一種提高北方設施番茄抗根結線蟲的栽培方法
【技術領域】：
[0001] 本發明屬于農業生產及微生物應用領域，具體涉及一種提高北方設施番茄抗根結 線蟲的栽培方法。
【背景技術】：
[0002] 番茄是我國主要的經濟作物之一，是農民增收的保障。設施蔬菜番茄集約化程度 越高，番茄根際土壤連作障礙現象日益嚴重，特別是根結線蟲泛濫。目前我國番茄種植土傳 病害發生嚴重，連作造成番茄種植土壤質量下降，每年因根結線蟲減產30%，占番茄種植面 積的40%以上，其中以北方地區設施番茄種植過程中根結線蟲的影響，制約著番茄集約化 生產。在山東設施蔬菜種植集約化程度較高地區，根結線蟲連作障礙現象嚴重，番茄生產受 到嚴重制約。農業生產中為了提高番茄的抗根結線蟲，目前生產上主要采用燜棚方式進行， 而番茄移苗栽培是主要的栽培方式，番茄土壤連作障礙與番茄種植生產存在較大的矛盾。 [0003]目前研究已表明，接種菌根真菌不但能夠提高番茄等蔬菜植物對磷等元素吸收， 同時能夠降低病原微生物的等病害的影響，已引起較廣泛的學術興趣。但是由于菌根真菌 不能直接離體培養，嚴重制約了菌根真菌在番茄上的應用，目前將菌根真菌與番茄接種育 苗是番茄育苗化的首選方式，但是菌根真菌在大田中作用表現并不十分突出，表明菌根真 菌在根際微生物態環境中獨立貢獻作用較低，必須與其他微生物共同作用。番茄基質化育 苗已是番茄生產的重要關鍵環節，基質化育苗措施是番茄幼苗培育重要一環。

【發明內容】
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[0004] 本發明的目的是提供一種方法簡單、成本較低，不但可以降低根結線蟲對番茄侵 染，還能促進番茄生長，提高番茄抗根結線蟲能力的提高北方設施番茄抗根結線蟲的栽培 方法。
[0005] 本發明首先通過育苗基質的配制，然后培養菌根真菌和番茄幼苗共生，再將菌根 番茄幼苗移栽栽培，在番茄幼苗移栽前，利用根際溶磷菌液體菌劑接種，以使菌根化番茄與 溶磷菌建立共生關系，在番茄營養生殖階段調控根際微生物環境，可以促進菌根化番茄與 溶磷菌建立共生關系，提高菌根真菌的侵染狀況，可大大提高番茄抗根結線蟲能力，降低根 結線蟲對番茄的侵染，提高番茄生長，從而實現本發明的目的。
[0006] 本發明的提高北方設施番茄抗根結線蟲的栽培方法，其特征在于，包括以下步 驟：
[0007]A、育苗基質的制備：所述的育苗基質按體積份計，包括稻殼2-4份、發酵雞糞1-3 份、河沙1-2份和珍珠巖1份，混合均勾，滅菌后（121°C條件下，滅菌40-60分鐘，取出冷卻 至30-40°C)，制得育苗基質；
[0008] B、在育苗基質上接種菌根真菌，形成菌根番茄接種劑，然后在此菌根番茄接種劑 上播種番茄種子，培養，生長出番茄幼苗；
[0009] C、在番茄幼苗移栽前，在番茄幼苗根系部位接種溶磷菌，移栽時，連同菌根番茄接 種劑一起移栽番茄幼苗。然后對移栽后的番茄幼苗覆土，對番茄幼苗進行栽培管理。
[0010] 所述的菌根真菌優選為摩西球囊霉（Glomusmosseae)。
[0011] 所述的溶磷菌優選為產堿假單胞菌（Pseudomonasalcaligenes)。
[0012] 所述的在育苗基質上接種菌根真菌，形成菌根番茄接種劑，然后在此菌根番茄接 種劑上播種番茄種子，培養，生長出番茄幼苗優選為：在育苗基質上接種摩西球囊霉，形成 菌根番茄接種劑，然后在此菌根番茄接種劑上播種番茄種子，培養，生長出番茄幼苗，確保 單株番茄幼苗含90~150個摩西球囊霉孢子。
[0013] 優選，以每克含40個摩西球囊霉孢子的摩西球囊霉固體菌劑與育苗基質按照體 積比為1 :25~35的比例混合均勻，形成菌根番茄接種劑，然后填充至泡沫空穴育苗盤中， 在穴中菌根番前接種劑表面下方2~3cm處播種番前種子，培養，生長出番前幼苗。
[0014] 優選，所述的摩西球囊霉固體菌劑是通過以下方法制備的：以過2_篩的河沙為 基質，經高溫滅菌后，自然狀態下放置10~14天，然后放入盆中，每2kg基質接種100-150g 摩西球囊霉菌原種，拌勻，加入基質重量18~25%的水，播種高粱種子，五個月后收獲被摩 西球囊霉侵染的宿主植物和含有摩西球囊霉孢子、根外菌絲的基質原種；然后把高粱地上 部分剪去，剪碎根段，與基質原種混勻，即制得摩西球囊霉固體菌劑。每克摩西球囊霉固體 菌劑含有40個摩西球囊霉孢子。
[0015] 在番茄幼苗移栽前，在番茄幼苗根系部位接種溶磷菌優選為：在番茄幼苗移栽前 2周開始，在番茄幼苗根系部位接種產堿假單胞菌液體菌劑2~4次，每次每株番茄幼苗接 種量為1〇 3~10 5個產堿假單胞菌。
