗糖20~40g/L，黃豆粉1.0~10g/L，硝酸銨1.0~2.0g/L，磷酸氫二鈉1.5 ~3 · Og/L，硫酸鎂0 · 15~0 · 32g/L，氯化鉀0 · 1 ~1 · Og/L，硫酸鐵0 · 01 ~0 · 10g/L; 所述淡紫擬青霉的固體培養基包括以下重量份數的組分:麥麩60~100份，玉米粉5~ 15份，谷殼5~15份。6. 根據權利要求1所述的農用殺線蟲劑組合物，其特征在于，所述的阿維菌素為90wt% ~97wt %固體粉狀阿維菌素或IOwt %~15wt %的阿維菌素油膏。7. 根據權利要求3所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述淡紫擬青霉在固體發酵 結束后還包括干燥步驟，所述干燥的溫度為30~50°C，所述干燥的時間為20~45h。8. 根據權利要求1所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述藥物載體包括硅藻土、 滑石粉、白炭黑、硫酸鈉、陶土和高嶺土中的一種或幾種。9. 根據權利要求1所述的農用殺線蟲組合物，其特征在于，所述輔助劑包括葡萄糖和/ 或玉米淀粉。10. 權利要求1~9任意一項所述的農用殺線蟲組合物在防治農作物線蟲方面的應用。
【文檔編號】A01N63/04GK105901017SQ201610349222
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年5月24日
【發明人】羅雙燕, 梁小文, 王根豪, 嚴藝波, 李肖宇, 吳俊杰, 石崢, 曾升華
【申請人】江西天人生態股份有限公司