專利名稱：試樣收集裝置的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種試樣收集裝置，此裝置含有一種吸收材料，可迅速吸收試驗液體，并能直接或間接地釋放試驗液體。此外，裝置中還含至少一種檢定試劑。本發明的試樣收集裝置專門打算作家庭用或供非專業機構使用。這些機構取樣一般由外行或非技術人員進行。
現在，有許多收集體液(如尿)樣品的方法，用以檢測專一反應物質。檢測這些物質的方法很多，從化學檢定到免疫和雜交檢定法。在傳統的免疫檢定和雜交檢定法中，試驗試樣通常用吸液管采取，在這些方法中要求精確的定量結果。在化學檢定或免疫檢定中，檢定在試驗條帶上進行，通常使用紙帶，將試驗帶(含所需的各種試劑)浸在試驗液體中取樣，或者，例如將這種試驗帶固定于尿流中。但是，因為試驗帶含為進行檢測一種專一反應物質所需的試劑，因此存在尿與試劑之間直接接觸的風險，這樣，在實際檢定發生前，試劑可從試驗帶上洗出。
為了盡量減少試劑被洗出的風險，特別是當試驗由外行進行時，通常將試驗帶由套管或套箱加以包圍，如歐洲專利EP291194和EP383619所討論的。
另外一個容易和可靠的收集試驗試樣的方法可避免同檢定試劑直接接觸。這個方法是利用一個分離的試劑收集裝置，如在歐洲專利EP293447中討論的長刷。此種長刷，含有一吸收材料的尖，在試樣收集后，插入一圓筒管中，這種圓筒管中有一個或多個密封容器或小室，其中順序有各種檢定試劑。當通過將收集裝置推進和經過每個容器而使收集裝置(長刷)的壓力施于密封上時，則密封破裂或崩潰。收集裝置的柄有適當的中止點，容許收集裝置尖端進入適當的容器并同其中的內容進行混合，容器的關鍵特征是，收集裝置的尖端和軀干能經過每一容器而進入圓筒管的較低部分，并與其連結。較低部分包含有配位體受體區。配位體受體區包含一俘獲膜，膜上涂以專一的結合試劑以俘獲反應物。檢測的發生可看見或看不見。雖然在這篇專利申請中討論的長刷適用于各種試驗試樣包括尿的方便收集，但實際上，試驗進行起來是復雜的，因為在俘獲膜區附近需要一具有密封的試劑小室的分離管。此外，為使試驗試樣和密封小室內的試劑之間足夠的接觸，需要一些特殊要求(收集裝置的柄中的適當的中止點)。
在專利申請WO86/03839中，提出一個固相擴散檢定法，其中，討論了一多孔物體(長刷)，此多孔體含凍干的標記的專一結合試劑例如凍干的金溶膠標記hCG抗體。將此長刷用試驗液體(如尿)潤濕后，則標記的專一結合試劑溶解，或當使用顆粒標記時，重復懸浮在試驗液體中。隨后使長刷同含一固定的專一結合試劑(如hCG抗體)的不溶的支持物(如硝化纖維紙)接觸，這樣，含溶解或再懸浮的標記的專一結合試劑和可能要測定的被分析物(如hCG)的試驗液體從長刷擴散到不溶的支持物中。當在試驗液體中含有這種被分析物時，此被分析物和標記的專一結合試劑將被固定的專一結合試劑結合。被分析物的存在可以用肉眼檢測到，例如，當金溶膠粒子用作標記時出現紅斑。試驗工作相當容易，需要的步驟最少。然而，用這種試驗，如果未準備除去過量的標記的專一結合試劑，則可在不溶的支持物上觀察到背景顏色。取樣后，用于此試驗的長刷含標記的專一結合試劑的溶液或懸浮液。在整個長刷分開，只要長刷同支持物接觸，則轉移到不溶的支持物上。這樣的背景顏色可能有害試驗結果。而且，用這種長刷具有一重要的風險，即在取樣過程，可能會從長刷洗出標記的專一結合試劑。
