專利名稱：一種測定養胃顆粒中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥制劑的含量測定方法，具體涉及一種測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法。背景技術：
養胃顆粒的處方組成為炙黃芪500g、黨參333g、白芍500g、甘草281g、陳皮250g、香附500g、烏梅167g、山藥500g。其制法為陳皮提取揮發油，藥渣備用；其余七味藥加水煎煮二次，第一次2小時，第二次I小時，第二次煎煮時加入上述陳皮藥渣，濾過，合并濾液，靜置，取上清液濃縮至相對密度1.16^1.19 (20°C)的清膏，加蔗糖粉446.7g及適量糊精，制成顆粒，干燥，噴入陳皮揮發油，混勻，制成3000g ;或清膏加適量的糊精制成顆粒，干燥，噴入陳皮揮發油，混勻，制成lOOOg，即得。本品為棕黃色至棕色的顆粒，氣香，味甜、微苦；或味微苦(無蔗糖)。功能與主治為:養胃健脾，理氣和中。用于脾虛氣滯所致的胃痛，癥見胃脘不舒、脹滿疼痛、噯氣食少；慢性萎縮性胃炎見上述證候者。
養胃顆粒在《中華人民共和國藥典》2010年版一部中含量測定項下只是測定了白芍中的芍藥苷這一個成 分，難以反應出整個藥品的質量，有一定的不足。
發明內容
本發明針對目前養胃顆粒含量測定方法的不足，提供了一種更加合理有效的含量測定方法用于產品的質量控制，在測定白芍中芍藥苷含量的基礎上，增加測定陳皮中的橙皮苷含量和甘草中的甘草酸含量。
本發明采用高效液相色譜法，在同一色譜條件下，采用流動相梯度洗脫，使用DAD紫外檢測器，在不同波長處同時測定芍藥苷、橙皮苷、甘草酸的含量。
本發明采用的技術方案是:
本發明提供一種測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，所述方法為:(I)待測樣品:將養胃顆粒研細混勻后加入體積濃度(Γ100%乙醇水溶液a或體積濃度50 100%甲醇水溶液a中制成混合液a，將混合液a在超聲頻率25KHz、超聲功率8(Tl00W的條件下超聲處理10 30分鐘，放冷，取超聲處理后的混合液a加入體積濃度(Γ100%乙醇水溶液b或體積濃度5(Γ100%甲醇水溶液b制成混合液b，使混合液b與混合液a質量相同，將混合液b搖勻、過濾，取濾液，獲得待測樣品；所述乙醇水溶液b與乙醇水溶液a相同，所述甲醇水溶液b與甲醇水溶液a相同；(2)含量測定:將步驟(I)制備的待測樣品注入高效液相色譜儀進行測試，獲得待測樣品的高效液相色譜譜圖；將芍藥苷標準品用體積濃度(Γ100%乙醇水溶液或體積濃度5(Γ100%甲醇水溶液配制成芍藥苷標準品溶液，取不同體積的芍藥苷標準品溶液在同樣條件下(與待測樣品測試條件相同)進行測試，獲得芍藥苷標準品溶液的高效液相色譜譜圖，以芍藥苷標準品溶液的高效液相色譜譜圖中吸收峰的峰面積為橫坐標，以芍藥苷準品溶液進樣量為縱坐標制作芍藥苷標準曲線，橙皮苷標準曲線和甘草酸銨標準曲線的制作同芍藥苷標準曲線，根據待測樣品的高效液相色譜譜圖中相應吸收峰的峰面積及各個標準品的標準曲線計算待測樣品中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸(甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207)含量；高效液相色譜儀測試條件為:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積濃度0.5%冰乙酸水溶液為流動相A，以乙腈為流動相B進行梯度洗脫，梯度洗脫條件為(TlOmin時流動相A為85%，l(T30min時流動相A為85 80%，3(T65min時流動相A為80 50%，分別在230nm、283nm和252nm處檢測吸收峰。
進一步，步驟(I)所述乙醇水溶液a為體積濃度50%乙醇水溶液，乙醇水溶液b為體積濃度50%乙醇水溶液。
