本發明涉及(ji)農業(ye)技術領域，具體涉及(ji)一種新型(xing)石(shi)斛培養方法。
背景技術：
鐵皮(pi)石(shi)(shi)斛(hu)(hu)(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是(shi)蘭科石(shi)(shi)斛(hu)(hu)屬多年生(sheng)(sheng)附(fu)生(sheng)(sheng)草(cao)本(ben)植物(wu)，是(shi)一(yi)(yi)種(zhong)名(ming)貴的(de)中(zhong)藥材(cai)，具有(you)悠久(jiu)(jiu)的(de)應用歷史，被列(lie)為(wei)九(jiu)大仙(xian)草(cao)之首，是(shi)藥中(zhong)黃金(jin)。《神(shen)農(nong)本(ben)草(cao)經》記(ji)載：“石(shi)(shi)斛(hu)(hu)除痹下氣，補(bu)五(wu)臟虛(xu)勞(lao)羸瘦，強(qiang)陰(yin)(yin)益(yi)精，久(jiu)(jiu)服厚腸胃”。金(jin)元(yuan)四(si)(si)大名(ming)醫之一(yi)(yi)朱丹溪(xi)稱石(shi)(shi)斛(hu)(hu)有(you)卓著的(de)滋陰(yin)(yin)健(jian)(jian)陽(yang)功效(xiao)，并且在中(zhong)醫補(bu)陰(yin)(yin)藥物(wu)中(zhong)，石(shi)(shi)斛(hu)(hu)是(shi)獨樹一(yi)(yi)幟的(de)。古往今(jin)來石(shi)(shi)斛(hu)(hu)被稱為(wei)滋陰(yin)(yin)補(bu)腎、養(yang)生(sheng)(sheng)保健(jian)(jian)之上品，一(yi)(yi)年四(si)(si)季(ji)皆可服用，且對各(ge)臟器的(de)陰(yin)(yin)虛(xu)之證有(you)通補(bu)之效(xiao)。長期(qi)的(de)臨床試驗(yan)和科學研(yan)究(jiu)的(de)結(jie)果表(biao)明(ming)石(shi)(shi)斛(hu)(hu)具有(you)補(bu)陰(yin)(yin)強(qiang)身、健(jian)(jian)壯(zhuang)筋骨，延緩衰老、潤膚養(yang)顏，治療(liao)眼疾、降低血(xue)糖(tang)、滋養(yang)肝陰(yin)(yin)、利膽(dan)溶石(shi)(shi)等(deng)多種(zhong)功效(xiao)，同時這(zhe)些功效(xiao)與石(shi)(shi)斛(hu)(hu)中(zhong)所含的(de)豐富的(de)營養(yang)成分密切相關，現(xian)代醫學研(yan)究(jiu)表(biao)明(ming)：鐵皮(pi)石(shi)(shi)斛(hu)(hu)中(zhong)所含有(you)的(de)石(shi)(shi)斛(hu)(hu)多糖(tang)，氨基酸、生(sheng)(sheng)物(wu)堿(jian)及菲類化合物(wu)等(deng)具有(you)較(jiao)高(gao)的(de)醫療(liao)保健(jian)(jian)作(zuo)用，能夠提高(gao)機體(ti)免疫力。
長期以來，應用鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)主要以采(cai)集野(ye)(ye)生(sheng)資(zi)源(yuan)(yuan)為主。近年來，隨著人們對鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)藥用價值(zhi)認識的(de)(de)日益提(ti)高，鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)的(de)(de)需求量(liang)也(ye)不斷提(ti)高，傳統的(de)(de)野(ye)(ye)生(sheng)資(zi)源(yuan)(yuan)已(yi)不能滿足人們的(de)(de)需求量(liang)，甚至(zhi)有(you)些地區的(de)(de)野(ye)(ye)生(sheng)資(zi)源(yuan)(yuan)面臨枯竭。為了更好(hao)地保護和利用鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)資(zi)源(yuan)(yuan)，越(yue)來越(yue)多(duo)的(de)(de)科研工(gong)作(zuo)(zuo)者開始(shi)(shi)響應國家(jia)號召，開始(shi)(shi)關(guan)注于(yu)鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)的(de)(de)研發工(gong)作(zuo)(zuo)，包括鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)人工(gong)馴化栽培(pei)，無性繁殖(zhi)(zhi)等，鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)的(de)(de)組織(zhi)培(pei)養技術是(shi)(shi)鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)繁殖(zhi)(zhi)的(de)(de)一種重要手段，也(ye)是(shi)(shi)大力推廣鐵(tie)皮(pi)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)種植、繁殖(zhi)(zhi)苗(miao)木的(de)(de)關(guan)鍵途徑，但是(shi)(shi)一般(ban)組織(zhi)培(pei)養過程中(zhong)幼苗(miao)生(sheng)長周(zhou)期較(jiao)長，消(xiao)耗大量(liang)資(zi)源(yuan)(yuan)，增加組培(pei)生(sheng)產成本，且所得的(de)(de)培(pei)育的(de)(de)過程中(zhong)容易發生(sheng)病蟲害，所得的(de)(de)石(shi)(shi)(shi)(shi)斛(hu)(hu)品(pin)質也(ye)很難保證。
技術實現要素：
為解決(jue)上(shang)述問題，本發(fa)明提供(gong)了一種新型石斛培養(yang)方法。
為實現上述目的，本發明采取的技術方(fang)案為：
一種新型石斛培養方法，包(bao)括如下步驟：
S1、將成(cheng)熟鐵皮石(shi)斛種(zhong)子(zi)置于浸(jin)(jin)種(zhong)劑(ji)消毒浸(jin)(jin)泡20～40min，所述浸(jin)(jin)種(zhong)劑(ji)由(you)以(yi)下重量份的原料制備而成(cheng)：
0.1-0.3份MnSO4粉末、0.05-0.15份CuSO4粉末、0.1-0.3份ZnSO4粉末、0.2-0.4份NiSO4粉末、0.2-0.5份(NH4)6Mo7O24.4H2O粉末、3～5份多(duo)菌靈、10～20份EM原露100倍稀釋液；
S2、將消毒浸種(zhong)完成后的種(zhong)子播種(zhong)于自(zi)制培養基中培養15-20天，經過種(zhong)胚膨大、萌發形成綠色圓球莖；培養條件(jian)為(wei)27-30℃，光(guang)照為(wei)1800-2300lx，光(guang)照時間為(wei)13-14h/d；
S3、將圓球莖(jing)轉(zhuan)入加蕨根發(fa)酵粉的(de)自制培養基(ji)中培養23-28天(tian)，使得圓球莖(jing)堆積在(zai)培養基(ji)中，并出(chu)現葉原基(ji)和分化苗；培養條件：溫(wen)度(du)25-26℃，光(guang)照(zhao)度(du)1700-2100lx，光(guang)照(zhao)時間為13-14h/d；
S4、將圓球(qiu)莖分(fen)化苗(miao)用清水(shui)沖洗(xi)后轉入改良1/2MS培養基(ji)中培養20-30天，經(jing)誘導產生(sheng)葉原基(ji)；
S5、將步驟(zou)S4中產生的(de)小苗(miao)轉入改良MS培養基中進行壯苗(miao)，經過60-70天(tian)壯苗(miao)培養，高度(du)達到1.5-2.5cm的(de)幼苗(miao)出現，培養條件(jian)：溫度(du)25-26℃，光照(zhao)度(du)1700-2100lx，光照(zhao)時間為13-14h/d；
S6、將步驟(zou)S5得到的幼苗轉入加花(hua)寶1號(hao)和2號(hao)的改良培養(yang)基(ji)進行誘導生根；
S7、將步(bu)驟(zou)S6得到的生(sheng)根(gen)苗(miao)進(jin)行煉(lian)苗(miao)馴(xun)化(hua)。
優選地，所述自制(zhi)培養(yang)基通過以下(xia)步驟(zou)制(zhi)備(bei)所得：
步驟一、取苔蘚泥炭(tan)土36-48份(fen)(fen)(fen)、酒糟8-10份(fen)(fen)(fen)、樹皮(pi)塊(kuai)18-22份(fen)(fen)(fen)、硝酸(suan)鉀(jia)0.5-0.9份(fen)(fen)(fen)、碳(tan)酸(suan)鈣(gai)纖(xian)維(wei)2-3份(fen)(fen)(fen)、蔗糖1-2份(fen)(fen)(fen)、磷酸(suan)二氫鉀(jia)0.5-1.5份(fen)(fen)(fen)、尿素0.2-0.4份(fen)(fen)(fen)、醋糟8-12份(fen)(fen)(fen)、豆餅粉(fen)8-12份(fen)(fen)(fen)分(fen)別進行粉(fen)碎后混合攪(jiao)拌均勻，加(jia)水(shui)，使(shi)其含水(shui)量達60％-70％，攪(jiao)拌20-40分(fen)鐘(zhong)，pH控(kong)制在7.0-7.5，其顆(ke)粒大小在5mm以下，顆(ke)粒粗細度均勻；
步驟(zou)二、將(jiang)拌(ban)勻(yun)后的(de)原(yuan)料(liao)堆積發酵(jiao)，做成高1.1-1.3米(mi)、底寬1.3-1.7米(mi)、長度不(bu)限的(de)梯形堆，在(zai)其上打(da)一些通(tong)氣孔，發酵(jiao)9-10天，發酵(jiao)結(jie)束后再加入適量的(de)水，拌(ban)勻(yun)，調節(jie)含水量在(zai)60-70％之間(jian)；