本發明涉及對已有技術，如上面的專利申請(WO86/03839)的方法，加以改進，特別是有關可靠性和健全性。這些改進通過一試樣收集裝置已經實現。在此裝置中，含有一種能夠迅速吸收試驗液體并能很容易地釋放試驗液體的吸收材料。此外，還至少含一種檢定試劑，其特征在于，上述檢定試劑存在于所說吸收材料的下游部分，所說部分含有在取樣過程防止所說的檢定試劑從裝置中洗出所采用的設施，有了這樣的設施，在取樣中或取樣后所說的檢定試劑對試驗操作是現成的，而所說的吸收材料的其余部分，全部或部分位于含檢定試劑的所說部分的上游。
檢定試劑包含在試樣收集裝置的僅一部分吸收材料中，此部分位于所說吸收材料的中或底部(下游)。收取試樣時是將吸收材料完全浸入試驗液體或固定吸收材料在尿流中。檢定試劑溶解或-如果檢定試劑含顆粒標記，則重新懸浮在試驗液體中。試樣收集后，試樣收集裝置的吸收材料的底(下游)部與試驗帶、膜等(例如含固定的專一結合試劑)接觸，檢定試劑和要被測定的專一反應物質(如果存在的話)由試樣收集裝置轉移到試驗帶，在此，它們與固定的專一結合試劑結合。試樣收集裝置的吸收部分的上(上游)部不含任何檢定試劑。用作試驗液體的貯庫。這種試驗液體現在用作洗液以除去未能結合于固定的專一結合試劑的過量的標記的專一結合試劑。
為了進行合適的試樣收集，在試樣收集裝置的那一部分(含檢定試劑)采用設施，以防止所說的檢定試劑從試樣收集過程中從裝置中被洗出來。當試樣收集由不熟練(如由外行)的人進行和固定試樣收集裝置在尿流中時將檢定試劑從裝置中洗出的危險是完全可能的，。
在一優選的具體實施方案中，所說的設施是采用排斥水或不能透過水的材料的蓋、套箱或外殼，將其包圍在至少含檢定試劑的那一部分吸收材料周圍。此蓋、套箱或外殼的結構應使得在取樣中或取樣后，所說的檢定試劑可以得到(或容易使其得到)以用于試驗操作。根據所用材料的類型和孔徑大小，蓋、套箱或外殼的厚度可以不同。這種排斥水材料最好是一疏水的織物或無紡材料、疏水紙或象紙一樣的材料。優選是一疏水的多孔燒結材料。這種疏水多孔燒結材料的孔徑大小應能防止試驗液體透過，一般情況下孔徑至多100微米。優選孔徑是低于50微米。疏水多孔燒結聚合物優選是聚丙烯、聚乙烯、超高分子量聚乙烯、疏水聚酯，最為優選的是乙烯醋酸乙烯酯。這樣的疏水多孔燒結聚合物材料，如乙烯醋酸乙烯酯可通過加入潤濕劑，如Tween20或Triton X100，很容易制成親水材料。因此，此材料在疏水狀態可用來防止檢定試劑的洗出，而在親水狀態，它可用作試驗液體，如尿，的吸收材料。乙烯醋酸乙烯酯還有一個優點是柔韌性好，因此，特別適合同不同類型的試驗裝置(如含多孔試驗帶的測桿試驗)結合。
當疏水多孔燒結材料以不同大小孔徑應用時，最好將所說的孔徑尺寸至多100微米的疏水材料同親水型的，孔徑尺寸大得足以使試驗液體迅速吸收的相同材料結合使用。因此，一方面選擇孔徑如此小，使試驗液體不能透過，從而，防止檢定試劑的洗出，而另一方面，同一材料，以親水型和優選具有大孔徑可使試驗液體迅速吸收可用作吸收材料。
通過用(例如含在有機溶劑中的蠟的)噴霧處理親水材料也能得到排斥水材料。通過在親水聚合物材料中分散涂有如氟碳化學吸收膜(FCAM)的填料物質—如SiO2、TiO2、Al2O3、SnO、Cu、鐵酸鹽和玻璃纖維—也可將親水材料制成水排斥材料。這樣，所說的親水聚合物材料的孔為所說的用FCAM涂蓋的填料粒子所填充。