進一步，步驟(I)所述甲醇水溶液a為體積濃度50%甲醇水溶液或70%甲醇水溶液，甲醇水溶液b為體積濃度50%甲醇水溶液或70%甲醇水溶液。
進一步，步驟(I)所述超聲處理時間為2(Γ30分鐘。
進一步，步驟(2)所述填充劑的粒徑為5μηι。
進一步,步驟(2)所述色譜柱長為250mm,內徑為4.6mm。
本發明所述養胃顆粒配方為炙黃芪、黨參、陳皮、香附、白芍、山藥、烏梅、甘草，廠家:正大青春寶藥業有限公司。
本發明所述乙醇水溶液a、乙醇水溶液b均為乙醇水溶液，甲醇水溶液a、甲醇水溶液b均為甲醇水溶液，為了便于區分不同步驟所用量不同而命名，混合液a和混合液b均為混合液，為了便于區分不同步驟所獲得混合液不同而命名，字母本身沒有含義。
與現有技術相比，本發明的優勢體現在:《中華人民共和國藥典》2010年版一部中養胃顆粒含量測定項下只是測定了白芍中的芍藥苷，本發明方法不僅測定芍藥苷的含量，又增加測定陳皮中的橙皮苷含量和甘草中的甘草酸含量，大大提高了養胃顆粒的質量控制標準。且采用同一色譜條件，在流動相梯度洗脫的方法下，利用DAD紫外檢測器同時在230nm處測定芍藥苷、在283nm處測定橙皮苷、在252nm處測定甘草酸。該方法含量測定方法學驗證完全符合規定，是一種先進的質量控制方法。相對于一般中藥固體制劑如果要用高效液相色譜法檢測不同成分的含量需要不同的色譜條件，因此需要大量的檢測時間及檢測成本，采用本發明則能節約時間和檢測成本，且能更加有效控制產品的質量。
圖1為實施例1中芍藥 苷標準曲線圖2為實施例1中橙皮苷標準曲線圖3為實施例1中甘草酸銨標準曲線圖4為實施例1中芍藥苷標準品溶液的色譜圖，峰a為芍藥苷；
圖5為實施例1中橙皮苷標準品溶液的色譜圖，峰b為橙皮苷；
圖6為實施例1中甘草酸銨標準品溶液的色譜圖，峰c為甘草酸銨；
圖7為實施例6中方法學驗證中專屬性考察缺白芍處方提取液色譜圖8為實施例6中方法學驗證中專屬性考察有白芍處方的提取液色譜圖，峰a為芍藥苷。
圖9為實施例6方法學驗證中專屬性考察缺陳皮處方提取液色譜圖10為實施例6方法學驗證中專屬性考察有陳皮處方的提取液色譜圖，峰b為橙皮苷；
圖11為實施例6方法學驗證中專屬性考察缺甘草處方提取液色譜圖12為實施例6方法學驗證中專屬性考察有甘草處方的提取液色譜圖，峰c為甘草酸；
圖13為實施例1中養胃顆粒的芍藥苷含量測定色譜圖14為實施例1中養胃顆粒的橙皮苷含量測定色譜圖15為實施例1中養胃顆粒的甘草酸含量測定色譜圖16為實施例2中養胃顆粒的芍藥苷含量測定色譜圖17為實施例2中養胃顆粒的橙皮苷含量測定色譜圖18為實施例2中養胃顆粒的甘草酸含量測定色譜圖19為實施例3中養胃顆粒的芍藥苷含量測定色譜圖20為實施例3中養胃顆粒的橙皮苷含量測定色譜圖21為實施例3中養胃顆粒的甘草酸含量測定色譜圖。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護范圍并不僅限于此:
實施例1:采用高效液相色譜法測定養胃顆粒中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸的含量
( I)高效液相色譜條件
儀器名稱:安捷倫1100高效液相色譜儀
色譜條件:色譜柱=ZORBAX SB — C18 (柱長250mm，內徑4.6mm)，填充劑:十八烷基硅烷鍵合硅膠(粒徑5 μ m)，流速:1.0ml/min，柱溫:25°C
DAD紫外檢測器檢測波長:230nm、283nm、252nm
以體積濃度0.5%冰乙酸水溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按表I進行梯度洗脫。
表I梯度洗脫條件
權利要求