步(bu)驟(zou)三、常壓下先(xian)將(jiang)溫(wen)度(du)升至110-115℃，保(bao)溫(wen)20-25min；然后將(jiang)溫(wen)度(du)上升至120-125℃，保(bao)溫(wen)60-70min；再將(jiang)溫(wen)度(du)升至130-145℃，在壓力為0.13-0.14MPa的情況下保(bao)溫(wen)60-70min，最后再悶(men)置30-35min，停止(zhi)加熱，讓其(qi)自然冷卻到25℃以(yi)下，得(de)自制培養基。
優(you)選地，所述加蕨根發(fa)酵(jiao)粉的自制培養基由(you)以下(xia)重量份的原(yuan)料制備而(er)成：
苔蘚泥炭土36-48份(fen)、酒糟8-10份(fen)、樹皮塊18-22份(fen)、硝酸(suan)(suan)鉀0.5-0.9份(fen)、碳(tan)酸(suan)(suan)鈣纖維2-3份(fen)、蔗糖1-2份(fen)、磷酸(suan)(suan)二氫鉀0.5-1.5份(fen)、尿素(su)0.2-0.4份(fen)、醋(cu)糟8-12份(fen)、豆餅(bing)粉8-12份(fen)、蕨(jue)根發酵粉為(wei)10-20份(fen)。
優(you)選地，所述步驟S4中(zhong)的(de)改(gai)良1/2MS培養基(ji)的(de)配方為硝酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)鉀19000mg/L、硝酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)銨16500mg/L、磷(lin)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)二氫鉀1700mg/L、氨基(ji)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)螯(ao)合鎂3700mg/L、碘酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)鈣4400mg/L、碘化鉀166mg/L、硼酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)1240mg/L、硫酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)錳(meng)2230mg/L、硫酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)鋅860mg/L、鉬酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)鈉50mg/L、硫酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)銅5mg/L、三(san)氯化六氨合鈷5mg/L、硫酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)亞鐵(tie)2780mg/L、乙二胺四乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)二鈉3730mg/L、肌醇(chun)20000mg/L、甘氨酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)400mg/L、鹽(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)硫胺素100mg/L、鹽(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)吡哆醇(chun)100mg/L、煙酸(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)(suan)100mg/L、蕨根發酵(jiao)粉15g/L、蔗糖30g/L、瓊脂6.5-8g/L。
優選地，所述步驟S5中的改良MS培養基(ji)的配(pei)方為：硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)(suan)鉀(jia)38000mg/L、硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)(suan)銨(an)33000mg/L、磷酸(suan)(suan)(suan)(suan)二氫鉀(jia)3400mg/L、氨基(ji)酸(suan)(suan)(suan)(suan)螯合鎂7400mg/L、碘酸(suan)(suan)(suan)(suan)鈣8800mg/L、碘化鉀(jia)166mg/L、硼(peng)酸(suan)(suan)(suan)(suan)1240mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)錳4460mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)鋅(xin)1720mg/L、鉬酸(suan)(suan)