不透水材料的有利形式是一種箔、一種半透膜、玻璃、橡膠或一種熱熔體。這種箔可由聚合物材料制成，可以是合成聚合物材料，如聚丙烯或聚乙烯，也可以是天然聚合物材料，例如玻璃紙。適宜的箔也可由非聚合物材料，如鋁制成。這些箔一般厚度為0.1-10毫米，要看所用材料來決定。箔帶有孔以吸收尿。這些孔距離檢定試劑的位置足夠遠，以防止檢定試劑被尿洗出。玻璃能用作不透水材料，形式有膠囊或管，內含有檢定試劑。在取樣后，例如通過加壓可使膠囊膠或管破裂，以便檢定試劑釋出。還有一些適宜的材料可作不透水材料，這些材料以液體形式施于或進入吸收材料，然后經過例如冷卻、干燥或通過如紫外線照射引起的化學反應使其固化。按此方法，在吸收材料之上或之中形成一種膜或包層。有利的是，這種材料是熱熔的，其所含的聚合物材料在室溫下是固態，而在如100℃時成為液體。其它適宜的材料含環氧樹脂、油漆或膠。
將水排斥材料表面的孔固化也能形成不透水材料。
所有所說的措施以如下的方式實現，即檢定試劑在試樣收集過程防止被洗出，但同時，檢定試劑和試驗液體通過吸收材料傳送是可行的(或可使之可行)，這樣，使得這些試劑可用于試驗操作。
在另外一個具體實施方案中，通過使用能控制釋放檢定試劑(控制釋放組分)的試劑組分，防止尿將檢定試劑洗出。包括檢定試劑的控制釋放組分存在于吸收材料的較低(下游)部分。所說的控制釋放組分一般含一粘合劑/控制釋放劑、一稀釋劑和可能的破碎劑。有利地是，所說的粘合劑/控制釋放劑是粘度增加劑，可根據其濃度影響控制釋放的速度，是脂肪物質或其混合物，為控制釋放速度的常規賦形劑，以及是不溶于水的對釋放速度有延遲影響的聚合物。適宜的粘度增加劑選自糖、聚乙二醇、明膠、膠淀粉、淀粉、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、樹膠(如阿拉伯樹膠和瓜耳樹膠)、纖維素為基礎和淀粉為基礎的材料以及包括它的混合物等。適宜的脂肪物質選自脂肪醇、脂肪酯、蠟、脂肪酸(如十八烷醇、Precirol、硬脂酸鎂、加氫的蓖麻油、加氫的花生油、蠟(象賦形劑Gelucire，由部分的甘油酯和聚縮水甘油脂肪酯組成)、硬脂酸)，植物源的固定的油類如花生油、蓖麻油、分餾的椰子油(Mygliols)、油酸乙酯、玉米油等。
對釋放速度有延遲影響的不溶于水的聚合物選自聚甲基丙烯酸酯(如Eudragit)和乙基纖維素。
在試劑組分中常常是需要稀釋劑。適宜的稀釋劑選自不溶于水的磷酸鈣(二和三元)、硫酸鈣二水合物、碳酸鈣、淀粉、改性淀粉、微晶纖維素、水溶性蔗糖、右旋糖、乳糖、甘露糖、木糖醇、山梨糖醇等及其混合物。
根據所希望的控制釋放速度，某一濃度的破碎劑可以使用，但破碎劑不一定總是需要。適宜的破碎劑選自微晶纖維系(AvicelPH101和102)、純化的木纖維素、藻酸、淀粉、淀粉甘醇酸鈉、瓜耳樹膠、聚乙烯基吡咯烷酮、交聯聚乙烯基吡咯烷酮、離子交換樹脂等及其混合物。
在一優選的控制釋放組分的具體實施方案中，檢定試劑同羥丙基纖維素、淀粉和乳糖或蔗糖混合，制備顆粒。隨后顆粒按照在EP299,299，US5073344和EP963375敘述的方法，同乙烯醋酸乙烯酯粉末混合并燒結。在燒結過程中，乙烯醋酸乙烯酯顆粒在控制熱條件下熔化在一起，這樣，將含檢定試劑的顆粒截留。控制釋放的程度可以通過改變上述的控制釋放組分的成分比例，加以調節。控制釋放組分優選地同一水排斥材料結合使用。
