本發明涉及(ji)牛(niu)樟(zhang)芝(zhi)子(zi)實(shi)體(ti)培育,具(ju)體(ti)涉及(ji)一種牛(niu)樟(zhang)芝(zhi)子(zi)實(shi)體(ti)椴木定(ding)向培養方法。
背景技術:
1、牛樟(zhang)芝屬擔子菌(jun)綱、多孔菌(jun)目、多孔菌(jun)科、薄孔菌(jun)屬,是一種(zhong)(zhong)珍稀(xi)的(de)藥用真菌(jun),牛樟(zhang)芝中含(han)有(you)多種(zhong)(zhong)生(sheng)理活性成分,如多糖、三萜類化(hua)合物、超(chao)氧歧化(hua)酶(sod)腺苷、蛋(dan)白質(zhi)(zhi)(含(han)免疫蛋(dan)白)、多種(zhong)(zhong)維(wei)生(sheng)素、微量元(yuan)素(鈣、磷、楮)、核酸(suan)、凝集(ji)(ji)素、氨基(ji)酸(suan)、膽固醇、木(mu)質(zhi)(zhi)素、血(xue)(xue)壓(ya)(ya)穩定物質(zhi)(zhi)等。其具備的(de)生(sheng)理活性功能具有(you)抗腫瘤(liu)、增強免疫力(li)、抗病毒、抗過敏、抗高血(xue)(xue)壓(ya)(ya)、抑制血(xue)(xue)小板(ban)凝集(ji)(ji)、降(jiang)血(xue)(xue)壓(ya)(ya)、降(jiang)膽固醇、抗細菌(jun)、保護肝臟等。
2、因牛樟(zhang)(zhang)芝一(yi)般生長(chang)在已腐(fu)朽(xiu)的(de)(de)老樹干的(de)(de)中空內壁(bi)或陰暗潮濕(shi)的(de)(de)表面,其生長(chang)比較(jiao)(jiao)雜亂,加(jia)之腐(fu)朽(xiu)的(de)(de)樟(zhang)(zhang)木提供的(de)(de)營(ying)養有限(xian),大多都只能形(xing)成(cheng)(cheng)一(yi)層牛樟(zhang)(zhang)芝菌膜或較(jiao)(jiao)薄的(de)(de)子實(shi)體(ti)。形(xing)成(cheng)(cheng)子實(shi)體(ti)時(shi)間(jian)也(ye)極(ji)為(wei)漫長(chang),一(yi)年左右才能形(xing)成(cheng)(cheng)較(jiao)(jiao)薄的(de)(de)子實(shi)體(ti)。
3、目前很多椴(duan)木(mu)栽培(pei)都存在著接(jie)種(zhong)后生長(chang)(chang)(chang)點過(guo)多、營養(yang)(yang)供給不(bu)足,造成存活困難、不(bu)易形成子實體、培(pei)養(yang)(yang)周期長(chang)(chang)(chang)、產率低(di)等問題。雖然(ran)牛樟(zhang)芝菌可以分解木(mu)材來(lai)提供自身營養(yang)(yang),但因為木(mu)材本(ben)身所(suo)(suo)提供的(de)(de)營養(yang)(yang)也很低(di),且一般接(jie)種(zhong)后整個牛樟(zhang)芝菌會在椴(duan)木(mu)上隨意的(de)(de)生長(chang)(chang)(chang),生長(chang)(chang)(chang)非常雜亂,生長(chang)(chang)(chang)點過(guo)多,而(er)椴(duan)木(mu)所(suo)(suo)提供的(de)(de)營養(yang)(yang)就更加不(bu)足以維持(chi)這樣的(de)(de)生長(chang)(chang)(chang)方式。
4、因此,現如今急需提供一種牛樟(zhang)芝子實(shi)體椴木定向(xiang)培養方法,以此來(lai)解決上述(shu)問題。
技術實現思路
1、本發明的目的是(shi)克(ke)服現有(you)技術的不(bu)足和缺陷(xian),提供一種牛(niu)(niu)樟芝子(zi)實(shi)體椴木(mu)定(ding)向(xiang)培養方法,有(you)效解決了牛(niu)(niu)樟芝生長(chang)雜(za)亂,椴木(mu)營養消(xiao)耗過快,牛(niu)(niu)樟芝生長(chang)緩(huan)慢(man),不(bu)易形成較優(you)子(zi)實(shi)體的問題。