(suan)(suan)鈉50mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)銅(tong)5mg/L、三(san)氯(lv)化六(liu)氨合鈷5mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)亞鐵5560mg/L、乙二胺(an)四乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)二鈉7460mg/L、肌醇20000mg/L、甘氨酸(suan)(suan)(suan)(suan)400mg/L、鹽(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)硫(liu)胺(an)素(su)100mg/L、鹽(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)吡哆醇100mg/L、煙(yan)酸(suan)(suan)(suan)(suan)100mg/L、NAA6ml/L、蕨根發酵粉15g/L、蔗糖30g/L、瓊脂(zhi)6.5-8g/L。
優(you)選地(di)，所(suo)述步驟S6中(zhong)的加(jia)花(hua)(hua)寶(bao)(bao)1號和2號的改(gai)良(liang)培養基的配方為：花(hua)(hua)寶(bao)(bao)1號2000mg/L、花(hua)(hua)寶(bao)(bao)2號2000mg/L、肌醇20000mg/L、甘氨酸(suan)400mg/L、鹽酸(suan)硫胺素100mg/L、鹽酸(suan)吡哆醇100mg/L、煙(yan)酸(suan)100mg/L、碘(dian)酵母100g/L、NAA5ml/L、IBA5ml/L、蔗糖30g/L、瓊(qiong)脂6.5-8g/L。
優選地，所(suo)述蕨(jue)根發酵粉(fen)通過以下(xia)步驟制備所(suo)得：
將洗凈后的蕨根瀝干，置(zhi)于汽(qi)爆罐(guan)(guan)內(nei)(nei)，先通(tong)入氮氣至汽(qi)爆罐(guan)(guan)內(nei)(nei)壓力(li)為(wei)0.7-1.5MPa，爆破(po)處(chu)理7-23min；然(ran)后迅速通(tong)入蒸汽(qi)至汽(qi)爆罐(guan)(guan)內(nei)(nei)壓力(li)為(wei)1.5-2.1MPa，蒸汽(qi)爆破(po)處(chu)理0.8-2.8min后，按(an)照接(jie)(jie)種(zhong)量1.5-1.7％的比(bi)例接(jie)(jie)種(zhong)微生物(wu)發酵(jiao)劑，保持溫(wen)度(du)25-35℃，發酵(jiao)48-54小時后，高(gao)溫(wen)滅菌(jun)，冷凍干燥，得(de)蕨根發酵(jiao)粉。
本發明具(ju)有以下有益效果：
本發明(ming)通過優化和改進(jin)各個步驟的(de)培(pei)養基對鐵(tie)皮石(shi)斛組(zu)(zu)織培(pei)養，可促進(jin)種子萌(meng)發并縮短萌(meng)發時(shi)(shi)(shi)間，為種子萌(meng)發提供充足的(de)營(ying)養，鐵(tie)皮石(shi)斛萌(meng)發率高，且(qie)萌(meng)發時(shi)(shi)(shi)間短，加快(kuai)了(le)組(zu)(zu)培(pei)苗的(de)生長速率，減(jian)少時(shi)(shi)(shi)間消(xiao)耗(hao)，降低成(cheng)本，且(qie)提高了(le)所得鐵(tie)皮石(shi)斛的(de)品(pin)質。
具體實施方式
為了使(shi)本(ben)發明(ming)的目(mu)的及(ji)優點(dian)更(geng)加清楚(chu)明(ming)白，以下結合實施例對本(ben)發明(ming)進行進一步詳細說明(ming)。應當理(li)解(jie)，此(ci)處所描(miao)述(shu)的具體實施例僅僅用以解(jie)釋本(ben)發明(ming)，并(bing)不用于限定本(ben)發明(ming)。
本發明實(shi)施例提供了一種新型石斛培(pei)養方法，包括如下步驟(zou)：
S1、將(jiang)成熟鐵皮石斛種子置于浸種劑消毒浸泡20～40min，所述浸種劑由以(yi)下(xia)重量(liang)份的原料制(zhi)備而成：
0.1-0.3份MnSO4粉末、0.05-0.15份CuSO4粉末、0.1-0.3份ZnSO4粉末、0.2-0.4份NiSO4粉末、0.2-0.5份(NH4)6Mo7O24.4H2O粉末、3～5份多(duo)菌(jun)靈(ling)、10～20份EM原露100倍稀釋液(ye)；
S2、將消(xiao)毒(du)浸種(zhong)(zhong)(zhong)完成后的種(zhong)(zhong)(zhong)子播種(zhong)(zhong)(zhong)于自制培(pei)養基中培(pei)養15-20天，經過種(zhong)(zhong)(zhong)胚膨大、萌發形成綠色圓球莖；培(pei)養條件(jian)為27-30℃，光照為1800-2300lx，光照時間為13-14h/d；