[0016] 所述的產堿假單胞菌液體菌劑是通過以下方法制備的：在每1000ml含有5. 0~ 16. 0g碳酸鈣的麥麩浸汁中，接入產堿假單胞菌，常規條件下培養，得到產堿假單胞菌液體 菌劑。
[0017] 按照本發明的方法培養的番茄苗（育苗基質及接種菌根真菌和溶磷菌培養的番 茄苗），經過大田和盆栽試驗驗證，能夠顯著降低根結線蟲對番茄根系侵染，增強番茄抗根 結線蟲能力，減輕細胞膜脂過氧化程度，穩定了細胞膜結構，降低了細胞膜滲透性，顯著提 高移栽后番茄對根結線蟲抗侵染能力，減輕病原微生物傷害，對北方設施番茄生產具有重 要意義。與常規番茄育苗相比，本發明能夠提高番茄生物量10-15%，提高或顯著提高番茄 產量，采用本方法對番茄根結線蟲防治效果可以達到38-56%，番茄生產達到高產優質的基 本要求。
[0018] 通過番茄幼苗接種菌根真菌，使番茄育苗過程的菌根化，菌根化番茄幼苗再接種 溶磷菌，使番茄根系與菌根真菌、溶磷菌建立共生關系，不但改善根際微生態環境，提高菌 根真菌侵染，而且提高番茄抗根結線蟲能力，增強番茄根系抵抗外界其他病原微生物侵染， 達到控制番茄根結線蟲的功效，從而有效提高番茄抗根結線蟲的能力。本發明的方法，工藝 簡單，便于操作，因而易于進行工廠化番茄育苗生產。
[0019] 本發明中使用的產堿假單胞菌（Pseudomonasalcaligenes)和摩西球囊 霉（Glomusmosseae)為現有技術中公開的菌株。其中產喊假單胞菌（Pseudomonas alcaligenes)已經在文獻中公開記載（參考文獻：LinZhang&JiequnFan&Xiaodong Ding&XinhuaHe&FusuoZhang&GuFeng.Hyphosphereinteractionsbetweenan arbuscularmycorrhizalfungusandaphosphatesolubilizingbacteriumpromote phytatemineralizationinsoil);摩西球囊霉（Glomusmosseae)已經在文南犬中公開 記載（參考文南犬：XiaodongDing&XinhuaSui&Fangffang&JunhuaGao&XinhuaHe&Fusuo Zhang&JunchengYang&GuFeng.SynergisticinteractionsbetweenGlomusmosseaeand Bradyrhizobiumjaponicuminenhancingprotonreleasefromnodulesandhyphae. Mycorrhiza, 2012, 22:51-58)，上述兩微生物本申請人也持有，并且保證可以在本發明申請 日起20年內向公眾提供。
【具體實施方式】：
[0020] 以下實施例是對本發明的進一步說明，而不是對本發明的限制。
[0021] 實施例1
[0022] 1、番茄育苗基質的制備：按照體積比取3份稻殼、2份發酵雞糞（堆肥發酵法制 備：在通風好、地勢高的地方，將帶墊料的雞糞堆積成堆，外面用泥漿封閉；發酵時間為夏 季15天左右，冬季50天左右）、2份粒徑為1mm的河沙和1份粒徑為1mm的珍珠巖（稻殼： 發酵雞糞：河沙：珍珠巖=3:2:2:1)，混合均勻，形成混合物，后將混合物在121°C條件下， 滅菌50分鐘，取出冷卻至40°C，制得育苗基質，備用。
[0023] 2、摩西球囊霉固體菌劑的制備方法：以過2_篩的河沙為基質，經高溫滅菌后（每 次121°C高壓蒸汽滅菌45min)，自然狀態下放置10天，然后裝兩公斤放入塑料盆中，接種 100g摩西球囊霉菌原種，拌勻，加入基質重量25 %的自來水，播種高粱種子，保持正常生 長，六個月后即可得到被摩西球囊霉菌侵染的宿主植物和含有摩西球囊霉菌孢子、根外菌 絲的基質原種；把高粱地上部分剪去，剪碎根段，并與含有摩西球囊霉菌孢子、根外菌絲的 基質混勻，即制得摩西球囊霉固體菌劑。每克摩西球囊霉固體菌劑含有40個摩西球囊霉孢 子。
[0024] 3、將此摩西球囊霉固體菌劑按照體積比1 :25與育苗基質混合均勻，而得到菌根 番茄接種劑；以基質育苗法進行番茄育苗，將菌根番茄接種劑填充至泡沫孔穴育苗盤的孔 穴中，然后在菌根番前接種劑表面下方2~3cm處播種番前種子，培養，生長出番前幼苗。
[0025] 4、產堿假單胞菌液體菌劑的制備與接種：培養基：每1000ml麥麩浸汁中含有5g 碳酸鈣（CaC03)，pH6. 5 ;將產堿假單胞菌接種到1000ml上述培養基中，200rpm，28°C，培養 24小時，得到產堿假單胞菌液體菌劑，每毫升菌液的菌數達到1.OX109個/mL。在番茄幼 苗移栽前2周開始，在番茄幼苗根系部位接種兩次產堿假單胞菌液體菌劑，每次每株番茄 幼苗接種量