專利名稱：具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法
技術領域：
本發明涉及一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法。
背景技術：
蒼蠅是蠅類的統稱。蠅在生物學分類系統中屬無脊椎動物、節肢動物門、昆蟲綱、雙翅目。再往下細分，有蠅科、麻蠅科、麗蠅科、寄蠅科、果蠅科、舌蠅科、狂蠅科、食蚜蠅科等數十個科。目前估計有6萬種，而且每天都可能有新種發現。我國蠅類有記載的有1500多種。
1、常規養殖目前國內常規養殖報道很多基本按以下辦法為主。
①室外養殖選擇遠離生活區，有樹蔭但有一定光線，野生蒼蠅較多的地方，面積根據自己所需的產量而定，養殖房只要能遮雨就可以了，茅草房、水泥瓦房、樹皮房都行，房屋四周用紗窗圍起來，養殖采用簡單的水泥池，每個池面積為1.5-2平方米，池邊高20厘米，房里面用無數來回穿叉的繩子連接，以給蒼蠅在上面歇息，用新鮮豬糞、雞糞、豆腐渣等混合，堆成一堆用農膜蓋嚴，發酵24-48小時后即喂養蠅蛆。
由于是室外養殖，集卵物有很多選擇，有用死魚等直接放在糞堆上，也用配制以100公斤糞料配麥麩1公斤，魚粉2兩，花生麩3兩，水1.5公斤，混勻后放在糞堆上，集卵后放入水泥池內，第二天早上就全部孵化了一般長到七天至八天就可出池燙死，洗凈烘干打粉作飼料。
②室內養殖大多農場用紅眼綠身蒼蠅和家中常見的小家蠅，培育，種蠅喂養于棚內，主要喂食紅糖水(1∶10)，加少量的奶油香精，喂法是在盆中墊塊海綿，將糖水等倒入海綿即可。
種蠅房(棚)，100～300多平方米一間，種蠅和育蛆同在一房(也有籠養種蠅)，有較多窗戶、房頂也留數個換氣窗，房頂有瓦料也有塑料薄膜、窗戶、換氣窗與房外相通的地方用紗窗嚴實封好，房內拉設數條繩子供蠅歇息，蠅房地面用水泥分隔成面積為2～3平方米的長方形育蛆池，池邊高20～25厘米，池的邊角處理設有收蛆桶(小塑料桶)，桶邊稍高于池底，長大的蠅蛆化蛹前，絕大多數都自動爬離糞堆，沿池邊爬行最終掉入收蛆桶內。
蠅蛆餌料用豬糞、雞糞、牛糞、酒糟、米糠、豆腐渣等配料，經過發酵喂養蠅蛆，長大后用開水燙死烘干打粉作飼料。也有養殖場用酒糟、米粉等配酵母粉，經消毒，喂養無菌蠅蛆，長大后烘干打粉，經紫外線消毒作為蠅蛆蛋白，用于保健食品或化裝品的添加劑。

發明內容
本發明的目的是提供一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法。
方法的步驟如下1)大頭金蠅飼養采用全透明式蠅房，房內拉設有多根繩子供種蠅歇息，大頭金蠅以動物蛋白、紅糖、水果為食物，以淫羊藿、加賴氨酸、蛋氨酸、維生素作為催卵素，用集卵盤子收集蠅卵，在集卵盤上放上萬分子一的碳酸氨水配制小麥麩，以引誘種蠅集中產卵；2)蠅蛆飼養采用通風的蠅蛆房，房頂用透明材料，房中裝有換氣扇和風扇，窗戶、換氣窗與房外相通的地方用紗窗嚴實封好，蠅蛆房內放置多個育蛆池，在育蛆池內放入蠅蛆餌料，同時放入上述蠅卵，育蛆池溫度控制28℃～60℃即可。
所述的蠅蛆餌料為青蛙、淡水魚或豬肺粉碎后在發酵池內發酵4～6天即可。
或者青蛙15％～30％淡水魚15％～30％、冬蟲夏草0.1％～0.2％、靈芝粉1％～2％、雞20％～30％、水果25％～35％，其余為植物飼料，粉碎后在發酵池內發酵4～6天即可。
或者豬肺25％～35％青蛙15～30％、淡水魚15％～30％、靈芝粉為1％～2％、人參粉0.1％～0.2％、水果20％～30％，其余為植物飼料，粉碎后在發酵池內發酵4～6天即可。
全透明式蠅房體積為10～20立方米，飼養量為30萬～50萬只種蠅。
食物中的動物蛋白35％～45％、紅糖20％～30％、水果30％～40％，動物蛋白為蛆漿。
催卵素中的淫羊藿20％～30％、加賴氨酸15％～25％、蛋氨酸15％～25％、維生素25％～35％，維生素為B2。
育蛆池由輕燒鎂粉30％～50％、氧化鎂30％～50％、木渣15％～25％原料制成。
本發明養殖的蠅蛆經過國家新藥篩選中心幾年來多次檢測有對肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、胃癌、等腫瘤細胞生長有很強的抑制率，其抗腫瘤生物活性都在75％～97％。幾年來通過國家新藥篩選中心的多次生物活性檢測，我們提供的特種蠅蛆全蟲粉具有抗癌等的生物活性。檢測結果證明我們采用這種蛆蟲的活體吸收、體內整合、組成特種蠅蛆全蟲粉的方法是成功的。
具體實施例方式
一.蒼蠅(蠅蛆)房場地選擇遠離生活區，無環境污染，植被良好，取用水方便地方建造蠅蛆房(棚)。
蒼蠅房材料以木材為主每間有10～20立方米，有較多窗戶，房頂也留數個換氣窗，房頂用透明材料，房中裝有換氣扇和風扇，窗戶、換氣窗與房外相通的地方用多層紗窗嚴實封好，房內拉設來回穿叉的繩索供種蠅歇息。蠅蛆房地面用輕燒鎂粉30％～40％、氧化鎂10％～30％、木渣5％～15％原料制成60×40×50的長方體育蛆池，具有透氣性能好。育蛆池溫度控制28℃-60℃。池邊角處埋設有收蛆桶(小塑料桶)，桶邊稍高于地面，長大的蠅蛆化蛹前，絕大多數都自動爬離餌料，沿池邊爬行最終掉入收蛆桶內(不健康的蠅蛆、死亡蠅蛆和健康蠅蛆形成自然分離)。