1.一種測定養胃顆粒中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，其特征在于所述方法為:(1)待測樣品:將養胃顆粒研細混勻后加入體積濃度(TlOO%乙醇水溶液a或體積濃度50 100%甲醇水溶液a中制成混合液a，將混合液a在超聲頻率25KHz、超聲功率8(Tl00W的條件下超聲處理10 30分鐘，放冷，取超聲處理后的混合液a加入體積濃度(TlOO%乙醇水溶液b或體積濃度5(Γ100%甲醇水溶液b制成混合液b，使混合液b與混合液a質量相同，將混合液b搖勻、過濾，取濾液，獲得待測樣品；所述乙醇水溶液b與乙醇水溶液a相同，所述甲醇水溶液b與甲醇水溶液a相同；(2)含量測定:將步驟(I)制備的待測樣品注入高效液相色譜儀進行測試，獲得待測樣品的高效液相色譜譜圖，取不同量芍藥苷標準品溶液在同樣條件下進行測試，獲得芍藥苷標準品溶液的高效液相色譜譜圖，以芍藥苷標準品溶液的高效液相色譜譜圖中吸收峰的峰面積為橫坐標，以芍藥苷標準品溶液進樣量為縱坐標制作芍藥苷標準曲線，橙皮苷標準曲線和甘草酸銨標準曲線的制作同芍藥苷標準曲線，根據待測樣品的高效液相色譜譜圖中相應吸收峰的峰面積及各個標準品的標準曲線計算待測樣品中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量；高效液相色譜儀測試條件為:色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積濃度0.5%冰乙酸水溶液為流動相A，以乙腈為流動相B進行梯度洗脫，梯度洗脫條件為(TlOmin時流動相A為85%，l(T30min時流動相A為85 80%，30 65min時流動相A為80 50%，分別在230nm、283nm和252nm處檢測吸收峰。
2.如權利要求1所述測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，其特征在于步驟(I)所述乙醇水溶液a為體積濃度50%乙醇水溶液，乙醇水溶液b為體積濃度50%乙醇水溶液。
3.如權利要求1所述測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，其特征在于步驟(I)所述甲醇水溶液a為體積濃度50%甲醇水溶液或70%甲醇水溶液，甲醇水溶液b為體積濃度50%甲醇水溶液或70%甲醇水溶液。
4.如權利要求1所述測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，其特征在于步驟(I)所述超聲處理時間為2(Γ30分鐘。
5.如權利要求1所述測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，其特征在于步驟(2)所述填充劑的粒徑為5 μ m。
6.如權利要求1所述測定藥物中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，其特征在于步驟(2)所述色譜柱長為25 0mm,內徑為4.6mm。
全文摘要
本發明公開了一種測定養胃顆粒中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法，所述方法為將養胃顆粒預處理制成待測樣品，將待測樣品注入高效液相色譜儀進行測試，獲得待測樣品的高效液相色譜譜圖，根據待測樣品的高效液相色譜譜圖中相應吸收峰的峰面積及各個標準品的標準曲線計算待測樣品中芍藥苷、橙皮苷和甘草酸含量；本發明方法不僅測定《中華人民共和國藥典》2010年版一部中養胃顆粒含量測定項下芍藥苷的成分，又增加測定陳皮中的橙皮苷含量和甘草中的甘草酸含量，大大提高了養胃顆粒的質量控制標準，該方法含量測定方法學驗證完全符合規定，是一種先進的質量控制方法；本發明則能節約時間和檢測成本，且能更加有效控制產品的質量。
文檔編號G01N30/02GK103175915SQ20131005022
公開日2013年6月26日 申請日期2013年2月8日 優先權日2013年2月8日
發明者林徐劍, 吳碧元, 柴建國, 施曉萍, 沈瑩 申請人:正大青春寶藥業有限公司