一種人參葉中人參皂苷的萃取方法
【專利摘要】本發明公開了一種人參葉中人參皂苷的萃取方法，包括以下步驟：步驟1：將0.2重量份人參葉粉碎后與1重量份石英砂混合均勻；步驟2：將混合物加入到鋪設有硅藻土的萃取池中，然后繼續加入硅藻土直至達到萃取池池口，蓋上萃取池的蓋子，采用ASE萃取法進行萃取；萃取條件為：萃取溶劑為體積比為1：1的乙醇和甲醇的混合物，萃取溫度100℃；靜態萃取時間5min；沖洗體積100％；靜態循環次數1次；靜態萃取的壓力為1500psi；吹掃時間為60s；步驟3：將萃取液稀釋后加入到離心管中凈化，然后過濾后得到濾液，所述的離心管中加有石墨碳SPE柱。本發明提供了一種人參葉中人參皂苷的萃取方法，該方法檢測精度高，萃取簡單，萃取效果要高于藥典的方法。
【專利說明】
一種人參葉中人參皂苷的萃取方法
技術領域
[0001] 本發明涉及實驗室檢測領域，特別是一種人參葉中人參皂苷的萃取方法。
【背景技術】
[0002] 2015年藥典記載：取本品粉末約0.2g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷 30ml，加熱回流1小時，棄去三氯甲烷液，藥渣揮去三氯甲烷，加甲醇30ml，加熱回流3小時， 提取液低溫蒸干，加水l〇ml使溶解，加石油醚(30~60 °C )提取2次，每次10ml，棄去醚液，水 液通過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑為1.5cm，柱長為15cm)，以水50ml洗脫，棄去水液。再用 20 %乙醇50ml洗脫，棄去20 %乙醇洗脫液，繼用80 %乙醇80ml洗脫，收集洗脫液70ml，蒸干， 殘渣加甲醇溶解，轉移至l〇ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。LC測試的 條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-〇. 05 %磷酸溶液(20:80)為流動相;檢 測波長為203nm。理論板數按人參皂苷Re峰計算應不低于1500。
[0003] 在大孔吸附樹脂柱分離人參皂苷的過程中，分離效率受到大孔吸附樹脂柱的活 性、洗脫效率等因素的影響，在測試的過程中，測試重復性差。
[0004] 為了改進這一問題，我們開發出了一種采用甲醇作為萃取劑的ASE快速萃取人參 皂苷的方法，該方法能快速的提取人參皂苷，且提取精度也較高。
[0005] 但是，在測試過程中，我們發現采用甲醇萃取時萃取精度不穩定。

【發明內容】

[0006] 本發明的目的是提供一種人參葉中人參皂苷的萃取方法，該方法檢測精度高，萃 取簡單，萃取效果要高于藥典的方法。
[0007] 本發明提供的技術方案為:一種人參葉中人參皂苷的萃取方法，包括以下步驟：
[0008] 步驟1:將0.2重量份人參葉粉碎后與1重量份石英砂混合均勻；
[0009] 步驟2:將混合物加入到鋪設有硅藻土的萃取池中，然后繼續加入硅藻土直至達到 萃取池池口，蓋上萃取池的蓋子，采用ASE萃取法進行萃取；
[0010] 萃取條件為:萃取溶劑為體積比為1:1的乙醇和甲醇的混合物，萃取溫度100°C;靜 態萃取時間5min;沖洗體積100%;靜態循環次數1次;靜態萃取的壓力為150(^ 81;吹掃時間 為 60s;
[0011] 步驟3:將萃取液稀釋后加入到離心管中凈化，然后過濾后得到濾液，所述的離心 管中加有石墨碳SPE柱。
[0012] 在上述的人參葉中人參阜苷的萃取方法中，所述的萃取池的體積為10ml。
[0013]在上述的人參葉中人參皂苷的萃取方法中，所述的ASE萃取法采用的是ASE350快 速溶劑萃取儀。
[0014] 本發明在采用上述技術方案后，其具有的有益效果為：
[0015] 本發明的萃取精度高，萃取簡單，萃取效果相比于藥典要高。
[0016] 同時，本發明的萃取溶劑的萃取效果要優于采用甲醇作為萃取溶劑的萃取效果。
【具體實施方式】
[0017] 下面結合【具體實施方式】，對本發明的技術方案作進一步的詳細說明，但不構成對 本發明的任何限制。
[0018] 實施例1:
[0019] 將人參葉樣品經粉碎機粉碎，過三號篩，約0.2g，精密稱定，與lg石英砂混合均勻， 待用，移入到預先放好過濾膜的ASE 10ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池 口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結束后，把萃取液轉移至蒸發皿中蒸干后用甲醇 溶解并定容至10mL容量瓶，吸取lml樣品液加入裝有100mg石墨碳SPE柱的2ml離心管進行凈 化，溶液過0.22微米濾膜后進入HPLC測定。