試樣收集裝置的吸收材料能容易地吸收試驗液體，但也容易在如機械壓力或毛細管轉移下釋放試驗液體。因此，它是海綿一樣的材料，如棉毛、織物和無紡材料，擠壓結合的纖維、紙和類似紙的材料。優選使用多孔燒結的親水和親水化材料，諸如親水化的聚乙烯醋酸乙烯酯以及其它親水化的聚酯、親水化的聚丙烯、親水化的聚乙烯和親水化的超高分子量聚乙烯。在試樣收集裝置中上游部分這些多孔燒結的親水和親水化材料的孔徑尺寸，優選大于下游部分的材料的孔徑，使得可迅速吸收試驗液體，并防止在取樣過程中洗出檢定試劑。也可給吸收材料著色以便于分析辨認。
存在于吸收材料中的檢定試劑優選是一特種結合對(如一抗原或抗體或其片段，DNA或RNA片段，抗生物素蛋白或生物素)中的一員。這樣的特種結合試劑優選給以標記。盡管原則上各種標記都可使用，但用在本發明的試樣收集裝置中的優選標記是所謂的顆粒標記，最優選的是使用直接顆粒標記，它會給出直接的可見的試驗結果而不需要附加的試劑或設備。所說的直接顆粒標記含小的帶色粒子，如金溶膠粒子、乳膠粒子、染料粒子、微脂粒或包括染料、碳—和硒溶膠粒子等的微膠囊。這些粒子不溶于水但在溶液中可再懸浮。所有這些顆粒標記在文獻(見Clin，Chem，27，1157，1981，EP007654，EP032270，EP291194，EP154,749，EP321008)中是眾所周知的。
金溶膠和碳溶膠粒子是特別有利的。金溶膠粒子有利地具有一直徑約為5-100毫微米，而優選的碳溶膠粒子大小是20-500毫微米。
可以用許多方法將檢定試劑引入試樣收集裝置。有利的是，通過例如分散可以直接施加于吸收材料。當多孔燒結親水合成聚合物用作吸收材料時，檢定試劑優選做為顆粒引入，在燒結過程之前，將其與多孔親水合成聚合物混合(參見EP299299，US5073344和EP963373)。這樣顆粒中除了檢定試劑外還含有糖，如海藻糖。在這種燒結過程中，在控制熱條件下，聚合物粒子熔合在一起產生一種堅實而多孔的結構。這樣，含檢定試劑的顆粒被截留。
檢定試劑也可以間接方法應用，例如通過將浸有檢定試劑的多孔載體引入吸收材料的內部空間。適宜的多孔載體是，例如圓紙盤、多孔燒結的材料或無紡材料。優選將檢定試劑以冷凍干燥形式，如accuspheres，導入所說內部空間。也可以將檢定試劑包含在膠囊或管中，然后插進吸收材料。
試樣收集裝置還有一手柄，此柄由一不透水材料生產是有利的。不透水材料可用熱塑性材料，聚苯乙烯等。此柄可加以顏色。顏色能用于被分析物的辨認，從而對處理大量不同試樣帶來方便。
本發明進一步涉及含上述試樣收集裝置的檢測專一反應物質的裝置和方法。
這樣裝置最好含有一膜、試驗帶等，這些由主要憑借毛細管力傳送試驗液體的材料組成。優選使用有吸收能力的多孔或纖維狀材料，這適宜迅速吸收液體。裝置還含有檢測所說的專一反應物質所需的其它的檢定試劑。這些其它檢定試劑優選是一抗原或抗體或其片段，DNA或RNA片段，抗生物素蛋白或生物素、蛋白質A等。此裝置最簡單形式是含附加的檢定試劑的膜、試驗帶等。所說的裝置優選是一過濾試驗，最優選的是一多孔試驗帶試驗。對這些類型的試驗已進行了許多實施例的說明(參見EP180638，EP291194，EP349215)。特別有關的討論是在我們的未決專利申請PCT/EP94/00899中討論的設備。這設備含一有內部空間的套箱和一引入試樣收集裝置的孔。在套箱上有一支持裝置。可運行由主要通過毛細管力傳送試驗液體的材料組成的試驗帶，并含有固定化的結合試劑，如專一結合對的一員，優選為一抗體。含有試劑混合物的液體試樣從試樣收集裝置傳送到試驗帶可以通過接觸來實現。這種傳送可以通過在套箱的特殊措施加以促進。特殊措施如在內壁有一提升裝置，或通過彎曲試驗帶的頂端，使其伸進套箱的內部空間。