S3、將(jiang)圓球莖轉入加蕨根發酵粉的(de)自制培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中培(pei)養(yang)(yang)23-28天，使得圓球莖堆積在培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中，并(bing)出現葉原基(ji)和分化苗；培(pei)養(yang)(yang)條(tiao)件：溫度(du)25-26℃，光照(zhao)度(du)1700-2100lx，光照(zhao)時間為13-14h/d；
S4、將圓球莖分化苗用清水沖洗后轉入改良1/2MS培(pei)養基中培(pei)養20-30天，經誘導產生葉原基；
S5、將步(bu)驟S4中(zhong)產生(sheng)的(de)小苗(miao)轉入(ru)改良MS培養基中(zhong)進(jin)行壯(zhuang)苗(miao)，經過60-70天壯(zhuang)苗(miao)培養，高度達到(dao)1.5-2.5cm的(de)幼苗(miao)出現，培養條(tiao)件：溫(wen)度25-26℃，光照(zhao)度1700-2100lx，光照(zhao)時間為(wei)13-14h/d；
S6、將步驟S5得(de)到的幼苗(miao)轉入加花寶(bao)1號和2號的改良培養基進行誘(you)導生根；
S7、將步驟S6得到的生根苗(miao)進行煉苗(miao)馴化。
所述自制(zhi)培養基通過(guo)以(yi)下(xia)步驟制(zhi)備所得：
步(bu)驟一、取苔蘚泥炭土36-48份(fen)、酒糟(zao)8-10份(fen)、樹皮塊(kuai)18-22份(fen)、硝酸(suan)鉀(jia)0.5-0.9份(fen)、碳(tan)酸(suan)鈣纖(xian)維2-3份(fen)、蔗糖(tang)1-2份(fen)、磷酸(suan)二氫鉀(jia)0.5-1.5份(fen)、尿素0.2-0.4份(fen)、醋糟(zao)8-12份(fen)、豆餅粉8-12份(fen)分別進(jin)行粉碎后混合攪拌均勻，加水(shui)，使其含水(shui)量達60％-70％，攪拌20-40分鐘，pH控制在7.0-7.5，其顆(ke)(ke)粒大小在5mm以下，顆(ke)(ke)粒粗細度均勻；
步驟二、將(jiang)拌勻后的原料堆積發(fa)(fa)(fa)酵(jiao)，做成高1.1-1.3米、底(di)寬1.3-1.7米、長(chang)度不限(xian)的梯(ti)形堆，在(zai)其上打(da)一些通氣孔(kong)，發(fa)(fa)(fa)酵(jiao)9-10天，發(fa)(fa)(fa)酵(jiao)結束后再加入適(shi)量的水，拌勻，調節含(han)水量在(zai)60-70％之間；
步(bu)驟三、常壓(ya)下先將(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)度升(sheng)至(zhi)110-115℃，保(bao)溫(wen)(wen)(wen)(wen)20-25min；然(ran)后(hou)將(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)度上升(sheng)至(zhi)120-125℃，保(bao)溫(wen)(wen)(wen)(wen)60-70min；再(zai)將(jiang)溫(wen)(wen)(wen)(wen)度升(sheng)至(zhi)130-145℃，在壓(ya)力為0.13-0.14MPa的情況下保(bao)溫(wen)(wen)(wen)(wen)60-70min，最(zui)后(hou)再(zai)悶置30-35min，停止加熱，讓其自然(ran)冷(leng)卻到(dao)25℃以下，得自制(zhi)培養基。
所述加(jia)蕨根發酵粉的(de)自制培養基由以下(xia)重(zhong)量份的(de)原料制備而成：
苔蘚(xian)泥炭土36-48份(fen)(fen)、酒糟(zao)8-10份(fen)(fen)、樹(shu)皮塊18-22份(fen)(fen)、硝(xiao)酸鉀0.5-0.9份(fen)(fen)、碳酸鈣(gai)纖維2-3份(fen)(fen)、蔗糖1-2份(fen)(fen)、磷(lin)酸二(er)氫鉀0.5-1.5份(fen)(fen)、尿素(su)0.2-0.4份(fen)(fen)、醋(cu)糟(zao)8-12份(fen)(fen)、豆餅粉(fen)8-12份(fen)(fen)、蕨根(gen)發酵(jiao)粉(fen)為10-20份(fen)(fen)。