二.蠅種選擇目前，從國內到國際研究，飼養蒼蠅一般都選用家蠅，因為家蠅比較容易養，飼養成本比較低，而我們所選用的是“大頭金蠅”(英文名chrgsomgiamegacephala(Fabricius))，此蠅經浙大生命科學院鑒定。
該蠅種是我們經過多年選擇，最終確定。它具有健壯、生殖率高、抗病能力強等特點。經過我們近幾年的培養，選出了一批優良蠅種，使其不會退化確保功效。
三.種蠅的飼養“大頭金蠅”特點，好動，不易人工飼養，飼養要求高，這里主要的是其對溫度條件要求很高，在25℃～40℃內為最佳。全透明式蠅房要求體積10～20立方米，飼養量30萬～50萬只種蠅，房內拉設有多根繩子供種蠅歇息。大頭金蠅以動物蛋白35％、40％、45％、紅糖20％、25％、30％、水果30％、35％、40％為食物，其中動物蛋白為蛆漿。以中藥淫羊藿20％、25％、30％、加賴氨酸15％、20％、25％、蛋氨酸15％、20％、25％、維生素25％、30％、35％作為“催卵素”，其中維生素為B2。用集卵盤子收集蠅卵，在集卵盤子上放上萬分子一的碳酸氨水配制小麥麩適量，以引誘種蠅集中產卵。
四.蛆的飼養采用通風的蠅蛆房，房頂用透明材料，房中裝有換氣扇和風扇，窗戶、換氣窗與房外相通的地方用紗窗嚴實封好，蠅蛆房內放置多個蠅蛆池，在育蛆池內放入蠅蛆餌料，同時放入上述蠅卵，育蛆池溫度控制28℃～60℃即可。
1.蠅房地面放有輕燒氧化鎂粉配木渣制成60×40×50的長方體蠅蛆池，池內放入經過發酵的餌料。
1)餌料選擇A青蛙15％、23％、30％淡水魚15％、23％、30％、冬蟲夏草0.1％、0.15％、0.2％、靈芝粉1％、1.5％、2％、雞20％、25％、30％、水果25％、30％、35％，其余為植物飼料，粉碎后在發酵池內發酵4、5、6天即可。
2)餌料選擇B豬肺25％、30％、35％青蛙15％、23％、30％、淡水魚15％、23％、30％、靈芝粉為1％、1.5％、2％、人參粉0.1％、0.15％、0.2％、水果20％、25％、30％，其余為植物飼料，粉碎后在發酵池內發酵4、5、6天即可。
3)蠅蛆餌料C為青蛙、淡水魚或豬肺粉碎后在發酵池內發酵4、5、6天即可。
4)發酵用水泥砌成120×60×50發酵池，將粉碎后的配方餌料倒入發酵池，加入少量發酵粉和EM菌液并拌勻，用塑料薄膜密封，發酵4～6天即可喂養蠅蛆，發酵能殺滅餌料中的致病菌和寄生蟲卵，還可消除餌料在蠅蛆房直接發酵產生的有害氣體，以免對蠅蛆造成危害。
5)用以上配方喂養的蠅蛆經國家新藥篩選中心多次檢測對肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、胃癌、肺癌(附表)腫瘤細胞生長有很強的抑制率，其抗腫瘤生物活性都在75％～97％。
五.加工將收集的蠅蛆漂洗冷凍，在適當的溫度下進行烘干，去除蟲體無效雜物、打粉，經紫外線消毒滅菌，沒有經過任何分離就能達到這種活性效果，它完全有可能以中藥單方進入市場，造福人類。
我們提供的特種蠅蛆全蟲粉，具有抗癌等生物活性，檢測結果證明我們采用這種蛆蟲活體吸收、體內整合、組成特種蠅蛆全蟲粉的方法是成功的。
國家新藥篩選中心National Center for Drug ScreeningShanghai，China抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株BEL-7402人肝癌作用時間72h
對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml) BEL-7402樣品編號 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 評價備注115426 88.5 95.4 20.1 4.12.3 有活性115427 92.1 70.6 13.0 2.56.1 有活性日期2003.3.7國家新藥篩選中心Natioral Center for Drug ScreeningShanghai，China抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株A-549人肺癌作用時間72h對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)A-549樣品編號 1 0.25 0.063 0.016 0.0039評價 備注11542693.297.7 4.0 0 0 有活性11542795.498.2 0 0 0 有活性日期2003.3.7國家新藥篩選中心National Center for Drug ScreeningShanghai，China抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株A-549人肺癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號 4 1 0.25 0.063 0.016 評價 備注NC0011496195.097.379.4 0 3.7有活性NC0011496295.397.052.0 0 0 有活性NC0011496391.496.82.5 2.5 0 有活性NC0011496494.897.294.3 0 0 