下面詳細解釋了本發明的示范的具體實施方案。


圖1，表示本發明中討論的試樣收集裝置的第一個具體實施方案的軸向橫截面。
圖2，表示本發明第一個具體實施方案的軸向橫截面的改進。
圖3，表示本發明第二個具體實施方案的軸向橫截面。
圖4，表示本發明第三個具體實施方案的軸向橫截面。
圖5，表示本發明第四個具體實施方案的軸向橫截面。
圖6，表示本發明第五個具體實施方案的軸向橫截面。
圖7，表示本發明第六個具體實施方案的軸向橫截面。
圖8，表示本發明第一個具體實施方案的改進的軸向橫截面。
所有這些圖的比例為2∶1。
圖1試樣收集裝置有部分1和3，這兩部分含多孔燒結的用一潤濕劑親水化的乙烯醋酸乙烯酯。部分2含有未處理的乙烯醋酸乙烯酯(為水排斥材料)。此裝置還含有柄8。部分1有一頂端4，和一延長部分5，后者適合于部分2的內部空間6。檢定試劑(標記的專一結合試劑7)以冷凍干燥形式引入內部空間6或浸入多孔載體。
圖2試樣收集裝置為描繪于圖1裝置的改進。這樣，部分1的延伸部分5用檢定試劑(標記的專一結合試劑7)浸漬。
圖3的試樣收集裝置中含有帶有多孔的燒結的親水或親水化的材料的部分1。在部分1的中部區用標記的專一結合試劑7浸漬。在這個區域中也可以截留此試劑。這個區域用含不透水材料的圓筒元件9包圍。
在圖4的試樣收集裝置中，親水部分1的延伸部分5伸進柄8，這里含孔12，使得將此裝置固定于尿流中時可以吸收尿。部分1被帶有孔11的不透水箔10所包圍，這樣，當使之同試驗膜或試驗帶接觸時，試劑混合物可流出。標記的專一結合試劑7包括在部分1的中部。
在圖5的試樣收集裝置中，含標記的專一結合試劑7的玻璃膠囊或管13插入親水部分1。在取樣后膠囊破裂，使檢定試劑用于試驗操作。
圖6的試樣收集裝置含兩個親水部分1和3。標記的專一結合試劑7以冷凍干燥形式位于兩部分之間，或浸入多孔載體中。通過含不透水材料的圓筒元件14將兩部分1和3聯結起來。圓筒元件也環繞著標記的專一結合試劑7。
在圖7的試樣收集裝置中，用帶有孔13的不透水的箔10包圍親水部分1，當將此裝置固定在尿流中時吸收尿。標記的專一結合試劑7包括在部分1的頂端4中。在進一步進行試驗前，在不透水箔10的頂端4應再做一孔，以便試樣收集裝置中的試劑與試驗帶或試驗膜的試劑相接觸。
圖8的試樣收集裝置是描繪在圖2裝置的改進。這樣，圖2含一內部空間6，部分3有一伸出部分5，適合于內部空間6。在伸出部分5的多孔燒結的乙烯醋酸乙烯酯的孔徑大小小于部分3的剩余部分的孔徑尺寸。兩種材料用一種潤濕劑親水化。而且，部分1含用潤濕劑親水化的多孔燒結聚乙烯，這樣，此材料的孔徑尺寸小于伸出部分5中材料的孔徑尺寸。標記的專一結合試劑或被截留或被浸于伸出部分5或位于伸出部分5和內部空間6的內壁之間。所說的試劑通過部分2的疏水的乙烯醋酸乙烯酯可免于被洗出。
本發明的試樣收集裝置可用于在試驗液體，如尿中檢測專一的反應物質，如抗原、半抗原、抗體或抗體片段、DNA-或RNA片段以及特別是hCG的方法中。
這樣一種方法包括例如下面幾步*.用所說的試樣收集裝置獲取試驗液體樣品，這樣，在試驗液體中，如果有專一反應物質的話，就會同檢定試劑反應。
*.將試樣收集裝置同，例如含固定的專一結合試劑的多孔試驗帶接觸，這樣，含有試劑混合物的試驗液體將由試樣收集裝置傳送到試驗帶，在此，專一反應物質和檢定試劑之間形成的絡合物被固定的專一結合試劑俘獲。
*.肉眼讀出檢定結果。