所述步驟S4中(zhong)的(de)改(gai)良(liang)1/2MS培養基的(de)配方為硝酸(suan)(suan)(suan)(suan)鉀(jia)(jia)19000mg/L、硝酸(suan)(suan)(suan)(suan)銨16500mg/L、磷酸(suan)(suan)(suan)(suan)二氫鉀(jia)(jia)1700mg/L、氨(an)(an)基酸(suan)(suan)(suan)(suan)螯合鎂3700mg/L、碘酸(suan)(suan)(suan)(suan)鈣(gai)4400mg/L、碘化鉀(jia)(jia)166mg/L、硼酸(suan)(suan)(suan)(suan)1240mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)錳2230mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)鋅(xin)860mg/L、鉬酸(suan)(suan)(suan)(suan)鈉(na)50mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)銅5mg/L、三氯化六氨(an)(an)合鈷5mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)亞鐵(tie)2780mg/L、乙二胺四乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)二鈉(na)3730mg/L、肌醇(chun)20000mg/L、甘氨(an)(an)酸(suan)(suan)(suan)(suan)400mg/L、鹽酸(suan)(suan)(suan)(suan)硫(liu)胺素100mg/L、鹽酸(suan)(suan)(suan)(suan)吡哆(duo)醇(chun)100mg/L、煙酸(suan)(suan)(suan)(suan)100mg/L、蕨根發(fa)酵粉15g/L、蔗(zhe)糖30g/L、瓊脂6.5-8g/L。
所述步驟(zou)S5中的(de)(de)改(gai)良(liang)MS培(pei)養基的(de)(de)配(pei)方為：硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)(suan)鉀38000mg/L、硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)(suan)銨33000mg/L、磷酸(suan)(suan)(suan)(suan)二氫鉀3400mg/L、氨基酸(suan)(suan)(suan)(suan)螯(ao)合(he)鎂7400mg/L、碘酸(suan)(suan)(suan)(suan)鈣8800mg/L、碘化(hua)鉀166mg/L、硼(peng)酸(suan)(suan)(suan)(suan)1240mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)錳(meng)4460mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)鋅1720mg/L、鉬酸(suan)(suan)(suan)(suan)鈉50mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)銅5mg/L、三氯化(hua)六氨合(he)鈷5mg/L、硫(liu)酸(suan)(suan)(suan)(suan)亞鐵5560mg/L、乙二胺四(si)乙酸(suan)(suan)(suan)(suan)二鈉7460mg/L、肌醇20000mg/L、甘氨酸(suan)(suan)(suan)(suan)400mg/L、鹽酸(suan)(suan)(suan)(suan)硫(liu)胺素100mg/L、鹽酸(suan)(suan)(suan)(suan)吡(bi)哆醇100mg/L、煙酸(suan)(suan)(suan)(suan)100mg/L、NAA6ml/L、蕨根發酵粉15g/L、蔗糖30g/L、瓊脂6.5-8g/L。
所述步驟S6中(zhong)的(de)加花寶(bao)(bao)1號和(he)2號的(de)改良培養基的(de)配方為：花寶(bao)(bao)1號2000mg/L、花寶(bao)(bao)2號2000mg/L、肌醇20000mg/L、甘氨(an)酸(suan)400mg/L、鹽酸(suan)硫胺(an)素100mg/L、鹽酸(suan)吡哆醇100mg/L、煙酸(suan)100mg/L、碘酵母(mu)100g/L、NAA5ml/L、IBA5ml/L、蔗(zhe)糖(tang)30g/L、瓊脂6.5-8g/L。
所述蕨根發酵(jiao)粉通過以(yi)下步驟制備所得：
將洗凈后的蕨根瀝干，置于汽(qi)(qi)爆罐(guan)(guan)內，先通入氮氣至汽(qi)(qi)爆罐(guan)(guan)內壓(ya)力為0.7-1.5MPa，爆破(po)處理(li)7-23min；然后迅(xun)速通入蒸汽(qi)(qi)至汽(qi)(qi)爆罐(guan)(guan)內壓(ya)力為1.5-2.1MPa，蒸汽(qi)(qi)爆破(po)處理(li)0.8-2.8min后，按照接(jie)種量1.5-1.7％的比例接(jie)種微生物發酵(jiao)劑，保持溫度25-35℃，發酵(jiao)48-54小時后，高溫滅(mie)菌，冷(leng)凍干燥(zao)，得蕨根發酵(jiao)粉。
以(yi)上所(suo)述僅是本(ben)(ben)發(fa)明的優選實施方式，應當指(zhi)出，對于本(ben)(ben)技術(shu)領域的普通技術(shu)人員來說，在不(bu)脫離本(ben)(ben)發(fa)明原理的前提下，還可以(yi)作出若干改(gai)進(jin)和潤飾，這些改(gai)進(jin)和潤飾也應視為本(ben)(ben)發(fa)明的保護范圍。