2、本(ben)發明的(de)目的(de)是通過以下技(ji)術方案來實(shi)現(xian)的(de):
3、一種牛樟芝子實體椴木定向(xiang)培(pei)養方法,包括以下步驟(zou):
4、步驟1:椴木處(chu)理
5、將椴木留出(chu)兩端,其余部(bu)分用(yong)薄膜包裹或涂刷石灰漿中的任意一種,再裝入pe袋滅菌;
6、步驟2:牛樟(zhang)芝(zhi)固體菌種培植(zhi)
7、將(jiang)牛樟芝菌(jun)種(zhong)(zhong)接種(zhong)(zhong)于斜(xie)(xie)面培養基(ji)(ji)(ji)中(zhong)(zhong)進行(xing)活化,再將(jiang)活化的牛樟芝斜(xie)(xie)面菌(jun)種(zhong)(zhong)切成5mm大小(xiao)的菌(jun)絲塊接種(zhong)(zhong)于液體(ti)(ti)(ti)種(zhong)(zhong)子培養基(ji)(ji)(ji)中(zhong)(zhong),將(jiang)液體(ti)(ti)(ti)種(zhong)(zhong)子培養基(ji)(ji)(ji)置于搖(yao)床(chuang)上,在(zai)25℃下恒溫培養5天(tian),得到液體(ti)(ti)(ti)菌(jun)種(zhong)(zhong),將(jiang)10-20ml的液體(ti)(ti)(ti)菌(jun)種(zhong)(zhong)接種(zhong)(zhong)到樟粉(fen)(fen)固(gu)體(ti)(ti)(ti)培養基(ji)(ji)(ji)中(zhong)(zhong),上搖(yao)床(chuang)培養10天(tian),待木粉(fen)(fen)成球狀并長滿粉(fen)(fen)紅色菌(jun)體(ti)(ti)(ti)和孢子后得到固(gu)體(ti)(ti)(ti)種(zhong)(zhong)子;
8、步驟3:將固體(ti)種(zhong)子接入處理完成的椴木中培養(yang)
9、將固體種子(zi)接入椴木中,置于18-26℃、黑(hei)暗且(qie)無菌的環境下培養(yang)一定時間可形(xing)成(cheng)子(zi)實體。
10、作(zuo)為本(ben)發(fa)明的一種(zhong)優(you)選技術方案,所述薄(bo)膜為聚丙烯薄(bo)膜、聚乙烯薄(bo)膜中的一種(zhong)。
11、作為本發明的(de)一種優選技術方案,所述石(shi)灰(hui)漿由生石(shi)灰(hui)和水混合(he)反應得到。
12、作為本發明的一(yi)種(zhong)優選(xuan)技術方案,所(suo)述步驟1具體為,在椴(duan)(duan)木的一(yi)端(duan)分(fen)別(bie)開設(she)多個凹槽,椴(duan)(duan)木的另一(yi)端(duan)用(yong)于(yu)補(bu)充(chong)水分(fen),再將其余部分(fen)采用(yong)薄膜包裹或涂刷石灰(hui)漿。
13、作為(wei)本(ben)發明(ming)的一(yi)種優選技術(shu)方(fang)案(an),所述斜面(mian)培養(yang)基(ji)的配制(zhi)為(wei):取麥芽提取物(wu)20g、葡萄糖20g、蛋白胨1g、瓊(qiong)脂粉20g,定(ding)容至1l,ph值為(wei)5.0。
14、作為本發明的一種(zhong)(zhong)優選技術方案,所述液體(ti)種(zhong)(zhong)子培養基的配(pei)制為:取麥(mai)芽提取物(wu)20g、葡萄糖20g、蛋(dan)白胨1g、定容至1l,ph值為5.0。