僅通過實施例，詳細討論本發明的某些優選的具體實施方案。所用的試樣收集裝置是描繪在圖8的裝置，此外，如在我們的未決專利申請PCT/EP94/00899號中討論的使用了試驗帶(含有固定的專一結合試劑和控制試劑)、支持裝置和套箱。
實施例11.金溶膠標記的單克隆hCG抗體(標記的專一結合試劑)的制備。
具有平均粒子直徑50毫微米(A540＝5.0)的金溶膠由Frens制得(Nature Physical Science Vol.240，1973，20)。
每毫升氯化鈉含1毫克單克隆hCG抗體(如在EP045103)中討論的β-單位專一和制備的)的溶液(9克/升)用0.1摩爾氫氧化鈉調節到pH達到8.0。
用0.1摩爾氫氧化鈉將1升的金溶膠溶液的pH調節到8.0，同20毫升的單克隆hCG抗體溶液混合，隨后加入40毫升20摩爾聚乙二醇的pH8.0溶液進行后涂敷。在3500克和室溫下進行離心20分鐘使后涂敷的金溶膠標記的hCG抗體沉降。抽吸除掉上層清液后，金溶膠小粒在含2％(V/V)胎兒腓腸血清、160克/升蔗糖、2％(W/V)Triton X100和1摩爾Tris pH8.0的溶液中再懸浮成50.0的A540值。
2a.親水化的乙烯醋酸乙烯酯的制備60克乙烯醋酸乙烯酯粉末(粒子尺寸為350微米或500微米)與含1％Tween/span(1∶3w/v)的100毫升乙醇混合。將混合物在輕微搖動下靜置10分鐘，傾析除去過量乙醇，最終在20-25℃干燥過夜。
2b.親水化聚乙烯的制備將60克聚乙烯粉末(粒子尺寸為50微米)同100毫升含1％Tween/span(1∶3w/v)的乙醇混合，然后按2a所述的方法進行處理。
2c.疏水化的乙烯醋酸乙烯酯的制備60克乙烯醋酸乙烯酯粉末(粒子尺寸為350微米)同100毫升含1％的Fluorresin(w/v)的異丙基乙醇混合。在輕微搖動下將混合物靜置10分鐘，傾析除去過量的異丙基乙醇，最后在20-25℃干燥過夜。
3.試樣收集裝置的制備描繪在圖8中的試樣收集裝置的部分A和部分B分別制造。部分A包括親水部分1和疏水部分2，而部分5B含帶有包括金溶膠標記的單克隆hCG抗體(標記的專一結合試劑7)的伸出部分5的親水部分3。
部分A在一模中制備。此模有兩個模部件一個模部件用于親水部分1，另一模部件用于疏水部分2。部分1的模部件裝有親水化的聚乙烯粉末(如在2b討論的)，而部分2的模部件裝以疏水化的乙烯醋酸乙烯酯粉末(如2c中討論的)。隨后，按照在EP299,299，US5 073344和EP963375中討論的方法燒結上述材料，并提起。
部分B的制備也是在兩個模部件構成的模中進行一個模部件用于親水部分3的伸出部分5，另一模部件用于部分3的其它部分。用于伸出部分5的模部件裝填以親水化的乙烯醋酸乙烯酯粉末，粒子大小350微米(如在2a中所述的)，而用于部分3其它部分的模部件也裝填以親水化的乙烯醋酸乙烯酯，但粒子大小為500微米(也是如在2a所述)。然后將這些材料如上述那樣進行燒結。
在部分A和B燒結后，測定各部分的孔徑尺寸。部分1的孔徑大小為20微米，部分2的孔徑大小為100微米，部分3的伸出部分5的孔徑為120微米，而部分3其余部分的孔徑為180微米。
然后，用蠕動泵將4-8微升的金溶膠標記的單克隆hCG抗體的懸浮液(見1)分散到部分3的伸出部分5的末端，在45-50℃用干燥溫暖的空氣流干燥5-6分鐘。
在金溶膠標記的單元隆hCG抗體干燥后，將部分A和B連結和焊接。在裝配之前將專門設計的焊接板放在部分A和部分B之間，將這兩部分對著熱的焊接板輕輕加壓，乙烯醋酸乙烯酯材料開始熔化，約一秒鐘后，將焊接板除去。通過將兩部分相互相對加以輕壓，則完成緊密的對接。