[0020] 萃取條件(見表1)為：
[0021] 表1
[0023] 分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0024] a)儀器：Thermo 雙三元液相（U-3000)
[0025] b)色譜柱：Thermo Syncronis C18 1 ? 7um 50 X 2 ? 1mm，即碳 18色譜柱的直徑 2.1mm，長度 50mm，粒徑 1
[0026] 幻柱溫：仙！：
[0027] d)流速:0.3mL/min
[0028] e)流動相：乙腈-水梯度洗脫（lmin乙腈:水的體積比為60:40; l-3min乙腈:水的體 積比為70:30; 3-8min乙腈:水的體積比為80:20，在本實施例中的體積比均為20°C的條件下 的體積比）
[0029] f)檢測波長：203nm [0030] 對比例1
[0031]將人參葉樣品經粉碎機粉碎，過三號篩，約0.2g，精密稱定，與lg硅藻土混合均勻， 待用，移入到預先放好過濾膜的ASE 10ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池 口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結束后，把萃取液轉移至蒸發皿中蒸干后用甲醇 溶解并定容至lOmL容量瓶，吸取lml樣品液加入裝有lOOmgGCB的2ml離心管進行凈化，溶液 過0.22微米濾膜后進入HPLC測定。
[0032]萃取條件(見表2)為：
[0033]表 2
[0035] 分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0036] a)儀器：Thermo 雙三元液相（U-3000)
[0037] b)色譜柱：Thermo Syncronis C18;1.7lim 50X2.1 mm
[0038] 幻柱溫：仙！：
[0039] d)流速:0.3mL/min
[0040] e)流動相：乙腈-水梯度洗脫（lmin乙腈:水的體積比為60:40; l-3min乙腈:水的體 積比為70:30; 3-8min乙腈:水的體積比為80:20)
[0041 ] f)檢測波長：203nm
[0042] 1.2實施例1的萃取方法的精確度測試
[0043]米用實施例1、對比例1的ASE萃取方法和藥典的萃取方法對人參葉進彳丁萃取，人參 葉為 3批，批號分別為15071601，120303,1407221;
[0044]實施例1的ASE萃取方法對同一批次的人參葉采用相同規格的設備平行測試兩次， 分別為ASE1和ASE2表示。
[0045]具體測試結果見下表3;
[0046]表 3
[0048]以上所述的僅為本發明的較佳實施例，凡在本發明的精神和原則范圍內所作的任 何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種人參葉中人參皂苷的萃取方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將0.2重量份人參葉粉碎后與1重量份石英砂混合均勾； 步驟2:將混合物加入到鋪設有硅藻土的萃取池中，然后繼續加入硅藻土直至達到萃取 池池口，蓋上萃取池的蓋子，采用ASE萃取法進行萃取； 萃取條件為:萃取溶劑為體積比為1:1的乙醇和甲醇的混合物，萃取溫度l〇〇°C;靜態萃 取時間5min;沖洗體積100% ;靜態循環次數1次;靜態萃取的壓力為1500psi ;吹掃時間為 60s ； 步驟3:將萃取液稀釋后加入到離心管中凈化，然后過濾后得到濾液，所述的離心管中 加有石墨碳SPE柱。2. 根據權利要求1所述的人參葉中人參皂苷的萃取方法，其特征在于，所述的萃取池的 體積為l〇ml。3. 根據權利要求1所述的人參葉中人參皂苷的萃取方法，其特征在于，所述的ASE萃取 法采用的是ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號】G01N30/06GK105929088SQ201610254597
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月22日
【發明人】陳學松, 廖強, 韋日偉, 陳佳麗, 王 華, 姚泳成
【申請人】廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所