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2004.11.30抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株BEL-7402人肝癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-8mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號 4 1 0.25 0.063 0.016 評價 備注NC00114961 84.396.6 23.6 0 3.0 有活性NC00114962 92.695.4 97.0 0 0 有活性NC00114963 86.294.3 0 0 0 有活性NC00114964 85.994.3 90.6 0 0 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2004.11.30
國新藥篩選中心抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法四氮唑鹽(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)還原法細胞株HL-60人白血病作用時間72h對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號410.25 0.0630.016 評價 備注NC00114961 92.8 100 1.200 有活性NC00114962 89.4 62.7 1.800 有活性NC00114963 6.31 0.5 9.01.3 0 無活性NC00114964 88.0 99.3 40.76.4 0 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2004.11.30抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株HO-8910人卵巢癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號 4 1 0.25 0.063 0.016 評價 備注NC00114961 91.192.9 93.0 1.2 0 有活性NC00114962 89.294.3 64.5 17.420. 有活性NC00114963 92.890.1 97.2 46.625. 有活性NC00114964 86.491.1 95.9 24.59.8 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2005.3.30
國家新藥篩選中心抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株SGC-7901人胃癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號41 0.25 0.063 0.016評價 備注NC00114961 92.8 96.495.0 10.8 25. 有活性NC00114962 92.1 95.692.6 0 13.3 有活性NC00114963 90.8 96.20 0 1.7 有活性NC00114964 81.0 96.989.9 0.63.1 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2005.3.30國新藥篩選中心抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株HELA人宮頸癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號4 1 0.25 0.063 0.016 評價 備注NC00114961 54.5 92.2 95.6 19.5 0 有活性NC0011496290.4 95.9 0 0 有活性NC00114963 66.3 95.7 20.0 0 0 有活性NC0011496493.4 95.0 0 0 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2005.3.30抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法磺酰羅丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法細胞株MDA-MB-468人乳腺癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號4 1 0.25 0.063 0.016 評價 備注NC00114961 97.3 97.8 86.6 13.9 2.7 有活性NC00114962 97.0 97.8 93.0 0 15.4 有活性NC00114963 96.6 98.1 15.7 0 1.2 有活性NC00114964 97.3 97.8 96.9 0 0 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2005.3.30
抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法四氮唑鹽(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)還原法細胞株HCT-116人腸癌作用時間72h結果評定無效10-5mol/L＜85％弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％強效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml)樣品編號4 1 0.25 0.063 0.016 評價 備注NC00114961 90.9 97.7 96.8 0 0 有活性NC00114962 93.7 97.7 98.7 0 0 有活性NC00114963 95.4 97.7 42.1 0 0 有活性NC00114964 95.4 97.3 97.0 0 0 有活性試驗者許承輝 楊蔚怡日期2005.3.30國家新藥篩選中心National Center for Drug ScreeningShanghai，China抗腫瘤生物活性體外篩選試驗篩選方法四氮唑鹽(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)還原法細胞株P-388小鼠白血病作用時間48h
對腫瘤細胞生長的抑制率％濃度(mg/ml) P-388樣品編號10.25 0.063 0.016 0.0039 評價 備注115426 99.0 98.9 20.8 0 0 有活性
權利要求
1.一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，方法的步驟如下1)大頭金蠅飼養采用全透明式蠅房，房內拉設有多根繩子供種蠅歇息，大頭金蠅以動物蛋白、紅糖、水果為食物，以淫羊藿、加賴氨酸、蛋氨酸、維生素作為催卵素，用集卵盤子收集蠅卵，在集卵盤上放上萬分子一的碳酸氨水配制小麥麩，以引誘種蠅集中產卵；2)蠅蛆飼養采用通風的蠅蛆房，房頂用透明材料，房中裝有換氣扇和風扇，窗戶、換氣窗與房外相通的地方用紗窗嚴實封好，蠅蛆房內放置多個育蛆池，在育蛆池內放入蠅蛆餌料，同時放入上述蠅卵，育蛆池溫度控制28 ℃～60℃即可。
2.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述的蠅蛆餌料為青蛙、淡水魚或豬肺粉碎后在發酵池內發酵4～6天即可。
3.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述的蠅蛆餌料的重量百分比為青蛙15％～30％淡水魚15％～30％、冬蟲夏草0.1％～0.2％、靈芝粉1％～2％、雞20％～30％、水果25％～35％，其余為植物飼料，粉碎后在發酵池內發酵4～6天即可。
4.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述的蠅蛆餌料的重量百分比為豬肺25％～35％青蛙15％～30％、淡水魚15％～30％、靈芝粉為1％～2％、人參粉0.1％～0.2％、水果20％～30％，其余為植物飼料，粉碎后在發酵池內發酵5～6天即可。
5.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述的全透明式蠅房體積為10～20立方米，飼養量為30萬～50萬只種蠅。
6.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述的食物中的動物蛋白35％～45％、紅糖20％～30％、水果30％～40％，動物蛋白為蛆漿。
7.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述催卵素中的淫羊藿20％～30％、加賴氨酸15％～25、蛋氨酸15％～25％、維生素25％～35％，維生素為B2。
8.根據權利要求1所述的一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法，其特征在于，所述的育蛆池由輕燒鎂粉30％～50％、氧化鎂30％～50％、木渣15％～25％原料制成。
全文摘要
本發明公開了一種具有抗腫瘤生物活性蠅蛆的養殖方法。方法的步驟如下1)大頭金蠅飼養采用全透明式蠅房，房內拉設有多根繩子供種蠅歇息，以動物蛋白、紅糖、水果為食物，以中藥淫羊藿、加賴氨酸、蛋氨酸、維生素作為催卵素，用集卵盤子收集蠅卵；2)蠅蛆飼養采用通風的蠅蛆房，房頂用透明材料，房中裝有換氣扇和風扇，窗戶、換氣窗與房外相通的地方用紗窗嚴實封好，蠅蛆房內設有育蛆池，育蛆池溫度控制28℃～60℃，在育蛆池內放入蠅蛆餌料，同時放入上述蠅卵。本發明養殖的蠅蛆經過國家新藥篩選中心幾年來多次檢測有對肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、胃癌、等腫瘤細胞生長有很強的抑制率，其抗腫瘤生物活性都在75％～97％。
文檔編號A01K67/00GK1736186SQ20051006027
公開日2006年2月22日 申請日期2005年8月4日 優先權日2005年8月4日
發明者周志欽, 沈榮法, 周淡宜 申請人:周志欽, 沈榮法