4.多克隆hCG抗體溶液的制備按照傳統的方法制備抗hCG的多克隆抗體。將6克的免疫提純的hCG抗體溶于含3.5毫摩爾Tris.pH8.0和9克/升氯化鈉的1升溶液中。
5.單克隆兔抗鼠抗體溶液的制備按照傳統的方法制備單克隆兔抗鼠抗體(抗卡巴粒)。將3克單克隆兔抗鼠抗體溶于含3.5毫摩爾Tris，pH8.0和9克/升氯化鈉的1升溶液中。
6.試驗帶制備和裝配在一長100毫米寬7毫米矩形的玻璃紙板(厚度0.6毫米，基準重量為100克/米2)上，在每一試驗帶上通過離底邊40毫米處吸移1微升的多克隆hCG抗體溶液(見4)形成含固定的專一結合試劑的檢測區。通過離底邊處50毫米吸移1微升的單克隆抗鼠IgG(見5)在每一試驗帶上形成第二區，稱為控制區。
最后，在如我們在我們的未決專利申請號PCT/EP94/00899中提到的設備中將這些試驗帶裝配起來。
7.檢定方法將試樣收集裝置(見3)固定在尿流中，這樣，疏水部分1和3迅速吸收尿。尿也將同干燥的金溶膠標記的單克隆hCG抗體接觸，其再懸浮在尿中，并將結合于尿中的hCG上，如果存在的話。試樣收集裝置隨后同在6中討論的設備中的試驗帶接觸。含hCG-金溶膠標記的單克隆hCG抗體絡合物的尿，在同試驗帶接觸后從試樣收集裝置中釋放出來，并由毛細管作用經過試驗帶傳送。然后，通過固定的多克隆hCG抗體將hCG-金溶膠標記的單元隆hCG抗體絡合物固定在試驗帶上，這樣，通過肉眼看顏色即可檢測hCG的存在。而且，通過在控制區觀測顏色可以控制試驗操作。
取樣和使試樣收集裝置同試驗膜或試驗帶接觸之間的時間可以變化。結果，專一反應物質和檢定試劑之間的預誘導時間也要改變。通過增加預誘導時間，可以提高檢定的靈敏度，這是使用分離的試樣收集裝置的優點。
另外，檢定時間可以縮短，而保持檢定靈敏度不變。方法是縮短檢測點和試樣收集裝置同試驗帶相接觸區域間的距離。另外一種縮短檢定時間而同時保持檢定的靈敏度和檢測點同接觸區(見上面)之間的距離都不改變的可能性，是利用較少體積的檢定試劑，可能同一適應的檢定試劑組分(如較低的糖濃度)結合起來。
實施例2試劑、試驗帶的制備和檢定方法和實施例1中所述的相同。然而，金溶膠標記hCG抗體作為顆粒引入吸收材料，而且試樣收集裝置的制法也不同1.金溶膠標記的單克隆hCG抗體顆粒的制備。
將1克淀粉和8.6克蔗糖充分混合。向此混合物中加入10毫升的金溶膠標記的單克隆hCG抗體的懸浮液(見實施例1中的1)。混合物均勻后，將1毫升的0.3克羥丙基纖維素溶于蒸餾水中的溶液加入其中。充分混合后，在40℃和真空下干燥48小時。將干燥后的物質過篩(篩孔尺寸為300微米)，得到的顆粒貯放在含硅膠的干燥器中的管瓶中。
2.試樣收集裝置的制備部分A(見實施例1中的3)的制法基本同實施例1中所述的方法相同。
部分B的制法也和實施例1中所述的相同。只是在伸出部分5的模部分不同。這里的模裝填的是親水化的乙烯醋酸乙烯酯粉末(粒子尺寸350微米)同金溶膠標記的單克隆hCG抗體顆粒(見1)的混合物。隨后，按照在實施例1中3的方法將材料燒結。
權利要求
1.試樣收集裝置，包括能夠迅速吸收試驗液體并能容易地釋放試驗液體的吸收材料，裝置中還含至少一種檢定試劑，其特征是，所說的檢定試劑存在于所說吸收材料的下游部分，所說的下游部分包含有能在取樣過程防止所說的檢定試劑從裝置中洗出的設施，提供所說的設施是在取樣過程或取樣后，能使所說的試劑可用于試驗操作，而所說吸收材料的其余部分則全部或部分地位于含有檢定試劑的所說部分的上游。