15、作為(wei)本發(fa)明的(de)(de)一種(zhong)優選技(ji)術方案,所述固(gu)體(ti)(ti)樟粉培(pei)養基的(de)(de)配制為(wei):取麥(mai)芽提取物20g、葡萄糖20g、蛋白胨(dong)1g、硫(liu)酸(suan)鎂0.5g、磷酸(suan)二氫鉀(jia)1g,定容(rong)至1l,再與樟樹的(de)(de)木粉混合均勻(yun),配成含(han)水量為(wei)40-90%的(de)(de)固(gu)體(ti)(ti)培(pei)養基。
16、作為本發明的(de)一種(zhong)優選(xuan)技術方案,所述(shu)牛樟(zhang)芝(zhi)菌種(zhong)采用atcc183和(he)atcc183175中的(de)一種(zhong)。
17、作為本(ben)發明的(de)(de)一(yi)種優選技術方案,所述步驟4具體(ti)為,將固體(ti)種子(zi)(zi)填滿椴(duan)木上的(de)(de)凹槽,固體(ti)種子(zi)(zi)的(de)(de)一(yi)端向上,立于pe袋中,用(yong)透(tou)氣膜將pe袋封口(kou),置于18-26℃、黑暗且無菌的(de)(de)環境下培(pei)養,培(pei)養20-30天,可(ke)看(kan)(kan)到椴(duan)木長(chang)滿橘紅色的(de)(de)菌絲體(ti),90天可(ke)看(kan)(kan)到子(zi)(zi)實體(ti)形成(cheng),180天可(ke)形成(cheng)較厚(hou)的(de)(de)子(zi)(zi)實體(ti)。
18、作為本(ben)發明的一種優選(xuan)技術方(fang)案,所述(shu)椴(duan)木(mu)(mu)為牛樟芝椴(duan)木(mu)(mu)、香樟椴(duan)木(mu)(mu)、杉樹椴(duan)木(mu)(mu)、櫟樹椴(duan)木(mu)(mu)中(zhong)的一種
19、與現有(you)技術相比,本(ben)發明具有(you)如下(xia)的(de)有(you)益效果(guo):
20、本發(fa)明(ming)通(tong)過(guo)對椴(duan)(duan)木(mu)進行處理,預留出椴(duan)(duan)木(mu)的(de)(de)(de)兩端,其余部分(fen)采用薄膜包裹或涂刷(shua)石灰漿,抑制牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)菌大(da)面積擴散生長,以使牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)菌在椴(duan)(duan)木(mu)上(shang)定向生長,保證椴(duan)(duan)木(mu)為牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)菌生長所(suo)提(ti)供的(de)(de)(de)營(ying)養(yang)不(bu)會(hui)被(bei)快速消耗,更有(you)利于定向生長的(de)(de)(de)牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)菌攝取椴(duan)(duan)木(mu)中的(de)(de)(de)營(ying)養(yang)快速生長,形成較優(you)的(de)(de)(de)子實(shi)(shi)體。本發(fa)明(ming)定向培養(yang)的(de)(de)(de)牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)具有(you)更好的(de)(de)(de)生長優(you)勢,有(you)效(xiao)提(ti)高了牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)子實(shi)(shi)體的(de)(de)(de)質(zhi)量,縮短了牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)生長周期,從而實(shi)(shi)現牛(niu)樟(zhang)(zhang)(zhang)芝(zhi)(zhi)椴(duan)(duan)木(mu)子實(shi)(shi)體工業化培養(yang)方式(shi)。