2.權利要求1的試樣收集裝置，其特征在于，所說的設施是排水材料的蓋、套或外殼。
3.權利要求2的試樣收集裝置，其特征在于，所說的水排斥材料選自疏水多孔燒結材料、疏水織物或無紡材料、疏水紙或紙類材料。
4.權利要求3的試樣收集裝置，其特征在于，所說的疏水多孔燒結材料是乙烯醋酸乙烯酯、聚丙烯、聚乙烯或超高分子量聚乙烯，這些材料的孔徑尺寸至多為100微米。
5.權利要求1的試樣收集裝置，其特征在于，所說的設施是不透水材料。
6.權利要求5的試樣收集裝置，其特征在于，所說的不透水材料是箔、玻璃、橡膠、熱熔體，或通過固化水排斥材料表面的孔形成的材料。
7.權利要求1的試樣收集裝置，其特征在于，所說的設施是能允許控制釋放檢定試劑的試劑組分。
8.權利要求1的試樣收集裝置，其特征在于，所說的吸收材料用所說的檢定試劑或截留在所說吸收材料孔中的檢定試劑浸漬。
9.權利要求1的試樣收集裝置，其特征在于，所說的檢定試劑包括在所說吸收材料的內部空間中。
10.權利要求9的試樣收集裝置，其特征在于，所說的檢定試劑是冷凍干燥形式。
11.權利要求9的試樣收集裝置，其特征在于，所說的檢定試劑浸于一附加的多孔載體中。
12.上述權利要求中任何一項的試樣收集裝置，特征在于，所說的吸收材料包含一多孔燒結親水或親水化的材料。
13.權利要求12的試樣收集裝置，其特征在于，所說的多孔燒結親水化材料是親水化的乙烯醋酸乙烯酯、親水化的聚丙烯、親水化的聚乙烯或親水化的超高分子量聚乙烯。
14.權利要求13的試樣收集裝置，其特征在于，在所說裝置的上游部分的所說多孔燒結親水化的材料的孔徑大小大于在所說裝置的下游部分中多孔燒結親水化材料的孔徑大小。
15.上述權利要求中任何一項的試樣收集裝置，特征在于，所說的檢定試劑是一標記的專一結合試劑。
16.權利要求15的試樣收集裝置，其特征在于，所說的標記的專一結合試劑含一顆粒標記。
17.權利要求16的試樣收集裝置，其特征在于，所說的顆粒標記是金溶膠或碳溶膠。
18.檢測在試驗液體中至少一種專一反應物質的裝置，包含權利要求1的試樣收集裝置。
19.檢測在試驗液體中至少一種專一反應物質的裝置，包含一權利要求1-17的試樣收集裝置。一套箱，套箱含內部空間和孔，以便將所說的試樣收集器引入所說的內部空間。一位于套箱上的支持裝置一試驗帶，位于支持裝置中并且由主要通過毛細管力傳送試驗液體的材料組成，并含有固定的專一結合試劑。
20.權利要求18或19的裝置，其特征在于，專一反應物質是hCG或hLH。
21.檢測試驗液體中至少一種專一反應物質的方法，這樣，使用權利要求1-17中任何一項的試樣收集裝置。
22.權利要求21的方法，這樣，專一反應物質是hCG或hLH。
全文摘要
敘述了一種試樣收集裝置，其中含一種吸收材料，這種材料容易吸收和釋放試驗液體，此外，裝置中還含至少一種檢定試劑。檢定試劑存在于吸收材料的僅一部分，吸收材料的其余部分位于上游部分。上游部分含檢定試劑，并作為要用作洗液的試驗液體的貯庫。含檢定試劑的吸收材料的一部分提供了在取樣過程防止檢定試劑洗出的設施，而在取樣過程或取樣后，使檢定試劑可用于試驗操作。
文檔編號B01L3/00GK1138697SQ9512027
公開日1996年12月25日 申請日期1995年11月27日 優先權日1994年11月28日
發明者P·F·H·M·沃海登, A·P·S·威塞 申請人:阿克佐諾貝爾公司