1.一種牛樟芝(zhi)子實體椴木定向(xiang)培養方法,其特征在于,包括以下步驟:
2.根據權利要求1所(suo)述的一(yi)種(zhong)牛樟芝子實體椴木定向培養方法,其特征在于,所(suo)述薄(bo)膜為聚(ju)丙烯薄(bo)膜、聚(ju)乙(yi)烯薄(bo)膜中的一(yi)種(zhong)。
3.根據權利(li)要求(qiu)1所述的一種牛樟芝子實體椴(duan)木定向培養方法,其特征在(zai)于,所述石灰(hui)漿由生石灰(hui)和水混合反應得(de)到。
4.根據權利要求(qiu)1所述的(de)一種(zhong)牛樟芝子實體椴木定向(xiang)培養方法,其特征(zheng)在于(yu),所述步驟1具體為,在椴木的(de)一端分(fen)別開設(she)多個(ge)凹槽,椴木的(de)另一端用于(yu)補充水(shui)分(fen),再(zai)將其余部分(fen)采用薄膜包裹(guo)或涂刷石灰(hui)漿。
5.根據權(quan)利要求(qiu)1所(suo)(suo)述的(de)一種(zhong)牛(niu)樟芝子實體椴木定(ding)向培養方(fang)法,其特征在(zai)于,所(suo)(suo)述斜面培養基的(de)配(pei)制為:取(qu)麥(mai)芽(ya)提(ti)取(qu)物20g、葡萄(tao)糖20g、蛋白(bai)胨1g、瓊脂粉20g,定(ding)容至1l,ph值為5.0。
6.根據權利要求1所(suo)述(shu)的一種(zhong)牛樟芝子實(shi)體(ti)(ti)椴木定向培(pei)養方法(fa),其特(te)征在于,所(suo)述(shu)液(ye)體(ti)(ti)種(zhong)子培(pei)養基的配制為:取麥芽提(ti)取物20g、葡萄糖20g、蛋(dan)白胨1g、定容(rong)至1l,ph值為5.0。
7.根據權利要求1所述的(de)一種牛樟(zhang)芝子實體(ti)椴(duan)木定(ding)向培(pei)養(yang)方法,其特征在于,所述固體(ti)樟(zhang)粉培(pei)養(yang)基(ji)的(de)配(pei)制(zhi)為:取麥芽提取物20g、葡萄糖20g、蛋白胨1g、硫(liu)酸(suan)鎂0.5g、磷酸(suan)二氫鉀1g,定(ding)容至(zhi)1l,再與(yu)樟(zhang)樹(shu)的(de)木粉混合均勻,配(pei)成含水量(liang)為40-90%的(de)固體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)。
8.根據(ju)權利要求1所述(shu)的一(yi)種(zhong)牛樟芝(zhi)子實體椴木定向培(pei)養方法,其特征在于,所述(shu)牛樟芝(zhi)菌種(zhong)采用(yong)atcc183和atcc183175中(zhong)的一(yi)種(zhong)。
9.根(gen)據(ju)權利(li)要求4所述(shu)的(de)一(yi)種(zhong)牛樟芝(zhi)子實體(ti)(ti)椴(duan)木(mu)定向培養(yang)方法(fa),其特征在于(yu),所述(shu)步驟4具體(ti)(ti)為,將固(gu)體(ti)(ti)種(zhong)子填(tian)滿椴(duan)木(mu)上的(de)凹槽,固(gu)體(ti)(ti)種(zhong)子的(de)一(yi)端向上,立于(yu)pe袋(dai)中,用(yong)透氣膜將pe袋(dai)封口,置于(yu)18-26℃、黑暗且無菌(jun)的(de)環(huan)境下培養(yang),培養(yang)20-30天,可看到(dao)椴(duan)木(mu)長滿橘(ju)紅色的(de)菌(jun)絲體(ti)(ti),90天可看到(dao)子實體(ti)(ti)形成,180天可形成較(jiao)厚的(de)子實體(ti)(ti)。
10.根據權利要求8所述的一種(zhong)牛(niu)樟芝子實體椴(duan)木定向培養方法(fa),其特征(zheng)在于(yu),所述椴(duan)木為牛(niu)樟芝椴(duan)木、香樟椴(duan)木、杉樹椴(duan)木、櫟樹椴(duan)木中的一種(zhong)。